Muestras: patas de saltamontes y

músculo de camarón. vortex

+incubar
+ Se agrega SDS( para lisar lípidos y
proteínas de la pared celular y limitar
MÉTODO actividad de lisozima) y solución de
DESPROTEINIZACIÓN
LISIS
DE LISIS/DESNATURALIZACIÓN proteasa K(digestión de proteínas).
Se mezcla por vortex y se incuba de
ALCALINA
ALJANABI 1h a toda la noche.
con SDS
Se mezclan las muestras y
el tampón de sal (NaCl,
Método simple y rápido para la extracción de
ADN utilizando al detergente SDS (aniónico
Tris-HCl ph:8, EDTA pH:8) AISLAMIENTO DE Se añade NaCl saturado a cada
para desnaturalizar en un
a pH alto) y al Isopropanol (precipita al ADN),
tubo eppendorf. ADN muestra para precipitar. Se
además de una sal que neutraliza y ayuda a mezcla en vortex por 30s a
precipitar, NaCl. velocidad máxima. Después se
centrifuga a 10,000g por 30min
para notar la separación.
El sobrenadante se transfirió a
un tubo nuevo y se agrega
isopropanol (en el cual el ADN REPRECIPITACIÓN
precipita, ya que es poco Separación
soluble) a cada muestra. Se DEL ADN
mezcla. Se incuba a -20°C por de fases
1h. Y luego se centrifuga a
10,000 g durante 20min

Sedimento:
se aparta/desecha

Sobrenadante: Separación RESUSPENCIÓN

LAVADO DEL ADN
se aparta/desecha de fases DEL ADN

El sobrenadante se descartara Se resuspende en 300-500µl

vertiendo y se enjuaga el gránulo de dH2O. Y se almacena
con etanol/H2O; etanol al 70%. Para hasta cuando se hagan la
eliminar sales y detergentes cuantificación.
contaminantes. Esto se hace 2-3
veces. Se deja secar solo o en
termobloque.
Reseña de Método
Técnica de Aljanabi

Es un método muy simple, de muy bajo costo, rápida obtención, universalmente aplicable y
reproducible para extraer ADN genómico de alta calidad de diferentes organismos (tejido vegetal;
trigo, hojas de cebada, papa, frijoles, hojas de pera y almendras), entre los que también se
encuentran hongos, insectos (patas de saltamontes) y camarones, en otras palabras tejido fresco.
No se utilizan reactivos y equipos costosos y peligrosos para el medio ambiente. Se puede realizar
incluso en laboratorios de baja tecnología.

Se requieren una cantidad mínima de tejido, de 50-100mg de muestra. Se aumenta la cantidad de

tejido hasta 10 veces pero no disminuye la calidad y cantidad del ADN. La recuperación de ADN es
cuantitativa y reproducible: la calidad es tal que se puede utilizar para todas las técnicas de
biología molecular relevantes. El ADN genómico obtenido con este método se puede utilizar para
todas las aplicaciones relevantes (digestión con enzimas de restricción, PCR, etc.).Todos los ADN
g producidos con este método producen un PCR claro, nítido y reproducible, implicando una
reproducibilidad e integridad de ADN alta.

NOMBRE: PANTOJA GAMEZ KENIA IVETH

NÚMERO DE CUENTA: 15219828
GRADO-GRUPO:3-1
MATERIA: INGENIERIA GENETICA
FECHA: 30/10/2020
 BIBLIOGRAFÍA:

Aljanabi, S. (1997). Universal and rapid salt-extraction of high quality genomic

DNA for PCR- based techniques. Nucleic Acids Research, 25(22), 4692-4693.
https://doi.org/10.1093/nar/25.22.4692