MEDIOS DE CULTIVO

Y
TÉCNICAS DE INOCULACIÓN
GENERALIDADES

El crecimiento de

microorganismos en

sustancias alimenticias

artificiales es una de las

técnicas más importantes

usadas en el laboratorio.
GENERALIDADES

• Permite reconocer las

características

culturales de las

bacterias.

• A partir de estas se

puede obtener cultivos

puros
GENERALIDADES
 MEDIO DE CULTIVO
• Conjunto de micronutrientes,
macronutrientes y factores de
crecimiento.

• Se crean condiciones
adecuadas de desarrollo y
reproducción de manera
artificial.
• Para su óptimo crecimiento es necesario dar condiciones ambientales

adecuadas para su desarrollo en medios artificiales.

• Estas son: temperatura, humedad, etc.

• Condiciones del medio de cultivo: componentes (macronutrientes y

micronutrientes), reguladores de crecimiento, pH, etc.
• Las características más importantes de los microorganismos a ser

consideradas al momento de preparar un medio de cultivo son:

✓ Tipo trófico: autótrofos, heterótrofos, quimiotrofos, fotótrofos.

✓ Tipo respiratorio: aerobios, anaerobios, anaerobios facultativos.

✓ Temperatura: psicrófilos, psicrótrofos, mesófilos y termófilos.

✓ pH: acidófilos, neutrófilos, alcalófilos.

✓ Presión: barófilos, barotolerantes, barófilos extremos

COMPOSICIÓN QUÍMICA - MACROELEMENTOS
• FUENTE DE CARBONO:
✓ Pueden ser CO2 o
compuestos carbonados
orgánicos.
✓ Se utilizan en la construcción
de innumerables moléculas
necesarias para la
célula.
✓ Los hidratos de carbono se
consideran fuente de
carbono y energía.
• FUENTE DE NITRÓGENO
Es metabolizado para
proveer proteínas, ácidos
nucleicos y polímeros de
pared.
✓Alguno microorganismos
pueden incorporar
nitrógeno aminoácidos, bases
purínicas o pirimidínicas.
COMPOSICIÓN QUÍMICA - MACROELEMENTOS
• FUENTE DE FÓSFORO • FUENTE DE AZUFRE

✓ Se agrega fosfatos de sodio o ✓ Se adiciona como metionina

El fósforo se incorpora a ácidos ✓ En la célula se incorpora a

nucleicos, fosfolípidos, polímeros aminoácidos y diferentes

de membrana, ATP, y sustancias coenzimas.

de reserva.
COMPOSICIÓN QUÍMICA – FACTORES DE
CRECIMIENTO
• Son compuestos orgánicos requeridos en muy bajas concentraciones.

• No pueden ser sintetizados por la propia célula.

• Deben ser agregados al medio de cultivo

• Pueden ser aportados en forma de:

✓ Extracto de carne

✓ Extracto de levadura

✓ Extracto de malta
CLASIFICACIÓN POR ESTADO – AGENTES
SOLIDIFICANTES
• Su uso es opcional y el más usado es el agar.

• Se le adiciona en diferentes

concentraciones.

✓ 1.5 – 2 % en medios sólidos

✓ 0.2 – 0.3% en medios semisólidos

✓ 5% en medios de consistencia firme

COMPOSICIÓN QUÍMICA – AGUA

• Representa del 80-90% del peso total de una

célula.

• Es fundamental para la realización de todos los

procesos metabólicos, funciones enzimáticas ….

• Los medios de cultivo se preparan en el

laboratorio con agua destilada.

CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO
Estado Físico

Finalidad o composición
POR SU ESTADO FÍSICO
MEDIOS LÍQUIDOS

• Llamado también caldo.

• USO:

✓ diluciones

✓ homogenizar mezclas

✓ enriquecer cultivos

✓ rehidratar cepas liofilizadas

POR SU ESTADO FÍSICO
MEDIOS SÓLIDOS
• Llamado también agar.
• Se le añade 2% de agar.
• En cajas petri o en tubos
• USO:
✓ Para separar
microorganismos
✓ Para favorecer el desarrollo
de colonias aisladas
 POR SU ESTADO
FÍSICO
MEDIOS SEMISÓLIDOS
• Consistencia leve o
gelatinosa.
• Medio líquido al que se
adiciona agar (0.4 a 0.8%).

• USO:
✓ Para determinar la movilidad
de los microorganismos
microaerófilos.
POR SU FINALIDAD O COMPOSICIÓN
Contiene los nutrientes
mínimos necesarios para
MEDIO COMÚN el desarrollo de bacterias
poco exigentes: caldo
común, caldo carne, etc.
POR SU FINALIDAD
O COMPOSICIÓN
MEDIO DE
ENRIQUECIMIENTO

Son medios líquidos que

favorecen el crecimiento
de un tipo de
microorganismo en
particular.

Permite aumentar el
número de
microorganismos de ese
tipo.
POR SU FINALIDAD O COMPOSICIÓN

MEDIO
ENRIQUECIDO

Se le agrega una
sustancia que
aumenta el poder
nutritivo.

Aporta algún factor

de crecimiento
necesario para el
microorganismo que
el medio no lo posea.
POR SU FINALIDAD O COMPOSICIÓN
MEDIO SELECTIVO

Favorece el crecimiento de
un grupo de
microorganismos e inhiben
el crecimiento de otros.

Útiles en muestras mixtas.

Al medio se le adiciona
sustancias inhibitorias
como antibióticos o
ciertos colorantes.
POR SU FINALIDAD O COMPOSICIÓN

MEDIO DIFERENCIAL

Permite diferenciar
bioquímicamente a las
bacterias por su
actividad metabólica.

Revela características
fisiológicas de los
microorganismos.
POR SU FINALIDAD O COMPOSICIÓN
MEDIO SELECTIVO
DIFERENCIAL

Contiene sustancias
inhibidoras y sustancias
diferenciales.

El medio Sal Manitol

para Staphylococcus
POR SU FINALIDAD O COMPOSICIÓN
MEDIO DE
TRANSPORTE

Medio líquido o
semisólido.

Permite el
mantenimiento de
muestras clínicas

Contiene agua y
amortiguadores del
pH.
MEDIO SIM
PRUEBA DEL INDOL

MOTILIDAD
MEDIO SIM
FORMACIÓN DE H2S
Agar Simmons Citrate