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Informe N° 2

Hematología Especial

Hemostasia

Presentado por:
Evelin Estefany Bolivar Fonseca
Miguel Arturo Gomez Mora
Paula Andrea Gutierrez Ovalle
Heidy Gabriela Ortegate Iza
Paula Valentina Pamplona Suarez
Alisson Valentina Rodriguez Correa

Grupo
VI C-D

Docente
Jonathan Andre Mora

Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca


Facultad ciencias de la salud
Bacteriología y laboratorio clínico
Bogota D.C.
2022

OBJETIVOS
Objetivo general
- Replicar en las instalaciones de la universidad Colegio Mayor de Cundinamarca las
pruebas básicas para la evaluación de desórdenes en la coagulación.

MARCO TEÓRICO

Hemostasia
La hemostasia es un proceso por el cual se mantiene la integridad del sistema vascular
después de un incidente en el que se produce un daño en la pared vascular y en consecuencia
se da la extravasación de la sangre, una vez ocurrido este evento se repara la fuga, este
proceso de reparación (hemostasia) posee tres etapas, la primera se basa en el reclutamiento y
activación de plaquetas, este paso tiene el objetivo de formar el tapón plaquetario; en la
hemostasia secundaria se dará la activación del sistema de coagulación, esto con la finalidad
de formar fibrina. Finalmente se da la cascada de fibrinólisis, la cual se encarga de la
degradación del coágulo una vez que se haya reparado el daño vascular o tisular.

PT
El tiempo de protrombina (PT) es una prueba screening con gran relevancia debido a que por
medio de este test se evalúa la presencia de desórdenes que afectan la vía extrínseca y/o
común de la coagulación. El fundamento de esta prueba consiste en medir el tiempo en el
cual se tarda en formar el coágulo de fibrina después de ser agregada la tromboplastina
cálcica, la cual debe estar a una concentración de 10 mM de cloruro de calcio, al plasma del
paciente, la muestra debe ser recolectada con anticoagulante de citrato de lo contrario no se
puede procesar la muestra.

APTT
El tiempo de tromboplastina parcial activada es una prueba que nos permite evaluar los
factores VIII, IX, XI y XII de la vía intrínseca de la coagulación, además esta prueba es útil y
fundamental para el control y seguimiento en la terapéutica con anticoagulante por heparina.
Así como en la prueba PT su fundamento se basa en la medición del tiempo que tarda en
coagular un plasma con la diferencia que este debe estar descalcificado,en presencia de un
exceso de cefalina, activador, calcio y se realiza la prueba a una temperatura de 37°C.

Factor XIII
El factor de coagulación XIII, es factor estabilizador de la fibrina. Es una proteína plasmática
de síntesis hepática y plaquetaria, que participa en la ruta final común de la hemostasia,
estabilizando el coágulo blando de fibrina o polímero de fibrina.

RESULTADOS

*Los siguientes procedimientos a mencionar se realizaron con la obtención de plasma pobre


en plaquetas (PPP) a partir de sangre total tomada en un tubo tapa azul que tenía como
anticoagulante Citrato de sodio al 3.2 %. La centrifugación para obtener PPP fue de 2500
rpm por 10 a 15 minutos
PT
● Tanto el reactivo como el plasma se pre-calentaron en el baño serológico por no más
de 10 minutos.
● Se pipetearon 100 μl de muestra y 150 μl del reactivo precalentado, disparando
simultáneamente el cronómetro.
● Finalmente se compararon los tres resultados con el control normal y se calculó el
INR para cada muestra con la siguiente ecuación

PT pte ISI
INR=( )❑
PT normal
En donde el valor de ISI es de 1.06
El control normal de esta prueba se encuentra estandarizado en 12.5 seg.

Se procesaron un total de 3 muestra más el control normal cuyos resultados fueron

PTG: 32’’
PT1: 15’’
PT2: 23’’
PTc (CN): 11 ’’

Imagen 1
Resultados de la prueba de PT de las tres muestras y el control normal a la derecha.

Cálculo INR

PTG
32 1.06
INR=( )❑ = 3.101
11
PT1

15 1.06
INR=( )❑ = 1.389
11
PT2

23 1.06
INR=( )❑ = 2.185
11

aPTT
● Para realizar esta prueba se pipetearon 100 μl de reactivo FSI y 100 μl de la muestra.
● Se incuba a 37°C durante 3 minutos en baño serológico y se adicionan 100 μl de
CaCl2
● Se realiza la observación de los resultados 25 seg después de adicionar los 100 μl de
CaCl2

El control normal de esta prueba se encuentra estandarizado en 26.5 seg.

Factor XIII
● En esta prueba se pipetearon 100 μl de CaCl2 y 100 μl de la muestra.
● Se incuba a 37°C durante 30 minutos en baño serológico y pasado este tiempo se
realiza la observación del coágulo, se realizan movimientos para desprender el
coágulo del tubo.
● Se adicionan 3cc de urea y se leen los resultados.

Interpretación de los resultados:


- Positivo (+): Se obtiene un coágulo inestable el cual se rompe al adicionar la urea.
- Negativo (-): Se obtiene un coágulo muy estable el cual gana firmeza al adicionar la
urea.

En esta prueba utilizamos tres muestras y realizamos el control normal, estos fueron los
resultados obtenidos:

XIII G: Negativo (-)


XIII 1: Negativo (-)
XIII 2: Negativo (-)
XIII C (CN): Positivo (+)
Imagen 2.
Resultados negativos de la prueba de factor XIII.

Imagen 3.
Resultado control normal de la prueba de factor XIII.

DISCUSIÓN

PT
El PT se puede ver aumentado cuando hay bajas cantidades, alteraciones o ausencia de
factores de coagulación, también si el paciente está tomando algunos antibióticos,
tratamientos hormonales y se disminuye el tiempo por aumento de la vitamina K por la
ingesta de algunos alimentos. Durante la práctica dieron elevados los tiempos en las 3
muestras con respecto al control posiblemente no se debe estos resultados a la muestra si no a
que no se logró identificar correctamente y a tiempo la formación del coágulo por lo cual
afectó los resultados que a su vez alteró los cálculos de del INR, también se puede atribuir a
un mal manejo de los reactivos, errores en el pipeteo o por una posible contaminación en los
tubos utilizados durante la prueba.

aPTT
Al momento de realizar esta prueba, no se obtuvieron los resultados esperados debido a
errores experimentales, como lo pudieron ser, tubos contaminados o mal manejo de los
reactivos.

Factor XIII
En esta prueba las 3 muestras trabajadas dieron como resultado un coágulo demasiado estable
que estaba fijo al tubo donde se realizó la prueba, esto nos indica un mal procedimiento al
momento de realizar la prueba debido a que el coágulo debería poder moverse en el tubo, por
esto se sospecha principalmente que es debido a un mal lavado de los tubos utilizados en la
práctica debido a que la contaminación residual puede provocar la formación de esta coágulo
fijo al tubo, también puede ser por un error al añadir los reactivos. Por culpa del profe q se
confundio en el tablero

REFERENCIAS
1. Flores-Rivera OI, Cuauhtémoc A, 330 N, Karina Ramírez-Morales D, Meza-Márquez
JM, et al. Fisiología de la coagulación [Internet]. Medigraphic.com. [citado el 2 de
junio de 2022]. Disponible en:
https://www.medigraphic.com/pdfs/rma/cma-2014/cmas142c.pdf
2. Wiener-lab. Tromboplastina cálcica para la determinación del tiempo de protrombina
en una etapa [Internet]. Wiener-lab.com. [citado el 2 de junio de 2022]. Disponible
en: https://www.wiener-lab.com/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/
prothrombin_time_plus_sp.pdf
3. Wiener-lab. Reactivos para la determinación del Tiempo de Tromboplastina Parcial
Activada [Internet]. Wiener-lab.com. [citado el 2 de junio de 2022]. Disponible en:
http://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/
apttest_ellagico_sp.pdf
4. C. compuesto químico [Internet]. Wikipedia.org. Wikimedia Foundation, Inc.; 2016
[cited 2022 Jun 3]. Available from: https://es.wikipedia.org/wiki/Factor_de_coagulaci
%C3%B3n_XIII

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