Método de Bradford: Determinación de proteína

El método de Bradford se basa en la unión de colorantes; debido a que, en condiciones adecuadas, los grupos ác
proteínas pueden interaccionar con grupos orgánicos de determinados colorantes para dar lugar a precipitados
Este método es muy rápido y sensible y se puede trabajar en un rango de 20 a 140 microgramos de proteína par
a 50 microgramos para el microensayo. Se trabajó con un ensayo estándar, y se prepararon 11 diluciones distinta
cuales se procedió a pasar al espectrofotómetro a una longitud de onda de 595nm, por duplicado.
a) Determinar la ecuación de la recta
b) Trazar el grafico de los datos experimentales
c) Una muestra problema de proteína dio una absorbancia de 0.543. Calcular el número de µg de proteína en el

Concentración Y1
µg/mL (x) ABS (y-ycal) (y-ycal)2
0 0 -0.0397 0.00157609
25 0.112 0.0223 0.00049729
50 0.148 0.0083 0.00006889
75 0.18 -0.0097 9.409E-05
100 0.248 0.0083 6.889E-05
125 0.294 0.0043 1.849E-05
150 0.344 0.0043 1.849E-05
175 0.353 -0.0367 0.00134689
200 0.463 0.0233 0.00054289
225 0.465 -0.0247 0.00061009
250 0.514 -0.0257 0.00066049
Srecta 0.024809429

Concentración y2 Mprob Y1
µg/mL (x) ABS (y-ycal) (y-ycal)2 ABS Cµg/mL
0 0 -0.025 0.000625 0.543 251.65
25 0.035 -0.0325 0.00105625 0.25 105.15
50 0.114 0.004 1.6E-05 0.125 42.65
75 0.167 0.0145 0.00021025
100 0.177 -0.018 0.000324
125 0.242 0.0045 0.00002025
150 0.433 0.153 0.023409
175 0.342 0.0195 0.00038025
200 0.344 -0.021 0.000441
225 0.385 -0.0225 0.00050625
250 0.411 -0.039 0.001521
Srecta 0.056282275
adecuadas, los grupos ácidos o básicos de las
dar lugar a precipitados con un color característico.
ogramos de proteína para el ensayo estándar y de 1
ron 11 diluciones distintas de albúmina de huevo, las
duplicado.

de µg de proteína en el problema.

Y1
0.6

0.5 f(x) = 0.00195236363636364 x + 0.0396818181818181

R² = 0.981445753515698
f(x) = 0.00172763636363636 x + 0.0249545454545455
0.4 R² = 0.878692106642043 y1
Linear (y1)
0.3
ABS

Linear (y1)
y2
0.2
Linear (y2)
0.1

0
0 50 100 150 200 250 300
Concentración (µg/mL )

estimacion lineal
m,b 0.001952364 0.039681818
(Sm,Sb) 8.94804E-05 0.013234331
r2 0.981445754 0.023461961
F 476.0641608 9
SC 0.262056009 0.004954173

SUMMARY OUTPUT Sy 0.023461961

m 0.002
Regression Statistics M 1 Sc 13.5560301
Multiple R 0.99067944 N 11
R Square 0.981445754 Yc 0.543
Adjusted R S 0.979384171 Ybarra 0.283727273
Standard Erro0.023461961 SCx 68750
Observations 11
ANOVA
df SS MS F Significance F
Regression 1 0.262056009 0.262056009 476.0641608 4.208211E-09
Residual 9 0.004954173 0.000550464
Total 10 0.267010182

Coefficients Standard Error t Stat P-value Lower 95% Upper 95% Lower 95.0%
Intercept 0.039681818 0.013234331 2.998399977 0.01499522 0.0097436812 0.06961996 0.00974368
X Variable 1 0.001952364 8.94804E-05 21.81889458 4.20821E-09 0.0017499449 0.00215478 0.00174994

RESIDUAL OUTPUT PROBABILITY OUTPUT

Observation Predicted Y ResidualsStandard Residuals Percentile Y

1 0.039681818 -0.03968182 -1.78281382 4.5454545455 0
2 0.088490909 0.023509091 1.056209972 13.636363636 0.112
3 0.1373 0.0107 0.480726658 22.727272727 0.148
4 0.186109091 -0.00610909 -0.27446756 31.818181818 0.18
5 0.234918182 0.013081818 0.58773633 40.909090909 0.248
6 0.283727273 0.010272727 0.461530266 50 0.294
7 0.332536364 0.011463636 0.515035102 59.090909091 0.344
8 0.381345455 -0.02834545 -1.27349679 68.181818182 0.353
9 0.430154545 0.032845455 1.47567155 77.272727273 0.463
10 0.478963636 -0.01396364 -0.62735441 86.363636364 0.465
11 0.527772727 -0.01377273 -0.6187773 95.454545455 0.514
 X Variable 1 Residual Plot
0.04
0.02 X Variable 1 Line Fit Plot
Residuals

0 0.6
-0.02 0 50 100 150 Normal
200 Probability
250 300 Plot
0.4
-0.04 0.6 Y
0.2 Predicted Y
Y

-0.06
0.4
0 X Variable 1
500.2
Y

0 100 150 200 250 300

0 X Variable 1
0 20 40 60 80 100 120
Sample Percentile
Upper 95.0%
0.06961996
0.00215478
ty Plot
Y
Predicted Y

80 100 120
tile
El Ácido 3,5-dinitrosalisílico (DNS), es un agente oxidante para un azúcar reductor. Éste compuesto es utilizado p
reacción que se genera entre el DNS y el azúcar reductor es de tipo redox, ya que el DNS se reduce en presencia
oxidado. Provocando un cambio de color en la muestra donde la concentración y el color de la muestra son prop
a) Determinar la ecuación de la recta
b) Trazar el grafico de los datos experimentales
c) Una muestra problema de azúcar dio una absorbancia de 0.540. Calcular el número de µg/mL de azúcar en el

1.2
Concentración
µg/mL ABS ABS 1
f(x) = 1.188
0 0 0 R² = 0.9900
0.8
0.1 0.016 0.024
0.2 0.083 0.115 f(x) = 0.8282

Axis Title
0.6 R² = 0.91570
0.3 0.205 0.259
0.217 0.4
0.5 0.519 0.536
0.6 0.399 0.617 0.2
0.7 0.459 0.79
0.8 0.544 0.908 0
0.9 0.809 0.983 0 0.1 0.2

ABS CoNCENTRACIÖN Yprom 0.470222222

0.54 0.51430013 Yconc 0.54
m 1.1952
M 1
N 10
Sy 0.051944668
SCx 0.822222222
DESV. EST. CONCEN
1.102802479
1.050144028
0.043461067
Sc 0.04564038
 te compuesto es utilizado para la cuantificación de azúcares reductores en una muestra problema. La
DNS se reduce en presencia del grupo reductor de la glucosa (aldehído) formando un grupo carboxilo
color de la muestra son proporcionales.

o de µg/mL de azúcar en el problema.

1.2

1
f(x) = 1.18883783783784 x − 0.0713594594594595
R² = 0.990062720197874
0.8

f(x) = 0.828297297297297 x − 0.0402243243243243

Axis Title

0.6 R² = 0.915706695914779 Y1
Linear (Y1)
0.4 y2
Linear (y2)

0.2

0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1
Axis Title

SUMMARY OUTPUT

Regression Statistics
Multiple R 0.990965968
R Square 0.982013549
Adjusted R Square 0.979765242
Standard Error 0.051944668
Observations 10

ANOVA
df SS MS F Significance F
Regression 1 1.178538912 1.178538912 436.7792361 2.882629E-08
Residual 8 0.021585988 0.002698248
Total 9 1.2001249

Coefficients Standard Error t Stat P-value Lower 95% Upper 95%

Intercept -0.08474545 0.030530676 -2.77574769 0.024082076 -0.155149321 -0.01434159
X Variable 1 1.195212121 0.057189197 20.89926401 2.88263E-08 1.063333597 1.32709065
Lower 95.0% Upper 95.0%
-0.15514932 -0.01434159
1.0633336 1.32709065
 La determinación de metales pesados puede llevarse a cabo polarográficamente p
reducción con un electrodo de gotas de mercurio. Para determinar cadmio en una
41 mA, operando en determinadas condiciones. Obtener la concentración de cad
El calibrado se obtuvo operando en las mismas condiciones sobre muestras de ca
valores:

100
Cd^2+, (M) I, mA
90
0.0001 9 80
f(x) = 86647.398843
R² = 0.99586820507
0.0002 20 70
0.0003 29 60
0.0004 39 50

mA
0.0005 48 40
0.0006 56 30

0.0008 73 20

0.0010 87 10

0
0.0000 0.0002
mA Concentración (M)
41 0.0004399 Xmuestra

SUMMARY OUTPUT
Ycon 41
Yprom 45.125 Regression Statistics
m 86647 Multiple R 0.99793196
M 1 R Square 0.99586821
N 8 Adjusted R Squar 0.99517957
Sy 1.835215359095 Standard Error 1.83521536
SCx 0.00000064875 Observations 8
suma fraccio 1.125
frac de y 1.47034150041E-15 ANOVA
raiz 1.06066017177982 df SS
Sc 2.24651729204E-05 Regression 1 4870.66691
Residual 6 20.2080925
Total 7 4890.875

CoefficientsStandard Error
Intercept 2.88439306 1.28639234
X Variable 1 86647.3988 2278.49642
 o polarográficamente por medida de la intensidad de corriente originada en su
erminar cadmio en una muestra de aguas residuales se obtuvo una corriente de
a concentración de cadmio en la muestra problema.
s sobre muestras de cadmio de concentración conocida, obteniendo los siguientes

100

90
f(x) = 86647.3988439306 x + 2.88439306358383
80 R² = 0.995868205078734

70

60

50

40

30

20

10

0
0.0000 0.0002 0.0004 0.0006 0.0008 0.0010 0.0012
Concentración (M)

MS F Significance F
4870.66691 1446.15339 2.2077E-08
3.36801541

t Stat P-value Lower 95% Upper 95% Lower 95.0% Upper 95.0%
2.24223432 0.06614355 -0.26329561 6.03208173 -0.26329561 6.03208173
38.0283235 2.2077E-08 81072.119 92222.6787 81072.119 92222.6787
en su
nte de

guientes