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Universidad de Guayaquil

Facultad de Ciencias Químicas


Carrera: Química y Farmacia
Informe de Práctica de Laboratorio
2010-2021 CI
PRÁCTICA 5 RECUENTO DE LEUCOCITOS
HEMATOLOGÍA Dra. Haydee Alvarado Alvarado, mgs.
ESTUDIANTE: Villacis Barros Cindy Domenica
SEMESTRE: Sexto PARALELO: G3
Objetivos de la práctica de laboratorio
• Aprender a realizar y aplicar la metodología para un recuento de leucocitos por milímetro cubico de
sangre e interpretar el resultado.
Fundamento
El recuento de leucocitos mediante cámara consiste en
determinar el número de ellos presentes en un volumen
determinado de sangre diluída. A esta muestra se le lisan los
hematíes para facilitar la visualización y recuento de leucocitos.
La muestra de sangre se diluye lo suficiente para que los leucos
estén separados unos de otros y así poder contarlos. El recuento
se realiza en una cámara de Neubauer o similar de dimensiones
conocidas.
La profundidad de la cámara es de 0,1 mm. Los cuadrados de
las esquinas miden 1 mm2 de superficie y están subdivididos en
16 cuadrados más pequeños de 0,25 mm de lado. El cuadrado del centro está dividido en 16 cuadrados de 0,2 mm de
lado y éstos a su vez están subdivididos en 16 cuadrados de 0,05 mm de lado.
Recuento de leucocitos en cámara de Neubauer
En el recuento de leucocitos se emplean líquidos de dilución que lisan los hematíes. El diluyente más utilizado es el
líquido de Türk, que contiene ácido acético glacial con la finalidad de destruir los hematíes. Este líquido está
compuesto por ácido acético glacial, violeta de genciana al 1% y agua destilada.
Los valores de referencia en el recuento de leucocitos son de 5-10 Gigaleucos por litro (Gl/L) para hombres y
mujeres. O lo que es lo mismo, 5000-10000 leucocitos/mm3.
• LEUCOPENIA es el recuento disminuido de Leucocitos
• LEUCOCITOSIS es el recuento aumentado de leucocitos
La cámara de recuento Neubauer
Es un dispositivo de precisión hecho de vidrio óptico especial. Se utiliza para contar células u otras
partículas en suspensiones bajo el microscopio. Las cámaras de recuento se utilizan principalmente para el
análisis de sangre (recuento de leucocitos, eritrocitos, trombocitos). Además, las cámaras de recuento
sirven para contar bacterias, espermatozoides y esporas de hongo. La cámara de Neubauer o, también
llamada, Hematocimetro es un grueso portaobjetos de cristal, dividido en tres secciones, la sección media a
su vez cuenta con un rayado fino formando una cuadrícula de 3 mm x 3 mm identificable fácilmente al
microscopio.
Así mismo, esta sección está a exactamente 0.1 mm más bajo que las secciones laterales, estableciendo un

volumen fijo una vez colocado el cubreobjetos especial (cubrehematocimetro).


Al observar al microscopio la sección central, podremos identificar un cuadrado de tres por tres, que en
conjunto mide 9 mm2.
En esta cuadrícula podemos localizar fácilmente los cuatro cuadrantes
que están en los extremos, cada uno de ellos divididos a su vez en un
conjunto de 4 x 4, en el esquema correspondiente se muestran con la
letra A. En la parte central se puede apreciar un cuadro central de 1 x
1 mm dividido en 25 cuadrantes de 0.2 x 0.2 mm, en la figura se
encuentra delimitada por un recuadro e indicado por una flecha.
El cuadro central, al observarlo a mayor aumento, vemos que cada
cuadro de esos cinco limitados por una triple línea, están constituidos
a su vez por un conjunto de 4 x 4. De estos 5 cuadros se utilizan de
manera rutinaria los cuatro conjuntos de los extremos y el central.
Para identificar en cuál de los cuadrantes centrales nos encontramos,
basta con localizar las líneas prolongadas, en la siguiente figura
podemos ver esa característica y el cuadro correspondiente:
A diferencia de los cuadrantes 1, 2, 4 y 5, el cuadrante 3 no presenta estas líneas por ser un cuadrante central
y estar rodeado de otros cuadrantes, el cuadro 3 presenta unas lineas.
Los cuadrantes a utilizar dependerán de la cantidad y tipo de célula a contar, de manera rutinaria se tiene
que:
• Glóbulos blancos se contabilizan en los cuadrantes A.
• Glóbulos rojos, plaquetas y espermatozoides se utilizan los cuadrantes B.

Reactivos de laboratorio
• Reactivo de leucocitos: TURK
Materiales de laboratorio
• Muestra de sangre venosa con EDTA k3
• Papel higiénico
• Cubre hematímetro.
• Pipeta diluidora de Thoma
• Goma de aspiración
• Auxiliar de pipeteo
Equipos de laboratorio
• Cámara de Neubauer
• Microscopio
Actividades que desarrollar/ técnicas de operatorio o procedimiento

1. Necesitamos sangre total lo cual para obtenerla vamos a tomar una muestra sanguínea con EDTA
(Anticuagulante) que es el tubo lila que es el que utilizamos para hematología
2. Tomamos una pipeta de thoma la de leucocitos, la cual tiene una pastillita blanca con la que la
podemos identificar fácilmente, viene con una manguera para poder aspirar y tomar la sangre
3. Vamos a llenar hasta la marca de punto 0.5 con la sangre total.
4. Después procedemos a llenar hasta el 11 con mi solución de Turk ( Acido acetico) el cual hemolisa
los eritrocitos y permite un mejor conteo de los leucositos
5. Agitamos por 1 minutos la pipeta de thoma, con cuidado de no formar burbujas

6. Desechamos las 4 primeras gotas que se vierten con la pipeta y la siguiente gota la colocamos entre
la cámara y el cubre por uno de los bordes de la cámara, dejándola que penetre por capilaridad.
Debemos intentar que no rebose la sangre diluida, ni se formen burbujas.
7. Dejamos reposar la cámara, durante dos minutos en un ambiente húmedo. Así las células tienen
tiempo de sedimentarse.
8. Luego procedemos a ver la cámara en el microscopio si usar aceite de inmersión enfocamos a 10
para ubicar la cámara y después observamos en 40x
Resultados obtenidos (Observaciones, cálculos, datos, ecuaciones, tablas, gráficos, figuras, fotos y otros
que así se consideren)
Leucocitos contados Sexo de la persona a
Leucocitos /mm3
en 4 cuadrados Factor de dilución Leucocitos/mm3 la que pertenece la
obtenido
grandes sangre
6.0*103Leucocitos/m
120 20 Masculino Normal
m3
𝐸𝑟𝑖𝑡𝑟𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠/𝑚𝑚3 = 𝐿𝑒𝑢𝑐𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑜𝑠 × 𝐷𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖𝑜𝑛 × 2.5
𝐸𝑟𝑖𝑡𝑟𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠/𝑚𝑚3 = 120 × 20 × 2.5
𝐸𝑟𝑖𝑡𝑟𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠/𝑚𝑚3 = 6,000𝑒𝑟𝑖𝑡𝑟𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠 𝑝𝑜𝑟 𝑚𝑚3 𝑑𝑒 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒
𝐸𝑟𝑖𝑡𝑟𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠/𝑚𝑚3 = 6.0 ∗ 103 𝐿𝑒𝑢𝑐𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠/𝑚𝑚3
Es muy importante observar que en la cámara de Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y linfocitos
son diferentes. Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulos
blancos se cuentan en las áreas coloreadas de azul.
Rangos de Referencia
Hombre Adulto 4,5 a 12 mil/ml
Mujer adulta 4,5 a 12 mil/ml
Conclusiones
• Los valores normales de Leucocitos están comprendidos entre los 4,5 y los 12 millones/mm3 en los
hombres, con esto podemos determinar que el paciente se encuentra dentro de los valores normales
de Eritrocitos.
• Esta prueba se la realiza Para detectar o diagnosticar diversos trastornos que pueden afectar a los
leucocitos o células de la serie blanca (glóbulos blancos) de la sangre, como infecciones,
inflamaciones o enfermedades en las que se afecta la producción o la supervivencia de los leucocitos;
para monitorizar tratamientos de enfermedades de la sangre o tratamientos que pueden alterar los
leucocitos.
Recomendaciones
• Al momento de agitar la solución tener cuidado de que no se formen burbujas ya que puede afectar
a la muestra.
• Al momento de dejar reposar la solución diluida en la cámara tiene que ser en un ambiente húmedo.
• Cuando observemos en el microscopio tiene que ser al 40 x sin utilizar aceite de inmersión
• Al momento de observar la cámara debemos enfocarnos en las rejillas de las esquinas ya que esos
son para el conteo de Leucocitos
• Si por alguna razón usted detecta una anormalidad en el llenado de la cámara, lo más recomendable
es que desmonte esa preparación, limpie la cámara y vuelva a montar desde cero.
Bibliografía
• Kasper DL, Braunwald E, Fauci AS, Hauser SL, Longo DL, Jameson JL eds, (2005). Harrison's
Principles of Internal Medicine, 16th Edition, McGraw Hill, Pp 329-336.
Firma de responsabilidad
Villacis Barros Cindy Domenica

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