TOXICOLOGÍA AMBIENTAL Y SALUD PÚBLICA

(CIENCIAS AMBIENTALES)

CUADERNO DE PRÁCTICAS
CURSO 2023-24

ÚNICA FECHA DE ENTREGA: HASTA EL 14 DE ENERO

DE 2024
(NO SE ADMITE LA ENTREGA POSTERIOR A ESTA
FECHA, TAMPOCO EN SEPTIEMBRE)
El cuaderno de respuestas debe enviarse a través
del curso virtual utilizando la herramienta “Entrega
de prácticas”. Se debe entregar en formato PDF
(puede emplear el programa gratuito PrimoPDF para la
conversión de Word a PDF).
Es obligatorio contestar todas las preguntas y
hacerlo en castellano.

Nombre y
Apellidos:

Correo
electrónico:

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2
 Prácticas de Toxicología Ambiental y Salud Pública

PRÁCTICA 1
ETIQUETAS Y FICHAS DE DATOS DE SEGURIDAD
Una de las normas de seguridad más importantes a la hora de trabajar en el laboratorio
es conocer la información relativa a los productos químicos que se manipulan. Los
proveedores de estos productos deben incluir de forma obligatoria una ficha de datos de
seguridad (FDS) que complementa la información que se aporta en la etiqueta con los
riesgos que supone el compuesto para la salud y la seguridad de las personas que los
manipulen, así como para el medio ambiente.
1.1 El Anexo II del Reglamento (CE) Nº 1907/2006 (REACH) (L396/267) corresponde a la
“Guía para la elaboración de fichas de datos de seguridad”. Utilizando esta guía,
conteste a las siguientes cuestiones.
1. Entre las propiedades fisicoquímicas que se deben incluir encontramos:
a) la presión de vapor, la viscosidad y la velocidad de evaporación del compuesto
b) las propiedades ópticas del producto en agua
c) el coeficiente agua/octanol, la humedad y la densidad de vapor de la sustancia
d) la temperatura, la presión de vapor y el olor de la sustancia

2. En el apartado sobre el transporte de la sustancia:

a) las normas que regulan el transporte marítimo son las que marca ICAO/IATA
b) se aplicará la Directiva 94/55/CE del 21 de noviembre de 1994 relativa al
transporte de sustancias peligrosas por ferrocarril
c) sólo se incluirá la información relativa al transporte fuera de las instalaciones del
transportista
d) en la información correspondiente se pueden incluir el número ONU, el grupo de
clasificación y el nombre propio del transporte

3. En este tipo de documentos, el concepto de control de la exposición:

a) permite evaluar el daño producido al realizar una exposición controlada sobre los
trabajadores antes de usar la sustancia de manera constante
b) cubre todas las medidas específicas de control de riesgos que deben tomarse
durante el uso para reducir al mínimo la exposición de los trabajadores y el medio
ambiente
c) se refiere a todo aquello que debe hacer un trabajador para asegurarse que
alcanza la dosis máxima de exposición
d) implica la necesidad de realizar test previos de exposición de los trabajadores y
analizar su respuesta ante dicha exposición a la sustancia

4. Respecto al almacenamiento:
a) no es preciso incluir las medidas básicas de almacenamiento que se incluyen en la
Directiva 98/24/CE
b) se indicará si es preciso algún tipo de diseño especial para realizar un almacenaje
seguro
c) se indicará la cantidad mínima que se puede almacenar

3
 d) las recomendaciones deberán ajustarse solo a las normativas europeas, obviando
todo lo referente a las normativas nacionales y/o regionales

5. Uno de los datos que debe incluirse son:

a) las condiciones que producen una reacción peligrosa
b) las medidas de seguridad que pueden no implementarse por el tipo de compuesto
que se trata
c) las posibles utilidades del compuesto en los laboratorios académicos
d) las sustancias que deben emplearse para realizar una reacción de oxidación

6. En la sección referente a la capacidad toxicológica:

a) deben incluirse los ensayos teóricos realizados a partir de modelos de simulación
b) es preciso incluir los efectos a largo plazo si se conocen
c) basta con indicar si es tóxico o no
d) no es necesario incluir los datos sobre efectos crónicos si estos se producen en un
periodo posterior a los cinco años de la exposición

7. Entre los requisitos generales para la elaboración de una ficha de datos de

seguridad la información incluida:
a) tiene que evitar indicar la composición de compuestos peligrosos para evitar
alarmar al usuario
b) en ningún caso debe incluir una fecha de emisión ya que invalida la ficha completa
c) se debe transmitir utilizando abreviaturas y acrónimos para evitar errores
d) debe ser clara y concisa para evitar confusiones

8. En el apartado de la información ecológica:

a) solo debe indicarse el tipo de degradación química que sufre el compuesto
b) se recogerán los datos disponibles sobre la toxicidad acuática en insectos,
moluscos y anfibios
c) se describirá el posible comportamiento de la sustancia en el medio ambiente
d) se indicará a qué especies puede afectar

9. En el apartado de primeros auxilios:

a) las explicaciones deben ser técnicas y precisas para que se lleven a cabo de
manera correcta
b) deben incluirse solo las medidas de carácter general, no las especificas
c) no deben diferenciarse en distintos apartados los que deben realizarse según las
diferentes vías de exposición
d) debe indicarse si se requiere consejo de un médico

10. En relación al uso de la sustancia o del preparado:

a) la ficha de datos de seguridad incluirá información sobre los usos identificados
pertinentes para el destinatario
b) el término empleado deberá ser distinto al que se ha utilizado en el registro
c) no deben incluirse, ya que los usos de una sustancia son variables en el tiempo y
precisaría de una actualización constante

4
 d) solo deben incluirse aquellos que puedan ser de interés en la industria

Pregunta Respuesta
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1.2 El CLP o Reglamento CLP es el Reglamento (CE) Nº 1272/2008 (modificado en el

Reglamento (CE) Nº 790/2009) sobre clasificación, etiquetado y envasado de
sustancias y mezclas, y por el que se modifican y derogan las Directivas 67/548/CEE y
1999/45/CE y se modifica el Reglamento (CE) Nº 1907/2006 (REACH). Entró en vigor el
20 de enero de 2009 y es de aplicación en toda la Unión Europea. En su Título III se
establecen las normas generales para la comunicación del peligro de una sustancia o
una mezcla mediante el etiquetado de su envase. Utilizando las Partes 3 y 4 del Anexo I
de este Reglamento (página 116 del 1272/2008), relativas a los peligros para la salud y
para el medio ambiente, indique a qué tipo de peligro se refiere cada uno de los
siguientes textos:

1. Evaluar la solidez de las pruebas implica contabilizar el número de tumores

observados en los estudios con personas y animales y determinar su grado de
significación estadística.
a) Carcinogenicidad
b) Lesiones oculares graves o irritación ocular
c) Corrosión o irritación cutáneas
d) Mutagenicidad en células germinales

2. Las sustancias cuya toxicidad aguda sea claramente inferior a 1 mg/l contribuyen a
la toxicidad de la mezcla incluso en bajas concentraciones, por lo cual se les asigna
un mayor peso en el método sumatorio de los componentes clasificados.
a) Toxicidad para la reproducción
b) Toxicidad específica en determinados órganos (stot) — exposición única
c) Peligroso para el medio ambiente acuático
d) Peligroso para la capa de ozono

3. Los criterios de clasificación se basan en la viscosidad cinemática. La fórmula

siguiente expresa la relación entre la viscosidad dinámica y la cinemática:
Viscosidad dinámica (mPa.s)/densidad (g/cm3)=viscosidad cinemática (mm2/s)
a) Toxicidad para la reproducción

5
 b) Peligro por aspiración
c) Toxicidad específica en determinados órganos (stot) — exposiciones repetidas
d) Sensibilización respiratoria o cutánea

Respuestas:
1
2
3

4. ¿Por qué se plantean criterios diferentes para la exposición a la sustancia y la

exposición a mezclas?

1.3 La lista de indicaciones de peligro, información suplementaria sobre los peligros y

elementos suplementarios que deben figurar en las etiquetas y la lista de consejos de
prudencia aparecen en los anexos III y IV (página 198 del 1272/2008). En la tabla se
muestran las indicaciones de peligros y los consejos de prudencia referentes a un
producto, complétela explicando lo que significa cada código.

Hazard statements
H202
H226
H260
H312
H317
H332
H340
H412
EUH 019
EUH 204
Precautionary statements
P251
P270
P231 + P232
P235 + P410
P314
P331
P336
P350
P374

6
1.4 A la hora de avisar de los peligros de un compuesto químico existen una serie de
pictogramas que se emplean para que el usuario conozca el tipo de peligro. Utilizando el
documento “Globally harmonized system of classification and labelling of chemicals
(GHS)” de las Naciones Unidas y el anexo V del Reglamento CLP (página 415 del
1272/2008) indique el significado de cada uno de los pictogramas que se indican a
continuación (nota: los de color naranja son los usados antes y han sido sustituidos por
los que tienen el recuadro rojo):

1 2 3

A1
A2
A3
B1
B2
B3

7
PRÁCTICA 2
MÉTODOS DE ENSAYO
La clasificación de las sustancias se hace sobre la base de ensayos bien realizados y
suficientemente validados, considerándose de preferencia los descritos en el Reglamento
(CE) Nº 440/2008 (y las modificaciones al mismo incluidas en el Reglamento (UE) Nº
260/2014).
2.1 En la Parte C de este Reglamento (página 787) se explican distintos métodos de
evaluación de la toxicidad. Respecto al ensayo de toxicidad para quironómidos en
sistemas sedimento-agua con sedimento enriquecido, señale la opción correcta:
1. Los parámetros que se evalúan son:
a) el tiempo de desarrollo del huevo hasta la fase larvaria y el peso de la larva.
b) la emergencia de adultos y el tiempo hasta que se produce.
c) el consumo de oxígeno de las larvas y la cantidad de glucógeno que aparece tras
la exposición.
d) la aparición de malformaciones mandibulares.
2. El ensayo se realiza para:
a) evaluar los efectos de exposición prolongada de sustancias sobre larvas del
díptero de agua dulce Chironomus sp
b) valorar el desarrollo embrionario en huevos de insectos y el potencial teratogénico
del producto analizado
c) estudiar el efecto sobre larvas de peces del género Danio de manera crónica y
aguda
d) determinar el efecto de la exposición de larvas de un género de ortópteros de
acuerdo con las directrices de la OCDE
3. Entre los componentes del sedimento artificial a emplear encontramos:
a) 4-5% de turba
b) 30% de gel de sílice
c) 1% de arcilla
d) 50% de caolín
4. La tasa de aparición de adultos se determina por la ecuación
a) ER=(fixi)/ne
b) ER=ln ne/na2
c) ER=(ne/na)
d) ER=1/(díai-(li/2))
5. La preparación del sistema de sedimentos implica:
a) el empleo de agua salada ya que estos organismos viven en zonas marinas
b) añadir primero el agua y, una vez estabilizada, añadir el sedimento de forma que
se impregne bien de la solución
c) el uso de recipientes descubiertos para simular la evaporación que se produce en
la naturaleza
d) colocar los sedimentos enriquecidos en los recipientes y añadir agua para
conseguir una relación de volumen de 1:4
6. Entre las especies que se pueden emplear en este ensayo encontramos:
a) Chironomus yoshimatsui

8
 b) Chironomus pallidivitatus
c) Chironomus kefferi
d) Chironomus luridus
7. Entre las condiciones para que el ensayo sea válido no se encuentra:
a) la aparición de adultos de C. riparius y C. yoshimatsui en los recipientes de control
debe producirse cuando hayan transcurrido entre 12 y 23 días desde su introducción
en los recipientes; en el caso de C. tentans es necesario un plazo de entre 20 y 65
días
b) la temperatura del agua no debe variar en más de ± 1,0 °C; la temperatura del
agua podría controlarse mediante un espacio isotérmico y, en tal caso, debería
confirmarse la temperatura ambiente de ese espacio a intervalos apropiados
c) al final del ensayo deben medirse en cada recipiente el pH y la concentración de
oxígeno disuelto; la concentración de oxígeno debe ser al menos el 20 % del valor de
saturación en el aire a la temperatura aplicada, y el pH del agua sobrenadante debe
estar en el rango de 5 a 7 en todos los recipientes de ensayo
d) la aparición de adultos en los controles no ha de ser inferior al 70 % al final del
ensayo
8. Respecto a la sustancia problema:
a) no debe ser una sustancia biodegradable
b) debe conocerse la hidrosolubilidad de la misma
c) se emplean concentraciones superiores a 100 mg/L
d) debe ser inmiscible en agua para una fácil absorción por parte del animal
9. Se entiende por ensayo límite:
a) un ensayo que utiliza una cantidad subóptima de sustancia a ensayar
b) aquel que se hace sin control
c) el que incluye al menos tres concentraciones y un control
d) aquel que implica una concentración de ensayo y un control
10. A la hora de realizar el ensayo:
a) se recomienda un periodo de equilibrado de, al menos, dos semanas antes de
realizar el ensayo
b) deben emplearse larvas que tengan, al menos, una semana tras la eclosión del
huevo
c) los organismos deben colocarse de manera inmediata una vez preparados los
recipientes de ensayo
d) la fase de los animales puede conocerse midiendo la anchura de la cápsula
cefálica
Respuestas:

Pregunta Respuesta
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2.2 Realice un esquema de la información que debe incluirse en el informe del ensayo de
inmovilización aguda de Daphnia sp.

10
PRÁCTICA 3
BASES DE DATOS
Como fuente de información toxicológica, además de las etiquetas y las FDS (MSDS,
Material Safety Data Sheet en inglés) existen bases de datos disponibles en Internet. La
información que incluyen es abundante, siendo necesario organizarla para poder hacer un
buen uso de ella. Cada base de datos presenta una gran variedad de datos, incluyendo
información relativa a estudios realizados, concentraciones analizadas, efectos que se
producen u organismos que se han empleado en los ensayos de toxicidad. Uno de los
objetivos de los créditos prácticos de la asignatura es conseguir que el alumno se familiarice
con las bases de datos y conozca dónde conseguir la información que puede requerir en un
futuro.
3.1 Se proporcionan varias bases de datos en las que se indica el tipo de información que se
puede obtener. Debe entrar en ellas para familiarizarse con su manejo y conocer su
utilidad de cara a una futura utilización profesional.
NOTA: Recuerde que las bases de datos son de uso profesional y, por tanto, se
realizan en inglés por ser el idioma técnico empleado en esta área. Al buscar un nombre
de un producto se debe utilizar el nombre químico del compuesto en inglés. En algunas de
ellas la búsqueda se realiza por el identificador numérico CASRN (Chemical Abstract
Service Registry Number), también llamado simplemente CAS y que debe buscarse
previamente.
► Entrada a las bases de datos de EEUU: https://www.nlm.nih.gov/toxnet/index.html

Esta página se ha integrado en otras bases de datos, a las que se puede acceder a
través de los enlaces que aparecen. Entre las bases de datos están:

11
ChemIDplus. Sinónimos químicos, estructuras, información regulatoria y enlaces a otras
bases de datos con información sobre productos químicos, incluyendo su número
CAS. https://chem.nlm.nih.gov/chemidplus/chemidlite.jsp
HSDB (Hazardous Substances Databank). Información sobre la toxicidad y los efectos
biomédicos de productos químicos. Se centra en la toxicología de las sustancias
potencialmente peligrosas. Posee información de la exposición en humanos, la higiene
industrial, los procesos de emergencia en el manejo, el destino ambiental, las
necesidades reguladoras y áreas relacionadas. Todos los datos se refieren y derivan
de un conjunto de libros, documentos gubernamentales, informes técnicos y literatura
seleccionada. Esta base de datos es revisada por el SRP (Scientific Review Panel), un
comité de expertos en las principales áreas que se incluyen en la base de datos. Esta
herramienta se organiza en fichas individuales para cada producto y contiene más de
5000 productos.
TOXLINE. Numerosas referencias a la literatura sobre los efectos biomédicos,
farmacológicos, fisiológicos y toxicológicos de las drogas y otras sustancias químicas.
CCRIS (NCI Chemical Carcinogenesis Research Information System). Contiene resultados
sobre carcinogénesis, promoción de tumores, inhibición de tumores y mutagénesis
obtenida del rastreo en revistas, los informes técnicos del Instituto Nacional de Cáncer
americano, revisiones y monografías de la Agencia Internacional para la Investigación
en Cáncer publicadas desde 1976. Los resultados de los test se han revisado por
expertos en carcinogénesis.
DART (Developmental and ReproductiveToxicology). Referencias antiguas y actuales de
agentes biológicos, químicos y físicos que pueden causar defectos congénitos. Las
fichas incluyen citas bibliográficas, resúmenes (cuando se encuentran disponibles),
MeSH (títulos de materias médicas), palabras clave ETIC (solo en las referencias más
antiguas), nombres químicos y números de registro CAS (Sociedad Americana de
Química). Esta base de datos la realiza la EPA (Agencia de Protección
Medioambiental de EEUU), el NIEHS (Instituto Nacional de Ciencias de la Salud
Medioambiental de EEUU) y el NCTR (Centro Nacional para la Investigación
Toxicológica de EEUU). ETIC la fundó la ATSDR (Agencia para el Registro de
Sustancias Tóxicas y Enfermedades de EEUU), la EPA y el NIEHS.
GENETOX (EPA GENetic TOXicology). Revisa y evalúa la literatura existente y los sistemas
de ensayos disponibles en el campo de la toxicología genética.
IRIS (Integrated Risk Information System). Evaluación del riesgo para la salud humana,
centrándose en la identificación del riesgo y el cálculo de la dosis-respuesta.
ITER. Información sobre el riesgo químico para distintas autoridades a nivel mundial, entre
las que se incluyen la Agencia de Protección Medioambiental de los EE.UU., la
Agencia para las Sustancias Tóxicas y el Registro de Enfermedades, Helath Canada,
el Instituto Nacional Alemán de Salud Pública y Medio Ambiente, la Agencia
Internacional para la Investigación del Cáncer, así como otros organismos
independientes.
LactMed. Información sobre sustancias químicas a las que podrían estar expuestas las
madres en periodo de lactancia. Entre los datos que incluye se encuentran niveles de

12
 exposición maternos y de los infantes, posibles efectos en recién nacidos y sustancias
alternativas a considerar.
Multi-Database. Búsqueda integrada en cualquiera o todas las bases de datos siguientes:
Hazardous Substances Data Bank (HSDB), Integrated Risk Information System (IRIS),
International Toxicity Estimates for Risk (ITER), Chemical Carcinogenesis Research
Information (CCRIS) y Genetic Toxicology (GENE-TOX).
TRI. Estimación de los vertidos anuales de las sustancias químicas al medioambiente.
Haz-Map. Datos sobre salud ocupacional, tanto para profesionales como para consumidores
interesados en conocer los efectos de la exposición a sustancias químicas en el lugar
de trabajo.
Household Products. Enlaza con los efectos sobre la salud de más de 8.000 marcas
comerciales a través de Material Safety Data Sheets (MSDS) y permite a científicos y
consumidores investigar productos en base a sus ingredientes químicos.
TOXMAP. Representación geográfica de los datos de TRI con enlaces a otros recursos
dentro de TOXNET.
► La UE ha centralizado la información en la European Chemical Agency (ECHA):
http://echa.europa.eu/information-on-chemicals
(versión en español: https://echa.europa.eu/es/information-on-chemicals)

3.2 Utilizando la base de datos HSDB responda a las siguientes preguntas sobre el 1H
-Benzotriazole (95-14-7) en el espacio asignado. Utilice como referencia la primera
molécula que aparezca en la base de datos.

1. ¿Qué pictogramas se asocian en relación a la seguridad química?

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 2. En agua, ¿qué solubilidad presenta?

3. ¿Cuál es la LC50 oral en rata?

4. ¿Qué presión de vapor presenta este compuesto a 25 °C?

5. ¿Cuál es el BCF para peces?

6. ¿Qué mecanismo de acción tiene?

7. ¿Qué coeficiente de partición octanol-agua tiene?

8. ¿Cuáles son los códigos de precaución asociados con este producto?

9. ¿Cuáles son las recomendaciones de primeros auxilios en caso de ingestión?

10. ¿Qué punto de fusión tiene?

11. ¿En qué cantidades se ha encontrado en el lago Tegel?

12. ¿Cuál es la LC50 a las 24 horas en Dugesia japonica?

3.3 La EU – Pesticides database recoge información de interés sobre estos compuestos.

Se va a utilizar para buscar información sobre los pesticidas y su situación actual en
relación con la normativa europea.
Iniciando la búsqueda por sustancias activas (“Search active substances”), conteste a
las preguntas siguientes relativas al Imidacloprid (CAS 13826-41-3).
1. ¿Cuál es su estatus actual y en qué fecha expira el mismo?

2. ¿Cuál es el Acceptable operator exposure levels (AOEL) para este compuesto?

3. ¿Está autorizado en algún pais?

14
3.4 Existen otras bases de datos que se pueden emplear. Una de ellas es la PPDB:
Pesticide Properties DataBase, de la Universidad de Hertfordshire. Empleando esta
base de datos responda a las siguientes preguntas relativas al compuesto Imidacloprid.
1. ¿Para qué tipo de plagas se utiliza?

2. ¿A qué grupo de sustancias pertenece?

3. ¿Qué factor de bioconcentración presenta?

4. ¿Qué solubilidad tiene en solventes orgánicos?

5. ¿Qué presión de vapor tiene?

15
PRÁCTICA 4
BASE DE DATOS AOP
En los últimos años se ha desarrollado una actividad importante, tratando de conjugar la
información disponible para obtener conclusiones integrales. Una herramienta que se ha
puesto en marcha es la Adverse Outcome Pathway wiki, por la acción de un consorcio
formado por diversas organizaciones. Es mantenida por una sociedad enfocada al avance
en las rutas que dan lugar a respuestas adversas [Society for the Advancement of Adverse
Outcome Pathways (SAAOP)]. Esta wiki tiene como objetivo ser un componente de una
base de datos más amplia propuesta por la OECD, la AOP Knowledgebase (AOP-KB), que
pretende integrar la información molecular con los resultados procedentes de ensayos de
toxicidad.
Entre en los AOPs pinchando en el enlace correspondiente (en la parte superior) y realice
la búsqueda del término “meiosis”. Conteste a las siguientes preguntas:
1. ¿Quién es el punto de contacto de la entrada “Inhibition of ALDH1A (RALDH)
leading to impaired fertility via disrupted meiotic initiation of fetal oogonia of the
ovary”?

2. Busque el resultado “Inhibition of 11β-hydroxylase leading to decresed population

trajectory”. ¿Cuáles son los sucesos claves [Key Events (KE)] y la respuesta
adversa [Adverse Outcome (AO)]?

3. Busque el resultado “Deiodinase 1 inhibition leading to increased mortality via

reduced posterior swim bladder inflation”. ¿Cuál es su aplicación a nivel
taxonómico (Taxonomic Applicability)?

4. Busque el resultado “Deposition of energy leading to lung cancer”. Según la

información incluida en el ámbito de aplicabilidad de este AOP (Domain of
Applicability), ¿es dependiente de sexo o se encuentra asociado a una etapa
determinada de la vida?

5. ¿Cuál es el AOP cuyo punto de contacto es Shihori Tanabe?, ¿en qué situación se
encuentra?

16
 Prácticas de Toxicología Ambiental y Salud Pública

PRÁCTICA 5
ENSAYO TOXICOLÓGICO
Al valorar la ecotoxicidad de un compuesto el primer paso es realizar un ensayo de
supervivencia, exponiendo grupos de animales prueba o de referencia a concentraciones
crecientes del compuesto potencialmente tóxico durante un tiempo definido. El análisis de la curva
dosis-respuesta, que refleja la mortalidad o la supervivencia del organismo estudiado, permite
cuantificar y expresar de forma precisa la toxicidad. En este tipo de estudios se pueden obtener
distintos parámetros de interés como la LC10 o la LC50. Con los datos que se indican:

Condiciones experimentales:
ORGANISMO: Chironomus piger Strenzke, 1956, larvas acuáticas de cuarto estadio.
TIEMPO DE EXPOSICIÓN: 48 horas.
MUESTRA: 3 réplicas experimentales de 30 individuos/concentración cada una.

COMPUESTO 1
Concentración (μg/L)
0 0.001 0.01 0.1 1 10 100
Experimento 1 30 30 28 23 20 16 12
Experimento 2 30 28 25 23 21 17 11
Experimento 3 30 30 27 23 22 16 10

COMPUESTO 2
Concentración (μg/L)
0 0.001 0.01 0.1 1 10 100
Experimento 1 30 25 18 13 7 5 3
Experimento 2 30 26 22 19 15 8 3
Experimento 3 30 22 17 11 8 6 4

COMPUESTO 3
Concentración (μg/L)
0 0.001 0.01 0.1 1 10 100
Experimento 1 30 28 21 18 15 11 7
Experimento 2 30 29 29 21 17 12 8
Experimento 3 30 28 22 18 16 12 6

5.1 Obtenga la LC50 para cada uno de los compuestos mostrados por medio de interpolación
gráfica. Para la representación gráfica puede utilizar el programa Graph.

5.2 Calcule la LC50 para cada uno de los productos mostrados utilizando el análisis Probit.
a.- Manualmente (siguiendo las instrucciones del documento que se encuentra en el
curso virtual).
b.- Utilizando un programa informático (se indica al final de la explicación).
La utilización del análisis Probit fue propuesta por Chester Ittner Bliss en 1934. Entomólogo de la
Estación Experimental Agrícola de Connecticut, su objetivo era encontrar un pesticida eficaz
para controlar los insectos que se alimentaban de hojas de parra. Representando la respuesta
de los insectos a varias concentraciones de pesticidas podía visualizar que cada pesticida

17
 Prácticas de Toxicología Ambiental y Salud Pública – 2023-24

afectaba a los insectos a distintas concentraciones, o lo que es lo mismo, que unos eran más
efectivos que otros. Sin embargo, carecía de un método estadístico adecuado que le permitiera
comparar esas diferencias. La aproximación más coherente era realizar un estudio de
regresión de la respuesta frente a la concentración o dosis y realizar la comparación entre los
distintos pesticidas. La relación de la dosis-respuesta es sigmoidea y en esa época la regresión
solo se empleaba en datos lineales. Por lo tanto, lo que hizo fue transformar la curva dosis-
respuesta sigmoidea en una línea recta. Bliss propuso la transformación del porcentaje de
muertos en una unidad de probabilidad o “probit” (relacionada con la establecida actualmente,
pero que él consideró arbitrariamente que era igual a 0 para 0.0001 y 10 para 0.9999). Para
ayudar a otros investigadores incluyó una tabla para convertir el porcentaje de muertos a los
valores probit, los cuales podían ser representados frente al logaritmo de la dosis y, de esta
forma, obtener una línea más o menos recta. En 1952 un profesor de la Universidad de
Edimburgo, David Finney, desarrolló la idea de Bliss en un libro (Probit Analysis, 1952).
Actualmente es el método estadístico preferido para estudiar las relaciones dosis-respuesta.
El análisis Probit es un tipo específico de regresión utilizado para estudiar variables de
respuesta binomiales, es decir, con solo dos salidas (por ejemplo, vivo-muerto). La curva dosis-
respuesta sigmoidea se transforma en una línea recta que se puede analizar por regresión a
través del método de mínimos cuadrados o de máxima probabilidad. Una vez que se ha hecho
la regresión, el investigador puede usar el resultado para comparar la cantidad de producto que
se requiere para generar la misma respuesta con cada uno de los distintos productos
empleados. Aunque hay muchos valores empleados para comparar la toxicidad de los
productos químicos, los más empleados hoy en día son la LC50 o la LD50. Para realizar este
análisis se pueden emplear tres aproximaciones diferentes:
• Por medio del uso de tablas para estimar los probit, ajustando la relación de manera
manual.
• Calculando manualmente los valores de probit, el coeficiente de regresión y los intervalos
de confianza.
• Por medio de un paquete estadístico como SPSS, StatPlus, etc.
En esta práctica se debe obtener la LC50 por medio de tablas y a través de un programa
informático. Para hacer el cálculo manual puede consultar un archivo en la sección de
Documentos, en la carpeta de prácticas, en el que se explica cómo hacerlo.
Para obtener el valor de la LC50 por medios informáticos existen diversas opciones:
1. Se puede emplear un programa informático antiguo llamado PROBIT (de la U.S.
Environmental Protection Agency), que se ha incluido en un archivo comprimido
(Probit.zip) en la sección de documentos del curso virtual. Este programa solo se puede
emplear en ordenadores que tengan un sistema operativo de 32 bits. Para comprobar su
sistema operativo compruebe en “panel de control” → “sistema” el sistema operativo de su
ordenador.
2. Si tiene un ordenador con sistema operativo de 64 bits puede emplear la versión de prueba
del programa StatPlus (http://www.analystsoft.com/en/products/statplus/) u otros paquetes
estadísticos a los que se tenga acceso. Importante: la versión de prueba solo se activa

18
 Prácticas de Toxicología Ambiental y Salud Pública – 2023-24

durante un mes por lo que solo tendrá 30 días para realizar esta parte de la práctica
desde el momento que active el programa. Si emplea un ordenador Apple debe utilizar
la versión de prueba del programa StatPlus que incluye el análisis probit.
3. También puede emplear el programa de acceso libre de análisis estadístico R, que se ha
aprendido a utilizar en la asignatura de Estadística Aplicada al Medio Ambiente de
segundo curso del Grado de CCAA. En el curso virtual se encuentra un documento (R
Data Analysis Examples.pdf) con un ejemplo de cómo emplear este programa obtenido de
Internet. El alumno puede encontrar documentos similares en red que explican el uso de R
para el análisis Probit.
4. Por último, se ha incluido en la carpeta de prácticas una hoja Excel (LD50 LC50 Probit
Analysis.xlsx) desarrollada por el autor de esta página
(https://probitanalysis.wordpress.com/). Como indica el autor, solo funciona con Excel 2010
o superior.
Manual:

Compuesto LC50

Programa:

95% Confidence Limits

Compuesto LC/EC 50 (en ppm)
Lower Upper
1
2
3

¿Qué puede decir de la toxicidad relativa de cada compuesto respecto a los otros dos, si
los pesos moleculares de estos compuestos son 350.2 g/mol (1), 211.3 g/mol (2) y 127.8
g/mol (3)?

5.3. Obtenga la representación normal para cada producto. Esta representación se realiza
calculando la mortalidad relativa específica para cada concentración. Para ello basta con
restar a cada valor de la mortalidad la inmediatamente anterior y representar el diagrama
correspondiente.

19
 Prácticas de Toxicología Ambiental y Salud Pública – 2023-24

5.4 A la hora de evaluar la toxicidad se emplean parámetros muy variados, entre los cuales
se encuentran los de tipo molecular como pueden ser la expresión de un gen o la
cantidad de una proteína. Se proporcionan los datos obtenidos en un estudio de
expresión génica con los productos A, B y C.

El diseño experimental implica la realización de tres experimentos independientes en los que se

exponen cinco individuos a las concentraciones indicadas. No existe letalidad de los compuestos
con las concentraciones empleadas. De los cinco individuos, se toman tres (que son las réplicas
biológicas) y se extrae el RNA de cada uno de ellos de forma aislada. El RNA se transforma en
cDNA y se utiliza para obtener los niveles de mRNA de los genes 1, 2 y 3 por medio de PCR en
tiempo real. El dato que se proporciona para cada gen e individuo se obtiene transformando el
ciclo umbral (Ct) obtenido a unidades arbitrarias con relación a la media del nivel de mRNA de la
población (obtenida previamente). La transformación se realiza de acuerdo con Pfaffl, 2001 (Pfaffl
MW. A new mathematical model for relative quantification in real-time RT-PCR. Nucleic Acids Res.
2001 29(9):e45. doi: 10.1093/nar/29.9.e45.).

Haga la representación gráfica de los datos y comente los resultados obtenidos razonando sus
respuestas. En esta práctica el estudiante debe emplear los conocimientos adquiridos a lo largo
del grado, especialmente lo aprendido en materias como Biología, Matemáticas, Estadística o
Técnicas Instrumentales. Es importante tener en cuenta que el diseño experimental consiste en
tres experimentos, es decir, se repite tres veces el mismo experimento. De cada experimento se
toman tres individuos que se analizan de forma individual. Así, la muestra para cada punto de
estudio es n=9 representando a la población. Esto significa que se está analizando una única
población. Por tanto, no se debe representar cada experimento por separado sino todos los datos
de forma conjunta. Una situación diferente si en cada experimento se utilizaran distinta población y
se hicieran varias réplicas técnicas simultáneas, entonces sí habría que representar cada
experimento por separado ya que se estarían analizando las respuestas en cada población. Esto
no impediría un análisis final conjunto para determinar la respuesta de la especie.

La representación queda a la elección del estudiante, aunque por la naturaleza de los datos es
aconsejable utilizar las llamadas “whisker boxes”. Se debe calcular la media para poder realizar la
comparación de los datos.

El análisis estadístico implicaría estudiar la distribución de los datos para determinar si se ajustan
o no a la normal. En función del tipo de distribución, se utiliza un test estadístico diferente. Si los
datos se ajustan a la normal, se emplea ANOVA para la comparación de medias mientras que si
no se ajustan se emplea la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis. La práctica no requiere
realizar el estudio estadístico, pero sí la obtención de la media para poder obtener alguna
conclusión.

Datos obtenidos (“Rep.” indica réplica biológica refiriéndose a individuo):

1ª Parte:

20
 Prácticas de Toxicología Ambiental y Salud Pública – 2023-24

Gen 1 Experimento 1 Experimento 2 Experimento 3

Rep. 1 Rep. 2 Rep. 3 Rep. 1 Rep. 2 Rep. 3 Rep. 1 Rep. 2 Rep. 3
Control 17.80 17.86 17.89 18.02 18.03 17.95 17.19 17.25 17.27
Comp A 0.1 mg/L 23.86 22.53 25.66 22.08 24.60 25.66 26.26 24.02 25.95
Comp A 1 mg/L 29.48 22.24 25.26 27.53 26.48 27.32 25.92 24.06 22.98
Comp A 10 mg/L 28.23 24.48 27.33 22.80 25.29 23.45 27.05 23.71 25.78
Comp B 0.1 mg/L 26.06 27.20 24.98 21.78 23.00 25.23 25.73 25.27 26.23
Comp B 1 mg/L 32.35 34.35 33.45 36.78 34.69 34.03 34.01 35.19 33.87
Comp B 10 mg/L 51.56 52.54 53.54 56.52 55.02 54.79 53.99 56.39 54.58
Comp C 0.1 mg/L 22.58 22.68 22.79 22.55 22.69 22.78 22.18 21.96 22.10
Comp C 1 mg/L 10.15 10.50 10.12 10.52 10.69 10.25 10.14 10.50 10.99
Comp C 10 mg/L 5.20 5.47 5.63 6.23 4.26 5.12 5.14 4.98 4.53

Gen 2 Experimento 1 Experimento 2 Experimento 3

Rep. 1 Rep. 2 Rep. 3 Rep. 1 Rep. 2 Rep. 3 Rep. 1 Rep. 2 Rep. 3
Control 73.15 73.98 75.03 72.15 75.15 72.89 71.89 73.54 72.10
Comp A 0.1 mg/L 72.36 73.54 72.89 78.82 77.15 76.25 71.58 72.13 72.95
Comp A 1 mg/L 73.25 72.68 72.02 73.58 73.46 74.01 72.03 72.58 72.33
Comp A 10 mg/L 23.50 22.50 22.78 25.54 26.20 26.00 24.60 24.80 24.66
Comp B 0.1 mg/L 78.56 75.58 76.21 75.12 76.91 77.01 72.23 73.14 72.98
Comp B 1 mg/L 68.54 67.25 68.16 67.12 67.91 66.52 66.26 67.20 65.78
Comp B 10 mg/L 42.25 42.32 43.12 41.15 42.51 41.76 40.25 41.51 42.03
Comp C 0.1 mg/L 72.15 73.12 71.98 72.83 72.03 71.72 70.48 71.05 70.94
Comp C 1 mg/L 98.56 94.65 96.54 97.89 98.45 96.91 97.85 98.01 97.25
Comp C 10 mg/L 108.53 106.55 107.15 10.9.25 108.91 110.02 112.12 110.65 110.45

Gen 3 Experimento 1 Experimento 2 Experimento 3

Rep. 1 Rep. 2 Rep. 3 Rep. 1 Rep. 2 Rep. 3 Rep. 1 Rep. 2 Rep. 3
Control 168.18 166.80 169.72 161.88 165.10 165.67 165.17 164.10 164.89
Comp A 0.1 mg/L 169.70 167.98 167.42 167.61 168.97 166.17 164.55 167.52 165.23
Comp A 1 mg/L 225.53 226.71 224.88 221.22 223.41 222.43 226.93 225.83 225.25
Comp A 10 mg/L 402.89 404.82 401.22 407.89 409.54 408.21 402.72 403.97 403.77
Comp B 0.1 mg/L 175.18 175.16 175.65 173.58 174.02 174.69 175.11 175.16 175.87
Comp B 1 mg/L 214.07 214.59 215.73 218.06 218.27 219.01 212.44 211.43 214.02
Comp B 10 mg/L 385.47 385.01 386.10 387.88 387.49 388.47 380.43 381.72 381.44
Comp C 0.1 mg/L 164.61 164.98 165.90 161.72 162.90 161.55 161.53 160.54 161.05
Comp C 1 mg/L 166.35 167.73 167.84 165.17 165.99 165.08 162.40 163.40 162.98
Comp C 10 mg/L 168.95 167.06 166.98 165.52 167.23 166.25 164.28 164.89 164.23

2ª Parte:

Se ha estudiado también el efecto que tiene la mezcla de los productos D y E. La gráfica de

los resultados obtenidos se muestra a continuación. Comente los resultados de las
gráficas en relación a la interacción que puede darse y el efecto que tiene la mezcla en la
expresión del gen.

21
 Prácticas de Toxicología Ambiental y Salud Pública – 2023-24

50 En el eje de ordenadas se muestra el valor en

unidades arbitrarias de la medida de expresión
del gen. En el eje de abscisas se muestran las
40
concentraciones empleadas siendo la mezcla
Arbitrary units

preparada con las mismas cantidades de cada

30
producto, es decir, 0.1 mg/L significa que hay
0.1 mg/L de producto D y 0.1 mg/L de producto
20 E.

10 Se representan los datos por medio de Whisker

Boxes y el círculo indica la media.
0
C 0.1 1 10 0.1 1 10 0.1 1 10 [mg/L]

Producto D Producto E Producto D+E

5.5 A continuación se muestran distintos datos obtenidos en experimentos con diferentes

compuestos químicos.

Gráfica 1 Gráfica 2
Actividad Cyp6a2 175

120
150
100

125
Arbitrary units

80

60
100
(µg/L)

40 75

20
50

0
Embryo Larvae Adult 25
[producto X] ng/L
0
Control 0.001 0.01 0.1 1 10
0h 12h 24h 36h 48h 60h 72h 84h 96h

-25
Tiempo

Tabla 1
Gráfica 3 Larvas Adultos
supervivientes Nº puestas Huevos/puesta
3000 a las 72h Hembras Machos

Control 297 12 13 7 315

Unidades arbitrarias

2000 0.001 μg/L 294 11 12 8 312

0.01 μg/L 291 11 12 7 311

1000 0.1 μg/L 115 6 5 3 254

1 μg/L 91 3 3 2 195

10 μg/L 55 2 3 1 175
0
Acetil colinesterasa Glutation-S-transferasa Catalasa

Control Cd Pb Cd+Pb

22
 Prácticas de Toxicología Ambiental y Salud Pública – 2023-24

1. ¿Qué tipo de estudio sobre una especie de insectos se está realizando de acuerdo con la
gráfica 1? Razone su respuesta.

2. Se quiere utilizar este producto en un ensayo de toxicidad acuática, pero no existe

posibilidad de realizar un ensayo de flujo. Un estudio previo proporcionó los datos que se
muestran en la gráfica 2, en relación con la degradación del producto. Indique cómo
realizaría un ensayo de toxicidad de una semana de duración para evaluar el daño sobre el
desarrollo en una especie con larvas acuáticas. Razone su respuesta.

3. Se ha analizado la actividad de las tres enzimas indicadas en la gráfica en respuesta a Pb

y Cd en una especie de molusco de agua dulce y se obtuvieron los datos de la gráfica 3
(datos no reales). ¿Qué procesos biológicos se analizan al estudiar estas actividades
enzimáticas? ¿Qué puede concluir de los resultados? Razone su respuesta.

4. En la tabla 1 se muestra el resultado obtenido en un ensayo al exponer 300 larvas de fase

IV de Chironomus nubifer a un compuesto en las condiciones indicadas. Se determina la
supervivencia a las 72h y la emergencia de adultos hasta 72 horas de la aparición del
primer adulto ¿Qué conclusión obtiene de los datos? Razone su respuesta.

5.6 Empleando como referencia lo aprendido en los ejercicios previos y las bases de datos
utilizadas, elabore el informe final de un ensayo de toxicidad para evaluar el daño crónico en
un test semi-estático. El compuesto a evaluar es tebuconazole (1-(4-Chlorophenyl)-4,4-
dimethyl-3-(1H-1,2,4-triazol-1-ylmethyl)-3-pentanol) y el ensayo se realiza con una de las
especies siguientes: Artemia franciscana o Lymnaea stagnalis (el estudiante debe
seleccionar una de ellas). En el mismo debe incluir los materiales y métodos que emplea en
el ensayo (información sobre la especie y su ciclo vital, número de individuos usados por
concentración, fase del ciclo empleada, composición del medio a emplear, propiedades físico-
químicas del producto estudiado), las condiciones del ensayo (concentraciones a emplear y
forma de selección de las mismas, parámetros a evaluar en el ensayo, periodos de toma de
datos, criterio de evaluación, metodología de análisis de datos, análisis estadísticos
empleados, cómo mostrar los datos) y la información de los resultados que debe mostrarse
al lector (realizar en un máximo de dos caras de A4). Para un mejor desarrollo del ejercicio
pueden crearse datos ficticios.

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 Prácticas de Toxicología Ambiental y Salud Pública – 2023-24

PRÁCTICA 6
BIBLIOGRAFÍA
A la hora de realizar un estudio toxicológico es importante tanto la aproximación práctica como
la teórica. En esta práctica se leerá un documento relacionado con aspectos toxicológicos de
interés. En el curso virtual se han incluido dos documentos de literatura científica de los cuales
debe seleccionarse uno para contestar las preguntas correspondientes que se encuentran a
continuación. Las respuestas deben ser razonadas y no ser la traducción del texto.

Mixture toxicity revisited from a toxicogenomic perspective. Altenburger R, Scholz

S, Schmitt-Jansen M, Busch W, Escher BI. Environ Sci Technol. 2012 46(5):2508-22.
doi: 10.1021/es2038036.
1.- Haga un resumen del artículo.
2.- Explique la figura 1 del artículo.
3.- ¿Qué recomendaciones hacen los autores para la utilización de las aproximaciones toxicogenómicas en
la evaluación de mezclas?

Test

1. El modelo de adición de respuesta:

a) es un modelo desarrollado para normalizar los datos obtenidos en metabolómica.
b) se emplea en el análisis de datos de RNA-seq.
c) se utiliza para mezclas de compuestos que ejercen su acción a través de distintas dianas.
d) permite potenciar la técnica de análisis de datos de microarrays por medio de sistemas informáticos.

2. ¿Cuál de las siguientes técnicas se usa en metabolómica?

a) tomografía por emisión de positrones.
b) Raman multifaceta nuclear
c) tomografía axial computerizada.
d) resonancia magnética nuclear.

3. La mayor parte de los estudios mostraron:

a) respuestas dependientes de tiempo.
b) diferencias cualitativas.
c) alteraciones cuantitativas en la expresión de genes.
d) diferencias cuantitativas dosis-respuesta.

4. ¿Cuántos estudios de los analizados emplearon mezclas binarias?

a) 18
b) 13
c) 41
d) 2

5. En las evaluaciones cualitativas,

a) es sorprendente que no se hayan realizado análisis de regresión para el modelado de las curvas dosis-
respuesta.
b) se producen valoraciones nominales de las concentraciones obtenidas en los experimentos al final del
proceso de análisis.

24
 Prácticas de Toxicología Ambiental y Salud Pública – 2023-24

c) los diferentes tests empleados y la arbitrariedad de los valores de corte invitan a considerar los resultados
dependientes del método empleado.
d) la respuesta a los tóxicos responde a situaciones de monotonía estadística con análisis en formas U.

6. ¿Cuál es una de las grandes ventajas de las técnicas de secuenciación masiva o de los
microarrays?
a) al ser con radiactividad, son altamente sensibles.
b) no precisan de aparataje especial para llevarse a cabo.
c) utilizan cantidades de DNA genómico pequeñas para la transcriptómica.
d) no necesitan de forma obligatoria la secuenciación del genoma.

7. El experimento de simulación consiste en:

a) añadir uno de los compuestos de forma exponencial hasta producir un efecto subletal.
b) determinar la concentración nominal mínima que produce un efecto letal del 50%.
c) considerar que la mezcla más simple es la de un compuesto consigo mismo.
d) utilizar un programa informático con los datos previos conocidos para anticipar las posibles rutas
afectadas por los tóxicos de la mezcla.

8. La comprensión de cómo las interacciones moleculares se traducen en efectos apicales ayudarán

a:
a) desarrollar nuevos métodos de análisis que requieran un mayor número de animales.
b) eliminar los estudios dosis-respuesta de los datos requeridos para la evaluación de riesgo.
c) ahorrar en el proceso de determinación de las interacciones entre los tóxicos al favorecer la industria
química.
d) la extrapolación de las respuestas de las mezclas a otras escalas y entre especies.

9. La capacidad de predicción de los modelos actuales sobre mezclas de tóxicos con componentes
efectivos a largo plazo:
a) no tiene interés por su falta de fiabilidad ante los resultados experimentales estudiados en el artículo
b) favorece el establecimiento de sólidas bases de desarrollo experimental
c) permite desarrollar una hipótesis de trabajo.
d) aún no es adecuada.

10. Si el estudio se plantea para comprender la cadena de efectos biológicos después de la

interacción del producto con un sistema vivo, debería seleccionar un planteamiento enfocado a:
a) identificar el principal responsable del efecto biológico.
b) determinar la hibridación entre muestra control y muestra problema.
c) descifrar las señales distintas respecto a la referencia.
d) cuantificar la intensidad de la señal obtenida en un parámetro.

RESPUESTAS

OPCION 1
1
2
3
4
5

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6
7
8
9
10

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 Prácticas de Toxicología Ambiental y Salud Pública – 2023-24

Exposure-driven risk assessment: applying exposure-based waiving of toxicity

tests under REACH. Rowbotham AL, Gibson RM. Food Chem Toxicol. 2011,
49(8):1661-73. doi: 10.1016/j.fct.2011.03.050.
1.- Haga un resumen del artículo
2.- Explique la figura 3 del artículo.
3.- Resuma las conclusiones a las que llegan los autores.

Test

1. El valor umbral que empleaba la Administración de Alimentos y Medicamentos de EEUU en su

umbral de regulación:
a) era menor que aquel utilizado por recomendación de la Organización Mundial de la Salud en los países
en vías de desarrollo durante la década de los 60-70.
b) se obtenía por la transformación de la potencia carcinogénica de cada producto en un nivel de exposición
correspondiente a la posibilidad de uno por cada millón de desarrollar cáncer.
c) supuso un hito en el desarrollo de los conceptos de toxicología para la evaluación de riesgos en el medio
ambiente con especial cuidado en todo lo relacionado con la región de los Grandes Lagos.
d) se basaba en los datos obtenidos por la JEFCA en sus tests de toxicidad realizados con ratones
desnudos para evaluar el nivel de carcinogenicidad del producto.

2. Bernauer et al (2008) aplicaron en su estudio factores de seguridad para obtener los valores
umbral en cada parámetro. Indique cuál de los siguientes no se incluyó entre ellos.
a) empleo de pocos productos.
b) uso de una muestra de pequeño tamaño.
c) diferencias interespecíficas.
d) variabilidad interindividual.

3. La base de datos de potencia carcinogénica se basa en:

a) los datos obtenidos con estudios dietéticos en animales con setecientos treinta carcinógenos.
b) la comparación relativa de los datos obtenidos en estudios con ratones frente a una molécula
carcinógena reconocida.
c) el análisis de los datos obtenidos por inhalación en ratones con tres mil doscientos productos
sospechosos de ser carcinógenos.
d) los test de Ames realizados con muestras procedentes de animales de laboratorio obtenidas tras tratarlos
con carcinógenos.

4. ¿Cuál de los siguientes criterios no es aplicable para poder eximir de realizar un test de toxicidad
reproductiva?
a) la sustancia tiene baja actividad toxicológica.
b) los datos toxicocinéticos indican que no se produce absorción sistémica por vías relevantes de
exposición.
c) no hay exposición humana o no es significativa.
d) los datos de estructura-actividad muestran alta actividad hidrosoluble.

5. Las siglas TTC corresponden a:

a) límites de exposición química.
b) peso de la evidencia.
c) umbral de preocupación tóxica.

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d) informe de seguridad química.

6. EBW significa que:

a) la aplicación de REACH precisa de nuevas tecnologías que permitan la evaluación de nuevos parámetros
in vivo no considerados hasta ahora.
b) se pueden utilizar los productos indicados sin necesidad de aplicar test in vitro, pero si es necesario
aplicar test in vivo.
c) todas las sustancias sin excepción deben desarrollar test de toxicidad experimentales para evaluar los
riesgos que poseen para el medio ambiente.
d) REACH permite no tener que llevar a cabo test de toxicidad para una sustancia basándose en escenarios
desarrollados para la evaluación de toxicidad.

7. Las siglas ALDBR se corresponden con:

a) la tasa de ingestión de producto por día.
b) la vida media de un producto inhalado en el organismo.
c) la frecuencia respiratoria diaria durante una vida media.
d) la inhalación aceptable media en la vida de un organismo.

8. Los requerimientos que tiene REACH para cada sustancia dependen de:
a) la estructura molecular del producto.
b) la actividad de la sustancia en los estudios que se han realizado previamente en vertebrados.
c) el origen de la sustancia.
d) el tonelaje importado o producido anualmente.

9. ¿Qué provoca la aplicación de REACH?

a) el aumento de test in vivo reducirá la necesidad de desarrollar test in vitro.
b) el aumento de la producción de productos químicos sin evaluar.
c) aunque busca reducir el empleo de test con vertebrados, inicialmente se producirá un aumento de test
con animales.
d) el incremento en las importaciones de productos químicos por encima de una tonelada.

10. El uso de un producto químico en un escenario ocupacional muy específico es:

a) una situación especial que requiere la realización de test in vivo como paso para la realización de test in
vitro.
b) un elemento cuantitativo de carácter modular para la valoración de un tóxico.
c) determinante de la necesidad de nuevos tests de toxicidad bajo la normativa REACH.
d) causa eximente cualitativa basada en exposición.

RESPUESTAS

OPCIÓN 2
1
2
3
4
5
6
7

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