LABORATORIO CLINICO

PRÁCTICA Nº 3

CURVA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA

Método Enzimático Colorimétrico
MÉTODO
La Diabetes Mellitus (DM) es una enfermedad crónica-degenerativa, no infecto-
contagiosa, incurable, pero que puede controlarse ; afecta al 15% de la población
mundial de esta proporción, la Diabetes Mellitus tipo I (DMI) le corresponde el 10%,
mientras que la Diabetes Mellitus tipo II (DMII), el 85%.
La prueba de tolerancia a la glucosa en ayunas es la forma más simple y rápida de medir
la glucosa en sangre y diagnosticar la diabetes.
El paciente no debe haber comido ni bebido nada durante 8 a 12 horas antes del examen
(excepto agua). Durante la prueba se examina la presencia de glucosa cuyos niveles
están por encima de 200 mg/dL que indican un diagnóstico de Diabetes Mellitus.
MATERIALES
MUESTRA
 Suero o plasma.
 La primera muestra debe recolectarse en ayuno.
REACTIVOS Y MATERIAL
REACTIVOS:
Monoreactivo : Tampon fosfato 100 mmol/L pH7.5, Glucosa
oxidasa > 10 KU/L, peroxidase > 2 KU/l, 4-aminoantipirina, 0.5
mmol/L, fenol 5 mmol/L.
Estandar: Concentración 100 mg/dL.
MATERIAL.

Tubos de ensayo de 13 Micropipeta de 10, 500 y Tips o punteras.

X100mm. 1000 uL.

Vacutainers sin Gradilla. Reactivos

anticoagulante con aguja /
jeringa.

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EQUIPO.
 Analizador bioquímico semiautomático/automático para lecturas 505-510 nm.

 Centrifuga.

 Baño María

PROCEDIMIENTO

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Preparar 75 gr de glucosa (azúcar impalpable) disuelta en 200 ml de jugo de

naranja (1.75 gr. De glucosa por kilogramo de peso corporal, máximo hasta 75
gr.)

Se toma una muestra de sangre venosa en ayunas.

Posteriormente se le hace tomar al paciente la solución preparada para luego

tomar la muestra de sangre a intervalos de:
- 30 minutos
- 01 hora.
- 01 hora 30 minutos.
- 02 horas (en total 05 muestras)

 Trazar la curva y entregar resultado para su interpretación médica.

RESULTADOS
 De la práctica se obtuvo los siguientes resultados:
 Glucosa basal. 55mg/dl
 Glucosa a los 30 min. 76mg/dl
 Glucosa a los 60 min. 100mg/dl
 Glucosa a los 90 min. 132mg/dl
 Glucosa a los 120 min. 105mg/dl
 Como se puede apreciar todos los resultados coinciden con los valores normales.

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DEPURACIÓN DE CREATININA
MÉTODO

Esta prueba sirve para medir la capacidad de los riñones para depurar la sangre de los
productos de desecho o materiales extraños.
La creatinina se filtra a nivel de glomérulo en condiciones normales la depuración de la
creatinina endógena se acerca a la taza de filtración glomerular.

MUESTRA
Obtener la muestra de manera usual (suero o plasma libre de hemólisis).
Orina de 24 horas.
DATOS DEL PACIENTE:
Peso del paciente en Kg.
Talla en cm.
Superficie corporal (SC) Hallar con la tabla de Numograma.
1.73 m2 Estándar Panamericano
1.50 m2 Estándar Perú
Volumen litro (orina) Considerar solo 2 cifras.
Volumen > de 2 litros no tomar en cuenta el EXEDENTE.
MATERIALES
EQUIPO:
Analizador Bioquímico Semiautomático
MATERIAL:
Tubos de ensayo de 13 Micropipeta de 50 µL, 500 Tips o punteras.
X100mm. µL.

1 Piseta con agua Gradilla. Reactivos

desionizada o destilada.

PROCEDIMIENTO
Hallar creatinina en suero mg/dl (Cr.S.)
Hallar creatinina en orina 24 hrs mg/dl (Cr.O.)

REALIZAR PREVIAMENTE UNA DE LAS SIGUIENTES DILUCIONES:

ORINA + H2O DESTILADA
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0.1 ml ó 4.9 ml
100 ul ó 4,900 ul
10 ul ó 490 ul

Tomar (50 ul método cinético) o (1.5 ul método colorímetro) de esta dilución procesar
como si fuera creatinina en suero sanguíneo y LEER

EJEMPLO:
Cr.O = 1.48 mg/dl
Fórmula:
Creatinina en orina (24 hrs) = mg/dl multiplicar x dilución.
Creatinina en orina = mg/dl x 50 (dilución)

Ejemplo:
Creatinina en orina = 1.48 mg/dl multiplicar x dilución.
(24 hrs. o al azar)
Creatinina en orina = 1.48 mg/dl x 50 (dilución)
Creatinina en orina = 74 mg/dl
CALCULAR CON LOS DATOS:
Ejemplo:
Creatinina en suero (Cr.S) : 3.28 mg/dl
Creatinina en orina (Cr.O) : 27.5 mg/dl
Peso : 96 Kg.
Talla : 160 Cm.
Superficie Corporal : 1.95 (con la ayuda del Nomograma)
Volumen Litro (V litro) : 2300 ml
Entonces: Volumen Litro = 2.3
FORMULA DE DEPURACIÓN DE CREATININA ENDOGENA O R1

DCE(R1) = Cr.O x V litro x factor

100
Factor = 0.7
Reemplazando:
DCE(R1) = 27.5 mg/dl x 2.3 x 0.7
100
DCE(R1) = 106.19 mg/dl
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100
DCE(R1) = 44.27
(R1) = 0.44

DEPURACIÓN DE CREATININA CORREGIDA

DCC = R1 x 100 x 1.53 (sc)
Cr.S.
Reemplazando:
DCC = 0.44 x 100 x 1.95
3.28
DCC = 26.1 ml/min.
RESULTADOS
 Los resultados estan muy por debajo de los valores normales por lo que
pudo haber un error a la hora de tomar los datos.

VALORES NORMALES.
50-150 ml/min

DETERMINACIÓN DE LA SUPERFICIE CORPORAL APLICANDO LA

SIGUIENTE FÓRMULA
SC = log P x 0.425 + log H x 0.725 + 1.8564
SC : Superficie corporal
P : Peso en kg.
H : Talla en cm.
NOMOGRAMA PARA LA DETERMINACION DEL AREA DE LA SUPERFICIE
CORPORAL

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HEMOGLOBINA GLICOSILADA
MÉTODO RÁPIDO SEPARACIÓN DE RESINA DE INTERCAMBIO IÓNICO
MÉTODO

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La HbA1 se forma irreversible y progresiva,ente en los eritrocitos durante los 120 didas
de su vida normal. Dado que la concentración de HbA1 en el eritrocito refleja el
promdeio de glucosa en la sangre de 4-6 semanas anteriores siendo estable por la vida
de los eritrocitos cuya medición proporciona una prueba de granvalor para evaluar el
control a largo plazo de los diabeticos

MUESTRA
SANGRE TOTAL con EDTA

PROCEDIMIENTO
Colocar en un CUP 500 ul de LYSE
LISANTE
Agregar al CUP 100 ul de sangre c/EDTA
Incubar por 5’ a temperatura 20-25º C
(Hemolisis completa)
Pipetear del CUP 100 ul al tubo con reactivo
RGT
Introducir el SEP un cm. Por encima del líquido y rotar por 10’ a 900 r.p.m.
Empujar el SEP hasta el fondo del tubo RGT y vaciar el sobrenadante a otro tubo y
LEER (utilizando agua destilada como BLANCO)
RESULTADO = A
 Agregar 20 ul del preparado CUP (Paso Nº 3) En un tubo que contiene 5 ml de
agua destilada y mezclar.
 LEER (utilizando agua destilada como BLANCO)
RESULTADO = B
CALCULAR:
FORMULA

% HbA1 = A X FACTOR
B

FACTOR = 2.86
Ejemplo:
% HbA1 = 0.322 = 051 x 2.86
2.631
à Resultado: 1.45
VALORES NORMALES

Normal o diabéticos estables : 4.5 – 7.0 % HbA1

Mal controlados o desequilibrio metabólico : >= 8.5 % HbA1

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