2023

Trabajo de laboratorio

Presentado por:

Andrea Ayala

Marcela Benavides

María Cajigas

4A

Fundación Universitaria San Martin

Microbiología y parasitología

Luz Delia Portilla

9 de marzo del 2023

 1. Describa e procedimiento realizado el primer día de la práctica y escriba dos objetivos

Una vez llegados al laboratorio y puestos nuestros elementos personales de protección la doctora
Luz Delia Portilla nos explica el procedimiento que se va a realizar el primer día de laboratorio.

SIEMBRA: para la siembra a cada grupo se nos entrega:

 dos AGAR sangre y un CROMOAGAR

 un mechero
 una rejilla
 un asa redonda
 toallas
 lápiz de cera
 materiales biológicos: cepas conocidas

para realizar la siembra en primer lugar se prende el mechero que debe estar colocado entre la
muestra y nosotros y nos protege del proceso infeccioso, posteriormente con un lápiz de cera
vamos a marcar en la parte inferior del agar sangre con nuestro nombre y grupo (3), a
continuación la doctora nos suspende la muestra del material biológico en un extremo del agar y
nosotros procedemos a esterilizar el asa dejamos enfriar tocamos un extremos del agar para
corroborar que este frio y empezamos a extender la muestra haciendo líneas en zigzag de un
extremo a otro, cerramos el agar y procedemos a flamear el asa para esterilizarla.

Seguidamente se pasa al proceso de incubación a 37ºC por 24 horas en la incubadora.

OBJETIVOS

1. Definir a través del cultivo AGAR sangre que tipo de cepa bacteriana conocida se sembró y
así poder conocer el agente infeccioso, sus características y diagnóstico.
2. Comparar con los demás grupos la morfología de cada una de las bacterias sembradas
para poder estudiarlas y conocerlas

2.dibuje la morfología, tipo de agrupación y afinidad con respecto al GRAM de las bacterias de su
cultivo

En el agar sangre después de 24 horas incubación

observamos que el cultivo es positivo para
klebsiella pneumoniae mayor de 100.000 unidades
formadoras de colonia por mililitro
después de la coloración de GRAM, al microscopio podemos observar BACILOS GRAM NEGATIVOS

Patologia por klebsiella pneumoniae:

La bacteriemia es la presencia de bacterias en el torrente sanguíneo. Puede producirse

espontáneamente, durante la infección de determinados tejidos, por el uso de sondas
gastrointestinales o catéteres venosos, o después de procedimientos odontológicos, digestivos, la
curación de una herida u otras maniobras. La bateriemia puede causar infecciones metastásicas,
entre ellas endocarditis, en especial en pacientes con anomalías de las válvulas cardíacas. La
bacteriemia transitoria suele ser asintomática, aunque puede causar fiebre. El desarrollo de otros
síntomas generalmente indica que hay una infección más grave, como una sepsis o un shock
séptico.

El desarrollo de síntomas como taquipnea, escalofríos, fiebre persistente, alteraciones sensoriales,

hipotensión y síntomas gastrointestinales (dolor abdominal, náuseas, vómitos, diarrea)

Fisiopatogenia de klebsiella pneumoniae

La bacteria klebsiella pneumoniae es una de las principales causas de las infecciones

hospitalarias. Además de los abscesos piogénicos hepáticos, K. pneumoniae hipervirulenta se
diferencia de K.pneumoniae clásica por su capacidad de propagación a sitios distantes (metástasis),
más comúnmente el ojo, los pulmones y el sistema nervioso central ,Esta patogenicidad se debe a
su capacidad de adaptación y de desarrollo de nuevos factores de virulencia así como de
multirresistencia a antibióticos como la ampicilina, las tetraciclinas y los beta-lactámicos

FACTORES DE VIRULENCIA

Los factores de virulencia que presenta la bacteria klebsiella pneumoniae para el desarrollo de la
patogenia son
1) Cápsula
Esta bacteria produce una capsula viscosa de polisacáridos complejos. Esta capsula permite
impedir el enlace con fagocitos y entonces evitar fagocitosis.
2) Fimbrias
Las fimbrias participan en la formación de colonias bacterianas intracelulares. Son factores
importantes para la formación de biopelículas.

3) Ureasa: Esta enzima contribuye a la formación y crecimiento de bacterias, que crecen en el tracto
urinario y que forman cálculos de infección. La hidrolisis de la urea provocara una precipitación de
sales inorgánicas (e incremento de pH) que conducen a la incrustación, principalmente en los
catéteres a un flujo de orina deteriorado y formación biopelículas que pueden inhibir el tratamiento
de antibióticos.

4) Formación de biofilm
La formación de biofilm por K.pneumoniae promueve la resistencia a la muerte del huésped y
antimicrobianos. Además, la comunidad de biopelículas es más resistente a la acción de muchos
antibióticos. La matriz del biofilm, matriz densa de proteínas, de polisacáridos y de ADN, previene
la difusión eficaz de antibióticos. Las biopelículas formadas por Klebsiella pneumoniae, según los
estudios más actuales, presentan resistencia a beta-lactámicos o ciprofloxacino.

5) Resistencia a los antibióticos: en este apartado destacamos dos mecanismos de acción.

La producción de enzimas betalactamasas (contra cefalosporinas y penicilinas) y las enzimas
carbapenémicos (contra todos los beta-lactámicos, incluyendo carbapenémicos, cefalosporinas,
penicilinas y monobactámicos).

Klebsiella pneumoniae es multirresistente a una gran variedad de antibióticos por lo que el

tratamiento es muy complicado.
6 antibiograma

Para lograr determinar en nuestra practica de laboratorio la resistencia y sensibilidad de

medicamentos de nuestro cutivo de bacteria klebsiella pneumoniae , nos disponemos hacer la
medicion de los halos con respecto a su diametro , teniendo en cuenta las unidades del patron de
resistencia o sensibilidad explicado por la docente :

NORMA INTERNACIONAL CLSF 2023

SENSIBILIDAD Halo mayor a 15 mm de diametro

RESISTENCIA Halo menor a 15mm de diametro
Para conocer la resistencia o sensibilidad de medicamentos nuestra bacteria klebsiella
pneumoniae nos disponemos hacer la medicion de los halos y de acuerdo a esto lograr
determinar resistencia y sensibilidad

Una vez realizado y evaluado las mediciones de los halos nos dio como resultado:

SENSIDISCOS SENSIBILIDAD RESISTENTES

CIP3 – Ciproflaxina
FEP 30 - Cefapime
AM30 – Amikacina
75/30- Cefoperazona
MMF-Heropenem
SAM – Ampicilina sul Bactam
33 mm de diametro
23 mm de diametro
30 mm de diametro
25 mm de diametro
6 mm de diametro
6 mm de diametro

Gracias a la medicion de los halos logramos determinar que el medicamentos que nosotros
implemetariamos es nuestro cultivo de bacteria klebsiella pneumoniae es Ciproflaxina con una
senesiblidad mayor de 33 mm de diametro , porlo tanto se puede conocer los efectos adversos de
este medicamento los cuales son debilidad muscular , nerviosismo, insomnio ,palpitaciones
cardiacas , ansiedad.