La sangre puede ser considerada como un tipo de tejido conjuntivo constituido por células libres (elementos formes) y una

sustancia intercelular
líquida (plasma). La sangre, como la mayor parte de los tejidos conjuntivos, se origina del mesénquima.

La sangre se compone de células y sus derivados y un líquido con abundantes proteínas llamado plasma.
Las células sanguíneas y sus derivados incluyen:
•Aeritrocitos (G. erythrós, rojo), también conocidos como hematíes o glóbulos rojos (RBC)
•Leucocitos (G. leukós, blanco), también conocidos como glóbulos blancos (WBC)
•Trombocitos, también conocidos como plaquetas
•El plasma es el material extracelular líquido que le imparte a la sangre las propiedades de fluidez

Se trata de determinar el número de glóbulos rojos y de glóbulos blancos contenidos en un milímetro cúbico de sangre (recuento globular) y, establecer
el porcentaje de los distintos tipos de leucocitos (Fórmula leucocitaria).

1. Pipetas de dilución.- Se utiliza dos pipetas, una para glóbulos rojos y otra para glóbulos
blancos (Fig. 1). En las pipetas se distinguen dos partes: una capilar y otra ampular.
La parte capilar equivale a 1 (unidad arbitraria) estando dividida en 10 partes iguales. La parte ampular de la
pipeta para rojos equivale a 100 y la de blancos a 10, de ahí que, en la parte superior lleven un enlace con las
marcas 101 y 11, respectivamente.
Las pipetas contienen en su parte ampular un pequeño agitador de vidrio que sirve para asegurar una mezcla
homogénea entre la sangre y el líquido de dilución.
A las pipetas se les adapta un tubo de goma que, en uno de sus extremos, lleva una boquilla de plástico que
sirve para aspirar.

2. Líquidos de dilución.- Se utiliza dos soluciones: una para glóbulos rojos y otra para glóbulos blancos.
a) Para glóbulos blancos.- Se emplea una solución de ácido acético al 1% (líquido de Turk) a la que se le añade unas gotas de azul de metileno; esta
solución produce hemólisis (destrucción de glóbulos rojos) y colorea débilmente el núcleo de los leucocitos, lo que facilita su identificación.
b) Para glóbulos rojos.- La solución es isotónica y tiene por objeto retardar los fenómenos de hemólisis. Se emplea la solución fisiológica del ClNa al
0.9% o al líquido de Hayem (solución isotónica de sulfito de sodio y bicloruro de mercurio).

3. Cámara cuentaglóbulos.- Existen diversos modelos. Se describirá la cámara de Neubauer que es

la que se va a utilizar en la práctica.

La cámara es de cristal y está atravesada por surcos profundos que delimitan tres zonas:
•Una central donde se encuentra 2 zonas elevadas grabadas con una cuadrícula
•Dos laterales, tambien elevadas, que presentan las bandas de apoyo para colocar la laminilla
cubreobjetos.
El retículo de Thoma, consiste en un cuadrado que mide 1 mm por lado. Está dividido
mediante rayas dobles y paralelas en 25 'cuadrados medianos' y cada uno de éstos, a
su vez, está dividido por rayas simples y paralelas en 16 'cuadrados pequeños'; es en
este retículo donde se cuentan los glóbulos rojos.

En los cuatro ángulos del retículo de Thoma existen cuatro retículos adicionales,
también de 1 mm de lado, cada uno dividido por rayas simples y paralelas, en 16
cuadrados.
En los retículos adicionales se cuentan los glóbulos blancos

Las dos bandas de apoyo sobrepasan 0.1 mm de la superficie central, de tal

forma que, cuando se coloca la laminilla cubreobjetos, queda un espacio de 0.1
Laminilla
mm entre la superficie central y cara inferior del cubreobjetos (altura de la
cámara).
Concepto para fijar. - El retículo de Thoma está dividido en 400 'cuadrados 3 mm
pequeños' ('cuadraditos') iguales, reunidos en grupos de 25 'cuadrados medianos'.

Obtención de la sangre.- La muestra de sangre se obtiene corrientemente por punción del pulpejo de un dedo, mediante una lanceta descartable.
También se puede utilizar la sangre extraída de una vena, recogida en un frasco con oxalato de amonio (anticoagulante).
Carga de las pipetas:

a) Glóbulos rojos.- Se aspira sangre hasta la marca 0.5 de la pipeta y luego con el líquido de dilución, se lleva hasta la marca 101 (dilución 1:200).
b) Glóbulos blancos.- Se aspira sangre hasta la marca 0.5 de la pipeta para glóbulos blancos y luego, con el líquido de dilución se lleva hasta la marca 11
(dilución 1:20).
Carga de la cámara.- Las primeras gotas de la pipeta se desechan. Se deposita entonces una gota de sangre diluida justo a nivel del borde del
cubreobjetos para que la gota se extienda, por capilaridad, sobre la superficie central donde se encuentra el retículo; se deja sedimentar por un tiempo de
2 ó 3 minutos en posición horizontal. La suspensión no debe caer en los surcos de la cámara.

a) Glóbulos rojos.- Observando con el objetivo de mayor aumento (40x y ocular 10x) se
cuentan los glóbulos en 80 'cuadrados pequeños' repartidos en 5 'cuadrados medianos',
ubicados en distintas zonas del retículo (los situados diagonalmente, o los 'cuadrados
medianos' de los cuatro ángulos del retículo, y el cuadrado central). La figura 5 muestra un
'cuadrado mediano' con glóbulos rojos.
Al contarse los glóbulos se excluyen los situados en las líneas superior e izquierda
pero se cuentan los que se hallan sobre las líneas inferior y derecha de los cuadrados.
Cálculo GR.- Para conocer el número de glóbulos rojos contenidos en 1 mm3 de sangre,
se hace el siguiente cálculo:
El resultado obtenido de la cuenta de los glóbulos de los 5 cuadrados medianos, se multiplica por 5, por
10 y por 200.
• Se multiplica por 5, porque se ha contado únicamente la 1/5 parte del mm2.
• Se multiplica por 10 para obtener el número de elementos en 1 mm3, considerando que la altura de la
cámara es de 0.1 mm.
• Se multiplica por 200, porque es el título de la dilución (1:200).
Se anotará un ejemplo:

Supongamos que se han contenido 450 glóbulos rojos en los 5 'cuadrados medianos'. Tenemos:
Número de hematíes = 450 x (5 x 10 x 200)
Número de hematíes = 450,000 x 10,000
Resultado: 4'500,000 hematíes x mm3

Regla práctica.- Al resultado obtenido de la cuenta de los glóbulos rojos en los 5 'cuadrados medianos',
se agrega 4 ceros.
b) Glóbulos blancos.- Empleando el objetivo de menor aumento y el ocular de 10x, se cuentan los
glóbulos blancos en los retículos adicionales.
Cálculo GB.- El resultado obtenido de la cuenta de los glóbulos blancos en los 4 retículos adicionales,
se divide por 4 y se multiplica por 10 y por 20.
• Se divide por 4, puesto que se han contado 4 mm (promedio).
• Se multiplica por 10, para obtener el número de elementos en 1 mm3, considerando que la altura de
la cámara es de 0.1 mm.
• Se multiplica por 20, porque es el título de la dilución(1/20)
Ejemplo: Supongamos que se han contado 156 glóbulos blancos en los 4 retículos adicionales
Tenemos: N° de leucocitos = 156 x 10 x 20 = 156 x 100 = 7800
4 2
Resultado: 7,800 leucocitos por mm3
Regla práctica.- El resultado obtenido de la cuenta de los glóbulos blancos en los 4 mm2, se divide por
2 y se agrega 2 ceros.