UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA- CICLO III-2023

“Año de la unidad, la paz y el desarrollo”

GRUPO 11

TEMA:

Practica N°11: Proteínas totales y fraccionadas

CURSO:

Estructura, función celular y tisular II

DOCENTE:

Dra. Elva Dhenis Lujan Castillo

ALUMNO:

Mariñas Arellano Eder Josue

 INDICE
1 INTRODUCCIÓN.....................................................................................................3

2 OBJETIVOS:.............................................................................................................4

2.1 OBJETIVO GENERAL......................................................................................4

2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS:............................................................................4

3 MARCO TEÓRICO:..................................................................................................5

4 PROCEDIMIENTO.................................................................................................13

4.1 PROCEDIMIENTO PREVIO..........................................................................13

4.1.2 EQUIPOS PARA EL PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA DE

SANGRE.................................................................................................................13

4.1.3 METODOLOGÍA DE LA EXTRACCIÓN DE SANGRE.......................13

4.1.4 OBTENCIÓN DEL SUERO.....................................................................14

5 CÁLCULOS MATEMÁTICOS..............................................................................17

6 INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS..............................................................18

7 CONCLUSIONES...................................................................................................22

8 BIBLIOGRAFÍA.....................................................................................................23

9 CUESTIONARIO....................................................................................................24
1 INTRODUCCIÓN

Las proteínas plasmáticas son sintetizadas principalmente en el hígado y en células

plasmáticas. Su síntesis está influenciada por el estatus nutricional, distintos factores
hormonales y diversos mecanismos de retroalimentación. Su concentración en plasma
depende de la relación entre su síntesis y catabolismo y de su distribución entre los
compartimentos intra- y extravascular. Las proteínas plasmáticas cumplen diversas
funciones importantes tales como el transporte de sustancias desde el sitio de
producción o absorción hasta el sitio de acción o degradación, participan en
mecanismos de señalización, son parte integral de la defensa inmune y de la respuesta
de fase aguda, son vitales en los mecanismos de coagulación y de la fibrinólisis y en el
mantenimiento de la presión oncótica entre otras funciones. La concentración de
proteínas totales se encuentra aumentada en patologías tales como las gammapatías
poli- y monoclonales, deshidratación severa, inflamación e infecciones crónicas. La
hipoproteinemia se observa en trastornos de absorción, desnutrición, enfermedades
renales como el síndrome nefrótico, quemaduras y hemorragias masivas.
2 OBJETIVOS:

2.1 OBJETIVO GENERAL

 Aplicar un método espectofotométrico

 Para determinar las proteínas totales; tanto albúmina como globulina, y la
importancia de la interpretacion de los estados metabólicos, nutricionales y
clínicos de acuerdo a su concentración.

2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

 Determinar en el marco la importancia de las proteínas totales y fraccionadas en

la interpretación de los estados metabólico, nutricional y clínico.
 Analizar las reacciones generales de interconversión de las proteínas además de
mencionar el destino final de la interconversión o eliminación de las mismas.
 Interpretar como la nutrición interviene en los estados de malnutrición proteica.
3 MARCO TEÓRICO:

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES ALBUMINAS Y

GLOBULINAS.

SIGNIFICACIÓN CLINICA

Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, ampliamente distribuidos

en el organismo y esenciales para la vida. Actúan como elementos estructurales y de
transporte y aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de
coagulación, etc.

Las globulinas se sintetizan en diferentes partes del cuerpo, como hígado o sistema
inmune, y entre ellas destacan proteínas de transporte y anticuerpos, las globulinas
sintetizadas por el hígado son las alfa y beta las gammaglobulinas son sintetizadas por el
sistema inmune.

Si los valores de globulinas totales se salen fueran de los rangos normales, se suelen
determinar las diferentes fracciones de globulinas por separado (alfa-1, alfa-2, beta y
gamma) mediante electroforesis. La concentración exacta de cada tipo de globulinas
ofrece información de diagnóstico relevante sobre diversas enfermedades, entre
ellas infecciones, trastornos del sistema inmunitario, enfermedades inflamatorias
crónicas y algunos tipos de cáncer, como el mieloma múltiple o la macroglobulinemia.

Valores normales

Los rangos de referencia de proteínas séricas totales son una guía que debe evaluarse de
forma individual según el paciente y sus condiciones particulares, por lo que suelen
variar ligeramente entre diferentes fuentes. Se suelen considerar valores normales:

 Proteína total: 6.4-8.3 g/dL (gramos por decilitro) o 64-83 g/L (gramos por
litro)
 Albúmina: 3.5-5.0 g/dL o 35-50 g/L
 Globulinas alfa-1: 0.1-0.3 g/dL o 1-3 g/L
 Globulinas alfa-2: 0.6-1.0 g/dL o 6-10 g/L
 Globulinas beta: 0.7-1.1 g/dL o 7-11 g/L
 Ratio A/G (albúmina/globulina): superior a 1 se considera normal.
BALANCE DE NITRÓGENO

Para establecer que sería el balance de

Nitrógeno, debemos empezar
recordando que estaría compuesto un
aminoácido. Sabemos que un
aminoácido estaría formado por un grupo amino (-NH2) y un grupo carboxilo (-
COOH).

Los aminoácidos absorbidos, como se mencionó, se utilizan para la obtención de

energía o para la síntesis. Existen conceptos importantes respecto al balance de
nitrógeno en el organismo, se dice que hay equilibrio nitrogenado cuando la entrada
dietética de nitrógeno (ingerido) es igual a las pérdidas, o sea:

EQUILIBRIO: NI = NH + NO + NP +NS

Donde:

I, Ingerido; O, Orina; H, Heces; P, Piel; S, Secreciones

Hay balance positivo cuando el organismo retiene nitrógeno o sea: NI>N Perdido;

Y el balance es negativo cuando se pierde más N que el que se retiene: NI <N Perdido

El N en las heces corresponde al N en la dieta no digerido, proteico o no, y a proteínas

endógenas del organismo. Mientras que el N en la orina corresponde a: urea, amoniaco,
algunos aminoácidos que sobrepasan el límite filtrable de los glomérulos renales, ácido
úrico y creatinina. En la dieta normal el 80% es urea.

El balance de nitrógeno se afecta por factores como: la edad, las alteraciones

fisiológicas, determinadas hormonas, procesos traumáticos, por la energía de la dieta y
por la calidad de las proteínas dietéticas. Los estudios de balance de nitrógeno han
servido para establecer los requerimientos promedios de proteínas, por que en realidad
cada persona, igual que para la energía, tiene sus propios requerimientos pues está
afectado por diferentes factores.

CATABOLISMO DE LOS AMINOÁCIDOS

Los aminoácidos absorbidos son transportados por la sangre a células donde sufren
reacciones de transaminación que consisten en el intercambio del grupo amino de un
aminoácido a un cetoácido, lo que resulta en la formación de un nuevo aminoácido a
partir de otro. De esta manera la célula se provee de los aminoácidos no esenciales para
la biosíntesis proteica. Los aminoácidos esenciales necesarios deben ser aportados por el
torrente sanguíneo.

POOL DE AMINOÁCIDOS

En el organismo la mayor parte de los aminoácidos se encuentran formando parte de las

proteínas de los tejidos. No obstante, en el interior de las células, en el líquido
intersticial, la sangre y otros líquidos corporales existen aminoácidos libres. Los
aminoácidos libres de los diferentes compartimientos del organismo se encuentran
relacionados a través de la circulación sanguínea y el conjunto constituye el
denominado “pool de aminoácidos”. La cantidad y concentración de cada uno de los
aminoácidos del pool es biológicamente constante en el sentido de que sus variaciones
se producen dentro de límites más o menos estrechos.

LA VIDA DE LAS PROTEÍNAS ESTÁ MARCADA

Las células del organismo están constantemente sintetizando proteínas, pero al mismo
tiempo también se están destruyendo, lo que constituye el ciclo continuo de la vida. Las
células de organismo humano sintetizan aproximadamente 100 mil proteínas más
diferentes, cada una de acuerdo a sus necesidades. Lo interesante es que la velocidad
con que se destruyen también es diferente.

LAS PROTEÍNAS Y AMINOÁCIDOS COMO TAMPÓN

Esta propiedad se debe a la existencia de:

Grupos ionizables de las cadenas laterales de los aminoácidos Asp, Glu, Lys, Arg, His,
Tyr, Cys.

Grupos COOH y NH2 terminales

Los aminoácidos y proteínas son electrolitos anfóteros, es decir, pueden tanto ceder
protones (ácidos) como captarlos (bases) y, a un determinado pH (en su pI), tener ambos
comportamientos al mismo tiempo. La carga depende del pH del medio. En un medio
muy básico se cargan negativamente, mientras que en el fuertemente ácido lo hacen
positivamente. Desde el punto de vista fisiológico este tipo de amortiguador es resulta
de especial interés a nivel tisular.
TAMPÓN HEMOGLOBINA

Es un tampón fisiológico muy eficiente debido tanto al cambio de pK que experimenta

al pasar de la forma oxidada a la reducida, como a la gran abundancia de esta proteína
en la sangre (15 % del volumen total sanguíneo). La oxihemoglobina (pK= 7,16) es un
ácido más fuerte que la desoxihemoglobina (pK= 7,71). Los valores de pK son tales que
determinan que en la disociación siguiente, el valor x sea, aproximadamente, 0,7.

HbH+ x + O2 → HbO2 + xH+

Esta propiedad de la hemoglobina, de cambiar su valor de pK, demuestra el efecto

tampón, permite el transporte de una determinada cantidad de CO2 liberada en los
tejidos. La hemoglobina oxigenada que llega a los tejidos se disocia liberando O2, un
proceso que está favorecido por el estado de los tejidos (baja pO2, menor pH y alta
pCO2). 0,7H+ + HbO2 ←→ HbH+ 0,7 + O2

IMPORTANCIA DE LA LEY DE STARLING

Entendiendo las fuerzas que influyen en el intercambio de líquidos intra y

extracelulares, es posible determinar las condiciones bajo las cuales puede aparecer un
edema.

La transferencia de líquido dentro del cuerpo ha sido estudiada desde hace más de un
siglo. Las diferentes fuerzas que resultan en movimientos netos de líquidos intra y
extracelulares se llaman "Fuerzas de Starling" y se expresan en la Ley de Starling de
intercambio capilar. La Ley de Starling afirma que:

Acumulación de líquido = K[(Pc - P w ) – σ(πpl – πif)] – Qlymph

- Pc = presión intracapilar media. Se trata de una presión hidrostática y es la presión

ejercida por la sangre mientras fluye a través de los capilares.

- Pw = presión líquida intersticial media. Se trata de una presión hidrostática y denota la

presión ejercida por el líquido en un espacio intersticial.

- πpl = presión oncótica del plasma. La presión oncótica es un tipo de presión osmótica,
y es una función de la concentración de proteínas plasmáticas. La presión oncótica
"atrae " el líquido de las áreas de baja concentración de proteína a las de alta
concentración de proteínas a través de las membranas permeables.
- πif = presión oncóntica del espacio intersticial. Esta presión también depende de las
concentraciones de proteína dentro del líquido intersticial.

- σ = coeficiente de reflexión de macromoléculas. Esta es una medida de la forma, el

tamaño y la carga eléctrica de las grandes moléculas en las membranas celulares
semipermeables.

NUTRICIÓN A TRAVES DE LA ALBUMINA

La albúmina es una proteína producida por el hígado. La albúmina ayuda a mantener el

líquido dentro del torrente sanguíneo sin que se filtre a otros tejidos. También transporta
varias sustancias por el cuerpo, por ejemplo, hormonas, vitaminas y enzimas. Los
niveles de albúmina bajos podrían indicar un problema del hígado o los riñones.

La albúmina en suero es un marcador nutricional importante utilizado para identificar la

desnutrición en pacientes con enfermedad renal crónica

HIPOPROTEINEMIA

La hipoproteinemia se debe a un aumento de las pérdidas proteicas o a un bajo consumo

de proteínas por inanición o malabsorción. Aumento de pérdidas: síndrome nefrótico
(pérdida de albúmina a través de los túmulos renales dañados), hemorragias por
traumatismos o extensas quemaduras.
Los valores de proteína plasmática se mantienen durante la inanición hasta que los
almacenes estén notablemente disminuidos. Sin embargo, en el ayuno prolongado y en
el síndrome de malabsorción. También son bajos en enfermedad hepática porque se
deprime la síntesis hepática de proteínas.

HIPERPROTEINEMIA

La hiperproteinemia es la concentración elevada de alguna (albumina o globulina) de las

proteínas plasmáticas, mas no indica alteraciones de las cantidades absolutas de
proteínas sanguíneas. El aumento de las proteínas es relativo, cuando el incremento se
debe a una hemoconcentración (Aumento en el número de hematíes) provocada por una
deshidratación; o absoluto, si aumentan las proteínas totales por incremento de las
síntesis de globulinas.

Esta elevación de las globulinas en general se observa, en estados de defensa contra

agentes infecciosos, en procesos inflamatorios crónicos, en patologías imnunomediadas
como la artritis reumatoidea o el Lupus eritematoso sistémico, o como resultado de una
vacunación.

CAUSAS

DESHIDRATACIÓN

Los primeros signos clínicos de la deshidratación se aprecian cuando el peso corporal

sufre una reducción del 5 al 25 %. Las causas de la disminución del volumen de agua
corporal pueden ser: una reducción importante de la toma de líquido o la pérdida de
líquido de origen renal o extrarrenal.

HIPERGLOBULINEMIA

Aumento de la cantidad de las globulinas contenidas en el plasma sanguíneo; bien de

todas las variedades de globulinas, siendo hiperactivas todas las familias celulares (o
clonos) secretoras: hiperglobulinemia (o disglobulinemia) policlonal; o bien solamente
de una variedad: la monoclonal resultante de la actividad excesiva de un solo clono. Las
globulinas se dividen en Alfa-Globulinas y Beta-Gammaglobulinas.

GAMMAPATÍAS

Las gammapatías son trastornos que se caracterizan por la presencia de una

concentración muy elevada de gammaglobulinas en la sangre.
Gammapatia Policlonal: refleja la existencia de una hipergammaglobulinemia difusa, en
la que están aumentados todos los tipos de inmunoglobulinas, como en: enfermedades
inflamatorias crónicas, enfermedades hepáticas (cirrosis), enfermedades autoinmunes
(lupus eritematoso sistémico (LES)), infecciones parasitarias (Kala-Azar) y
enfermedades malignas.

Gammapatia monoclonal: se caracterizan por la proliferación de una clona de células

plasmáticas, que producen una proteína homogénea (componente M o paraproteína),
como en: mieloma múltiple, Macroglobulinemia de Waldenström, gammapatías
monoclonales de significado indeterminado y amiloidosis primaria.

INMUNOGLUBULINAS

Son proteínas plasmáticas sintetizadas por los linfocitos B maduros y las células
plasmáticas, en respuesta a la estimulación por un antígeno, y que actúan como
anticuerpos, para la defensa específica del organismo.

Las inmunoglobulinas (anticuerpos) son proteínas de importancia vital que circulan en

el torrente sanguíneo y realizan una amplia variedad de funciones. Influyen
notablemente sobre el equilibrio de nuestro sistema inmunitario. Hay varios tipos
distintos de anticuerpos:

Inmunoglobulina A (IgA): se encuentra en los recubrimientos de las vías

respiratorias y del sistema digestivo, así como en la saliva, las lágrimas y la leche
materna.

Inmunoglobulina G (IgG): es el tipo de anticuerpo que más abunda en el cuerpo. Se

encuentra en la sangre y en otros fluidos, y brinda protección contra las infecciones
bacterianas y víricas. La IgG puede tardar un tiempo en formarse después de una
infección o vacunación.

Inmunoglobulina M (IgM): se encuentra principalmente en la sangre y en el líquido

linfático; este es el primer anticuerpo que fabrica el cuerpo para combatir una nueva
infección.

Inmunoglobulina E (IgE): normalmente se encuentra en pequeñas cantidades en la

sangre. Se puede encontrar en cantidades superiores cuando el cuerpo reacciona de una
manera exagerada a los alérgenos o cuando está combatiendo una infección provocada
por un parásito.

Inmunoglobulina D (IgD): existe en pequeñas cantidades en la sangre y es el anticuerpo

que menos se conoce.

PLASMAFÉRESIS

La plasmaféresis, también llamada recambio de plasma, es una técnica que permite la

separación de la sangre en sus dos componentes, celular y plasmática. El objetivo de su
aplicación es eliminar los anticuerpos y otros elementos patógenos del torrente
circulatorio. Es la técnica más utilizada dentro de la aféresis terapéutica. La
plasmaféresis terapéutica, también conocida como recambio plasmático terapéutico, se
define como una técnica o procedimiento terapéutico de depuración sanguínea
extracorpórea, la cual consiste en la extracción de un volumen determinado de plasma
(de 2 a 5 litros), cuya finalidad es eliminar o remover partículas de gran peso molecular,
patógenos o de disminuir la tasa de inmunocomplejos circulantes u otros componentes
en el plasma que intervienen intervienen en la respuesta inmune patológica y que son
considerados responsables de una enfermedad o bien de sus manifestaciones clínicas.
4 PROCEDIMIENTO

4.1 PROCEDIMIENTO PREVIO

4.1.1.1 MATERIALES PARA LA EXTRACCIÓN DE MUESTRA SANGUÍNEA

 Jeringa
 Ligadura
 Algodón
 Alcohol
 Tubos de ensayo 13 x 100
 Gradilla

4.1.1.2 MATERIALES DE BIOSEGURIDAD

 Guantes
 Mascarilla
 Protector facial
 Gafas

4.1.2 EQUIPOS PARA EL PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA DE

SANGRE

 Centrífuga

4.1.3 METODOLOGÍA DE LA EXTRACCIÓN DE SANGRE

1. Preparar los implementos

2. Lavarse las manos
3. Ubicar el torniquete tres dedos arriba del sitio que se va a punzar para que la
vena sea más visible
4. Localizar la vena mediante inspección, pedir que el paciente abra y cierre el
puño
5. Desinfectar el área que se va a punzar con una torunda
6. Punzar la vena en dirección contraria al flujo sanguíneo
7. Insertar la aguja después introducir el vacutainer y extraer la sangre.
 8. Retirar el torniquete
9. Sacar el vacutainer despacio y agitarlo
10. Hacer presión con una torunda en el lugar donde se encuentra la aguja y retirar
la aguja.
11. Etiquetar los tubos
12. Desechar el material usado
13. Lavarse las manos.

4.1.4 OBTENCIÓN DEL SUERO

1. Obtención de muestra de sangre por flebotomía.

2. Se deja reposar la muestra por 30 minutos.
3. Se lleva la muestra a centrifugación calibrando la centrifuga con otro tubo de
ensayo.
4. Se centrifuga 5 minutos a 3500 rev/min.

4.1.4.1 1MÉTODO: DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES

FUNDAMENTO DEL METODO BIURET

 El método de BIURET para determinar proteínas totales es un método directo,

rápido con elevada sensibilidad, asociada con la especificidad de la reacción de
BIURET que es una de las reacciones más simples y exactas para determinación
de las proteínas en líquidos biológicos. El reactivo está listo para uso y posee
excelente estabilidad y respuesta semejante para todas las proteínas del suero.
 Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ión cúprico, en medio
alcalino, para dar un complejo color violeta con máximo de absorción a 540 nm,
cuya intensidad es proporcional a la concentración de proteínas totales en la
muestra.
 La reacción por el método de BIURET se lleva así:
 En solución alcalina el Cu+2 reacciona con el enlace peptídico de las proteínas
dando un color purpúreo que se cuantifica espectrofotométricamente (540nm).
Como estándar se utiliza una solución de albúmina.

CONDICIONES PREVIAS

 Precalentar el Baño María 15 minutos antes.

  Longitud de onda: 540 nm en espectrofotómetro.
 Temperatura de reacción: 37° C (incubar en Baño María).
 Tener el reactivo BIURET (2), suero y el estándar 7gr% (3).
 Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
 Cubetas espectrofotométricas.
 Reloj o timer.

METODOLOGÍA ESCRITA

Coger 3 tubos de ensayo y rotular: blanco (B), standard (S) y desconocido(D)

B S D

Con las micropipetas medir los volúmenes indicados a continuación y pipetear los 3
tubos de ensayo de la siguiente manera:

a. 50 uL de agua destilada en el tubo B.

b. 50 uL de suero patrón en el tubo S. El suero patrón es una solución de

albúmina y globulina en estado nativo (7gr%).

c. 50 uL de muestra en el tubo D

B S D

Agua destilada 50 ul
 Suero patrón 50 ul

Muestra 50 ul

Reactivo EDTA/Cu 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml

Agregar 3.5 ml de reactivo BIURET/EDTA (1,2) en los tres tubos B,S,D. El BIURET
reacciona con las proteínas otorgando una coloración violeta.

Mezclar e incubar a 37 °C durante 15 minutos en Baño María.

Determinar las absorbancia del desconocido (D) y del standard (S) a una longitud de
onda de 540 nm en el espectrofotómetro marcando el cero con el blanco (B) de reactivo.

Lecturas obtenidas en el espectrofotómetro

Lectura de la muestra estándar

ABSORBANCIA

MUESTRA STANDARD 0.45

Lectura de la muestra desconocida

ABSORBANCIA

MUESTRA DESCONOCIDA 0.25

5 CÁLCULOS MATEMÁTICOS

Cálculos para hallar el factor de calibración

● Factor de calibración= (Concentración del estándar g/dL)/Absorbancia del

estándar
● Factor de calibración= (7 g/dL)/(0.45)
● Factor de calibración = 15.56

Cálculos para hallar la concentración del desconocido

● Concentración del desconocido= Factor de calibración x Absorbancia del

desconocido
● Concentración del desconocido= 15.56 x 0.25
● Concentración del desconocido= 3.888 g/dL
● Proteínas totales = 3.888 g/dL
6 INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

La concentración de proteínas totales encontrada en nuestro paciente es de 3.888 g/dL,

dicha concentración es indicador para la presencia de una hipoproteinemia ya que se
encuentra fuera de los valores normales para proteínas totales (6,1 a 7,9 g/dL). Los
pacientes con cirrosis tienen una deficiencia funcional hepática, esta deficiencia
desencadena una disminución de la síntesis de albúmina y por ende una disminución en
la presión oncótica, lo cual puede llevar a la formación de edemas manifestándose con
signos de hinchazón en los tejidos blandos debido a la acumulación de líquido en el
compartimiento intersticial y ascitis (acumulación de líquido en el abdomen). Esto nos
deja como diagnostico a un paciente que padece de cirrosis hepática.

Diagnósticos alternativos:

Debido a que el paciente presento valores bajos de proteínas totales también se puede
sospechar que presente una desnutrición, o puede tener un problema renal (síndrome
nefrótico, glomerulonefritis, etc.).

2° MÉTODO: DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA

1. FUNDAMENTO DEL METODO CRESOLSUFON FTALEINA (BCF)

● La albúmina reacciona específicamente sin preparación previa con la forma

aniónica del bromo Cresolsulfon Ftaleina (BCF), en presencia de un exceso de
colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbancia a 625 nm
respecto del Blanco de reactivo, es proporcional a la cantidad de albúmina
presente en la muestra.

2. CONDICIONES PREVIAS

● Precalentar el Baño María 15 minutos antes.

● Longitud de onda: 625 nm en espectrofotómetro.
● Temperatura de reacción: 15-28° C por 10 minutos (incubar en Baño María).
● Tener el reactivo BIURET (2), suero y el estándar 5gr% (5).
● Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
● Cubetas espectrofotométricas.
 ● Reloj o timer.

3. METODOLOGÍA ESCRITA

Coger 3 tubos de ensayo y rotular: blanco (B), standard (S) y desconocido(D)

Con las micropipetas medir los volúmenes indicados a continuación y pipetear los 3
tubos de ensayo de la siguiente manera:

10 uL de suero patrón (3) en el tubo S. El suero patrón es una solución de

albúmina y globulina en estado nativo (5 gr%).

10 uL de muestra en el tubo Da. 10 uL de suero patrón (3) en el tubo S. El suero patrón

es una solución de albúmina y globulina en estado nativo (5 gr%).

B S D

Suero patrón 10 ul

Muestra 10 ul

Reactivo BCF 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml

Agregar 3.5 ml de reactivo BIURET/EDTA (1,2) en los tres tubos B,S,D. El BIURET
reacciona con las proteínas otorgando una coloración violeta.

Mezclar e incubar de 15-28 °C durante 10 minutos en Baño María.

Determinar las absorbancia del desconocido (D) y del standard (S) a una longitud de
onda de 625 nm en el espectrofotómetro marcando el cero con el blanco (B) de reactivo.

Lecturas obtenidas en el espectrofotómetro

Lectura de la muestra estándar

ABSORBANCIA

MUESTRA STANDARD 0.35

Lectura de la muestra desconocida

ABSORBANCIA

MUESTRA DESCONOCIDA 0.20

CÁLCULOS MATEMÁTICOS

Cálculos para hallar el factor de calibración

● Factor de calibración= (Concentración del estándar g/dL)/Absorbancia del

estándar
● Factor de calibración= (5 g/dL)/(0.35)
● Factor de calibración = 14.28

Cálculos para hallar la concentración del desconocido

● Concentración del desconocido= Factor de calibración x Absorbancia del

desconocido
● Concentración del desconocido= 14.28 x 0.20
● Concentración del desconocido= 2.856 g/dL
● Proteínas totales = 2.856 g/dL

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Los resultados se indican en gramos por decilitro (g/dL), en el caso de nuestro paciente
se presentó un valor de 2,85 g/dL.

El paciente tiene un nivel de albúmina bajo, se le diagnostico cirrosis hepática en

estadio agudo con riesgo a presentar ascitis, debido a que disminuye el valor de la
presión oncótica (dependiente de albúmina) y esto repercute en la acumulación de
líquido en el espacio peritoneal en el paciente.
Esta prueba ayuda a diagnosticar, evaluar y observar afecciones del riñón e hígado.
Cuando los riñones comienzan a fallar, la albúmina empieza a filtrarse en su orina,
además que el hígado ya no produce las cantidades adecuadas de albúmina.

Los niveles de albúmina bajos pueden significar que el paciente se encuentra en un

estado de desnutrición, con riesgo a sufrir enfermedades cardiacas (ICC, pericarditis),
podría también presentar una insuficiencia renal aguda o presentar una infección como
tuberculosis o Peritonitis Bacteriana.
7 CONCLUSIONES

 Esta práctica virtual fue de gran utilidad por que permite asimilar las diferentes
etapas de ambos métodos, proteínas totales y método de albúmina.
 Permite visualizar los procedimientos las veces necesarias para poder
comprender de una mejor manera el laboratorio virtual.
 Permite abstraer no solo las técnicas y cálculos si no también el aprendizaje de
los criterios para poner en funcionamiento un equipo, estandarizarlo y sacar los
datos necesarios para interpretar los resultados en base al laboratorio
desarrollado.
 Comprender la importancia de los valores bajos de proteínas totales y albúmina
mediante el ejemplo de un caso, para interpretarlos mas eficientemente.
8 BIBLIOGRAFÍA

 Balance de Nitrógeno - Physical Training and Sport [Internet]. Grupo Sobre

Entrenamiento (G-SE). G-SE; 2014 Available from: https://g-se.com/balance-
de-nitrogeno-bp-B57cfb26e7db49
 Vilca C. Evaluación nutricional de la proteína de la hoja de coca (Erythroxylum
coca Lamarck var. Coca). II-GENERALIDADES 2.1.0 -NATURALEZA DE
LAS PROTEÍNAS [Internet]. Available from:
https://sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtualdata/Tesis/Salud/Cordero_V_T/
Cap2.pdf
 Balance de nitr�geno y equilibrio nitrogenado [Internet]. Tripod.com. 2020
[cited 2020 Oct 19]. Available from: http://angiejr3.tripod.com/id4.html
 Metabolismo de AA Contenidos de tema [Internet]. Available from:
http://uvsfajardo.sld.cu/sites/uvsfajardo.sld.cu/files/digestion_metab._aa_
1_jazmin.pdf
 Las proteínas sufren un recambio continuo. RECAMBIO DE LAS PROTEÍNAS
TISULARES Proteasas, peptidasas [Internet]. Available from:
http://www3.uah.es/bioquimica/Tejedor/BBM-II_farmacia/T13-
reacciones.pdf
 CRECES [Internet]. Creces.cl. 2018 Available from:
http://www.creces.cl/Contenido?art=384#:~:text=Si%20el%20amino
%C3%A1cido%20final%20es,m%C3%A1s%20ef%C3%ADmera
%20(10%20minutos)
9 CUESTIONARIO

1. PARA QUÉ ES ÚTIL LA DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS

TOTALES Y FRACCIONARIAS

La prueba de proteínas totales y fraccionarias sirve para determinar la cantidad de

proteínas que hay en la sangre, entre ellas dos trascendentales las proteínas globulinas
(parte importante del sistema inmunitario) y albúminas (importante para impedir el
escape de líquidos fuera de los vasos sanguíneos) (1).

PROTEÍNAS TOTALES:

Resultado de sumar los distintos componentes proteicos encontrados en el organismo

tales como: Alfa 1, Alfa 2, Beta Gamma Globulina y albúmina.

PROTEÍNAS FRACCIONARIAS

Miden la cantidad específica de cada proteína

Los valores normales son:

Proteínas totales: 6.60g/dL - 8.70g/dL

Albúmina: 3.40g/dL - 4.80g/dL

Globulina: 2.00g/dL – 3.50g/dL

Son útiles para determinar el estado anormal y posibles enfermedades que pueden
afectar nuestro organismo.

Cuando se hace una medición de proteínas totales en sangre se mide la cantidad de

proteínas totales en el suero, miden las proteínas en la parte líquida de la sangre,
específicamente las globulinas y la albúmina. Diagnostica problemas nutricionales,
enfermedad renal o hepática.

Las proteínas totales son útiles a la hora de realizar el seguimiento de los cambios en los
niveles de proteínas que causan diversos estados de enfermedad. Generalmente la
comprobación de las proteínas totales se realiza junto con otras pruebas como la
electroforesis de proteínas, la seroalbúmina o las pruebas de la función hepática.

La determinación de los niveles de proteínas totales es útil en la detección de:

Hipoproteinemia causada por deshidratación, hemoconcentración o aumento en la
concentración de proteínas específicas.

Hipoproteinemia por hemodilución producida por un defecto en la realización de la

síntesis proteica, catabolismo proteico excesivo o perdidas excesivas (hemorragias).

REFERECIAS:

1. Proteínas Totales y Fraccionadas - Multilab - Qué es, precio, preparación

[Internet]. [cited 2020 Oct 12]. Available from:
https://www.multilab.com.pe/examen/451/proteinas-totales-y-fraccionadas

2. Proteínas totales | Proteínas [Internet]. [cited 2020 Oct 12]. Available from:
https://proteinas.org.es/proteinas-totales

2. ¿CUAL ES EL DESTINO FINAL DE INTERCONVERCION O

ELIMINACION DE PROTEÍNAS?

Las proteinas que ingerimos en nuestra dieta diaria, son principalmente escondidas
hasta que sus aminoácidos constituyentes por medio de diversas encimas digestivas y el
acido clorhídrico presentes en el tracto gastrointestina. Se procesan las proteínas
endógenas, lo que se suele conocer bajo la denominación de recambio proteico.

Tracto digestivo

Se encarga del proceso de las proteínas exógenas o ingeridas de la dieta; es la

denominada digestión de proteínas.Este permite obtener los aminoácidos en forma libre,
necesarios para sintetizar las proteínas propias, así como otras biomoléculas que se
forman partir de ellos.

Recambio Proteico

La digestión celular hace referencia a la degradación intracelular de las proteínas, con la

finalidad de reciclar o degradar los aminoácidos de las mismas.

Esta proteólisis puede darse en los lisosoma o en el citoplasma.

3. ¿CUÁLES SON LAS REACCIONES GENERALES DE

INTERCONVERSIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS?

Las reacciones generales de aminoácidos incluyen transaminación, deshidratación,

descarboxilación, racemización y desaminación oxidativa. Transaminación y
deshidratación son las formas de desaminación no oxidativa de los aminoácidos. Todas
las enzimas que participan en estas reacciones emplean como coenzima el Fosfato de
Piridoxal.

TRANSAMINACIÓN: Entre las reacciones de transferencia de grupos amino, las

transaminaciones son especialmente importantes. Ellas son catalizadas por las
transaminasas (que están implicadas tanto en las rutas catabólicas y anabólicas del

metabolismo de aminoácidos). Durante la transaminación, el grupo amino de un

aminoácido se transfiere a un 2-oxoácido (a-cetoácido).

Las células contienen varias aminotransferasas, muchas de ellas específicas para

el -cetoglutarato como aceptor de grupos aminos. Sin embargo difieren en su
especificidad para el otro sustrato, el aminoácido que cede el grupo amino, y en función
del cual se denominan.

DESAMINACIÓN OXIDATIVA:

Cuando el grupo amino de un aminoácido se libera como amoníaco, recibe el nombre de

desaminación. De particular importancia es la desaminación oxidativa. En esta reacción,
el grupo amino es liberado en forma de amoníaco y se genera un 2-oxoácido. Un
ejemplo de desaminación oxidativa es la catalizada por el enzima glutamato
deshidrogenasa.

Glutamato + NAD+(P) a-cetoglutarato + amoníaco + NAD(P)H + H+

El glutamato generado en el citosol de las células hepáticas por las reacciones de

transaminación es transportado hasta la matriz mitocondrial donde por acción de la
glutamato deshidrogenasa sufre desaminación oxidativa, liberándose iones amonio. Este
enzima únicamente se encuentra en la matriz mitocondrial y es capaz de utilizar como
aceptores de los equivalentes de reducción NAD+ y NADP+.
DESCARBOXILACION

Los AA se descarboxilan y forman aminas biógenas, ellas o sus derivados tienen muy
importantes funciones biológicas (hormonas, neurotransmisores, inmunomoduladores,
etc): histamina, etanolamina, serotonina, feniletilamina, etc. Desde la TYR, por
descarboxilación y otras reacciones, se producen la familia de las catecolaminas:

dopamina, noradrenalina y adrenalina. El TRP se descarboxila a triptamina y ésta se

convierte en Serotonina

BIBLIOGRAFÍA:

1. METABOLISMO DE COMPUESTOS NITROGENADOS [Internet]. Available

from: http://www3.uah.es/bioquimica/Tejedor/bioquimica_quimica/R-T20-1-
Rgenerales.pdf

4. COMO INTERVIENE LA NUTRICIÓN EN LOS ESTADOS DE

MALNUTRICIÓN PROTEICO Y CALÓRICO Y QUE REPERCUSIÓN
TIENE LAS CARACTERÍSTICAS OSMOLARES Y BUFFER DE LAS
PROTEÍNAS.

La desnutrición calórico-proteica (DCP), antes llamada malnutrición calórico-proteica,

es una deficiencia energética causada por el déficit de todos los macronutrientes. Suele
estar acompañada de deficiencias de muchos micronutrientes. La DCP puede ser súbita
y completa (inanición) o gradual. La gravedad varía desde deficiencias subclínicas hasta
una emaciación evidente (con edema, alopecia y atrofia cutánea) y la inanición. Con
frecuencia, afecta a varios sistemas orgánicos. Para el diagnóstico, suelen realizarse
pruebas de laboratorio, entre ellas, la medición de la albúmina sérica. El tratamiento
consiste en corregir los déficits de líquidos y electrolitos con soluciones por vía IV y
luego reponer, de manera gradual, los nutrientes por VO siempre que sea posible.

DCP PRIMARIA

En todo el mundo, la DCP afecta sobre todo a niños y adultos mayores que no tienen
acceso a los nutrientes, si bien una causa frecuente en este último grupo

es la depresión. La DCP también puede ser resultado de ayuno o de anorexia nerviosa.

El maltrato también puede ser una causa en estos grupos etarios. En los niños, la DCP
crónica primaria tiene dos formas comunes: el marasmo y el kwashiorkor. La forma en
que se presenta depende del equilibrio entre las fuentes de energía no proteicas y
proteicas. La inanición es una forma aguda y grave de DCP primaria.

En los niños, la DCP primaria crónica tiene dos formas frecuentes: marasmo y
kwashiorkor.

EL MARASMO

También llamado forma seca de la DCP causa pérdida de peso y depleción de la grasa y
de la masa muscular. En los países industrializados, el marasmo es la causa más
frecuente de DCP en los niños.

EL KWASHIORKOR

también llamado la forma edematosa o húmeda de la DCP es un riesgo que se observa

luego del abandono temprano de la lactancia materna, que suele suceder cuando nace un
hermano menor que desplaza al otro del pecho. Los niños con kwashiorkor tienden a ser
mayores que los afectados por marasmo. El kwashiorkor también puede ser resultado de
una enfermedad aguda, con frecuencia gastroenteritis u otra infección (probablemente,
en estos casos es secundario a la liberación de citocinas), en un niño que ya tiene DCP.
Una dieta más pobre en proteínas que en calorías es más probable que cause
kwashiorkor que marasmo.

La inanición es la falta total de nutrientes. En ocasiones es voluntaria (como en el caso

del ayuno o de anorexia nerviosa), aunque puede ser secundaria a factores extrenos (p.
ej., durante hambrunas o exposición a la naturaleza).

DCP SECUNDARIA
Este tipo suele ser resultado de:

Trastornos que afectan la función gastrointestinal: estos trastornos pueden interferir con
la digestión (p. ej., insuficiencia pancreática), la absorción (p. ej., enteritis y
enteropatías) o el transporte linfático de nutrientes (p. ej., fibrosis retroperitoneal y
enfermedad de Milroy).

Trastornos consuntivos: en este tipo de trastornos (p. ej., sida, cáncer y EPOC) y en la
insuficiencia renal, el catabolismo causa un exceso de citocinas, que a su vez ocasionan
desnutrición por mecanismos como la anorexia y la caquexia (pérdida de masa muscular
y de grasa). Una insuficiencia cardíaca en fase final puede producir una caquexia
cardíaca, que es una forma grave de desnutrición; la mortalidad es particularmente
elevada. Los factores que contribuyen a la caquexia cardíaca son la congestión hepática
pasiva (que causa anorexia), el edema en el tracto gastrointestinal (que afecta la
absorción) y, en la enfermedad avanzada, el aumento de los requerimientos de
O2 debido al metabolismo anaerobio. Los trastornos consuntivos pueden disminuir el
apetito o alterar el metabolismo de los nutrientes.

Condiciones que pueden aumentar las demandas metabólicas: infecciones,

hipertiroidismo, feocromocitoma y otros trastornos endocrinos, quemaduras,
traumatismos, cirugías y otras enfermedades críticas.

BIBLIOGRAFÍA

1.- Mehta NM, Corkins MR, Lyman B, et al. Defining pediatric malnutrition: a
paradigm shift toward etiology-related definitions. JPEN J Parenter Enteral Nutr.
2013;37(4):460-481. doi:10.1177/0148607113479972

5. ¿CÓMO INTERVIENE LA SOBREALIMENTACIÓN DE LAS

PROTEÍNAS EN EL MANEJO DEL NITRÓGENO Y DE RIESGOS?
PROBLEMAS DE ÁCIDO ÚRICO “GOTA”, OBESIDAD,
¿COLESTERONEMIA?

El exceso de ácido úrico en sangre predispone a padecer gota. Este exceso de ácido
úrico se puede acumular en las articulaciones o en distintos órganos. El tratamiento
adecuado es una dieta baja en purinas (compuestos que se producen por la digestión de
las proteínas de la dieta o se sintetizan como tales por el organismo). Recomendaciones
nutricionales

Las recomendaciones nutricionales para el paciente hiperuricémico son:

1 Disminuir la ingesta de alimentos ricos en purinas.

2 Evitar el alcohol de forma drástica.

3 Reducir la cantidad de proteínas ingeridas por cada kilo de peso ideal, no del peso
actual. Para ello, debemos disminuir la cantidad de carne y pescado, no sobrepasando
los 100 g al día.

4 Beber abundante agua (más de 2 litros por día).

5 Reducir el peso corporal; sin embargo, esta reducción debe ser de forma gradual, ya
que una dieta muy baja en calorías produce un aumento de los niveles de ácido úrico y
puede provocar crisis de gota.

6 Evitar el ayuno prolongado.