Factores de virulencia

II. Aspectos moleculares de la virulencia de B. anthracis

Los principales factores de virulencia a los que B. anthracis debe su patogenicidad
son una cápsula de poliglutamato y las toxinas que produce, compuestas por tres
proteínas que actúan combinadas de a dos. Estas proteínas son respectivamente
el antígeno protector, conocido por su uso en la elaboración de vacunas, el factor
edema y el factor letal. Los genes de las toxinas se encuentran codificados en el
plásmido pXO1 y el operón biosintético de la cápsula es llevado por el plásmido
pXO2. Sólo recientemente comenzó a revelarse la importancia de otros factores
de virulencia, como por ejemplo los sideróforos.
Cápsula
B. anthracis, al igual que muchas bacterias patógenas, forma como su estructura
más externa una cápsula que está involucrada en el primer contacto entre la
bacteria y las células del hospedador.
En general, las cápsulas bacterianas están compuestas de polisacáridos (Hidrato
de carbono formado mediante la unión de varias moléculas de azúcar, como el
almidón o la celulosa). Por el contrario, en B. anthracis la cápsula es peptídica y
está constituída por poli-g-D-glutamato con una inmunogenicidad extremadamente
débil, lo que le permite a la bacteria escapar de la fagocitosis. (Es importante ya
que hace a la bacteria inusual, casi todas las capsulas son hechas de
polisacáridos, pero la de esta bacteria está formada por aminoácidos,
especialmente el glutamato, esta hace que se inhiba la fagocitosis por medio de
los neutrófilos o por el complemento)
Así, la cápsula contribuye a la patogenicidad de este microorganismo
permitiéndole evadir las defensas inmunológicas y su dispersión en diversos
tejidos del hospedador.
Hasta hace pocos años la síntesis de la cápsula de B. anthracis se adjudicaba a
tres enzimas, CapB, CapC y CapA. Actualmente se sabe que un pequeño péptido,
CapE, de sólo 47 aminoácidos, es necesario para la síntesis de la cápsula, y que
la proteína CapD interviene en su anclado al peptidoglicano
Los genes capB, capC, capA, capD (inicialmente denominado dep) y capE se
encuentran ubicados secuencialmente en el operón capBCADE del plásmido
pXO2
codificado por el plásmido pxo2 (Plásmido: Los plásmidos son elementos
genéticos –pequeñas moléculas de ADN– independientes del cromosoma de las
bacterias, que se localizan en el citoplasma de la célula, el PXO2 es responsable
de la síntesis del ácido poligD-glutámico, que es secretado y forma una cápsula
que envuelve la pared celular y contribuye con la patogenicidad permitiendo la
evasión de los mecanismos de inmunidad y defensa

TOXINAS
Aunque la cápsula es un factor de virulencia importante para el establecimiento de
la enfermedad, los síntomas asociados con el ántrax son el resultado de la
producción de toxinas durante el desarrollo bacteriano. El efecto combinado de
toxemia y bacteremia conduce a la muerte del hospedador infectado, y aunque los
antibióticos pueden liberarlo del patógeno no pueden protegerlo de los efectos de
las toxinas.
La exotoxina está codificada por genes ubicados en un plásmido distinto que es el
plásmido pxo1 y está formado por tres proteínas que actúan en conjunto y solas
no tienen toxicidad, estas interfieren en la señalización celular en los macrófagos y
son: el antígeno protector, el factor edema y el factor letal
La combinación de PA y LF forma la toxina letal que causa la muerte en animales
de experimentación y la lisis de ciertas líneas celulares eucarióticas. La toxina
edemática, constituida por PA y EF, induce un incremento en los niveles de AMPc
(AMP cíclico) intracelular generando edema en los tejidos.

PATOGENIA
Va haber 3 diferentes métodos o formas de ingreso de la bacteria, via cutánea,
intestinal o pulmonar
Cuando ingresa la espora al cuerpo, los macrófagos van a fagocitar las esporas,
ellas dentro del macrófago van a expresar sus factores de virulencia y van a
multiplicarse, esto va a producir que sean liberadas del macrófago y se produzca
la lisis del macrófago, esto hace que se liberen citosinas inflamatorias como el
factor de necrosis tumoral alfa y la interleucina 1
Estas bacterias pueden irse a los nódulos linfáticos y generar o irse hacia los
vasos sanguíneos sistémicos y generar una septisemia y toxemia y puede
diseminarse a órganos importantes como el sistema nervioso central o el pulmón
Esta bacteria va a producir unas exotoxinas, factor protector, factor letal y factor
edema
¿Cómo infectan a los seres humanos? pueden ingresar a través del contacto
con la piel donde la mayoría de las infecciones el 95% se producen por esta vía de
entrada y la gente entra en contacto con productos de animales contaminados
como ser lana, cuero, pelos y huesos, la infección ocurre cuando la bacteria entra
en un corte o herida en la piel y tiene una mortalidad de un 20%, se llama
carbónico cutáneo o ántrax maligno cutánea.
Otra vía de entrada pero mucho menos frecuente es la vía inhalatoria donde
ocurren cuando la gente respira esporas de la bacteria pero tiene que estar
expuesta a una cantidad muy grande de espora entre 8.000 a 10.000 esporas para
infectarse de este modo, la mortalidad es muy alta del 95%, primero se genera la
fase inicial que es predomica la cual es un cuadro gripal, es esta fase va haber
cefalea, malestar general, anemia, fiebre alta, luego esta la fase aguda
bacteriemica la cual es donde se produce la toxicidad, hay dificultad para respirar,
disnea, sianosis, sudoración, signos de alteración del estado general, inflamación
cutánea y mediastínica, fiebre mas alta que la primera fase, condensación
pulmonar o derrame plural y pueden comprometer la vida del paciente.
Cuando se inhalan las esporas del ántrax viajan a los pulmones, inmediatamente
las células inmunológicas atacan y devoran las esporas, las transportan hasta los
ganlglios linfáticos, dentro de ellos las esporas se transformas en bacterias activas
matando las células inmunológicas, logran liberarse y se diseminan en el flujo
sanguíneo, comienzan a dividirse y duplicarse en el torrente sanguíneo donde
producen las toxinas que dañan directamente al paciente, suprimiendo al sistema
inmunológico, en menos de una semana se multiplican tanto que los vasos
sanguíneos comienzan a filtrar sangre descontroladamente, esta pérdida de
sangre genera la difusión de órganos y la muerte.
La otra vía de entrada es por ingestión, es decir durante periodos de pobreza
extrema, puede ocurrir que se compren o vendan carnes de animales que fallecen
por ántrax, la carne puede utilizarse para fabricar embutidos que sin los controles
bromatológicos apropiados pueden infectar a humanos por ingestión de las
esporas, este tipo de infección llamada ántrax maligno gastrointestinal o carbunco
gastrointestinal, también tiene un alto porcentaje de mortalidad. Hay 2 tipos de
manifestaciones, faríngea o intestinal, dependiendo de donde inocule la bacteria
en la faringe va a producir odinofagia (dolor al deglutir), disfagia (dificultad para
degluir) esto a causa del edema de la faringe, tambien ocasionara fiebre y ulceras
faríngeas, en caso de que inocule en el intestino provoca nausas, vomito,
somnolencia, dolor abdominal agudo, diarrea, que puede complicarse hasta una
peritonitis, una enteritis hemorrágica con edema en la pared intestinal y
ulceraciones en la mucosa gástrica e intestinal, ya sea cutaneo o gastrointestinal
provoca edema o ulera
En cuanto al ántrax maligno cutáneo, es la presentación clínica más frecuente y
en general los médicos la puedan reconocer rápidamente, se produce por
inoculación a la piel y comienza con las zonas expuestas de brazos y manos,
seguidos de cara y cuello, la lesión es similar a una picadura, primeramente se
forma una pápula que dentro de los primeros días se transforma en una úlcera
rodeado de vesículas, la lesión habitual tiene un diámetro de 13 centímetros y de
aspecto redondeado, más tarde, se desarrolla la costra necrótica negra
característica que se asocia con edema, por lo general la secreción es indolora y
tiene dos lesiones provoca picazón o prurito, después de unas dos horas la lesión
se seca y la costra comienza a desprenderse, se separa y puede haber linfangitis
linfadenopatia regional y algunos síntomas sistémicos como fiebre, malestar
general, cefaleas, el tratamiento miento antibiótico no parece cambiar la
progresión de la lesión en sí misma pero mejora los síntomas sistemicos.
En este tipo de enfermedades hay que tener siempre en cuenta el contacto
potencial de los animales con los animales infectados, luego de la ingesta de
animales contaminados se puede presentar el ántrax maligno gastrointestinal, que
tiene dos formas clínicas, una es abdominal, que es infrecuente los síntomas son
inespecíficos incluyen náuseas, vómitos, anorexia y fiebre, se presentan lesiones
en el intestino grueso principalmente y cuando la enfermedad progresa aparecen
dolor abdominal hematemesis y diarrea sanguinolenta, cuando la toxemia avanza
se produce y muerte debido shock, cianosis y muerte debido a la perforación
intestinal.
La forma orofaríngea se produce edema y necrosis titular en el área cervical,
puede haber lesión inflamatoria en la pared posterior en el paladar duro o
amígdalas, las manifestaciones clínicas son dolor de garganta, disfagia, fiebre
linfadenopatía cervical y la aparición de la toxemia, tiene un alto porcentaje de
mortalidad y en general es por sepsis o fulminante
El ántrax maligno pulmonar se produce por inhalación de esporas, estas esporas
no secretan toxinas hasta que germinan por lo que provocan una escasa reacción
inflamatoria al inicio de la infección las esporas germinan dentro de los
macrófagos y forman bacilos que son transportados hacia los ganglios linfáticos y
lliare y mediastínicos que son los que provocan necrosis hemorrágicas grave y
edema mediastínico, esto lleva al ensanchamiento del mediastino, lo que produce
dolor subesternal y es propio de la lesión, en la radiografía vemos dónde se ve el
ensanchamiento del mediastino, a medida que la necrosis se extiende a la pleura,
pueden haber derrames pleurales, sanguinolentos con tos seca y estridor, algunas
veces los ganglios mesentéricos muestran edemas y necrosis

EXPLICACION DEL ESQUEMA

El factor protector es una proteína que esta compuesta por 2 unidades, el factor
protector 63 y el factor protector 20, estas van a estar unidas pero cuando se unen
a una proteasa de tipo furina (La furina es una enzima proteasa que en humanos
y otros animales está codificada por el gen FURIN. Algunas proteínas están
inactivas cuando se sintetizan por primera vez y se deben eliminar secciones para
que se activen. La furina escinde estas secciones y activa las proteínas.), estas
son separadas y únicamente queda como porción viable el factor protector 63 que
este va a polimerizarse y va ocasionar un canal alrededor de la membrana, este
canal va a permitir la entrada de las otras exotoxinas como el factor letal y el factor
edema
Una vez que están unidas el factor protector con alguna de estas 2 exotoxinas, la
célula va a endocitar a las exotoxinas.
El factor edema es una exotoxina importante por que cuando esta forma el
complejo con el factor protector, es endocitada y una vez que esta adentro de la
celula es liberada y es un adenilato ciclasa la cual favorece el incremento celular
de AMP cíclico, dependiente de calmodulina (Proteina) y convierte el ATP
(adenosín trifosfato es un nucleótido fundamental en la obtención de energía
celular.) en AMP cíclico, los niveles incrementados de AMP cíclico es el producto
que va alterar la homeostasis del agua de la célula y va a formar un edema masivo
del ántrax cutáneo, también es importante porque inhibe función de los neutrófilos
y provoca la lisis de los macrófagos, al matar estas células inhibe la fagocitosis de
las bacterias, alteran las funciones celulares relacionadas con la inmunidad innata,
como la quimiotaxis de los neutrófilos, la fagocitosis y la producción de superóxido,
así como con la función de los macrófagos, los linfocitos T y B y las células
dendríticas
Cuando un organismo se infecta a partir de una herida sucede el edema cutáneo
entrando las esporas por la piel y donde hay necrosis, al producir las toxinas, en la
fase inicial se van a generar una pápula pruriginosa indolora en el sitio de la
inoculación, esta rodeada por un anillo eritematoso y pequeñas vesículas,
posteriormente las vesículas se fusionan y generan una vesícula grande, esta
vesícula va a tener un edema perivascular gelatinoso duro y se va a romper, al
romperse deja un cráter el cual va a tener tejido necrótico, entonces se crea una
escara indurada poco profunda de color café o negro

El factor letal es otra exotoxina capaz de inactivar a la proteína quinasa (es un

tipo de enzima que transfiere grupos fosfatos desde ATP a un sustrato específico
o diana, encontrada en células eucariotas), ocasiona también la liberación de
citosinas pro inlflamatorias desde los macrófagos las cuales son el factor de
necrosis tumoral alfa y la interleucina 1, esto va a conducir un proceso
inflamatorio, La toxina letal es una metaloproteasa de zinc dependiente de
calmodulina; dentro del macrófago induce un influjo de calcio y la inhibición de la
síntesis
Cuando ingresa la espora al cuerpo, los macrófagos van a fagocitar las esporas,
ellas dentro del macrófago van a expresar sus factores de virulencia y van a
multiplicarse, esto va a producir que sean liberadas del macrófago y se produzca
la lisis del macrófago, esto hace que se liberen citosinas inflamatorias como el
factor de necrosis tumoral alfa y la interleucina 1
El conjunto de todos estos factores provoca daño tisular que puede progresar
hasta un estado de shock
El LF es una metaloproteasa de zinc dependiente de calmodulina que fragmenta e
inactiva múltiples proteínas cinasa activadas por mitógeno y que interfiere en la
transducción de señal (hace que no se cree señalización para la respuesta
inmunológica)