1- Expresar en forma clara una breve descripción de la cromatografía.

Una cromatografía es conjunto de métodos de separación que permiten analizar

individualmente los componentes de una sustancia compleja.

2- Definir los siguientes términos:

a) elución

b) fase móvil

La fase móvil es la parte de la cromatografía donde se arrastra el compuesto a analizar a través

de la fase estacionaria. Esta fase debe mantenerse inerte ante el compuesto.

c) fase estacionaria

La fase estacionaria es la parte fija de la columna de cromatografía a través de la cual se fuerza

el paso de la fase móvil. En esta fase, la solución y sus componentes, arrastrados por la fase
móvil, interactúan en función de sus propiedades químicas.

d) constante de distribución

Se define a la constante de distribución a una constante de equilibrio Kc que relaciona la

actividad de los distintos solutos respecto a su fase estacionaria y móvil:

K c =¿ ¿

e) tiempo de retención

El tiempo de retención está asociado con la K c y es tiempo en el que tarda un analito en

atravesar la fase salida. Su ecuación es t R =t m + t S . Buena representación la de abajo

f) factor de retención

El factor de retención indica la afinidad de un compuesto por la fase estacionaria. Se calcula

t r −t m
con k =
tm
g) factor de selectividad

El factor de selectividad es una ratio entre la constante de distribución de la especie más

K B k B (t ¿¿ r )b−t m
retenida (A) por sobre la menos retenida (B) α = = = ¿
K A k A (t¿¿ r )a−t m ¿
h) altura de plato

La altura del plato también dicha H, es una medida cuantitativa de la eficiencia de una columna
H
dado por la ecuación N= , luego con la teoría de velocidades la altura H se asocia a la
L
2
σ
deviación estándar de una curva gaussiana (σ ) de la siguiente manera H= de esto y del
L
análisis de una curva de gauss puede también deducirse que H es la fracción de analito
comprendida entre L y L−σ
2
LW
Experimentalmente se puede calcular como H= 2
16 t R

i) difusión longitudinal

La difusión longitudinal se da cuando los solutos se dispersan en la banda debido a las

diferencias de concentraciones.

j) difusión en remolino
Cuando el flujo de la fase móvil resulta turbulento la aleatoriedad de las líneas de flujo y a la
aleatoriedad de los tamaños de los poros lo que es un causante de ensanchamiento de la
banda debido a diferencias de velocidad a las que las partículas se mueven

k) resolución de la columna

La resolución de una columna indica el grado de separación entre los distintos componentes
del compuesto a analizar

l) eluyente.

Es el medio solvente que arrastra los compuestos, este medio no debe reaccionar con la
sustancia a analizar.

3- ¿Cuáles son las principales diferencias entre la cromatografía gas-líquido y líquido-líquido?

En la cromatografía liquido liquido, la fase móvil es un líquido. Este líquido interactúa

selectivamente con los componentes de la muestra, lo que permite su separación. Por otro
lado, en la Cromatografía de gas líquido, la fase móvil consiste en un gas inerte que transporta
la muestra a través de la columna. En la fase estacionaria de la cromatografía liquido liquido, la
fase estacionaria es un líquido. Mientras que en la Cromatografía gas líquido, la fase
estacionaria es un líquido inmovilizado sobre un sólido. Otra diferencia son las condiciones de
temperatura son distintas. La GLC se lleva a cabo a temperaturas elevadas, mientras que la LLC
se realiza a temperaturas más bajas.

4- ¿Cuáles son las principales diferencias entre la cromatografía líquido-líquido y líquido-

sólido?

Las principales diferencias entre estas cromatografías son las fases estacionarias y su
sensibilidad ante las mediciones. En la cromatografía Líquido-Líquido tanto la fase estacionaria
como la fase móvil son líquidos. En la Cromatografía Líquido-Sólido en LC, la fase estacionaria
es un sólido que se encuentra empacado en una columna cromatografía. La fase móvil es un
líquido.

5- Explique la manera en que se puede manipular el factor de retención de un soluto.

t r −t m
El factor de retención de un soluto que ya habimos definido antes como k = puede
tm
modificarse con cambios en la temperatura, composición de la fase móvil y la velocidad por
L
ejemplo. Sabemos que la velocidad es v= entonces aumentar v modifica tr y por lo tanto k
tr
KVS
también. Otra expresión de k es k = donde K depende de la concentración del soluto
VM
por lo tanto al modificarla también afectamos al factor de retención.

6- Describa un método para determinar el número de platos de una columna.

2
tr
Dos métodos para calcular el numero de platos N son N=16 ( ) o también
W
 2

( )
2
α 1+k b
N=16 R s ( ) donde W alfa y kb ya están determinados con anterioridad en el
α−1 kb
trabajo

7- Los siguientes datos corresponden a una columna para cromatografía de líquidos:

a) El número de platos para cada pico

Utilizando la siguiente ecuación obtenemos los siguientes resultados:

2
tr
N=16 ( )
W

b) La media y la desviación estándar de N

2
L σ
ya que H es la altura del plato y se expresa como H= y la desviación estándar H=
N L

L σ2 L
entonces H= = →σ=
N L √N

c) La altura de plato de la columna.

N tr(m) W(m) σ H(cm) L(cm)

2775 5,4 0,41 0,46 8,90E-03 24,7
2472 13,3 1,07 0,49 9,99E-03 24,7
2363 14,1 1,16 0,5 1,05E-02 24,7
2523 21,6 1,72 0,49 9,79E-03 24,7