Limonina en El Limon

Departamento de Ingeniería Química y Bioquímica
Ing. Bioquímica
Reporte Final de Residencia Profesional
“Evaluación del contenido de limonina en el limón persa (Citrus Latifolia Tanaka) y

mexicano (Citrus Aurantifolia Christn (swingle)) como criterio de la selección de materia
prima para la elaboración de jugo de limón”
Presenta
Víctor Daniel Hernández Villanueva
Asesor interno. M.C. Celia Alejandrina Pedroza Macías

Asesor externo. I.Q.A. Javier Méndez Rodríguez
14 de Noviembre de 2014; Tecomán, Colima.

Tabla de contenido
INTRODUCCIÓN .................................................................................................................................. 5
Capítulo 1 Planteamiento del proyecto ............................................................................................. 7
1.1 Justificación .................................................................................................................................. 8
1.2 Objetivos ....................................................................................................................................... 9
1.2.1 Objetivo general ................................................................................................................... 9
1.2.2 Objetivos específicos ............................................................................................................. 9
1.3 Caracterización del área ......................................................................................................... 10
1.3.1 CITROJUGO S.A. DE C.V. ......................................................................................................... 10
1.3.1.1 Misión ................................................................................................................................... 10
1.3.1.2 Visión 2018 ........................................................................................................................... 11
1.3.2 Organización de la empresa ................................................................................................... 11
1.4 Alcances y Limitaciones .............................................................................................................. 12
1.4.1 Alcances ............................................................................................................................... 12
1.4.2 Limitaciones ......................................................................................................................... 12
Capítulo 2 CITROJUGO S.A. DE C.V................................................................................................... 13
2.1 PLANTA ................................................................................................................................... 14
2.2 PRODUCTOS ............................................................................................................................ 15
2.2.1 Jugo concentrado de limón turbio .................................................................................. 15
2.2.2 Jugo concentrado de limón clarificado ........................................................................... 15
2.2.3 Jugo de limón simple ....................................................................................................... 16
2.2.4 Aceite de limón destilado................................................................................................ 16
2.2.5 Aceite de limón centrifugado tipo A ............................................................................... 17
2.2.6 Aceite de limón centrifugado tipo B ............................................................................... 17
2.2.7 Esencia de limón .............................................................................................................. 18
2.2.7 Cáscara de limón deshidratada ....................................................................................... 18
2.3 Caracterización del Departamento de calidad ..................................................................... 19
2.3.1 Objetivos del área de control de calidad ............................................................................ 19
2.3.2 Política de calidad................................................................................................................ 19
CAPITULO 3 Fundamentos teóricos .................................................................................................. 20
3.1 Generalidades de los cítricos ................................................................................................. 21
3.2 Caracterización del Limón (Lemon), Limón Mexicano (Citrus aurantifolia Christn ( Swingle)
) y Limón persa (Citrus Latifolia Tanaka) ..................................................................................... 22
2
3.2.1 Limón (Lemon) ................................................................................................................. 22
3.2.2 Limón Mexicano (Citrus aurantifolia Christn ( Swingle) ) .............................................. 23
3.2.3 Limón persa (Citrus Latifolia Tanaka) ............................................................................. 25
3.3 Limonoides amargos presentes en el limón .......................................................................... 26
3.3.1 Limonina: Principal representante amargo de los limonoides .......................................... 26
3.4 Cromatografía: Definición y aspectos generales .................................................................. 27
3.4.1 Métodos Cromatograficos.................................................................................................. 28
CAPITULO4 Procedimiento y descripción de las actividades realizadas ........................................ 31
4.1 Muestreo de camiones de limón ........................................................................................... 32
4.2 Preparación de soluciones ..................................................................................................... 33
4.2.1 Soluciones de Carrez I.......................................................................................................... 33
4.2.2 Soluciones de Carrez II ........................................................................................................ 33
4.2.2 Acido Fosfórico 3µM............................................................................................................ 34
4.2.2 Acetonitrilo grado HPLC ...................................................................................................... 35
4.3 Preparación de la muestra ..................................................................................................... 35
4.4 Preparación del equipo e Inyección de muestra ................................................................... 38
4. 5 Curva de calibración de la limonina ....................................................................................... 42
4. 6 Reporte de Análisis ................................................................................................................. 42
CAPITULO 5 Resultados .................................................................................................................. 45
5.1 Resultados de Limón Mexicano verde procedente de Colima.............................................. 46
5.2 Resultados de Limón Mexicano amarillo procedente de Colima ......................................... 47
5.3 Resultados de Limón Mexicano verde procedente de Michoacán ....................................... 47
5.4 Resultados de Limón Mexicano amarillo procedente de Michoacán ................................... 48
5.5 Resultados de Limón Persa verde procedente de Veracruz.................................................. 49
5.6 Resultados de Limón Persa amarillo procedente de Veracruz ............................................. 49
5.7 Resultados de Limón Persa verde procedente de Tabasco ................................................... 50
5.8 Resultados de Limón Persa amarillo procedente de Tabasco .............................................. 51
CAPITULO 6 Análisis de Resultados ................................................................................................ 52
6.1 Limón Mexicano Verde........................................................................................................... 53
6.2 Limón Mexicano Amarillo ...................................................................................................... 54
6.3 Limón Persa Verde .................................................................................................................. 55
6.4 Limón Persa Amarillo ............................................................................................................. 56
Capítulo 7 Conclusiones ................................................................................................................... 62
3
Capítulo 8 Recomendaciones ........................................................................................................... 64
Fuentes de consulta.......................................................................................................................... 66
_Páginas WEB ................................................................................................................................... 67
_Libros ............................................................................................................................................... 68
_Tesis................................................................................................................................................. 68
4
INTRODUCCIÓN
En el cultivo de limón en México, se destacan dos variedades: el limón Mexicano con
semilla y el limón Persa sin semilla. “En el primer caso, su producción se generalizó desde
principios del siglo XX, y su desarrollo cubre la mayor parte del territorio nacional,
principalmente en la costa del Pacífico Mexicano, iniciando su plantación comercial en el
estado de Michoacán de donde se extendió a Colima, Oaxaca y Guerrero, con presencia en
Tamaulipas, Jalisco y Nayarit” (Goycoolea, 2012).
El limón mexicano se particulariza por la acidez que muestra el jugo del fruto, su
gran tamaño y la abundancia de aceite en la cáscara.
En el caso del limón persa, su cultivo en México es reciente y data de principios de

los 70 con su establecimiento en la región de Martínez de la Torre, Veracruz, de donde se
ha difundido ampliamente en la vertiente del Golfo de México a los Estados de Tabasco y
Yucatán con presencia en Chiapas y Oaxaca (Gonzales, 2003)
El limón Mexicano y Persa, además de desarrollarse cada uno en regiones

delimitadas, tienen mercados diferenciados ya que el limón Mexicano se destina al mercado
nacional y el Persa tiene como destino principal la exportación, sin embargo este ha venido
incrementando su participación en el consumo nacional, además de complementar el
abasto nacional en épocas de baja producción de limón Mexicano.
En las distintas industrias se procesa el limón para originar una amplia gama de
productos, como son el aceite esencial y diferentes jugos, cuya variante de clarificación
mediante ultrafiltro a nivel molecular para eliminar todos los sólidos, es preferido en
Inglaterra por su transparencia, agradable olor y brillante color. Además, la cáscara es
aprovechada para obtener pectinas o para fabricar mermeladas, previa deshidratación o
escaldada de la cáscara. Finalmente, no pueden dejar de citarse las empacadoras, donde se
prepara el limón en fruta para el mercado nacional e internacional.
Del limón todo es aprovechable: de las hojas se puede obtener un aceite, como lo
hacen en Italia, y en cuanto a la madera, tal vez podría ser útil, porque la gran cantidad de
aceites que contiene la convierten en un excelente combustible ¡que arde como yesca! En
5
general, “estos productos son utilizados por la industria alimentaria. El limón seleccionado
en las empacadoras es preparado, además, para su exportación a Estados Unidos, Canadá
y Sudamérica” (Madera, 2014).
Entre las alternativas de comercialización se han desarrollado procesos para la

elaboración de zumos (lo que conocemos como jugos de limón), sin embargo algunas
variedades cítricas (como el limón mexicano y persa) poseen un amargor excesivo,
representando un impacto económico significantemente negativo sobre la industria del
limón, debido a que los jugos amargos tienen un valor comercial más bajo y normalmente
con rechazados por los consumidores.
Para resolver el problema en el jugo de limón se han desarrollado procedimientos

con resinas neutras o de intercambio iónico y carbón activado disminuyendo o eliminando
así componentes responsables del amargor del jugo de limón como lo es la limonina.
Un pequeño inconveniente de las resinas es la saturación de estas por lo que a

determinados periodos de tiempo se tiene que realizar una regeneración de esta.
En la planta de Citrojugo S.A. de C.V. se trabaja con este tipo de resinas para la
realización de jugo de limón tipo Lemon; el cual tiene un amargor muy bajo o prácticamente
nulo. Lo anteriormente dicho es debido a que este jugo presenta una concentración menor
a 30 ppm de limonina (como producto final).
EL presente trabajo es sobre la evaluación del contenido de limonina de dos

variedades de limón (Persa y Mexicano) en dos estados de maduración (verde y amarillo)
proveniente de 4 entidades (Veracruz, Tabasco, Michoacán, Colima respectivamente) y de
esta manera tener un parámetro para la selección de materia prima a la hora de realizar un
jugo de limón tipo lemon.
6
Capítulo 1
Planteamiento del proyecto
7
1.1 Justificación
Dentro de la empresa CITROJUGO S.A. de C.V. se realiza el procesamiento de jugo

de limón tipo lemon, el cual es principalmente caracterizado por un bajo contenido de
limonina ( igual o menor a 30 ppm) por lo cual es de suma importancia tener un control de
este limonoide al iniciar a procesar la materia prima.
El presente trabajo tiene la finalidad de evaluar el contenido de limonina en limón

tipo Persa (Citrus Latifolia Tanaka) y Mexicano (Citrus Aurantifolia Christn (swingle)) en
dos estados de maduración ( verde y amarillo) proveniente de 4 estados de la República
Mexicana ( Colima, Michoacán, Tabasco y Veracruz) mediante Cromatografía Liquida de
Alta Eficacia (HPLC) y de esta manera establecer en qué estado de maduración y la zona de
origen tiene menor cantidad de limonina en las dos variedades de limón.
Uno de los beneficios directos de esta evaluación son los tiempos de procesamiento
ya que el ingreso de la materia prima reduciría drásticamente.
Otro de los beneficios es el aumento en el tiempo de funcionamiento de las

columnas desamargadoras (contienen una resina que atrapa al limonoide reduciendo el
contenido de limonina en el jugo de limón tipo lemon).
8
1.2 Objetivos
1.2.1 Objetivo general
Establecer el contenido de limonina del limón persa y mexicano provenientes de las

diferentes zonas geográficas (Veracruz, Tabasco, Michoacán, Colima) respectivamente en
dos estados de maduración: verde y amarillo.
1.2.2 Objetivos específicos
 Determinar contenido de limonina en limón persa proveniente de las

diferentes zonas geográficas de Veracruz y Tabasco.
 Determinar contenido de limonina en limón mexicano proveniente de las
diferentes zonas geográficas de Michoacán y Colima.
 Analizar resultados del contenido de limonina en las dos variedades de limón
en el estado de maduración verde y amarillo.
9
1.3 Caracterización del área
1.3.1 CITROJUGO S.A. DE C.V.
Es un conglomerado agro-industrial dedicado a la producción, tratamiento,

procesamiento industria y venta de limón verde y sus productos derivados.
Fue establecido en 1980 para promover el desarrollo socio-económico de esta

industria en el estado de Colima, sus buenas estrategias lo hicieron llegar a nuevos
continentes. Actualmente controla toda la cadena de producción: desde los viveros para la
producción de árboles hasta la entrega del producto final, pasando por las plantaciones,
empacadora, industria, transporte y centros de distribución. Las plantas industriales están
ubicadas en el estado de Colima (Citrojugo S.A. de C.V., 2010).
1.3.1.1 Misión
En Citrojugo S.A. de C.V. nuestra misión es representar a la industria del cítrico en

México, siendo la mejor alternativa para nuestros clientes, ofreciendo soluciones que
integren un producto seguro y garantizado.
Nuestro compromiso es asegurar y garantizar que contamos con los mejores

estándares de calidad gracias al trabajo, esfuerzo y desarrollo de nuestros colaboradores.
10
1.3.1.2 Visión 2018
Queremos ser la compañía con los mejores procesos integrados e innovadores en

los cítricos para su comercialización a nivel mundial.
Queremos tener la mayor capacidad de procesamiento con el fin de dar las mejores
soluciones a nuestros consumidores globales.
1.3.2 Organización de la empresa
Para el logro de sus objetivos, CITROJUGO S.A. DE C.V. está organizada bajo el
siguiente esquema
Figura 1.3.2.1 Organigrama de Citrojugo S.A. de C.V.
Yo participe en el departamento de calidad en el área de control de la calidad en

conjunto con los analistas de cromatografía.
11
1.4 Alcances y Limitaciones
1.4.1 Alcances
 Análisis de limonina en limones por HPLC en un tiempo de 15 min.
 Análisis de limón proveniente de 4 distintas entidades federativas.
 Evaluación de materia prima en Citrojugo S.A. de C.V.
1.4.2 Limitaciones
 Disponibilidad del HPLC debido al monitoreo de las columnas
desamargadoras las 24 horas.
 Falta de suministros materiales (Cartuchos C18) por parte de la empresa.
12
Capítulo 2
CITROJUGO S.A. DE C.V.
13
2.1 PLANTA
Se encuentra ubicada en la salida de carretera al Real. En esta planta se realiza la

producción de jugo concentrado de limón, aceite destilado y centrifugado de limón.
En el inicio del proceso se cuenta con dos tolvas que reciben la materia prima; y
estas a su vez cada una destina la materia prima a uno de los dos procesos de extracción
que se manejan: Molienda ( se pasa el limón a través de unos molinos donde se tritura por
completo, posteriormente se somete a un proceso de centrifugación donde se separa aceite
y jugo) y método de raspadura ( la materia prima pasa a través de unos raspadores que
actúan sobre el epicarpio y el mesocarpio y en conjunto con un flujo muy bajo de agua se
llevan a los alambiques donde se inicia el proceso de extracción de aceite de limón).
Para el proceso de producción de jugo de limón se cuenta con un proceso de

clarificación del jugo mediante la utilización de un ultra filtro, el des amargado (reducción
de limonina) del jugo mediante columnas empacadas con resinas especializadas y
finalmente un proceso de evaporación para la concentración del jugo de limón. También se
cuenta con el área de envasado; para el resguardo del jugo se cuenta con tres cámaras
frigoríficas a -18°C.
En el proceso del aceite destilado del limón se cuentan con alambiques en donde se
realiza el “cocimiento” para así dirigir a los destiladores de acero inoxidable que operan al
vacío en corriente de vapor; así separando los vapores condensados mediante decantación.
Se cuenta con un área con tanques de acero inoxidable con agitación para la
realización de las mezclas de aceites requeridas por el cliente.
En el proceso del aceite centrifugado de limón cuentan con unas centrifugas que
separan los sólidos considerados como desecho, el jugo y el aceite centrifugado que se
separa, se somete a un proceso de des encerado (naturalmente el aceite decanta todas las
ceras de mayor peso molecular, sometiendo el aceite nuevamente a centrifugación) para
así finalmente obtener el aceite centrifugado tal cual.
14
Cuenta con almacén donde se almacena el aceite de limón para su posterior envió
al centro de distribución.
La planta cuenta con el departamento de calidad que se encarga de la inspección y

revisión de la producción con el fin de asegurarse que cumplan con los más altos criterios
de calidad para superar las expectativas de sus clientes.
2.2 PRODUCTOS
Citrojugo S.A. de C.V. elabora una amplia gama de productos derivados de este
cítrico como son:
2.2.1 Jugo concentrado de limón turbio
Se obtiene por expresión suave, se tamiza, se centrifuga y se concentra mediante un

proceso industrial en condiciones sanitarias apropiadas.
Es un líquido turbio, muy viscoso, un poco pegajoso con un color que puede oscilar
entre beige y el café claro con un buen sabor distintivo a limón mexicano, libre de sabores
extraños envejecimiento.
2.2.2 Jugo concentrado de limón clarificado
Se obtiene por expresión suave, se tamiza, se centrifuga, se filtra mediante un

sistema de membranas y se concentra mediante un proceso industrial en condiciones
sanitarias apropiadas.
Es un líquido claro, un poco viscoso y con un color amarillo claro característico a

limón mexicano.
15
2.2.3 Jugo de limón simple
Se obtiene por expresión suave, se tamiza, se centrifuga y se pasteuriza mediante
un proceso industrial en condiciones sanitarias.
Es un líquido turbio de poca viscosidad, con un color y olor característicos a limón

mexicano.
Dentro de los tres tipos de jugos de limón también se encuentra el tipo lemon el cual
principalmente es caracterizado por tener un contenido igual o menor a 30 ppm de
limonina.
Figura 2.2.1.- Diferentes tipos de jugo de limón producidos en Citrojugo.
2.2.4 Aceite de limón destilado

Es obtenido por destilación por arrastre con vapor de agua de la emulsión jugo-
aceite obtenida de prensar los frutos enteros en una prensa de tornillo.
Tiene un olor Fresco, terpénico, algo frutal de tipo cítrico; Sabor y de color
ligeramente amarillento a amarillo.
16
Figura 2.2.4.1.- Aceite de limón destilado
2.2.5 Aceite de limón centrifugado tipo A

Es obtenido por centrifugación de la emulsión jugo-aceite obtenida de prensar los
frutos enteros en una prensa de tornillo.
Tiene aspecto de líquido claro de color ambas a verde que puede presentar un
precipitado ceroso; olor fresco frutal de tipo cítrico que recuerda al jugo de limón y un sabor
característico.
Figura 2.2.5.1.- Aceite de limón centrifugado tipo A
2.2.6 Aceite de limón centrifugado tipo B
Es el aceite obtenido por centrifugación de la emulsión agua-aceite obtenida de

tratar los frutos enteros en una máquina provista de rodillos con una superficie abrasiva o
con puntas que rompen las celdillas de aceite.
Tiene un aspecto de Líquido claro color ámbar muy oscuro a verde intenso, que
puede presentar un precipitado ceroso; con olor fresco frutal de tipo cítrico que recuerda
a la cáscara de limón y un sabor característico.
17
Figura 2.2.6.1.- Aceite de limón centrifugado tipo B
2.2.7 Esencia de limón
Es el aceite recuperado por decantación del agua de condensación obtenida durante

la concentración del jugo de limón.
Tiene un aspecto de líquido claro que va de incoloro a ligeramente amarillento con

olor fresco terpénico con una pronunciada nota a jugo de limón.
Figura 2.2.6.1.- Esencia de limón
2.2.7 Cáscara de limón deshidratada
Se obtienen por lavado y deshidratado de las cáscaras de limón verde residuales de

la extracción del jugo y aceite, ya que el subproducto se utiliza para la extracción de pectina.
Figura 2.2.7.1.- Cascara de limón deshidratada
18
2.3 Caracterización del Departamento de calidad
El departamento de control de calidad es muy importante en cualquier empresa de

giro industrial. En Citrojugo S.A. de C.V. se encuentra conformado por el área de Control de
Calidad y Aseguramiento de la Calidad.
El área de control de calidad entrega resultados 100% confiables en tiempo y forma

al departamento de producción para la correcta producción de lotes de jugos y aceites
dentro de las especificaciones.
El área de control de calidad se divide en:
Laboratorio de Análisis Fisicoquímicos: Se encarga de realizar análisis Fisicoquímicos

y sensoriales todos los lotes de producto terminado de jugos y aceites para evaluar que
estén dentro de especificaciones y retener todo el producto no conforme.
Laboratorio de Cromatografía: Se encarga de realizar análisis cromatograficos a lotes

de producto de jugos y aceites para evaluar que estén dentro de las especificaciones y poder
retener todo el producto no conforme Y a la materia prima con la finalidad de detectar los
plaguicidas que pudieran tener.
2.3.1 Objetivos del área de control de calidad
 Cero rechazos de jugos y aceites de clientes externos por trabajo de ensayos no conformes.
 Cero quejas de clientes externos por trabajo de ensayos no conformes.
2.3.2 Política de calidad
Entregar resultados de análisis 100% confiables en tiempo y forma al departamento

de producción para la correcta producción de jugos y aceites dentro de las especificaciones.
Analizar físico-químicamente y reportar todos los lotes de producto terminado de

jugos y aceites para evaluar que estén dentro de las especificaciones y retener todo el
producto no conforme.
19
CAPITULO 3
Fundamentos teóricos
20
3.1 Generalidades de los cítricos
Los frutos cítricos pertenecen a la clase Angiospermae, a la subclase Dicotiledónea

de la orden Rutae con familia del mismo nombre y al género Citrus; y en estos podemos
encontrar a la naranja (Citrus sinensis), la mandarina (Citrus reticulata), la toronja (Citrus
paradisi) y al limón (Citrus aurantifolia, Citrus limon, Citrus latifolia, entre otros) (Catarina
et al,2011 )
En los frutos cítricos se distinguen dos partes: la piel o corteza y los segmentos o
cascos. La corteza a su vez está formada por el epicarpio y el mesocarpio (mesocarpio
externo y mesocarpio interno) que forman la parte coloreada de la corteza, la cual recibe el
nombre de flavedo.
El mesocarpio interior es de color blanco, de allí el nombre de albedo; en algunas

variedades el mesocarpio interno esta coloreado de amarillo a rosa palido. El endocarpio
está constituido por los cascos o segmentos. Los haces vasculares conductores del agua y
los nutrientes, que existen en la corteza y en el eje central del fruto no penetran en el
interior de los segmentos, excepto aquellos que partiendo del eje central, alimentan en un
pricipio a los rudimentos seminales y después a la semillas.
Figura 3.1.1- Esquematización de las diferentes secciones de un cítrico
21
El epicarpio o también denominado flavedo contiene los pigmentos y aceites
esenciales del cítrico.
El albedo en su estado fresco contiene de un 75 – 80 % de agua. Es aquí donde se

encuentra la pectina en mayor cantidad dentro del cítrico y en la mayoría de los cítricos se
encuentra dos principios preamargos: la limonina contenida en el jugo y la isolimonina
contenía en las de ombligo las cuales son responsables del amargor en el jugo después de
exprimirlos.
El endocarpio es donde se encuentra la pulpa de los cítricos y por ende el jugo que
el color característico es debido fundamentalmente a los carotenoides. Algunos otros
compuestos de importancia se encuentran aquí también como algunos azucares y ácidos
como el málico, oxálico, succínico y el cítrico (el cual es un parámetro de niveles de acides
en jugos a nivel industrial) y algunos flavonoides.
3.2 Caracterización del Limón (Lemon), Limón Mexicano (Citrus

aurantifolia Christn ( Swingle) ) y Limón persa (Citrus Latifolia Tanaka)
3.2.1 Limón (Lemon)
El limón o comercialmente conocido como Lemon es un fruto en baya del limonero,

árbol de hoja perenne y espinoso de la familia de las rutáceas que alcanza más de 4 metros
de altura. Botánicamente hablando es una especie hibrida entre C. medica (limón francés)
y C. aurantium (naranjo amargo).
Figura 3.2.1.1.- Limón

El fruto es de forma oblonga u oval, de 7 a 12 cm de longitud, amarillo claro o dorado.
Tiene una cáscara más o menos gruesa y punteada de glándulas, dependiendo de las
22
variedades y en su interior, la pulpa está dividida en 'gajos', unidos unos contra otros dando
forma al fruto, y poseen un jugo agrio y fragante. Sus semillas son pequeñas, ovoides y
puntiagudas.
Figura 3.2.1.2 .- Limón y Limonero

Es ampliamente utilizado en alimentos asumiendo la función de condimento de
comidas ( el jugo), usos domésticos como quitamanchas de tinta, abrillantamiento de
bronce y otros metales, y en un contexto más industrial el zumo es utilizado para la
fabricación de bebidas refrescantes y la corteza es utilizada perfumería, pastelería y en
confección de licores.
3.2.2 Limón Mexicano (Citrus aurantifolia Christn ( Swingle) )
Conocido con múltiples nombres entre los que se incluyen lima acida, limón sutil es
un fruto con forma globosa con diámetro entre 2.5 a 3 cm de color verde amarillento al
madurar.
23
Figura 3.2.2.1 .- Limón Mexicano.
Proviene de un árbol perenne de unos 5 e altura, y tronco habitualmente torcido,
se ramifica densamente desde muy abajo. Las ramas poseen espinas cortas y duras que
surgen de las axilas. Existen diferentes cultivares de Citrus aurantifolia con diversos grados
de acidez y colores que varían del verde al amarillo (Madera, 2014).
Figura 3.2.2.2 .- Árbol de limón mexicano.

El principal uso de este es el aceite que es ampliamente utilizado en la industria
alimentaria, en la perfumería debido a que está constituido principalmente por
monoterpenos, dos derivados del bornadol, canfeno, carveo, cimeno, cineol, citronelol,
dimetil estireno, felandreno, geraniol, limoneno, neral, alfa y beta- pineno, pinocarveol, iso-
piperitenol, piperitona, sabineno, sabinol, terpineno, terpineol, terpinoleno y verbenol.
Además se han identificado los sesquiternopenos, bergamopteno, beta-bisaboleno, alfa-
bisabolol, alfa cadinol, beta-cariofileno, farnesal y farnesol; y las cumarinas, un derivado de
la cumarina, la iso-impleratorina, limetina, oxi-hidrato de pencedanina, felopterina, iso-
pimpinelina y geranil-psoralen (Catarina et al, 2011).
24
3.2.3 Limón persa (Citrus Latifolia Tanaka)
También conocida como lima de Tahití, limón criollo, limón pérsico, limón mesina,
limón sin semilla. El fruto tiene unos 6 cm de diámetro, a menudo con extremos ligeramente
puntiagudos, normalmente se vende con color verde, aunque cuando alcanza la madurez
total es amarillo. Son menos ácidas que la lima ácida y no tiene el amargor de la lima ácida
y que enmascara sus otros sabores (Goycoolea, 2012).
Figura 3.2.3.1 .- Limón persa.
El jugo del fruto y el polvo del fruto desecado tienen un amplio uso medicinal, solo
o en combinaciones. Por vía oral se usa para tratar afecciones respiratorias (amigdalitis,
bronquitis, catarro, cefalea, gripe, inapetencia, neumonía, resfrio, tos), gastrointestinales
(diarrea, disentería, estomatitis, flatulencia, gastralgia, gastritis, fiebre tifoidea, náusea,
vómito) escorbuto, fiebre, gonorrea, hepatitis, hipertensión, ictericia, paludismo,
sarampión, reumatismo, y neuralgia. Las pepitas machacadas con azucar, se dice que son
antihelmínticas.
Tópicamente se usa el jugo puro o diluido en lavados para tratar candidiasis,

erisipela, escarlatina, exantema, heridas, herpes, infecciones, llagas, quemaduras, y tiña. En
gargarismos para infecciones de la boca y garganta; el jugo o esencia en colirios se usa para
conjuntivitis.
Se le atribuye propiedad antiséptica, astringente, balsámica, cicatrizante,

depurativa, desecante, digestiva, diurética, emenagoga, febrífuga, hipotensora,
refrescante, sudorífica y vermífuga.
25
3.3 Limonoides amargos presentes en el limón
Son compuestos tri terpenos altamente oxigenados presentes en las rutáceas y otras
plantas. Se han aislado aproximadamente 36 limonoides del genero citrus, pero los
predominantes y que le confieren sabor amargo son la limonina y la nomilina.
Figura 3.3.1 .- Estructura química de limonoides amargos
3.3.1 Limonina: Principal representante amargo de los limonoides
Se encuentra normalmente en los tejidos de las frutas cítricas intactas. Contienen

un precursor no amargo de la limonina: la sal del ácido limonico anillo-A lacona ( LARL). Solo
cuando las frutas cítricas se maceran, y cuando los jugos obtenidos a partir de ellas se
almacenan, la acción combinada de los acidos del jugo y de la enzima limonoide anilo-D
lactona hidrolasa ( LDRLasa), transforma el limonoide no amargo, LARL, en Limonina
(Mitchel et al, 1983).
26
Figura 3.3.1.1 .- Síntesis de formación de la Limonina por acción de la LDRLasa.
El amargor producido en el limón es un problema tangible para el aprovechamiento

comercial de los derivados cítricos (específicamente el jugo) se han reportado varios
procedimientos para la determinación de limonina. Estos procedimientos esencialmente
son realizados por técnicas basadas en cromatografía.
3.4 Cromatografía: Definición y aspectos generales
Tal como Rubinson & Rubinson definen a la cromatografía como la “ciencia y el arte
de separar entre si los componentes de una sustancia” para poder analizarlos uno por uno
y cuantificarlos en una mezcla definida por estudiar. La separación de estos componentes
se consigue a través de una gran variedad de técnicas cuyas bases moleculares tienen
diferencias muy diversas.
Estas separaciones cromatografías se pueden llevar a cabo en fase liquida o en fase

gaseosa, en las cuales las muestra se introduce en una fase fluida en movimiento (un líquido
o gas respectivamente) denominada fase móvil la cual transporta la muestra a través de un
volumen o capa de partículas de materia solida (denominada fase estacionaria). La
interacción química de los analitos se puede producir en la misma superficie del solido
denominado fase estacionaria, con los líquidos que estén en contacto con esa superficie o
bien las moléculas enlazadas a dicha superficie.
27
Figura 3.4.1.- Clasificación de los procesos cromatograficos
3.4.1 Métodos Cromatograficos
Existen distintos métodos cromatograficos dentro de la cromatografía, pero para

tener una comprensión completa atenderemos a la clasificación general expresado en la
siguiente imagen.
Figura 3.4.1.1 .- Clasificación de los distintos métodos cromatograficos

(Tomado de SKOOG et al)
28
3.4.2 Cromatografía liquida de alta resolución (HPLC)
Engloba un conjunto de técnicas de análisis basadas en la separación de los

componentes de una mezcla y su posterior detección. Las técnicas son muy variadas, pero
en todas ellas hay una fase móvil que consiste en un fluido (en este caso es un líquido) que
arrastra la muestra con un flujo constante de presión proporcionado por una bomba
llevándola hasta la columna donde se encuentra la fase estacionaria (se trata de un sólido
o un líquido fijado en un sólido). Generalmente estas columnas están fabricadas con tubos
de vidrio de paredes resistentes o con polímeros como el polieteretercetona; además
existen columnas de acero inoxidable revestidas con vidrio o polieteretercetona.
Figura 3.4.2.1.- Esquematización general de un HPLC
Después de haber pasado por la fase estacionaria (los compuestos ya

separados) pasan por un detector que genera una señal que puede depender de la
concentración y del tipo de compuesto. Generalmente se utilizan una variedad de
detectores como se muestra en la siguiente imagen.
29
Figura 3.4.2.2.- Múltiples detectores que se pueden utilizar en HPLC
Algunos autores también han trabajado con el acoplamiento de HPLC/MS ;

es decir la utilización de la cromatografía de alta eficacia acoplada a espectrometría
de masas definida tal cual como una técnica de análisis que combina las capacidades
de la separación física de del HPLC con la capacidad de análisis de masas del MS.
30
CAPITULO4
Procedimiento y descripción de las actividades realizadas
31
Para realizar la evaluación del contenido de limonina en el limón persa y mexicano
se utilizara la técnica cromatografía de HPLC con detección UV / Vis.
4.1 Muestreo de camiones de limón
Se identifica la procedencia del camión y la variedad del limón que transportaba

este. Las muestras eran tomadas de todo el camión a través de portezuelas que tenía en
una bolsa de plástico. Las muestras tenían un peso aproximado entre 2 y 3 Kilogramos.
Fig. 4.1.1 .- Camión cargado con limón
El limón tomado fue seleccionado con respecto a la variedad, estado de madurez y

procedencia como se muestra en la siguiente tabla.
Muestra Variedad Estado de Procedencia

de limón maduración
A Mexicano Verde Colima
B Mexicano Amarillo Colima
C Mexicano Verde Michoacán
D Mexicano Amarillo Michoacán
E Persa Verde Tabasco
F Persa Amarillo Tabasco
G Persa Verde Veracruz
H Persa Amarillo Veracruz
Tabla 4.1.1.- Estructura general de muestreo de camiones de limón.
32
4.2 Preparación de soluciones
4.2.1 Soluciones de Carrez I
Con apoyo de una campana de extracción se disuelve 21.9 gramos de acetato de

zinc Zn (CH3COO)2 2H2O y 3 gramos de ácido acético glacial en agua destilada,
posteriormente en un matraz se afora a 1000 ml. Se deposita en un envase ámbar para
evitar su descomposición por la luz visible.
Figura 4.2.1.1.- Acetato de Zinc Figura 4.2.1.2.- Ácido Acético Glacial
4.2.2 Soluciones de Carrez II
Se disuelve 10.6 gramos de ferrocianuro de potasio [K4Fe(CN)6]3H2O en agua

destilada, posteriormente en un matraz se afora a 1000 ml. Se deposita la solución en un
envase ámbar para evitar su descomposición por la luz visible.
33
Figura 4.2.2.1.- Ferrocianuro de Potasio
4.2.2 Acido Fosfórico 3µM
Pesar 0.173 gramos de ácido fosfórico concentrado disolviendo con agua grado HPLC
aforando en un matraz hasta 500 ml. Se procede a filtrar al vacío con membrana de nylon 66 con
porosidad de 0.45 µm.
Figura 4.2.2.1.- Membrana de nylon en equipo de filtración al vacío
34
4.2.2 Acetonitrilo grado HPLC
Simplemente se procede a filtrar al vacío el acetonitrilo grado HPLC con membrana

de nylon 66 con porosidad de 0.45 µm.
Figura 4.2.2.1.- Acetonitrilo grado HPLC
4.3 Preparación de la muestra
Se procedió a cortar todos los limones de la muestra en 4 partes cada uno para
poder ingresarlos al exprimidor y obtener el jugo de limón.
Figura 4.3.1.- Limones partidos Figura 4.3.2.- Extractor mecánico de jugo de limón
Ya obtenido el jugo de la muestra se mezcla y se obtiene representativamente una

muestra de 25 ml de jugo en un tubo Falcón (de 50 ml) y se ingresó a un congelador hasta
35
que se pudiera realizar el análisis en el HPLC (debido a la disponibilidad de tiempo del
equipo) y para evitar la descomposición de la limonina contenida.
Figura 4.3.3.- Tubo Falcón con 25 ml de jugo de limón
Cuando se determinó que se podía realizar el análisis en el equipo se procedió a

descongelar la muestra. Enseguida se inició la fase de extracción de la limonina agregando
1 ml de solución de CARREZ I y CARREZ 2 (Tabla 4.3.1) respectivamente para realizar la
separación de pulpa y solidos solubles contenidos en el jugo; además de dejar reposar
durante 1 minuto de reposo entre cada solución.
Solución Composición
CARREZ I Agua destilada, acetato de zinc y ácido
acético glacial.
CARREZ II Agua destilada, ferrocianuro de potasio.
Tabla 4.3.1.- Composición de soluciones CARREZ
36
Figura 4.3.4.- Fase de extracción de limonina mediante soluciones CARREZ
Posteriormente del reposo se ingresó la muestra contenida en el tubo Falcón a una

centrifuga en la cual se programó a 5000 rpm durante 10 minutos para precipitar todos los
sólidos solubles, pulpa y demás componentes de peso molecular mayor al de la limonina.
Figura 4.3.5.- Centrifuga
Del sobrenadante obtenido se toma 1.5 ml y se realiza una extracción en fase solida
con un cartucho C18 Bond Elut® de Agilent Technologies (con un tratamiento previo al
cartucho) que retendrá a la limonina y otros limonoides dentro de este para finalmente
37
eluirlo con acetonitrilo grado HPLC y depositarlo en un vial con tapa de rosca de aprox. 1.5
ml de volumen (Figura 4.3.7).
Figura 4.3.6.- Cartucho C18 Blond Elut de Figura 4.3.7.- Vial con extracto de limonina.
Agilent Technologies.
4.4 Preparación del equipo e Inyección de muestra
Para la realización del análisis de limonina se realizara en un HPLC Agilent

Technologies 1200 que cuenta con un des gasificador, una bomba cuaternaria, inyector
manual mediante loop marca Rheodyne®, columna ZORBAX Eclipse Plus C18 (150 x 4.6 mm)
de fase inversa y un detector de UV/ VIS de lámpara de deuterio para alcanzar longitudes
de onda de 190- 600 nm.
Figura 4.4.1.- HPLC Agilent 1200 Series
38
Figura 4.4.2.- Loop marca Figura 4.4.3.- Columna Zorbax Eclipse Plus C18
Rheodyne®
Además de lo anterior se necesita un equipo de cómputo en el cual se tenga

instalado el software ChemStation for LC 3D systems que es el indicado para el control del
HPLC Agilent 1200 Series.
Figura 4.4.4.- Software para control de HPLC
39
Se procede al encendido del HPLC iniciando por el encendido del des gasificador de
líquidos, enseguida la bomba cuaternaria y finalmente el detector UV/VIS. Se procede a
iniciar el software ChemStation, enseguida se selecciona el método pre programado a
ejecutar (en este caso está guardado como LIMONINA.M) y esperamos a que el software lo
cargue por completo. Las condiciones de operación del equipo son las siguientes:
Fase móvil: Acetonitrilo: Acido Fosfórico 3µM en una proporción 60 %: 40 % respectivamente.
Flujo: 1.5 ml por minuto.
Presión: 100 bar
Tiempo: 15 minutos
Figura 4.4.5.- Condiciones de método LIMONINA.M
Se enciende el equipo en conjunto desde el software y esperamos a que el HPLC se

estabilice en el método seleccionado. Existen dos referencias que nos dicen cuando el
equipo está listo para iniciar la inyección y análisis de la muestra: cuando los iconos
representativos del flujo/presión de trabajo, la columna y el detector (DAD) se encuentran
sombreados en verde y el “online plot” se encuentre graficando muy cercano a 0 en el eje
de mAU.
Figura 4.4.6.- Esquema de los iconos representativos del flujo/presión, columna y detector
(DAD)
40
Figura 4.4.7.- Online Plot graficando muy cercano a 0
Se toma una jeringa con capacidad de 50 µL y se procede a bombear y enjuagar esta

con muestra contenida en el vial (Figura 4.3.7), se toman 30 µL de muestra y se procede a
inyectar directamente al Loop Rheodyne® (Figura 4.4.2) y se gira para iniciar el análisis de
la muestra.
Figura 4.4.8.- Inyección manual en HPLC
41
4. 5 Curva de calibración de la limonina
La curva de calibración se realizó por el método de estándar externo (calibración

sencilla) utilizando un estándar de Limonina marca SIGMA-ALDRICH® y Acetonitrilo grado
HPLC preparando 6 diluciones que van desde 0 hasta 100 ppm de limonina.
Figura 4.5.1.- Curva de calibración generada por reporte del software ChemStation
4. 6 Reporte de Análisis
El software reporta las gráficas de los cromatogramas resultantes en donde se

observa cada uno de los picos con sus respectivos tiempos de retención (tr). Así como las
tablas de resultados donde se puede encontrar los tiempos de retención y su absorbancia
de cada uno de los picos detectados.
42
Figura 4.6.1.- Cromatograma de muestra de jugo de limón.
Como se puede observar en la figura 4.6.2 el tiempo de retención de la limonina es

de 1.409 minutos aproximadamente; además podemos observar en el espectro el pico en
un tr de 1.409 min. que tiene una forma de un pico bifurco que es el espectro característico
de la limonina observado al correr el estándar.
Figura 4.6.2.- Espectros del pico de la limonina en 1.409 min.
43
Y finalmente el software nos entrega un reporte corto con la cuantificación de
limonina contenida en la muestra, tiempo de retención y área del pico.
Figura 4.6.3.- Reporte final de análisis
44
CAPITULO 5
Resultados
45
Se realizaron un total de 80 análisis de limonina entre las diferentes variedades de
limón y sus distintas procedencias. Los resultados se encuentran agrupados de la siguiente
manera:
5.1 Resultados de Limón Mexicano verde procedente de Colima
Numero de Concentración de limonina ( ppm)

muestra
1 18.66
2 19.34
3 19.68
4 19.90
5 19.45
6 18.99
7 18.43
8 18.59
9 19.01
10 19.78
Tabla 5.1.1.- Muestras de Limón mexicano verde procedente de Colima
Aplicando un tratamiento estadístico obtenemos:

Desviación estándar: 0.52068331
Media: 19.1765465
Mediana: 19.175
Promedio: 19.183
Varianza: 0.27475667
46
5.2 Resultados de Limón Mexicano amarillo procedente de Colima
Numero de muestra Concentración de limonina ( ppm)

11 7.98
12 8.35
13 7.89
14 8.59
15 8.22
16 9.45
17 8.75
18 8.20
19 7.93
20 8.67
Tabla 5.2.1.- Muestras de Limón mexicano amarillo procedente de Colima

Media: 8.39107755
Mediana: 8.285
Promedio: 8.403
5.3 Resultados de Limón Mexicano verde procedente de Michoacán

21 25.78
22 23.99
23 24.56
24 25.34
25 24.34
26 24.99
27 25.48
28 24.69
29 24.15
30 24.30
Tabla 5.3.1.- Muestras de Limón mexicano verde procedente de Michoacán
47
Media: 24.7552826
Mediana: 24.625
Promedio: 24.762
Varianza: 0.371773333
5.4 Resultados de Limón Mexicano amarillo procedente de Michoacán

31 21.3
32 21.25
33 20.99
34 20.75
35 20.45
36 20.67
37 20.01
38 19.99
39 20.94
40 21.08
Tabla 5.4.1.- Muestras de Limón mexicano amarillo procedente de Michoacán

Media: 20.7381974
Mediana: 20.845
Promedio: 20.743
48
5.5 Resultados de Limón Persa verde procedente de Veracruz

41 13.69
42 11.09
43 12.06
44 11.78
45 12.98
46 11.56
47 12.56
48 13.45
49 12.50
50 11.85
Tabla 5.5.1.- Muestras de Limón Persa verde procedente de Veracruz

Media: 12.3265074
Mediana: 12.28
Promedio: 12.352
5.6 Resultados de Limón Persa amarillo procedente de Veracruz

51 9.29
52 8.69
53 8.45
54 8.58
55 9.09
56 7.98
57 8.65
58 7.89
59 7.68
60 8.90
Tabla 5.6.1.- Muestras de Limón Persa amarillo procedente de Veracruz
49
Media: 8.46231047
Mediana: 8.58
Promedio: 8.47777778
Varianza: 0.74484
5.7 Resultados de Limón Persa verde procedente de Tabasco

61 8.70
62 7.98
63 7.89
64 8.85
65 8.96
66 9.92
67 8.54
68 9.90
69 8.56
70 7.86
Tabla 5.7.1.- Muestras de Limón Persa verde procedente de Tabasco

Media: 8.68830679
Mediana: 8.63
Promedio: 8.716
50
5.8 Resultados de Limón Persa amarillo procedente de Tabasco

71 6.98
72 5.87
73 4.59
74 5.02
75 6.39
76 5.59
77 6.79
78 4.98
79 5.79
80 4.06
Tabla 5.8.1.- Resultados de muestras de Limón Persa amarillo procedente de Tabasco

Media: 5.53124163
Mediana: 5.69
Promedio: 5.606
51
CAPITULO 6
Análisis de Resultados
52
6.1 Limón Mexicano Verde
Como se puede apreciar en la Figura 6.1.1 el contenido de limonina en cada una de

las procedencias se mantiene dentro de un rango (para Colima de 18 a 20 ppm y en el caso
de Michoacán de 24 a 26 ppm) pero si existe un gran margen entre el contenido de limonina
del limón de estas dos entidades.
Limon Mexicano Verde

30
25
Limonina (ppm)
20
15
Colima
10
Michoacan
0
Colima 18.66 19.34 19.68 19.9 19.45 18.99 18.43 18.59 19.01 19.78
Michoacan 25.78 23.99 24.56 25.34 24.34 24.99 25.48 24.69 24.15 24.3
Muestras
Figura 6.1.1.- Contenido de Limonina en el limón Mexicano verde
53
6.2 Limón Mexicano Amarillo
El contenido de limonina (Figura 6.2.1 ) en cada una de las procedencias se mantiene

dentro de un rango (para Colima de 7 a 10 ppm y en el caso de Michoacán de 20 a 22 ppm)
del cual se puede observar una gran diferencia en el contenido de limonina entre Colima y
Michoacan del limón Mexicano amarillo, y con referencia a la Figura 6.1.1 del limón
Mexicano verde se puede apreciar que el contenido de limonina llega hasta las 20 ppm.
Limon Mexicano Amarillo

25
20
Limonina (ppm)
15
10
0
Colima 7.98 8.35 7.89 8.59 8.22 9.45 8.75 8.2 7.93 8.67
Michoacan 21.3 21.25 20.99 20.75 20.45 20.67 20.01 19.99 20.94 21.08
Muestras
Colima Michoacan
Figura 6.2.1.- Contenido de Limonina en el limón Mexicano amarillo
54
6.3 Limón Persa Verde
La Figura 6.3.1 muestra que el contenido de limonina en el limón persa verde se

mantiene dentro de un rango de 8ppm a 14 ppm, Veracruz se mantiene con
concentraciones de 11 ppm a 14 ppm y Tabasco con 8 ppm hasta 10 ppm; por lo cual se
puede apreciar un gran margen entre el contenido de limonina del limón de estas entidades.
Limon Persa Verde

16
14
12
Limonina (ppm)
10
8
6
4
2
0
Veracruz 13.69 11.09 12.06 11.78 12.98 11.56 12.56 13.45 12.5 11.85
Tabasco 8.7 7.98 7.89 8.85 8.96 9.92 8.54 9.9 8.56 7.86
Muestras
Veracruz Tabasco
Figura 6.3.1.- Contenido de Limonina en el limón Persa verde
55
6.4 Limón Persa Amarillo
El limón persa verde se encuentra en un rango de 8ppm a 14 ppm de limonina

(Figura 6.3.1) mientras que el limón persa amarillo (Figura 6.4.1) va de 4ppm hasta 10ppm.
El contenido de limonina en cada una de las procedencias se mantiene dentro de un rango
(para Veracruz de 8 a 10 ppm y en el caso de Tabasco de 4 a 7 ppm) pero existe un gran
margen entre el contenido de limonina del limón de estas entidades.
Limon Persa Amarillo

10
9
8
Limonina (ppm)
7
6
5
4
3
2
1
0
Veracruz 9.29 8.69 8.45 8.58 9.09 7.98 8.65 7.89 7.68 8.9
Tabasco 6.98 5.87 4.59 5.02 6.39 5.59 6.79 4.98 5.79 4.06
Muestras
Veracruz Tabasco
Figura 6.4.1.- Contenido de Limonina en el limón Persa amarillo
56
Aplicando un análisis estadístico al total de muestras se obtienen las siguientes tablas:
Promedio Mediana Media Varianza Desviación

estándar
Colima 19.1830 19.1750 19.1765 0.2747 0.5206
Colima 8.4030 8.2850 8.3910 0.2295 0.4831
Michoacán 24.7620 24.6250 24.7552 0.3717 0.5237
Michoacán 20.7430 20.8450 20.7381 0.2195 0.4515
Tabla 6.1.- Análisis estadístico del Limón Mexicano verde y amarillo
Promedio Mediana Media Varianza Desviación

estándar
Veracruz 12.3520 12.2800 12.3265 0.7044 0.7374
Veracruz 8.4777 8.5800 8.4623 0.7448 0.4792
Tabasco 8.7160 8.6300 8.6883 0.5490 0.7858
Tabasco 5.606 5.6900 5.5312 0.9073 0.8709
Tabla 6.2.- Análisis estadístico del Limón Persa verde y amarillo
Las Medidas de tendencia central, nos permiten identificar los valores más
representativos de los datos, de acuerdo a la manera como se tienden a concentrar.
La media nos indica el promedio de los datos; es decir, nos informa el valor que obtendría
cada uno de los individuos si se distribuyeran los valores en partes iguales. La mediana por
el contrario nos informa el valor que separa los datos en dos partes iguales, cada una de las
cuales cuenta con el cincuenta por ciento de los datos.
Las medidas de dispersión nos permiten reconocer que tanto se dispersan los datos
alrededor del punto central; es decir, nos indican cuanto se desvían las observaciones
alrededor de su promedio aritmético (media).
57
El limón Mexicano (Tabla 6.1) en el estado de maduración verde cuenta con
promedios con un rango muy pequeño (19.18 ppm para Colima y 24.76 para Michoacán) y
así pudiéndose concluir que el estado de maduración verde en el limón mexicano es un
factor importante en el contenido de limonina sin importar su procedencia.
El estado de maduración amarillo de limón Mexicano se puede apreciar que hay una
gran holgura del rango promedio de contenido de limonina (8.40 ppm para colima y para
Michoacán 20.74 ppm) que en perspectiva con sus respectivas procedencias en estado de
maduración son bajas, pero es aún más bajo para el caso de colima; lo anterior es muy
probable a las diferencias de temperaturas en las zonas ( Colima y Michoacán) ya que este
factor es influyente en el metabolismo de la producción de la limonina.
Las desviaciones estándar mostradas señalan que los resultados de contenidos de

limonina están distribuidos homogéneamente.
El limón persa (Tabla 6.2) en sus dos estados de maduración cuenta con un rango de
contenido de limonina que va desde los 5 ppm hasta las 13 ppm demostrando firmemente
que el limón persa es el que tiene menor cantidad de limonina con respecto al limón
Mexicano.
Se puede observar que el contenido promedio de limonina en el limón persa verde

de Veracruz es mayor que en el de tabasco, además de tener una holgura relativamente
pequeña entre ambas.
En el caso del limón persa amarillo se denota una holgura del contenido promedio
de limonina similar al del limón persa verde, además de obtener las concentraciones más
bajas de contenido de limonina en el limón persa.
Para poder tener un mejor panorama acerca de esta evaluación tomaremos los
promedios de las diferentes variedades de limón en los dos estados de maduración
graficándolos.
58
Limon Mexicano
30
24.762
25
20.743
19.183
20
Limonina (ppm)
15
10 8.403
0
Colima Michoacan
Verde Amarillo
Figura 6.1.- Contenido de limonina en el limón Mexicano en los dos estados de

maduración
En la figura 6.1 muestra que el limón Mexicano en estado de maduración verde es

el que más contenido de limonina tiene en comparación con el limón Mexicano amarillo. El
limón mexicano amarillo procedente de colima es el que menor cantidad de limonina tiene
(8.403 ppm), esto muy probablemente debido a las diferencias de temperaturas entre
Colima y Michoacán.
59
Limon Persa
14
12.352
12
10
8.716
Limonina (ppm)
8.4777
8
5.606
6
0
Veracruz Tabasco
Verde Amarillo
Figura 6.2.- Contenido de limonina en el limón Persa en los dos estados de maduración
En el análisis de resultados se mencionó que el limón persa era el que menor

contenido de limonina tiene; esto con respecto al limón mexicano. En la figura 6.2 muestra
que el limón persa verde cuenta con una mayor cantidad de limonina con respecto al estado
de maduración amarillo. Se concluye que en el limón persa el que menor cantidad de
limonina tiene es el que se encuentra en estado de maduración amarillo cuya procedencia
es Tabasco.
Analizando las Figuras 6.1 y Figura 6.2 se denota que el estado de maduración
amarillo de las dos variedades de limón persa y limón Mexicano son una buena opción de
materia prima para la elaboración de jugo debido a su bajo contenido de limonina; pero con
respecto a sus procedencias los limones amarillos de Colima y Tabasco son los de menor
contenido de limonina.
60
El limón Mexicano verde de procedencia de Michoacán tiene el contenido de
limonina mas alto dentro de la evaluación (24.7 ppm), por lo cual esta sería la peor opción
como materia prima para la elaboración de jugo.
El limón persa amarillo procedente de tabasco es el que tiene la menor cantidad de

limonina (5.6 ppm); por lo que se concluye finalmente que es la mejor opción como materia
prima en la elaboración del jugo de limón.
61
Capítulo 7
Conclusiones
62
De acuerdo a los resultados obtenidos se concluye que el limón persa provenientes
de Veracruz y Tabasco contiene menor cantidad de limonina en comparación con la
variedad de limón mexicano proveniente de Michoacán y Colima; confirmando de esta
manera la información encontrada en la bibliografía.
Dentro de esta misma variedad: Persa, podemos encontrar que el limón proveniente
de Tabasco es el que tiene menor cantidad de limonina en comparación del que proviene
de Veracruz. El estado de maduración que contiene menor cantidad de limonina es el
amarillo.
Se llega a la conclusión que el limón Persa en estado amarillo proveniente de

Tabasco es la mejor opción de elección ya que presenta un contenido muy bajo de limonina
en comparación con los otros. Se sabe de antemano que no se puede realizar una selección
total de limón persa amarillo dentro de los camiones por lo cual lo más viable es el
procesamiento de camiones de limón persa provenientes de tabasco que tengan un alto
porcentaje de limón amarillo para la fabricación de jugo de limón tipo Lemon.
63
Capítulo 8
Recomendaciones
64
 Realizar mantenimientos preventivos al HPLC para evitar movimientos de los
picos dentro del cromatograma.
 Regularizar el procedimiento de muestreo de limón directo del camión
enfocado en alguna certificación.
 Ampliación de los muestreos para otros proveedores provenientes de otras
entidades.
 Realización de un programa permanente para muestreo de camiones para
análisis de limonina.
65
Fuentes de consulta
66
_Páginas WEB
 Biblioteca Digital de la Medicina Tradicional Mexicana. (2009). Limon: Citrus

aurantifolia (Christm) Swingle. Recuperado el día 8 de noviembre de 2014, de
http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/monografia.php?l=3&t=Lim%
C3%B3n&id=7410 .
 Guillermo Pérez. (2009). Espectrometría de resonancia magnética nuclear.
Recuperado el día 7 de noviembre de 2014 de
http://www.espectrometria.com/espectrometra_de_resonancia_magntica_nuclea
r.
 Mitchel at al. (1983). Removal of bitter naringin and limonin from citrus juices
containing the same. Recuperado el día 2 de noviembre de 2014 de
http://es.patents.com/us-4514427.html .
 Catarina et al. (2011). Industrialización de cítricos y valor agregado. Recuperado el
día 5 de noviembre de 2014 de
http://repository.lasallista.edu.co/dspace/bitstream/10567/559/1/CAPITULO%201
1.pdf .
 Mirtea, E. (2013). El limon de Colima. Recuperado el día 23 de noviembre de 2014
de http://www.mexicodesconocido.com.mx/el-limon-de-colima.html .
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2.2.5 Aceite de limón centrifugado tipo A

Figura 2.2.5.1.- Aceite de limón centrifugado tipo A

2.2.6 Aceite de limón centrifugado tipo B

Es el aceite obtenido por centrifugación de la emulsión agua-aceite obtenida de

2.2.7 Esencia de limón

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Tiene un aspecto de líquido claro que va de incoloro a ligeramente amarillento con

Figura 2.2.6.1.- Esencia de limón

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