Lic. T.M.

Carlos Ortega Tumay

Servicio de Bioqumica-HNERM-ESSALUD

Definicion de Porfiria

La palabra porfiria deriva del griego porphyra que

significa morado o purpura.
Las porfirias, constituyen un grupo de enfermedades
metablicas
hereditarias,
originadas
como
consecuencia de alteraciones en la biosntesis del
grupo Hemo.
Se caracteriza por la presencia de d-amino levulinico
y/o profobilinogeno en orinas y porfirinas en orinas
-heces que provocan alteraciones neurologicas o
cutaneas o ambas.

Breve Historia

Las porfirias fueron reconocidas por primera vez a

fines del siglo XIX, por Gunther en 1911 , quien
describi una porfiria congnita con lesiones
cutneas ( hidroa estival) y afectacin heptica, cuya
patogenia y tratamiento se desconocan, aunque si
se conoca la predisposicin a padecer la
enfermedad.

Fisiopatologia

La sntesis del grupo Hemo

se realiza mediante una
secuencia de ocho reacciones
qumicas catalizadas por
ocho enzimas diferentes,
cada una de ellas
codificadas por otros tantos
genes.
El dficit parcial o total de
estas enzimas (excepto la
primera de ellas) da lugar a
los distintos tipos de
porfiria.

Cada enfermedad est

asociada al aumento y
acumulacin de alguno
de los intermediarios
de la va metablica.
Siendo este incremento
el responsable directo o
indirecto de los
sntomas y efectos
clnicos de estas raras
enfermedades.

Metabolismo de las Porfirinas

Las porfirinas, derivados tetrapirrlicos cclicos, se encuentran

en todas las clulas vivas, tanto animales como vegetales; no
poseen actividad farmacodinmica. Se encuentran como
sustancias intermedias en el ciclo metablico del hem. El cido
succnico unindose a un aminocido, la glicina, dar lugar
mediante una serie de pasos intermedios al hem, que
unindose a una protena, la globina, dar lugar a la
hemoglobina.
La deficiencia enzimtica parcial de algunas de los enzimas
catalizadoras entre el primer paso y los siguientes en la sntesis
del hem dar lugar a un acumulo de porfirinas o de sus
precursores.
En el ciclo metablico de las porfirinas existe una doble va,
solamente una de ellas es una va til en la sntesis del hem.

Clases de Porfirias

I.-Segn su origen:
1.-Eritropoyeticas: -Congenita de Gunther
-Protoporfiria
2.-Hepaticas
-Cutanea tarda
- Variegata
-Coproporfiria hereditaria - Aguda de DOSS
-Aguda intermitente

1.-Porfiria Aguda intermitente

Es la mas frecuente de
toda las variedades.
La mayoria de los
pacientes permanecen
asintomaticos.
Las manifestaciones
clinicas se relacionan con
factores ambientales.
Mas comun en mujeres de
20 a 30 aos.

2.-Porfiria Variegata o Mixta

Esta constituida por un

sindrome que asocia
ampollas, erosiones y
cicatrices. Semeja a la
profiria cutanea tarda.
Pero posee un patrn
clsico de laboratorio
que la diferencia de las
demas.

3.-Coproporfiria hereditaria

Posee un cuadro
semejante a la porfiria
variegata, aunque mas
discreto acompaado
de brotes de porfiria
aguda.

4.-Porfiria cutanea tarda

Es la forma mas comun.

Es causada por un
deficit de la
uroporfobilinogeno
descarboxilasa.
Se caracteriza por una
gran sensibilidad
cutanea.

5.-Porfiria aguda de Doss

La porfiria por deficiencia de

ALA deshidratasa, llamada
plumboporfiria o de Doss, es
la mas minoritaria de las
porfirias.
Las mutaciones genticas a
nivel de esta enzima, logran
bloquear los sitios de unin de
plomo, en las molculas
transportadoras, causando
acumulacin del mismo.

Epidemiologia

La prevalencia varia bastante de paias a pais.

En el Norte de Europa se estima que es de 1 a 2 por
1000 habitantes son portadores del gen de para
porfiria aguda intermitente.
Mientras que en sudafrica se da la mayor prevalencia
del tipo variegata en 3 por 1000 habitantes.
En los EEUU se estima una prevalencia de 1 por
25000 habitantes.
En el Per hay hasta ahora 15 casos confirmados.

Rol del Laboratorio en

el Dx. Oportuno de las
porfirias.

Pruebas a realizar segn el nivel

de complejidad.

El primer nivel consiste

en evidenciar la presencia
de los precursores y/o
porfirinas.
en diferentes muestras
biolgicas: orina, sangre
y heces.
En el segundo nivel, una
vez demostrado el
acumulo del/los
compuesto/s en las
diferentes muestras
estudiadas, debemos

cuantificar la actividad
enzimtica
especfica responsable del
mismo.
El tercer nivel ,trata de
analizar el gen que
codifica la enzima
alterada mediante el
empleo de tcnicas
moleculares que precisan
el aislamiento previo del
ADN.

Pruebas a realizar en el primer

nivel de atencin

I. Mtodos de cribado
Mediante el empleo de este tipo de mtodos
podemos evidenciar de modo rpido la presencia de
cantidades anormales de precursores y/o porfirinas,
indicativa de la existencia de una porfiria. Estos
mtodos pueden aplicarse en diferentes tipos de
muestras biolgicas y son cualitativos.

Muestras de orina

1. Observacin directa de una muestra de orina

reciente bajo una lmpara de fluorescencia (lmpara
de Wood).
2. Test de Hoesch. Es un procedimiento rpido que
produce el inmediato cambio de color de la orina en
contacto con el reactivo de Ehrlich. El reactivo a
emplear tiene un bajo costo por lo que debe estar
disponible en los servicios de urgencias de los
hospitales.

Test de Watson Schwartz

Es la prueba clasica para diferenciar entre

urobilinogeno y porfobilinogeno.
Se realiza una serie extracciones sucesivas con
sustancias quimica como cloroformo, butanol que
basados en las caracteristicas fisico quimica nos dara
una reaccion de color rosa.

Reactivo de Erlich

Reactivo de Ehrlich
1 g de 4-dimetilamino-benzaldehido
42 cc de Acido actico 100%
8 cc de Acido perclrico 70%
Mezclar bien hasta la disolucin y conservar en frascos de
color topacio de 10 cc a 4C protegidos de la luz.
Estabilidad de 2 meses.
Desechar en cada uso el frasco empleado debido a la
oxidacin del reactivo por el oxgeno del aire.

Procedimiento del test de Hoesch

Poner en un tubo de ensayo 2 cc de Reactivo de

Hoesch y aadir 2gotas de la orina problema
procedente de una miccin casual.
En caso de test positivo, se produce una coloracin
rosada en la solucin resultante analizada.

Resultados de la deteccin
de Urobilinogeno

Test de Watson
Schwartz

Muestras de Sangre

1. Cuantificacin de porfirinas totales

en una muestra de sangre tras un
proceso de extraccin con un
solvente orgnico en medio cido.
2. Barrido espectrofluorimtrico. La
dilucin de una alcuota de plasma
en un buffer fosfato/salino, nos
mostrar un pico de emisin de
fluorescencia especfico para cada
tipo de porfiria.

Muestras de Heces

Cuantificacin de porfirinas
totales en una muestra de heces
tras un proceso de extraccin con
un solvente orgnico en medio
cido

Mtodos cuantitativos

A. Anlisis de precursores. cido

deltaaminolevulnico y Porfobilingeno.
La determinacin se realiza en una muestra de orina
de 24 horas recogida en condiciones de refrigeracin
a 4C y protegida de la luz. Su cuantificacin puede
llevarse a cabo tanto en columna abierta de
intercambio inico con valoracin final
espectrofotomtrica, o mediante cromatografa
lquida de alta resolucin con deteccin de
fluorescencia (mtodo de referencia).

b.- Cuantificacin de porfirinas fraccionadas.

Muestras: Se puede utilizar sangre, orina de 24 horas

o heces una sola depsicion.
Condicin que se guarden protegidas de la luz y
sean guardadas bajo refrigeracin
Metodologa: se usa el mtodo de referencia que es la
cromatografa liquida de alta resolucin con
deteccin de fluorescencia.

Pruebas a realizar en el segundo

nivel de atencin

Estudio de las Enzimas

Muestras: se puede dosar en sangre, en leucocitos o
fibroblastos segn la enzima de que se trate.
La metodologa a emplear puede ser una tcnica
espectrofotomtrica/espectrofluorimtrica o bien
cromatografa lquida de alta resolucin con
deteccin UVVIS o de fluorescencia.
No son tan sensibles y especificas como el DNA.

Pruebas a realizar en el tercer

nivel de atencin

Este tipo de estudio requiere la extraccin previa de

ADN procedente de una muestra de sangre
perifrica. Una vez obtenido, el anlisis molecular
puede llevarse a cabo mediante secuenciacin directa
del gen si se trata del estudio del caso ndice, o bien
mediante el empleo de una simple reaccin en
cadena de la polimerasa (PCR) si lo que pretendemos
es buscar una mutacin ya conocida por el
conocimiento previo del citado caso ndice.