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UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS – “ESPE”

DEPARTAMENTO DE LA CIENCIAS DE LA VIDA

Nombre: Kimberly Gavilanes Fecha: 10/02/2023

Asignatura: Biotecnología Humana NRC: 9227

Tarea de laboratorio

Tema: Sensibilidad analítica y eficiencia de amplificación del gen ACTB en la Reacción en Cadena
de la Polimerasa cuantitativa (qPCR) a partir de ARN extraído de la línea celular McCoy ATCC
CRL-1696 Mus musculus, fibroblasto murino.

1. Utilizar la base de datos del NCBI y buscar la secuencia de ARN mensajero del gen ACTB en
Mus musculus.

Tomado de : https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NM_007393.5?report=fasta

2. Luego para el gen:


• Utilizar el software online BLAST (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi), ingresar la
secuencia del gen ACTB y realizar el alineamiento de la secuencia del gen y los primers.
Primer Forward ACTB: 5'- TGCTCTAGACTTCGAGCAGGAGATG -3'

Primer Reverse ACTB: 5'- AGCCTCAGGGCATCGGAA -3'

• Utilizar el software online PRIMER BLAST


(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/), ingresar la secuencia del gen ACTB y
determinar el tamaño del fragmento flanqueado por los primer forward y reverse.

Tomado de :
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/primertool.cgi?ctg_time=1675955842&job_key=x80
Z803cQHRnTtBL3Sv0eacw5UuKI_5Wiw

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