INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL CIENCIAS BIOLOGICAS

LABORATORIO DE BIOQUIMICA

PRACTICA No. 13 Aislamiento de DNA Plasmidico

Guarneros Hernndez Jorge Luis, 4QM1, Seccin IV

cidos nucleicos: Son compuestos orgnicos de elevado

peso molecular, formados por carbono, hidrgeno,
oxgeno, nitrgeno y fsforo. Cumplen la importante
funcin de sintetizar las protenas especficas de las
clulas y de almacenar, duplicar y transmitir los
caracteres hereditarios. Los cidos nucleicos,
representados por el ADN (cido desoxirribonucleico) y
por el ARN (cido ribonucleico), son macromolculas
formadas por la unin de molculas ms pequeas
llamadas nucletidos.
NUCLETIDOS
Son molculas compuestas por grupos fosfato, un
monosacrido de cinco carbonos (pentosa) y una base
nitrogenada. Adems de constituir los cidos nucleicos
forman parte de coenzimas y de molculas que
contienen energa. Los nucletidos tienen importantes
funciones, entre ellas el transporte de tomos en la
cadena respiratoria mitocondrial, intervenir en el
proceso de fotosntesis, transporte de energa
principalmente en forma de adenosina trifosfato (ATP) y
transmisin de los caracteres hereditarios. Presentes en
el DNA.
NUCLESIDOS
Es la unin de una pentosa con una base nitrogenada, a
travs del carbono 1 del monosacrido con un nitrgeno
de la base. Al establecerse la unin qumica se desprende
una molcula de agua.
Los nuclesidos se identifican de acuerdo a la base
nitrogenada de la cual provienen. Si derivan de bases
purnicas llevan el sufijo osina. Si lo hacen de bases
pirimidnicas se agrega la terminacin idina. Adems, si
el nuclesido est unido a la desoxirribosa se le agrega el
prefijo desoxi. Estas estn presentes en el RNA difiere
con el DNA en una base pirimidica que es el uracilo
OBJETIVOS:
Aislar DNA plasmidico bacteriano, comprobando dicho
aislamiento por medio de una electroforesis

RESULTADOS:

Espectro de absorcion de DNA

Absorbancia

INTRODUCCION:

0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
200

220

240

260

280

300

Longitud de onda (nm)

Figura 1 grafica del espectro de absorcin de DNA

purificado.

Calculo de DNA obtenido

=

260
0.626
1
. =
( )
22500
22500 20

=1.4x10-6 g/mL
Por el mtodo del nomograma la concentracin es
2.0x10-5 g/mL.

DISCUSIN:
Se hizo una dilucin de DNA puro como patrn para
obtener el espectro UV con el fin de ver como es la
absorcin de luz ultravioleta en dicho polmero,
desacuerdo las bases que lo componen. Adems se
determin la concentracin de DNA por dos mtodos
que es usando un Nomograma y por medio de un siendo
mayor la calculada por el nomograma y esto es porque
no es una prueba tan exacta ya que es a base de tablas
donde en el que se pueden dar errores de medicin.

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PRACTICA No. 13 Aislamiento de DNA Plasmidico

Resultados de la Cromatografa

CONCLUSION

Figura 2. Cromatograma obtenido en la prctica.

Muestra
Adenina
Citosina
Guanina
Uracilo
Timina
RNA

RF
0.4375
0.3544
0.3717
0.5696
0.6282
0.3205 Citosina
0.4102 Guanina
0.4871 Adenina
0.5769 Uracilo
DNA
0.3376 Citosina
0.3896 Guanina
0.4805 Adenina
0.6233 Timina
Tabla de RF calculados a partir del cromatograma
obtenido.
De acurdo a los resultados los el RNA y DNA contiene
bases nitrogenadas y de acuerdo a los RF comprobamos
que el DNA contiene las bases nitrogenadas, GUANINA,
ADENINA, TIMINA, Y CITOSINA. Mientras que el RNA
contiene las bases nitrogenadas: GUANINA, ADENINA,
CITOSINA Y URACILO. Difiriendo del DNA por la base
pirimidica TIMINA.
.

Se comprob las bases nitrogenadas que estn

presentes en DNA y RNA por medio de un
cromatograma
Se obtuvo un espectro de DNA en un intervalo
de longitud de onda de 200 a 300 nanmetros
que corresponde a los Rayos Ultravioleta.
Se vieron diferentes formas de calcular la
concentracin de DNA.
Se conocieron los paso para realizar una
hidrlisis de DNA y RNA

BIBLIOGRAFIA:
1. http://www.terradaily.com/reports/Building_Life_On
_Earth_999.htmlDato del descubrimiento del ADN
en terradaily.com
2. Volver arriba Dahm R (2008). Discovering DNA:
Friedrich Miescher and the early years of nucleic
acid research. Hum Genet 122 (2): 565
581. PMID 17901982.
3. Volver arriba Levene P, (1919). The structure of
yeast nucleic acid. J Biol Chem 40 (2): 415424.