UNIVERSIDAD NACIONAL DE FRONTERA

Facultad de Ingeniería de Industrias Alimentarias y Biotecnología

Escuela Profesional de Ingeniería de Industrias Alimentarias

PRÁCTICA DE LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA E

INSTRUMENTAL N° 13

“CROMATOGRAFÍA POR PAPEL”

Autores:

Luis Paúl Acuña Cruz

Alison Bembelu Ato Ruíz

Grecia Ivette Ginocchio García

Pedro Aarón Rey Chávez

Nelida Geraldine Rosales Curay

Docente:

M.Sc. Ing. David Roberto Ricse Reyes

Sullana – Perú

2023
 CAPÍTULO I: INTRODUCCIÓN

La cromatografía en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar

análisis cualitativos, ya que, pese a no ser una técnica muy potente, no requiere de ningún
tipo de equipamiento. La fase estacionaria está constituida simplemente por una tira de papel
filtro.

Este informe consta de 11 capítulos, empezando por la Introducción, el capítulo I donde se

explica el contenido de este informe resumiendo de manera breve todos los puntos que se
están tomando en cuenta. En el capítulo II se presentan los Objetivos, en esta parte del
informe se detalla a lo que se quiere llegar con esta práctica. En el capítulo III tenemos el
Fundamento Teórico, donde se detalla el material o información en el que se ha basado para
la realización de dicho informe. Después encontramos el capítulo IV, donde se detalla los
materiales y reactivos utilizados en la práctica. Para el capítulo V tenemos el Procedimiento
Experimental, en el capítulo VI Cálculos y Resultados, se observan todos los cálculos que
resultaron de los experimentos realizados. Después de este encontramos al capítulo VII
donde encontramos las conclusiones, éstas; en concordancia con los objetivos, mencionan
los logros obtenidos al final de la práctica. Luego tenemos al capítulo VIII, donde también
en concordancia con los objetivos y conclusiones, nos dan las recomendaciones para
profundizar la práctica realizada. Posteriormente, tenemos el capítulo IX donde en el
cuestionario se realizan las investigaciones para dar respuesta a las preguntas planteadas. En
el capítulo X, tenemos las referencias bibliográficas, haciendo mención de todas las fuentes
de información. Finalmente sigue el capítulo XI donde se adjuntan imágenes de evidencia
del procedimiento realizado en el laboratorio.
 CAPÍTULO II: OBJETIVOS

2.1. Objetivo general

Describe la separación de mezclas por cromatografía papel.

2.2. Objetivos específicos

● Medir la distancia recorrida por el absorbente del papel.

● Analizar la influencia del solvente en la separación cromatográfica.
● Calcular los Rf para cada una de las sustancias separadas.
 CAPÍTULO III: FUNDAMENTO TEÓRICO

3.1. Cromatografía

UB (s.f.) menciona que la cromatografía comprende un conjunto de técnicas que tienen

como finalidad la separación de mezclas basándose en la diferente capacidad de
interacción de cada componente en otra sustancia. De forma general, consiste en pasar
una fase móvil (una muestra constituida por una mezcla que contiene el compuesto
deseado en el disolvente) a través de una fase estacionaria fija sólida. La fase
estacionaria retrasa el paso de los componentes de la muestra, de forma que los
componentes la atraviesan a diferentes velocidades y se separan en el tiempo. Cada uno
de los componentes de la mezcla presenta un tiempo característico de paso por el
sistema, denominado tiempo de retención. Cuando el tiempo de retención del
compuesto deseado difiere del de los otros componentes de la mezcla, éste se puede
separar mediante la separación cromatográfica.

3.2. Cromatografía en papel

Sourav (2023), afirma que la cromatografía en papel es una especie de cromatografía

plana en la que las técnicas cromatográficas se llevan a cabo en papel especializado.
Debido a su capacidad para separar, identificar y cuantificar cuantitativamente
sustancias orgánicas e inorgánicas, se considera en gran medida como el método
cromatográfico más simple y utilizado.

Figura 1
Elementos que componen la técnica de la cromatografía en papel
 Nota. La tinta que se desplaza a través del papel muestra algunos de los componentes
de la sustancia analizada.

3.3. Tipos de cromatografía en papel

Sourav (2023), menciona los siguientes tipos de cromatografía en papel:

● Cromatografía de adsorción en papel

En la cromatografía de adsorción en papel, la fase estacionaria se crea impregnando

el papel con sílice o alúmina. El material adsorbente, como gel de sílice o alúmina,
se distribuye uniformemente por todo el papel. La fase móvil, por otro lado, es un
solvente que se mueve a través del papel, llevando consigo los analitos. A medida
que la fase móvil sube por el papel, los compuestos de la muestra se absorben en el
material adsorbente en función de su afinidad por él. La separación se produce
cuando diferentes compuestos se absorben en diferentes grados, lo que hace que
migren a diferentes velocidades en el papel. Este tipo de cromatografía en papel se
usa comúnmente para separar mezclas de compuestos en función de sus
características de adsorción.

● Cromatografía de partición en papel

En la cromatografía de partición en papel, la fase estacionaria es creada por la

humedad o agua presente en los poros de las fibras de celulosa en el papel filtro. La
fase móvil es otro solvente que se usa para transportar los analitos a través del papel.
En esta técnica, la separación se basa en la partición de los analitos entre la fase
estacionaria (humedad en el papel) y la fase móvil (disolvente). Los diferentes
compuestos de la muestra se reparten entre las dos fases, siendo unos más solubles
en la fase móvil y otros con mayor afinidad por la fase estacionaria. A medida que
la fase móvil asciende por el papel, los analitos se separan en distintas bandas o
puntos en función de su comportamiento de partición. La cromatografía de partición
en papel a menudo se denomina simplemente cromatografía en papel, ya que es el
tipo de cromatografía en papel más utilizado.
3.4. Aplicaciones de la cromatografía en papel

PCE (s.f.), menciona que las aplicaciones prácticas de la cromatografía se encuentran

por ejemplo en la producción, donde se usa la cromatografía para la limpieza y
aislamiento de sustancias. Por otro lado, en la analítica química se usa la cromatografía
para separar mezclas en compuestos homogéneos. La cromatografía juega un papel
importante en muchos sectores, como la química orgánica, la bioquímica, la química
inorgánica, la química ambiental y la química alimenticia.
 CAPÍTULO IV: MATERIALES Y REACTIVOS

4.1. Materiales

● Papel para cromatografía Whatman No.1

● 1 frasco de boca ancha de 15 cm de alto y 7 cm de diámetro
● 1 cutter
● 1 regla
● 1 lápiz
● 3 pipetas graduadas de 10 mL, 2ml y 5ml
● 1 probeta 10 mL
● 1 caja de Koplin
● 1 propipeta
● 3 capilares

4.3. Reactivos

● Rojo congo
● Rojo de fenol
● Azul de bromofenol
● n-butanol
● Ácido acético glacial
CAPÍTULO V: PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
 CAPÍTULO VI: CÁLCULOS O RESULTADOS

1. Calcule los valores de Rf para cada uno de los componentes. Exprese los resultados con
dos cifras decimales.

NaOH
Distancia movida Rf1 Rf2 Rf3
Distancia movida por punto (cm)
Amarillo Naranja Azul Sin cambio 1.33 1.33
1.33 1.33 1.33 alguno 0.3 1.0
Por solvente (cm) = 4.43 = 1.33
Sin cambio 0.3 1.0
alguno

Ácido acético glacial

Distancia movida Rf1 Rf2 Rf3
Distancia movida por punto (cm)
Naranja Rojo Azul 1.33 Sin cambio 1.33
1.33 1.33 1.33 0.3 alguno 0.9
Por solvente (cm) =4.43 = 1.48
0.3 Sin cambio 0.9
alguno
Ácido acético
Distancia movida Rf1 Rf2 Rf3
Distancia movida por punto (cm)
Amarillo Naranja Azul 1.33 1.33 1.33
1.33 1.33 1.33 2.4 2.55 3.0
Por solvente (cm) =0.55 = 0.52 = 0.44
2.4 2.55 3.0

2. Compare los Rf de los tres indicadores obtenidos cuando corren individualmente con los
determinados cuando están en una mezcla
• La comparación de los Rf en los tres indicadores obtenidos algunos son mayores que
otros ya que esta ayuda a conocer la relación entre la distancia recorrida por la
sustancia y la distancia recorrida por el frente de la fase móvil, en Rf1 del ácido
acético glacial recorrió más rápido que los demás.
3. ¿Cuál de los compuestos presentes fue más afín con la fase móvil?
• Mediante el procedimiento y los resultados nos dimos cuenta de que el azul tiene un
recorrido mayor a comparación de los demás, nos indica que se disuelve mucho más
rápido que los 2 compuestos más e incluso de la misma mezcla de los 3 y el que
menos tuvo afinidad fue el rojo y el amarillo.

4. ¿Cómo esperaría los valores de Rf de los componentes si la fase móvil tuviera una mayor
proporción de ácido acético?
• Se esperaría que los valores de Rf serían menores por el hecho de que el ácido
acético es bastante soluble en sustancias orgánicas, y todas las sustancias que
se usaron en el experimento lo fueron.
 CAPÍTULO VII: CONCLUSIONES

● Se pudo medir la distancia recorrida por el absorbente del papel.

● Se analizó la influencia del solvente en la separación cromatográfica.
● Se calcularon los Rf para cada una de las sustancias separadas.
● Se describió la separación de mezclas por cromatografía papel.
 CAPÍTULO VIII: RECOMENDACIONES

● Los contaminantes con casi las mismas propiedades pueden ser muy difíciles de separar
y, si conocer el grado de pureza es muy importante, se pueden ejecutar cromatogramas
con una variedad de adsorbentes diferentes para ver si cada uno da el mismo resultado.

● A la hora de escoger el solvente se debe tener perfectamente estudiada la solubilidad de

los reactivos a la temperatura a la cual se tiene que realizar el experimento.

● Se puede determinar para cada una de las manchas el valor de Rf (factor de retención), o
la distancia que cada compuesto se desplaza en la placa. Cada compuesto tiene un Rf
característico que depende del disolvente empleado y del tipo de placa de CCF utilizada,
pero es independiente del recorrido del disolvente.

● Se sugiere realizar la separación de mezclas por cromatografía en capa fina (CCF) donde
la fase estacionaria consiste en una capa delgada de un adsorbente (como por ejemplo gel
de sílice, alúmina o celulosa) depositada sobre un soporte plano como una placa de vidrio,
o una lámina de aluminio o de plástico.
 CAPÍTULO IX: CUESTIONARIO

1. Se desea separar una muestra que contiene varios aminoácidos. ¿Qué agente
revelador emplearía para conocer la posición de los componentes?

● La separación de una mezcla de aminoácidos se revelará e identificarán mediante la

reacción con la ninhidrina.

2. ¿Qué sistema de disolvente emplearía para separar por cromatografía en papel

una muestra de esteroides? ¿Cuál sería la fase estacionaria adecuada? ¿Cómo
podría conocer el tipo de esteroides que tiene la muestra problema?

● La muestra, debe estar disuelta de preferencia en un solvente volátil, siendo

recomendados el éter etílico, cloroformo, acetato de etilo acetona, etanol, etc, además
la fase estacionaria estaría constituida por el sílice gel, ya que este material es polar
y es usado para el análisis de esteroides, además para conocer el tipo de esteroides
en nuestra problema se pueden realizar mediante la cromatografía en capa fina.
(Lifeder, 2020)
 CAPÍTULO X: REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Areaciencia. (s.f). Cromatografía Aprende Fácil. Recuperado de Areaciencias. July 9, 2023,

from https://www.areaciencias.com/quimica/cromatografia/.pp 4.

Díaz, N., Bárcena, A., Fernández, E., Galván, A., Jorrín, J., Peinado, J., Melendez, F., &
Túnez, I. (2006). 8. Espectrofometría: Espectros de absorción y cuantificación
colorimétrica de biomoléculas. Recuperado de
https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-
mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETRIA.pdf pp.7

PCE. (s.f). Cromatografía. PCE Ibérica. Julio 9, 2023, Recuperado de https://www.pce-

iberica.es/instrumentos-de-medida/instrumentos-laboratorios/cromatografia.htm pp
2.

Sourav. (2023, Junio 26). Principio de cromatografía en papel, tipos, instrumentación,

pasos. Recuperado de ‘Wiktionary. Julio 9, 2023, from

https://microbiologynote.com/es/paper-chromatography/ pp 3-4.

UB. (s.f). CROMATOGRAFÍA. Recuperado de Wiktionary. Julio 9, 2023,

https://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_fonament.htm
 CAPÍTULO XI: ANEXOS

Anexo A. Reactivos presentes en la práctica.

Figura 1
Reactivos usados en el ensayo químico

Nota. Rojo congo, Rojo de fenol, Azul de bromofenol, Ácido acético glacial y n-butanol.

Figura 2
Reactivos usados para el ensayo químico cromatografía por papel

Nota. Alcohol , ácido acético, butanol.

Figura 3
Tiras de papel filtro usados para el ensayo bioquímico cromatografía por papel

Nota.La presente figura expresa los resultados que son medidos y expresados en cm.