Fotometría 410[nm] 0,600 ABS

Absorbancia Absorbancia Absorbancia 0.700

Tiempo [min] 5[mg/mL] 8[mg/mL] 10[mg/mL] f(x) = 0.0508791208
0.600 R²
BAρNA BAρNA BAρNA f(x)==0.92064807192
0.0674065934
R² = 0.95201481446
0 0.113 0.486 0.382 0.500
0.25 0.120 0.522 0.420

Absorbancia
0.400
0.5 0.125 0.548 0.449
0.300
0.75 0.131 0.568 0.474
1 0.135 0.585 0.495 0.200
1.25 0.139 0.598 0.513 0.100
f(x) = 0.0136043956
R² = 0.95956254319
1.5 0.142 0.608 0.529
0.000
1.75 0.144 0.618 0.544 0
2 0.147 0.627 0.556 Absorba
5[mg/m
2.25 0.149 0.635 0.567 Linear (A
2.5 0.152 0.641 0.578 10[mg/m
2.75 0.154 0.648 0.587
3 0.156 0.654 0.596

Actividad Enzimática
ΔDO410/Δt 0.0136043956 0.0508791209 0.0674065934
Actividad enzi
Actividad
enzimática 0.0247352647 0.0925074925 0.1225574426 0.14
[U/mL]
0.12 f(x) = 8.6121

Actividad enzimática [U/mL]

R² = 0.98920
0.1
Caracterización Actividad Enzimática
0.08
Actividad
enzimática 0.0247352647 0.0925074925 0.1225574426 0.06
[U/mL] 0.04
[S] [μmol/mL] 0.0114973981 0.018395837 0.0229947963
0.02

0
1/Actividad 0.01 0.012 0
40.428109855 10.809935205 8.1594391914
enzimática
1/[S] 86.9762 54.360125 43.4881

1/Vmáx -28.27590197
Vmáx -0.035365804
Km/Vmáx 0.7803362038
Km -0.027597217
 Absorbancia vs Tiempo
0.700
f(x) = 0.0508791208791209 x + 0.518912087912088
0.600 R²
f(x)==0.920648071925381
0.0674065934065934 x + 0.413505494505495
R² = 0.952014814466958
0.500
Absorbancia

0.400

0.300

0.200
f(x) = 0.0136043956043956 x + 0.118593406593407
0.100 R² = 0.959562543199736
0.000
0 0.5 1 1.5 2 2.5
Absorbancia Linear (Absorbancia Absorbancia Linear (Absorba
5[mg/mL] BAρNA 5[mg/mL] BAρNA) Tiempo [min] BAρNA
8[mg/mL] 8[mg/mL] BAρN
Linear (Absorbancia
10[mg/mL] BAρNA)

Actividad enzimática vs Concentración sustrato

0.14
45
0.12 f(x) = 8.61210262579525 x − 0.0718923182081076
Actividad enzimática [U/mL]

R² = 0.98920134356622 40
0.1
35
0.08
30

1/Actividad enzimática
0.06

0.04 25
0.02
20
0
0.01 0.012 0.014 0.016 0.018 0.02 0.022 0.024 15
Concentración de sustrato [mmol/mL]
10

0
40
 Coeficiente de extinción (ϵ400[nm])
mpo Longitud paso de luz

Volumen solución
enzimática

Volumen total celda

Peso molecular BAρNA

Concentración sustrato
Medida 1
Medida 2
Medida 3
2 2.5 3 3.5
Linear (Absorbancia Absorbancia
NA 8[mg/mL] BAρNA) 10[mg/mL] BAρNA

1/Acti vidad enzimáti ca vs 1/[S]

45

40
f(x) = 0.780336203785195 x − 28.2759019733672
35 R² = 0.971869143338335

30
1/Actividad enzimática

25

20

15

10

0
40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90
1/[S]
 8.8 [mL/(μmol*cm)]
1 [cm]

0.2 [mL]

3.2 [mL]
435 [mg/mmol] C19H23ClN6O4

entración sustrato
5 [mg/mL] 0.01149739814 [μmol/mL]
8 [mg/mL] 0.01839583702 [μmol/mL]
10 [mg/mL] 0.02299479628 [μmol/mL]
Absorbancia a 280[nm]

DO280
Blanco 0.104
Solución y blanco 0.44
Solución 0.336

Factor de dilución 1
Longitud paso de luz 1 [cm]
Coeficiente de extinción (ϵ280[nm]) 1 [(mg/mL)-1][cm-1]

Concentración proteína [P] 0.336 [mg/mL]

Tiempo [min] cinco diez ocho
0 0.113 0.486 0.382
0.25 0.12 0.522 0.42
0.5 0.125 0.548 0.449
0.75 0.131 0.568 0.474
1 0.135 0.585 0.495
1.25 0.139 0.598 0.513
1.5 0.142 0.608 0.529
1.75 0.144 0.618 0.544
2 0.147 0.627 0.556
2.25 0.149 0.635 0.567
2.5 0.152 0.641 0.578
2.75 0.154 0.648 0.587
3 0.156 0.654 0.596

Actividad Enzimática
ΔDO410/Δt
Actividad 0.013604396 0.05087912 0.06740659
enzimática [U/mL] 0.024735265 0.09250749 0.12255744
enzimática
[U/mL] 0.024735265 0.09250749 0.12255744
[S] [μmol/mL] 0.011497398 0.0229948 0.01839584
1/Actividad
enzimática 40.42810985 10.8099352 8.15943919
1/[S] 86.9762 43.4881 54.360125

1/Vmáx -26.54288535
Vmáx -0.037674879
Km/Vmáx 0.752206535
Km -0.02833929
 Coeficiente de extinción (ϵ400[nm]) 8.8 [mL/(μmol*cm)]
Longitud
Volumen paso de luz
solución 1 [cm]
enzimática 0.2 [mL]
Volumen total celda 3.2 [mL]
Peso molecular BAρNA 434.881 [mg/mmol] C19H23ClN6O4

AE/S
0.14 45

0.12 40
35
0.1
30
0.08
25
0.06 20

0.04 15
10
0.02
5
0 0
0.01 0.012 0.014 0.016 0.018 0.02 0.022 0.024 40 45 50
 1/AE 1/S
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90
Tiempo [min] diez cinco ocho
0 0.113 0.486 0.382
0.25 0.12 0.522 0.42
0.5 0.125 0.548 0.449
0.75 0.131 0.568 0.474
1 0.135 0.585 0.495
1.25 0.139 0.598 0.513
1.5 0.142 0.608 0.529
1.75 0.144 0.618 0.544
2 0.147 0.627 0.556
2.25 0.149 0.635 0.567 0.14
2.5 0.152 0.641 0.578
2.75 0.154 0.648 0.587 0.12
3 0.156 0.654 0.596
0.1

0.08
ΔDO410/Δt
Actividad 0.0136044 0.05087912 0.06740659
enzimática [U/mL] 0.02473526 0.09250749 0.12255744 0.06
enzimática
[U/mL] 0.02473526 0.09250749 0.12255744 0.04
[S] [μmol/mL] 0.0229948 0.0114974 0.01839584
0.02
1/Actividad
enzimática 40.4281099 10.8099352 8.15943919
1/[S] 43.4881 86.9762 54.360125 0
0.01 0.012 0.0

1/Vmáx 50.920033
Vmáx 0.01963864
Km/Vmáx -0.50514219
Km -0.0099203
 Coeficiente de extinción (ϵ400[nm]) 8.8 [mL/(μmol*cm)]
Longitud
Volumen paso de luz
solución 1 [cm]
enzimática 0.2 [mL]
Volumen total celda 3.2 [mL]
Peso molecular BAρNA 434.881 [mg/mmol] C19H23ClN6O4

0.14
Chart Title
0.12 45
40
0.1
35
0.08 30
25
0.06
20
0.04 15
10
0.02
5

0 0
0.01 0.012 0.014 0.016 0.018 0.02 0.022 0.024 40 45 50 55 60 65 70
 Chart Title

50 55 60 65 70 75 80 85 90
Tiempo [min] diez ocho cinco
0 0.113 0.486 0.382
0.25 0.12 0.522 0.42
0.5 0.125 0.548 0.449
0.75 0.131 0.568 0.474
1 0.135 0.585 0.495
1.25 0.139 0.598 0.513
1.5 0.142 0.608 0.529
1.75 0.144 0.618 0.544
2 0.147 0.627 0.556
2.25 0.149 0.635 0.567
2.5 0.152 0.641 0.578 0.14
2.75 0.154 0.648 0.587
0.12
3 0.156 0.654 0.596
0.1

0.08
ΔDO410/Δt
Actividad 0.0136044 0.05087912 0.06740659
enzimática [U/mL] 0.02473526 0.09250749 0.12255744 0.06
enzimática
0.04
[U/mL] 0.02473526 0.09250749 0.12255744
[S] [μmol/mL] 0.0229948 0.01839584 0.0114974 0.02
1/Actividad
0
enzimática 40.4281099 10.8099352 8.15943919 0.01 0.012 0.0
1/[S] 43.4881 54.360125 86.9762

1/Vmáx 56.1190828
Vmáx 0.01781925 45
Km/Vmáx -0.5895312 40
Km -0.010505
35
30
25
20
15
10
5
0
40 45 50 55
 Coeficiente de extinción (ϵ400[nm]) 8.8 [mL/(μmol*cm)]
Longitud
Volumen paso de luz
solución 1 [cm]
enzimática 0.2 [mL]
Volumen total celda 3.2 [mL]
Peso molecular BAρNA 434.881 [mg/mmol] C19H23ClN6O4

Chart Title
0.14

0.12

0.1

0.08

0.06

0.04

0.02

0
0.01 0.012 0.014 0.016 0.018 0.02 0.022 0.024

Chart Title
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90
Tiempo [min] ocho diez cinco
0 0.113 0.486 0.382
0.25 0.12 0.522 0.42
5 0.125 0.548 0.449
0.5 0.131 0.568 0.474
3 0.135 0.585 0.495
3.625 0.139 0.598 0.513
4.25 0.142 0.608 0.529
4.875 0.144 0.618 0.544
5.5 0.147 0.627 0.556
6.125 0.149 0.635 0.567
6.75 0.152 0.641 0.578
7.375 0.154 0.648 0.587 0.045
8 0.156 0.654 0.596 0.04
0.035
0.03

ΔDO410/Δt 0.00447861 0.01697607 0.02237999 0.025

Actividad
enzimática [U/mL] 0.00814292 0.03086558 0.04069088 0.02

enzimática 0.015
[U/mL] 0.00814292 0.03086558 0.04069088 0.01
[S] [μmol/mL] 0.01839584 0.0229948 0.0114974
0.005
1/Actividad
0
enzimática 122.806023 32.3985476 24.5755298 0.01 0.012 0.0
1/[S] 54.360125 43.4881 86.9762

1/Vmáx 111.270204
Vmáx 0.00898713 140
Km/Vmáx -0.83338829
Km -0.00748977 120

100

80

60

40

20

0
40 45 50
 Coeficiente de extinción (ϵ400[nm]) 8.8 [mL/(μmol*cm)]
Longitud
Volumen paso de luz
solución 1 [cm]
enzimática 0.2 [mL]
Volumen total celda 3.2 [mL]
Peso molecular BAρNA 434.881 [mg/mmol] C19H23ClN6O4

Chart Title
0.045
0.04
0.035
0.03
0.025
0.02
0.015
0.01
0.005
0
0.01 0.012 0.014 0.016 0.018 0.02 0.022 0.024

Chart Title
140

120

100

80

60

40

20

0
40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90
Tiempo [min] ocho cinco diez
0 0.113 0.486 0.382
0.25 0.12 0.522 0.42
0.5 0.125 0.548 0.449
0.75 0.131 0.568 0.474
1 0.135 0.585 0.495
1.25 0.139 0.598 0.513
1.5 0.142 0.608 0.529
1.75 0.144 0.618 0.544
2 0.147 0.627 0.556
2.25 0.149 0.635 0.567
2.5 0.152 0.641 0.578
2.75 0.154 0.648 0.587 0.14
3 0.156 0.654 0.596
0.12

0.1

0.08
ΔDO410/Δt
Actividad 0.0136044 0.05087912 0.06740659
enzimática [U/mL] 0.02473526 0.09250749 0.12255744 0.06
enzimática
0.04
[U/mL] 0.02473526 0.09250749 0.12255744
[S] [μmol/mL] 0.01839584 0.0114974 0.0229948 0.02
1/Actividad
0
enzimática 40.4281099 10.8099352 8.15943919 0.01 0.012 0.0
1/[S] 54.360125 86.9762 43.4881

1/Vmáx 29.8212868
Vmáx 0.03353309 45
Km/Vmáx -0.16267534 40
Km -0.00545501
35
30
25
20
15
10
5
0
40 45 50 5
 Coeficiente de extinción (ϵ400[nm]) 8.8 [mL/(μmol*cm)]
Longitud
Volumen paso de luz
solución 1 [cm]
enzimática 0.2 [mL]
Volumen total celda 3.2 [mL]
Peso molecular BAρNA 434.881 [mg/mmol] C19H23ClN6O4

Chart Title
0.14

0.12

0.1

0.08

0.06

0.04

0.02

0
0.01 0.012 0.014 0.016 0.018 0.02 0.022 0.024

Chart Title
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90