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Efecto de 5 diferentes concentraciones de NaCl, sobre la tasa de transpiración de la

especie Ruta chalepensis


Introducción.

El fenómeno de estrés salino es común en lugares con tendencias a tener sequías, debido a
que el agua se seca y quedan residuos que en su mayoría es NaCl. En el año 2020 se estimó
que el 6% del área total del globo y el 30% de los cultivos a nivel mundial, sufren de
problemas de suelos salinos (Castillejo 2020). Por otro lado, en el Perú, la salinidad del mar
peruano presenta concentraciones de 33,2 a 35,6 UPS en verano, y de 33,8 a 35,4 UPS en
invierno, siendo así uno alcalino, con picos de mayor salinidad en invierno. (Instituto del mar
peruano, 2013). En las superficies de la costa peruana alrededor de un 14% de ellos posee una
salinidad muy evidente, mientras que 5% una salinidad incipiente. En solo la pampa de la
costa, estos tienen un suelo salino de 23% y 11% de suelo no salino, mientras que los suelos
no evaluados oscilan en un 66%. (Alva, C. et al, sf p.16).

En lo personal, yo soy amante de las plantas y voy a comprar a un mercado lejano a comprar
ciertas especies de plantas para mi hogar, la quinta vez que fui en 2020, fui a comprar
R.chalepensis, sin embargo, observe en las muestras de plantas del proveedor que solía
comprar, que algunas plantaciones de R.chalapensis y otras plantas más, estaban con hojas
marchitas y verdes, además de que las plantas se veían muy débiles. Lo que me informo la
persona que le suelo comprar, es que las plantaciones de su proveedor estaban teniendo
últimamente muy mala conducción de sales, entonces, esto provocaba que las plantas
tuvieran estrés salino, y por ello la mayoría tenía modificaciones morfológicas a primera
vista.

Es por esto que nace la necesidad de investigar acerca de esta problemática. En el siguiente
trabajo se buscará responder la siguiente pregunta: ¿En qué medida 5 diferentes
concentraciones de una solución hipotónica de NaCl (0 mM, 20mM, 40mM, 60mM y
80mM)  condiciona en la tasa de transpiración de la especie Ruta chalepensis?, dicha
interrogante será abordada a través de un experimento cuantitativo en la cual se expondrá
R.chalapensis a diferentes concentraciones hipotónicas de NaCl durante 3 semanas.
Asimismo, el propósito de esta investigación es determinar el efecto de dichas
concentraciones sobre la tasa de transpiración y diagnosticar si hay una diferencia
significativa entre las concentraciones. Siguiendo la realidad de los suelos de la costa
peruana.

Marco teórico.

El estrés salino

La salinidad en las tierras agrícolas son originados de diferentes


formas, una de ellas es por la cercanía de las cosechas con el mar,
asimismo es influyente el cambio climático. La otra forma es por

1
la mala implementación del agua y suelo en las cosechas, ya que
permitiría el transporte de las sales por el suelo y a otros sitios
(Arnaldoa, 2019). El estrés salino u osmótico es como se llama este
fenómeno, esté afecta a la tasa de producción de las plantas,
además de provocar anomalías morfológicas, de transporte y
cambios metabólicos y en los orgánulos. Los suelos salinos se
caracterizan por presentar niveles tóxicos de cloruro de sodio y
sulfato de sodio. Los valores de conductividad eléctrica en
extractos saturados de suelo salino oscilan alrededor de 4.0 dS/m
(≈ 40 mM NaCl) (Rodríguez, N. et al., 2019. p.3)

El crecimiento de las plantas se ve afectado por el estrés salino en dos fases: la primera
perteneciente a la fase osmótica, en la cual se observa NaCl en la zona radicular de la planta y
la fase iónica, que corresponde a la respuesta tardía y es el resultado del efecto tóxico de la
sal cuando está dentro de la especie. En la respuesta temprana, se da como afección la lesión
de partes de las hojas que hacen la transpiración. (Castillejo 2020). Lo que sucede con el
estrés salino, es que este fenómeno provoca que se rompa la homeostasis iónica de las plantas
al provocar un exceso de Na+ y una deficiencia de K+. Al suceder esto, ocurre un cierre
estomático y como consecuencia, se da una limitación a la entrada de CO2 (Alcaraz, J. 2012.
p.2), y dándose una pérdida de agua. Los poros de la epidermis, o también llamado estomas,
son cerrados, de igual forma sucediendo con las células oclusivas, por lo cual estos no
permiten absorber el dióxido de carbono, además de permitirse que el vapor del agua de las
hojas se de en menos medida. (Allot, A., et al. 2015. p.436). Entonces se puede decir que
mientras la especie Ruta chalepensis esté expuesta a una mayor concentración de solución
hipotónica, menor será la tasa de transpiración.

Ruta chalepensis.

La especie Ruta chalepensis posee grandes propiedades que ayuda a tratar ciertas
enfermedades, la especie es usada para los espasmos gastrointestinales, hemorroides,
parasitosis, etc. Si bien esta planta es de origen mediterráneo, en Latinoamérica también
posee gran importancia, por su cantidad de vitamina C (INECOL). Por otro lado, la
transpiración es algo fundamental en la planta, orgánulos como los estomas están presente en
el control de la tasa transpiratoria, y cuando no es dado correctamente, la reproducción, y
crecimiento de la especie es afectado, entre los factores que lo modifican está presente la
temperatura, humedad relativa, y factores ambientales, en estos factores está el desbalance de
los nutrientes en el suelo a causa del estrés salino (Naizaque, J. et al, 2014)

Metodología.

Variables.

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- Variable Independiente: La cantidad en mM de concentraciones de Cloruro de sodio,
las cuales son 0 mM, 20 mM, 40 mM, 60 mM y 80 mM. El cual será aplicado a las
muestras de la especie Ruta chalpensis, en un lapso de tiempo de 3 semanas, de forma
progresiva durante la semana de riegos.
- Variable dependiente: La tasa de transpiración de la especie Ruta chalepensis
expuesta a las concentraciones de NaCl. El cual será medido a través de un potómetro
casero al final del aplicado de las 5 concentraciones.

- Las variables controladas se muestran en la siguiente tabla:

Tabla 1.
Datos sobre las variables controladas en el experimento

Variables ¿Cómo influye? / ¿Por qué se debe ¿Cómo se controla?


Controladas controlar?
Según el diccionario de plantas medicinales
de Barcelona, lo ideal para la especie es una
Se puede controlar con un termómetro en el
temperatura de 20°C, más puede aguantar
área donde se colocaría las muestras,
heladas de hasta -7°C, pero soporta más
además de usar focos de 20 watts para
temperaturas cálidas, a lo contrario no
mantener el calor con el cual la especie
La podrá desarrollarse plenamente, y los
creció la cual es de 20°C para su
temperatura  orgánulos que derivan a la transpiración
crecimiento óptimo y así no afectar a los
serían débiles, si la temperatura varía,
resultados de la tasa transpiratoria por
afectaría de igual forma a la tasa de
soluciones hipotónicas. Y el termómetro
transpiración de la planta, y si es irregular
para mantener la temperatura.
en cada muestra, afecta a los resultados con
las soluciones hipotónicas. 
El tipo y cantidad de sustrato puede ser
Colocando el mismo tipo de sustrato y
El tipo y determinante para el crecimiento de la
pesando con una balanza de a kg (±0.01 kg)
cantidad de especie y su transpiración, a diferente
antes de colocar el tallo con la hoja y el tipo
sustrato  abono y cantidad de sustrato, de esa forma
siendo de la misma marca.  
afectando su transpiración en el potómetro. 
El tiempo en el potómetro tiene que ser de Como el tiempo es mayor, esto se puede
24 h de forma en todas las muestras, en medir a través de una alarma, iniciará
tiempo 
cualquier caso este límite de tiempo sea inmediatamente se pondría las plantas y
irregular en las muestras, la transpiración concluirlo cuando está suene, pero habrá un
variará y los resultados no serán confiables.  margen de error de ±0.01 s 

Fuente: Autoría propia

- Variables no controladas:
La alta humedad relativa: La alta humedad disminuye a los daños colaterales por el
exceso de salinidad, además que un alto riego puede producir plagas, por lo que los
resultados obtenidos tendrán variaciones y no serían los correctos. 

3
Materiales y reactivos.

Los materiales y reactivos a utilizar en el experimento, se muestran en la siguiente tabla.

Tabla 2.
Datos sobre la indumentaria y reactivos a utilizar

Materiales / Equipos (para las 50 muestras, cada


Reactivos / Insumos
tratamiento son 10 muestras) 
● 4 botellas de 1.5 L
● abono
● 5 focos de 20 watts
● 5 macetas de 95 cm x 52 cm
● 3 Jarrones de capacidad de 1.5 L
● Taza medidora de 0.5 L (±0.1 L)
● 1 balanza de kg (± 0.01 kg)
● Total de agua para las concentraciones:
Materiales para el potómetro casero o Para el 1er paso para los brotes: 3L,
● 1 pote de vaselina 1L por jarrón
● 1 rollo cinta aislante o Para las concentraciones: 20 L.
● 10  botellas de 2L y 10  botellas de 500ml llenas
de agua ● 0mM, 20mM, 40mM, 60mM y 80mM de
● 1 rollo cinta transparente NaCl
● 1 cúter
● 10 tubos de goma de 50 cm ● 50 muestras de tallo de 10 cm con hojas de la
● 10 reglas impresa a tamaño real de 20 cm (± 0.1 especie Ruta chalepensis
cm)
● 1 lapicero
● 1 cuentagotas
● 1 rollo de hilo pabilo
● 1 tijera
● 1 clip
● 1 plumón

Fuente: Autoría Propia

Procedimiento.

Se va a usar el potómetro para poder medir la transpiración de la especie y el método de


replantación por esquejes. Así mismo, la tierra se salinizará con NaCl de forma progresiva,
vertiendo así 20 mM disueltos en 4L de agua.

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En base a todo lo dicho, se implementó el siguiente procedimiento

1. Se sumergirán los tallos de la especie a tratar sobre los jarrones con agua, y se esperará 3
días para observar el desarrollo de raíces.
2. Las muestras enraizadas de R.chalepensis se sembrarán en las 5 macetas. Con una
separación de 8 cm entre ellas, y con 2 cm de profundidad. Se realizarán 2 hileras de 3 y
4 muestras de la especie.
3. Las muestras se colocarán en un lugar con una humedad relativa adecuada, y la
temperatura será manejada a través del uso de los focos de 20 watts.
4. La cantidad de NaCl se medirá con una balanza de kg en montos de 0 mM, 20 mM, 40
mM, 60 mM, y 80 mM, estas medidas serán distribuidas entre las muestras de la especie.
Se disolverán en agua, 2L por cada concentración y se esparcirá eventualmente con el
riego, este será de forma constante durante 3 semanas de manera interdiaria con una
cantidad de 0.45 L por cada 7 plantas, siendo estas 3 veces por semana.

Medición de la tasa de transpiración.

1. Una vez se hayan concluido las aplicaciones, se medirá las muestras a


través de un potómetro, el tiempo en el que se dejará en este serán 24 horas,
ya que la especie no es una especie que absorbe agua de forma rápida y
notoria. El potómetro fue elaborado de forma casera.

Realizar un potómetro.1

1. Colocar una regla impresa sobre el cartón de 25 cm x 6 cm y asegurar con cinta, la regla
debe estar de forma que 0 cm debe estar en la parte superior y 20 cm en la inferior, después
colocar el tubo de goma, de forma que la boquilla esté en la marca de 0 cm y asegurar con
cinta.
2. Tomar una botella de 500 ml llena de agua y colocarla detrás del cartón en la cual tiene la
regla, la botella de 2 L será colocada detrás de la que tiene el cartón solo. Se asegura con
cinta y con hilo pabilo
3. En la parte del cartón con la regla, se colocar un corte de cinta aislante después de haber
hecho entrar el agua por el tubo, se tapara y se hará pequeños agujeros en él, por otro lado en
el otro cartón, se pondrá la muestra de la especie y se colocará vaselina alrededor para evitar
filtraciones de aire.
4. Después de ello en la regla se marcará el lugar en el cual llega el agua y cuando se termine
la prueba, se hará otra marca al nivel del agua que marca. Con esos datos se resolverá la
siguiente fórmula:

𝑣
𝑡
En la cual V es el volumen del capilar y T el tiempo.

1
Obtenido de: Thinkthac. (2021). Potometer Model | ThinkTac | Science Experiment. Recuperado de
https://www.youtube.com/watch?v=Pt3dvQJvhoI

5
Calcular el volumen capilar: πr2h

En la cual r es el radio del capilar y h la distancia que el agua ha recorrido

Seguridad, ética e impacto ambiental.

● Se debe tener cuidado con el manejo de NaCl si se mantiene un corte, rozadura o


lesión que conlleve pérdida de sangre, ya que este puede ocasionar ardor en la
zona afectada.
● Los restos de la especie R.chalepensis puede ser utilizada en menor cantidad
como abono para plantas Xerófitas.
● Las botellas de plástico, y los cartones usados en el modelo experimental fueron
recaudados de forma reciclada, por lo cual no se está contribuyendo a la
contaminación ambiental.
● El agua utilizada para los potómetros es reunida una vez se finalice el tratamiento
con las muestras, esta agua servirá de riego para los árboles de mi comunidad. Y
la tierra salina será distribuida en las plantaciones de estos en una mínima cantidad
de forma que no afecte su crecimiento.
● El manejo de plantación de la especie planta trata de ser con guantes, ya que las
hojas son hasta cierto punto toxicas, y puede causar irritación si su contacto es
constante.

Análisis y discusión de resultados.

Anova.

A través de esta herramienta estadística, se logrará comparar las varianzas entre los
promedios de los diferentes grupos de concentraciones de NaCl. Con ello se podría
determinar si efectivamente se encuentra una diferencia significativa entre los factores en la
variable independiente.

Tukey.

Se usa cuando se observa que hay una diferencia en la herramienta previa, Anova. Esta es una
prueba que crea intervalos de confianza para las diferencias entre las parejas medias de los
valores que se van a evaluar, mientras que controla la tasa de error de los factores.

Recopilación de datos y análisis.


Los tubos colocados en el potómetro, tendrán la función de los capilares de R. chalepensis, de
esta forma haciendo la función del transporte de agua, así aplicándose la propiedad de
cohesión y adhesión.

Tabla 3.

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Datos procesados obtenidos del Anexo 1, sobre la tasa de transpiración de R. chalepensis
afectado con las concentraciones de 0, 20, 40, 60, y 80 NaCl.

Fuente: Excel (autora propia)

Tabla 4.
Tabla Anova de la tasa de transpiración de las muestras de R. chalepensis afectadas con 0,
20, 40, 60 y 80 mM de NaCl.

Fuente: Excel (autoría propia)

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H0 = Al aumentar las concentraciones de NaCl sobre las plántulas de R. chalepensis, no
habrá diferencia significativa en la tasa de transpiración en la especie.
H1 = Al aumentar las concentraciones de NaCl sobre las muestras de las plántulas de R.
chalepensis, la tasa de transpiración será menor

F < valor crítico para F = aceptación de hipótesis nula


F > valor crítico para F = aceptación de hipótesis alternativa

En la tabla, se muestra que el valor de F es 42.883, y como este es mayor a el valor crítico
para F, el cual es 2.689…, se tendrá que aceptar la hipótesis alternativa. Entonces, se puede
decir que hay diferencia significativa en el efecto de diferentes concentraciones de NaCl, en
la tasa de transpiración de las muestras de R. chalepensis, y por ello, se tendrá que usar la
herramienta Tukey.

Gráfica 1.

Gráfica de caja y bigotes de las medias de las tasas de transpiración de


R.chalepensis afectado con 5 concentraciones diferentes de NaCl.

Fuente: Minitab (Autoría propia)

La gráfica muestra que la concentración de NaCl que provoca mayor tasa de transpiratoria de
R.chalepensis, representada a través del mayor valor de media, es la de 0 mM, el cual posee
un valor entre los intervalos de 0.0005, y 0.0007. Por otro lado, el intervalo que tiene menor
valor en media, significando la tasa de transpiración de R.chalepensis afectada con 80 mM de
NaCl, teniendo así la media entre 0.0000 y 0.0001, estos valores representan a la media de la
menor tasa de transpiración obtenida entre las tasas de R.chalepensis afectada con las 5
diferentes concentraciones. Sin embargo, hay un símbolo de valor atípico en la caja de 20
mM, este valor corresponde a la tasa de transpiración en la fila 5 de la concentración de 20
mM, poseyendo así una media de 0.0005278.

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Tabla 5.
Tabla Tukey de la tasa de transpiración de R.chalepensis, afectada con las concentraciones
de 0, 20, 40, 60 y 80 mM de NaCl.

Fuente: Minitab (Autoría propia).

Según la tabla, se puede inferir que entre las concentraciones de 20 mM y 40 mM no hay una
diferencia significativa en las tasas de transpiración, de igual forma sucede entre las
concentraciones de 60 mM y 80 mM de NaCl. Sin embargo, si hay diferencias significativas
entre las concentraciones de 20 mM y 40 mM, representadas por la letra B, y las 60 mM y 80
mM, representadas por la letra C, de igual forma sucede con la concentración control de 0
mM de NaCl, esta será significativamente diferente comparado con las demás
concentraciones representadas por las letras B y C. En cuestión a las medias de las tasas
transspiratorias, éstas irán decreciendo a medida que la concentración de NaCl aumenta, eso
demostrado en los cambios en las medias de la tasa de transpiración, así disminuyendo desde
la media de la tasa de transpiración de la concentración de NaCl letra A, la cual es 0.000630,
hasta la media de la tasa de transpiración afectada con la máxima concentración utilizada, 80
mM, el cual es 0.000088.

Gráfica 2.
Gráfica obtenida de la tabla Tukey, para la tasa de transpiración de R.chalepensis afectada
con 5 concentraciones diferentes de NaCl.

9
Fuente: Minitab (Autoría propia)

Según la gráfica 2, se evidencia que las tasas de transpiración que no poseen diferencia
significativa son las que están afectadas con las concentraciones de 80 mM - 40 mM y 80
mM - 60 mM, ya que, estos dos intervalos contienen cero en la medias y su linea choca con el
punto 0.0000 en el eje X. Por otro lado, la tasa de transpiración en las concentraciones de 60
mM - 80 mM de NaCl, son los intervalos que tienen menor margen para no ser
significativamente diferente, ya que es el intervalo con la línea más cercana a pasar por
0.0000 en el eje X.

Conclusión.

En la experimentación de la investigación, se pudo obtener datos útiles de los cuales se pudo


analizar y determinar si había una posible diferencia significativa entre las tasas de
transpiración de las 5 diferentes concentraciones de NaCl usadas. Con el análisis de datos, se
comprobó que hay varianza significativa entre las tasas de transpiración, por consiguiente, se
aceptó la hipótesis alternativa, entonces, aquello quiere decir que a mayor concentración de
NaCl, es menor la tasa de transpiración de R.chalepensis. Esto es debido a que la solución
hipotónica si condiciona a la tasa de transpiración de una planta, como expuso Alcaraz, J
(2012) en su material de Geobotanica para la Universidad de Murcia, ya que se da una rotura
en la homeostasis iónica de las plantas por aquel estrés salino, debido a que el exceso de
NaCl provoca que haya mucho Na+, pero un déficit de K+. Finalmente, aquello tiene como
consecuencia un cierre estomático, así limitándose la entrada de CO2, y dándose una pérdida
de agua. Por ello su daño morfológico. Entonces, mientras que la concentración de NaCl sea
mayor, mayor será el déficit de k+ y mayor la cantidad de sodio, tasa de transpiración irá
disminuyendo.

Finalmente, como sugerencia para otros trabajos de investagicon, propongo que se usen las
plantas marinas, ya que son las plantas que tienen mayor exposición a NaCl, de esta forma se
podría conocer que pasará a futuro con ese aquellas plántulas si las sales en los mares siguen
aumentando. Asimismo, considero que sería idóneo que se tomara en cuenta la estación más
idónea para la siembra de una especie determinada, de esa forma será más fácil de manipular
las variables controladas como la temperatura. Y finalmente, pienso que es mejor obtener un
potómetro y no hacerlo de forma casera, ya que de un u otro modo, habrá dificultades o
variaciones en los potometros que se hacen y aquello podría dificultar la obtención de datos
verídicos.

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Referencias

Alcaraz, J (2012). Salinidad y vegetación. Universidad de Murcia. Recuperado de


https://www.um.es/docencia/geobotanica/ficheros/tema18.pdf
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http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0123-422620140001000
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http://www.scielo.org.pe/pdf/arnal/v26n3/a05v26n3.pdf
Thinkthac. (2021). Potometer Model | ThinkTac | Science Experiment. Recuperado de
https://www.youtube.com/watch?v=Pt3dvQJvhoI

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Anexos

Anexo 1.
Datos en bruto de las muestras de R. chalepensis afectada con 5 concentraciones diferentes de NaCl, durante la tercera semana.

Distancia de agua Diferencia entre la distancia


Distancia de agua en Tasa de Radio del tallo Diámetro del
Concentración después de 1440 de agua en 0 minutos y volumen Tiempo
0 minutos transpiración (diámetro del tallo tallo
de NaCl minutos (± 0.01 después de 1440 minutos (± capilar (± 0.1 min )
(± 0.01 cm) (cm3/min) ÷ 2) (± 0.1 cm)
cm) 0.1 cm)

0.00038888
0 cm 8 cm 8cm 0.56 0.15cm 0.3 cm
cm3 /min
0.00068750
0 cm 7.9 cm 7.9 cm 0.99 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00063194
0 cm 12.90 cm 12.90 cm 0.91 0.05 cm 0.1 cm
cm3/min
0.00064583
0 Mm 0.3 cm 7.50 cm 7.47 cm 0.93 1440 min 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00061805
0 cm 7.10 cm 7.10 cm 0.89 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00088194
0 cm 6.5 cm 6.5 cm 1.27 0.25 cm 0.5 cm
cm3/min
0.00055555
0 cm 6.4 cm 6.4 cm 0.8 0. 2 cm 0. 4 cm
cm3/min
0.00039583
0 cm 4.6 cm 4.6 cm 0.57 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00043055
0 cm 5 cm 5 cm 0.62 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00041666
0 cm 4.8 cm 4.8 cm 0.6 0.2 cm 0.4cm
cm3/min
0.00036805
20 mM 0 cm 7.5 cm 7.5 cm 0.53 1440 min 0.15 cm 0.3 cm
cm3/min
0.00052777
0 cm 3.9 cm 3.9 cm 0.76 0.25 cm 0.5 cm
cm3/min
0.00038888
0 cm 4.5 cm 4.5 cm 0.56 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00036805
0 cm 7.6 cm 7.6 cm 0.53 0.15 cm 0.3 cm
cm3/min

12
0.00035416
0.5cm 3.1 cm 2.6 cm 0.51 0.25 cm 0.5 cm
cm3/min
0.00031250
0 cm 2.3 cm 2.3 cm 0.45 0.25 cm 0.5 cm
cm3/min
0.00020000
0 cm 2.6 cm 2.6 cm 0.32 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00047200
40 mM 0 cm 3.2 cm 3.2 cm 0.62 1440 min 0.25 cm 0.5 cm
cm3/min
0.00028472
0 cm 3.3 cm 3.3 cm 0.41 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00025694
0 cm 3.0 cm 3.0 cm 0.37 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00034027
0 cm 3.9 cm 3.9 cm 0.49 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00014583
0 cm 1.7 cm 1.7 cm 0.21 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00022916
0 cm 1.2 cm 1.2 cm 0.33 0.3 cm 0.6 cm
cm3/min
0.00006944
0 cm 1.5 cm 1.5 cm 0.1 0.15 cm 0.3 cm
cm3/min
0.00014583
60 mM 0 cm 1.7 cm 1.7 cm 0.21 1440 min 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00018750
0 cm 1.4 cm 1.4 cm 0.27 0.25 cm 0.5 cm
cm3/min
0.00013888
0 cm 1.6 cm 1.6 cm 0.2 0.2 cm 0.4 cm
cm3/min
0.00027083
0 cm 1.9 cm 1.9 cm 0.39 0.2 cm 0.4 cm
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