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El destino de los transgenes en el intestino humano

ArtículoenNature Biotechnology · Marzo 2004

DOI: 10.1038/nbt0204-170 · Fuente: PubMed

CITAS LEE
29 727

1 autor:

Juan herencia
Universidad de Leeds

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 NOTICIASYVISTAS
puerto). Presumiblemente, los filamentos de actina y las
proteínas motoras están involucradas en este transporte
retrógrado previamente no caracterizado, pero la
posibilidad de que los receptores se deslicen sobre la
superficie de los filopodios mientras escapan de la
endocitosis permanece abierta.
Además de demostrar la competencia de
señalización y la compatibilidad estérica de los QD
conjugados con un ligando natural, Lidkeet al.probar
directamente que erbB2, pero no erbB3, puede
modular el destino endocítico de los receptores
http://www.nature.com/naturebiotechnology
activados. Este hallazgo es relevante para los
intentos dirigidos al bloqueo farmacológico de los
cánceres que expresan erbB usando anticuerpos
monoclonales (p.ej, Herceptin/trastuzumab de
Genentech (S. San Francisco, CA, EE. UU.), o
inhibidores de la cinasa de bajo peso molecular (p.ej,
Iressa/gefitinib de Astra Zeneca (Londres).
El informe de Dahanet al.enCiencia demuestra otra
ventaja que ofrecen los QD. Su tamaño, más pequeño
que las perlas de látex, pero más grande que las
moléculas de tinte orgánico, permite la penetración en
estructuras densas como las sinapsis neuronales,
mientras que su fotoestabilidad permite el seguimiento
del receptor durante períodos prolongados. Por lo tanto,
al utilizar QD conjugados con anticuerpos específicos del
© 2004 Grupo editorial de la naturaleza
receptor de glicina, un importante receptor de
neurotransmisores inhibidores en la médula espinal,
estos autores pudieron rastrear el movimiento de los
receptores individuales durante más de 20 minutos,
mucho más allá del límite de pocos segundos de las
etiquetas fluorescentes.
Una propiedad de los QD que limita su uso en
análisis cuantitativos es la intermitencia aleatoria de
su emisión de fluorescencia (parpadeo). Sin
embargo, esta propiedad permitió a Dahan et al.para
detectar y rastrear QD individuales, y reportan una
relación señal-ruido significativamente mejor que la
obtenida con fluoróforos. Además de la población
casi inmóvil de receptores sinápticos y los receptores
extrasinápticos altamente móviles (coeficiente de
difusión de∼0.1µmetro2/s), el seguimiento QD único
define una tercera categoría de receptores
transitorios en la periferia de la sinapsis. Se cree que
los intercambios aleatorios y direccionales de los
receptores de glicina entre los tres subdominios de la
membrana, así como la endocitosis y la exocitosis de
los receptores, son la base de la plasticidad sináptica,
un proceso crucial para las funciones neurales.8.
Si bien es evidente que los QD han llegado a la
mayoría de edad, con un número cada vez mayor de
aplicaciones, también está claro que aún deben
abordarse varios problemas. La citotoxicidad sigue siendo
un impedimento. Debido a sus superficies polivalentes,
los QD inducen el entrecruzamiento de las proteínas de la
superficie, lo que puede interferir con los procesos
biológicos. Además, el parpadeo y los cambios de color
actualmente limitan las aplicaciones analíticas de los QD.
La conjugación exitosa de EGF a QD probablemente será
seguida por el etiquetado
170
QD con otras moléculas biológicas, así como medicamentos,
que requerirán una gama más amplia de núcleos y
recubrimientos QD. Sin embargo, la combinación de QD con
microscopía multifotónica, transferencia de energía de
resonancia de fluorescencia, metodologías de alto rendimiento
y dispositivos optoelectrónicos probablemente afectará los
campos de la obtención de imágenes de células vivas, así como
la obtención de imágenes del comportamiento animal, el
diagnóstico de enfermedades y la administración de fármacos.
Más específicamente, se pueden crear muchos colores QD
espectralmente estrechos para permitir el análisis simultáneo
de múltiples receptores. Por lo tanto, la dinámica del receptor
interactuará mejor con la biología molecular, y ambos
El destino de los transgenes en el
intestino humano
Juan herencia
Los microbios intestinales que no pueden recuperarse en cultivo artificial pueden adquirir y
albergar genes de plantas modificadas genéticamente.
¿Se puede transferir el ADN transgénico de un cultivo
genéticamente modificado (GM) a las personas o
animales que comen el cultivo o a su microflora
intestinal (Figura 1)? En este número, Netherwood et
al.1informan que los microbios que se encuentran en
el intestino delgado de personas con ileostomías (es
decir, resección del íleon terminal y desviación de la
digesta a una bolsa de colostomía) son capaces de
adquirir y albergar secuencias de ADN de plantas
GM. Este hallazgo plantea preguntas importantes
para los encargados de la evaluación de riesgos de
las plantas transgénicas destinadas al uso
alimentario.
Recientemente, se ha centrado mucha atención en
el potencial de los transgenes para escapar de las
plantas GM a sus parientes silvestres.2–4. Pero se ha
dedicado relativamente poco trabajo a la posibilidad
de transferencia de transgenes a los animales que
consumen la planta oa su microflora comensal. Aún
se ha investigado menos sobre el destino del ADN de
las plantas cuando los humanos se comen los
cultivos. Se ha argumentado que los transgenes son
lo mismo que cualquier otro ADN que consumimos y
que si la transferencia de genes de plantas a
humanos o animales fuera común, todos deberíamos
estar verdes ahora. Curiosamente, es el ADN del
cloroplasto el que se encuentra en los linfocitos.
John Heritage está en la División de Microbiología de la
Universidad de Leeds, Woodhouse Lane, Leeds LS2 9JT,
Reino Unido.
correo electrónico; j.heritage@leeds.ac.uk
VOLUMEN 22 NUMERO 2 FEBRERO 2004BIOTECNOLOGÍA DE LA NATURALEZA
facilitará un enfoque de biología de sistemas para los
estudios de transducción de señales.
1. Lidke, DSet al. Nat. Biotecnología.22, 198–203 (2004).
2. Dahan, M.et al. Ciencia302, 442–445 (2003).
3. Bruchez, M. Jr.et al. Ciencia281, 2013–2016 (1998).
4. Chan, WC y Nie, S.Ciencia281, 2016–2018 (1998).
5. Watson, A., Wu, X. y Bruchez, M.biotecnicas34, 296–
300, 302–293 (2003).
6. Akerman, Estados Unidoset al. proc. nacional Academia ciencia EE.UU99
, 12617–12621 (2002).
7. Yarden, Y. y Sliwkowski, MXNat. Rev Mol. Celúla. Biol.2
, 127–137 (2001).
8. Gomes, ARet al. neuroquímica Res.28, 1459–1473
(2003).
citos de animales que comen tanto material vegetal
modificado genéticamente como convencional5, y existe
evidencia de que las bacterias en la flora oral siguen siendo
competentes para la transformación genética cuando están
suspendidas en la saliva6.
En su GM Science Review de 2003, el gobierno
del Reino Unido concluyó que la transferencia
trans-reino de ADN de plantas GM a bacterias es
"poco probable que ocurra debido a una serie de
barreras bien establecidas".7y el apoyo ilustrado
para esta posición de la evidencia experimental
en la literatura revisada por pares. La revisión
también concluyó que el ADN transgénico no es
diferente de otro ADN consumido como parte de
la dieta y que tendrá un destino similar.
Nuevamente, estas conclusiones se basaron en
una revisión de la evidencia científica publicada,
que indica que el ADN ingerido está sujeto a
degradación pero que el proceso de degradación
no es necesariamente completo. Gran parte de
este trabajo se ha realizado utilizando estudios
con animales, y se sabe muy poco sobre el
proceso en humanos.
Netherwoodet al.han dado un paso
significativo para abordar la falta de estudios en
humanos. Estudiaron a 12 voluntarios sanos y
siete ileostomistas que recibieron una comida de
soya GM que contenía la 5-enol-piruvil
shikimato-3-fosfato sintasa (epsps) transgén, que
codifica la resistencia al herbicida glifosato. En los
sujetos sanos, el ADN del material vegetal
transgénico se degradó por completo después de
pasar por el colon.

Célula vegetal
http://www.nature.com/naturebiotechnology
Figura 1Una posible ruta para la transferencia de ADN de células vegetales en la dieta humana a bacterias. Parte del ADN de los alimentos se degrada durante la cocción y el procesamiento, pero
el resto se ingiere intacto. El ADN consumido se hidroliza en gran medida durante la digestión. Netherwoodet al.proporcionar evidencia de que el ADN transgénico intacto puede recuperarse en
el íleon humano y ser absorbido por bacterias en este entorno.
© 2004 Grupo editorial de la naturaleza
Curiosamente, sin embargo, las secuencias de
ADN transgénico se recuperaron mediante PCR a
partir de la digestión de los siete ileostomistas. En
seis de estos sujetos, se detectó un producto de PCR
que abarcaba todo el gen. En un caso, se estimó que
casi el 4 % del ADN transgénico en la comida de
prueba se recuperó del líquido de la ileostomía. Por
lo tanto, fragmentos bastante grandes de ADN
pueden sobrevivir al paso por el estómago, si se
muestran solo en personas con una patología
gastrointestinal.
Claramente, los ileostomistas pueden no ser
representativos de la población general, ya que han
sufrido una enfermedad que requiere cirugía radical.
No obstante, han sido validados previamente como
un modelo fiel para estudiar otros aspectos de la
digestión. Se necesitará más investigación para
determinar la relevancia de los nuevos resultados
para la población en general.
Quizás un hallazgo más significativo y
desconcertante de este trabajo es la evidencia de que
el ADN transgénico había cruzado las barreras del
reino desde una fuente vegetal GM hasta la
microflora intestinal, incluso antes de la participación
de los sujetos en el estudio. Las secuencias
transgénicas no se detectaron en las muestras
originales de líquido de ileostomía tomadas antes del
consumo de la harina de soja transgénica, pero se
pudieron detectar en un número de copias muy bajo
una vez que las bacterias en estas mismas muestras
se enriquecieron mediante pases en serie en caldo
Luria.
BIOTECNOLOGÍA DE LA NATURALEZAVOLUMEN 22 NUMERO 2 FEBRERO 2004
harina de soja tripa humana
Se tuvo mucho cuidado para evitar la
contaminación de la muestra; aunque no se puede
descartar la contaminación, el patrón de resultados
hace que esta explicación sea poco probable. Elepsps
El gen utilizado en la soja transgénica tiene un origen
bacteriano, pero la secuencia fue modificada para
optimizar su expresión en las plantas. El análisis de
secuencia de los productos de PCR reveló que el
objetivo amplificado a partir de digesta cultivada era
idéntico al de la planta.epspsgen en lugar de su
homólogo bacteriano.
Los experimentos microbiológicos, incluido el
cultivo diferencial, proporcionaron buenas
pruebas de que, con toda probabilidad, la
bacteria que alberga el transgénicoepspsLa
secuencia es indiferente a la presencia de
oxígeno en el medio de cultivo y depende para su
nutrición de otro organismo presente en la
muestra y subcultivos líquidos posteriores. ¿Es
probable que una bacteria que no se puede aislar
en cultivo puro sea capaz de adquirir ADN
transgénico y albergarlo a través de varios pases
en cultivo líquido, aunque con muy baja
frecuencia? Debe recordarse que las técnicas de
cultivo convencionales no pueden recuperar más
que una pequeña minoría de los microbios en el
tracto gastrointestinal. Apenas estamos
comenzando a aprender cómo caracterizar tales
organismos.
Netherwoodet al.podría haber hecho más
para caracterizar la supuesta transferencia
trans-reino. No reportan intentos de ver
NOTICIASYVISTAS
Bacteria
?
R. Henretta
si el ADN transgénico presente en la digestión
cultivada, y presumiblemente encontrado en
la bacteria que no crecerá en cultivo puro en
un medio sólido, se estaba expresando
aunque no se amplificaron genes de longitud
completa de estas muestras. Esto podría
haberse logrado con relativa facilidad usando
RT -PCR.
Tampoco hay descripción de las secuencias que
flanquean elepspsgen, por lo que es imposible
determinar el contexto en el que se encuentra la diana de
PCR en estos cultivos. No obstante, en general, los datos
presentados en el documento respaldan la conclusión de
que sí se produce un flujo de genes desde las plantas
transgénicas hacia la microflora intestinal. Además,
debido a que los eventos de transferencia parecen haber
ocurrido en tres de los siete sujetos examinados, puede
ser que las transferencias de genes entre reinos no sean
tan raras como sugiere el Panel de Revisión de Ciencias
de GM del Reino Unido.7. Esta observación es
significativa, y es imperativo que los eventos de
transferencia se caractericen más completamente,
particularmente con miras a comprender la estabilidad en
la digesta ileal cultivada de transgenes de plantas y genes
nativos, el contexto en el que se encuentran estos genes
y su capacidad para ser expresado.
Si los hallazgos de Netherwoodet al. influir en la
evaluación de riesgos de los cultivos transgénicos? Creo
que los autores toman exactamente la posición correcta
aquí. Proponen que los eventos de transferencia de
genes de las plantas transgénicas al intestino
171
 NOTICIASYVISTAS
microflora para la que proporcionan evidencia es
muy poco probable que altere la función
gastrointestinal o ponga en peligro la salud humana.
Sin embargo, concluiría que, si bien esto puede ser
cierto para la construcción examinada por el grupo
de Gilbert, puede no serlo en otros casos, como los
genes que codifican la resistencia a los antibióticos
utilizados en la medicina humana.
Netherwoodet al.pedir a los evaluadores de
riesgos que consideren la posibilidad de un flujo de
genes trans-reino en la futura evaluación de
http://www.nature.com/naturebiotechnology
seguridad de los alimentos GM1. Apoyo esa
conclusión y la extendería agregando que cada caso
debe ser considerado por sus propios méritos.
La detección sin etiquetas se
vuelve nítida
Pablo S Cremer
Las plataformas de cristal líquido ofrecen una detección rápida, sencilla y económica de
analitos entrantes en imitadores de biomembranas bidimensionales de fluidos.
© 2004 Grupo editorial de la naturaleza
La unión de ligandos a receptores unidos a la
membrana celular juega un papel fundamental en
una amplia gama de campos, desde la señalización
celular y el tráfico de linfocitos hasta las respuestas
inmunitarias e inflamatorias.1–2. Por ejemplo, el paso
inicial en el ataque de un patógeno a un huésped
humano generalmente implica la unión y el
reordenamiento de los restos de la superficie celular
por el virus entrante o la toxina proteica. Además,
generalmente se estima que la mitad de los
medicamentos recetados se dirigen a los receptores
unidos a la membrana.3. Solo un puñado de técnicas
ampliamente aplicadas están disponibles para
monitorear la unión del ligando al receptor. La
mayoría de ellos requieren que se adjunte una
etiqueta al analito entrante o involucran métodos
complejos de patrones ópticos y de superficie para la
lectura. Esto ha motivado la búsqueda de ensayos sin
etiquetas para detectar rápidamente las
interacciones proteína-membrana sin necesidad de
elementos ópticos especiales, control de
temperatura o superficies metálicas de película
delgada. Como un paso hacia esta meta, Brake et al.4
informe enCienciael uso de un cristal líquido
termotrópico, 4 -pentil-4-cianobifenilo, como soporte
sensible para monocapas de fosfolípidos.
Paul S. Cremer está en el Departamento de
Química, Texas A&M University, PO Box
30012, 3255 TAMU, College Station, Texas
77843, EE. UU.
correo electrónico: cremer@mail.chem.tamu.edu
172
Ver estadísticas de publicación
1. Netherwood T,et al. Nat. Biotecnología.22, 204–209 como monitores continuos de agentes de guerra
(2004).
biológica. La ventaja de estos sistemas radica en que
2. Wilkinson, MJet al. Ciencia302, 457–459 (2003).
3. Anónimo.Fil. Trans. R. Soc. Largo B358, 1775-1913 mantienen muchas de las propiedades de las
(2003). membranas celulares naturales sin las
4. Andow, DANat. Biotecnología.21, 1453–1454 (2003).
complicaciones que surgen del uso de ensayos de
5. Einspanier, R.et al. EUR. Alimentos Res. Tecnología212, células enteras. Una de las propiedades más
129–134 (2001).
importantes que las bicapas y monocapas de
6. Mercer, DK, Scott, KP, Bruce-Johnson, WA, Glover, LA y Flint,
HJaplicación Reinar. Microbiol.sesenta y cinco, 6–10 fosfolípidos comparten con las células enteras es su
(1999). fluidez bidimensional. Las moléculas lipídicas
7. Panel de Revisión Científica de GM del Reino Unido.Revisión
individuales pueden difundirse libremente por la
científica de GM. Primer Informe. Una revisión abierta de la
ciencia relevante para los cultivos y alimentos GM basada en superficie y los ligandos unidos a la membrana
los intereses y preocupaciones del público(Gobierno del Reino pueden reorganizarse en presencia de un analito
Unido, Londres, 2003). Disponible en línea (http://
www.gmsciencedebate.org.uk/report/pdf/gmsci-report1-
proteico, viral o bacteriano que contiene múltiples
full.pdf). Último acceso 22 de diciembre de 2003. sitios de unión. De hecho, tal unión multivalente de
ligandos-receptores es un motivo dominante de las
interacciones proteína-membrana celular.6–8.
Frenoet al.han combinado tales monocapas de
fosfolípidos con un cristal líquido termotrópico para
crear un dispositivo que puede detectar rápidamente
los analitos entrantes. Su cristal líquido pertenece a
la misma clase de moléculas que se encuentran en
relojes digitales y pantallas de cristal líquido. El
dispositivo sensor de cristal líquido transmite
directamente información sobre la unión de
proteínas desde la película delgada de fosfolípidos al
mundo exterior. El método funciona reorientando las
moléculas de cristal líquido debajo de la porción de la
monocapa en la que se unen las proteínas (verFigura
Las monocapas y bicapas de fosfolípidos se están 1).
volviendo omnipresentes para modelar los complejos en su informe,los autores demuestran que los ensayos
mecanismos biofísicos de las interacciones entre basados en cristales líquidos se pueden utilizar
proteínas y membranas celulares.5. Tienen un potencial fácilmente para detectar interacciones ligando-receptor.
significativo para su uso como dispositivos sensores para Por ejemplo, la unión de la fosfolipasa A2
detectar patógenos en entornos clínicos o incluso (EPL2) a las membranas de fosfolípidos se siguió
a Luz desde arriba b Luz desde arriba
Polar Polar
-
Polar Polar
erin boyle
Figura 1Interacciones moleculares en una superficie recubierta de fosfolípidos en un cristal líquido.(a) Las proteínas se
acercan a una superficie que contiene un reservorio de cristal líquido termotrópico recubierto con una monocapa lipídica. (b)
La membrana contiene ligandos específicos (mostrados en rojo) que se unen específicamente a la proteína entrante (azul).
Esto hace que las moléculas de cristal líquido debajo de las proteínas unidas se realineen. La luz enviada a través de los polos
cruzados pasa a través de la región donde tuvo lugar el realineamiento, mientras que las áreas que contienen las especies
alineadas verticalmente permanecen oscuras.
VOLUMEN 22 NUMERO 2 FEBRERO 2004BIOTECNOLOGÍA DE LA NATURALEZA