AMILASA (MTODO COLORIMTRICO)

Reactivo lquido para la determinacin fotomtrica de la

Amilasa en suero y orina.

Para uso en el diagnstico in Vitro.

SIGNIFICANCIA CLINICA

TECNICA

La enzima amilasa es producida por el pncreas exocrino y las glndulas

salivales. Esta enzima pertenece a las del grupo denominado hidrolasas,
teniendo por funcin la hidrlisis de algunos polisacridos como el
almidn y el glucgeno.

Reactivo 1

Desconocido

0.50

0.50

-----

0.010

Preincubar 3 a 5 minutos a 37C.

Muestra

Su aumento est relacionado en la mayora de los casos con pancreatitis

aguda, elevndose bruscamente la concentracin de la enzima en la
sangre y orina, permaneciendo elevada por ms tiempo en la orina que
en el plasma, siendo por ello de gran valor el estudio de la actividad en
suero y orina para saber sobre el curso de la enfermedad.

Referencia
(mL)
(mL)

Incubar EXACTAMENTE 7 1/2 minutos a 37 C.

Agua desionizada

(mL)

4.00

4.00

Reactivo 2

(mL)

0.50

0.50

Mezclar suavemente por inversin y leer a 600 nm (rango 580-620 nm.)

contra blanco de agua dentro del plazo de una hora.

FUNDAMENTOS DEL METODO

CALCULOS
Inicialmente, la amilasa se determinaba cuantitativamente segn el
mtodo iodomtrico de Wohlgemuth. Posteriormente, Somogyi
estandariz las cantidades de almidn y iodo, siendo estas
modificaciones las bases de los mtodos amiloclsticos y iodomtricos
introducidos posteriormente por Caraway.
El mtodo utilizado por VALTEK se basa en la capacidad de la amilasa
para desdoblar el almidn. El producto de esta hidrlisis est
compuesto bsicamente por dextrina y maltosa. El almidn remanente
reacciona con el reactivo de iodo para dar un color azul que se lee
fotomtricamente.

Conservados entre 2 y 8C. en frasco cerrado y protegidos de la luz,

estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.

-REACTIVO 2
Iodo
HCl

Para orinas, se recomienda trabajar con muestra de 24 horas.

Amilasuria (U/24 h) = Amilasa (U/dL) X Vol. 24 h. (mL)
100
ADVERTENCIAS Y MEDIDAS DE PRECAUCION:

REACTIVOS

-REACTIVO 1
Almidn soluble
Buffer fosfato pH 7.0
Preservantes y estabilizantes

Amilasa (U/dL)= Abs. Referencia - Abs. Desconocido X 1000

Abs. Referencia

550 mg/l
100 mmol/l
c.s.

10 mEq/l
20 mmol/l

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros controles

valorados para este mtodo.
Utilizar slo plasma heparinizado puesto que los otros
anticoagulantes interfieren con la reaccin.
Evitar la contaminacin del sustrato con saliva dada la alta
concentracin de amilasa que ella contiene.
Utilizar material muy limpio para evitar la contaminacin de los
reactivos.
1 U/dL corresponde a la cantidad de enzima que es capaz de
hidrolizar 10 mg de almidn en treinta minutos en las condiciones
del ensayo.

ESPECIFICACIONES DE DESEMPEO:

Preparacin del Reactivo de Trabajo: los reactivos se proveen listo para

su uso.

-Linealidad: hasta 600 U/dL.

Para valores superiores a 600 U/dL, diluir la muestra con suero
fisiolgico y el resultado obtenido se multiplica por el factor de dilucin.

MUESTRA

RANGOS DE REFERENCIA

Suero o plasma heparinizado libre de hemlisis, y orina. La amilasa es

estable por 7 das a temperatura ambiente y varios meses a 4C.

Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia en

funcin de la poblacin de pacientes. Los rangos de referencia que se
enumeran a continuacin estn tomados de la bibliografa existente.

MATERIAL NECESARIO NO INCLUIDO

Suero (U/dL)

Espectrofotmetro manual o fotocolormetro de filtros con cubeta

termoestable, capaz de medir absorbancia a 600 nm (rango 580-620
nm), bao termoregulado, cronmetro, pipetas.

Normal

Orina (U/24 h)

16 - 118

<6.000

Pancreatitis aguda

250-10.000

>20.000

Pancreatitis crnica

< 250

>7000

Grupo Industrial Mexlab Sa de CV. Susana Gomez Palafox #5486,Paseos del sol,zapopan jalisco.Tel.(33)36342361 /
01800111 4343 / 018001117788 / www.grupomexlab.com

PRESENTACIONES DISPONIBLES
CODIGO
035-100
035-110

CONTENIDO
Reactivo 1
Reactivo 2
Reactivo 1
Reactivo 2

1 x 25 mL
1 x 25 mL
2 x 25 mL
2 x 25 mL

BIBLIOGRAFIA
1. Wohlgemuth, J., Bio Chem 29 (1), 1908.
2. Somogyi, M., Biol Chem 125 (399), 1938.
3. Street, H.V., Close, J.R., Clin Chem Acta 1 (256), 1956.
REV N 2