Biología Celular y Molecular 2020

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BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR- TOMO 1

Capítulo 1: NIVELES DE ORGANIZACIÓN
2da edición: noviembre 2020
COMITÉ BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR –
MUSEO ANATOMICO “DRA. GLADYS DE CABALLERO”
Universidad Centro Occidental “Lisandro Alvarado”
Decanato de Ciencias de la Salud “Dr. Pablo Acosta Ortiz”
Barquisimeto, Venezuela
Miembros preparadores docentes: Álvarez Adonis.
Diseño de portada: Boschetti María y Camacaro María
Edición General: Boschetti, María, Camacaro María y Hernández Carmelo.
Museo Anatómico “Dra. Gladys de Caballero”
2020
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Capítulo 1: NIVELES DE ORGANIZACIÓN
El presente material constituye una guía de ayuda para el estudio de los procesos
que se desarrollan en los seres vivos desde el punto de vista celular y molecular,
permitiendo entender posteriormente los fenómenos que se expresan a nivel clínico,
dirigidos a estudiantes de Biología Celular y Molecular del Decanato de Ciencias de la
Salud- UCLA y participantes del curso de Biología celular y molecular.
Dispone de textos, cuadros, figuras y esquemas, recopiladas de diversas fuentes

bibliográficas, que facilitan la comprensión de los aspectos relacionados con la Biología
celular y molecular de manera sencilla y concisa. Al ser una guía, revela los aspectos más
resaltantes de cada tema, por lo cual debe ser complementado con la información
proporcionada por libros de texto de Biología Celular y Molecular.
Este material es realizado sin fines de lucro y publicado en la plataforma Google

Classroom para su consulta.
1. NIVELES DE ORGANIZACIÓN |4
1. Origen y Evolución de las Células En 1920 se sugirió por primera vez que
Las células se dividen en dos clases moléculas orgánicas simples podrían
principales, inicialmente definidas según polimerizar espontáneamente y formar
donde situaran el núcleo. Las células macromoléculas bajo las condiciones que se
procariotas (bacterias) carecen de envoltura pensaba que existían en la atmósfera
nuclear; las células eucariotas presentan un primitiva.
núcleo donde el material genético está En el momento en el que surgió la vida, la

separado del citoplasma. Las células atmósfera se piensa que tenía poco o nada
procariotas son generalmente más pequeñas de oxígeno libre, constando principalmente
y simples que las células eucariotas; además de CO2 y N2 además de pequeñas
de la ausencia de núcleo, sus genomas son cantidades de gases como H2, CH4 y NH3,
menos complejos y no contienen orgánulos en presencia de agua, conducía a la
citoplasmáticos o citoesqueleto. formación de una variedad de moléculas
Al margen de estas diferencias, los orgánicas, incluyendo varios aminoácidos.
mismos mecanismos moleculares básicos Aunque el experimento de Miller no

gobiernan la vida de procariotas y eucariotas, reprodujo con precisión las condiciones
indicando que todas las células presentes primitivas de la Tierra, claramente demostró
hoy descienden de un ancestro primordial la plausibilidad de la síntesis espontánea de
único. las moléculas orgánicas, proporcionando los
materiales básicos desde donde surgieron los
2. La primera célula
primeros organismos vivos.
Parece ser que la vía emergió hace, al
El experimento consistió, básicamente,
menos, 3.800 millones de años,
en someter una mezcla de metano,
aproximadamente 750 millones de años
amoníaco, hidrógeno, dióxido de carbono,
después de que se formara la tierra. Como se
nitrógeno y agua a descargas eléctricas de
originó la vida y cómo la primera célula se
60.000 voltios a temperaturas muy altas. El
convirtió en un ser son cuestiones de
experimento ha sido repetido en múltiples
especulación, puesto que estos
acontecimientos no pueden producirse en un
laboratorio.
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ocasiones, obteniendo compuestos orgánicos Fig 2: Estructura de los ácidos nucleicos

diversos.
Uno de los pasos críticos en el
El siguiente paso en la evolución fue la aprendizaje de la evolución molecular ocurrió
formación de macromoléculas. Se ha a principios de los años 80, cuando se
demostrado que los bloques monoméricos descubrió en los laboratorios de Sid Altman y
que constituyen las macromoléculas se Tom Cech que el ARN es capaz de catalizar
polimerizan espontáneamente bajo numerosas reacciones químicas, incluyendo
condiciones prebióticas plausibles. Pero la la polimerización de nucleótidos. El ARN es,
característica fundamental de la por tanto, el único capaz de servir como
macromolécula de la que surgió la vida debe molde y catalizar su propia replicación. Como
tener la habilidad de replicarse por sí misma. consecuencia, se cree que el ARN ha sido el
Solamente una macromolécula capaz de sistema genético inicial, y que una etapa
dirigir la síntesis de nuevas copias de sí temprana de la evolución química estuvo
misma sería capaz de reproducirse y basada en moléculas de ARN con replicación
evolucionar. propia (un período de la evolución conocido
como el mundo del ARN) Las interacciones
De las dos clases principales de
en orden entre el ARN y los aminoácidos
macromoléculas que aportan información en
evolucionaron a lo que hoy es el código
las células actuales (ácidos nucleicos y
genético, y eventualmente el ADN reemplazó
proteínas), solo los ácidos nucleicos son
al ARN como el material genético.
capaces de dirigir su propia replicación. Los
ácidos nucleicos pueden servir como molde La primera célula, se presupone, que
para su propia síntesis como resultado del surgió de la envoltura del ARN de replicación
apareamiento de bases específicas entre propia en una membrana compuesta por
nucleótidos complementarios. fosfolípidos. los fosfolípidos son los
componentes básicos de todas las
membranas biológicas presentes hoy día,
incluyendo la membrana plasmática de
células eucariotas y procariotas.
La característica clave de los fosfolípidos

que forman las membranas es que son
moléculas anfipáticas, lo que quiere decir que
una porción de la molécula es soluble en
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agua y la otra porción no. Los fosfolípidos

presentan largas cadenas hidrocarbonadas
Fig 3: Dogma central de la biología molecular
insolubles en agua (hidrofóbicas) unidas a
grupos solubles en agua (hidrofílicos) que 3. Evolución del metabolismo
contienen fosfatos.
Debido a que las células se originaron en
En contacto con el agua, los fosfolípidos un mar de moléculas orgánicas, éstas eran
espontáneamente se agrupan en una bicapa capaces de obtener alimento y energía
con los grupos que contienen fosfatos en el directamente de su ambiente. Pero una
exterior en contacto con el agua y sus colas situación como ésta es limitada en sí misma,
hidrocarbonadas en el interior en contacto por lo que las células necesitaron evolucionar
unas con otras. Esta bicapa fosfolipídica sus propios mecanismos de creación de
forma una barrera estable entre dos energía y sintetizar las moléculas necesarias
compartimientos acuosos, entonces separa el para su replicación. La creación y la
interior de la célula de su ambiente externo. utilización controlada de la energía
metabólica es primordial para todas las
La envoltura del ARN autorreplicante y
actividades celulares, y los procesos
las moléculas asociadas a una membrana
principales de metabolismo energético se han
lipídica se han mantenido, por tanto, como
conservado prácticamente intacto s en las
una unidad, capaz de reproducirse a sí
células actuales.
misma y evolucionar. La síntesis de proteínas
a partir del ARN pudo ya haber evolucionado, Todas las células utilizan adenosina 5’-
en cuyo caso la primera célula consistiría en trifosfato (ATP) como fuente de energía
un ARN de replicación propia y sus proteínas metabólica para llevar a cabo la síntesis de
codificadas. las constituyen celulares y conducir otras
actividades que requieren energía, como el
Cómo los genes del ADN proporcionan
movimiento (p. ej., la contracción muscular).
las instrucciones para hacer proteínas. El
dogma central de la biología molecular: ADN Los mecanismos utilizados por las células
→ ARN → proteína. para generar ATP han evolucionado en tres
etapas, correspondientes a la evolución de
las glicolisis, fotosíntesis y metabolismo
oxidativo. El desarrollo de estos procesos
metabólicos cambió la atmósfera de la Tierra,
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en consecuencia, alterando el curso de la tarde y tuvo la importante consecuencia de

evolución. cambiar la atmósfera de la Tierra. El uso de
H2O en reacciones fotosintéticas produce O2
En la atmósfera anaerobia inicial de la
libre; se cree que este mecanismo ha sido el
Tierra, las primeras reacciones generadoras
responsable de hacer a la atmósfera de la
de energía presumiblemente implicaron la
Tierra tan abundante de O2. La liberación de
escisión de moléculas orgánicas en ausencia
O2 como consecuencia de la fotosíntesis
de oxígeno. Estas reacciones parecen ser
cambió el medio en el que las células
una forma del actual glicolisis (la rotura
evolucionaron y se cree que determinó el
anaerobia de la glucosa a ácido láctico, con
la ganancia neta de energía de dos
moléculas de ATP). Además de utilizar ATP
como su fuente de energía química
intracelular, todas las células actuales llevan
a cabo el glicolisis, de acuerdo con la idea de
que estas reacciones surgieron muy pronto
desarrollo del metabolismo oxidativo.
en la evolución.
Fig 4: Ecuación química de la fotosíntesis,
La glicolisis proporcionó un mecanismo proceso que determinó el desarrollo del
mediante el cual la energía en moléculas metabolismo oxidativo al hacer la tierra
abundante en O2.
orgánicas ya formadas (p. ej., la glucosa)
podía convertirse en ATP, que podía ser El O2 es altamente reactivo y proporcionó
utilizado como fuente de energía para dirigir un mecanismo de generación de energía a
otras reacciones metabólicas. partir de moléculas orgánicas mucho más
El desarrollo de la fotosíntesis fue el eficiente que la glicolisis anaerobia. Por
siguiente paso más importante de la ejemplo, la rotura oxidativa completa de la
evolución, que permitió a la célula generar glucosa en CO2 y H2O produce energía
energía a partir de la luz solar y ser equivalente a 36 o 38 moléculas e ATP, en
independientes de la utilización de las comparación con las 2 moléculas de ATP que
moléculas orgánicas ya existentes. se forman en la glicolisis anaerobia. Con

pocas excepciones, las células actuales
La utilización de H2O como donante de
utilizan reacciones oxidativas como fuente
electrones e hidrógeno para la conversión del
principal de energía.
CO2 a compuestos orgánicos evolucionó más
4. Procariotas actuales
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Los procariotas actuales, que incluyen la mayoría de los otros procariotas, E. Coli
todos los tipos de bacterias, están divididos está rodeada por una pared celular
en dos grupos (las arquebacterias y las bacteriana rígida compuesta de polisacáridos
eubacterias) que se diferenciaron al principio y péptidos. Dentro de la pared celular se
de la evolución. encuentra la membrana plasmática, que es
una bicapa de fosfolípidos y proteínas
Algunas arquebacterias viven en
asociadas. Mientras que la pared celular es
condiciones extremas, que hoy en día son
porosa y puede ser penetrada por una
inusuales pero que pudieron prevalecer en la
variedad de moléculas, la membrana
primitiva Tierra. Por ejemplo, las
plasmática proporciona una separación
termoacidófilos viven en pozos calientes de
funcional entre el interior de la célula y su
sulfuro con temperaturas hasta de 80°C y
medio externo. El ADN de E. Coli es una
valores de pH de 2. Las eubacterias incluyen
molécula circular única en el nucleoide que,
las formas comunes que están presentes en
en comparación con el núcleo de las
nuestros días (un amplio grupo de
eucariotas, no está rodeado por una
organismos que viven en una gran variedad
de ambientes, como la tierra, el agua, y otros
organismos (p. ej., los patógenos).
La mayoría de las células bacterianas

son esféricas, en forma de bastón, o espiral,
con diámetros que oscilan de 1 a 10um. Su
contenido de ADN varía desde unos
0.6millones a 5millones de pares de bases,
cantidad suficiente para codificar unas 5000
proteínas diferentes. Las procariotas más membrana que lo separa del citoplasma. El
grandes y complejos son las cianobacterias, citoplasma contiene aproximadamente
bacterias en las que evolucionó la 30.000 ribosomas (lugar de la síntesis de
fotosíntesis. proteínas), que destacan por su apariencia
granular.
La estructura de célula procariota típica
es la de Escherichia coli, una habitante Fig 5: Representación de una Escherichia
coli. Procariota habitante del tracto intestinal
común del tracto intestinal humano. La célula en el ser humano.
tiene forma de bastón, alrededor de 1um de
diámetro y cerca de 2um de longitud. Como 5. Células eucariotas
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Como las células procariotas, todas las papeles imprescindibles en el metabolismo

células eucariotas están rodeadas por energético.
membranas plasmáticas y contienen
Las mitocondrias, que se encuentran en
ribosomas. No obstante, las células
casi todas las células eucariotas, son los
eucariotas son mucho más complejas y
centros del metabolismo oxidativo y son por
contienen un núcleo, variedad de orgánulos
tanto las responsables de generar la mayoría
citoplasmáticos, y un citoesqueleto. El
del ATP derivado de la rotura de moléculas
orgánulo más grande y prominente de las
orgánicas. Los cloroplastos son los centros
células eucariotas es el núcleo, con un
donde se lleva a cabo la fotosíntesis y se
diámetro aproximado de 5um. El núcleo
encuentran exclusivamente en las células de
contiene la información genética de la célula,
las plantas y algas verdes.
que en las eucariotas se encuentra
organizada de forma linear en lugar de Los lisosomas y los peroxisomas también
moléculas de ADN circular. El núcleo es el proporcionan compartimentos metabólicos
sitio de la replicación del ADN y de la síntesis especializados para la digestión de
del ARN; la traducción del ARN en proteínas macromoléculas y varias reacciones
tiene lugar en los ribosomas del citoplasma. oxidativas, respectivamente. Además, la

mayoría de las células de las plantas
Además de un núcleo, las células
contienen grandes vacuolas que desarrollan
eucariotas contienen una variedad de
variedad de funciones, incluyendo la
orgánulos delimitados por membranas dentro
digestión de macromoléculas y el almacenaje
del citoplasma. Estos orgánulos proporcionan
diferentes compartimientos en los que se
localizan las distintas actividades
metabólicas. Las células eucarióticas son por
lo general más grandes que las células
procariotas, con frecuencia presentando un
volumen celular cien veces mayor.
La compartimentalización proporciona por

los orgánulos citoplasmáticos es lo que
permite a las células eucariotas funcionar con
eficiencia. Dos de estos orgánulos, las
mitocondrias y los cloroplastos, juegan
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de productos de desecho y nutrientes. de filamentos proteínicos que se extienden

por el citoplasma. El citoesqueleto
proporciona el marco estructural de la célula,
Fig 6: Representación de una célula determinando la forma celular y la
eucariota animal y sus orgánulos
citoplasmáticos. organización general del citoplasma.
Debido al tamaño y complejidad de las Además, el citoesqueleto es responsable de
células eucariotas, el transporte de proteínas los movimientos de todas las células (por ej.,
a sus destinos dentro de la célula es una la contracción de las células musculares), del
labor formidable. Dos orgánulos transporte intracelular y la posición de los
citoplasmáticos, el retículo endoplasmático y orgánulos y otras estructuras, incluyendo los
el aparato de Golgi, es tan específicamente movimientos de los cromosomas durante de
dedicados a la diferenciación y transporte de la división celular.
las proteínas destinadas a la secreción, a la

incorporación en la membrana plasmática, y
Los eucariotas se desarrollaron hace al
a la incorporación en los lisosomas. El
menos 2700 millones de años, después de
retículo endoplasmático es una red extensa
1000 o 1500 millones de años de la evolución
de membranas intracelulares, que se
procariota. Los estudios de sus secuencias
extienden desde la membrana nuclear hasta
de ADN indican que las arquebacterias y
atravesar todo el citoplasma. No solo actúa
eubacterias son tan diferentes entre sí como
en el proceso y transporte de proteínas, sino
lo son de los eucariotas actuales. Por lo
también en la síntesis de lípidos. Desde el
tanto, parece ser que un acontecimiento en la
retículo endoplasmático, las proteínas son
primera etapa de la evolución ha sido el
transportadas dentro de pequeñas vesículas
motivo de la divergencia de tres líneas de
al aparato de Golgi, donde siguen siendo
descendencia a partir de un antepasado
procesadas y clasificadas para el transporte a
común, dando lugar a las actuales
sus destinos finales. Además de esta función
arquebacterias, eubacterias y eucariota.
de transporte de proteínas, el aparato de
Golgi presenta síntesis de lípidos y (en →Adquisición de la membrana de los
células de las plantas) síntesis de algunos orgánulos subcelulares
polisacáridos que componen la pared celular.
Un paso crítico en la evolución de las
Las células eucariotas tienen otro nivel de células eucariotas fue la adquisición de la
organización interna: el citoesqueleto una red envoltura membranosa de los orgánulos
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subcelulares, permitiendo el desarrollo de la En general, se ha aceptado un origen

complejidad mayor. Estos orgánulos se cree endosimbiótico de estos orgánulos,
que han sido adquiridos como resultado de la suponiendo que la mitocondria ha
asociación de células procariotas, con el evolucionado a partir de las bacterias
antepasado de las eucariotas. aerobias y los cloroplastos de las bacterias
fotosintéticas, como las cianobacterias. La
La hipótesis de que las células eucariotas adquisición de bacterias aerobias podría
evolucionaron a partir de una asociación provenir de una célula aerobia con la
simbiótica de las procariotas (endosimbiosis) habilidad de llevar a cabo un metabolismo
se sustenta con los estudios de las oxidativo. La adquisición de bacterias
mitocondrias y los cloroplastos, los cuales se fotosintéticas podría provenir de la
cree que han evolucionado desde bacterias independencia nutricional conseguida al
que vivían en células grandes. desarrollar la fotosíntesis. Por tanto, estas
Las mitocondrias y los cloroplastos tienen asociaciones endosimbióticas resultaron muy
un tamaño similar al de las bacterias, y como beneficiosas para sus asociados, que fueron
ellas, se reproducen mediante su escisión seleccionados en el curso de la evolución.
bipartita. Lo más importante, es que las 6. Desarrollo de organismos

mitocondrias y los cloroplastos contienen su
multicelulares
propio ADN, que codifica alguno de sus
componentes. El ADN de las mitocondrias y Muchos eucariotas son organismos
cloroplastos se replica cada vez que el unicelulares que, como las bacterias, se
orgánulo se divide, y los genes que contiene componen de células únicas capaces de su
se transcriben dentro del orgánulo y se propia replicación. Los eucariotas más
traducen en los ribosomas de este. Por lo simples son las levaduras. Las levaduras son
tanto, las mitocondrias y los cloroplastos más complejas que las bacterias, pero mucho
contienen sus propios sistemas genéticos, más pequeñas y simples que las células
que son diferentes del genoma nuclear de la animales o vegetales.
célula. Además, los ribosomas y los ARN Los organismos multicelulares

ribosómicos de estos orgánulos están más evolucionaron de los eucariotas unicelulares
relacionados con los bacterianos que hace al menos 1700 millones de años.
aquellos codificados por los genomas Algunos eucariotas unicelulares forman
nucleares de los eucariotas. agregados multicelulares que parecen
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representar una transición evolutiva desde Las células presentes en animales son
una única célula a un organismo multicelular. considerablemente más diversas que las de
las plantas. El cuerpo humano, por ejemplo,
está compuesto por más de 200 tipos de
células diferentes, consideradas
generalmente como componentes de los
cinco tipos principales de tejidos: tejido
epitelial, tejido conectivo, sangre, tejido
nervioso y tejido muscular. Las células
epiteliales forman láminas que cubren la
superficie del cuerpo y delimitan los órganos
internos.
Fig 7: Tejidos básicos del cuerpo humano, Existen muchos tipos diferentes de
los cuales están formados por agregados de células epiteliales, cada una especializada
células, siendo esto un reflejo de la evolución
de los organismos multicelulares. para una función específica, incluyendo
protección (la piel), la absorción (por ej., las
células del intestino delgado), y secreción (p.
Por ejemplo, las células de muchas algas
ej., células de la glándula salivar). El tejido
(p. ej., el alga verde Volvox) se asocian unas
conectivo incluye hueso, cartílago y tejido
con otras para formar colonias multicelulares,
adiposo, cada uno de los cuales está
las cuales se cree que son los precursores
formado por diferentes tipos de células
evolutivos de las plantas actuales. El
(osteoblastos, condrocitos y adipocitos,
aumento de la especialización celular
respectivamente). El tejido conectivo suelto
determinó la transición de las colonias
que delimita con las capas epiteliales y
agregadas a los verdaderos organismos
rellena los espacios entre los órganos y
multicelulares. La continua especialización y
tejidos del cuerpo está formado por otro tipo
la división de las funciones entre las células
de células: los fibroblastos.
de un organismo ha proporcionado la
complejidad y diversidad observada en los La sangre contiene diferentes tipos de
muchos tipos de células que componen las células, que funcionan en el transporte del
plantas y los animales de hoy, incluyendo a oxígeno (glóbulos rojos, o eritrocitos),
los seres humanos. reacciones inflamatorias (granulocitos,

monocitos y macrófagos), y la respuesta
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inmune (linfocitos). El tejido nervioso está que las existentes en las células
formado por células nerviosas, o neuronas, eucariotas.
que están altamente especializadas en la 6. Las células eucariotas miden entre 10 y
transmisión de señales a través del cuerpo., 50 micras y las procariotas entre 0-10
micras.
7. Diferencias entre las células
7. En las células eucariotas existe un
procariotas y eucariotas:
número determinado de cromosomas
lineales, mientras que las células
1. Ambas células poseen su material procariotas poseen un cromosoma circular
genético en una región nuclear rodeada
de citoplasma, sin embargo, Las células
eucariotas contienen el material genético
en un núcleo definido rodeado por una
envoltura membranosa mientras que las
procariotas lo poseen en el nucleoide ya único.
que carecen de núcleo definido (rodeado
Fig 8: ADN solamente se asocia a proteínas
de membrana), de echo de ahí derivan histonas en una célula eucariota, en las
sus nombres. procariotas el ADN no se asocia a éste.
2. Las células eucariotas poseen orgánulos 8. En las células eucariotas el ADN se
mientras que las procariotas no. encuentra asociado a proteínas, tipo
3. Las células eucariotas pueden ser histonas; por el contrario, en las células
unicelulares y multicelulares y las procariotas el ADN no se asocia a estas
procariotas solo multicelulares. proteínas.
4. Ambos tipos de células pueden estar 9. Las células eucariotas poseen también
rodeados por una pared celular rígida, tal estructuras intracelulares no delimitadas
es el caso de las plantas y las bacterias. por membranas, entre las cuales se
Aunque las paredes celulares de encuentran los elementos del
procariotas y eucariotas pueden tener citoesqueleto que son complejos
funciones semejantes, existen diferencias supramoleculares que participan en la
en su composición química. contractilidad celular, movimiento y
5. En las células procariotas las cantidades soporte. Hasta hace poco tiempo se
de ADN son relativamente más pequeñas, pensaba que las células procariotas no
poseían citoesqueleto, pero ha sido
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encontrado en algunas bacterias 1. Estructura similar de la membrana

filamentos de citoesqueleto primitivo. plasmática.
10. Las células procariotas y eucariotas 2. Mecanismos similares para la
contienen ribosomas que son complejos transcripción y traducción de la
supramoleculares no delimitadas por información genética.
membranas. Los ribosomas procarióticos 3. Rutas metabólicas similares.
son más pequeños que los eucarióticos y 4. Mecanismo similar para conservar la
sus componentes estructurales son energía química en forma de ATP, en
menos numerosos que los de los procariotas se ubica en la membrana
ribosomas eucarióticos. plasmática y en eucariotas en la
11. Las células eucariotas se dividen por membrana mitocondrial interna.
mitosis, proceso mediante el cual los 9. Niveles de Organización
cromosomas duplicados se condensan en
La biología se ocupa de analizar
estructuras compactas, que se separan
jerarquías o niveles de organización que van
por medio de la participación del huso
desde la célula a los ecosistemas. Estos
mitótico, lo que permite que cada célula
niveles pueden definirse en una escala de
hija reciba un ordenamiento equivalente
organización que va de menor a mayor
de material genético. En procariotas ese
complejidad.
proceso de condensación de los
cromosomas no ocurre ni se forma el Tanto para los organismos unicelulares
huso mitótico, el ADN se duplica y las dos como para los pluricelulares su organización
copias se separan de forma precisa (fisión empieza a nivel químico y adquiere mayor
binaria o bipartición) complejidad a nivel celular en el caso de los
12. En su mayoría los procariotas son unicelulares y, a nivel sistémico en el caso
organismos asexuados, puesto que del cuerpo humano.
contienen un cromosoma único razón por
Por lo tanto, es posible estudiar biología a
lo que carecen de procesos comparables
muchos niveles, desde un conjunto de
a la meiosis de los organismos eucariotas,
organismos (comunidades) hasta la manera
formación de gametos o fecundación
en que funciona una célula o la función de las
verdadera.
moléculas de la misma.
8. Características comunes entre
células procariotas y eucariotas:
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En orden de mayor a menor puede ser tan sencillo como un campo

complejidad mencionaremos los con flores separado de otro campo por
principales niveles de organización: una colina sin flores.
- Biosfera: La suma de todos los seres

- Individuo: Una o más células
vivos tomados en conjunto con su medio
caracterizadas por un único tipo de
ambiente. En esencia, el lugar donde
información codificada en su ADN. Puede
ocurre la vida, desde las alturas de
ser unicelular o multicelular. Los
nuestra atmósfera hasta el fondo de los
individuos multicelulares muestran tipos
océanos o hasta los primeros metros de la
celulares especializados y división de
superficie del suelo. Dividimos a la Tierra
funciones en tejidos, órganos y sistemas.
en atmósfera (aire), litosfera (tierra firme),
hidrosfera (agua), y biosfera (vida). - Sistema: Grupo de células, tejidos y
órganos que están organizados para
- Ecosistema: La relación entre un grupo realizar una determinada función, p.ej. el
de organismos entre sí y su medio sistema circulatorio.
ambiente. Los científicos a menudo - Órganos: Grupo de células o tejidos que
hablan de la interrelación entre los realizan una determinada función. Por
organismos vivos. Dado, que de acuerdo ejemplo, el corazón, es un órgano que
a la teoría de Darwin los organismos se bombea la sangre en el sistema
adaptan a su medio ambiente, también circulatorio.
deben adaptarse a los otros organismos
de ese ambiente. - Tejido o supracelular: Un grupo de
células que realizan una determinada
- Comunidad: Es la relación entre grupos función. Por ejemplo, el tejido muscular
de diferentes especies. cardíaco.
- Especie: Grupo de individuos similares - Célula: la más pequeña unidad

que tienden a aparearse entre sí dando estructural de los seres vivos capaz de
origen a una cría fértil. funcionar independientemente. Cada
célula tiene un soporte químico para la
- Poblaciones: Grupos de individuos
herencia (ADN), un sistema químico para
similares que tienden a aparearse entre sí
adquirir energía etc.
en un área geográfica limitada. Esto
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- Organela: Es una subunidad de la célula, componen de miles, o más, de átomos.

es una agrupación funcional de Las más comunes en bioquímica son los
biomoléculas y reacciones e interacciones ácidos nucleicos, proteínas, carbohidratos
bioquímicas con una determinada función y Lípidos, e incluso los Priones.
celular p.ej. la mitocondria (el sitio
principal de generación de ATP en - Moléculas, átomos, y partículas
eucariotas). subatómicas: los niveles funcionales

fundamentales de la bioquímica.
- Supramolecular: A este nivel se 10. Virus
encuentran las asociaciones
Los virus son parásitos intracelulares
supramoleculares, que resultan de la
obligatorios incapaces de replicarse por sí
combinación de 2 o más macromoléculas
mismos a menos que se ubiquen dentro de
unidas por un enlace que no es covalente
una célula huésped. Se reproducen mediante
(pj. Virus).
la infección de células huésped y la
usurpación de la maquinaria celular para
producir más partículas virales.
Los virus contienen una pequeña

cantidad de material genético que según el
virus puede ser ADN o ARN de cadena
simple o doble.
10.1 Características Generales:
- Son agentes infecciosos que parasitan de

forma obligada células animales,
vegetales y bacterias.
Fig 9: Virus, perteneciente al nivel - Compuesto por una estructura simple de
supramolecular proteínas y ácido nucleico.
- Macromolecular: Una macromolécula es - Los genomas víricos pueden ser ARN o
una molécula de gran tamaño creada ADN, pero no de ambos.
comúnmente a través de la polimerización - Son estructuras inertes en el medio
de subunidades más pequeñas extracelular.
(monómeros). Por lo general, se - No poseen organelas.

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- Son 100 veces más pequeños que las su ADN al ADN de los cromosomas de la
bacterias con unos diámetros entre 10 y célula huésped formando el provirus.
300 nm. Pudiendo generar varios efectos:
- Que la célula que contiene el provirus se
comporte normalmente en tanto no se
exponga a algún tipo de estímulo como
rayos UV que activan al ADN viral
latente,
provocando lisis celular y liberación de la
progenie viral. Ej. Virus de la varicela
zoster o Virus del herpes simple.
- Que la célula que contiene el provirus
produzca una nueva progenie viral por
Fig10: Representación de un virus desnudo, gemación en la superficie de la célula sin
donde se evidencia el ácido nucleico cubierto
de la cápside. lisis de la célula infectada. Ej. VIH
10.2 Características estructurales: - Que la célula que contiene un provirus

pierda el control de su propio crecimiento
- Genoma: ADN o ARN
y división y se convierta en maligna. Ej.
- Proteínas estructurales: Capsómero que
VPH
son las sub unidades proteínas idénticas.
- Cápside o core: Conjunto de capsómeros
que conforman una estructura que
protege el núcleo. Puede ser de forma
icosaédrica, compleja, helicoidal, et.
- Nucleocápside: Ácido nucleico + cápside
(virus desnudos) si adicionalmente
poseen glicoproteínas y membrana de la
célula huésped se llaman virus envueltos.
10.3 Tipos de infección viral
Existen dos tipos básicos de infección viral:

Fig 11: Representación de un virus
1. Infección lisógena: En lugar de producir envuelto, donde se evidencia el ácido
nucleico cubierto de la cápside y su
la muerte de la célula huésped, introduce característica envoltura que corresponde a
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la membrana plasmática de la célula del prion del scrapie) presenta el mismo PM

huésped.
que la proteína PrPc y se diferencia de ésta,
2. Infección lítica: El virus detiene las en su plegamiento erróneo respecto al de la
actividades normales de síntesis en el proteína denominada PrPc. Ambas formas
huésped y reorienta a la célula para proteicas poseen idéntica secuencia de
emplear sus materiales como maquinaria aminoácidos y la única diferencia entre ellas
en la elaboración de ácidos nucleicos y es en su estructura secundaria, es decir en la
proteínas virales que se ensamblaran forma de plegamiento en ciertas regiones de
para producir la progenie viral que se la cadena polipeptídica, lo que se traduce en
libera después de que la célula sufre lisis. un cambio en la estructura secundaria de la

proteína, de hélice alfa a hoja plegada β,
11. Priones
dando como producto final un cambio
El prion, palabra acuñada en 1982 por conformacional en la proteína.
Stanley B. Prusiner al investigar una serie de
El prion infeccioso (PrPsc) provoca
enfermedades de carácter crónico e
enfermedades neuropatológicas mortales en
irreversibles que afectaban al sistema
el hombre y otros animales, tales como el
nervioso central, es un acrónimo inglés
Scrapie (encefalitis espongiforme), Kuru y
derivado de las palabras proteína e infección.
ECJ capaces de transmitirse de un humano a
Los priones son simplemente una otro y de un humano a animales. En el
macromolécula de membrana, genoma de los mamíferos existe un gen que
específicamente una proteína de superficie codifica la proteína priónica PrPc que se
celular con algunos carbohidratos. A expresa normalmente en varios tejidos,
diferencia del resto de los agentes principalmente en neuronas del sistema
infecciosos (virus, bacterias, hongos etc.), nervioso central. Este gen se encuentra en el
que contienen ácidos nucleicos (ya sea ADN, hombre en el cromosoma 20.
el ARN, o ambos), un prion solamente está
compuesto por aminoácidos y no presenta El suceso crítico en la patogénesis
material genético, parece estar relacionado con un cambio
La proteína PrPc, es una glicoproteína estructural que transforma a la PrPC en la
localizada preferentemente en el lado externo PrPSc, el componente principal de las
la membrana de las neuronas. La proteína partículas infecciosas. Se propone que la
prión infecciosa denominada PrPsc (proteína forma alterada de la proteína PsPsc,

adquiere la capacidad de transformar la
| 19
forma normal en patológica. La patología se vacas locas, la que puede transmitirse a

manifiesta probablemente por la acumulación personas que entran en contacto con los
de la proteína anormal. tejidos de animales enfermos, o los ingieren;
en humanos se denomina enfermedad de
Estas proteínas patógenas ahora pueden
Creutzfeldt Jacob. Otra enfermedad priónica
entrar en contacto con otras e inducir nuevos
es el Kuru, relacionado con el canibalismo de
cambios, generando una reacción en cadena
material encefálico como un acto ritual. Los
donde paulatinamente aparecen una gran
tratamientos para las enfermedades priónicas
cantidad de PRPsc, extendiéndose de célula
son muy limitados y actualmente se
a célula y a través de los tejidos. Dichas
encuentran en desarrollo.
proteínas mutadas forman agregados
supramoleculares, y autorreproducibles que Finalmente, los priones parecieran ser en
forman de placas amiloides, agregados la biología, la máxima expresión de lo simple,
proteicos patógenos que se acumulan en donde sólo un cambio en la forma de una
forma de fibras insolubles y que matan las proteína desencadena una cascada de
neuronas produciendo agujeros en el eventos que suele terminar en una
cerebro. enfermedad mortal, gracias a Dios en la
biología, también son cosas simples las que
Los priones anormales no inducen una
hacen posibles los funcionamientos
respuesta inmunológica efectiva que los limite
extraordinarios de la célula.
y son resistentes a la degradación por los
lisosomas (véase organelas eucariotas), por 11.1 Mecanismo de contagio
lo que terminan formando grandes agregados
No se conocen con exactitud los
(uniones de muchas PRPsc), que causan
mecanismos a través de los cuales la PrPc
muerte celular y daño, entre ellos llama la
pasa a ser PrPSc. Una de las hipótesis es la
atención las consecuencias sobre el tejido
creación de radicales -SH, cambiando unos
nervioso.
aminoácidos presentes comúnmente en las
Se conocen varias enfermedades hélices alfa (encontradas en alto porcentaje
priónicas en humanos, en animales, y en las PrPc) por otros, normalmente entre
algunas que pueden transmitirse entre cisteínas que pueden formar puentes
animales y humanos; también existen casos disulfuro, hecho que da lugar a un cambio
hereditarios y algunos brotes espontáneos. conformacional y dando lugar a un aumento
Un ejemplo es la Encefalopatía Bovina, en la proporción de láminas beta.
también conocida como la enfermedad de las
| 20
Según las hipótesis actuales, los

Organización Proteína Agregados
aminoácidos que actúan en el cambio
monomérica proteicos
conformacional son la metionina, por su
capacidad de crear enlaces disulfuro por su
radical –SH, así como la cisteína; y la valina, Estabilidad Monómeros Monómeros
por su proximidad atómica a la Met y Cys. de estables poco

monómeros estables
11.2 Características de los priones
(agregados
El gen codificando del prion PrPc (gen amiloides)
PRNP) se localiza en el brazo corto del
cromosoma 20, no tiene intrones y es un gen Resistencia Resistencia
autosómico dominante. Se expresa en el normal extrema a la
tejido neuronal, cardíaco, muscular, Resistencia
radiación y
pancreático y hepático. disolventes
El plegamiento erróneo de la PrPc a fuertes
PrPSc confiere a la PrPSc dos propiedades

que la diferencian de la PrPc: Solubilidad Soluble en Insoluble en
detergentes detergentes
1. La resistencia parcial a la digestión por
proteasas
2. Insolubilidad. Es importante destacar que tanto las
PrPc como las PrPSc tienen la misma
Variable Prpc PrpSc secuencia de aminoácidos, pues derivan del

mismo gen.
Hélice α (4 Lámina β 11.3 Transporte al cerebro

regiones de (proteína
Estructura A partir de una ingesta contaminada, el
proteína plana)
Secundaria agente patógeno es transportado por el
globular)
epitelio intestinal, desde donde entra a las
células M (especializadas en el transporte de
Resistencia Susceptible a Resistente a macromoléculas y partículas a través de las
a proteasas proteasas proteasas células del epitelio intestinal) mediante
transcitosis. A continuación, el agente entra
| 21
dentro de las células migratorias y de los nada menos que a los mencionados
macrófagos (sistema inmunitario). plásmidos.
Una vez reconocido, se sintetiza un Los plásmidos son moléculas de ADN

anticuerpo contra el prion, pero no tiene extracromosómico circular que se replican y
ninguna eficacia, causa por la cual el prion es transcriben independientes del ADN
transportado por el sistema inmunitario y se cromosómico. Están presentes normalmente
acumula en el bazo y los ganglios linfáticos, en bacterias de manera natural (No son
que están muy inervados. Este hecho infecciosos-patógenos). También se
produce el contagio al tejido nervioso y la encuentra en hongos parasitados por
consecuente muerte neuronal y por ello, el bacterias y en algunas ocasiones en
cerebro adquiere un aspecto esponjoso. organismos eucariotas como las levaduras.
La muerte neuronal se produce porque Cada bacteria puede tener uno o varios
las PrpSc son insolubles y resistentes a las plásmidos a la vez. Las moléculas de ADN
proteasas de los lisosomas. Este hecho plasmídico, adoptan una conformación tipo
explica la acumulación de PrPSc en los doble hélice al igual que el ADN de los
lisosomas, produciendo un aumento de cromosomas. A diferencia del ADN
volumen y la consecuente lisis de los cromosómico, los plásmidos no tienen
lisosomas que acidifican la célula proteínas asociadas. Se han encontrado
produciendo su muerte. plásmidos en casi todas las bacterias.
12. Plásmidos Algunos plásmidos llamados plásmidos

integrativos tienen la capacidad de insertarse
La palabra plásmido fue dada a conocer
en el cromosoma bacteriano. Estos rompen
por primera vez por el biólogo molecular
momentáneamente el cromosoma y se sitúan
norteamericano Joshua Lederberg en 1952
en su interior, con lo cual, automáticamente la
(quien obtuvo el premio Nobel de Fisiología y
maquinaria celular también reproduce el
Medicina en 1958). En 1957, durante una plásmido.
epidemia de disentería en Japón, un grupo
Cuando ese plásmido se ha insertado se
de investigadores descubrió que ciertas
les da el nombre de episoma. Se denomina
formas bacterianas eran resistentes a los
transformación cuando el plásmido se
antibióticos empleados para tratar esta
traslada al cromosoma bacteriano y la
enfermedad. Tiempo después se encontró
conjugación se basa en el intercambio
que esta resistencia se debía nada más y
| 22
unidireccional de información genética desde

En otros casos, los plásmidos contienen
una bacteria donante a otra receptora
genes que codifican enzimas capaces de
mediante un contacto real.
degradar algunos antibióticos, permitiendo
Aunque el ADN plasmídico no porta que la bacteria sobreviva a la acción de los
información genética esencial para la vida de mismos. Por ejemplo, la producción de β-
la bacteria, sí porta genes que le confieren lactamasas por cepas Neisseria gonorrhoeae,
nuevas propiedades fenotípicas y que en Staphylococcus aureus y Haemophylus
algunos casos le son útiles para su influenzae está codificada plasmídicamente.
adaptación al crecimiento en determinados
ambientes. Entonces, el tipo de genes que portan los
plásmidos es variado, tratándose
Muchas bacterias potencialmente
generalmente de genes que aportan ventajas
patógenas para el hombre, solo son capaces
adaptativas a la bacteria que los porta: como
de comportarse como tales cuando portan un
ya dijimos genes de resistencia a antibióticos,
plásmido que contiene genes que le permiten
genes de producción de sustancias tóxicas
expresar moléculas de adhesión a los tejidos
para otras bacterias o genes que codifican
del huésped o sintetizar sustancias tóxicas
enzimas útiles para degradar sustancias
para éste. Como ejemplo la toxina tetánica
químicas.
producida por Clostridium tetani, está
codificada plasmídicamente. 12.1 Tipos de plásmidos:
Los plásmidos pueden clasificarse según

distintos criterios, por ejemplo, por su
tamaño, su número de copia o el tipo de
genes que contiene, según su en grupos de
incompatibilidad, etc. Los clasificaremos en
base a 3 criterios:
1. De acuerdo a su habilidad de
transferirse a otra bacteria:
1.1 Los plásmidos conjugativos contienen
“tra-genes”, los cuales ejecutan complejos
Fig 12: Representación de una bacteria, procesos de conjugación, como la

donde se evidencia la importancia de los
plásmidos en la resistencia a los antibióticos.
| 23
transferencia sexual de plásmidos a otra otra durante la conjugación promovida

bacteria. por otro plásmido, con este método
1.2 Los plásmidos no-conjugativos, son toda una población puede hacerse
incapaces de iniciar una conjugación, de resistente a los antibióticos.
allí que ellos pueden transferirse 3. Plásmidos degradativos
únicamente con la asistencia de los ✓ Los cuales habilitan la digestión de
plásmidos conjugativos y lo hacen “por sustancias inusuales como tolueno o
accidente”. ácido salicílico.
1.3 Una clase intermedia de plásmidos los 4. Plásmidos virulentos
“movilizables” los cuales llevan solo un ✓ Los cuales convierten la bacteria en un
subtipo de genes requeridos para la patógeno. Son capaces de producir
transferencia. Ellos pueden “parasitar” un toxinas.
plásmido conjugativo, transfiriéndose a
una alta frecuencia solo en su presencia. 5. Plásmidos según el grupo de
2. De acuerdo a su función: incompatibilidad:
2.1 Plásmidos de fertilidad: ✓ Dos plásmidos son incompatibles
✓ También son conocidos como factores (no pueden permanecer establemente
F11 los cuales contienen tra-genes, en la misma célula) porque comparten
son capaces de conjugarse. un mismo sistema de replicación y
2.2 Plásmidos de resistencia: segregación de las copias. Como se
✓ Son conocidos como factores R, sabe, los plásmidos se pueden
otorgan resistencia a ciertos clasificar según su pertenencia a un
antibióticos a los huéspedes. mismo grupo de incompatibilidad.
Contienen de manera singular genes 6. Si se introduce interfiere en la replicación
que codifican enzimas capaces de hasta que uno se pierda
destruir o modificar antibióticos. 7. Los plásmidos son incompatibles porque
✓ Como muchos plásmidos de comparten el mismo mecanismo de
resistencia son a su vez plásmidos de control de replicación y/o funciones de
conjugación pueden propagarse por partición.
toda una población aunque con menor

12.2 Organización genética y funcional:
rapidez que el plásmido de fertilidad.
Tomando como referencia al plásmido F
Con frecuencia, los factores R no
tenemos que poseen:
conjugativos, pasan de una bacteria a
| 24
1. Una porción Tra relacionadas con del ADN plasmídico a las bacterias para su
funciones de transferencia conjugativa. amplificación.
2. Una región de replicación vegetativa:
Un ejemplo muy importante es la insulina
posee genes relacionados con la
que es empleada para el tratamiento de la
replicación vegetativa así como determina
diabetes, La insulina humana fue la primera
la incompatibilidad con respecto a otros
molécula de uso terapéutico obtenida
plásmidos.
mediante ingeniería genética. Actualmente la
3. Varias secuencias de inserción:
proteína recombinante obtenida es idéntica a
necesarias para insertar en plásmido en el
la humana, lo que ofrece una alternativa de
cromosoma por medio de recombinación
tratamiento para la diabetes aprobada para
homóloga.
uso en humanos desde 1982. De esta forma,
4. 2 secuencias ori (origen de replicación),
los plásmidos pueden ser auxiliares en el
una de ellas oriV actúa para la replicación
control de enfermedades.
vegetativa y la otra OriT es el origen para
la replicación en la transferencia
conjugativa.
12.3 Utilidad Biológica 1. ¿Cuál de las principales macromoléculas

es la única capaz de dirigir su propia
¿En qué nos pueden ayudar los
replicación?
plásmidos? Al parecer, los plásmidos
2. ¿Cuál es el dogma central de la biología
benefician a las bacterias, pero ¿Será que
celular y molecular?
también nos puedan ayudar a nosotros? ¡Sí
3. ¿A qué nivel de organización pertenecen
pueden!
las mitocondrias?
Los plásmidos tienen aplicación en 4. ¿En qué tipo de célula se encuentran lso
ingeniería genética Los plásmidos empleados cloroplastos?
en ingeniería genética se llaman vectores 5. ¿Cuál es la diferencia estructural entre un
después que se les ha insertado el gen de virus desnudo y uno envuelto?
interés. Son muy útiles para sintetizar 6. ¿Cuál es la diferencia en la estructura
proteínas con fines investigativos, mediante secundaria entre un prion fisiológico y uno
un procedimiento conocido como patológico?
transformación, que permite la transferencia
| 25
7. ¿Qué molécula fue usada como vector en

ingeniería genética para la obtención de la
insulina?
✓ Alberts, B (2010). Biología Molecular

de la Célula. 5 ed. Ediciones Omega.
España.
✓ Cooper, G y Haussman, R. (2011). La
Célula. 5ed. Editorial Marbán. España.
✓ Karp, G. (2009). Biología Celular y
Molecular. Conceptos y Experimentos.
5 ed. Editorial McGraw – Hill. México.
✓ Lodish, H y otros. (2006). Biología
Celular y Molecular. 4 ed. Editorial
Panamericana.
|1
|2

Capítulo 2: BIOMOLÉCULAS
Miembros preparadores docentes: Alfonzo Samantha.
Edición General: Boschetti, María y Hernández Carmelo.
2020
|3

Capítulo 2: BIOMOLÉCULAS


2. BIOMOLÉCULAS |4
AGUA  Funciones
- Solvente universal
Representa el 70% más de la masa
- Es el líquido matriz alrededor del cual
celular total, en base a esto es relevante el
se construye la estructura insoluble
estudio de las interacciones entre el agua y el
de la célula.
resto de los componentes celulares.
- Es el medio a través del cual los
 Estructura materiales se transportan de un
- Es una molécula constituida por dos compartimiento a otro de la célula.
átomos de hidrógeno y uno de - Es reactante o producto en muchas
oxígeno. reacciones celulares.
- Está determinada por la - Es un amortiguador térmico.
electronegatividad de este último. - Da flexibilidad y elasticidad a los
- Forma un tetraedro irregular. tejidos.
E
s
 Propiedades
t
- Color: incolora
r
u
- Sabor: insípida
c - Olor: inodora
t - Se encuentra en la naturaleza en los
u
tres estados.
r
- Tensión superficial: alta cohesividad
a de una molécula de agua.
de las moléculas de agua entre ellas
 Características o con otras sustancias para ocupar
- Es una molécula polar. la menor cantidad de espacio.
- Las moléculas de agua son capaces

de formar enlaces de hidrógeno - Capilaridad: capacidad de adherirse a
entre sí o con otras moléculas superficies y ascender por espacios
polares. reducidos. Aumenta con la reducción
- Puede también interaccionar con iones del espacio.
cargados.
- Se mueve a través de un transporte - Alto calor específico: Cantidad de
pasivo llamado osmosis. calor o energía necesaria para que

|5
la temperatura de un gramo de al mantener constante e igualar la

sustancia se eleve 1 grado temperatura en las diferentes zonas
centígrado. corporales.
o Se requiere un gran aporte de
energía para poder aumentar la - Bajo punto de solidificación
temperatura del agua, y esto se (congelación): temperatura en la
debe a los enlaces de cual el agua pasa de estado líquido
hidrogeno. a sólido.
- Alto calor de vaporización: cantidad o El punto de congelación del
de calor (calorías) necesaria para agua es de 0℃
superar las fuerzas de atracción o Densidad máxima a 4℃: la
entre las moléculas adyacentes de densidad es la magnitud que
un líquido, de modo que las refleja el vínculo que existe
moléculas individuales puedan entre la masa de un cuerpo y su
separarse unas de otras y pasar al volumen.
estado gaseoso. o A medida que la temperatura
o El calor de vaporización del disminuye, la densidad
agua es de 540 Kcal/g, a 100ºC aumenta, al llegar a 4℃
al ser tan elevado permite alcanza su máxima densidad
mantener la temperatura del (1Kg/l), luego al seguir
organismo más baja que la del disminuyendo la temperatura,
ambiente. la densidad empieza a
disminuir y se solidifica (se
- Alto punto de ebullición: temperatura expande).
en la cual el agua pasa de estado
líquido a gaseoso. - Disolvente de moléculas
o El punto de ebullición del agua anfipáticas: el agua solubiliza
es de 100 ℃. compuestos anfipáticos.
- Elevada conductividad calórica: - Ionización: Se ioniza en protones

permite una adecuada conducción hidratados e iones hidroxilo.
de calor en el organismo,
contribuyendo a la termorregulación
|6
o Actúa como un ácido cuando enlaces covalentes del agua

dona un protón y como base produciendo una rotura y que así el
cuando lo acepta. agua pase de un estado líquido a
gaseoso, produciendo enfriamiento.
- Electrolito débil: Es capaz de
CARBOHIDRATOS
disociarse en una proporción muy
escasa y originar tanto H+ como OH- Son aldehídos y cetonas polihidroxilados.
. Por este motivo se dice que el agua Fórmula básica: CH2O
es una sustancia anfótera o anfolito.
 Funciones
- Función energética: la degradación
- Disolvente de compuestos polares
de monosacáridos proporciona
de naturaleza iónica: debido a la
energía para las células.
capacidad del agua de establecer
o Cada gramo de
puentes de hidrogeno con grupos
carbohidratos aporta una
polares de otras moléculas no
energía de 4Kcal.
iónicas.
- Capacidad de hidratación o
- Almacenamiento: los polisacáridos
solvatación: facilita la separación
como el glucógeno y la amilopeptina
de iones e diferentes cargas, lo que
constituyen una forma de
contribuye a la solubilización de
almacenamiento de monómeros de
compuestos iónicos.
glucosa.
 Agua como termorregulador

- Estructural: los polisacáridos forman
corporal
estructuras esqueléticas muy
- El agua se encuentra distribuida por
resistentes como la celulosa que
todo el cuerpo y está en movimiento,
constituye la pared celular de las
como es un buen conductor térmico
células vegetales.
es capaz de absorber el calor y
llevarlo hacia otras partes del cuerpo
- Señalización celular: Pueden unirse
a través de sus propiedades,
a lípidos o proteínas de la superficie
mediante el sudor y transpiración.
de la célula y así representan
- Al realizarse la actividad física se
señales de reconocimiento celular.
genera calor el cual rompe los
|7
- Son componentes de nucleótidos: la unidades a 10 monómeros

ribosa y desoxirribosa, monómeros constituy - Polisacáridos:
del ARN y ADN respectivamente. entes Más de 10
monómeros
- Aporte de fibras que facilitan el
tránsito intestinal: los CHO que no 1. Según su grupo functional:
pueden ser digeridos (como la
celulosa) constituyen las fibras - Aldosas: Grupo funcional: aldehído,
alimenticias, y le dan volumen a las es decir, la molécula contiene un
heces. carbonilo en el extremo de la misma.
- Cetosas: Grupo funcional: cetona.
- Son los responsables antigénicos de o Si el grupo carbonilo se localiza
los grupos sanguíneos. en una posición interna (forma un
grupo cetona), el azúcar es una
 CLASIFICACIÓN: cetosa, como la fructosa.
1. Según su - Aldosas: Grupo
grupo funcional
funcional aldehído
- Cetosas: Grupo
funcional cetona
- Triosas: 3 átomos
- Pentosas: 5
2. Según el
átomos
número
- Hexosas: 6
de
átomos A: Aldohexosa (glucosa). B: Cetohexosa
átomos (Fructosa)
de
carbono 2. Según el número de átomos de
- Monosacáridos: 1 carbono
monómero - Triosas
3. Según el
- Disacáridos: 2 o Función: intermediarios
número
monómeros metabólicos,
de
- Oligosacáridos: 2
|8
- Ejemplos: D-Gliceraldehído y - Ejemplos: D- Ribosa, a partir de la cual

Dihidroxiacetona. se obtiene desoxirribosa, y la
Ribulosa.
A: D-Gliceraldehído B: Dihidroxiacetona
- Tetrosas
o Función: Forman parte de A: D-Ribosa B: D-Ribulosa
las estructuras de las células - Hexosas
vegetales o Función: Fuentes de energía
o Ejemplos: D- Eritrosa y celular de forma rápida
Treosa, y Eritrulosa. o Ejemplos: Glucosa,
galactosa y fructosa.
- Pentosas
o Función: Forman parte de
las estructuras de los ácidos
nucléicos.
A: D-Glucosa B: D-Galactosa C: D-Fructosa
3. Según el número de unidades

constituyentes:
- Monosacáridos:
o Azúcares más simples al poseer
A: D-Eritrosa B: Eritrulosa solo un monómero

o No pueden desdoblarse en
sustancias más sencillas
mediante hidrolisis ácida.
|9
o Los monosacáridos se unen la α- galactosidasa, enzima

entre sí mediante reacciones de ausente en el tracto digestivo
deshidratación. humano, que sólo posee β-
galactosidasa, por lo que no son
NOTA: ¿Qué es un enlace digestibles a nivel del estómago
glucosídico? ni del intestino delgado.
Enlace que se establece entre el grupo

- Tetrasacáridos:
OH de un carbono anomérico de un
o Estaquiosa (2 galactosas +
monosacárido con un grupo OH de otro
glucosa+ fructosa)
monosacárido con liberación de una
molécula de agua.
- Polisacáridos:
o Constituidos por más de 10
- Oligosacáridos: monómeros, es decir un número
o Formados por 2 a 10 elevado (cientos o miles) de
monómeros azúcares.
o Señalización y marcaje celular o Los polisacáridos con una menor
cantidad de monosacáridos,
- Disacáridos: actúan como marcadores
o Formados por dos celulares.
monosacáridos que pueden ser o Son formas de reserva de
iguales o distintos: azucares y constituyen
o Glucosa + Glucosa: Maltosa con componentes estructurales de las
enlaces alfa (1-4) células.
o Glucosa + Fructosa: Sacarosa
con enlaces alfa (1-2) Homopolisacáridos
o Glucosa + Galactosa: Lactosa a) Polisacáridos de reserva: almacenan
con enlaces beta energía digerible con facilidad:
(1-4)
- Glucógeno
- Trisacáridos: o Principal polisacárido de reserva
o Rafinosa (2 galactosas + del organismo humano, se
fructosa): Es hidrolizable con
| 10
almacena principalmente en  Amilopectina: Presenta

hígado y musculo esquelético. ramificaciones (alfa (1-6)) cada 25-
o Constituye el reservorio nutricional 30 unidades de glucosa lineal (alfa
de glucosa, que permite su rápida (1-4)).
movilización.
o Está formado por
aproximadamente 30.000
unidades de glucosa con
ramificaciones cada 8-12
monómeros (enlaces alfa (1-6))
Se observa la diferencia entre las dos configuraciones

del almidón, donde la Amilosa (A) carece de
ramificaciones, mientras que la Amilopectina (B), las
posee.
b) Polisacáridos estructurales: Se trata de

glúcidos que participan en la
construcción de estructuras orgánicas.
- Celulosa:
o Función: Principal componente
Estructura del glucógeno, donde se pueden observar estructural de la pared celular de
los enlaces que se forman entre las moléculas de
glucosa que lo constituyen. las plantas.
o Constituida por moléculas de
- Almidón glucosa unidas por enlace beta (1-
o Principal forma de almacenamiento 4) en lugar de alfa.
de CHO en las plantas. o No puede utilizarse como fuente de
o Se almacena en forma de gránulos energía de humanos ni animales
o Posee dos configuraciones: pues no poseen la maquinaria
 Amilosa: molécula helicoidal no enzimática necesaria (celulosa)
ramificada. o Es importante incluirla en la dieta

(fibra dietética).
| 11
- Quitina: grupos sulfatos y una molécula de

o Polisacárido nitrogenado no ácido hexurónico.
ramificado Se dividen en:
o Formado por residuos de N- - Estructurales: son componentes
acetilglucosamina fundamentales de la matriz extracelular
o Función: constituyente fundamental del tejido cartilaginosos, óseo y
del esqueleto de artrópodos, en el conectivo.
exoesqueleto de invertebrados. o Ácido hialurónico: abundante en
los tejidos conectivos, pero
Heteropolisacáridos
también en el tejido nervioso y
Según la presencia de nitrógeno o no epitelio.
en su molécula, se dividen en:  Compuesto por ácido D-
glucurónico y N-acetil-D-
a) Heteropolisacáridos no nitrogenados
glucosamina unidos por
enlaces β (1→3).
- Las pectinas se distribuyen en la
 Se encuentra disuelto en la
pared celular de las plantas, frutos
matriz en forma de sal, como
cítricos, manzanas, remolachas y
hialuronato.
zanahorias.
 Distribución: se encuentra en la
o Son el principal componente de la
piel y un 25 % en los huesos y
lámina media de la pared celular y
articulaciones. El resto se
constituyen el 30 % del peso seco
distribuye entre los músculos y
de la pared celular primaria de
las vísceras.
células vegetales.
 Excelente lubricante
o En presencia de agua forman
geles.
o Condroitín sulfato (condroitin-6-
o Determinan la porosidad de la
sulfato): Glicosaminoglicano
pared.
sulfatado compuesto por una
cadena de disacáridos de N-
b) Heteropolisacáridos nitrogenados
acetilgalactosamina y N-ácido
- Los glucosaminoglucanos
glucurónico alternados, sulfatado
constituidos generalmente por una
en la posición 6 el anillo de N-
molécula de N-acetilglucosamina o N-
acetilgalactosamina.
acetilgalactosamina, portadora o no de
| 12
 Se une a una proteína central, - Se pueden clasificar en

constituyendo el proteoglicano, peptidoglicanos, glicoproteínas y
que confiere al cartílago sus proteoglicanos.
propiedades mecánicas y a) Peptidoglicanos
elásticas. - Es un polímero de gran tamaño y está
 Distribución: cartílago, piel, compuesto por unidades de N-
vasos sanguíneos, así como los acetilglucosamina y ácido N-
ligamentos y los tendones. acetilmurámico.
- Componente principal de la pared
- De secreción: son componentes celular de los procariotas.
fundamentales del tejido de los - Confieren a la pared bacteriana una
tendones y cartílagos. forma característica y un soporte
o Heparina: mecánico.
 Este polisacárido presenta una
secuencia de cinco azúcares b) Glicoproteínas: resultan de la unión de
que interactúan con proteínas una fracción glucídica con una fracción
que se encargan de coagular proteica a través de enlaces
la sangre. covalentes.
 Función: es un anticoagulante - Se encuentran muy difundidas en las
que desbloquea la circulación membranas de las células
de la sangre del corazón a los - Se encuentran ampliamente
pulmones. distribuidas, a nivel de secreciones,
o Mucoitín sulfatos: presentes en el plasma, hormonas, enzimas.
mucus segregado por las
glándulas del tracto digestivo y c) Proteoglicanos, molécula compuesta
respiratorio, intervienen en la por la unión covalente entre una
protección de los tejidos. cadena de aminoácidos y uno o varios
glucosaminoglucanos sulfatados.
- Los glicosaminoglicanos se unen a los
Heterósidos o heterosacáridos:
péptidos a través de residuos del
- Resultan de la combinación de una o aminoácido serina.
varias moléculas de osas con una
fracción no glucídica.
| 13
- La función de los proteoglucanos hormonas esteroideas o como

depende de sus moléculas de mensajeros moleculares que trasladan
glucosaminglicanos señales desde los receptores de la
- Su acción mecánica es esencial en los superficie celular hasta dianas dentro de
cartílagos y en las articulaciones. la célula.
LÍPIDOS
- Rol protector: gran propiedad de
Conjunto de moléculas inorgánicas y aislante térmico y eléctrico.
heterogéneas insolubles en agua.
- Son precursores de vitaminas
 Características:
liposolubles (A,D,E,K)
- Son ricos en átomos de carbono,
oxigeno e hidrogeno.  CLASIFICACIÓN:
- También pueden contener N, P y S.
- Son solubles en solventes orgánicos
1. Ácidos grasos
no polares, tales como éter,
- Saturados
benceno y cloroformo.
- Insaturados
- En medio acuoso suelen formar
2. Esteroides
asociaciones supramoleculares.
1) SIMPLES 3. Terpenoides
- Se almacenan en forma de TAG en
4. Prostaglandinas
el tejido adiposo.
1. Acilglicéridos
 Funciones:
2. Fosfolípidos
- Estructural: Son el componente
- Fosfoglicéridos
principal de las membranas
- Fosfoesfingolípidos
celulares.
2) 3. Esfingolípidos
COMPUESTOS - Esfingofosfolípidos
- Energética: proporcionan una fuente
- Esfingoglicolípidos
importante de energía. 1 gramo de
o Cerebrósido
lípidos al ser degradados aporta
s
9.4 cal/g.
o Gangliósidos
o Sulfátidos
- Señalización celular: como
| 14
1) Simples: a) Trans: distorsionan ligeramente la

- Ácidos grasos: estructura, no deben existir en el
o Son los lípidos más simples organismo, ya que actúan en nuestro
o Consisten en largas cadenas cuerpo como falsas moléculas
hidrocarbonadas que con mayor saturadas.
frecuencia contienen 16 o 18 átomos b) Cis: Posee los grupos semejantes o
de carbono con un grupo carboxilo idénticos (generalmente grupos –H)
(COO-) en un extremo. en el mismo lado de un doble
o Sus propiedades dependen de la enlace.
longitud de la cadena y del grado de
insaturación:
 Menor longitud de la cadena y
mayor número de insaturaciones,
menor punto de fusión, por lo que
mayor fluidez.
 Mayor longitud de la cadena y
menor número de insaturaciones,
mayor punto de fusión, por lo que
menor fluidez.
A: Ácido elaídico (18:1Δ9trans)
o Se dividen en:
B: Ácido oleico (18:1Δ9cis)
Saturados:
 Presentan enlaces simples
- Esteroides:
 Son más resistentes
o Se construyen alrededor de un
 Forma: lineal
elemento característico de 4 anillos
 Dan rigidez a la membrana
o Son derivados del
Insaturados:
ciclopentanoperhidrofenantreno o
 Contienen 1 o más dobles enlaces
anillo esterano.
entre átomos de carbono.
o El principal es el siguiente:
 Son más fáciles de romper debido
Colesterol
a que los enlaces dobles son más
 Esterol de 27 átomos de carbono
débiles.
que se encuentra principalmente en
 Puede presentar enlaces de tipo:
las células animales.
| 15
 Consta de 4 anillos ácidos grasos localizados en la

hidrocarbonados con un grupo membrana de las células.
hidroxilo en un extremo, o Es constituida por un esqueleto de 20
 Carácter anfipático. átomos de carbono.
 Componente importante de las o Funciones:
membranas biológicas.  Pueden ser descritas como
 Precursor de las hormonas hormonas locales que actúan tanto
esteroideas, vitamina D, estradiol y de forma paracrina como de forma
ácidos biliares. autocrina.
 Regulador de la fluidez de la  Están asociadas a muchos
membrana. procesos fisiológicos (hambre,
 Si está en exceso causa rigidez. sueño, vigilia)
 Contraen el musculo liso.
 Intervienen en la respuesta
inflamatoria
o La PGE2 es una de las
prostaglandinas más
abundantemente.
Estructura química del colesterol. 2) Compuestos

- Acilglicéridos
- Terpenoides o Ésteres de ácidos grasos unidos al
o Grupo amplio de compuestos glicerol.
derivados del isopropeno. o Resultan de una reacción de
o Se encuentran en plantas y otros esterificación.
compuestos biológicos como las o Constituyen la forma de almacenaje de
vitaminas liposolubles. ácidos grasos para fines energéticos.
o Le dan olor y sabor a las frutas o El glicerol permite establecer tres
(aceites esenciales) enlaces esteres y según esto el
compuesto se denomina:
- Prostaglandinas  Monoacilglicérido: Cuando el
o La prostaglandina es un mensajero glicerol se encuentra unido a
químico que es sintetizado a partir de un solo ácido graso.
| 16
 Diacilglicérido: tiene unido dos a) Micelas:

ácidos grasos.  Es una capa de fosfolípidos en
 Triacilglicérido: cuando tiene forma circular.
unido tres ácidos grasos.  Tienen una parte hidrofóbica, que
a) Son abundantes en la está en el interior y otra hidrofílica
naturaleza. en su exterior, lo que le da la
b) Se sintetizan en hígado, ventaja de que pueden transportar
tejido adiposo, glándula moléculas insolubles en un medio
mamaria, riñón, intestino. acuoso.
c) Representan la forma de  Sin las micelas ninguna sustancia
reserva energética más insoluble en agua podría
eficaz transportarse a través de un
d) Moléculas productoras de solvente polar como el agua.
energía.  Ejemplos: jabones o detergentes y
las lipoproteínas
 Absorción intestinal de ácidos
grasos.
b) Bicapa lipídica:
A: Monoacilglicerol B: Diacilglicérido C: Triacilglicérido
 Es la estructura básica de
la membrana y constituye una
barrera relativamente
- Fosfolípidos
impermeable al agua. .
o Principal componente de las
 Mantiene a iones, proteínas y
membranas celulares.
otras moléculas compartimenta
o Se componen de dos ácidos grasos
das e impide su libre difusión.
unidos a un grupo polar de cabeza:
Grupo fosfato.
c) Liposomas
o Tienen la capacidad de crear
 Consiste en dos capas de fosfolípidos
moléculas organizadas en un ambiente
en forma circular.
acuoso:
 Son empleados en multitud de
tratamientos que requieran que un
| 17
compuesto viaje por el torrente Compuestos por ceramida (Compuesto

sanguíneo y tenga efecto en un tejido, formado por la esfingosina y un ácido graso
su liberación sea lenta o para su de cadena larga, unidos por enlace amida)
administración tópica. unido a un grupo fosfato o un aminoalcohol
o Se dividen en:
- Esfingolípidos
Fosfoglicéridos o glicerofosfolípidos: o Carecen de glicerol y contienen
esfingosina (la cual es
 Los dos ácidos grasos están
un aminoalcohol formado por 18 carbo
ligado a átomos de carbono del
nos, que forman una
glicerol como en los TAG.
cadena hidrocarbonada insaturada)
 Los ácidos grasos pueden ser
o Se dividen en:
diferentes entre sí y se designan
R1 Y R2 Esfingofosfolípidos
 El tercer carbono está ligado al
La más abundante es la esfingomielina
grupo fosfato que a su vez
frecuentemente está unido a otra  Es el único fosfolípido no glicérico
molécula polar pequeña como la de las membranas celulares.
serina, colina, inositol o  Contiene dos cadenas
etanolamina, formando: hidrocarbonadas unidas a un grupo
d) Fosfatidilserina polar de cabeza formado por
e) Fosfatidilcolina serina, colina o etanolamina, en
f) Fosfatidilinositol vez de glicerol.
g) Fosfatidiletanolamina  Deben su nombre a que se
 Son los principales constituyentes encuentran, fundamentalmente, en
lipídicos de las membranas. las células de Schwann que
 También actúan como precursores, constituyen las vainas de mielina
moléculas de señalización celular, que rodean y protegen el axón de
forman parte de las lipoproteínas, y las neuronas.
de la bilis. Esfingoglicolípidos
 Derivados de la ceramida
Fosfoesfingolípidos:
| 18
 Incorporan mono u oligosacáridos galactocerebrósidos (poseen una galactosa

unidos mediante enlaces glucosídicos unido a la esfingosina).
a la esfingosina.
AMINOÁCIDOS
 Además de desempeñar una función
estructural de las membranas  Estructura
plasmáticas, los esfingoglucolípidos - Es una molécula orgánica que posee
están implicados en: en su estructura molecular un grupo
a) El reconocimiento de las amino (-NH2) y un grupo carboxilo (-
superficies celulares COOH; ácido), ambos unidos a un
b) La especificidad de asociación carbono central denominado carbono α.
celular en los tejidos - Además, al carbono α se encuentra
c) La transmisión del impulso unido un grupo R o cadena lateral que
nervioso permite diferenciar un aminoácido de
 Especificidad del grupo sanguíneo otro, y un hidrógeno.
 Se dividen: - Los aminoácidos, presentan un
a) Cerebrósidos: carbono quiral (carbono α), por lo que
los α-aminoácidos presentan isomería
Se forman por la unión, mediante enlace
óptica, presentando dos formas
glucosídico, de una molécula de ceramida y
enantioméricas la D y la L.
un monosacárido, generalmente glucosa
(glucocerebrósidos) o galactosa
(galactocerebrósidos).
b) Gangliósidos:
Están caracterizados por la presencia

de oligosacáridos con grupos carboxilo
(ácidos siálicos o N-acetilneuramínico) y junto
Estructura química de un Aminoácido
con las sulfatidas, que contienen un grupo
 Tipos:
sulfato O-ligado en un residuo de glucosa o
- Aminoácidos no proteicos, que juegan
galactosa.
un papel determinante para el ser
c) Sulfátidos
humano y que tienen función propia,
Esteres sulfúricos de los cerebrósidos. por ejemplo el GABA, que es
Los más frecuentes son derivados de los neurotransmisor.
| 19
- Aminoácidos proteicos o canónicos: 20 - La Alanina, Valina, leucina e isoleucina

que forman parte de las proteínas. tienen cadenas laterales
hidrocarbonadas compuestas por hasta
Se agrupan de acuerdo a las propiedades de
sus cadenas laterales en 4 amplias cuatro átomos de carbono.
categorías: - La prolina tiene una cadena lateral
1. Aminoácidos no polares hidrocarbonada, siendo el único
aminoácido cuya cadena lateral se
encuentra ligada al nitrógeno.
- Cisteína y metionina contienen en sus
NOMBRE ABREVIACIÓN
cadenas laterales átomos de azufre.
Alanina Ala A
- Fenilalanina y triptófano tienen en sus
Cisteína Cys C cadenas laterales anillos aromáticos.
2. Aminoácidos polares
Fenilalanina Phe F
Glicina Gly G
NOMBRE ABREVIACIÓN
Isoleucina Lle I
Asparragina Asn N
Leucina Leu L
Glutamina Gln Q
Metionina Met M
Tirosina Tyr Y
Prolina Pro p
Treonina Thr T
Triptófano Trp W
Serina Ser S
Valina Val V
- Son 10 aminoácidos que tienen

cadenas laterales no polares, que no i. Tienen cadenas laterales sin
interaccionan con el agua, por ende en carga, pero polares.
medio acuoso se encuentran ubicados ii. Serina, treonina, y tirosina
en el interior de la proteína para evitar tienen en sus cadenas laterales
el contacto. grupos hidroxilos
- La glicina posee una cadena lateral que iii. Asparragina y glutamina tienen
consiste en un solo átomo de grupos polares amida.
hidrogeno
| 20
3. Aminoácidos básicos (Polares

con carga positiva): Isoleucina
Lisina, arginina e histidina tienen cadenas
Leucina
laterales cargadas positivamente.
Lisina
NOMBRE ABREVIACION
Metionina
Arginina Arg R
Fenilalanina
Histidina His H
Treonina
Lisina Lys K
Triptófano
Valina
4. Aminoácidos ácidos (polares con
Histidina
carga negativa)
NOMBRE ABREVIACIÓN
 Enlace peptídico:
Ácido aspártico Asp D - Enlace covalente que se forma entre
el grupo amino (–NH2) de un
Ácido glutámico Glu E
aminoácido y el grupo carboxilo (–
COOH) de otro aminoácido.
- El ácido aspártico y el ácido glutámico
poseen cadenas laterales ácidas que
PROTEÍNAS
terminan en grupos carboxilos. Polímeros compuestos por monómeros de
También se pueden clasificar en aminoácidos, cuya responsabilidad básica es
aminoácidos esenciales y no ejecutar las tareas dirigidas por la información
esenciales, siendo los primeros aquellos genética.
que no son sintetizados en nuestro  Características

organismo, y por ende es necesario que - Polímeros de 20 aminoácidos distintos
los obtengamos a través de la dieta, y unidos mediante enlaces peptídicos.
estos son: - Contienen C, H, O y N, y la mayoría
contiene S, P, Fe, Zn y Cu.
| 21
- Son moléculas abundantes en el  Clasificación

organismo, el 50% del peso seco de
Según su composición:
los seres vivos son las proteínas.
- Son las más variadas de todas las 1. Simples o holoproteínas:
macromoléculas - Están formadas únicamente por

cadenas polipeptídicas, ya que en su
 Funciones hidrólisis (descomposición en
- Enzimática: necesarias para la subunidades) sólo se obtienen
realización eficiente de las funciones aminoácidos.
biológicas. - A su vez se dividen en:

o Fibrosas:
- Estructural: sirven como  Formadas por cadenas
componentes estructurales de las polipeptídicas ordenadas de modo
células. paralelo a lo largo de un eje

formando fibras.
- Transporte: actúan en el transporte y  Son resistentes e insolubles en
almacenamiento de pequeñas agua.
moléculas.  Función principal es la de

proporcionar soporte mecánico a
- Señalización celular: actúan como las células y los organismos.
receptores de membrana, y también  No se degradan tan fácilmente
participan en el mecanismo de como lo hacen las proteínas
neurotransmisión. globulares.
- Proporciona una defensa frente a a) Colágeno:

infecciones. - El cual tiene numerosos residuos de
prolina e hidroxiprolina que impiden
- Reguladora: regulan la actividad la formación de estructuras α o β.
celular o fisiológica. - El colágeno es la principal proteína
fibrosa de los tejidos conectivos de
- Función contráctil, desempeñada por los animales.
proteínas componentes del - Las fibras de colágeno forman los
citoesqueleto celular. tendones, el pellejo de los animales,
| 22
la córnea, huesos y otros tejidos b) Histonas

conjuntivos. - Asociadas al ADN, forman parte de la
cromatina y desempeñan un papel
b) Queratina muy importante en los procesos de
- Las queratinas son proteínas regulación génica,
insolubles en agua presentes en los
animales: el pelo, la piel, la lana, las 2. Conjugadas o heteroproteínas
escamas, las plumas, las pezuñas,
Además de tener la secuencia de
los cuernos y la seda.
aminoácidos, tienen también otro tipo de
residuo químico (grupo prostético).
c) Elastina
- Es una proteína flexible localizada en a) Fosfoproteínas:
el tejido conjuntivo de estructuras y - Su grupo prostético es el ácido
órganos que son elásticos, como la ortofosfórico.
piel, los ligamentos o los vasos - Ejemplos de fosfoproteínas son la
sanguíneos. vitelina, y la caseína.
- Las redes de elastina se alargan o se

doblan cuando son sometidas a un b) Glicoproteínas:
esfuerzo. - Su grupo prostético está formado por

un glúcido.
o Globulares - Las gammaglobulinas con función de
 Son cadenas polipeptídicas anticuerpos son, así mismo,
plegadas formado esferas glicoproteínas
 Solubles en agua. - También se incluyen en este grupo el
 Desempeñan funciones móviles mucus protector, algunas hormonas y
y dinámicas en la celula el líquido sinovial.
 La casi totalidad de las enzimas

y anticuerpos son globulares c) Lipoproteínas
 Ejemplo: - Su grupo prostético es un lípido.
a) Albúmina - Aparecen en las paredes bacterianas y
- Posee funciones de transporte o de en el plasma sanguíneo.
reserva de aminoácidos.
| 23
Según el número de aminoácidos: o Hélices alfa: los enlaces de H+

se forman entre grupo CO y
1. Oligopéptidos:2-20 aminoácidos
NH de enlaces peptídicos
2. Polipéptidos:21-50 aminoácidos
separados por 4 residuos de
3. Proteínas propiamente dichas:
aminoácidos.
más de 51 aminoácidos
o Hoja o lámina plegada beta: se

 Estructura de las proteínas
forma cuando dos partes de
Las proteínas presentan 4 niveles de una cadena polipeptídica se
organización estructural: encuentra una junto a otra con
1. Estructura primaria: enlaces de hidrógenos entre
- Viene determinada por la secuencia de ellas.
aminoácidos en la cadena proteica,

es decir, el número de aminoácidos
presentes y el orden en que están
enlazados.
Estructura secundaria de una proteína
3. Estructura terciaria:
Estructura primaria de una proteína
- Es el modo en el que las cadenas
polipeptídicas se pliegan, como
2. Estructura secundaria: resultado de las interacciones entre
- Es el ordenamiento regular que la las cadenas laterales de los
cadena polipeptídica adopta en aminoácidos que conforman la
determinadas regiones de la proteína.
molécula, gracias a la formación de - Esta estructura se encuentra
enlaces o puentes de hidrógeno estabilizada por:
entre los grupos CO y NH del enlace o Enlaces covalentes entre los
peptídico. residuos de cisteína
| 24
o Interacciones iónicas
o Puentes de hidrógeno
o Interacciones de Van der
Waals
o El efecto hidrofóbico.
Hemoglobina, un ejemplo de proteína

tetramérica.
 Desnaturalización y renaturalización
de las proteínas:
- Desnaturalización
Estructura terciaria de una proteína o Consiste en el desplegamiento de la
cadena polipeptídica, rompiéndose
NOTA: A partir de esta estructura se todas las uniones que corresponden a
forman proteínas. las estructuras secundarias y
superiores.
o La proteína pierde su actividad
biológica característica.
4. Estructura cuaternaria: o Pueden desnaturalizarse por cambios
- Se refiere a la ordenación espacial de en la temperatura y pH.
las subunidades polipeptídicas que o Pueden ser de dos tipos: reversible e
componen a las proteínas que irreversible.
poseen más de una cadena.
- Son llamadas proteínas multiméricas u - Renaturalización
oligoméricas.
Cuando las condiciones en relación a la
temperatura y pH son normalizadas, algunas
moléculas proteicas desnaturalizadas pueden
recuperar su forma característica.
| 25
BIBLIOGRAFÍA
Cooper, G & Hausman, R (2011) La

Célula (5ª ed.) España: Marbán.
|1
|2

Capítulo 3: ENZIMAS
MUSEO ANATÓMICO “DRA. GLADYS DE CABALLERO”
Universidad Centroccidental “Lisandro Alvarado”
Miembro preparador docente: Cuenca Kira.
Diseño de portada: Boschetti María y Camacaro María.
Edición General: Cuenca Kira y Hernández Carmelo.
2020
|3

Capítulo 3: ENZIMAS


3. ENZIMAS
|4
1. Conceptos básicos reacciones muy por encima de un millón

de veces, de tal forma que reacciones
1) Reacción química: Es un proceso por
que tardarían años en la ausencia de
el cual una o más sustancias,
catálisis pueden ocurrir en fracciones de
llamadas reactivos, se transforman en
segundos si son catalizadas por la
otra u otras sustancias con propiedades
enzima adecuada.
diferentes, llamadas productos. En una
reacción química, los enlaces entre los
2. Principios de la catálisis
átomos que forman los reactivos se
enzimática
rompen y se reorganizan de otro modo,
La enzima actúa sobre una molécula
formando nuevos enlaces y dando lugar
denominada sustrato (S) la cual se
a una o más sustancias diferentes a las
convierte en producto (P) como resultado
iniciales.
de la reacción: S↔P. La doble flecha
2) Catálisis: Es el proceso por el cual se
representa que la reacción se encuentra en
aumenta la velocidad de una reacción
equilibrio, es decir, que puede ir en un
química, debido a la participación de
sentido directo S→ P o inverso S←P. En
una sustancia llamada catalizador.
presencia de la enzima apropiada, la
3) Catalizadores: Son sustancias que
conversión de sustrato a producto se
aceleran las reacciones químicas y
acelera y el equilibrio entre S y P no se
experimentan cambios físicos durante
altera S P.
ella pero regresan a su estado original
cuando la reacción termina. 3. Propiedades de las enzimas
4) Sustrato: Es una molécula o
1) Se requieren en pequeñas cantidades.
reactivo sobre la cual actúa una enzima
2) No se alteran de forma irreversible o
para convertirlo en producto.
permanente durante la reacción, por lo
5) Enzimas: Son catalizadores proteínicos
que cada molécula de enzima puede
que incrementan la velocidad de
participar varias veces en reacciones
prácticamente todas las reacciones
individuales.
químicas dentro de la célula. Las
enzimas aceleran la velocidad de éstas
|5
3) No tienen efecto en la termodinámica de
la reacción. Se refiere a que las
enzimas no aportan energía para una
reacción química, por lo que no
determinan si una reacción tiene
características termodinámicas
favorables o desfavorables.
Fig 1. Código numérico de la enzima glucoquinasa
4. Nomenclatura de las enzimas 5. Aspectos estructurales de las

 Nombre común: Se le añade el sufijo enzimas
“asa” al nombre del sustrato sobre el
5.1 Sitio activo
que actúan las enzimas.
Ejemplo: Las enzimas que hidrolizan el
Surco o hendidura de la enzima donde se une
almidón son amilasas, las que
el sustrato y sufre una reacción química. Está
hidrolizan lípidos son lipasas, las que
compuesto de aminoácidos de diferentes
hidrolizan proteínas son proteasas.
partes de la cadena polipeptídica.
Los sustratos en la mayoría de los casos se
 Nombres sistemáticos: Consta de 3
ligan inicialmente al sitio activo mediante
partes
interacciones no covalentes (incluyen enlaces
 Nombre del o de los sustratos
de hidrógeno, iónicos, e interacciones
 Tipo de reacción catalizada
hidrófobas) aunque se conocen muchos
 Terminación “asa”
ejemplos en los que se forma un enlace
Ejemplo: ADN polimerasa, alcohol covalente transitorio.
deshidrogenasa.
5.1.1 Sitio de unión al sustrato
 Código numérico: Número clave
Formado por residuos de aminoácidos que
propio de cada enzima que caracteriza
están en contacto directo con el sustrato y
el tipo de reacción catalizada.
forman enlaces temporales con el mismo.
Ejemplo: E.C. 2.7.1.1 Glucoquinasa
El grupo de aminoácidos que se encuentra en
el sitio de unión, así como la posición que
estos tienen en el espacio tridimensional, le
dan un tamaño, forma y comportamiento
químico muy específicos donde solo puede
|6
entrar un determinado sustrato (ni siquiera sus 5.1.4 Apoenzima
isómeros) es lo que determina la Es la parte protéica y catalíticamente inactiva
ESPECIFICIDAD de las enzimas. de una enzima. Está desprovista de cofactores
y coenzimas.
5.1.2 Sitio catalítico
Es el sitio encargado de la acción biológica de 5.4 Cofactor
la enzima. Formado por los residuos de Es una molécula no proteínica, inorgánica
aminoácidos directamente implicados en el como los metales (hierro, cobre, Cinc)
mecanismo de la reacción, es decir, implicados necesaria para la actividad enzimática. Se une
en la transformación de sustrato a producto. por enlaces no covalentes.
5.5 Coenzima
Molécula de bajo peso molecular que se
clasifica como un tipo de cofactor orgánico que
se puede unir a la apoenzima de forma no
covalente y transportan grupos químicos de
Fig 2. Sitio activo de una enzima

una reacción a otra.
5.1.3 Sitio alostérico Ejemplo: Nicotinamín Adenín Dinucleótido

(NAD+), que funciona como transportador de
Sitio físicamente diferente al sitio activo
electrones en reacciones de óxido-reducción.
presente en las enzimas regulatorias o
El NAD+ puede aceptar un ión de hidrógeno
enzimas alostéricas, que son enzimas cuya
(H+) y dos electrones (e-) de un sustrato,
actividad en el sitio activo puede ser modulada
formando NADH. El NADH puede entonces
por la presencia de moduladores en el sitio
donar estos electrones a un segundo sustrato,
alostérico denominados efectores
reformando el NAD+. De este modo, el NAD+
alostéricos.
transfiere electrones del primer sustrato (que
se oxida) al segundo (que se reduce).
Ciertas vitaminas son constituyente esenciales

de coenzimas, por ejemplo:
Fig 3. Sitio alostérico de una enzima

|7
sustratos relacionados estructuralmente
entre sí.
 Absoluta: Cuando la enzima solo
puede actuar sobre un tipo de
sustrato.
 Relativa: La enzima actúa sobre
Fig 4. Tabla de coenzimas con sus vitaminas relacionadas varios sustratos que poseen
estructura muy similar.
5.6 Grupos prostéticos
 De función: La enzima solo cataliza una
Denota a las coenzimas unidas de forma
de las posibles reacciones en las que esté
covalente a la enzima.
implicado el sustrato.
Ejemplo: El oxígeno transportado por la Un mismo compuesto puede ser sustrato
hemoglobina está unido al hemo, un grupo
de varias enzimas que lo modifican de
prostético de estas proteínas.
manera diferente. La especificidad en este
caso no depende de la unión enzima-
5.7 Holoenzima sustrato sino de la acción catalítica de la
enzima.
Es una entidad completamente catalítica
compuesta por una apoezima + cofactor o 7. Complejo enzima sustrato
coenzima.
Es la relación física entre una enzima y su(s)
sustrato(s), durante la cual ocurre la catálisis
de la reacción.
El sustrato se une a una región específica de
la enzima, denominada sitio activo. Mientras
está ligado al sitio activo, el sustrato se
convierte en el producto de la reacción, que
Fig 5. Conformación de una enzima
entonces se separa de la enzima. La reacción
catalizada por enzimas puede por tanto
6. Especificidad enzimática
escribirse como sigue: S+E ↔E-S↔E-I*↔E-
 De sustrato: Las enzimas tienen un alto P↔E+P
grado de especificidad hacia el sustrato.
Pueden catalizar la transformación de
apenas un sustrato o una familia de
|8
8. Modelos de interacción enzima-
sustrato
8.1 Modelo llave y cerradura (Propuesto por

Emil Fischer en 1894) Fig 7. Modelo ajuste inducido
Es un modelo de interacción enzima-sustrato 9. ¿Cómo actúan las enzimas?

en la que el sustrato encaja perfectamente en
En presencia de la enzima apropiada la
el sitio activo de la enzima. Refiriéndose a la
conversión de S a P se acelera, pero el
enzima como a una especie de cerradura y al
equilibrio entre S y P no se altera, por lo tanto
sustrato como a una llave que encaja de forma
la enzima debería acelerar de igual manera las
perfecta en dicha cerradura. Una llave sólo
reacciones directa e inversa.
funciona en su cerradura y no en otras
Para que una reacción se produzca, el sustrato
cerraduras.
debe convertirse primero a un estado de
mayor energía denominado estado de
transición.
 Estado de transición o complejo

activado: Es un estado de máxima energía
por el cual debe pasar una sustancia
química para transformarse en otra.
Fig 6. Modelo llave cerradura
En otras palabras, estado por el cual debe
8.2 Modelo ajuste inducido (Propuesto por pasar el sustrato para convertirse en
Daniel Koshland 1958) producto.
El sitio activo adopta una conformación

idónea solo en presencia del sustrato, lo  Energía de activación: Es la energía
que desencadena un cambio cinética mínima necesaria para que un
conformacional que da lugar a la formación reactivo alcance el estado de transición y
de producto. por ende realice una reacción química.
Constituye una barrera para el desarrollo
de la reacción, limitando su velocidad.
|9
Las enzimas actúan reduciendo la energía de 4. Formación del complejo E-P
activación, incrementando de este modo la 5. Disociación del complejo E-P
velocidad de la reacción. El incremento de
velocidad es el mismo tanto en la dirección 10. Cinética enzimática
directa como en la inversa, ya que ambas
 Cinética: Estudia la velocidad con la que
deben pasar por el mismo estado de
una enzima cataliza una reacción.
transición. Conforme el estado de transición se
convierte en productos, la afinidad de la Leonor Michaelis y Maud Menten publicaron la
enzima por las moléculas unidas disminuye y relación matemática entre la concentración del
se liberan los productos. sustrato y la velocidad de las reacciones
enzimáticas, medidas por la cantidad de
producto formado (o de sustrato consumido)
en un tiempo determinado.
 Velocidad de una reacción: Cantidad de

material inicial (sustrato) transformado en
compuesto final (producto) por unidad de
tiempo.
 Velocidad inicial: Es la velocidad medida
antes de que se haya formado suficiente
producto que permita que la reacción
inversa ocurra.
Fig 8. Diagrama energético para reacciones catalizadas y no La velocidad de reacción inicial varía mucho
catalizadas
con la concentración de sustrato.
La catálisis general enzimática se lleva a
Con concentraciones bajas de sustrato: Las
cabo en 5 etapas:
moléculas de enzima se someten a
1. Reconocimiento de la enzima por su
relativamente pocas colisiones con el sustrato
sustrato E+S
en un tiempo determinado. Por consiguiente, la
2. Formación del complejo enzima-
enzima tiene “tiempo ocioso”; es decir, las
sustrato E-S
moléculas de sustrato limitan la velocidad.
3. Transformación del complejo E-S en
complejo E-I (complejo intermedio o de
Con altas concentraciones de sustrato: Las
transición)
enzimas chocan con las moléculas de sustrato
| 10
a mayor velocidad. Por tanto, en presencia de
concentraciones altas de sustrato, las
moléculas individuales de enzima trabajan a su
máxima capacidad; o sea, las moléculas de
enzima limitan la velocidad.
Por tanto, mientras mayor sea la concentración

de sustrato, la enzima se aproxima a su estado
de saturación.
 Velocidad máxima (Vmáx): Velocidad que Fig 9. Relación entre la concentración de sustrato y la velocidad de la reacción
se alcanza cuando toda la enzima se
encuentra unida al sustrato, es decir, se
Autoevaluación Responda brevemente
las siguientes preguntas
encuentra saturada y trabajando a su 1) ¿Qué es una enzima?

máxima capacidad. 2) Menciona 2 propiedades de las enzimas
3) ¿Cómo se denomina el sitio diferente al
 Km o constante de Michaelis: Es la
sitio activo de una enzima?
concentración de sustrato a la que la
4) ¿Qué estudia la cinética enzimática?
velocidad de la reacción es la mitad de la 5) Verdadero o falso: A menor valor de Km
Vmáx. mayor afinidad
En la mayor parte de los casos, el valor de 11. Regulación enzimática

Km proporciona una medida de la afinidad
de la enzima por el sustrato. Mientras más La regulación enzimática es necesaria para
alta sea la Km, es más alta la que la enzima sea capaz de acelerar las
concentración de sustrato que se requiere reacciones donde se sintetice exactamente lo
para alcanzar la mitad de la Vmáx y por que necesita la célula y no se desperdicie
tanto, menor será la afinidad de la enzima energía en la síntesis de producto innecesario.
por ese sustrato. 11.1 Regulación por retroalimentación

Simplificándolo es una relación El producto de una vía metabólica modifica la
inversamente proporcional: a menor valor actividad de las enzimas implicadas en su
de Km mayor afinidad, a mayor valor de síntesis.
Km menor afinidad.  Negativa: El producto final de la vía
metabólica, inhibe la actividad de la
enzima implicada en su síntesis es decir, la
enzima catalizadora de la reacción.
| 11
Ejemplo: El aminoácido isoleucina se 11.2 Inhibidores
sintetiza, a través de una serie de Son moléculas capaces de unirse a una
reacciones comenzando por el aminoácido enzima y producir su inactivación.
treonina. El primer paso de la vía esta
catalizado por la enzima treonina 11.2.1 Reversibles
desaminasa que es inhibida por la Cuando un inhibidor puede disociarse debido a
isoleucina (el producto final de la vía). que se une a la enzima mediante enlaces no
Cuando se ha sintetizado la cantidad de covalentes.
isoleucina adecuada en la célula, inhibe a “Complejo enzima-inhibidor disociable”.
la treonina desaminasa bloqueando una  Competitiva: Ocurre en el sitio activo de la
síntesis mayor de isoleucina. enzima, la estructura del inhibidor se
asemeja a la del sustrato por lo tanto puede
combinarse reversiblemente con la enzima
formando un complejo enzima-inhibidor en
lugar de un complejo enzima-sustrato. El
inhibidor compite con el sustrato por el sitio
activo sobre la superficie de la enzima.
La inhibición competitiva puede ser
rebasada si la proporción sustrato/inhibidor
es lo bastante grande, es decir, si el
Fig 10. Retroalimentación negativa
número de colisiones entre la enzima y un
 Positiva: El producto final de la vía
inhibidor se vuelve insignificante en
metabólica, estimula aún más a la enzima
relación con las colisiones que se producen
catalizadora de la reacción.
entre la enzima y su sustrato, el efecto del
inhibidor se vuelve mínimo.
Fig 11. Retroalimentación positiva

| 12
 Acompetitiva:
El inhibidor solo se une al complejo enzima
sustrato y no a la enzima libre.
La adición de más sustrato a la reacción
ocasiona un aumento de la velocidad de la
misma pero no hasta el grado que se observa
en las reacciones sin inhibir.
Fig 12. Comparación entre una reacción sin inhibidor y una inhibida La inhibición acompetitiva suele observarse en
por un inhibidor competitivo
las reacciones en las que las enzimas unen
más de un sustrato.
 No competitiva: En este caso no hay
competencia entre el sustrato y el inhibidor.
El inhibidor no muestra analogía estructural
con respecto al sustrato y puede asumirse
que se une a un espacio diferente en la
enzima. Puede haber la formación de un
complejo enzima-inhibidor-sustrato que
logra descomponerse para formar el
Fig 14. Comparación entre una reacción sin inhibidor y una inhibida
producto, por lo tanto la reacción se retrasa por un inhibidor acompetitivo
pero no se impide.
En este caso el aumento de la 11.2.2 Irreversibles
concentración del sustrato no puede Cuando un inhibidor se une a la enzima de
contrarrestarlo. forma covalente, con frecuencia a una cadena
lateral del sitio activo. “Complejo enzima-
inhibidor no disociable”.
Producen un cambio permanente en la enzima
con deterioro definitivo de su capacidad
catalítica.
 Inhibidores irreversibles suicidas:

Son inhibidores activados
Fig 13. Comparación entre una reacción sin inhibidor y una inhibida
enzimáticamente. Se trata de moléculas
por un inhibidor no competitivo
| 13
que se unen al sitio activo de manera
específica, igual que el sustrato o los 11.4 Regulación alostérica
inhibidores competitivos. Las enzimas alostéricas son aquellas que
Una vez unidos al sitio activo, la enzima además del sitio activo presentan un lugar
transforma la molécula en una especie distinto llamado sitio alostérico donde se unen
química muy reactiva, que modifica específicamente sus moduladores, llamados
covalentemente a la enzima, inactivándola. efectores alostéricos.
Tiene por tanto la especificidad del
inhibidor competitivo y la potencia de los  Efectores alostéricos
inhibidores irreversibles.  Homotrópico: El sustrato de la enzima
cumple funciones de modulador o
11.3 Regulación por modificaciones efector alostérico. Generalmente
químicas presenta cooperatividad positiva.
 Fosforilación y desfosforilación: Es un  Heterotrópico: El efector o modulador

mecanismo especialmente frecuente para alostérico es diferente al sustrato de la
regular la actividad enzimática; la adición enzima, puede ser positivo o negativo.
de grupos fosfato puede estimular o inhibir - Positivos o activadores: Favorecen la
las actividades de muchas enzimas conformación activa de la enzima.
diferentes. - Negativos o inhibidores: Promueven
La forma activa puede ser la fosforilada o la que las enzimas alostéricas adopten su
no fosforilada, eso depende de la enzima. conformación inactiva.
En las enzimas de las vías degradativas del
metabolismo, la forma fosforilada es más
activa que la no fosforilada, mientras que
en las vías biosintéticas ocurre lo contrario.
Fig 16. Inhibición y activación alostérica
Fig 15. Fosforilación y desfosforilación de proteínas

| 14
La modulación alostérica ilustra la relación 12. Factores que afectan la
íntima entre la estructura molecular y la actividad enzimática
función. Los cambios muy pequeños en la
estructura de la enzima inducidos por el
modulador alostérico pueden producir cambios 12.1 Concentración de sustrato
notables en la actividad enzimática. Aumentar la concentración de sustrato también

aumenta la velocidad de reacción debido a que
11.5 Compartimentalización hay mayor probabilidad de que se encuentre la
Las enzimas se encuentran en enzima con su sustrato.
compartimentos (se guardan en una parte Una vez que todas las enzimas están unidas a
específica de la célula donde ejercen su su sustrato, cualquier aumento del mismo no
función), por ejemplo, en un organelo en tendrá efecto alguno en la velocidad de
particular. reacción, ya que las enzimas disponibles
La compartimentalización significa que las estarán saturadas y trabajando a su máxima

capacidad.
capacidad.
enzimas que son necesarias para procesos
específicos se pueden conservar en los
lugares donde actúan, lo que asegura que
encuentran listos sus sustratos, no dañan la
célula y tienen el microambiente necesario
para funcionar bien.
Ejemplo: Las enzimas digestivas del lisosoma
funcionan mejor a un pH alrededor de 5.0 que
se encuentra en el interior ácido del lisosoma,
pero no en el citosol que tiene un pH de
unos 7.2. Las enzimas del lisosoma tienen
Fig 17. Efecto de la concentración de sustrato sobre la actividad
baja actividad al pH del citosol, lo que podría enzimática
servir de "garantía" para la célula de que

12.2 Concentración de enzima
incluso si el lisosoma se rompe y derrama sus
La cantidad de enzimas se modifica por
enzimas, estas no comenzarán a digerir la
degradación o por síntesis de las mismas pero
célula porque ya no tendrán el pH adecuado
ambos mecanismos son lentos. Aumentar la
para funcionar.
concentración de la enzima acelera la
reacción, siempre que se disponga de sustrato
al cual unirse.
| 15
12.4 pH
Cuando se mide la actividad enzimática a
diversos pH, la actividad optima generalmente
de observa entre los valores de 5.0 y 9.0 sin
embargo, varias enzimas por ejemplo la
pepsina es activada a valores de pH bien
alejados de estos límites.
La forma de la curva del pH óptimo está
Fig 18. Efecto de la concentración de enzima
determinada por:
 Desnaturalización de la enzima a valores
de pH altos o bajos.
 Alteraciones en el estado de carga de la
12.3 Temperatura
enzima y/o el sustrato: Para la enzima los
Por lo general, un aumento de temperatura
cambios de carga pueden afectar la
favorece la reacción, ya que aumenta la
actividad ya sea cambiando la estructura o
energía cinética de los reactantes y con ella se
la carga de un residuo que funciona para
facilita la interacción enzima-sustrato.
ligar un sustrato o está implicado en la
Después de la temperatura óptima que es
catálisis.
propia de cada enzima, se comienza a
producir la desnaturalización protéica y la
enzima pierde su actividad catalítica.
Fig 20. Efecto del pH en la actividad de la enzima
13. Clasificación de las enzimas

según el tipo de reacción que
cataliza
Las enzimas se clasifican de acuerdo al tipo de

Fig 19. Efecto de la temperatura en la actividad de la enzima
reacción que catalizan, en seis grupos:
| 16
13.6 Ligasas (E.C.6)

13.1 Oxidoreductasas (E.C.1)
Catalizan la formación de un enlace entre dos
Catalizan reacciones de óxido-reducción, entre
moléculas, utilizando la energía procedente del
las subclases de este grupo se encuentran
ATP.
deshidrogenasas, oxidasas, reductasas y
peroxidasas. Catalizan reacciones de 14. ¿Cuál es la importancia medica
transferencia de hidrógeno (H) o electrones de las enzimas y para qué sirve
(e-) de un sustrato a otro.
este conocimiento?
13.2 Transferasas (E.C.2)  La enzimología diagnóstica es el área

Catalizan la transferencia de un grupo químico de la medicina que utiliza las enzimas
(excepto el hidrógeno), de una molécula a otra. como auxiliares del diagnóstico y el
Entre los grupos que transfiere tenemos: tratamiento.
amino, carboxilo, carbonilo, metilo, fosforilo y  Las enzimas plasmáticas funcionales
acilo. Las quinasas representan un grupo se encuentran en la sangre en
especializado que transfiere grupos fosfato. concentraciones equivalentes o mayor
que en los tejidos. Las enzimas
13.3 Hidrolasas (E.C.3) plasmáticas no funcionales no llevan
Catalizan la ruptura hidrolítica de uniones C-O, a cabo ninguna función conocida en la
C-N, C-C, etc., adicionando una molécula de sangre, sus sustratos con frecuencia no
agua. se encuentran en el plasma y las
propias enzimas se encuentran en la
13.4 Liasas (E.C.4) sangre de personas sanas en valores
Rompen enlaces por mecanismos distintos a la hasta 1 millón de veces menos que en
hidrolisis o la oxidación. Rompen dobles los tejidos. Su presencia en el plasma
enlaces adicionando átomos o forman dobles en cifras mayores que los valores
enlaces removiendo átomos. Las normales sugiere una velocidad
descarboxilasas y aldolasas son ejemplos de aumentada de destrucción tisular. La
liasas. medición de los valores de enzimas
plasmáticas no funcionales representa
13.5 Isomerasas (E.C.5) para el medico una prueba valiosa de
Catalizan reacciones de interconversión de diagnóstico y pronóstico clínico.
isómeros.
| 17
 La mayor parte de los medicamentos
actúan por alteración de las reacciones Bibliografía
catalizadas por enzimas. Muchos de
estos compuestos se asemejan al  Geoffrey M. Cooper & Robert E. Hausman
(2010). La célula. 5º Edición. Edit MARBÁN
sustrato natural y por esto actúan como
inhibidores competitivos de la actividad  Gerald Karp (2011). Biología celular y
enzimática. La comprensión de gran molecular. 6º Edición. Edit McGrawHill
parte de la farmacología y la toxicología

depende del estudio profundo de los
fundamentos de la inhibición
enzimática.
Autoevaluación Responda brevemente

las siguientes preguntas
6) Tipo de retroalimentación donde el producto

final de la vía metabólica, estimula aún más a
la enzima catalizadora de la reacción
7) ¿Qué tipo de regulación es la fosforilación y
desfosforilación?
8) Verdadero o falso: En la inhibición no
competitiva el inhibidor muestra analogía
estructural con respecto al sustrato
9) Menciona 2 factores que afectan la actividad
enzimática
10) Enzimas que catalizan la transferencia de un
grupo químico (excepto el hidrógeno), de una
molécula a otra.
| 18
Respuestas de la
7) ¿Qué tipo de regulación es la
fosforilación y desfosforilación? R=
autoevaluación
1) ¿Qué es una enzima? R= Catalizador
Regulación por modificaciones químicas
8) Verdadero o falso: En la inhibición no
competitiva el inhibidor muestra
proteínico que incrementa la velocidad de analogía estructural con respecto al
prácticamente todas las reacciones sustrato. R= Falso
químicas dentro de la célula.
9) Menciona 2 factores que afectan la

2) Menciona 2 propiedades de las actividad enzimática. R= pH y
enzimas temperatura
R=
- Se requieren en pequeñas cantidades.
- No se alteran de forma irreversible o 10) Enzimas que catalizan la transferencia
permanente durante la reacción. de un grupo químico (excepto el
hidrógeno), de una molécula a otra. R=
3) ¿Cómo se denomina el sitio diferente al Transferasas
sitio activo de una enzima? R= Sitio
alostérico
4) ¿Qué estudia la cinética enzimática?

R= Estudia la velocidad con la que una
enzima cataliza una reacción.
5) Verdadero o falso: A menor valor de

Km mayor afinidad. R= Verdadero
6) Tipo de retroalimentación donde el

producto final de la vía metabólica,
estimula aún más a la enzima
catalizadora de la reacción. R=
Retroalimentación positiva
1
2

Capítulo 4: NÚCLEO INTERFÁSICO
Miembro preparador docente: Serrano María.
Edición General: Serrano María y Cuenca Kira.
2020
3

Capítulo 4: Núcleo Interfásico
El presente material constituye una guía de ayuda para el estudio de los procesos que se
desarrollan en los seres vivos desde el punto de vista celular y molecular, permitiendo entender
posteriormente los fenómenos que se expresan a nivel clínico, dirigidos a estudiantes de Biología
Celular y Molecular del Decanato de Ciencias de la Salud- UCLA y participantes del curso de Biología
celular y molecular.
Dispone de textos, cuadros, figuras y esquemas, recopiladas de diversas fuentes bibliográficas,

que facilitan la comprensión de los aspectos relacionados con la Biología celular y molecular de
manera sencilla y concisa. Al ser una guía, revela los aspectos más resaltantes de cada tema, por lo
cual debe ser complementado con la información proporcionada por libros de texto de Biología Celular
y Molecular.
Este material es realizado sin fines de lucro y publicado en la plataforma Google Classroom para
su consulta.
4. NÚCLEO INTERFÁSICO 4
Definiciones
El núcleo es la organela más voluminosa y la El núcleo interfásico puede observarse en las
estructura que marca la principal diferencia células eucariotas gracias al microscopio óptico
entre las células eucariotas y las procariotas. y clasificarse de acuerdo a varios aspectos:
En las células procariotas la información • Forma: La forma del núcleo al igual que la
genética está organizada en una región célula es de tipo tridimensional, por lo tanto,
denominada nucleoide, estas no cuentan con va a variar dependiendo de la configuración
un armazón nuclear como las células de la célula que se esté observando.
Podemos encontrar núcleos: esféricos,
cúbicos, arriñonados o bilobulados.
eucariotas.
Fig. 1. Dibujo esquemático de una célula eucariota y una
célula procariota.
El núcleo juega un papel muy importante en la

división celular, ya que en su interior se
Fig. 3. Visualización al microscopio óptico de diferentes
encuentra el genoma humano, por lo que sirve formas nucleares.
para almacenar la información genética y como
punto de control celular. • Ubicación: La ubicación generalmente es
central, pero puede variar dependiendo
Es importante destacar que existe un lapso de de la polarización de la célula y la
tiempo en el que la célula no se encuentra en influencia de otros componentes. Puede
división y se denomina interfase. Por lo tanto, ubicarse central, periférico o apical.
cuando hablamos del núcleo interfásico nos Ejemplo: La ubicación del núcleo en un
referimos a la características y estructura del adipocito es periférica, y se debe a la
mismo en etapa no divisible. presencia de una gota de lípidos central
que obliga a las organelas a ubicarse en
la periferia.
Fig. 2. Dibujo esquemático del ciclo celular. Las fases G1, Fig. 4. Dibujo esquemático de un adipocito donde se
S y G2 conforman la interfase, la fase M conforma la visualiza el núcleo periférico.
mitosis o fase divisible de la célula.
5
• Tamaño y cantidad: Es de tipo variable. 2.1 Componentes de la envoltura nuclear

La clasificación en este caso se realiza
utilizando un prefijo que indique la • Membrana nuclear externa: Se continua
cantidad de núcleos presentes en la con la membrana del Retículo
célula que se observa. Ejemplo: Endoplasmático Rugoso, es por esa
mononuclear (1 núcleo), binuclear (2 razón que presenta ribosomas
núcleos), polinuclear (3 o más núcleos). adheridos a su superficie y son
funcionalmente similares, sin embargo,
1. Características estructurales y la membrana nuclear presenta una
composición proteica ligeramente
funcionales diferente a la del retículo
Como se mencionó anteriormente, el núcleo endoplasmático rugoso.
contiene el genoma humano, por lo tanto, en • Membrana nuclear interna: Esta
su interior se llevan a cabo todos los membrana es la que define el núcleo en
procesos de la expresión génica como lo sí. Presenta proteínas únicas y
son la replicación del ADN, la transcripción y específicas que permiten la unión a la
lámina nuclear y a la cromatina.
el procesamiento del ARN (exceptuando la
traducción que tiene lugar en el citoplasma). Ambas tienen la función de actuar como una
Es por esto que su estructura debe ser la barrera selectiva que impide el libre paso de
adecuada para proteger el genoma. las moléculas desde el interior nuclear hacia
el citoplasma o viceversa. Es permeable
Es así como presenta una envoltura
solo a pequeñas moléculas apolares (sin
nuclear que se encarga de proporcionar un
carga) y de esta manera el ADN se mantiene
armazón estructural y separa el interior
seguro y aislado de reacciones químicas
nuclear del citoplasma manteniéndolos
que tienen lugar en el citoplasma y podrían
como dos compartimentos metabólicamente
afectar al material genético de manera
diferentes.
negativa.
La envoltura nuclear consiste en una
cisterna perinuclear con una estructura
compleja compuesta por dos (2) membranas
concéntricas separadas entre ellas por 25-
40nm, la lámina nuclear y los complejos de
poro nuclear.
Fig. 6. Dibujo esquemático de la membrana nuclear
externa e interna.
• Lámina Nuclear: Se encuentra subyacente a

las membranas nucleares. Consiste en una
red fibrosa que proporciona soporte
estructural. Está compuesta por proteínas
de 60 a 80 Kd denominadas lamininas, que
se ensamblan para formar filamentos y
posteriormente forma laminas que van a
Fig. 5. Dibujo esquemático de una porción de la envoltura
interaccionar con proteínas de la membrana
nuclear con todos sus componentes.
nuclear interna, como la Emerina y el
6
receptor de lámina B, así mismo también se central, este octámero esta unido a 2 anillos, un
unen a la cromatina por medio de las anillo del lado citoplasmático y otro a nivel
histonas H2A Y H2B. nuclear, desde estos anillos se extienden
filamentos que le otorgan la forma de cesta.
Fig. 7. Dibujo esquemático de la envoltura nuclear.
¿Sabías que? Las laminopatías son un conjunto de

enfermedades raras que comparten formas erróneas Fig. 8. Dibujo esquemático de un complejo de poro
de codificación genética de las lamininas, proteínas nuclear cortado frontalmente.
constitutivas de la lámina nuclear. Son trastornos que
afectan a diferentes tejidos y funciones como el tejido 2. Transporte molecular a través de la
muscular estriado, el tejido adiposo, el tejido óseo, el
envoltura nuclear
sistema nervioso o el envejecimiento precoz.
Entre el núcleo y el citoplasma ocurre
La distrofia muscular de Emery-Dreifuss o el
constantemente un intercambio de
síndrome Hutchinson-Gildford Progeria son
moléculas.
ejemplos de laminopatías.
Se presentarán diferentes tipos de
2.2 Complejos del poro nuclear transporte como lo son la difusión pasiva, el
transporte dependiente de energía para el
Son los únicos canales a través de los cuales
importe y exporte de proteínas y el
pueden viajar moléculas entre el núcleo y el
transporte de ARNs.
citoplasma. Es una estructura muy grande con
un diámetro aproximado de 120nm, compuesto
por 30 proteínas. Juegan un papel muy
importante ya que por medio de ellos se
transportan los ARN que son sintetizados en el
núcleo y deben llegar al citoplasma para
intervenir en la síntesis de proteínas. Por otro
lado existen proteínas necesarias para las
funciones nucleares que deben transportarse
desde el núcleo hacia el citoplasma, por lo que
estos canales sirven para regular el paso de un
compartimiento a otro. Fig. 9. Dibujo esquemático de los tipos de
transporte nuclear.
Mediante microscopia electrónica se detalló que
estos complejos tienen una estructura de
octámero organizada alrededor de una canal
7
3.1 Difusión de pequeñas moléculas concentración de GDP, que en este caso es el

interior nuclear, recordando que dicho gradiente
Las moléculas pequeñas (menores de 40Kda)
se mantiene gracias a RanGAP y RanGEF.
son capaces de atravesar rápidamente los
canales abiertos (poros nucleares) por difusión • Cuando la proteína está en el interior
pasiva en ambas direcciones. nuclear, ocurre una conversión de RanGDP
a RanGTP por la acción de RanGEF.
3.2 Importación de proteínas
• Ocurre la separación de la proteína de la
Las proteínas que necesitan ser importadas son importina.
aquellas responsables de todas las • RanGTP junto a la importina es devuelta al
características de la estructura interna del citoplasma y así puede reconocer
núcleo y de la función del genoma. Para su nuevamente una señal de localización
importe deben: nuclear.
• Estar etiquetadas con una secuencia de
aminoácidos específicas, denominada señal
de importación nuclear.
• La señal de importación es reconocida por
los receptores de transporte nuclear
(Importinas) que dirigen la traslocación de
proteínas a través del poro nuclear hacia el
interior.
• En el citoplasma debe estar presenta la
proteína Ran GAP, la cual estimula la
hidrolisis de GTP a GDP.
• En el núcleo debe estar presente Ran GEF,
la cual estimula el intercambio de GDP por
GTP. Fig. 10. Dibujo esquemático del importe de proteínas
Lo que ocasiona una distribución desigual, 3.3 Exportación de proteínas

creándose un gradiente de concentración, con Algunas proteínas permanecen en el interior
mayor concentración de GTP en el exterior y nuclear, pero muchas otras viajan
GDP en el interior. constantemente desde el núcleo hacia al
• Por otra parte, se encuentra Ran, la cual es citoplasma. En este caso debe:
una proteína de bajo peso molecular que • Etiquetarse para su exportación con una
regula la actividad de las importinas. Ran se señal de exportación nuclear
une a GDP.
• La señal es reconocida por los
• En el citoplasma Ran GAP (se encuentra receptores en el interior nuclear
unida a los filamentos citoplásmicos del denominados exportinas
complejo de poro nuclear) estimula la
• Las exportinas se unen a Ran/GTP en el
hidrolisis de Ran/GTP a Ran/GDP y por
interior del núcleo y por el gradiente
gradiente ocasiona el paso a través del
mencionado anteriormente, es llevado al
complejo de poro nuclear de la proteína que
citoplasma junto a la proteína.
debe ser importada unida a la importina.
• Una vez en el citoplasma ocurre la
¿Por qué? Porque al haber mayor hidrolisis de RanGTP a RanGDP,
concentración de GDP en el citoplasma, Ran se gracias a la presencia de RanGAP
va a dirigir al compartimiento con menor
8
• Se produce la liberación de la proteína y

la exportina regresa al interior nuclear
junto a RanGDP.
Fig. 12. Dibujo esquemático de los tipos de

regulación del transporte nuclear.
3.5 Transporte de ARN

Fig. 11. Dibujo esquemático del importe de proteínas Como estudiaran más adelante, existen
3.4 Regulación del transporte a través del diferentes tipos de ARN que serán exportador
complejo de poro nuclear hacia el citoplasma de diversas formas.
El transporte de ciertas moléculas desde y • ARNt: Precursores de los ARNmi, son

hacia el núcleo debe ser regulado para que no exportador por la acción de exportina-t y
ocurra una alteración genética. Para dicha exportina5.
regulación vamos a tener dos procesos: • ARNr: Se asocian con proteínas
ribosómicas y con proteínas específicas del
a) Una proteína reguladora se encarga de procesamiento del ARN en el nucléolo. Son
ocultar la señal de importación/exportación transportadas de manera independiente y
nuclear, sin dicha señal la molécula no es en su exportación interviene la cariofilina
reconocida y por lo tanto no se transporta. Crm1.
Ejemplo: IkB oculta la señal de localización • ARNsn: Crm1 se une a la caperuza 7-
de NFkB, el cual es un factor de metilguanosina del extremo 5´ y permite su
transcripción que si no es regulado puede exportación. Mientras que secuencias
desencadenar una división celular presentes en el ARNsn permiten su
descontrolada. importación.
• Exportador del ARNm: Complejo de 2
b) La fosforilación de la proteína ocasiona que
proteínas, una de las cuales está
no sea reconocida por la importina y de esta
relacionada con NTF2, es un factor
forma no será transportada hasta que ocurra
citosólico que facilita el transporte de
la desfosforilación de la misma.
proteínas hacia el núcleo e interactúa
con el complejo de poro nuclear.
9
3. Organización interna del núcleo Histonas
En el interior nuclear, vamos a tener la Pequeñas proteínas que contienen una gran
proporción de aminoácidos básicas (arginina y
presencia de ciertas estructuras que se
lisina), que facilitan la unión con la molécula de
encuentran perfectamente organizadas y
ADN. Existen 5 tipos: H1, H2A, H2B, H3 Y H4.
cumpliendo funciones específicas.
Fig. 15. Dibujo esquemático del nucleosoma. Se

observa el octámero de histonas H2A, H2B, H3 y H4
rodeado por las bases de ADN y sujetado por H1.
Fig. 13. Dibujo esquemático del núcleo celular, con la
presencia del nucleolo y la cromatina
Cromatina Nucleosoma
Complejos entre el ADN eucariótico y proteínas Unidad básica estructural de la cromatina, que
(histonas). Durante la mitosis se condensa, se repiten cada 200 pares de bases. Dando a la
formando así la estructura de los cromosomas cromatina una apariencia de collar de cuencas.
que se distribuirán en los núcleos hijos. Contiene 2 vueltas completas de ADN (166
pares de bases) sujetas por una molécula de
H1.
La función de estos elementos es formar los
cromosomas mediante su condensación
durante la mitosis, duplicando el ADN en la
reproducción celular.
Disposición de la cromatina:
• Eucromatina: Se refiere a la cromatina

sin condensar y distribuida por todo el
núcleo. Durante este período los genes
se transcriben y el ADN se replica como
preparación para la división.
• Heterocromatina: En este caso, la

cromatina permanece condensada y
transcripcionalmente inactiva. Contiene
Fig. 14. Dibujos esquemáticos de la cromatina secuencias de ADN altamente repetitivo.
10
Las cuales reflejan la progresión de las etapas

de transcripción del ARNr, procesamiento y
ensamblaje de ribosomas.
Fig. 16. Micrografía electrónica donde se observa la

eucromatina y la heterocromatina
Nucléolo
Fig. 18. Representación grafica de las regiones
Es la subestructura que más destaca, su nucleolares.
tamaño depende de la actividad metabólica de
la célula. Es el sitio donde tiene lugar la
transcripción y el procesamiento del ARNr, y el
ensamblaje de los ribosomas, así como la
fábrica de producción de ribosomas.
Autoevaluación
1. Dibuja una célula eucariota y una
procariota señalando 3 diferencias.
2. ¿Qué es la interfase?
3. Menciona los elementos de la envoltura
nuclear.
4. Mediante un dibujo esquemático explica
la exportación nuclear.
5. ¿Por qué es importante la regulación del
transporte nuclear?
Fig. 17. Micrografía electrónica donde se observa el
nucleolo.
6. Dibuja y señala los elementos del
nucleosoma.
Morfológicamente consta de 3 regiones
diferenciadas:
✓ Centro Fibrilar
Bibliografía
✓ Componente fibrilar denso
✓ Componente glandular ✓ Cooper, G. La célula 5a Edición.
España 2010.
✓ Geneser, F. Histología sobre
bases moleculares 3ª Edición.
Buenos Aires 2009.
|1
|2

Capítulo 4: MEMBRANA CELULAR
Miembros preparadores docentes: Moreno Maria.
Edición General: Boschetti María y Hernández Carmelo.
2020
|3

Capítulo 2: MEMBRANA CELULAR
El presente material constituye una guía de ayuda para el estudio de los procesos que
se desarrollan en los seres vivos desde el punto de vista celular y molecular, permitiendo
entender posteriormente los fenómenos que se expresan a nivel clínico, dirigidos a
estudiantes de Biología Celular y Molecular del Decanato de Ciencias de la Salud- UCLA y
participantes del curso de Biología celular y molecular.


5. MEMBRANA CELULAR |4
MOSAICO FLUIDO
Los científicos estadounidenses Garth
Nicolson y Seymour J. Singer en 1972
propusieron el modelo del mosaico fluido.
Este modelo, establece que las membranas
son estructuras bidimensionales con proteínas
globulares inmersas en una bicapa de
fosfolípidos; las proteínas se presentan como
un “mosaico” de partículas discontinuas que
penetran y atraviesan la bicapa lipídica.
Todas las Células tanto Procariotas como Gracias a este modelo también sabemos que
Eucariotas están separas del ambiente las membranas celulares son estructuras
externo por una estructura denominada dinámicas donde sus componentes son
MEMBRANA CELULAR O MEMBRANA móviles, capaces de interaccionar de acuerdo
PLASMÁTICA, estructura definida como a los requerimientos funcionales de la célula.
“bicapa fosfolipidica con proteínas asociadas”

que consta con un espesor de entre 5 a 10 nm
que a microscopia electrónica posee una
disposición trilaminar. Dicha estructura define
el límite celular y separa su contenido interno
del medio externo. Debido a que actúa como
una barrera selectivamente permeable al paso
de moléculas, la membrana plasmática
determina la composición del citoplasma. En
último término define la identidad de la célula, En la figura 4.1 se muestra una representación
tridimensional del modelo de mosaico fluido, propuesto
por lo que es considerada una de las por S. J. Singer y G. Nicholson. Nótese los distintos
tipos de moléculas asociadas en la bicapa de lípidos.
estructuras más importantes de la evolución
celular.
Las membranas biológicas son tan diversas

en estructura como en función, pero
mantienen siempre características comunes.
|5
COMPOSICION DE LA MEMBRANA fosfatidilcolina, esfingomielina y glicolípidos;
PLASMATICA mientras que la Capa Interna contiene

fosfatidil etanolamina, fosfatidilserina y
fosfatidil inositol. Mientras que el colesterol se
distribuye por igual en ambas capas.
PROTEÍNAS DE MEMBRANA
Las proteínas asociadas a la membrana

plasmática son las responsables de llevar a
cabo las funciones específicas, participan
como receptores de señales externas y
transportadores de moléculas. Así pues, las
Figura 4.2 Componentes lipídicos de la membrana
proteínas pueden clasificarse como integrales
plasmática.
y periféricas. Las proteínas integrales
BICAPA FOSFOLIPIDICA atraviesan la membrana y las proteínas
periféricas están unidas a proteínas
La estructura fundamental de la membrana
integrales.
plasmática es una bicapa fosfolipidica que
también contiene glucolípidos y colesterol. Es En este orden de ideas, es importante saber
una estructura no covalente que se ensambla que los lípidos y proteínas pueden ser
espontáneamente en medios acuosos modificados por carbohidratos constituyendo
formando compartimientos cerrados. Las los glicolípidos y glicoproteínas. Estando
membranas plasmáticas de mamíferos entonces los Carbohidratos orientados solo
contienen aproximadamente de 50% a 60% de hacia el exterior celular.
lípidos, entre estos lípidos, se encuentra:
fosfatidil colina, fosfatidil serina,
fosfatidiletanolamina y esfingomielina,
entre los que se alternan moléculas de
colesterol.
Estos fosfolípidos se disponen de manera

determinada en ambas monocapas: la Capa
Externa de la membrana plasmática está
Figura 4.3 estructura de la membrana plasmatica, donde
constituida predominantemente por se evidencias Proteinas Integrales y Perifericas.
|6
Los lípidos representan aproximadamente

50% de la composición de las membranas,
porcentaje que varía de acuerdo al tipo y
funciones de la membrana. Por ejemplo:
✓ La membrana interna de la mitocondria

contiene aproximadamente 70% de
proteínas, organizadas en complejos
implicados en el transporte de
electrones y fosforilación oxidativa. Figura 4.4 Célula Epitelial Intestinal
Polarizada.
GLICOCÁLIX
La superficie celular esta recubierta por una En las bicapas lipídicas, los lípidos también se
capa protectora de carbohidratos denominada mueven en sentido lateral, pero, además
glicocálix. Los carbohidratos de la superficie pueden moverse de una mitad de la bicapa a
celular sirven de marcadores para el la otra por un movimiento conocido como
reconocimiento inter celular. FLIP-FLOP.
MOVILIDAD DE MOLECULAS EN LA FLUIDEZ DE LA MEMBRANA

MEMBRANA CELULAR La fluidez de la membrana está determinada
por la temperatura y por la composición
Si hablamos de la “movilidad de las proteínas
lipídica (largo de la cadena de ácidos grasos y
de membrana” es bien sabido que las
la presencia de dobles enlaces). También
proteínas son libres de difundir lateralmente a
podemos incluir al colesterol, pues este
través de su monocapa fosfolipidica. Sin
también regula la fluidez de la membrana. Por
embargo, la movilidad de algunas proteínas se
un lado, la interacción de los anillos
restringe por sus acciones con otras
hidrocarbonados rígidos con las cadenas
moléculas. Además, debemos destacar el
hidrocarbonadas de los ácidos grasos,
caso particular el de las uniones estrechas
disminuyen la movilidad de las porciones
que impiden que las proteínas se muevan
externas de los ácidos grasos, haciendo que
entre los distintos dominios de membrana
esta parte de la membrana sea más rígida a
plasmática de las células epiteliales.
temperaturas altas. Por otro lado, al interferir
en las interacciones entre las cadenas
hidrocarbonadas de los ácidos grasos,
|7
mantiene la fluidez de la membrana a

temperaturas más bajas.
Autoevaluación
Ahora bien, atendiendo a las necesidades Responde a las siguientes interrogantes para
celulares la membrana pone en ejecución su reforzar conceptos ya aprendidos:
propiedad fundamental “PERMEABILIDAD 1. ¿A qué se refiere el modelo de
SELECTIVA” entendida como una medida de Mosaico Fluido y quienes lo
la facilidad con que un compuesto atraviesa la propusieron?
membrana, permitiendo a la célula controlar y 2. Dentro de la composición estructural
mantener su composición química. Y de la membrana celular, señale ¿qué
mediante los procesos de transporte celular la elementos pertenecen a la monocapa
célula logra poner de manifiesto la interna y cuales a la monocapa
permeabilidad selectiva. externa?
3. ¿Qué elementos modifican la fluidez
de la membrana plasmática?
4. ¿Cuáles son 2 de las principales
funciones del Glicocálix?
En la figura 4.5 se observa que los gases, las

moléculas hidrofóbicas y las pequeñas
Figura 4.5 Permeabilidad de las bicapas fosfolipidicas
moléculas polares sin carga pueden difundir a

través de las bicapas fosfolipidicas. No
pueden hacerlo las moléculas polares más
grandes ni las moléculas cargadas.
|8
TRANSPORTE CELULAR ➢ Difusión facilitada. Se produce
Se distinguen dos tipos de transporte, cuando las moléculas polares
atendiendo al gradiente de concentración, a pequeñas como los iones, atraviesan la
ambos lados de la membrana, transporte membrana, a través de proteínas
pasivo y transporte activo. transmembrana, llamadas proteínas

canal, permitiendo a la célula controlar
TRANSPORTE PASIVO
el movimiento de iones a través de la
Se produce cuando un compuesto difunde a membrana sin interaccionar con las
través de la membrana a favor del gradiente cadenas hidrófobas de los lípidos de la
de concentración; es decir, desde donde el membrana.
compuesto está en mayor concentración hacia Los poros formados por estos canales
donde se encuentra en menor concentración. proteicos se abren o cierran
Dentro del transporte pasivo, se distinguen la selectivamente en respuesta a señales
difusión simple y la difusión facilitada. extracelulares.
Las moléculas pequeñas como
➢ Difusión simple: Este tipo de
glucosa y aminoácidos pueden
transporte es experimentado sólo por
atravesar la membrana por difusión
moléculas pequeñas no cargadas tales
facilitada, a través de proteínas
como glicerol, O2, CO2, H20 y etanol,
transmembrana, llamadas proteínas
que pueden difundir libremente a través
transportadoras.
de la membrana.
Figura 4.7 Modelo para la Difusión Facilitada de

la Glucosa
Figura 4.6 Movimiento de moléculas pequeñas

sin carga a través de la membrana celular.
|9
CANALES IÓNICOS compuesto particular y permite su

desplazamiento a través de la membrana y
Los canales iónicos median el transito rápido
posterior liberación, gracias a cambios
de iones seleccionados a través de la
conformacionales de la proteína acoplados a
membrana plasmática. Están especialmente
la utilización de energía almacenada en el
caracterizados en células nerviosas y
ATP.
musculares, donde son los responsables de la
transmisión de señales eléctricas. TRANSPORTE ACTIVO PRIMARIO
Bomba Na+/K+. Las bombas de iones son

en gran medida las encargadas de establecer
y mantener los gradientes iónicos a través de
la membrana plasmática, mediante un
transporte activo. Un ejemplo típico de este
tipo de bomba es la ATPasa de Na+/K+ o
Figura 4.8 Modelo de un Canal Iónico de Na+ Bomba de Na+/K+, responsable de bombear
Na+ fuera de la célula y K+ al interior de la
misma y, por lo tanto, establece un
TRANSPORTE ACTIVO
pronunciado gradiente de estos iones a través
Se establece cuando un compuesto atraviesa de la membrana plasmática, acoplado a la
la membrana en contra del gradiente de hidrólisis de ATP.
concentración; es decir, desde donde está
menos concentrado hacia donde está más
concentrado. Este tipo de transporte se divide
a su vez en primario y secundario. El
transporte activo primario está acoplado
directamente a la hidrólisis de ATP y el
transporte activo secundario, está
indirectamente acoplado a la hidrólisis de
ATP. Al igual que en la difusión facilitada, el
transporte activo de un compuesto requiere de
proteínas integrales de membrana, conocidas .
como proteínas transportadoras. En este Figura 4.9 Bomba Na+/K+. como modelo de
Transporte acoplado a la hidrolisis de ATP
caso, la proteína se une selectivamente a un
| 10
Para mantener el gradiente de iones, las abiertos por lo que es más permeable al K +
células gastan energía considerable. La que al Na+ o a otros iones.
bomba de Na+/K+ juega un papel importante
Como consecuencia, el flujo de K+ supone la
en la propagación de señales eléctricas en el
principal aportación al potencial de membrana
nervio y el músculo. Además, el gradiente de
en reposo. La concentración 20 veces superior
Na+ establecido en la bomba, también se
en el interior celular, respecto al fluido
emplea para dirigir el transporte activo de
extracelular, dirige el flujo de K+ hacia el
otras moléculas como es el caso del
exterior celular. Como el K+ se encuentra
transporte de glucosa por las células
cargado positivamente el flujo de este ión
epiteliales intestinales. En la mayoría de las
desde la célula, genera un potencial eléctrico
células animales mantiene el equilibrio
a través de la membrana encontrándose el
osmótico y el volumen celular.
interior de la misma cargada negativamente.
POTENCIAL DE MEMBRANA O DE
REPOSO, DESPOLARIZACIÓN Y
POTENCIAL DE ACCIÓN
Como los iones están cargados

eléctricamente, su transporte supone que se
establezca un gradiente o potencial eléctrico a
través de la membrana. La magnitud del
potencial eléctrico varía entre -15 y -100 mV.
Para células no excitables este voltaje se
llama potencial de membrana y para las
células excitables como las nerviosas y
musculares, se denomina potencial de
reposo.
El potencial eléctrico se debe a las bombas

iónicas y al flujo de los iones a través de los
canales de la membrana plasmática de la
célula en reposo. La membrana plasmática de Figura 4.10 Potencial de Membrana en reposo y
Canales Iónicos durante Despolarización e
la célula en reposo, contiene canales de K+ Hiperpolarización.
| 11
Cuando se estimula la membrana en reposo,

la célula responde abriendo la compuerta de
algunos canales de sodio y permite que
penetre a la célula un número limitado de
iones sodio. Este movimiento de cargas
positivas al interior celular reduce el potencial
de membrana que se vuelve menos negativo.
Al reducirse el voltaje disminuye la polaridad
entre los lados de la membrana, lo que se
denomina Despolarización.
Luego que se abren las compuertas del Na+

se cierran en cuestión de milisegundos y se
abren los canales de K+, lo que provoca la
salida de K+ al exterior y el restablecimiento
del potencial de reposo. Los gradientes
iónicos se mantienen por la bomba Na+/K+
que utiliza la energía derivada de la hidrólisis
de ATP para transportar Na+ y K+ contra sus
gradientes electroquímicos. Los cambios en el
potencial de membrana luego de la
despolarización constituyen un potencial de
acción. La despolarización de las regiones Figura 4.10.1 Potencial de Membrana y Canales
Iónicos durante un Potencial de Acción.
adyacentes de la membrana plasmática
permite a los potenciales de acción viajar a lo
largo de los axones de las células nerviosas
como señales eléctricas, dando como
resultado la rápida transmisión de los impulsos
nerviosos a través de largas distancias.
| 12
TRANSPORTE ACTIVO ENDOCITOSIS

SECUNDARIO Además de los tipos de transporte descritos
En este tipo de transporte se produce el paso anteriormente, las células eucariotas también
de sustancias a través de la membrana celular son capaces de captar macromoléculas y
que no sean permeables a la misma. Para partículas del medio extracelular dentro de
lograr esto, utilizan la energía del ATP de vesículas derivadas de pliegues o
manera indirecta. El ejemplo más típico de invaginaciones de la membrana plasmática.
este tipo de transporte es el sistema de co- La captación de materiales extracelulares en
transporte sodio-glucosa en el intestino vesículas citoplasmáticas se denomina
delgado. Cada molécula de glucosa que se endocitosis.
transporta desde el lumen o cavidad del

intestino delgado hacia el interior del
enterocito o célula intestinal, está
acompañada por el movimiento simultáneo de
un ión sodio. El paso de este ión sodio se debe
a que la bomba Na+-K+ mantiene un gradiente
de Na+ favorable.
Es decir, la glucosa puede transportarse en

contra de un gradiente de concentración a
expensa del transporte de sodio a favor de un
gradiente de concentración.
Figura 4.11 Transporte activo de la Glucosa

Figura 4.12 Proceso de Fagocitosis Celular
| 13
Cuando la célula captura partículas grandes superficie exterior de la membrana celular, se

como las bacterias, la endocitosis se denomina ENDOCITOSIS MEDIADA POR
denomina FAGOCITOSIS. Y, si la RECEPTORES.
captación celular es de contenido liquido en Un ejemplo de este tipo de transporte, lo

lugar de partículas sólidas, se denomina constituye la captura de colesterol por las
PINOCITOSIS. células de mamíferos que se transporta a
través del torrente sanguíneo en forma de
Por otra parte, la captación selectiva de
lipoproteínas de baja densidad (LDL). Para
macromoléculas extracelulares específicas
ello, se requiere de la unión de LDL a un
(ligandos) luego de unirse a receptores en la
receptor específico y liberación posterior del
Figura 4.13 Proceso de Endocitosis Celular
colesterol en la célula.
EXOCITOSIS
Por su parte la exocitosis describe el proceso

de fusión de vesículas con la membrana
plasmática y de liberación el contenido al
exterior de la célula, como se muestra en la
Figura 4.14.
Figura 4.14 Comparación Proceso de Exocitosis y

Endocitosis Celular.
La exocitosis de origina cuando una célula

produce sustancias para exportar, tales como
proteínas o cuando la célula necesita
| 14
deshacerse de un desecho o de un elemento

BIBLIOGRAFÍA
toxico. Proteínas de membrana recién
fabricadas, y los lípidos de membrana se Cooper, G & Hausman, R (2011) La
mueven a la parte superior de la membrana Célula (5ª ed.) España: Marbán.
por exocitosis.
Capitulo 13. Membrana Plasmatica.
Es pertinente, siempre recordar que tanto la
Figura 4.2 (página 531)
endocitosis como exocitosis celular son
procesos de transporte activo. Figura 4.3 (página 533)

Autoevaluación
Responde a las siguientes interrogantes para
reforzar conceptos ya aprendidos:
5. Mencione los tipos de transporte
Celular, y de un ejemplo de moléculas Figura 4.10.1 (página 547)
que lo utilizan. Figura 4.11 (página 556)

6. Defina Potencial de membrana,
Potencial de Reposo y Potencial de
acción, haciendo énfasis en sus Figura 4.13 (página 564)
diferencias.
7. ¿Qué es la Permeabilidad Selectiva?
y ¿Cuál es su importancia?
| 15
Respuestas de la 4. El Glicocálix protege la superficie

celular y está implicado en las
autoevaluación interacciones celular célula
5. Tipos de transporte celular;
1. Propuesto por los científicos Nicolson y
Transporte pasivo: (difusión simple,
Seymour J. Singer en 1972; el modelo
difusión facilitada, por canales iónicos)
del mosaico fluido establece que las
Transporte activo: (primario,
membranas son estructuras
secundario)
bidimensionales con proteínas
Ej.: co-transporte Sodio-Glucosa como
inmersas en una bicapa de fosfolípidos,
ejemplo de transporte activo
que se comportan como estructuras
secundario.
dinámicas donde sus componentes son
6. Potencial de membrana: es la
móviles, capaces de interaccionar de
diferencia de potencial a ambos lados
acuerdo a los requerimientos
de la membrana celular. El Potencial
funcionales celulares.
de reposo: así se le denomina a
2. En la Capa Externa de la membrana
potencial de membrana de una célula
plasmática se encuentran
excitable (ej. Célula muscula, o
predominantemente fosfatidilcolina,
nerviosa) y Potencial de acción: es el
esfingomielina y glicolípidos; mientras
cambio brusco en el potencial de
que en la Capa Interna esta fosfatidil
membrana (despolarización) que
etanolamina, fosfatidilserina y fosfatidil
desencadena la transmisión de impuso
inositol. Mientras que el colesterol se
nervioso en células excitables.
distribuye por igual en ambas capas.
7. La permeabilidad selectiva es una
3. La fluidez de la membrana
cualidad muy especial de la célula que
plasmática está determinada por 2
se manifiesta como una medida de la
elementos: la temperatura y por la
facilidad con que un compuesto
composición lipídica (longitud de la
atraviesa la membrana, permitiendo a
cadena de ácidos grasos y la presencia
la célula controlar y mantener su
de dobles enlaces o insaturaciones).
composición química.
También el colesterol, que regula la
fluidez de la membrana en relación a la
temperatura del medio.
|1
|2

Capítulo 6: ÁCIDOS NUCLEICOS, REPLICACIÓN DEL ADN, Y
GENOMA.
Miembro preparador docente: Campo G. Noé A.
Edición General: Campo Noé y Hernández Carmelo.
2020
|3

Capítulo 6: ÁCIDOS NUCLEICOS, REPLICACIÓN DEL ADN, Y
GENOMA.


6. ÁCIDOS NUCLEICOS, REPLICACIÓN DEL ADN, Y
GENOMA |4
compartimientos celulares. Se encuentra en el

Ácidos Nucleicos
núcleo, el citoplasma, la matriz mitocondrial y
Los ácidos nucleicos son grandes polímeros el estroma de cloroplastos de células
formados por la repetición de monómeros eucariotas y en el citosol de células
denominados nucleótidos, unidos mediante procariotas.
enlaces fosfodiéster. Constituyen el material
Composición Química De Los Ácidos
genético de los organismos y son necesarios
Nucleicos
para el almacenamiento y la expresión de la
información genética. Cuando se realiza la hidrólisis completa de los
ácidos nucleicos, se obtienen tres tipos de
componentes principales:
 Azúcar, en concreto una pentosa.
 Bases nitrogenadas: púricas y

pirimidínicas.
 Ácido fosfórico.
Figura 1 Ácidos Nucleicos. Ácido ribonucleico
(ARN) y Ácidos desoxirribonucleico (ADN)
Existen dos tipos de ácidos nucleicos química

y estructuralmente distintos: el ácido
desoxirribonucleico (ADN) y el ácido
ribonucleico (ARN); ambos se encuentran en
todas las células procariotas, eucariotas y
virus. El ADN funciona como el almacén de la
información genética y se localiza en los
cromosomas del núcleo, las mitocondrias y los
cloroplastos de las células eucariotas. En las
células procariotas el ADN se encuentra en su
único cromosoma y, de manera
extracromosómica, en forma de plásmidos. El
Figura 2
ARN interviene en la transferencia de la
Componentes
información contenida en el ADN hacia los de los Ácidos
Nucleicos.
|5
El azúcar, en el caso de los ácidos es específica del ADN y el Uracilo es
desoxirribonucleicos (ADN) es la 2-desoxi-D- específico del ARN.
ribosa y en el caso de los ácidos ribonucleicos
Además de las bases nitrogenadas
(ARN) es la D-ribosa.
anteriormente descritas, se han encontrado
Las bases nitrogenadas que forman parte de otras bases nitrogenadas en algunos virus o
los ácidos nucleicos son de dos tipos, púricas formando parte de algunos tipos especiales de
y pirimidínicas. Las bases púricas derivadas de ARNs.
la purina (fusión de un anillo pirimidínico y uno
Nucleósidos y Nucleótidos
de imidazol) son la Adenina (6-aminopurina) y
la Guanina (2-amino-6-hidroxipurina). Las La unión de la base nitrogenada a la pentosa
bases pirimidínicas (derivadas de la pirimidina) recibe el nombre de nucleósido y se realiza a
son la Timina (2,6-dihidroxi-5-metilpirimidina o través del carbono 1’ de la pentosa y los
también llamada 5-metiluracilo), Citosina (2- nitrógenos de las posiciones 3 (pirimidinas) o 9
hidroxi-6-aminopirimidina) y Uracilo (2,6- (purinas) de las bases nitrogenadas mediante
dihidroxipirimidina). Las bases nitrogenadas un enlace de tipo N-glucosídico. La unión del
que forman normalmente parte del ADN son: nucleósido con el ácido fosfórico se realiza a
Adenina (A), Guanina (G), Citosina y Timina través de un enlace de tipo éster entre el grupo
(T). Las bases nitrogenadas que forman parte OH del carbono 5’ de la pentosa y el ácido
de el ARN son: Adenina (A), Guanina (G), fosfórico, originando un nucleótido. Los
Citosina (C) y Uracilo (U). Por tanto, la Timina nucleótidos son las unidades o monómeros
utilizados para construir largas
cadenas de polinucleótidos.
Figura 3 Estructura de los nucleósidos

y nucleótidos.
• Nucleósido = Pentosa + Base

nitrogenada.
• Nucleótido = Pentosa + Base

nitrogenada + Ácido fosfórico.
• Polinucleóotido = Nucleótido +
Nucleótido + Nucleótido + ....
|6
Tanto los nucleótidos como los Polinucleótidos
nucleósidos pueden contener como azúcar la
Los nucleótidos se unen entre si para formar
D-ribosa (ribonucleótidos y ribonucleósidos) o
largas cadenas de polinuclóetidos, esta unión
la pentosa 2-desoxi-D-ribosa
entre monómeros nucleótidos se realiza
(desoxirribonucleótidos y
mediante enlaces fosfodiéster entre los
desoxirribonucleósidos). Además, los
carbonos de las posiciones 3’ de un nucleótido
nucleótidos pueden tener 1, 2 ó 3 grupos
con la 5’ del siguiente.
fosfato unidos al carbono 5’ de la pentosa,
existiendo por tanto, nucleótidos 5’ Figura 4. Estructura
monofosfato, nucleótidos 5’ difosfato y de los polinucleótidos
nucleótidos 5’ trifosfato. En algunos casos el

ácido fosfórico se une a la pentosa por el
carbono 3’, existiendo nucleótidos 3’
monofosfato, difosfato o trifosfato según el
número de grupos fosfato que posea.
Cuadro 1. Función de los nucleótidos
Cuadro 2. Nomenclatura de nucleósidos y nucleótidos

|7
Proporciones de las bases nitrogenadas: diferentes valores según la especie
reglas de Chargaff estudiada. Este resultado indicaba que
los ácidos nucleicos no eran la
Al principio se pensaba que los ácidos
repetición monótona de un
nucleicos eran la repetición monótona de un
tetranucleótido. Existía variabilidad en la
tetranucleótido, de forma que no tenían
composición de bases nitrogenadas.
variabilidad suficiente para ser la molécula
biológica que almacenara la información. Sin Todos los ADN estudiados cumplen la relación
embargo, Chargaff (1950) demostró que las A=T y G=C, excepto el ADN del bacteriofago
proporciones de las bases nitrogenadas eran ØX174. El ADN de este virus es de una sola
diferentes en los distintos organismos, aunque hélice. En los virus ARN no se cumple la
seguían algunas reglas. Estas reglas de equimolaridad de las bases excepto en el caso
Chargaff se cumplen en los organismos cuyo del virus del Tumor de las heridas y de los
material hereditario es ADN de doble hélice y Reovirus que tienen ARN de doble hélice. En
son las siguientes: estos virus se cumple que A=U y G=C,
además se cumple que A+G/U+C=1. El fago
 La proporción de Adenina (A) es igual a
T2 y los otros fagos T-pares (T4 y T6) en vez
la de Timina (T). A = T . La relación
de citosina tienen hidroximetil-citosina (HMC).
entre Adenina y Timina es igual a la
Algunos organismos tiene en su ADN una
unidad (A/T = 1).
pequeña proporción de 5-metil-citosina (5-Me-
 La proporción de Guanina (G) es igual a C) que sustituye a la citosina.
la de Citosina (C). G= C. La relación
entre Guanina y Citosina es igual a la
unidad ( G/C=1).
 La proporción de bases púricas (A+G)

es igual a la de las bases pirimidínicas
(T+C). (A+G) = (T + C). La relación
entre (A+G) y (T+C)
es igual a la unidad
(A+G)/(T+C)=1.
 Sin embargo, la proporción entre (A+T)

Figura 5. Proporción de las bases nitrogenadas
y (G+C) era característica de cada en el ADN según Chargaff.
organismo, pudiendo tomar por tanto,
|8
El modelo de la doble hélice: Watson y inciden los rayos X, produciendo al
Crick (1953) revelarse manchas. El ángulo de difracción
presentado por cada una de las manchas
Una vez demostrado que los ácidos nucleicos
en la película suministra información sobre
eran los portadores de la información genética,
la posición en la molécula de ADN de cada
se realizaron muchos esfuerzos encaminados
átomo o grupo de átomos.
a determinar su estructura con exactitud.
Watson y Crick (1953) fueron los primeros Mediante esta técnica de difracción de rayos X
investigadores en proponer una estructura se obtuvieron los siguientes resultados:
para los ácidos nucleicos y su labor
 Las bases púricas y pirimidínicas se
investigadora se vio recompensada con el
encuentran unas sobre otras, apiladas a lo
Premio Nobel en 1962, Premio Nobel que
largo del eje del polinucleótido a una
compartieron con M. H. F. Wilkins y que se les
distancia de 3,4 Å. Las bases son
concedió por sus descubrimientos en relación
estructuras planas orientadas de forma
con la estructura molecular de los ácidos
perpendicular al eje (Astbury, 1947).
nucleícos y su significación para la transmisión
de la información en la materia viva.. Para  El diámetro del polinucleótido es de 20 Å y
realizar su trabajo emplearon dos tipos de está enrollado helicoidalmente alrededor de
datos ya existentes. su eje. Cada 34 Å se produce una vuelta
completa de la hélice.
 Por un lado, utilizaron los datos obtenidos
varios años antes por Chargaff (1950),  Existe más de una cadena polinucleotídica
relativos a la composición de bases enrollada helicoidalmente (Wilkins et el.
nitrogenadas en el ADN de diferentes 1953, Frankling y Gosling, 1953).
organismos.
Basándose en estos dos tipos de datos
 El otro tipo de datos eran los procedentes Watson y Crick propusieron su Modelo de
de estudios de difracción de rayos X sobre estructura para el ADN conocido con el
fibras de ADN. Para determinar la nombre de Modelo de la Doble Hélice. Las
estructura tridimensional o disposición características del Modelo de la Doble Hélice
espacial de las moléculas de ADN, se hace son las siguientes:
incidir un haz de rayos X sobre fibras de
 El ADN es una doble hélice enrollada
ADN y se recoge la difracción de los rayos
helicoidalmente “a derechas” (sentido
sobre una película fotográfica. La película
dextrorso). Algo parecido a dos muelles
se impresiona en aquellos puntos donde
entrelazados.
|9
 Enrollamiento de tipo plectonémico: doble hélice y están apiladas unas
para separar las dos hélices es sobre otras a una distancia de 3,4 Å.
necesario girarlas como si fuera un  Cada 10 bases, cada 34 Å seproduce
sacacorchos. una vuelta completa de la doble hélice
 Cada hélice es una serie de nucleótidos (360º). Las bases se encuentran en sus
unidos por enlaces fosfodiéster en los configuraciones cetónicas, cumpliendo
que un grupo fosfato forma un puente así las reglas de apareamiento A-T y G-
entre grupos OH de dos azúcares C.
sucesivos (posiciones 3’ de un azúcar y  La secuencia de bases nitrogenadas
5’ del siguiente). puede ser cualquiera, no existe ninguna
 Las dos hélices se mantienen unidas restricción.
mediante puentes o enlaces de
hidrogeno producidos entre las bases
nitrogenadas de cada hélice. Siguiendo
los datos de Chargaff (1959), la Adenina
de una hélice aparea con la Timina de
la hélice complementaria mediante dos
puentes de hidrógeno. Igualmente, la
Guanina de una hélice aparea con la
Citosina de la complementaria mediante
tres puentes de hidrógeno.
 Las dos hélices por razones de
complementaridad de las bases
nitrogenadas son antiparalelas,
teniendo secuencias de átomos
inversas. Una hélice lleva la secuencia
5’P → 3’ OH , mientras que la hélice
complementaria sigue la secuencia de
átomos 3’OH → 5’P.
 El diámetro de la doble hélice es de 20
Å.
 Las bases nitrogenadas son estructuras
planas perpendiculares al eje de la Figura 7. Estructura del ADN según el modelo de Watson
y Crick
| 10
Además, la estructura en doble hélice Esta estructura sugería la existencia de algún
propuesta por Watson y Crick (1953) sugería código que permitiera pasar de la secuencia
varías propiedades importantes del material lineal de bases nitrogenadas en el ADN a la
hereditario: secuencia lineal de aminoácidos en las
proteínas.
 Las reglas de complementariedad de
las bases nitrogenadas A-T y G-C
sugieren un forma sencilla de
replicación del material hereditario. Esta
forma sencilla de replicación se
denomina método Semiconservativo.
Cuando el ADN se replica sus dos
hélices se separan y cada una de ellas
sirve de molde para sintetizar una
nueva hélice siguiendo las reglas de
apareamiento de las bases
Figura 9. Representación esquemática de la
nitrogenadas. polimerización de los ácidos nucleicos. Partiendo
de nucleótidos que se unen entre sí, formando
 La mutación a nivel molecular macromoléculas que se asocian con una hebra
complementaria,, dando lugar a una estructura con
consistiría en un cambio en la forma de hélice bicatenaria.
secuencia de bases nitrogenadas del

ADN.
 Al no existir ninguna restricción en la

secuencia de bases nitrogenadas, el
ADN poseía la suficiente variabilidad
como para ser el material hereditario.
Figura 8. Complementariedad entre las bases nitrogenadas.

| 11
ADN
La unidad básica de información en

los seres vivos es el gen, definido en
células eucariotas como un segmento de
ADN que lleva la información necesaria
para la síntesis de una proteína o de un
ARN. La cantidad, tamaño y distribución
de los genes varía según la especie
analizada. En el hombre, el número de
genes que codifican proteínas se calcula
que es tan sólo el 3 % del ADN; siendo el
resto, secuencias reguladoras y estructurales.
Figura 10 . Estructura del ADN. Este se encuentra
La comprensión de los mecanismos de
en el nucleo de las células y dan lugar a estructuras
almacenamiento y de las formas de utilización complejas a las cuales se asocian proteínas histonas
lo cual le permite tener diferentes grados o estados de
de la información ha servido para poder aclarar organización dentro de la célula.
muchas de las incógnitas planteadas sobre la
estructura y la función celular. La célula realiza
esta actividad a través de las rutas de la
Replicación del ADN
información genética; estas vías constituyen el Las propiedades de la replicación son
principio fundamental de la genética molecular. básicamente iguales en todos los seres vivos,
Son tres procesos denominados: y siendo así que la mayoría de los estudios se
a) Replicación o copia del ADN paterno para han realizado en Escherichia coli, se describirá
formar moléculas de ADN hijas idénticas a su el proceso a nivel del organismo bacteriano; y
progenitor, e idénticas entre sí. a continuación, se indicarán algunas

características propias de organismos
b) Transcripción o copia de la información de
eucariotas.
una parte del ADN a moléculas de ARN.
Principales características de la replicación
c) Traducción o copia de la información
genética del ARN a la secuencia aminoacídica 1) La replicación es un proceso
específica de una proteína. semiconservador. Cada cadena de la

molécula de ADN parental actúa de molde
para la síntesis de una nueva cadena
| 12
produciéndose dos nuevas moléculas de 3'. Esto determina que la cadena molde ha de
ADN, cada molécula nueva posee una tener la dirección 3'→5', para que la nueva
cadena vieja y una nueva. cadena en formación, complementaria y
antiparalela tenga la dirección 5' →3'
2) La replicación comienza en un punto del
coincidente con el sistema de trabajo de la
ADN. Las dos cadenas de ADN se replican
enzima. Al ser la horquilla de replicación
al mismo tiempo y comienzan en un punto
bidireccional, el sistema descrito implicaría que
denominado origen. En dicho punto el ADN
la otra cadena parental 5'→3' debería estar
parental se desenrolla y forma una
siendo copiada en dirección 3'→5', situación
estructura de lazo cuyos extremos se
imposible debido a la limitación de las enzimas
denominan horquillas de replicación. En el
sintéticas. Este problema es obviado debido a
caso del cromosoma circular bacteriano, el
que,
punto inicial de la replicación es un gen
denominado oriC. 5) La síntesis de ADN es semidiscontinua. En
una cadena, la inicialmente comentada en el
punto anterior, la replicación es continua y en
la segunda la síntesis es discontinua. Esta
solución fue descrita por Reiji Okazaki quien
encontró que en el procedimiento de copia de
las dos cadenas del ADN parental, se formaba
Figura 11. Modelo esquemático de un punto de origen una cadena nueva continua (también
de replicación.
denominada conductora) en la que la síntesis
3) La replicación es bidireccional. Comenzada se desarrolla en la misma dirección de la
en un punto de la molécula de ADN el proceso enzima o de la horquilla de replicación;
se desarrolla hacia los dos extremos de la mientras que la otra cadena nueva era
cadena; en cada lazo, los extremos u discontinua (también denominada cadena
horquillas de replicación avanzan en el rezagada o retrasada) ya que su síntesis se
proceso de síntesis hasta
completar la copia.
4) La síntesis de ADN se
desarrolla en dirección 5' → 3'.
La dirección en que actúan las
enzimas es fija y única de 5' a
Figura 12. Esquema de la replicación bidireccional del ADN. Se evidencian
hebras continua y rezagada,
| 13
realizaba en contra de la dirección de la requisitos de funcionamiento comunes, que
horquilla mediante fragmentos, los son:
fragmentos de Okazaki, secuencias formadas
1) Necesitan una cadena de ADN molde, el
por unos centenares o miles de nucleótidos
proceso de replicación es dirigido por la
dependiendo de la célula.
cadena de ADN molde, y sigue el principio de
complementariedad de bases fijando el
nucleótido que debe incorporarse a la cadena
Enzimas que participan en la replicación
en formación según tal regla.
2) Necesitan un cebador, la polimerización

ADN polimerasas que realizan estas enzimas requiere que exista
La reacción básica que tiene lugar en la una cadena previa inicial (cebador) ya que son
replicación es una reacción de polimerización, incapaces de coger sobre su centro activo dos
de formación de un enlace fosfodiéster entre nucleótidos individuales y comenzar la
nucleótidos. En una cadena de ADN en síntesis. Uno de los sustratos necesarios de la
crecimiento se incorpora un nucleótido cuya reacción es, por tanto, una cadena
base es la complementaria a la de la cadena preexistente, y ninguna de estas enzimas es
molde. Los nucleótidos que se incorporan han capaz de iniciar la síntesis de una cadena
de hacerlo en su forma activada o nucleótido nueva desde su primer nucleótido.
trifosfatados (dNTP). La reacción que tiene

lugar es la siguiente:
ADN (n nucleótidos) + dNTP → ADN (n+1

nucleótidos) + PPi
La reacción de polimerización es
termodinámicamente favorable por la hidrólisis
del pirofosfato; pero no sólo por el
desdoblamiento del pirofosfato, sino también
por las interacciones no covalentes que se
establecen entre las bases. Esta reacción es
catalizada por varias enzimas, las
Figura 13. Esquema de La Polimerasa III
ADNpolimerasas, cada una con un tipo de catalizando la incorporación de nucleótidos en la
actividad muy específica pero con una serie de horquilla de replicación.
| 14
3) Su dirección de síntesis es fija de 5'→ 3', Existen tres polimerasas denominadas ADN
esto significa que adicionan nucleótidos a la polimerasa I (la primera que se describió),
cadena siempre por un extremo fijo, el extremo ADN polimerasa II y ADN polimerasa III. Si
3'. O bien, que de los dos extremos del se comparan algunas características
nucleótido libre que se va a incorporar, utilizan diferenciales entre ellas, se puede observar
su grupo fosfato o extremo 5' para añadirlo a la que la ADN polimerasa III es la más compleja.
cadena en crecimiento. Está formada por diez subunidades diferentes
y tiene una capacidad de polimerización
4) La velocidad con que adicionan nucleótidos,
infinitamente superior a cualquiera de las otras
o procesividad, se mide como el número de
dos, siendo, por tanto, la principal enzima de la
nucleótidos incorporados en la unidad de
replicación.
tiempo y es una característica propia de cada
polimerasa. La ADN polimerasa I es importante por su
tarea de corrección, capaz de realizarla tanto
Una cualidad de todas las ADN-polimerasas es
en la dirección descrita como en la dirección
la precisión con que realizan la replicación,
contraria, debido a que posee la actividad
estimándose en Escherichia coli que se
exonucleasa 5'→3', careciendo de la misma el
comete un error en uno de cada 109 a 1010
resto de polimerasas.
nucleótidos, lo cual en el cromosoma de
Escherichia coli supone un error cada 1.000 a Otros enzimas que participan en el proceso
10.000 replicaciones. Estos errores son de replicación
corregidos por las mismas polimerasas
Para la replicación se necesitan, aparte de las
mediante una actividad enzimática
ADN polimerasas descritas, alrededor de 20
independiente, la actividad exonucleasa 3'-5';
proteínas diferentes, el conjunto de las mismas
esta actividad les permite eliminar el último
se denomina sistema ADN replicasa o
nucleótido incorporado si éste es erróneo, para
replisoma ya que aunque no formen una
a continuación, seguir con la polimerización.
unidad física, constituyen una unidad
Esta capacidad de corrección, mediante la
funcional.
discriminación entre bases correctas e
incorrectas, mejora la precisión de la Dentro de las enzimas que participan están:
replicación. Si se añade el hecho de que, 1) Helicasas, enzimas que separan las dos
además, existen otros sistemas de corrección cadenas de la molécula de ADN parental.
que actúan después de acabada la replicación, Desplazándose a lo largo de la molécula de
puede observarse la fidelidad y garantía del
proceso.
| 15
ADN eliminan los enlaces entre las cadenas eliminado y sustituido por un fragmento de
consumiendo en el proceso ATP. ADN por la ADN polimerasa I.
2) Topoisomerasas, enzimas que desenrollan 5) ADN ligasas, enzimas que se encargan de

el ADN y lo relajan. Existen cuatro unir trozos formados de cadenas, realizando
topoisomerasas (I a IV) que actúan eliminando un enlace fosfodiéster entre los nucleótidos
superenrollamientos negativos; o bien pertenecientes a dos segmentos de una
induciéndolos, dependiendo del grado de cadena.
plegamiento que tenga el ADN en su estado
6) Proteínas de Enganche Deslizante. En
natural.
eucariotas denominadas PCNA (antígeno
3) Proteínas fijadoras de ADN, proteínas que nuclear de células proliferativas). Sitúa a la
estabilizan las cadenas separadas uniéndose polimeriza en el cebador y mantiene l
a ellas. asociación estable con el molde.
4) Primasas, enzimas que sintetizan el 7) Proteínas de Enganche de Carga, en

cebador, éste suele ser un corto fragmento de eucariotas denominadas RFC (factor de
ARN, necesario para que pueda comenzar la replicación C) fijan a la PCNA al ADN en la
ADN polimerasa III, y que posteriormente será zona de unión del cebador y el molde.
Figura 14. Modelo de la horquilla de replicación en E. coli.

| 16
Todas estas enzimas participan en el proceso formado por la ADN polimerasa III. El hecho de
de la replicación de forma coordinada, que las direcciones de trabajo de la primasa y
permitiendo que se desarrolle de una manera la polimerasa sean contrarias a la dirección de
secuencial y organizada. crecimiento de la hebra, y de que el proceso
sea uniforme en ambas hebras, viene
justificado por el hecho de que la ADN
Fases de la replicación polimerasa III es una proteína dimérica. Esta
Se pueden distinguir tres fases según las enzima obliga a la cadena molde de la hebra
enzimas que participan en las mismas: retrasada a formar un bucle sobre la misma.
1. Fase de inicio
El origen de la replicación es una porción de

ADN que contiene una secuencia
característica de bases. Este segmento es
reconocido por una proteína denominada
ADN-A.
2. Fase de elongación
La elongación consiste en la formación del

cebador y la síntesis de la cadena de ADN. El
proceso se caracteriza por no desarrollarse de
forma idéntica en ambas hebras. La síntesis
en la cadena conductora o continua requiere
únicamente que actúe la primasa formando un
cebador de ARN de unos 10 a 60 nucleótidos,
para a continuación penetrar la ADN
polimerasa III y realizar la polimerización de
desoxirribonucleótidos. En la cadena retrasada
se forma un conjunto proteico en el que se
localizan siete proteínas distintas además de la
primasa (primosoma). Este grupo se desplaza
a lo largo del molde de la hebra retrasada en
Figura 15. Diagrama de ADN polimerasa extendiendo
dirección 5' →3' sintetizando a intervalos un una cadena de ADN y autocorrigiendo errores.
corto cebador de ARN, al que se unirá ADN
| 17
De esta forma, la dirección de síntesis es la Replicación en células eucariotas
misma en ambas hebras. Al ir desarrollándose
Las moléculas de ADN en células eucariotas
la polimerización el bucle aumenta hasta
son mucho mayores y más complejas ya que
contactar con el fragmento de Okazaki previo,
el proceso de la replicación es bastante más
forzando a la polimerasa a separarse o
complicado.
disociarse y a recomenzar de nuevo el proceso
dónde se ha formado el nuevo cebador y ella Los orígenes de la replicación son
creará el nuevo bucle. secuencias mayores, en levaduras de unos

400 pares de bases, que se presentan en
En una fase posterior se eliminan los
varios puntos de los cromosomas. La
segmentos de ARN cebador, por acción de la
velocidad de desplazamiento de la horquilla de
actividad exonucleasa 5'→3' de la ADN
replicación es de unos 50 nucleótidos por
polimerasa I, quien también se encarga de
segundo, una velocidad relativamente baja si
rellenar los trozos ocupados por el cebador.
se compara con la de los procariotas (10 veces
Por último, la ADN ligasa une los segmentos
mayor). Para incrementar la velocidad global
catalizando la formación de un enlace
del proceso, en eucariotas existen varios
fosfodiéster.
puntos de origen sobre la misma molécula de
3. Fase de terminación ADN, estando separados entre 30.000 y
300.000 pares de bases. La presencia de
En el caso de Escherichia coli con un
múltiples horquillas de replicación acelera el
cromosoma circular, las dos horquillas de la
proceso, y permite que la replicación en
replicación se encuentran en el extremo
eucariotas se desarrolle a velocidades
contrario al origen terminando así la
mayores que en los procariotas.
replicación y necesitando,
únicamente, la presencia de una
topoisomerasa para la separación
de las dos moléculas.
Figura 16. Orígenes de replicación en

eucariotas. A la derecha se observa una
micrografía electrónica de transferencia
donde se evidencian múltiples orígenes de
replicación. A la izquierda un esquema de
los orígenes de replicación y formación de
os nuevos segmentos de ADN.
| 18
Los fragmentos de Okazaki en el ADN transmite a las generaciones futuras. Los
eucariota son más cortos, generalmente cambios permanentes se denominan
contienen 135 nucleótidos, debido a que la mutaciones.
horquilla de replicación se mueve más
Si la mutación se produce sobre ADN que no
despacio.
es relevante, o bien tiene un efecto pequeño
También se han descrito diferencias respecto sobre un gen, la mutación se denomina
a las ADN polimerasas en eucariotas, la ADN “silenciosa”, por carecer de efectos aparentes.
polimerasa α es una proteína oligomérica, en Si la mutación es favorable aporta ventajas
la que una de sus subunidades tiene acción adaptativas a las células o al organismo que la
primasa. desarrolla, y si bien estas mutaciones son
raras, por lo estables que son las moléculas de
Por último, el ADN eucariota está unido a las
ADN y por los mecanismos de reparación
histonas y empaquetado en los nucleosomas.
existentes, su existencia ha permitido la
El proceso de replicación ha de ir acompañado
variación necesaria para el desarrollo de la
por el proceso de síntesis de histonas, ya que
evolución de las especies. Sin embargo, la
en cada ciclo de replicación no sólo se ha de
mayoría de las mutaciones son deletéreas
duplicar el ADN sino también las histonas. Las
para la célula, y en los mamíferos está
enzimas que desarrollan ambos procesos son
comprobada una estrecha correlación entre la
distintas pero han de ir coordinadas, ya que la
acumulación de mutaciones y el cáncer.
velocidad debe ser igual. Las histonas recién
sintetizadas se incorporan a la molécula de
ADN que lleva la hebra retrasada, mientras
que las viejas histonas permanecen en el
dúplex que lleva la hebra conductora.
Mecanismos de reparación del ADN
El mantenimiento de la información codificada

en el ADN es absolutamente imprescindible
para la célula, ya que éstas son moléculas
insustituibles.
Una alteración en la molécula de ADN produce

un cambio en la secuencia de bases, que en el
caso de que la molécula se replique se
Figura 17. Ejemplos de lesiones producidas en el
ADN.
| 19
A lo largo de tan solo un día se acumulan gran a) Reparación de apareamientos incorrectos.
cantidad de lesiones sobre el genoma celular;
b) Reparación por corte (escisión) de base y
se estima que cada veinticuatro horas se
nuleotidos.
pierden alrededor de 5000 bases púricas por
destrucción de sus enlaces glicosídicos con la c) Reparación de grandes lesiones.
desoxirribosa. Sin embargo, gracias a los d) Reparación directa.

mecanismos de reparación, estas lesiones son
e) Reparación por recombinación.
eliminadas prácticamente en su totalidad, las
que no lo son se convierten en mutaciones.
Existen varios tipos de mutaciones,
Reparación de una sola cadena de ADN
clasificadas según el tipo de cambio que se
Los tipos más frecuentes de daños en el ADN
produce sobre la molécula de ADN:
corresponden a rupturas en una sola cadena.
1) Sustitución de una base por otra:
Si bien pueden tener muchas consecuencias
a) Transición si el cambio es de una base por cuando no son adecuadamente reparadas, su
otra del mismo grupo, base púrica por base principal ventaja es que siempre dejarán la
púrica o pirimidínica por pirimidínica. cadena complementaria intacta para que sea
utilizada como guía en la reparación. La
b) Transversión, si el cambio es de base púrica
estructura de doble hélice del ADN es ideal
a pirimidínica, o a la inversa.
para que este proceso se lleve a cabo.
2) Inserción de un par de bases, o adición
.-Inversión directa del daño: En algunos
de nucleótidos.
casos, una célula puede reparar daños en el
3) Delección de un par de bases o ADN al simplemente revertir la reacción
eliminación de nucleótidos. química que los causó. Para entender esto,
La reparación del ADN es posible debido a la necesitamos darnos cuenta que el "daño al
existencia de hebras dobles que funcionan ADN" suele implicar solo un grupo extra de
como moldes ya que en caso de que una de átomos que se unen al ADN mediante una
ellas sufra algún tipo de lesión, puede reacción química. Por ejemplo, la guanina (G)
eliminarse y sustituirse por una correcta, puede sufrir una reacción que añade un grupo
utilizando la información de la hebra metilo (CH3) a un átomo de oxígeno de la
complementaria. base. Si no se corrige, la guanina que contiene

metilo formará pareja con timina (T) en lugar
de citosina (C) durante la replicación del ADN.
| 20
Afortunadamente,
los seres humanos
y muchos otros
organismos tienen
una enzima que
puede quitar el grupo metilo, y revertir la
reacción para regresar la base a su estado Figura 18. Reparación de una O6-metilguanina
normal.
Reparación por escisión de bases
La reparación por escisión de bases

(BER) es el mecanismo responsable
de eliminar los nucleótidos dañados
en el ADN que podrían causar
mutaciones por un mal apareamiento,
o bien por la ruptura del ADN durante
su replicación. Este proceso involucra
a un grupo de enzimas conocidas
como ADN glicosilasas, las cuales
reconocen el daño y recortan la base
dañada; también participa otra enzima
conocida como AP endonucleasa, que
hace un segundo corte, pero ahora
entre los azúcares, para permitir que
el nucleótido completo sea eliminado y
posteriormente sustituido. La
sustitución puede ser de un único nucleótido o Figura 19. Reparación por escisión de bases.
junto con otros aledaños (de 2 a 10

nucleótidos).
| 21
.-Reparación por escisión de nucleótidos .-Reparación por mal apareamiento de las
bases
La reparación por escisión de nucleótidos
(NER) es particularmente importante para La forma de doble hélice es consecuencia
remediar el daño en el ADN que ocurre por la directa del apareamiento específico de las
exposición a la radiación solar por un tiempo bases nitrogenadas en los nucleótidos que
prolongado; una hora bajo el sol intenso puede forman el ADN; la adenina (A) se une a la
producir hasta 100 000 lesiones en el ADN por timina (T) y la citosina (C) se une a la guanina
cada célula. No obstante, ésta no es la única (G). Sin embargo, durante la replicación del
fuente de daño, pues existen otros agentes ADN es posible que se inserten bases que no
que provocan fenómenos similares. Así, corresponden, y por lo tanto ocurran errores;
durante el proceso se produce una distorsión por ejemplo, una guanina se aparea con una
de la doble cadena del ADN, lo que ocasiona timina (G/T) o una adenina se une a una
problemas para expresar y replicar su citosina (A/C). Así, la reparación por mal
información. Esta distorsión permite que un apareamiento de las bases (MMR) es el
complejo enzimático reconozca el daño y corte sistema encargado de reconocer y arreglar
los azúcares que lo delimitan; una helicasa este tipo de errores, con el fin de evitar
empuja esta región lejos y una ADN cambios (mutaciones) en el ARN y las
polimerasa repara el hueco formado al agregar proteínas codificadas.
los nucleótidos faltantes; finalmente, una ADN
Al igual que para el mecanismo anterior,
ligasa pega los extremos.
resulta necesaria la presencia de un complejo
enzimático que reconozca el daño en el ADN y
al mismo tiempo determine cuál de las dos
cadenas se debe reparar y cuál se usará como
molde. Existe además un grupo de proteínas
que, sin ser centrales en el proceso de
reparación, colaboran para hacer más eficiente
el proceso. De manera general, el mecanismo
detecta los cambios en la estructura de la
doble cadena del ADN y recorta un fragmento
de tamaño variable que deja en el centro a la
base mal apareada. Después, una enzima
denominada exonucleasa degrada el
Figura 20. Reparación por escisión de nucleótidos. fragmento y permite que se vuelva a sintetizar,
| 22
pero ahora de manera adecuada, para que mecanismo utiliza la copia del ADN en el
finalmente una ligasa selle los extremos. cromosoma hermano como molde para reparar
los daños. En este proceso, un complejo
enzimático se une al ADN y recorta los
Reparación de ambas cadenas del ADN extremos de una de las cadenas; así, la otra
Un tipo especialmente peligroso de daño en el cadena queda más larga, y a ella se une una
ADN ocurre cuando ambas cadenas se enzima denominada recombinasa, que ayuda
rompen y no queda alguna que pueda servir para que invada al ADN del cromosoma
como molde para la reparación; esto abre la hermano en el punto homólogo a su
posibilidad de que se produzcan daños secuencia; de esta manera, lo utiliza como
importantes para la célula; por ejemplo, que se molde para complementar su secuencia y
pierda información. reparar el daño.
.-Reparación por unión de extremos no Si bien es una manera más “limpia” y precisa
homólogos de reparación, este mecanismo solamente lo

utiliza la célula durante un breve periodo
La unión de extremos no homólogos (NHEJ)
después de la replicación del ADN, cuando los
es el mecanismo más simple para reparar este
cromosomas se encuentran todavía alineados
tipo de daños: los extremos de las cadenas se
y cerca uno de otro.
colocan juntas y se pegan. Puede
considerarse una manera de reparación rápida
pero “sucia”, ya que no se asegura de que se
restaure la secuencia o que los extremos
unidos realmente estuvieran cercanos antes
del daño. Sin embargo, resulta vital para la
célula, pues el tiempo es una prioridad;
además, este mecanismo puede actuar en
cualquier momento del ciclo celular.
.-Reparación por recombinación homóloga

Una forma más precisa de reparar las rupturas
en ambas cadenas del ADN es la
recombinación homóloga (HR). Los humanos
Figura 21. Diagrama comparativo entre reparación por
y muchos otros seres vivos poseemos dos escisión de bases (BER), reparación por escisión de
nucleótidos (NER), y reparación por mal apareamiento
copias de cada cromosoma; así, este de bases (MMR).
| 23
Figura 22. Diagrama comparativo

entre reparación por unión de
extremos no homólogos (NHEJ), y
reparación por recombinación
homóloga (HR).
Los mecanismos de reparación y las

ahora se multiplica más rápidamente y se
enfermedades
desprende del tejido de origen para
Los mecanismos de reparación del ADN están diseminarse hacia otras partes del cuerpo. Por
involucrados en una diversidad de procesos otro lado, muchas de las enzimas involucradas
que se llevan a cabo día con día. Debido a en la reparación del ADN están presentes en
esto, las células que presentan defectos en su grandes cantidades en las células con cáncer,
función son más susceptibles de presentar lo cual les permite sobrevivir a los daños
daños irreparables y, en consecuencia, ocasionados con el tratamiento (quimioterapia
favorecer el desarrollo de algunas o radioterapia), a pesar de que vayan
enfermedades. acumulando más daños que vuelven más
agresiva a la enfermedad.
.-Cáncer
Los mecanismos de reparación del ADN son

clave para el desarrollo de una de las
enfermedades que más afligen a la
humanidad: el cáncer. En primera instancia,
los defectos en alguno de los procesos .-
descritos anteriormente permiten que se

Figura 23. Esquema de formación de células
acumulen daños que poco a poco van
cancerígenas.
alterando el comportamiento de la célula, que
| 24
Envejecimiento prematuro .-Neurodegeneración
De manera natural, la edad nos hace más Debido a que algunos de los defectos en los
susceptibles a que nuestros sistemas de sistemas de reparación del ADN son
reparación cometan errores. De hecho, se congénitos –es decir, hereditarios–, pueden
piensa que el envejecimiento es resultado de tener repercusiones observables en etapas
la acumulación de daños no reparados. Por tal tempranas. Durante los primeros meses de
motivo, si los defectos en los sistemas de desarrollo del feto, cuando existe una gran
reparación ocurren temprano en una persona, proliferación, diferenciación y migración, las
esto se verá reflejado como un envejecimiento células son más susceptibles de presentar
prematuro. Existen diferentes enfermedades daños en el ADN y ocasionar enfermedades, lo
que se manifiestan así, tales como los cual es especialmente importante en las
síndromes de Hutchinson-Gilford, de Werner, células del sistema nervioso.
de Cockayne, y la enfermedad conocida como
Uno de los primeros hallazgos que
xeroderma pigmentosum. Aunque son
relacionaron la reparación del ADN con la
entidades clínicamente diferentes, comparten
neurodegeneración fue la enfermedad
la particularidad de deberse a defectos en los
conocida como ataxia telangiectasia, la cual se
sistemas de reparación del ADN.
caracteriza clínicamente por un gran deterioro
en la parte del cerebro que controla el
movimiento y el habla. Ahora se sabe que las
células en esta región son más sensibles al
daño y mueren debido a los defectos en la
estructura y función de la proteína.
Figura 24. Señalización de daños en ATM y ADN. En respuesta a

una ruptura de la doble hebra del ADN ( A ), ocurren varios eventos
simultáneos que finalmente activan la transducción de la señal ATM.
La ATM existe como un complejo multimérico inactivo que, en
respuesta al daño del ADN, sufre autofosforilación a un monómero
activo ( B ). Una variante de histona, la histona H2AX, presente en la
cromatina, se fosforila y sirve como plataforma de unión para los
factores de reparación. El complejo MRE11-RAD50-NBS1 se localiza
en la lesión de ADN junto con BRCA1 ( C ). El ensamblaje de este
complejo facilita la co-localización coordinada de ATM activo junto con
otros factores, incluidos MDC1 / NFBD1 y 53BP1. BRCA1, MDC1 y
53BP1 también se fosforilan de una manera dependiente de ATM ( D).
El ensamblaje de este complejo multiproteico facilita la respuesta
celular a una rotura bicatenaria del ADN. 53BP1, proteína 1 de unión a
p53; ATM, ataxia telangiectasia, mutada; BRCA1, asociado a cáncer
de mama 1; MDC1, mediador del punto de control de daños.
| 25
Genoma Complejidad de los Genomas
El genoma es el conjunto del material

Eucariotas
hereditario de un organismo, la secuencia de Los genomas de la mayoría de eucariotas son
nucleótidos que especifican las instrucciones grandes y más complejos que los de
genéticas para el desarrollo y funcionamiento procariotas. El gran tamaño de los genomas
del mismo y que son transmitidas de eucariotas no resulta sorpréndete, puesto que
generación en generación, de padres a hijos. uno debe esperar encontrar mas genes en
En él, además de los genes propiamente organismo que son más complejos. Sin
dichos, se incluyen regiones espaciadoras, embargo, el tamaño del genoma de muchos
regiones reguladoras, restos de genes antaño eucariotas no parece estar relacionado con su
funcionales y muchas otras secuencias de complejidad genética. Por ejemplo, los
función o papel todavía desconocido, si es que genomas de las salamandras y los lirios
tienen alguno. contiene diez veces más cantidad de ADN que
El genoma es el conjunto de instrucciones la encontrada eb el genoma humano, u estos
genéticas que se encuentra en una célula. En organismos no son diez veces más complejos
los seres humanos, el genoma consiste de 23 que los seres humanos.
pares de cromosomas, que se encuentran en

el núcleo, así como un pequeño cromosoma
que se encuentra en las mitocondrias de las
células. Cada conjunto de 23 cromosomas
contiene aproximadamente 3,1 mil millones de
bases de la secuencia de ADN.
Figura 26. Complejidad de los genomas eucariotas.
Esta aparente paradoja se resolvió por el

descubrimiento de que los genomas de la
mayoría de células eucariotas contienen no
Figura 25. Genoma como instrucciones genética.
| 26
solo genes funcionales sino también sino no codificantes que separa a los exones se
también grandes cantidades de ADN que no denominan secuencias intermedias o
codifican proteínas. La diferencia de tamaño intrones. El gen completo se transcribe para
del genoma entre la salamandra y del hombre producir una molecula larga de ARN en la que
refleja las grandes cantidades de ADN no los intrones se han retirado mediante Splicing
codificantes en lugar de mas genes. La o empalme, por lo que solo los exones se
presencia de grandes cntidades de secuencias encuentran en el ARNm.
no codificantes, es una propiedad universal de
los genomas de eucariotas complejos. Se cree
que el genoma humano contiene
aproximadamente 20.000-25.000 genes.
Gen
Es un segmento de ADN que se expresa para

dar un producto funcional, que puede ser un
Figura 28. Estructura de un gen eucariota promedio.
ARN (ribosómico y transferente) o un
polipéptido.
La estructura intrón-exón de muchos genes
eucariotas es complicada, siendo la cantidad
de ADN en las secuencias de los intrones con
frecuencia más grande que la de los exones.
Por ejemplo: un gen humano promedio
contiene aproximadamente 9 exones,
interrumpidos por 8 intrones y distribuido a lo
largo de aproximadamente 30.000 (30 kb)
pares de bases de ADN genómico. Los exones
generalmente suman solo unos 2.5 kb
incluyendo las regiones de los extremos 5´ y
Figura 27. Gen y ADN. 3´ del ARNm que no se traducen en proteínas
(regionse 5´y 3´no traducidas o UTR). Los
La estructura de la mayoría de los genes
intrones por tanto comprenden más del 90%
eucariotas poseen a su vez, grandes
del gen humano promedio.
cantidades de ADN no codificantes. Es asi que
las secuencias de ADN codificantes se Los intrones están presentes en la mayoría de
denominan exones, y las secuencias de ADN genes eucariotas complejos, aunque no son
| 27
universales. Casi todos los genes de las Secuencias de ADN repetitivas
histonas, por ejemplo, carecen de intrones, por
Son secuencias de ADN altamente repetitivas,
lo que claramente los intrones no son
no codificantes, que contribuyen al tamaño del
necesarios para la función del gen en las
genoma de las eucariotas. Estas secuencias
células eucariotas.
pueden estar de cientos a miles de copias por
A pesar que la mayoría de intrones no genoma.
especifican la síntesis de un producto proteico,
Repeticiones de secuencias sencillas
algunos realizan diversas actividades celulares
relevantes. Muchos intrones codifican para Son repeticiones en tándem de hasta miles de
ARN funcionales, como las pequeñas copias de secuencias cortas, que varían desde
moléculas de ARN nucleolar que intervienen 1 hasta 500 nucleótidos. Constituye
en el procesamiento del ARN ribosómico, y los aproximadamente el 10 % del genoma de
microARN que actúan como reguladores eucariotas superiores. Los ADN de secuencia
destacados de la expresión génica de las sencilla no se transcriben y no proporcionan
células eucariotas. De igual modo los intrones información genética funcional. Algunos, sin
contienen secuencias reguladoras que embargo representan papeles importantes en
controlan la transcripción y el procesamiento la estructura cromosómica.
del ARNm. Por otra parte la presencia de
Estas Regiones repetitivas, tienen una
intrones permite la formación de distintas
localización cromosómica preferentemente en
combinaciones de exones que hacen posible
los centrómeros y los telómeros. Atendiendo a
la síntesis de distintas proteínas a partir de un
la unidad de repetición estas secuencias se
mismo gen.
denominan:
Además se cree que los intrones han jugado
 Satélites. La unidad de repetición oscila
un papel importante en la evolución, facilitando
ente 100 y 10.000 nucleótidos, típico en
la recombinación entre regiones codificantes
centrómeros.
de proteínas de distintos genes (proceso
 Minisatelites o polimorfismos VNTR. La
conocido como arrastre de exones). Los
unidad de repetición es menor, alrededor
exones con frecuencia codifican dominios de
de 7-100 nucleótidos. Así según el número
proteínas funcionales, de modo que la
de repeticiones de esta secuencia base.
recombinación entre intrones de diferentes
Los polimorfismos en longitud varían entre
genes daría lugar a nuevos genes con nuevas
500 y 10.000 nucleótidos.
combinaciones de secuencias codificantes de
proteínas.
| 28
 Microsatelites o polimorfismos STR. La es decir, son capaces de moverse a puntos
unidad de repetición esta formada por 2-6 distinto en el ADN genómico, por medio de la
nucleótidos, y según el numero variable de transcriptasa inversa.
repeticiones los polimorfismos STR oscilan
Las secuencias SINE (Short interspersed
entre 100 y 500 nucleótidos.
elements) poseen una longitud de 100 a 300
Tanto mini- como microsatélites se han pares de bases, es aproximadamente el 13%
utilizado, mediante análisis por PCR i RFLP, del genoma humano, unas 1,5 millones de
en pruebas forenses, de paternidad y estas secuencias se encuentran dispersas a
parentesco, y asesoramiento genético través del genoma, aunque se transcriben en

mediante análisis de ligamiento. Ambos tipos ARN no codifican proteínas y su función es
de repeticiones pueden incluir prequeñas desconocida.

variaciones de la secuencia base. Familia de secuencias “Alu”, las secuencias
SINE están representadas en el ser humano
por la familia de secuencias Alu, llamadas asi
porque presenta en sus extremos sitios de
restricción para la enzima Alu I. se encuentran
generalmente en regiones cromosómicas ricas
en genes activos. Son ricas en G + C. Tienen
una estructura especial porque presenta una
repetición directa de 130 pb y una secuencia
insertada, además de un promotor para la
Figura 29. Ejemplo de secuencias repetitivas en ARN polimerasa III. La secuencia Alu parece
tandém.
origiinada a partir del ARN 7SL, de 300
Retrotransposones nucleótidos, que está relacionado con la
SINE y LINE, son secuencias repetidas de síntesis de proteínas de membrana.
ADN que se encuentran dispersas en el Los LINE (long interspersed elements)

genoma, en lugar de estar repetidas en humanos, poseen una longitud de 4-6 kb,
tándem. Estos elementos dispersos aunque muchas secuencias repetidas
contribuyen importantemente en el tamaño del derivadas de LINE son más cortas, con un
genoma, aproximadamente el 45% de este. tamaño aproximado de 1 kb. Existen
Estas secuencias a su vez son ejemplos de aproximadamente 8.500 repeticiones de
elementos transponibles (retrotransposones), secuencias LINE en el genoma, constituyendo
| 29
Figura 30. Esquema del proceso de

retrotransposición de las Alus. Aparte del
primer paso, que consiste en la transcripción de
las Alus mediante ARN-pol-III (transcripción
mediante ARN-pol-II en el caso de los LINE1),
este modelo se puede aplicar también a los
elementos LINE1. El segundo paso, muestra la
transcripción reversa “in situ” (TPRT: Target-
Primed Reverse Transcription; Lin y Levin, 1997).
La endonucleasa corta la secuencia
(preferentemente en 3’-AA/TTTT-5’) y el ARNm
del elemento se fija con su cola de poli-A en el
extremo 3’ del corte abierto, el cual debe de ser
rico en T. Después de la transcripción reversa, se
produce un segundo corte en la hebra contraria y
el ligamiento que cierra el ADN (ilustración
adaptada de Batzer y Deininger, 2002).
el 21% del ADN humano. Los LINE se

transcriben y al menos uno de ellos codifican
para proteínas, pero al igual que los SINE, no
poseen una función conocida en la fisiología
celular.
Transposones de ADN
Elementos semejantes a retrovirus
Estos elementos se mueven por el genoma
también se mueven dentro del genoma por
siendo copiados y reinsertados como
transcripción inversa. En los humanos estos
secuencias de ADN, en lugar de moverse
elementos varian desde 2-10 kb de longitud.
mediante la transcripción inversa. En el
Existen aproximadamente 450.000 elementos
genoma humano existen unas 300 copias de
semejantes a retrovirus en el genoma humano,
transposones de ADN, variando desde 80 a
lo que constiutye aproximadamente el 8%.
3000 pares de bases de longitud. Contribuyen
aproximadamente al 3 % del genoma humano.
| 30
Pseudogenes y Duplicación génica
Otro de los factores que favorecen al gran

tamaño de los genomas eucariotas es que
algunos genes están presentes en múltiples
copias, algunas de las cuales frecuentemente
son afuncionales. En algunos casos, múltiples
copias de genes son necesarias para producir
ARN o proteínas requeridas en grandes
cantidades, como los ARN ribosómicos o las
histonas. En otros casos, miembros concretos
de un grupo de genes relacionados
(denominados una familia genética) pueden
ser transcritos en diferentes tejidos o en
diferentes etapas del desarrollo. Por ejemplo,
las subunidades α y β de la hemoglobina se
encuentran codificadas por familias de genes
en el genoma humano, con diferentes
miembros de esa familia expresados en el
tejido embrionario fetal y tejidos adultos. Los
Figura 31. Pasos de transposición.
Representación del mecanismo de transposición miembros de muchas familias de genes se
que realiza la transposasa propuesta para agrupan en una región de ADN; los miembros
elementos Tc1 / mariner . El proceso comienza de otras familias están dispersas en
con la unión de dos monómeros de transposasa a
cromosomas diferentes.
los TIR, formando el complejo de un solo extremo
. Luego, los extremos del transposón se unen Las familias de genes se cree que han surgido
mediante ambos monómeros de transposasa que
de la duplicación de un gen ancestral original,
forman un dímero, generando el Complejo Paired-
divergiendo los diferentes miembros de una
End , y tiene lugar la escisión del transposón.
Finalmente, el dímero de la transposasa reconoce
familia como consecuencia de mutaciones
un dinucleótido TA, se une a él y forma el Target durante la evolución. Tal divergencia puede
Capture Complex para realizar la inserción. desembocar en la evolución de proteínas
relacionadas capaces de funcionar en tejidos
diferentes en diferentes etapas del desarrollo.
Por ejemplo las globinas fetales presentan una
| 31
mayor afinidad para el O2 que las globinas Las duplicaciones génicas pueden surgir por
adultas (una diferencia que permite al feto dos mecanismos diferentes. La primera es la
obtener oxigeno de la circulación materna). duplicación de un segmento de ADN, que
puede resultar en la transferencia de un bloque
Como cabría esperar, sin embargo, no todas
de ADN a una nueva localización en el
las mutaciones favorecen a la función del gen.
genoma. Se estima que dichas duplicaciones
Algunas copias genéticas presentan
de segmentos de ADN de entre 1 kb y 50 kb,
mutaciones sustanciales que ocasionan la
forman el 5% del genoma humano. Por otro
perdida de la capacidad para producir un
lado, los genes pueden duplicarse mediante
producto genético funcional. Por ejemplo, las
transcripción inversa de un ARNm. Seguido de
familias de genes humanos de α y β globina
integración de la copia de ADNc en nuevo
contienen dos genes que han sido
punto cromosómico. Este modo de duplicación
desactivados por mutaciones. Tales copias no
génica, análogo a la transposición de
funcionales llamadas pseudogenes,
elementos repetitivos a través de
representan reliquias evolutivas que aumentan
intermediarios de ARN, resulta en la formación
considerablemente el tamaño de los genomas
de copias genéticas que carecen de intrones y
eucariotas si hacer una contribución genética
que carecen también de las secuencias
funcional. Estudios recientes han identificado
cromosómicas normales que dirigen la
más de 20.000 pseudogenes en el genoma
transcripción de un gen en ARNm. Como
humano. Puesto que se asume generalmente
resultado, la duplicación de un gen por
que se trata de una estimación a la baja. Es
transcripción inversa generalmente da lugar a
probable que nuestro genoma contenga
una copia génica inactiva denominada
muchos más pseudogenes que genes
pseudogen procesado. S estima que existen
funcionales.
varios miles de pseudogenes procesados en el
genoma humano.
Figura 32. Grupo de alfaglobina en el

cromosoma 16 como ejemplo de
pseudogenes. Adaptado de Thompson
Genetics in Medicine, 8th Edition.
| 32
Autoevaluación Responda brevemente las

siguientes preguntas Bibliografía
1.- Defina nucleósido, nucleótido, y ácidos
nucleicos.
2.- Describa la estructura y composición  Cooper G. M, Hausman R. E. 2015. La
química del ADN. célula. 6th ed. MARBAN S.L
3.- Mencione las bases nitrogenadas que se
 Gerald Karp (2011). Biología celular y
encuentran en los ácidos nucleicos.
molecular. 6º Edición. Edit McGrawHill
4.- ¿Que ocurría si…
 McKinnon, P. J. 2004. ATM and ataxia
a.- durante la replicación del ADN en
eucariotas solo existiese un único origen telangiectasia. Embo reports. Consultado
de replicación. en;https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/article
b.- durante la replicación del ADN no se s/PMC1299121/
incorporaran enzimas topoisomerasas.
 Zhang X., Gingeras T., Weng Z. 2019.
5.- ¿En qué sentido se da la replicación del
ADN? Genome-wide analysis of polymerase III-
transcribed Alu elements suggest cell-type-
6.- Explique los eventos que ocurren a nivel de
la horquilla de replicación. specific enhancer function. Genome
7.- ¿De donde proviene la energía necesaria Research. ncbi.com
para la escisión de las bases mal apareadas
durante la reparación de errores producidos en  Kimball, J. W. (31 de octubre de 2015).
la replicación del ADN? DNA repair (Reparación del ADN). En
8.- Explique porque tener un genoma más Kimball's biology pages. Consultado en
grande no implica que sean organismos de
https://www.biology-
mayor complejidad
pages.info/D/DNArepair.html#DSBs.
9.- Defina genoma, gen, intrón y exón.
10.- Mencione ejemplos de secuencias de  Dexheimer, T. S. (2013). DNA repair
ADN no codificantes repetidas en tándem pathways and mechanisms (Vías y

mecanismos de reparación del ADN). En L.
A. Matthews, S. M. Cabarcas y E. Hurt
(Eds.), DNA repair of cancer stem cells (p.
21). http://www.springer.com/978-94-007-
4589-6
 Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M.,

Roberts, K. y Walter, P. (2002). DNA repair
| 33
(Reparación del ADN). En Molecular
biology of the cell (4ta ed.). Nueva York,
NY: Garland Science. Consultado en
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK268
79/#_A840_.
 Galian, J. 2014. Estudio de la evolucion del

espaciador ribosomal intergénico 45S
(IGS45S) y otras familias de ADN repetido
en plantas, mediante técnicas moleculares
y citogenéticas. Universidad de Murcia.
 Muñoz, M., Garcia J. 2010. DNA

Transposons: Nature and Applications in
Genomics. Current Genomics. ncbi.com
 Bourque G et al. Ten things you should

know about transposable elements. 2018.
Genome Biol.
 Beauregard, A., Curcio, M., Belfort M. 2009.

The take and give between
retrotransposable elements and their host.
HHS Public Access. ncbi.com
 National Human Genome Research

Institute. Genetics glossary. genome.com
 Introducción a la expresión génica.

khanacademy.org
 Revisión y reparación del ADN.

khanacademy.org
| 34
Respuestas de la (Eucariotas)
topoisomerasas
la ausencia
causaría que
de
los
autoevaluación
1.- Nucleósido: Base de purina o
cromosomas completos tendrían que
rotar continuamente durante la síntesis
de ADN.
pirimidina unida a un azúcar (ribosa o
desoxirribosa). Nucleótido: nucleósido
fosforilado. Ácido nucleico: polímero de 5.- 5´-3´
nucleótidos.
2.- Páginas 7-10 6.- Páginas 11-18
3.- ADN: Adenina, Guanina, Citosina,
Timina. ARN: Adenina, Guanina, Citosina, 7.- La energía necesaria proviene de
Uracilo. la escisión del grupo fosfato que se
4.- encuentra unido al nucleótido recién
a.- Tomaría mucho tiempo a la incorporado (el mal apareado).
maquinaria enzimática poder replicar
completamente el genoma del 8.- Páginas 25-26
individuo, aproximadamente 30.000
minutos, problema que se incrementa 9.- Genoma: totalidad de material
por el hecho de que la replicación del hereditario (conjunto de cromosomas)
ADN de mamíferos es diez veces propios de una una especie u
menor que en bacterias, posiblemente organismo que representa toda la
como resultado del empaquetamiento información genética presente en las
del ADN eucariota en cromatina. células. Gen: unidad básica
b.- (1b) En caso de que la molécula de hereditaria, constituida por ADN, que
ADN a replicar fuese circular codifica para un producto final
(bacterias), una vez que las dos (proteína o ARN). Intrón: secuencia
hebras de ADN están desenrolladas, el no codificante que interrumpe los
ADN que se encuentra en la cabeza exones de un gen. Exón: segmento
de la horquilla de replicación es codificante de un gen que se incluye
forzado a rotar en dirección opuesta, en un ARN sometido a corte y
de forma que las moléculas se enrollan empalme.
en sobre si mismas. (2b) En caso de 10.- Satélites, Minisatélites.
moléculas de ADN lineares Microsatélite
|1
|2

Capítulo 8: SÍNTESIS DE PROTEÍNAS
Miembros preparadores docentes: Boschetti Saer María Laura
Edición General: Boschetti María y Hernández Carmelo.
2020
|3

Capítulo 8: SÍNTESIS DE PROTEÍNAS


8. SÍNTESIS DE PROTEÍNAS |4
 Los distintos ARNt poseen un

plegamiento similar en forma de L, que
TRADUCCIÓN DE PROTEÍNAS
es necesario para el correcto anclaje
Las proteínas se sintetizan a través de un de los ribosomas durante la
molde de ARNm mediante un proceso traducción.
altamente conservado a lo largo de la  Necesitan dos regiones distintas y
evolución. Todos los ARNm se leen en separadas en la molécula, para poder
dirección 5’ – 3’, y las cadenas polipeptídicas cumplir con su papel como
se sintetizan desde el extremo amino terminal adaptadores.
al carboxilo terminal. La traducción tiene lugar  Poseen una secuencia CCA en su
en los ribosomas, siendo los ARNt los extremo 3’ al cual los aminoácidos se
adaptadores entre el molde de ARNm y los unen covalentemente.
aminoácidos incorporados a la proteína. Es  La secuencia de ARNm es reconocida
por esto, que la síntesis de proteínas implica por el Lazo Anticodón, localizada en el
tres tipos de moléculas de ARN (ARNm, otro extremo del ARNt plegado.
ARNt y ARNr) además de varias proteínas
necesarias para su desenvolvimiento.
ARN DE TRANSFERENCIA
Al momento de la traducción, cada uno de los

20 aminoácidos debe ser alineado con su
correspondiente codón del ARNm molde, y es
en dicho proceso, donde el ARN de
Estructura del ARNt
transferencia entra en juego y permite esa
unión o alineación. Incorporación de los aminoácidos con
los ARNt:
Características Generales:
La unión del aminoácido al ARNt
 Los ARNt tienen una longitud de
específico es mediado por un grupo de
aproximadamente 70-80 nucleótidos,
enzimas llamadas Aminoacil ARNt
con una estructura en forma de hoja
sintetasas. La reacción ocurre en dos
de trébol.
etapas:
|5
1) El aminoácido es activado mediante RIBOSOMA

una reacción con ATP formándose un
Son el lugar donde se sintetizan las
intermediario Aminoacil AMP.
proteínas. Se caracterizaron como partículas
2) El aminoácido activado se une
subcelulares mediante ultracentrifugación de
posteriormente al extremo CCA 3’ del
células lisadas y normalmente se designan
ARNt aceptor, liberándose el AMP.
de acuerdo con su coeficiente de
Las dos reacciones son catalizadas por la sedimentación: 70S para los procariotas y
Aminoacil ARNt sintetasa, las cuales deben 80S para los eucariotas, los cuales son de
ser enzimas muy selectivas que reconozcan mayor tamaño. La estructura general de los
específicamente tanto a los aminoácidos ribosomas procariotas y eucariotas es similar,
individuales como la secuencia de bases aunque difieren en algunos detalles en
específica de los ARNt receptores. Éstas cuanto al ARNr y al número de proteínas, que
tienen una actividad correctora o Lectora de se evidencia a continuación en la siguiente
pruebas por la cual es Aminoacil AMP imagen:
incorrecto es hidrolizado antes de unirse al
ARNt en la segunda etapa.
Estructura ribosómica en Procariotas y

Eucariotas.
Unión del aminoácido al ARNt
La evidencia de actividad catalítica del ARNr
se obtuvo con los experimentos de Harry
Noller y colaboradores en 1992, los cuales
|6
demostraron que la subunidad grande del ribosoma se desplaza por el ARNm hasta
ribosoma es capaz de catalizar la formación encontrar un codón de iniciación AUG.
de enlaces peptídicos.
ORGANIZACIÓN DE LOS ARN

MENSAJEROS E INICIO DE LA
TRADUCCIÓN
La región 5’ terminal de los ARNm de

procariotas y eucariotas son secuencias no
codificadoras, conocidas como regiones 5’ no
codificantes (UTR). Los ARNm que codifican
varios polipéptidos se llaman policistrónicos,
mientras que los que codifican un único
polipéptido se denominan monocistrónicos. ARNm procariota y eucariota.
Los ARNm procariotas normalmente son
policistrónicos, mientras que los eucariotas
son monocistrónicos, y contienen una MECANISMO DE LA TRADUCCIÓN
caperuza de 7-metilguanosina en el extremo
La dividiremos en tres etapas: Iniciación,
5’ y en el extremo 3’ la cola Poli-A.
elongación y terminación. Como es de
El lugar de iniciación de los ARNm esperarse, este proceso no es exactamente
procariotas es una secuencia llamada igual para procariotas y eucariotas, sin
Secuencia Shine-Dalgarno, que precede al embargo, en ambas el primer paso es la
codón de iniciación AUG. La unión de un metionil ARNt específico y el
complementariedad de bases entre la ARNm a la subunidad menor del ribosoma.
secuencia Shine-Dalgarno y la secuencia del Así mismo, la subunidad mayor del ribosoma
ARNr 16S cerca del extremo 3’ alinea el se unirá al complejo, formando un ribosoma
ARNm con el ribosoma. En cambio, en las funcional sobre el cual tiene lugar la
células eucariotas, el ARNm se une a la elongación de la cadena polipeptídica.
subunidad 40S del ribosoma por la caperuza
En procariotas, la traducción comienza
de 7-metilguanosina en el extremo 5’, como
cuando una subunidad ribosómica 30S se
se mencionó anteriormente, por lo que el
une a dos factores de iniciación, IF1 e IF3.
Luego, el ARNm, el N-formilmetionil ARNt
|7
iniciador e IF2 (unido a GTP. Luego, se libera En Eucariotas, se requieren al menos 11

IF1 e IF3 y la subunidad 50S se asocia al proteínas llamadas factores de iniciación
complejo, lo que induce la hidrólisis del GTP eucarióticos (eIFs). Los factores eIF1, eIF1A,
unido y la liberación de IF2 unida a GDP, eIF3 y eIF5 se unen a la subunidad
formándose el complejo de asociación 70S, ribosómica 40S, y eIF2 en un complejo con
preparado para catalizar la formación de un GTP, se une al metionil ARNt iniciador, para
enlace peptídico en la etapa de elongación. formar un complejo a su vez con la
subunidad 40S. El ARNm es reconocido y
dirigido hacia el ribosoma por los factores
eIF4. El cap del extremo 5’ es reconocido por
eIF4E, que forma un complejo con eIF4A y
eIF4G. eIF4G se une a su vez a la proteína
de unión a Poli-A (PABP), que está asociado
con la cola Poli-A en el extremo 3’ del ARNm.
Así mismo, los factores de iniciación eIF4E,
eIF4G en asociación con eIF4A y eIF4B
dirigen el ARNm hacia la subunidad
ribosómica 40S, mediante interacción con los
factores eIF4G y eIF3. A continuación, el
ribosoma se desplaza sobre el ARNm para
identificar el primer codón de iniciación AUG.
Éste desplazamiento requiere energía y se
acompaña de la hidrólisis de ATP. Cuando el
AUG de iniciación es identificado, eIF5
desencadena la hidrólisis del GTP unido a
eIF2, seguido de la liberación de eIF2 (unido
a GDP) y otros factores. Luego, la subunidad
ribosómica 60S se une al complejo 40S
gracias a la acción de eIF5B.
Inicio de la traducción en Procariotas.

|8
dirigido hacia el sitio A por eEF1α (EF-tu en

procariotas) unido a GTP. Luego, va a ocurrir
la hidrólisis del GTP, por lo que eEF1α (unido
a GDP) sale del ribosoma, dejando a ese
segundo aminoacil ARNt situado en el sitio A.
Se forma el enlace peptídico entre el metionil
ARNt iniciador en el sitio P y el segundo
aminoacil ARNt en el sitio A, dando como
resultado la transferencia de la metionina al
aminoacil ARNt en el sitio A, formándose un
peptidil ARNt en esta posición y dejando un
ARNt libre en el sitio P.
Luego, comienza el proceso de translocación,

donde se requiere otro factor de elongación
que es eEF2 (EFG en procariotas), el cual
acoplado a una hidrólisis de GTP, va a
permitir que el ribosoma se desplace tres
nucleótidos a lo largo de ARNm. Este
movimiento transloca el peptidil ARNt al sitio
P y al ARNt libre al sitio E, dejando un sitio A
vacío para la unión de un nuevo aminoácido.
Inicio de la traducción en eucariotas.
Posteriormente pasamos a la parte de la

elongación, que en este caso, dicho proceso
es muy similar en procariotas y eucariotas.
El ribosoma presenta tres sitios de unión al

ARNt, llamados P (Peptidil), A (Aminoacil) y E
(Liberación). El N-formilmetionil ARNt
iniciador se sitúa en el sitio P, dejando un
sitio A libre. El segundo aminoacil ARNt, es
|9
Terminación de la traducción.
REGULACIÓN DE LA TRADUCCIÓN
Uno de los mecanismos de regulación

traduccional es la unión de proteínas
represoras, que bloquean la traducción a
secuencias específicas del ARNm. Uno de
los mejores ejemplos en células eucariotas,
es la regulación de la síntesis de Ferritina.
El ARNm contiene una secuencia de

respuesta al hierro (IRE) cerca del cap del
Elongación de la traducción . extremo 5’. En presencia de una cantidad
adecuada de hierro, la traducción del ARNm
Para la etapa de terminación, un codón de
ocurre normalmente, sin embargo, si la
terminación (UAA, UAG o UGA) se coloca en
cantidad de hierro disminuye, una proteína
el sitio A del ribosoma, el cual va a ser
denominada proteína de unión a la secuencia
reconocido por factores de liberación. En
de respuesta de hierro (IRP) se une a la
células procariotas podemos encontrar: RF1
secuencia IRE bloqueando la traducción al
que reconoce a UAA y UAG y RF2 que
interferir en la unión del ARNm a la
reconoce UAA o UGA. En eucariotas sólo
subunidad ribosómica 40S.
encontramos a eRF1 que reconoce los tres
codones de terminación. El resultado, será la
liberación de la cadena polipeptídica
completa, seguido de la disociación del ARNt
y del ARNm del ribosoma.
Regulación a través de la Ferritina.

| 10
Otro de los mecanismos de regulación, se da proceso de autoensamblaje. En ausencia de

a través de la regulación mediante la chaperonas, las cadenas polipeptídicas no
fosforilación de eIF2 y eIF2B. En este caso, la plegadas o parcialmente plegadas son
forma activa de eIF2, que forma un complejo inestables en la célula y con frecuencia se
con GTP, dirige al metionil ARNt iniciador al pliegan de forma incorrecta o se agregan
ribosoma. Luego, eIF2 es liberado del formando complejos insolubles. Una vez que
ribosoma en su forma inactiva unida a GDP. la síntesis de la cadena polipeptídica finaliza,
Para continuar la traducción, eIF2 debe ser la proteína completa es liberada del ribosoma
reactivado por eIF2B, que estimula el y estará preparada para plegarse en la
intercambio de GDP por GTP. La traducción conformación tridimensional adecuada.
puede ser inhibida por la acción de proteínas
quinasas reguladoras, que fosforilan a eIF2 o
a eIF2B. Estas fosforilaciones bloquean el
intercambio de GTP por GDP, de modo que
eIF2/GTP no puede ser regenerando.
PLEGAMIENTO Y PROCESAMIENTO
DE PROTEÍNAS
CHAPERONAS Y EL PLEGAMIENTO DE
PROTEÍNAS
Son proteínas que facilitan el plegamiento de

otras proteínas. Ellas actúan como Papel de las chaperonas durante la traducción.
catalizadores que facilitaran el ensamblaje Así mismo, las chaperonas también
sin formar parte del complejo ensamblado. Es estabilizan los polipéptidos no plegados o
importante saber que las chaperonas no parcialmente plegados, transportándolos
proporcionan una información adicional para desde el citosol hasta la mitocondria. Las
el plegamiento de las proteínas en su chaperonas citosólicas estabilizan la
conformación tridimensional; esta viene configuración o conformación extendida. Las
determinada exclusivamente por la secuencia chaperonas mitocondriales facilitan el
de aminoácidos. Más bien, las chaperonas
transporte y posterior plegamiento de la
catalizan el plegamiento protéico ayudando al cadena polipeptídica dentro del orgánulo.
| 11
Papel de las chaperonas en el transporte de Acción secuencial de las chaperonas.

proteínas.
Existen dos familias de proteínas

ENZIMAS QUE CATALIZAN EL
chaperonas, las chaperonas Hsp70 y las
PLEGAMIENTO PROTÉICO
chaperoninas, que actúan en una vía de
plegamiento protéico general tanto en células A) Proteína disulfuro isomerasa (PDI):
procariotas como eucariotas. Se pueden Cataliza la formación de puentes

encontrar miembros de ambas familias en el disulfuro a través de la transferencia
citosol y en los orgánulos subcelulares de las de equivalentes de oxidación a su
células procariotas y eucariotas. Las sustrato. Promueve el intercambio
chaperonas de la familia Hsp70 se unen y rápido entre parejas de puentes de
estabilizan las proteínas no plegadas durante disulfuro, para que la proteína
la traducción. El péptido nativo se dirige a adquiera el patrón de puentes de
chaperonas de la familia chaperoninas, disulfuro compatible con una
donde ocurre finalmente el plegamiento. La conformación estable. La PDI es una
hidrólisis de ATP se necesita para liberar el chaperona crítica y un catalizador del
polipéptido extendido de Hsp70 y para el plegamiento protéico en el retículo
plegamiento en el interior de las endoplasmático y es una de las
chaperoninas. proteínas más abundantes en dicho
orgánulo.
| 12
incluyendo la secreción de proteínas tanto en

células procariotas como eucariotas, así
como las proteínas que van a formar parte de
la membrana plasmática, lisosomas,
mitocondrias, etc. Estas proteínas son
marcadas con secuencias amino terminales
Actividad de la proteína disulfuro isomerasa.
para transportarse a sus destinos finales, y
estas secuencias son eliminadas de la
B) Peptidil prolil isomerasa: Cataliza la cadena polipeptídica por escisión proteolítica
isomerización entre la conformación cuando atraviesan las membranas. Un
cis y trans de los enlaces peptídicos en ejemplo de esto, se encuentra en la
los que interviene la prolina. La prolina secuencia señal, que dirige la translocación
es un aminoácido especial en el que el de las cadenas polipeptídicas a través de la
equilibrio entre las conformaciones cis membrana plasmática de bacterias o hacia el
y trans del enlace peptídico que interior del retículo endoplasmático en
precede a un residuo de prolina, está eucariotas. En ella, secuencias de
ligeramente desplazado hacia la aminoácidos hidrofóbicos en el extremo
conformación trans. Esta enzima está amino terminal de la cadena polipeptídica, se
ampliamente distribuida tanto en insertan en un canal de la membrana tras su
células procariotas como eucariotas y síntesis en el ribosoma. El resto de la
cataliza el plegamiento de varias proteína es translocada a través del canal y
proteínas. la secuencia señal es eliminada por la

actividad de una peptidasa señal, liberándose
una proteína madura y translocada.
ESCISIÓN DE PROTEÍNAS
La escisión de cadenas polipeptídicas

(proteólisis) es una etapa importante en la
maduración de muchas proteínas. Las
modificaciones proteolíticas de los extremos
amino también tienen un papel fundamental
en la translocación de muchas proteínas a
través de las membranas celulares,
| 13
Papel de la secuencia señal en la translocación a La mayoría de las glicoproteínas de las

través de la membrana. células eucariotas serán destinadas a la
secreción o a formar parte de la membrana
plasmática. Estas proteínas se transfieren
GLICOSILACION
normalmente al interior del retículo
Es la modificación de proteínas por la adición endoplasmático mientras la proteína es
de carbohidratos. Las proteínas a las que se sintetizada.
les ha añadido una cadena de glúcidos
La glicosilación se inicia también en el
(llamadas glicoproteínas) normalmente son
retículo endoplasmático antes de que termine
secretadas o se localizan en la superficie
la traducción de la proteína. La primera etapa
celular, sin embargo, algunas proteínas
es la Adición, en dicho retículo
nucleares o citosólicas también están
endoplasmático, de un oligosacárido formado
glicosiladas. Los carbohidratos de las
por 14 residuos de aminoácidos a la cadena
glicoproteínas tienen funciones importantes
polipeptídica en crecimiento, el oligosacárido
en:
formado por dos N-acetilglucosaminas, nueve
A) El plegamiento de proteínas en el manosas y tres glucosas, el cual se une a un
Retículo endoplasmático. lípido (el dolicol fosfato)en la membrana del
B) La decisión del destino de las retículo endoplasmático. El oligosacárido es
proteínas a su compartimiento transferido desde el dolicol fosfato a un
intracelular residuo de asparragina de la cadena
C) Como sitio de reconocimiento en las polipeptídica.
interacciones célula-célula.
Las glicoproteínas se clasifican en dos

tipos:
a) N-glicoproteínas: Aquí los

carbohidratos se unen al átomo de
nitrógeno de la cadena lateral del
aminoácido asparragina.
b) O-glicoproteínas: Aquí el átomo de
oxígeno de los aminoácidos serina o
treonina es el sitio de unión de la cadena Síntesis de N-glicoproteínas.
glucídica.
| 14
REGULACIÓN DE LA FUNCIÓN DE
LAS PROTEÍNAS:
REGULACIÓN POR PEQUEÑAS

MOLÉCULAS
La mayoría de las enzimas son reguladas por

cambios en su conformación que provocan
modificaciones en su actividad catalítica. En
muchos casos estos cambios de
conformación se producen por la unión de
Inhibición feedback.
pequeñas moléculas como aminoácidos o
nucleótidos, que regulan la actividad b) Regulación de factores de
enzimática. Entre estos tenemos: traducción como eEF1α por la
unión de GTP: La forma unida a GTP
a) Inhibición feedback: Productos
es la conformación activa, mientras
finales de muchas rutas enzimáticas,
que la unida a GDP es la conformación
inhiben la enzima que cataliza la
inactiva. Un ejemplo de estos son las
primera etapa de su síntesis, de esta
proteínas celulares codificadas por el
manera se asegura una cantidad
oncogén ras, donde dicha proteína en
adecuada de producto y a su vez se
su forma activa unida a GTP, puede
evita su producción en exceso. Esta
interaccionar con su molécula diana e
retroinhibición es un ejemplo de
inducir la división celular. Es de gran
regulación alostérica, en la que la
importancia el estudio de las
molécula reguladora se une a un sitio
diferencias conformacionales entre la
de la enzima distinto del centro activo.
forma activa unida a GTP y la forma
La unión de esta molécula reguladora
inactiva unida a GDP, debido a las
modifica la conformación de la
mutaciones que se evidencian en los
proteína, con lo cual se produce un
genes ras, al mantenerse unidas al
cambio en su centro activo, afectando
GTP, propiciando la división celular sin
la actividad enzimática.
control alguno, contribuyendo así al
desarrollo del 20% de los cánceres en
los humanos.
| 15
FOSFORILACIÓN DE PROTEÍNAS reguladoras y dos catalíticas, siendo este su

estado inactivo. El AMPc se une a las
La fosforilación de proteínas, son procesos
subunidades reguladoras e induce un cambio
reversibles en el interior de la célula, y su
conformacional que provoca su disociación
función, al igual que la regulación alostérica,
de las subunidades catalíticas. Las
es activar o inhibir una gran variedad de
subunidades catalíticas libres son
proteínas celulares en respuesta a señales
enzimáticamente activas. Por lo tanto, el
ambientales. Esta fosforilación es realizada
AMPc actúa como un regulador alostérico,
por proteínas quinasas, las cuales catalizan
alterando las interacciones proteína-proteína.
la transferencia de un grupo fosfato desde el
ATP a la cadena lateral de la serina y la
treonina (específicamente llamadas proteína-
serina/treonina quinasas o proteína-tirosina
quinasas). Las proteínas fosfatasas catalizan
la eliminación mediante la hidrólisis de los
grupos fosfatos de estos mismos
aminoácidos.
Regulación de la proteína quinasa dependiente

de AMPc.
Proteínas quinasas y fosfatasas.

DEGRADACIÓN DE PROTEÍNAS
INTERACCIONES PROTEÍNA-PROTEÍNA
La cantidad de proteínas en la célula está
Muchas enzimas están reguladas por regulada no sólo por su tasa de síntesis sino
interacciones proteína-proteína. Un buen también por su tasa de degradación. La vida
ejemplo es la proteína quinasa dependiente media de las proteínas celulares es muy
de AMPc. Constituida por dos subunidades
| 16
variable, desde pocos minutos a varios días.

En células eucariotas existen dos rutas
principales que se encargan de la
degradación de proteínas: Vía de la
ubiquitina-proteosoma y la proteólisis
lisosómica:
a) Vía de la ubiquitina-proteosoma: Es
la ruta principal de la degradación
selectiva de proteínas en células
eucariotas. La ubiquitina es un
polipéptido formado por 76
aminoácidos, que se usa como
marcador de proteínas citosólicas y
nucleares para una rápida proteólisis.
La ubiquitina, primero, se activa por la
enzima E1. La ubiquitina activada se
transfiere a una de las distintas
enzimas conjugantes de la ubiquitina
Vía de la ubiquitina-proteosoma.
(E2). En la mayoría de los casos, la
ubiquitina se transfiere a la ubiquitina b) Proteólisis lisosómica: LA otra ruta
ligasa (E3), y luego a una proteína de degradación de proteínas en las
diana específica. Más moléculas de células eucariotas, supone la entrada
ubiquitina se añaden posteriormente y de proteínas a los lisosomas. Los
la proteína poliubiquitinada es lisosomas son orgánulos rodeados de
degradada por un complejo de membrana que contienen una serie de
actividad proteasa (proteosoma). En enzimas digestivas, incluyendo
este proceso la ubiquitina se libera, de distintos tipos de proteasas. Un
manera que puede utilizarse para otro mecanismo de captura de las
ciclo de degradación de proteínas. proteínas celulares hacia los
lisosomas, se denomina autofagia, el
cual se produce mediante la formación
de vesículas (autofagosomas) de
manera que pequeñas áreas del
| 17
citoplasma u orgánulos citoplasmáticos 2. ¿Cuál es la enzima que cataliza la

se rodean de membranas citosólicas. incorporación de los aminoácidos al
Estas vesículas se fusionan con los ARNt? ¿Qué otra función cumple?
lisosomas, y las enzimas lisosómicas 3. ¿Luego de qué evento ocurre el
digestivas se encargan de digerir su proceso de la translocación y qué
contenido. sucede durante el mismo?
4. ¿Cuáles son los codones de
terminación en la etapa de
terminación?
5. ¿Qué son las chaperonas y cómo se
clasifican?
6. ¿Cuál es la función de la proteína
disulfuro isomerasa (PDI)
7. Explique la vía de la ubiquitina-
proteosoma.
BIBLIOGRAFÍA
Cooper, G & Hausman, R (2011) La
Célula (5ª ed.) España: Marbán.
Capitulo 8. Síntesis de proteínas,

plegamiento y regulación
Autofagia.
Autoevaluación
Responde a las siguientes interrogantes para
reforzar conceptos ya aprendidos:
1. ¿Qué son los Ribosomas y como se

diferencian?
|1
|2

Capítulo 9: MICROSCOPÍA ÓPTICA, ELECTRÓNICA Y DE
FLUORESCENCIA

1ra edición: 2019
Miembro preparador docente: Chávez Ricardo.

Edición General: Álvarez Adonis, Chávez Ricardo y Hernández Carmelo.
2020
|3

Capítulo 9: Capítulo 9: MICROSCOPÍA ÓPTICA, ELECTRÓNICA Y DE
FLUORESCENCIA


9. MICROSCOPÍA ÓPTICA, ELECTRÓNICA Y DE FLUORESCENCIA
|4
comenzó a desarrollar en el siglo XIII con el

monje franciscano Roger Bacon. La utilidad
1. MICROSCOPIA ÓPTICA
de cualquier tipo de microscopio, no solo
depende de su capacidad de aumento sino,
El desarrollo de la biología celular y
más importante, de su capacidad para
molecular se produce en forma paralela a la
resolver detalles. Para el estudio del material
invención de instrumentos y técnicas
biológico se disponen de varios tipos de
biofísicas y bioquímicas que extienden los
microscopios, lo cuales se pueden clasificar
sentidos a nuevos límites y acrecientan el
básicamente de acuerdo al tipo de fuente
conocimiento de la estructura y
luminosa que usan, siendo el microscopio
funcionamiento de la célula. El acceso a este
óptico de campo claro, de uso común.
tipo de conocimientos resulta dificultoso pues
las células son pequeñas y transparentes. El
Este es un microscopio compuesto que
ojo humano no logra distinguir objetos
utiliza dos sistemas de lentes; el primero
menores a 50 micras (µm) de diámetro ni
produce una imagen amplificada del objeto, y
consigue resolver dos líneas separadas por
el segundo agranda la imagen formada por el
menos de 100 µm (es decir, se ven como una
primero. Para formar una imagen a partir de
sola línea). Se necesita del microscopio
un corte histológico usa luz visible, por esto la
óptico cuyo límite de resolución es de 0,2 µm
muestra debe ser lo bastante fina como para
y para estructuras más pequeñas, que midan
que el haz de luz pueda atravesarla. También
entre 0,4 y 200 nanómetros (nm), se requiere
se usan métodos de tinción, según las
del microscopio electrónico.
necesidades, con el fin de aumentar los
detalles en la imagen.
El microscopio es un instrumento básico
para el estudio de la Biología, ya que nos
El microscopio compuesto de uso común
permite percibir detalles de organismos y
también se conoce con el nombre
estructuras que no podrían ser observados
microscopio óptico en base a que sus
directamente, por simple inspección ocular.
propiedades derivan del empleo de lentes
Para observar elementos tan pequeños es
ópticas. Está constituido por cuatro grupos de
necesario disponer de lentes de aumento.
dispositivos o sistemas articulados de tal
Estas lentes se conocen desde tiempos de
manera que garantizan un funcionamiento
Arquímedes, pero la óptica como disciplina se
óptimo y ergonómico.
|5
1.1. Componentes del microscopio pudiéndose llegar, con ciertas
óptico. modificaciones, a 2000 y 3000 aumentos
(200 X-300 X).
 Sistema mecánico: Conjunto de
piezas que sirven de soporte a las
lentes: pie o base, columna,
mecanismo de enfoque, platina, Ojo Ocular
revolver, tubo). Imagen en el
microscopio
 Sistema óptico: Conjunto de lentes prisma

responsables del poder de aumento y Tubo
resolución (objetivos y ocular).
Objetivos
 Sistema de Iluminación: Elementos Preparación
que producen las radiaciones (luz Vástago o

brazo
visible o no) y transmiten, reflejan y
regulan tanto la intensidad como la Condensador
cantidad de rayos que van a incidir Pie o base

sobre el espécimen (lámpara o fuente
de iluminación, espejo, condensador y
diafragma).
Partes de un microscopio.
 Accesorios: Son aditivos que

1.2. Trayectoria de la luz en el
permiten extender las capacidades del microscopio.
instrumento (cámaras fotográficas, de
video, computadoras, accesorios para
El condensador proyecta un cono de luz
dibujar, entre otros).
sobre el espécimen que está siendo
examinado en el microscopio. Después de
El campo del microscopio está
atravesar la muestra, ese haz luminoso, en
intensamente iluminado, mientras que los
forma de cono, penetra en el objetivo y éste a
objetos observados aparecen más oscuros.
su vez proyecta una imagen aumentada en el
En general con este microscopio se pueden
plano focal del ocular, que nuevamente
alcanzar los 1000 aumentos (100X),
amplía dicha imagen siendo la que se percibe
|6
por la retina del ojo como una imagen situada condensar la luz sobre el espécimen.
a 25 cm de la lente ocular. La ampliación total
dada por un microscopio es igual al aumento  Objetivo: Tomando en cuenta el grado
del objetivo multiplicado por el aumento del de corrección de las aberraciones hay
ocular. dos categorías de objetivos para el
microscopio, los objetivos acromáticos
y los objetivos apocromáticos. En cada
categoría se distinguen aún dos
grupos, los objetivos secos y los
objetivos de inmersión.
Los objetivos difieren entre sí por la

naturaleza del medio interpuesto entre el
cubre-objeto de la lámina histológica y la
lente frontal del objetivo. En los objetivos
secos el medio interpuesto es el aire cuyo
índice defracción (n=1) es muy diferente del
índice del vidrio porta y cubre-objeto (n=1,5).
Por el contrario, en los objetivos de
inmersión el medio que separa al cubre -
Paso de la luz en el M.O
objeto de la lente frontal del objetivo es un
líquido cuyo índice de refracción es lo más
1.3. Función de los componentes del M.O
próximo al del vidrio. Este líquido puede ser
agua destilada (n=1,33) o mejor aún aceite
1.3.1. Sistema óptico de cedro, que posee un índice de refracción
(n=1,515) casi idéntico al del vidrio.
El lente que se encuentra más
cercano al espécimen se denomina La ventaja de los objetivos de inmersión
objetivo, tiene una distancia focal corta y, consiste en la disminución o eliminación de la
forma una imagen real y aumentada que refracción de los rayos luminosos entre el aire
es el objeto del segundo sistema de y el objetivo, en consecuencia la luminosidad
lentes denominado ocular. El de la imagen está aumentada, mientras que
condensador tiene la función de en los objetivos secos, está disminuida. El
|7
empleo de la inmersión aumenta el ángulo de serie y alineada. En la parte externa posee

apertura del objetivo y permite mayor grabadas las especificaciones y
resolución gracias a la captura de una mayor características.
cantidad de rayos luminosos refractados y
solo puede utilizarse con objetivos de mayor  Ocular: Es un tubo cilíndrico con
aumento (100 X). diafragma fijo en el centro y una lente
en cada extremo, la superior se
denomina lente ocular (produce
aumento de la imagen real del objetivo)
y la inferior lente colectora (aplana y
aclara el campo).
Objetivos
Tipo de lente
acromático
Longitud Tipos de objetivos. (a) Objetivo ac romático que
del tubo Grosor del contiene una lente frontal y dos pares internos, (b)
cubreobjetos objetivo semi -apocromático o fluorit a, con cuat ro pares
Aumento del de lentes y (c) objetivo apocromático que contiene un

Apertura
objetivo triplete, dos pares, un menisco y una lente es férica
numérica
frontal.
Lente frontal del

objetivo  Aumenta la imagen y la transforma en
Nomenclatura de los objetivos una imagen virtual, derecha con
respecto a la imagen del objetivo, pero
Estructura de los objetivos: aun invertida, con respecto al objeto.
Luego, el ojo endereza la imagen.
Generalmente es un tubo cilíndrico que
contiene en su interior un revestimiento anti-  Campo del microscopio: Se
reflejo y las diversas lentes colocadas en denomina campo del microscopio al
|8
círculo visible que se observa en el consiste en la cuantificación o medición de

ocular. También podemos definirlo estructuras del espécimen en estudio. En
como la porción del plano visible ciertos casos es relevante conocer el número,
observado a través de las lentes. Si el tamaño o dimensiones de las células y
aumento es mayor, el campo demás elementos del tejido.
disminuye, lo cual quiere decir que el
campo es inversamente proporcional al Usualmente se coloca en el plano de la
aumento del microscopio. La forma del apertura fija del diafragma una pieza circular
campo está determinada por el de vidrio con una escala o gradilla (fig. 4-9),
diafragma fijo del ocular, que la cual aparece enfocada y superpuesta a la
generalmente es de forma circular, no imagen del espécimen al encontrarse en el
obstante, el campo puede ser cuadrado plano de formación de la misma. Los oculares
y esta forma es muy útil al realizar para la medición poseen un mecanismo de
estudios de coprología o hematología, enfoque mediante rotación. Se debe calibrar
donde se requiere reconstruir la la escala de medición del ocular con cada
totalidad del campo de observación de objetivo que se use. En la actualidad se
la preparación, lo cual se dificulta con puede emplear algún software de
un campo circular clásico al quedar computación para realizar mediciones sobre
zonas superpuestas. las imágenes digitales y obtener datos muy
precisos, no obstante, el método más
El ocular produce un aumento adicional a económico y de uso más generalizado es la
la imagen proporcionada por el objetivo. El medición con los oculares.
valor de este aumento está inscrito en la
superficie del ocular y generalmente es de En ocasiones se coloca en el diafragma
10x, 12.5x, 15x, 20x o 25x. Otro valor es el del ocular una estructura filamentosa
número de campo que consiste en el (alambre, pestaña, cerda) denominada
diámetro en milímetros de la apertura fija del señalador, con la finalidad de indicar de
diafragma, la cual puede variar desde 18mm manera específica alguna estructura en
hasta 26.5mm. particular en el campo de observación. El
Los oculares modernos poseen otro tipo de señalador se aprecia como una línea oscura
inscripciones que denotan sus que parte del borde del campo hacia el centro
características. del mismo.
Otra de las aplicaciones del ocular
|9
Muchos oculares modernos poseen una

copa de goma cuya finalidad es, por una Propiedades de los objetivos
parte colocar los ojos a la distancia correcta
de observación y por otra, impedir la  Escala de reproducción: Es la
formación de reflejos luminosos que dificulten relación lineal que existe entre el
la visualización. Algunos microscopios tamaño del objeto y su imagen, por
binoculares poseen un mecanismo de ejemplo, 4:1, 40:1, 65:1.
enfoque del ocular que ajusta las dioptrías en  Poder de definición: Es la capacidad
caso que el observador posea una del objetivo de formar imágenes de
disminución de su agudeza visual. El ajuste contornos nítidos
se realiza por separado tanto para el ojo  Límite de resolución: Es la menor
derecho como para el izquierdo; de igual distancia que debe existir entre dos
manera se ajustan a la distancia interpupilar objetos para que puedan visualizarse
del observador (usualmente entre 55 y 75 por separado.
mm).  Poder de resolución: Es la capacidad
de mostrar la imagen en sus detalles
más finos. Está en relación inversa con
el límite de resolución.
Comparación entre límites de

resolución del microscopio óptico,
electrónico y ojo humano.
Microfotografía de un froti s de sangre periférica , en
la que se observa un campo rectangular c on una
escala de divisiones precisas, que en este caso son en Las principales unidades de medidas
el orden de 1/10 mm. Para determinar el tamaño de usadas en biología celular son el micrómetro
una célula se cuenta el número de divisiones que y el nanómetro. Como se aprecia, las
ocupa y la cifra se divide entre el aumento del objetivo
principales unidades de medida que se
empleado, dando como resultado un valor que
emplean corrientemente en microscopia no
corresponde al tamaño de la misma. Si la célula mide
7 divisiones, corresponde a 7/10mm; si el aument o del son las de uso cotidiano. En la siguiente tabla
objetivo es 100x, se divide 0. 7mm:100 = 0.007mm = se expresan aquellas unidades y sus
7µm. Tomado de K apitza H G. (1997). Microscopy equivalencias:
from the very begining. 2ª ed.
| 10
objetivos (2x hasta 100x). Para objetivos de

1.3.2. Sistema iluminación bajo poder de aumento (menor a 10x)
algunos condensadores poseen una lente
 Condensador: Concentra el haz de frontal adicional que es abatible. La altura del
luz sobre el plano del espécimen que condensador es regulada mediante un
se encuentra en la platina. Debajo de mecanismo activado con un tornillo que lo
él se encuentra el diafragma que baja o lo sube, acercándolo o no a la platina
regula la cantidad de luz que llega al donde está colocado el espécimen.
condensador.
 Fuente de Luz: Es el bombillo que
Es un dispositivo que tiene por finalidad está ubicado en la parte inferior del
formar conos luminosos grandes, con aparato, en caso de no poseerla debe
aperturas mayores, necesarios para ver con ubicarse una fuente de luz externa
los objetivos de mayor aumento. (bombillo incandescente común)
aproximadamente a 30 cm.
El condensador está conformado por
una o varias lentes situadas debajo de la  Diafragma o iris: Es un dispositivo
platina del microscopio, colocadas entre la que se coloca inmediatamente debajo
fuente de luz y el espécimen. de la platina. Debe permitir cambios en
la apertura y con diámetros variables
Al igual que en los objetivos, las lentes
cuya finalidad es la de obtener conos
del condensador poseen poder de aumento y
luminosos cada vez más estrechos y
también producen aberraciones, sin
eliminar los rayos de luz sobrantes.
embargo, éstas también pueden corregirse.
Los primeros diafragmas consistían en
El cono de luz que produce el
un disco de metal con agujeros de
condensador debe ajustarse de manera
diferente diámetro, el cual se rotaba
apropiada para optimizar la intensidad y el
según la necesidad. Estos discos
ángulo de apertura. Cada vez que se cambia
fueron substituidos por el iris, otro
un objetivo se debe realizar un ajuste para
dispositivo más elaborado y con un
obtener el cono de luz conveniente a la
diseño que le permite cambiar de
apertura numérica del nuevo objetivo. A
diámetro. La apertura del diafragma se
menudo no es práctico utilizar el mismo
regula en relación con el tipo de
condensador para un amplio rango de
objetivo que se esté utilizando. El
| 11
diafragma o iris está pintado de negro micrométrico.

con la finalidad de eliminar los rayos
de luz reflejada que pueden interferir  Tornillo de ajuste macro y
con la iluminación del objeto. micrométrico: Provocan el
desplazamiento del tubo o la platina
1.3.3. Sistema mecánico (según el modelo de microscopio) en
sentido vertical, lo que contribuye a
Este sistema soporta al sistema óptico y realizar el enfoque. El movimiento
aloja los elementos necesarios para la rápido del tornillo macrométrico posee
iluminación y enfoque del preparado. Toda dientes que se engranan y producen
montura, por complicada que sea posee los un movimiento tosco para lograr un
siguientes elementos: pie o base, mecanismo enfoque aproximado. Se utiliza para
de enfoque (tornillos macro y micrométrico), enfocar con los objetivos de poco
la platina, el revólver y el tubo del ocular. aumento y para subirlos rápidamente
con la finalidad de colocar o retirar de
 Pie o Base: Brinda apoyo y estabilidad la platina el preparado histológico. El
al aparato. tornillo micrométrico por el contrario
posee una graduación tal que cada
 Vástago o brazo: Soporta la platina, división de la rosca permite un
tubo y tornillos de ajuste macro y movimiento vertical imperceptible en el
micrométrico. orden de 0,001mm. Esta disposición
permite evaluar de manera
 Mecanismo de enfoque: Se logra aproximada el espesor de los objetos,
desplazando en sentido vertical ya sea considerando el número de vueltas
la platina donde se coloca el que realiza el tornillo al enfocar su
espécimen o ya sea el revólver donde parte más superficial y luego la más
están colocados los objetivos, de profunda.
modo que se pueda centrar el punto
focal del objetivo que se está El movimiento del tornillo micrométrico
utilizando es ese momento. Se logra tiene una extensión de 5mm
mediante dos mecanismos, primero aproximadamente y está limitado. Permite un
uno rápido del tornillo macrométrico y enfoque fino y se utiliza con los objetivos de
segundo, otro lento del tornillo mayor aumento.
| 12
viceversa.
 Tubo ocular: Soporta la porción óptica  Vernier o Nonius: consiste en dos
del microscopio. Es un cilindro hueco pequeñas reglas graduadas en
de longitud variable, cuyo interior está milímetros cuya finalidad es la de
pintado de negro mate y posee un obtener coordenadas aproximadas
diafragma para impedir la formación que sirven de referencia para localizar
de reflejos y facilitar la observación. El una estructura determinada en la
tubo puede ser doble y alojar dos preparación. En la práctica, el uso del
lentes oculares (microscopio vernier no es frecuente, se hace un
binocular). En los modelos de poco complicado anotar las cifras y
microscopios grandes destinados a la más difícil aún colocarlas en las reglas
microfotografía, hay un tercer tubo y localizar la estructura en cuestión.
accesorio, generalmente más largo y Además, estas cifras solo son válidas
vertical que sirve para conectar una para el microscopio en el cual se
cámara fotográfica sin necesidad de obtuvieron. Hay otros procedimientos
lente ocular. más simples para tal fin.
 Platina: Es una plataforma horizontal  Subplatina: Soporta al condensador y

sobre la cual se coloca el preparado a se ubica por debajo de la platina.
observar, tiene un orificio central que
permite el paso de luz y un vernier  El revólver: Considerado como un
que posibilita la relocalización de los accesorio del tubo. Es un implemento
detalles de interés. Generalmente es muy importante que permite el
de forma cuadrada y posee un intercambio rápido de objetivos
sistema de fijación e inmovilización de mediante un movimiento de rotación.
la lámina porta-objeto compuesto por El revólver está constituido por una
pinzas o una pieza articulada que esta semi-esfera que posee una serie de
fija a otro dispositivo, el carro. Este anillos en los cuales van atornillados
dispositivo permite el examen los objetivos. Esta pieza gira
metódico y completo de la alrededor de un eje que está colocado
preparación al proporcionar un en la parte inferior del tubo. Puede ser
desplazamiento hacia adelante o de diversas formas y de igual manera,
hacia atrás y de derecha a izquierda y alojar un número variable de objetivos
| 13
(dos, tres, cuatro o más). 1.4.2. Dibujar: Dibujar las preparaciones

microscópicas es una actividad de las más
completas y precisas que permite obtener
una representación fiel del espécimen en
1.4. Accesorios del microscopio estudio tal y como el observador la percibe y
representa la suma de detalles que se
Habiéndose familiarizado con la observan al cambiar el plano de enfoque,
estructura y funcionamiento del microscopio obteniéndose la sensación de relieve y
óptico, hay que considerar aquellos profundidad. Se emplean las cámaras claras
accesorios que conducen a una excelente y otros dispositivos para dibujar que están
práctica microscópica y que facilitan el concebidos con una serie de espejos y
trabajo, haciéndolo más rápido y efectivo o prismas que hacen coincidir en la retina o en
ampliando las capacidades del instrumento. una pantalla tanto el campo observado como
Dentro de las actividades o posibilidades se el plano en el cual se debe dibujar. Se sigue
pueden citar: sobre una hoja de papel el contorno de la
imagen observada al mismo tiempo que se
1.4.1. Medir y cuantificar: Consiste en la dibuja con un lápiz.
micrometría (morfometría) aproximada de los
especímenes observados al microscopio. 1.4.3. Fotografiar: Las imágenes obtenidas
Para cuantificar longitudes, cantidades se archivan y se emplean en publicaciones
(conteo de células, núcleos, partículas), científicas y presentaciones con fines
ángulos. Se emplean oculares de medición docentes y banco de datos. Se necesitan
con retículos o gradillas en combinación con adaptadores para conectar la cámara a un
micrómetros especializados, láminas tubo semejante al tubo del ocular en
calibradas, cámaras de conteo y el vernier. microscopios trinoculares. Se emplean desde
En la actualidad se han desarrollado las cámaras fotográficas clásicas hasta las
instrumentos para morfometría que emplean cámaras digitales especializadas para
tecnología digital y los datos obtenidos acoplar al microscopio y las cámaras
pueden ser transmitidos a un computador, fotográficas digitales de uso común.
permitiendo así la automatización, el Actualmente la fotografía clásica resulta
almacenamiento de los datos y la obtención complicada, costosa, de resultados menos
de variables estadísticas a partir de ellos. atractivos y ha sido desplazada por la
fotografía digital que es de más fácil y
| 14
práctica ejecución. Con las cámaras digitales

de alta resolución se obtienen resultados muy
satisfactorios e inmediatos que pueden ser
archivados en el computador para su 1.5. Principios físicos aplicados al
microscopio
posterior análisis y procesamiento.
1.5.1 Poder de penetración: Es la
1.4.5. Filmar: La captura de imágenes en propiedad que permite la observación
movimiento se realiza mediante cámaras de simultánea de varios planos del
video (digitales o no) que registran la preparado. Es inversamente proporcional
actividad de especímenes vivos, células en a la escala de reproducción o aumento.
cultivo, cámaras de perfusión, dispositivos
con motor y automatizados, entre otros, para 1.5.2. Distancia focal: Es la distancia de
la demostración y análisis de procesos la lente frontal al preparado colocada en
fisiológicos en videomicroscopía. la platina, cuando está enfocado.
Disminuye cuando aumenta la escala de
1.4.6. Incrementar el contraste: Para reproducción del objetivo.
facilitar la observación de especímenes con
una estructura particular y células vivas se 1.5.3. Aumento total: Se debe notar que
emplean filtros, condensadores y otros el ocular también tiene un aumento, por lo
dispositivos que transforman al microscopio tanto el aumento total de la imagen que
de campo claro en un instrumento para tal fin, se observa es el producto entre el
lográndose la microscopia fotónica especial aumento del objetivo y el ocular. Ejemplo:
(campo oscuro, contraste de fases, si se tiene colocado el objetivo cuya
polarización, entre otras). escala de reproducción es 40:1 y el ocular
tiene un aumento de 10X, entonces el
1.4.7. Procesamiento de imágenes: Con el aumento total será 40 x 10 = 400X.
empleo del computador y de software

especializados para captura, administración y 1.5.4. Apertura numérica (AN): Este
procesamiento de las microfotografías, en la valor corresponde a la capacidad de un
actualidad se ha llegado a nuevos niveles en lente objetivo de utilizar más o menos los
facilidad de uso y sofisticación que simplifican rayos luminosos para formar la imagen.
la investigación científica Este valor se encuentra grabado en la

manga del lente, siendo de 0,25 para el
| 15
objetivo de 10X, de 0,65 para el de 40X y lo cual puede deducirse que para
de 1,25 para el de 100X. aumentar el PR de un instrumento o
disminuir el LR, se puede:
AN = n x sen α
Disminuir λ
Aumentar la AN
Donde, n es el índice de refracción del
medio que atraviesa el haz y α es el
1.6. Consideraciones para el uso del
ángulo de apertura. microscopio óptico
1.5.5. Poder y límite de resolución: El 1.6.1. Imagen: Se debe tomar en

poder de resolución (PR) es la capacidad consideración que la imagen de un
de un instrumento para producir imágenes microscopio óptico se encuentra siempre
distintas de puntos situados muy cerca el “cabeza abajo” y si se mueve la preparación
uno del otro en el objeto. Depende de la hacia un lado se observa que se desplaza en
longitud de onda (λ) de la luz utilizada y sentido opuesto, estas características se
de la AN del objetivo utilizado. El límite de encuentran siempre presentes en un
resolución (LR) es la distancia mínima microscopio óptico.
que debe existir entre dos puntos para
que puedan ser discriminados como tales. 1.6.2. Enfoque: El enfoque de una
Viene dado por: preparación se realiza de la siguiente
LR= 0,61* λ manera:
AN
 Utilizando el tornillo macrométrico
Donde 0,61 es una constante, λ es la
desplazar la palatina completamente
longitud de onda de la luz utilizada y AN
hacia abajo.
es la apertura numérica del objetivo en
 Tomar el preparado (lámina
uso.
portaobjeto con la muestra o corte
El LR es el inverso del PR, de manera
histológico) y colocarlo sobre la
que cuanto mayor sea el poder de
platina, teniendo en consideración que
resolución de un instrumento menor será
la lámina cubre-objetos quede
el límite de resolución.
dispuesta hacia arriba y el objeto de
LR= 1_
estudio ubicado sobre el orificio de la
PR
platina.
El máximo PR de un microscopio
 Colocar el objetivo de menor
óptico es aproximadamente 0,15 μm, con
| 16
aumento (2X, 4X ó 10X) ya que estos

quedan siempre más alejados de la 1.6.4. Determinación de la posición de los
platina y así evitar que topen el lente objetos observados: El círculo luminoso
objetivo con la preparación. que se observa a través del ocular se
 Subir la preparación con el tornillo denomina campo microscópico y los objetos
macrométrico hasta el tope siempre que se observan en él se pueden localizar en
mirando por un lado del microscopio relación con las manecillas del reloj.
para evitar que choque el objetivo con
la preparación. 1.6.5. Inversión de las imágenes: Las
 Mirando a través del ocular se imágenes son invertidas por los lentes. De
empieza a bajar lentamente la platina esta manera los objetos que aparecen en el
hasta localizar el foco, es decir donde fondo del campo microscópico se encuentran
la preparación se observa nítidamente realmente en la parte más alta y los objetos
y por último utilizando el tornillo que se encuentran en el lado izquierdo del
micrométrico se define la imagen. campo microscópico se encuentran
realmente en el lado derecho.
NOTA: La mayor parte de los microscopios
actuales están parafocalizados, lo que indica 1.6.7. Preparación de la muestra: Ya que
que al quedar en foco la lupa, los demás los microorganismos son transparentes es
objetivos quedaran también enfocados, y solo difícil distinguirlos con este tipo de
se requiere de un pequeño ajuste del tornillo microscopía y es por lo que se suelen teñir.
micrométrico para ver nítidamente la imagen
en el momento que se cambie de objetivo. 1.7. Observación microscópica
1.6.3. Empleo del objetivo de inmersión en Para observar una muestra al

aceite (100X): Se deben utilizar microscopio óptico podemos recurrir a:
preparaciones teñidas completamente secas.
Para esto se pone una pequeña gota de 1.7.1. Preparación húmeda: Se realiza
aceite de inmersión sobre la porción que se colocando una gota de la suspensión de
va a examinar. Preferencialmente se deben microorganismos entre un porta y un
utilizar aceites sintéticos que no se secan, en cubreobjetos. Se observa directamente.
vez de aceite de madera de cedro que se
seca rápidamente. 1.7.2. Preparación fijada: Se coloca una
| 17
suspensión homogénea de microorganismos

en una gota de agua sobre el portaobjetos y
se fija (mediante calor o agentes químicos) y
después se colorean mediante diferentes
técnicas. Éstas preparaciones se observan  Enumere los pasos para lograr el
sin cubreobjetos y, habitualmente, con enfoque de manera correcta.
objetivos de inmersión.
1.7.3. Coloraciones: Son técnicas que

permiten observar microorganismos y tejidos
en función de la capacidad de éstos para
reaccionar (o no) con determinadas
sustancias colorantes, de acuerdo con su
naturaleza química.
 Observe un lente ocular, examínelo y

Autoevaluación: precise el significado de los números
 Identificar las partes mecánicas, que muestra su superficie ocular.
ópticas y sistema de iluminación de un
microscopio óptico.
2. Microscopía de Fluorescencia
y Microscopía Electrónica
2.1. Espectrofotometría y Energía

Electromagnética.
 Precisar la función de cada
componente mecánico, óptico y de
La espectrofotometría es una técnica
iluminación del microscopio óptico.
analítica que consiste en medir la absorción o
la transmisión de luz de un compuesto. Esta
técnica es muy útil en bioquímica debido a
que permite realizar numerosos estudios,
| 18
entre los cuales se encuentran los siguientes: energía absorbida como rayos luminosos.
(1) identificación de un compuesto
desconocido a La técnica más versátil y poderosa para
través de sus características del espectro de la localización de proteínas dentro de una
absorción en ultravioleta, visible o infrarrojo; célula por microscopía óptica es la emisión
(2) determinación de la concentración de un fluorescente de las células y la observación
compuesto conocido mediante la absorción con el microscopio de fluorescencia. En éste
de luz de una o más longitudes de onda; y (3) microscopio los objetos son iluminados por
medición de la aparición de un producto o la rayos de una determinada longitud de onda, y
desaparición de un sustrato durante el curso un químico fluorescente, los fluorocromos,
de una reacción catalizada por una enzima. que son sustancias que tienen la propiedad
de emitir un fotón de una longitud de onda
La absorción de luz ocurre cuando los
determinada, son excitados y emiten luz
electrones, de la molécula que absorbe luz,
(fluorescente) a una longitud de onda
son promovidos a un nivel de energía mayor,
específica más larga.
debido a que la frecuencia de la oscilación
electrónica de la molécula es exactamente
La mayoría de los colorantes
igual a la frecuencia de la luz que irradia la
fluorescentes, o fluorocromos, emiten luz
molécula. La longitud de onda
visible, pero algunos como la
correspondiente a esta frecuencia (λmáx ) es
indocarbocianina Cy5, los cuales son
aquella a la cual el compuesto absorbe más
colorantes fluorescentes pertenecientes a la
luz y está determinada por la estructura de la
familia de las cianinas que emiten luz desde
molécula.
el infrarrojo al ultravioleta (UV).
Las moléculas fluorescentes absorben luz

de una dada longitud de onda y emiten luz de
2.2. Microscopía de Fluorescencia
otra longitud de onda, más larga. Si un
componente de este tipo es iluminado a su
La microscopía de fluorescencia fue
longitud de onda absorbente y visualizado a
descubierta en 1908 por Köhler y Siedentopf,
través de un filtro que sólo permita pasar la
y se fundamenta en que una sustancia
luz de longitud de onda igual a la de la luz
natural en las células o un colorante
emitida, el componente aparece brillante
fluorescente aplicado al corte es estimulado
sobre un fondo oscuro. La intensidad y el
por un haz de luz, emitiendo parte de la
| 19
color de la luz es una propiedad marcadas con fluorocromos.

característica de la molécula fluorescente 2.4. Funcionamiento del microscopio de
utilizada. fluorescencia
2.3. Fluorescencia La fluorescencia es uno de los

fenómenos físicos más utilizados en
La fluorescencia es un tipo de microscopía biológica y analítica, sobre todo
luminiscencia, en la que seguidamente a la por su alto grado de sensibilidad y
absorción de la energía de la luz, se produce especificidad.
una emisión de una longitud de onda mayor

La luz de una fuente de longitud de onda
por un corto periodo de tiempo.
múltiple se mueve a través de un filtro
excitador que solo permite que pase la
radiación excitada de la longitud de onda
deseada. Esta radiación es reflejada por el
filtro dicroíco o dicromático y enfocada por la
lente del objetivo sobre la muestra, las
moléculas fluorescentes de la muestra se
Esquema de movimientos de fotone s de variada
longitud de onda. excitan y emiten luz (por fluorescencia) de
una longitud de onda específica y mayor.
En los microscopios de fluorescencia Esta luz es enfocada por el objetivo y la
modernos, solo la luz fluorescente emitida por mayor parte pasa a través del filtro
la muestra se usa para formar una imagen, la dicromático y no se refleja. Un filtro de
imagen observada es el resultado de la barrera final bloquea toda la luz residual con
radiación electromagnética emitida por las la frecuencia de la radiación de excitación.
moléculas que han absorbido la excitación
primaria y reemitido una luz con mayor
longitud de onda. Para dejar pasar solo la
emisión secundaria deseada, se deben
colocar filtros apropiados debajo del
condensador y encima del objetivo. Se usan
para detectar sustancias con
autofluorescencia vitamina A o sustancias
| 20
formación de la imagen. En este sentido, la

microscopía de fluorescencia difiere de la
microscopía óptica convencional en la cual la
imagen es formada por la luz de iluminación.
En el esquema se sitúan los tres

elementos característicos del microscopio de
fluorescencia:
 Primer filtro de corte o filtro de

excitación: Es el filtro que selecciona
Microscopio óptico para fluorescencia
la luz de la longitud de onda incidente
Filtro
que se va utilizar para excitar la
Barrera
muestra. En el esquema está
Filtro Excitador seleccionando la luz de longitud de
onda entre 450 y 490 nm (azul).
 Espejo de ranuras ordenadas o

espejo dicroico: Se trata de un
espejo que tiene la propiedad de
Cubo de filtros de fluore scencia
reflejar la luz de ciertas longitudes de
onda y de dejar pasar otras. En este
Este microscopio es similar al
caso refleja luz de longitud de onda
microscopio convencional, a excepción de
menor de 510 nm (por ello refleja la luz
que la luz incidente que procede de una
incidente azul) y deja pasar la luz de
potente fuente atraviesa un primer filtro que
longitud de onda superior a 510 nm,
selecciona la longitud de onda capaz de
dejando pasar la luz verde emitida por
excitar al fluorocromo antes de incidir sobre la
el fluorocromo presente en la muestra.
muestra. La luz emitida por la muestra
(reflejada y fluorescente) atraviesa un
 Segundo filtro de barrera o filtro de
segundo filtro que selecciona la longitud de
emisión: Es el filtro que selecciona la
onda de emisión del fluorocromo. Otra
luz de longitud de onda fluorescente.
diferencia radica en que la luz de iluminación
En este caso deja pasar la luz de
(excitación) no está involucrada en la
| 21
longitud de onda de 520 a 560 nm y concepto de antígeno más allá del

elimina la parte del espectro reflejado y concepto clásico que definía antígeno
permite visualizar el espectro de como la sustancia que desencadena la
emisión correspondiente al producción de anticuerpos. Así dentro de
fluorocromo. esta definición de antígeno se incluyen
las moléculas que, previa presentación
En el esquema los filtros que se han antigénica, son capaces de
indicado serían los que emplearíamos en la desencadenar la activación de células T
fluorescencia asociada al isotiocianato de citotóxicas capaces de destruir las
fluoresceína, molécula fluorescente células diana sin la participación de
ampliamente utilizada en microscopía de anticuerpos.
fluorescencia acoplada a anticuerpos.
 Anticuerpo: también conocidos como
inmunoglobulinas, abreviado Ig, son
2.5. Inmunofluorescencia
glicoproteínas del tipo gamma globulina.
Pueden encontrarse de forma soluble
Consiste en conjugar colorantes
en la sangre u otros fluidos corporales
fluorescentes con anticuerpos, exponiendo
de los vertebrados, y son empleados
después este conjugado a los anticuerpos o
por el sistema inmunitario para
antígenos correspondientes en cortes
identificar y neutralizar elementos
histológicos, frotis de microsorganismos o de
extraños tales como bacterias, virus o
células, o cultivos de tejidos en capas únicas,
parásitos.
con la intención de visualizar la distribución
de una proteína o antígeno específico en
2.5.1. Microscopia de Inmunofluorescencia
células o secciones de tejido utilizando la
para detección de proteínas en células
especificidad de los anticuerpos por su
fijadas.
antígenos para dirigir marcadores
fluorescentes a las biomoléculas dianas de
forma específica. Los colorantes químicos como el bromuro
de etidio, DAPI (4',6- diamidino -2-
 Antígeno: es una molécula capaz de fenilindole), Azul de Cromassie G-250, Rojo
producir una respuesta del sistema Ponceau, colorean los ácidos nucleicos o una
inmune adaptativo mediante la activación extensa variedad de proteínas. No obstante,
de linfocitos. Esta definición amplía el a menudo los investigadores desean detectar

| 22
la presencia y localización de proteínas

específicas. Un método muy utilizado con
este propósito emplea anticuerpos
específicos unidos en forma covalente a los
fluorocromos. Los fluorocromos utilizados
incluyen la rodamina y el rojo Texas, que
emite luz roja, Cy3, que emite luz anaranjada
y fluoresceína que emite luz verde. Estos  Indirecta o secundaria: Un
fluorocromos pueden ser combinados anticuerpo secundario marcado con un
químicamente con anticuerpos específicos fluorocromo se utiliza para reconocer
purificados para casi cualquier un anticuerpo primario. El proceso
macromolécula deseada. consta de dos etapas: en la primera
se fijan sobre un portaobjetos los
Cuando un complejo de anticuerpo- antígenos que constituyen el sustrato
fluorocromo se agrega a una fracción celular conocido específico (células que
o tisular permeabilizada, el complejo se unirá contienen virus, Streptococcus
al antígeno correspondiente, que luego piogenes, Toxoplasma gondii,
emitirá luz cuando se lo ilumine con la Trypanosoma cruzi, entre otros), sobre
longitud de onda de excitación, una técnica él se coloca el suero de quien se
denominada microscopía de sospecha la presencia de anticuerpos
inmunofluorescencia. específicos, si la reacción es positiva
2.5.2. Técnicas de Inmunofluorescencia habrá formación de un complejo
antígeno-anticuerpo no visible ya que
 Directa o primaria: Es una técnica el anticuerpo no estaba marcado. Para
que consiste en demostrar la la segunda etapa previamente se
presencia de un antígeno mediante debe obtener una anti-inmunoglobulina
reacción directa con un anticuerpo humana marcada, que reaccionará con
específico marcado con colorante el anticuerpo del complejo producido
fluorescente. El anticuerpo es obtenido en la primera etapa. La anti-
a través de la inoculación del antígeno inmunoglobulina se obtiene así: de
(glicoproteína, proteína) en un modelo una mezcla de varios sueros de
animal generalmente conejos y cabras. personas normales, se precipitan las
globulinas (anticuerpos), estas
| 23
globulinas son inoculadas a un células en suspensión (por ejemplo esputo)

organismo (conejos, cabras, chivos y con la finalidad de analizar proteínas,
llamas), el organismo producirá glúcidos y moléculas pequeñas tanto de
anticuerpos humanos que se marcan origen biológico como no biológicos.
con fluoresceína o cualquier otro de
los fluorocromos.  Es una técnica analítica (cuali-
cuantitativa) en química y bioquímica.
Este anticuerpo marcado se unirá  Métodos inmunológicos de diagnóstico
al anticuerpo humano no marcado de clínico de diferentes enfermedades
la primera etapa que en este momento cutáneas-
se puede considerar como un  Procedimientos microscópicos en
antígeno, dando reacción positiva de microbiología, genética, histología,
fluorescencia solamente si en la histoquímica, biología celular y
primera etapa se produjo unión entre molecular, biología del desarrollo,
el antígeno fijado en la muestra y el patología (sondas vitales, ensayos de
anticuerpo presente en el suero viabilidad, indicadores,
humano que estamos evaluando.  Análisis poblacionales de células
(citometría de flujo).
 Diagnósticos de neoplasias.
 Detección de virus, bacterias, hongos,
parásitos.
2.5.4. Limitaciones:
Al igual que la mayoría de las técnicas de

fluorescencia, un problema significativo con la
inmunofluorescencia es el fotoblanqueo, es
2.5.3. Aplicaciones
decir la pérdida de actividad puede ser
controlada reduciendo la intensidad o el
La Inmunofluorescencia, como técnica,
tiempo de exposición a la luz, incrementando
puede ser utilizada en cortes de tejidos,
la concentración de fluorocromo, o
líneas celulares cultivadas, células
empleando fluorosforos más robustos que
individuales y secreciones que contengan
sean menos propensos al fotoblanqueo.
| 24
que no pueden obtener resolución atómica ya

2.5.5. Ventajas: que dicha longitud de onda de la radiación
incidente es demasiado grande. Con el ME
 Alta sensibilidad. se pueden obtener electrones acelerados con
 No es necesaria la esterilidad. λ asociada bastante menor de 1 Å, y por
 Se pueden obtener resultados rápidos. tanto se puede obtener, al menos
 No es necesario realizar cultivos. teóricamente, resolución atómica. Con las

lentes adecuadas se puede transformar los
 Se puede identificar microorganismos
electrones difractados en la imagen real.
específicos en un grupo mixto.
Además de usarse para difracción e imagen,
 Determina la identidad de un
el ME tiene otros usos.
organismo muerto.
El Microscopio Electrónico no es más que

2.5.6. Desventajas:
uno de los muchos aparatos cuyo
fundamento es la óptica electrónica. No hay
 Es una técnica costosa.
posibilidad de estudiar la óptica electrónica
 Deber ser aplicada por un personal
sin enfrentarse con una de las consecuencias
altamente especializado.
aparentemente paradójicas de la física
 Los resultados no son 100%
teórica moderna: la dualidad onda -
específicos.
corpúsculo, cuando los electrones inciden
 Generalmente no son posibles los
como paquetes de ondas sobre los átomos
análisis in vivo.
de una muestra, las colisiones pueden
representarse, y a veces con gran precisión
3. Microscopia Electrónica como colisiones del tipo bola de billar. Sin
embargo, Si la muestra contiene un cristal en
El objeto de esta de técnica es la una cierta orientación, los electrones deberán
interacción de los electrones con la materia y representarse por ondas para dar cuenta de
la forma de obtener información tanto las reflexiones.
estructural como de caracterización de
defectos. En muchos sentidos, el microscopio 3.1. Fundamento de la Microscopia
electrónico ME ofrece una solución ideal a los Electrónica
problemas que presentan los microscopios
ópticos es la longitud de onda (λ ~ 0.5 µm) Un microscopio electrónico utiliza
| 25
electrones en lugar de fotones o luz visible que transfieren la imagen formada a la

para formar imágenes de objetos diminutos. pantalla de un computador. Los microscopios
Los microscopios electrónicos permiten electrónicos solo se pueden ver en blanco y
alcanzar una capacidad de aumento muy negro, puesto que no utilizan la luz, pero se
superior a los microscopios convencionales le puede dar color a la imagen en el
debido a que la longitud de onda de los computador, su funcionamiento es semejante
electrones es mucho menor que la de los a un monitor monocromático.
fotones "visibles". Para un voltaje de 100 kV,
Con el microscopio electrónico se puede
la longitud de onda asociada a los electrones
alcanzar una resolución de aproximadamente
es 0.037 Å (0.01 Å para 1 MV).
40.000 veces más que el poder de resolución
del microscopio de luz y 2 x 106 veces el
El primer microscopio electrónico fue
poder de resolución del ojo humano.
diseñado por Ernst, Max Knoll y Jhener entre
1925-1930, quienes se basaron en los
Existen dos tipos principales de
estudios de Louis acerca de las propiedades
microscopios electrónicos: Microscopía
ondulatorias de los electrones. Un
Electrónica de Transmisión. MEB o TEM del
microscopio electrónico, funciona con un haz
inglés “Transmission Electron Microscopy” y
de electrones generados por un efecto
Microscopía Electrónica de Barrido. MEB o
térmico-iónico por un cañón de electrones
SEM del inglés “Scanning Electron
provenientes de un filamento (cátodo) que es
Microscopy”.
generalmente wolframio, y se
monocromatizan acelerándolos a través de
un potencial (E) en un sistema sometido a
vacío. Éste haz de electrones es acelerados
por un alto voltaje y focalizados por medio de
lentes magnéticas (todo al vacío ya que los
electrones son absorbidos por el aire).
Los electrones atraviesan la muestra
(debidamente deshidratada) y la
amplificación se produce por un conjunto de
MEB y MET
lentes magnéticas que forman una imagen
sobre una placa fotográfica o sobre una
pantalla sensible al impacto de los electrones
| 26
3.2. Microscopio Electrónico de electrones del haz se pierden en las paredes
Transmisión (MET). y aberturas excepto un estrecho cono que
atraviesa el diafragma del condensador.
En el campo de la física moderna es La lente condensadora se usa tanto para
primordial entender el comportamiento tanto controlar la intensidad luminosa, como para
del haz de luz como el de los electrones. El variar la abertura de iluminación relativa en el
TEM no explora superficies, por el contrario, objeto.
el haz de electrones incidente atraviesa la
muestra o espécimen observado y la sombra 3.2.1. Partes y Funcionamiento
da detalles finos o ultra-estructurales que son
capturados en una pantalla fosforescente con 1. Cañón de electrones, que emite los
propiedades de emisión de luz, ubicada en la electrones que chocan o atraviesan el
parte inferior de la columna. El tener una espécimen (dependiendo del
adecuada preparación de la muestra da lugar microscopio electrónico), creando una
a una excelente definición. Para utilizar un imagen aumentada.
TEM debe cortarse la muestra en capas 2. Lentes magnéticas para crear campos
finas, no mayores de un par de miles que dirigen y enfocan el haz de
angstroms. Los microscopios electrónicos de electrones, ya que las lentes
transmisión pueden aumentar la imagen de convencionales utilizadas en los
un objeto hasta un millón de veces. microscopios ópticos no funcionan con
los electrones.
Un esquema clásico de estos aparatos 3. Sistema de vacío es una parte muy
está representado en la figura que se anexa. importante del microscopio electrónico.
Algunos instrumentos no poseen lente Debido a que los electrones pueden ser
condensadora, otros en cambio tienen dos, desviados por las moléculas del aire, se
mientras otro grupo de aparatos posee debe hacer un vacío casi total (operar a
solamente una lente proyectora. bajas presiones, típicamente en el orden
-4 -8
La fuente de electrones está constituida por de 10 a 10 kPa) en el interior de un
un hilo de volframio o tunsgteno en forma de microscopio de estas características. La
horquilla, rodeado por una pantalla cilíndrica necesidad de esto se debe a dos
polarizada negativamente respecto al razones: primero, permitir una diferencia
filamento. Después de atravesar el ánodo de voltaje entre el cátodo y tierra sin que
conectado a tierra, la mayor parte de los se produzca un arco voltaico. Segundo,
| 27
reducir la frecuencia de las colisiones de  Reconocimiento de virus y sus

los electrones con los átomos del aire a características ultraestructurales.
niveles despreciables.  Estudios de citoquímica.
4. Placa fotográfica o pantalla  Estudios de estructuras moleculares.
fluorescente que se coloca detrás del
objeto a visualizar para registrar la  Determinación de estructura cristalina
imagen aumentada. en minerales, metales y otros
5. Sistema de registro que muestra la materiales.
imagen que producen los electrones,  Estudio de fases y zonas cristalinas en
que suele ser una computadora. polímeros.
 Determinación del tamaño de partículas.
3.2.2. Microtomía  Cambios estructurales de materiales
sometidos a diferentes tratamientos.
Para la observación de los tejidos, estos
deben estar debidamente fijados y debe n ser
cortados con el micrótomo. Dependiendo del
tipo de micrótomo utiliza cuchillas de
diamante o vidrio (la más común).
Micrografías de MET
3.3. Microscopio Electrónico de Barrido

3.2.3. Algunas aplicaciones del
(MEB).
Microscopio Electrónico de Transmisión:
En el Microscopio Electrónico de Barrido

 Estudios de ultraestructura de tejidos
(SEM), un campo magnético permite enfocar
vegetales, animales y humanos.
los rayos catódicos (electrones) y obtener
 Realización de estudios de histoquímica
una imagen tridimensional, para el examen
e inmunohistoquímica para identificar
de la superficie de las estructuras,
compuestos específicos.
| 28
permitiendo la observación y la
caracterización de materiales orgánicos e 3.3.2. Funcionamiento:
inorgánicos.
La muestra es colocada en un pequeño
3.3.1. Descripción del Equipo. espacio, al cual se le hace vacío después de
cerrada la puerta. La puerta tiene tres
El SEM consta de las siguientes partes: palancas que el operador usa para: subir y
bajar la muestra, rotar la muestra y acercarla
1. Cañón de electrones (e-). o alejarla.
2. Filamento de tungsteno o de
hexaboruro de lantano-LaB6.
3. Ánodo.
4. Columna de vacío.
5. Lentes condensadores (centran y
Introducción de muestra en MEB
dirigen el haz de electrones).
Un haz delgado de electrones, es
6. Lentes Objetivas (controlan la
producido en la parte superior del
cantidad de electrones del haz).
microscopio por medio del calentamiento de
7. Detectores para colectar y medir
un filamento metálico (10-30 KV). El haz de
electrones (producción de imagen).
electrones primarios sigue un recorrido a
8. Bobinas de barrido (obligan al haz a
través de la columna de vacío del
barrer la muestra).
microscopio, esto, con el propósito, de evitar
9. Control de aumento.
la dispersión de los electrones. El trayecto del
10. Generador de barrido.
haz de electrones es enseguida modificado
11. Colector de electrones (electrones
por un conjunto de bobinas deflectoras que lo
se atraen y se aceleran).
hacen recorrer la muestra punto por punto y a
12. Escintilador (convierte la energía
lo largo de líneas paralelas (barrido), y a su
cinética de los electrones en luz
vez atraviesa las lentes condensadoras o
visible).
electromagnéticas que le permiten ser
13. Amplificador.
reenfocado o centrado hacia la muestra.
14. Pantalla (imagen).
15. Bombas de vacío.
| 29
Incidencia De los electrones sobre muestra en 3.3.3. Algunas aplicaciones de la

MEB
Microscopía Electrónica de Barrido.
Posteriormente, el diámetro del haz de  Obtención de imágenes 3D.

electrones puede ser modificado al pasar por
 Morfología de células y tejidos
los lentes objetivos que controlan la cantidad
animales, humanos o vegetales.
de electrones dentro de este. Cuando los
 Morfología interna de células y tejidos.
electrones primarios golpean la muestra, son
 Morfología superficial de minerales.
emitidos electrones secundarios por el propio
 Formas de cristalización de minerales.
espécimen. Estos electrones secundarios son
 Cambios morfológicos de materiales
atraídos por un colector donde se aceleran y
sometidos a tratamientos químicos.
se dirigen al escintilador, allí la energía
 Estudio de moléculas.
cinética es convertida en puntos de mayor o
 Reconocimiento de fósiles.
de menor luminosidad, es decir, en luz
 Interacción de microorganismos con
visible. Esta luz es dirigida a un amplificador
células eucariotas.
donde se convierte en señal eléctrica, la cual
pasa a una pantalla de observación en la cual
la imagen es formada línea por línea y punto
por punto. Los circuitos que dirigen las
bobinas de barrido (que obligan al haz a
barrer la muestra), son las mismas que
Micrografías en MEB
dirigen la parte de colección de electrones y
que producirán la imagen.
Resolución del Equipo: El MEB tiene un

aumento de 20.000X y una resolución que
puede llegar a los 5nm 10nm y una
profundidad de foco de 10 μm, mucho menor
que el MET. Micrografías en MEB
| 30
imagen.
5. La imagen es formada en un dispositivo

(pantalla fluorescente, monitor de
televisión, placa fotográfica).
Comparación de la formación de imagen en M.O,

MET y MEB
3.3.4. Formación de la imagen en los

microscopios electrónicos.
Los pasos básicos de la formación de la Representación e squemática del si stema óptico

imagen en el microscopio electrónico, tanto del microscopio electrónico de transmi sión, en el
de transmisión como de barrido son: cual se aprecia un proceso de aumento en tres
etapas y la formación de la imagen .
1. Un haz de electrones se forma en el
cátodo y es acelerado hacia el
espécimen gracias a un potencial
eléctrico positivo.
2. El haz de electrones es enfocado

mediante el empleo de lentes
electromagnéticos.
3. En la muestra irradiada ocurren

interacciones las cuales afectan el haz
de electrones. Esquema que muestra de manera simplificada la
formación de la imagen en el microscopio
4. Las interacciones y efectos son electrónico de transmi sión.
detectadas y transformadas en una

| 31
contienen metales pesados empleados en la

obtención del preparado, aparecen como
regiones oscuras (electron-densas) debido al
poder que poseen los átomos del metal
pesado en dispersar los electrones que
inciden sobre la muestra. Las regiones del
espécimen (por ejemplo cristales) que
poseen una mayor densidad aparecerán más
oscuras que las regiones vecinas amorfas. A
mayor cantidad de metal depositado, mayor
electrondensidad, lo cual permite un marcado
Esquema que muestra de manera simplificada la contraste, el cual es revelado en una amplia
formación de la imagen en el microscopio gama que va desde el negro, pasando por los
electrónico de barrido tonos de gris hasta llegar al blanco; esto
último representa las zonas en las que no se
3.3.5. Interpretación de las micrografías depositó el metal. Variaciones en el espesor
electrónicas: del espécimen afectan la interpretación
debido a la superposición de elementos; a
Con el empleo de técnicas más recientes mayor espesor, mayor contraste, de allí que
como inmunofluorescencia y microscopía el espesor del corte debe ser mínimo
confocal muchas estructuras presentes en la (alrededor de 100 nanómetros).
célula han sido estudiadas, corroborando su
aspecto morfológico observado previamente Los cortes son colocados en una rejilla
en las micrografías electrónicas. (portaobjeto) de cobre revestida de una
película plástica y este material puede
El contraste observado en las incrementar la granulosidad en la imagen y
micrografías electrónicas de transmisión puede interferir seriamente con el contraste
depende de ciertas propiedades del de la micrografía.
espécimen, del sistema óptico del
microscopio y de las condiciones de Las micrografías electrónicas de barrido
iluminación y reproducción fotográfica. muestran una imagen 3D (tridimensional) del
espécimen analizado. En la micrografía las
Las regiones del espécimen que zonas más oscuras corresponden a los
| 32
planos más profundos y las zonas más claras permite que la información detallada
a los planos más superficiales del espécimen, alcance la imagen, limitando de este
a partir de los cuales se originó una mayor modo la resolución.
cantidad de electrones secundarios. Al
componerse la imagen de zonas claras y  El contraste de amplitud (que radica en
oscuras se puede apreciar el relieve y las la naturaleza corpuscular de los
depresiones, que, en conjunto, conformarán electrones) se debe al contraste de
el aspecto tridimensional. difracción, provocado por la pérdida de
electrones del haz. Es un contraste
dominante en especímenes gruesos.
 El contraste de fase (que radica en la

naturaleza ondulatoria de los electrones)
se debe al contraste de interferencia
provocado por los desplazamientos en las
fases relativas de las porciones del haz.
Es un contraste dominante en
especímenes finos.
 Existen también distintas aberraciones

producidas por las lentes: astigmática,
Microfotografía electrónica de una mitocondria al esférica y cromática.
Microscopio electrónico de transmi sión. Las zona s
más oscura s son denominadas electrón-densa s y
 El problema de la función de transferencia
las zonas claras son denominadas electrón-
lúcidas. Nótese la variada electrondensidad, la cual de contraste (CTF): la CTF describe la
depende del grado de afinidad de las estructura s respuesta de un sistema óptico a una
por los metales empleados para el contraste. imagen descompuesta en ondas
Aumento 60.000x.
cuadráticas.
3.4. Limitaciones de la Microscopia

 El material biológico presenta dos
Electrónica.
problemas fundamentales: el entorno de
vacío y la transferencia de energía. Para
 El limitado diámetro de la apertura no
resolverlos, se utilizan distintas técnicas
| 33
dependiendo del tamaño de la muestra: de fusión, tienen un tamaño de grano

pequeño.
 Para muestras grandes como órganos,
tejidos o células, se utilizan tres técnicas: b) La réplica metálica: para construir la
réplica metálica se evapora el metal
Unidad Símbolo Equivalencia
metro (m) (M9 (m) (estaño) que se deposita sobre la
Centímetro Cm 0,01 m muestra a la vez que esta, por el
Milímetro mm 0,001 m
vacío, se disuelve.
Micrómetro μm 10 m
-6
-9
Nanómetro nm 10 m
4. Anexo.
-10
Angstrom Å 10 m
Unidades lineales y conversión

a) La fijación química o la criofijación
b) La inclusión en resinas (criosustitución)
4.1. Aplicación:
c) La réplica metálica.
El nanómetro y el Angstrom son

 Para muestras pequeñas como
empleados a nivel molecular o
complejos macromoleculares se supramolecular:
utilizan técnicas especiales para
lograr la formación de la imagen, Ejemplo:
estas son
a. Molécula de mioglobina: 45 Aº x 35 Aº x 25
Aº
a) La tinción negativa: los agentes de
b. Ancho de DNA: 20 Aº
tinción más usados son el molibdato
amónico, el fosfotungstato sódico y
La micra (micrómetro) es usado para
sales de uranio como acetato y
organelas celulares:
formiato. Todos ellos presentan las
Ejemplo:
siguientes propiedades: interactúan
a. Mitocondria esférica puede medir 2 μm
mínimamente con la muestra y son
(ME)
estables en la interacción con los
b. Núcleo esférico puede medir 10 μm (MO).
electrones, son altamente solubles en
agua, presentan una alta densidad que
favorece el contraste, tienen alto punto
| 34
Autoevaluación
Bibliografía
- Convertir 0.035 micrómetros en
nanómetros. _________________________
 Cooper G. M, Hausman R. E. 2015.
La célula. 6th ed. MARBAN S.L
- ¿Cuántos Angstrom son 0,20 micrómetros?
__________________________
- Expresar 679 nanómetros en micrómetros  · Gerald Karp (2011). Biología
celular y molecular. 6º Edición. Edit
____________________________ McGrawHill
- Convertir 703 Angstrom en milímetros  Goldsmith, Cynthia S.; Miller, Sara

E. (2009-10-01). "Modern Uses of
_______________________________ Electron Microscopy for Detection
of Viruses". Clinical
- Transformar 8 centímetros en micras

 Aspden, Reuben S.; Gemmell,
________________________________
Nathan R.; Morris, Peter A.; Tasca,
Daniel S.; Mertens, Lena; Tanner,
Michael G.; Kirkwood, Robert A.;
Ruggeri, Alessandro; Tosi, Alberto;
- A cuánto equivalen 120 micras en Angstrom Boyd, Robert W.; Buller, Gerald S.;
Hadfield, Robert H.; Padgett, Miles
___________________________ J. (2015). "Photon-sparse
microscopy: visible light imaging
using infrared illumination" (PDF).
- Represente 4 centímetros en nanómetros
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Guión de Conceptos Fundamentales de Biología Celular Elemental
BIBLIOGRAFIA CONSULTADA
Alberts, B(2010). Biología Molecular de la Célula. 5 ed. Ediciones Omega. España.
Cooper, G y Haussman, R. (2011). La Célula. 5ed. Editorial Marbán. España.
Karp, G. (2009). Biología Celular y Molecular. Conceptos y Experimentos. 5 ed. Editorial McGraw – Hill. México.
Lodish, H y otros. (2006). Biología Celular y Molecular. 4 ed. Editorial Panamericana.
- NOVEDADES DEL GUIÓN:
• GUIÓN ELABORADO por la DRA. ALBA IBARRA, docente de Biología Celular y Molecular en el mes de
FEBRERO DEL AÑO 2017.
• GUIÓN MODIFICADO bajo la coordinación del Br. ADONIS ÁLVAREZ en el mes de SEPTIEMBRE DEL AÑO
2019, en la cual participaron los siguientes Br:
I. Alfonzo Samantha
II. Camacaro María
III. Campo Noé
IV. Moreno María
V. Serrano María
VI. Silva María
VII. Valderrama Omar

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BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR- TOMO 1

Museo Anatómico “Dra. Gladys de Caballero”

BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR- TOMO 1

Dispone de textos, cuadros, figuras y esquemas, recopiladas de diversas fuentes

Este material es realizado sin fines de lucro y publicado en la plataforma Google

Las células se dividen en dos clases moléculas orgánicas simples podrían

principales, inicialmente definidas según polimerizar espontáneamente y formar

procariotas (bacterias) carecen de envoltura pensaba que existían en la atmósfera

nuclear; las células eucariotas presentan un primitiva.

núcleo donde el material genético está En el momento en el que surgió la vida, la

Al margen de estas diferencias, los orgánicas, incluyendo varios aminoácidos.

mismos mecanismos moleculares básicos Aunque el experimento de Miller no

ocasiones, obteniendo compuestos orgánicos Fig 2: Estructura de los ácidos nucleicos

La característica clave de los fosfolípidos

agua y la otra porción no. Los fosfolípidos

en consecuencia, alterando el curso de la tarde y tuvo la importante consecuencia de

El desarrollo de la fotosíntesis fue el eficiente que la glicolisis anaerobia. Por

siguiente paso más importante de la ejemplo, la rotura oxidativa completa de la

energía a partir de la luz solar y ser equivalente a 36 o 38 moléculas e ATP, en

independientes de la utilización de las comparación con las 2 moléculas de ATP que

moléculas orgánicas ya existentes. se forman en la glicolisis anaerobia. Con

La mayoría de las células bacterianas

Como las células procariotas, todas las papeles imprescindibles en el metabolismo

moléculas de ADN circular. El núcleo es el proporcionan compartimentos metabólicos

sitio de la replicación del ADN y de la síntesis especializados para la digestión de

del ARN; la traducción del ARN en proteínas macromoléculas y varias reacciones

tiene lugar en los ribosomas del citoplasma. oxidativas, respectivamente. Además, la

La compartimentalización proporciona por

de productos de desecho y nutrientes. de filamentos proteínicos que se extienden

Debido al tamaño y complejidad de las Además, el citoesqueleto es responsable de

labor formidable. Dos orgánulos transporte intracelular y la posición de los

citoplasmáticos, el retículo endoplasmático y orgánulos y otras estructuras, incluyendo los

el aparato de Golgi, es tan específicamente movimientos de los cromosomas durante de

dedicados a la diferenciación y transporte de la división celular.

las proteínas destinadas a la secreción, a la

subcelulares, permitiendo el desarrollo de la En general, se ha aceptado un origen

Las mitocondrias y los cloroplastos tienen asociaciones endosimbióticas resultaron muy

ellas, se reproducen mediante su escisión seleccionados en el curso de la evolución.

bipartita. Lo más importante, es que las 6. Desarrollo de organismos

se transcriben dentro del orgánulo y se propia replicación. Los eucariotas más

que son diferentes del genoma nuclear de la animales o vegetales.

célula. Además, los ribosomas y los ARN Los organismos multicelulares

los seres humanos. reacciones inflamatorias (granulocitos,

2. Las células eucariotas poseen orgánulos 8. En las células eucariotas el ADN se

mientras que las procariotas no. encuentra asociado a proteínas, tipo

unicelulares y multicelulares y las procariotas el ADN no se asocia a estas

procariotas solo multicelulares. proteínas.

Aunque las paredes celulares de encuentran los elementos del

procariotas y eucariotas pueden tener citoesqueleto que son complejos

funciones semejantes, existen diferencias supramoleculares que participan en la

en su composición química. contractilidad celular, movimiento y

encontrado en algunas bacterias 1. Estructura similar de la membrana

En orden de mayor a menor puede ser tan sencillo como un campo

- Biosfera: La suma de todos los seres

- Especie: Grupo de individuos similares - Célula: la más pequeña unidad

- Organela: Es una subunidad de la célula, componen de miles, o más, de átomos.

eucariotas). subatómicas: los niveles funcionales

Los virus contienen una pequeña

10.1 Características Generales:

- Son agentes infecciosos que parasitan de

- Macromolecular: Una macromolécula es - Los genomas víricos pueden ser ARN o

una molécula de gran tamaño creada ADN, pero no de ambos.

comúnmente a través de la polimerización - Son estructuras inertes en el medio