Identificación y cuantificación de la concentración de una disolución de

CuSO4.5H2O, por espectrofotometría de UV-Vis, mediante regresión lineal simple

(RLS), aplicando el método de estándar externo
Yainys Acosta1, Oriana Alemán2, Carlos Barrera3, Juan Corena4 and María
Mercado5
Mario Romero
1
, Facultad de química y Farmacia, Universidad del atlántico, Km 7 Vía Puerto,
Barranquilla, Atlántico.
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Resumen

En esta práctica vamos a identificar y cuantificar la concentración de una disolución de

CuSO4.5H2O, esto lo vamos a realizar utilizando la espectrofotometría de UV-Vis y

aplicando el método de regresión lineal simple (RLS) con un estándar externo. Este

método nos va a permitir determinar la concentración de la muestra desconocida

comparándola con una serie de estándares de concentraciones conocidas. La

espectrofotometría de UV-Vis utiliza la absorción de luz en la región del ultravioleta-

visible para medir la cantidad de sustancia presente en la muestra. Mediante la

construcción de una curva de calibración utilizando los valores de absorbancia de los

estándares, podremos obtener una ecuación de regresión lineal que relaciona la

concentración de CuSO4.5H2O con la absorbancia.

PALABRAS CLAVES

Espectrofotometría, Absorbancia, concentración, regresión lineal, UV-Vis

1. INTRODUCCION

La espectrofotometría es una técnica utilizada para medir la cantidad de luz absorbida o

transmitida por una muestra en función de la longitud de onda. Se utiliza en diversos

campos como química, bioquímica y medicina para determinar la concentración de

sustancias en solución. En la espectrofotometría, se utiliza un instrumento llamado

espectrofotómetro (figura 1), para medir la cantidad de luz absorbida o transmitida por una

muestra. Este instrumento emite una luz de diferentes longitudes de onda y luego

detecta la cantidad de luz que la muestra absorbe o transmite. Esto nos permite

determinar la concentración de una sustancia en la muestra. La espectrofotometría UV-

Vis es una técnica que utiliza la luz ultravioleta y visible para medir la absorbancia o

transmitancia de una muestra en función de la longitud de onda. Es ampliamente

utilizada en química, bioquímica y ciencias de los materiales para determinar la

concentración de sustancias y analizar la estructura molecular.

figura 1. Equipo de espectrofotometría UV

2
2. EXPERIMENTAL

Parte 1.

1. Primero preparamos 50 ml de una disolución madre de CuSO4 x 5H2O 100

mM, partiendo del soluto solido de esa misma. (figura 2.).

2. Con esa disolución madre preparamos 5 disoluciones estándar con diferentes

alícuotas, luego agregamos agua destilada hasta el aforo. (figura 3.)

 primer matraz: 1ml de disolución madre

 segundo matraz: 2ml de disolución madre

 tercer matraz: 3ml de disolución madre

 cuarto matraz: 4ml de disolución madre

 quinto matraz: 5ml de disolución madre

3. Luego calculamos la concentración de cada una de las disoluciones.

4. Para poder determinar el espectro de absorción de la disolución madre con

un rango visible de 400-1100 nm hicimos un blanco, colocando en una celda

3
 de paso de luz (figura 4.), seleccionamos auto zero y luego línea base con un

rango de 400-1100 nm.

5. Luego en otra celda agregamos la disolución madre de CuSO4 x 5H2O y

medimos su espectro absorción.

6. En el equipo Shimadzu-UV-1900 (Figura 5.) seleccionamos la metodología

fotométrica y medimos la absorbancia de cada disolución estándar.

7. Construimos una curva de calibrado, donde se grafico la absorbancia vs las

disoluciones estándar. Determinando la regresión lineal, la ecuación de la

recta y el coeficiente de regresión lineal.

4
figura 2. Disolución madre de CuSO4. 5H2O figura 3. Disoluciones estándar

Figura 4. Celdas de cuarzo para espectrofotómetro UV-

Vis Figura 5. shimadzu-uv-1900

Parte 2.

Se hizo el mismo procedimiento que en la primera parte, pero aquí se cambio el

volumen de las alícuotas. (figura 6)

 Primer matraz: 1,5 ml de disolución madre

 Segundo matraz: 2,5 ml de disolución madre

 Tercer matraz: 3,5 ml de disolución madre

 Cuarto matraz: 5,5 ml de disolución madre

5
  Quinto matraz: 7,0 de la disolución madre

(figura 6) disoluciones del grupo 2.

3. RESULTS AND DISCUSSION

 Resultados

 Cálculos de los gramos de CuSO4.5H2O necesarios para preparar la

disolución de 100 mM

M x V ( L ) dsl x MMslt x 100 %

Wslt =
P%

100mM

P= 99.5%

6
 MM= 249,69 g/mol

Wslt =
( 100 mMx
1M
100 mM
x 50 mL x
1L
100 mL
x
249 , 69 g
1 mol
x 100 % )

99.5 %

Wslt =1,2547 g

En la parte experimental tuvimos un peso de 1,2499 g (figura 7)

Con este valor experimental hallamos la Molaridad, pero antes hay que encontrar el

numero de moles.

W 1,2499 g −3
n= = =5,0058 x 10 mol
MM 249 , 69 g /mol

Ahora si podemos hallar Molaridad.

−3
moles slt 5,0058 x 10 mol
M= = =0,1001 M
V dsl(L) 0 , 05 L

Figura 7: Balanza Radwag

 Cálculos para determinar la concentración de las disoluciones estándar

preparadas a partir de la disolución madre de CuSO4.5H2O 100 mM.

Disoluciones Grupo 1. Disoluciones grupo 2.

1.0 mL x 100 mM
A. =4 mM 1.
25 mL

1.5 mL x 100 mM
=6 mM
25 mL

2.0 mL x 100 mM
B. =8 mM 2.
25 mL

2 ,5 mL x 100 mM
=10 mM
25 mL

7
 3.0 mL x 100 mM
C. =12mM 3.
25 mL

3 ,5 mL x 100 mM
=14 mM
25 mL

4.0 mL x 100 mM
D. =16 mM 4.
25 mL

5 ,5 mL x 100 mM
=22 mM
25 mL

5 ,0 mL x 100 mM
E. =20 mM 5.
25 mL

7.0 mL x 100 mM
=28 mM
25 mL

 Determinación de la concentración de la muestra problema de

CuSO4.5H2O, mediante regresión lineal simple, método estándar externo.

Y =mx+b

y−b 0,182−0.0008
x= x= =15 , 48 mM
m 0.0117

 Determinar el coeficiente de absortividad molar del CuSO4.5H2O en

L/mol*cm.

A 0.182 L
A=E x C x D E= E= =0,011
CxD 1 cm x 15 , 48 mol/ L molxcm

A=0,182 D=1 cm

E=? C=15 , 48 mol / L

 Espectro de absorción del CuSO4.5H2O desde 1100 nm hasta los 400 nm.

8
 Espectro de absorcion
0.2
0.18
0.16
0.14
0.12
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
400 500 600 700 800 900 1000 1100

 Curva de calibrado: Abs vs [estándar] para cada uno de los estándares

preparadas de CuSO4.5H2O.

Tabla 1. Disoluciones del grupo 1. Grafica 1.

Disoluciones
Grupo 1
[mM] Abs
0.25
4 0,046
f(x) = 0.011725 x − 0.000299999999999995
8 0,092 0.2 R² = 0.999223193356713
12 0,144
0.15
16 0,187
0.1
20 0,233
0.05

0
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22

9
Tabla 2. Disoluciones del grupo 2. Grafica 2.

Disoluciones Grupo 2
[mM] Abs 0.3
6 0,07 f(x) = 0.0112 x + 0.00239999999999999
0.25 R² = 0.999977223550848
10 0,114
0.2
14 0,159
0.15
22 0,249
0.1
28
0.05

0
0 5 10 15 20 25 30

Tabla 3. Disoluciones globales Grafica 3.

Curva global
[mM] Abs Curva Global
4 0,046 0.25
6 0,07 0.2
f(x) = 0.0116779448621554 x − 0.000751879699248087
R² = 0.998488580948295
8 0,092
0.15
10 0,114
0.1
12 0,144
14 0,159 0.05
16 0,187 0
20 0,233 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22

22 0,249
Disoluciones de los grupos 1 y 2

 Discusiones

 Importancia de la regresión lineal simple, cuando se usa.

La regresión lineal simple es una herramienta estadística utilizada para analizar

la relación entre dos variables: una variable dependiente y una variable

independiente. Se utiliza para predecir el valor de la variable dependiente en

función de la variable independiente.

La importancia de la regresión lineal simple radica en su capacidad para modelar

y predecir relaciones lineales entre variables. Permite identificar la tendencia

general de los datos y determinar la fuerza y dirección de la relación entre las

10
 variables. Esto es especialmente útil en la toma de decisiones y la planificación,

ya que permite hacer predicciones basadas en datos históricos y entender cómo

un cambio en la variable independiente puede afectar la variable dependiente.

Además, la regresión lineal simple también se utiliza para evaluar la

significancia estadística de la relación entre las variables y para calcular

coeficientes como la pendiente y la intersección de la línea de regresión. Estos

coeficientes proporcionan información sobre la magnitud y dirección de la

relación.

 Que información entrega el r2, la pendiente y el intercepto en una regresión

lineal simple.

El coeficiente de determinación (R2) en una regresión lineal simple indica la

proporción de variabilidad de la variable dependiente que puede ser explicada

por la variable independiente. Mientras más cercano a 1 sea el valor de R2,

mayor será la capacidad del modelo para predecir la variable dependiente.

La pendiente de la línea de regresión representa el cambio promedio en la

variable dependiente por cada unidad de cambio en la variable independiente.

El intercepto de la línea de regresión es el valor en el eje vertical cuando la

variable independiente es igual a cero.

11
4. CONCLUSIONS

A través de la realización de la práctica de laboratorio e informe, adquirimos un

conocimiento profundo sobre las partes fundamentales de un espectrofotómetro UV-Vis

y los diversos tipos de muestras que pueden analizarse con este equipo. Utilizando el

método de estándar externo, obtuvimos los espectros de absorción del cloruro de

cobalto hexahidratado (Cl2Co*6H2O) y determinamos con precisión el coeficiente de

absorción molar y la concentración de la muestra problema. Esto destacó la

aplicabilidad y la importancia del método de estándar externo en la espectroscopia UV-

Vis para la cuantificación de sustancias.

12
Al analizar el efecto de la concentración en relación con la absorbancia utilizando la

Ley de Beer, consolidamos nuestro entendimiento de esta ley fundamental y su

relevancia en la espectroscopia.

Este laboratorio nos proporcionó una valiosa experiencia en la operación de un

espectrofotómetro UV-Vis, así como un conocimiento más profundo de los conceptos

relacionados con la espectrofotometría.

REFERENCES

1. Skoog, DA, West, DM, Holler, FJ, & Crouch, SR (2013). Fundaments de la
Química Analytica. Aprendizaje Cengage.
2. Willard, HH, Merritt, LL, Dean, JA y Settle Jr, FA (2018)
3. Montgomery, D.C., Peck, E.A., & Vining, G.G. (2012). Introduction to Linear
Regression Analysis. Wiley.

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