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Ciencias Naturales

Informe de laboratorio

Estudio y manejo del microscopio


Study and handling of the microscope
Laura Daniela Arrieta Caro, Laura Vanessa Jiménez Flores, Claudia Esperanza Mosquera
Morales, Valeria Sofia Pérez García, Kenther Augusto Salas Córdova

Laboratorio de microbiología, facultad de ingeniería y cencías exactas, universidad de Cartagena, Cartagena,


Colombia.

Resumen
En la práctica de laboratorio se reconoció el microscopio y cada una de las
Citación: reconocimiento de las partes
del microscopio y su uso adecuado.
partes que conforman (tubo, oculares, objetivos, platina, carro, revólver,
informe de laboratorio, febrero de 2023. tornillo macro métrico, tornillo micro métrico, la fuente de luz, filtros,
Correspondencia:
condensador), así mismo se conocieron las funciones de cada una de ellas,
luego cada integrante del grupo hizo reconocimiento del microscopio
Laura Daniela Arrieta caro
siguiendo las indicaciones de cómo subir y bajar la plantilla, cómo mover el
Laura Vanessa Jiménez Flórez
carrito que sujeta la muestra, cómo enfocar y hacer que la imagen se vea
Claudia Esperanza Mosquera Morales nítida.
Valeria Sofia Pérez García
El objetivo principal de la práctica fue el uso adecuado del microscopio por
Kenther Augusto Salas Córdova lo tanto se usaron 4 muestras (una flor, un insecto, lana, agua estancada)
estas fueron observadas y analizadas por cada uno de los integrantes en los
Recibido: 28 de febrero de 2022 diferentes objetivos que posee el microscopio (4K, 10k, 40k y 100k).
Palabras claves: microscopio, Muestra, manejo.
Abstract

In the laboratory practice, the microscope and each of the parts that conform
(tube, eyepieces, objectives, stage, carriage, revolver, macrometric screw,
micrometric screw, light source, filters, condenser) were confirmed. the
functions of each one of them were known, then each member of the group
did a microscope examination of the following instructions on how to raise
and lower the template, how to move the cart that holds the sample, how to
focus and make the image look sharp.
The main objective of the practice was the proper use of the microscope,
therefore 4 samples were used (a flower, an insect, wool, stagnant water)
these were observed and analyzed by each of the members in the different
objectives that the microscope has (4K, 10k, 40k and 100k).

Keywords: microscope, sample, management.

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Informe de laboratorio,22 de febrero-diciembre de 2023.

Introducción
El microscopio es un instrumento de precisión que nos permite visualizar
organismos muy pequeños que no pueden ser visto a simple vista, es decir,
que nuestro ojo no es capaz de percibir, eso se logra a través un sistema
óptico formado por lentes que amplían la imagen de lo que se esté
observando.
En este informe se describirá el uso y el manejo adecuado del microscopio
al usar cuatro muestras.

Materiales y métodos
Materiales

Microscopios
Porta-objetos y cubre-objetos
Hilos de lana y algodón
Flores con polen
Agua de charca
Partes de insecto

Método de investigación
Se observó el microscopio y cómo usarlo:
Parte Mecánica:
 Pie o Base: Generalmente en forma de herradura o rectangular, es el
apoyo de las demás piezas del microscopio. El pie debe ser sólido y
pesado para asegurar su estabilidad.
 Columna o Brazo: Este elemento relaciona el tubo del microscopio
con el pie; sostiene la platina y el condensador y de ella se agarrará
el microscopio cuando se traslada durante los trabajos. En algunos
microscopios la columna es móvil.
 Tubo del Ocular: Está colocado en la parte superior del
microscopio, donde están acoplados los oculares, que pueden tener
movimiento vertical, con ayuda de una cremallera sobre la columna.
En algunos microscopios el tubo ocular es inclinado y se mantiene
fijo, en este caso se mueve la platina.
 Revólver o Disco Giratorio: Está debajo del tubo ocular donde están
acoplados los objetivos, presenta movimiento giratorio para facilitar
el cambio de un objetivo a otro.
 Platina: Es una placa que puede ser cuadrada, circular o
rectangular, con un orificio central que permite el paso de la luz a
través de ella. Su función es sostener las placas con los preparados
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Informe de laboratorio,22 de febrero-diciembre de 2023.

biológicos que se van a observar.


 Carro: Es un dispositivo ubicado sobre la platina, cuya función es
sujetar y mover la placa que se va a estudiar. Posee dos tornillos que
permiten movimientos horizontales y verticales (hacia adelante,
hacia atrás, hacia la izquierda y hacia la derecha) del portaobjetos.
Cuando la platina carece del anterior dispositivo, lleva dos soportes
para fijar las placas llamadas ganchos o uñas.
 Mecanismos de Movimiento: Está integrado por el tornillo
Macrométrico y el Micrométrico.
 Tornillo Macrométrico: Acerca o aleja rápidamente el objetivo del
preparado a observar; su función es lograr un enfoque más o menos
claro o aproximado del objeto.
 Tornillo Micrométrico: Acerca o aleja el objetivo del preparado,
pero lentamente, casi imperceptiblemente, permite desplazamientos muy
finos de la platina o del tubo del ocular. Durante la observación y enfoque
este tornillo debe estarse moviendo permanentemente; su
función es darle nitidez al enfoque.

Parte óptica:
Está integrada por los objetivos, oculares y el aparato de iluminación
(espejo, diafragma, condensador y filtros). Estos elementos son los que
permiten la iluminación, ampliación y la visión aumentada del objetivo.
 Objetivo: Es la pieza más importante del microscopio. Ellos se
acoplan mediante roscas estándar al revólver y pueden ser
cambiados de posición con sólo rotarlos. Reciben el nombre de
objetivos porque son los lentes que están más cerca del objeto. La
mayoría de los microscopios tienen tres o cuatro objetivos. Las
lentes de los objetivos son de aumentos diversos, los más usados
son: Objetivos de pequeños aumentos 3.5x; 4x, 5x, 6x, 8x y 10x;
objetivos de grandes aumentos 40x, 45x, 50x y objetivos de
inmersión 90x, 95x y 100x. Las lentes de inmersión se emplean con
aceite de cedro para conectar la lente frontal (lente inferior del
objetivo) al porta-objeto. Entre el objetivo y el objeto se produce
una pérdida de luz por reflexión que se corrige adicionando al
preparado unas gotas de aceite de cedro (aceite de inmersión) cuyo
índice de refracción 1.515, es próximo al cristal. Este aceite
también reduce o suprime por completo la refracción de los rayos
de luz provenientes de la fuente luminosa.
 Ocular: Están colocados en la parte superior del tubo ocular. Está
formado por dos sistemas de lentes dispuestos en un cilindro. Su
finalidad es aumentar la imagen dada por el objetivo y
eventualmente corregir algunos defectos de la misma. Reciben
dicho nombre porque son las lentes que se encuentran más cerca del
ojo. Hay oculares de 3.5x; 5x; 6.3x; 10x; 12.5x; 15x; 20x y 25x.
El aumento de la imagen de un objeto observado a través de un
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Informe de laboratorio,22 de febrero-diciembre de 2023.

microscopio, se calcula multiplicando el número de aumento del


objetivo con el cual se está trabajando por el número de aumento
del ocular que se está utilizando.
 Aparato de iluminación: Está conformado por la fuente de luz, el
diafragma, el condensador y los filtros.
 Fuente de Luz: Puede ser natural o artificial, cuando es natural
(solar) o procede de un foco luminoso situado fuera del
microscopio, un espejo recoge la luz del medio y la refleja a través
del objeto y del sistema de lentes. La luz artificial la constituye un
bombillo en el microscopio y conectado a un circuito eléctrico de
bajo voltaje.
 Diafragma: Está ubicado entre la fuente de luz y el condensador,
inmediatamente debajo de la platina, su función es regular la
intensidad de luz que atraviesa el objeto. El diafragma tiene una
palanquita que al moverla hacia adelante o hacia atrás agranda o
achica el orificio central, dejando pasar mayor o menor cantidad de
luz respectivamente.
 Condensador: Es un elemento cónico que posee un sistema de dos
lentes convergentes que recogen o concretan los rayos luminosos
para enviarlos al objetivo por el agujero de la platina. Existe un
tornillo manual que permite graduar la altura del condensador. Esta
graduación es importante cuando se trabaja con objetivos de gran
aumento (40x y 100x), debido a que en la medida que se trabaja
con estos objetivos el condensador debe subirse. Lo contrario
sucede cuando se trabaja con objetivos de menor aumento (4x y
10x).
 Filtros: Entre la fuente de luz y el condensador de algunos
microscopios existe un portafiltros en el cual se pueden colocar
filtros a voluntad del observador. Los filtros son elementos de
cuarzo o de vidrio, pueden ser de color azul, amarillo o verde. Ellos
interceptan el haz de rayos luminosos antes de entrar al
condensador, esto se hace con el objeto de seleccionar un tipo de
luz determinada para una experiencia dada.

Figura1: microscopio y sus partes


LA LUZ
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Informe de laboratorio,22 de febrero-diciembre de 2023.

La luz es una forma de energía transportada continuamente por el espacio a


velocidades muy elevadas (330.000 Km/s en el vacío). La luz está formada
por pequeños corpúsculos que salen de un foco luminoso en forma de
ondas. El brillo de la luz es proporcional a la altura o amplitud de la onda y
su color depende de la longitud de ésta. La luz blanca está constituida por
una gama de colores del espectro visible, estos colores son: rojo,
anaranjado, amarillo, verde, azul y violeta.
Cada color corresponde a una longitud de onda determinada, por
consiguiente, la luz blanca se compone de muchos rayos de luz, todos
vibrando con diferentes longitudes de onda.
La luz de una sola longitud de onda se llama monocromática. Si bien se
utilizan casi solo microscopios de luz blanca, la mayoría de las lentes
modernas están diseñadas para el uso de luz monocromática verde.

LENTES
Las lentes son el componente más importante del microscopio; se fabrican
de vidrio u otros materiales transparentes.
Pueden ser convexas o cóncavas en ambas superficies, planas en una cara o
tener cualquier combinación de éstas dos formas en su superficie.
Las lentes son de dos tipos: positivas y negativas.
 Lentes Positivas: Hacen converger los rayos de luz, es decir, los
concentra para formar una imagen real.
 Lentes Negativas: Hacen divergir los rayos de luz, sin formar
ninguna imagen real.

girar el revólver y poner el objetivo de menos aumento en posición de


trabajo, llevar el condensador a su parte más altas, con el tornillo micro
métrico hacer que el objetivo baje y llegue a su tope, enchufar el
microscopio a un fuente de energía, colocar la muestra en la platina y
centrar el objetivo, con el tornillo macrométrico vamos dándole nitidez a la
imagen a la medida que lo vamos girando si es necesario se mueve el carro
para buscar una mejor imagen de la muestra; Luego de realizar estos pasos
y analizar cada muestra en los diferentes aumentos de los objetivos se pudo
observar con más precisión y más cercanía la muestra usada, logrando
observar de más cerca el contenido de cada muestra.
Resultados
Muestra 1 agua estancada
Esta muestra se observó 3 veces en el microscopio con diferentes objetivos,
donde se evidenció que a medida que se cambian los objetivos unos puntos
que se podían ver mucho más cerca.
En 4x: se observaron claramente unos puntos dispersos.
En 10x: al observas más de cerca pudimos ver los residuos en el agua.
En 40x: al observar la muestra se evidenció un alga.
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Figura 1: muestra en 4x figura 2: muestra en 10x

Figura 3: muestra en 40x


Muestra 2 pata de hormiga
Se realizó el mismo proceso que la muestra anterior y se pudo evidenciar
que a medida que se rotaban los objetivos los bellos que tenia se podían ver
mucho mejor.
En 4x: se observó unos bellos en las patas
En 10x: se pudo observar mucho mejor la bellosidad y la estructura
En 40x: se observó la estructura que era algo similar a una huella.

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Figura 1: muestra en 4x figura 2: muestra en 10x

Figura 3: muestra en 40x


Muestra 3 polen(bonche)
Se logró evidenciar cómo a medida que se cambiaban los objetivos se podía
ver el polen y cómo está revestido por unas especies de punticas.
En 4x: se pudo observar unas bolitas de polen con el pistilo de una flor
En 10x: se observaron filamentos en las bolitas de polen
En 40x:se pudo observar mucho mejor los filamentos presentes en el polen.

Figura1: muestra en 4x figura2: muestra en 10x

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Figura 3: muestra en 40x


Muestra 4 hilo
Se evidenció a medida que se giraban los objetivos una tabulación.
En 4x:se observó la hebra de hilo mucho más cerca.
En 10x:se observó la estructura de la hebra.
En 40x: se observó la hebra de hilo como una especie de tubos
transparentes.

Figura1: muestra en 4x figura2: muestra en 10x

Figura 3: muestra en 40x

Discusión
Durante la realización de la práctica de laboratorio surgieron varios
inconvenientes puesto que al iniciar a ver las muestras fue un poco
complicado el manejo del microscopio, por lo que varios integrantes del
grupo intentaban acomodar el objetivo de tal forma que se lograra observar
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Informe de laboratorio,22 de febrero-diciembre de 2023.

con nitidez la imagen y que todos pudieran observar la muestra hasta que se
logró dominar el microscopio para usarlo correctamente.
Conclusiones
En este informe se logró identificar cada una de las partes del microscopio
y la función que desempeña cada una, así mismo el modo de uso de este en
el área de los laboratorios.
Agradecimientos
A Valeria Pérez, kenther Salas y Laura Arrieta por el uso correcto del
microscopio, a Laura Jiménez y Claudia Morales, por su apoyo en el
proceso de recolección de información. A cada integrante por su ayuda en
la limpieza de las muestras para la identificación.
Referencias
 https://www.mundomicroscopio.com/partes-del-microscopio/
 https://microscopioelectronico.com/partes-del-microscopio-optico/
 https://bct.facmed.unam.mx/wp-content/uploads/
2018/08/2_microscopia.pdf
 https://factoresymercadeo.com/wp-content/uploads/2020/10/
ACEITE-DE-CEDRO-MADERA-MICROSCOPIO-
INMERSION.pdf
 https://sites.google.com/site/coleccionguillermocrovetto/home/
accesorios-de-microscopia/espejos
 https://www.mundomicroscopio.com/preparacion-de-muestras/
 https://www.studocu.com/co/document/universidad-de-
cartagena/biologia/cuestionario-terminado/14305458
 https://www.scribd.com/doc/52686189/CUADRO-
COMPARATIVO-DE-MICROSCOPIOS#

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Revista de la Academia Colombiana de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Riqueza de insectos con dos métodos de recolección

CUESTIONARIO:
1. Coloque los nombres a las diferentes partes del microscopio
numeradas en la figura No. 1.6 e investigue las funciones de cada una
de ellas.
Ocular: Este es el elemento óptico que proporciona la segunda etapa de
ampliación de imagen. El ocular amplia la imagen que ha sido previamente
aumentada mediante el objetivo. En general, el aumento aportado por el
ocular es inferior al del objetivo. Es a través del ocular que el usuario
observa la muestra. En función del número de oculares se puede distinguir
entre microscopios monoculares, binoculares e incluso trinoculares. La
combinación de objetivo y ocular determina el aumento total del
microscopio.
Tubo: El tubo es una parte esencial de la estructura, ya que es la que
garantiza la alineación entre las partes ópticas. Esta parte del microscopio
enlaza el ocular con el objetivo.
Revólver: El revólver es la pieza donde se encuentran posicionados los
objetivos, permitiendo hacer un intercambio de aumento cómodamente
simplemente con girarlo. También lo puedes encontrar por el nombre de
portaobjetivos.
Brazo: El brazo es el elemento que une todas las demás piezas fijas, como
la base, la platina o el cabezal. Es una parte esencial para el correcto
funcionamiento de todas las partes, ya que se encarga de mantenerlas
perfectamente alineadas.
Platina: Esta es la parte del microscopio compuesto donde se sitúan las
muestras para analizar y en la que se encuentran las pinzas que sujetan el
portaobjetos. La platina tiene un agujero por donde atraviesa la luz que
ilumina la muestra, además es una pieza móvil que se regula mediante
tornillos.
Objetivo: El objetivo es el conjunto de lentes que se encuentran más cerca
de la muestra y que producen la primera etapa de aumento. El objetivo
suele tener una distancia focal muy corta. En los microscopios modernos
distintos objetivos están montados en el revólver. Este permite seleccionar
el objetivo adecuado para el aumento deseado. El aumento del objetivo
junto con su apertura numérica suele estar escrito en su parte lateral.
Pinzas: Las pinzas son las encargadas de sujetar el portaobjetos y mantener
fija la muestra para poder analizarla sin que ésta se mueva. Generalmente
son dos pinzas las que sujetan la muestra.
Condensador: El condensador es el elemento encargado de concentrar los
rayos de luz provenientes del foco a la muestra. En general, los rayos de luz
provenientes del foco son divergentes. El condensador consiste en un
seguido de lentes que cambian la dirección de estos rayos de modo que
pasen a ser paralelos o incluso convergentes.
Base o pie: Es la pieza que se encuentra en la parte inferior del microscopio
y sobre la cual se montan el resto de elementos. Acostumbra a ser la parte
más pesante para proporcionar suficiente equilibrio y estabilidad al
microscopio. Es habitual que incluya algunos topes de goma para evitar que

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el microscopio se deslice sobre la superficie donde se encuentra.
Tornillo macrométrico: Girando este tornillo se consigue mover la platina
para acercar la muestra hasta los objetivos mediante un movimiento rápido
vertical. Este tornillo macrométrico se utiliza para realizar un primer
acercamiento, necesitando utilizar el tornillo micrométrico para un ajuste
más preciso.
Tornillo micrométrico: El tornillo micrométrico es el encargado de
controlar el enfoque hacia la muestra con una precisión mayor. Este tornillo
permite realizar movimientos lentos y precisos para ajustar un enfoque
óptimo.
2. ¿Qué otros tipos de microscopios se utilizan en la investigación
biológica?
En la investigación biológica se han ido incorporando diversos tipos de
microscopios, entre ellos destacan el microscopio electrónico de
transmisión, microscopio electrónico de barrido, y, el microscopio
electrónico de barrido y transmisión, el cual combina características de los
anteriormente mencionados. Por otra parte, existen otros tipos de
microscopios, pero estos no se enfocan específicamente en la investigación
biológica. (Ojeda, 1997)
3. ¿Qué son objetivos secos?
Son objetivos secos aquellos que entre el objeto observado y el objetivo
solamente existe el aire.
4. ¿Qué son objetivos de inmersión?
se denominan objetivos de inmersión aquellos que requieren que entre la
preparación y la lente frontal del objetivo se coloque una sustancia líquida,
ésta puede ser agua, glicerina o un “aceite de inmersión”, natural como el
“aceite de cedro” o aceites artificiales.
5. ¿Para qué se utiliza el aceite de cedro cuando usamos el objetivo de
inmersión?
La función del aceite de inmersión es restringir el movimiento de la
muestra,
además de evitar el rozamiento entre el cubre objetos y el objetivo. Otra
función del aceite de inmersión es evitar que la luz se desvíe; al contrario,
lo que se pretende es que la luz llegue concentrada hacia la muestra
Cuando se utiliza un microscopio de espejo:
6. ¿Qué importancia tiene utilizar la parte cóncava del espejo?
Es fundamental ya que este permite acumular la luz, lograr mantener la
estabilidad de la misma y lograr una mejor resolución. Su forma cóncava es
la que permite que la luz artificial no pase sin control alguno.
¿Qué importancia tiene utilizar la parte plana del espejo?
Es adecuado cuando se trabaja con objetivos débiles y se va a emplear luz
natural.
8. Investigue sobre el funcionamiento de los diferentes microscopios
electrónicos y establezca diferencias entre ellos.

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9. Describa las principales técnicas de preparación de muestras


empleadas en microscopía óptica.
Existen dos formas básicas de preparar una muestra para el microscopio: la
preparación en fresco o húmeda y la preparación en seco.
Preparación en fresco
La preparación en fresco es ideal para la observación de microorganismos
o de tejidos biológicos que requieren ser hidratados.
 Si la muestra es líquida colocamos unas gotas de la muestra en el
centro del portaobjetos con la ayuda de una pipeta.
 Si la muestra es sólida colocamos primero unas gotas de agua
destilada o de solución salina sobre el portaobjetos y a continuación
un fragmento de la muestra con la ayuda de unas pinzas.
 Sujetando el cubreobjetos por dos de sus lados, apoyamos otro de
sus lados sobre el portaobjetos de modo que forme un ángulo de
aproximadamente 45 grados.
 A continuación podemos soltar con cuidado el cubreobjetos de
modo que quede colocado sobre el líquido que hemos depositado
anteriormente. (Mediante este procedimiento se evita la formación
de burbujas dentro de la muestra. En caso de que hayan aparecido
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burbujas entre el portaobjetos y el cubreobjetos será necesario
repetir el procedimiento anterior.)
 En caso de que haya un exceso de líquido alrededor del
cubreobjetos podemos eliminarlo mediante papel absorbente.
Las preparaciones en fresco mantienen la hidratación durante un
periodo de aproximadamente 30 minutos.
Si se requiere mantener la muestra hidratada durante un espacio de
tiempo más largo pueden sellarse los bordes del cubreobjetos con
vaselina. En este caso se evita la evaporación del líquido durante
unas horas o incluso unos días.
Preparación en seco
La preparación en seco es ideal para muestras que no necesitan
hidratación. Esto incluye, por ejemplo, un cabello, granos de polen,
esporas, muestras de plantas, insectos, etc.
 Si la muestra es totalmente opaca el primer paso consistirá en cortar
primero una sección muy fina de la muestra. Esto permitirá
observarla en el microscopio mediante luz transmitida.
 Colocamos la sección que hemos cortado en el centro del
portaobjetos con la ayuda de una pinzas. Si la muestra tiene un
cierto volumen es recomendable utilizar un portaobjetos con una
cavidad cóncava.
 Para mantener la muestra fija en su sitio la cubrimos con un
cubreobjetos. Esto evita también que el objetivo llegue a tocar la
muestra en caso de cometer algún error durante la manipulación del
microscopio.
La ventaja de las muestras en seco es que no tienen problemas de
deshidratación y pueden mantenerse preparadas para una
observación posterior.
Preparación con tinción
Existen distintas técnicas para aplicar una tinción que se adecuan a
los distintos tipos de muestras.
Si hemos preparado una muestra en fresco, podemos aplicar un
tinte siguiendo los siguientes pasos:
 Depositamos unas gotas del tinte sobre uno de los bordes del
cubreobjetos.
 Colocamos papel absorbente al lado opuesto del cubreobjetos para
forzar el movimiento del tinte a través de la muestra.
 Una vez la muestra ha absorbido el tinte retiramos el papel
absorbente.
Los tintes permiten aumentar el contraste y facilitar la observación
de algunos detalles concretos de la muestra. Existen tintes de
distintos colores y características adecuados para distintos tipos de
muestras.
10. ¿Qué son los colores complementarios y que utilidad tendrían
en microscopía óptica?

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Los colores complementarios son aquellos que proporcionan un mayor
contraste respecto a otro a color, usualmente se emplean el rojo-cian, verde-
magenta o azul-amarillo. Su utilidad radica en proporcionar “color” a
muestras aparentemente invisibles o transparentes. (Calvo & otros, 1986)

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