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Unidad I
Introducción a la microbiología.
Práctica 1
Docente:
El ambiente de trabajo en un laboratorio debe ser distendido, donde haya una colaboración de
todos en la solución de los problemas. Dependiendo de la cantidad de muestras, el trabajo en
determinados momentos es intensivo y puede resultar incluso agobiante. En esos momentos es
cuando más se agradece el hecho de que todos cooperen en la superación de las dificultades.2
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.Equipo
MICROSCOPIO
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Uso del microscopio
INCUBADORA
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❖ El calor puede afectar su funcionamiento por lo que se debe evitar colocar cerca de
radiadores a vapor, cocinas, hornos, autoclaves, etc. Evitar el sol directo, las corrientes
de aire repentinas, ductos de calefacción y enfriamiento y zonas de alto tráfico.
❖ Para asegurar la circulación del aire alrededor de la unidad, se debe dejar un espacio de
por lo menos 20 cm entre la parte posterior y los laterales de la incubadora y cualquier
tipo de pared o particiones que obstruyan la libre circulación del aire. 3. La incubadora
debe permanecer nivelada y bien colocada.
❖ La limpieza se debe realizar con un desinfectante adecuado para el uso que la
incubadora tenga, no se deben utilizar abrasivos, ni limpiadores en aerosol que podrían
filtrarse en las pequeñas aberturas o grietas y alcanzar componentes eléctricos. Se debe
realizar periódicamente (máximo cada mes).
❖ La incubadora controla la temperatura mediante la convección del aire interno por lo
que el material a ser incubado debe distribuirse uniformemente y espaciado y no debe
ocupar más de ¾ del volumen de la cámara para que el aire pueda circular libremente
entre el material y por toda la cámara.
BAÑO MARIA
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Requerimientos para la instalación y el uso:
Mantenimiento
Los termobaños son equipos que no son muy exigentes desde el punto de vista de
mantenimiento. Las rutinas recomendadas están principalmente enfocadas a la limpieza de los
componentes externos.
1. Apagar y desconectar el equipo. Esperar a que el mismo se enfríe para evitar riesgos de
quemaduras accidentales.
2. Extraer el fluido utilizado para el calentamiento. Si es agua, puede verterse a un sifón.
Si es aceite, recolectar en un recipiente con capacidad adecuada.
3. Limpiar el interior del tanque con un detergente suave. Si se presentan indicios de
corrosión, existen en el mercado sustancias para limpiar el acero inoxidable. Frotar
suavemente con esponjas sintéticas o equivalentes. Evitar la utilización de lana de
acero para remover manchas de óxido, debido a que las mismas dejan partículas de
acero que podrían acelerar la corrosión.
4. Limpiar con agua limpia el exterior y el interior del termobaño.
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REFRIGERADOR
Tipos
Funcionamiento
Los refrigeradores funcionan haciendo que el refrigerante que circula por su interior pase de
estado líquido a gaseoso. Este proceso, conocido como «evaporación», enfría el área
circundante y produce el efecto deseado.
Mantenimiento
Como cualquier equipo eléctrico, es importante verificar que la fuente de alimentación cumpla
con las necesidades de voltaje del equipo.
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Limpiar el interior mínimo cada 3 meses, evitando así la contaminación de las sustancias que
se coloquen en su interior. Para hacerlo, se desconecta su cable de alimentación, se retiran los
estantes para limpiar por separado; tanto el interior como los estantes se suelen lavar con
sustancias detergentes suaves que no corroan el material.
Revisar el empaque de la puerta: éste siempre debe de estar en buen estado, ya que permite el
cierre hermético, preservando la temperatura en su interior.
CONGELADOR
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En específico, el cuenta colonias tipo Quebec, permite la
visualización de colonias bacterianas en un fondo oscuro, ya sea con
o sin sistema de iluminación, uniforme y brillante.
Funcionamiento
AUTOCLAVE
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JARRA DE ANAEROBIOSIS GASPAK
FLUJO LAMINAR
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LIOFILIZADORA
FERMENTADOR
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● Entrada de ácido y base para el control de pH.
● Entrada de gases estériles. Estos gases pueden ser aire, O2, CO2, N2, entre otros.
● Entrada aséptica para el inóculo, el medio o nutrientes concretos.
● Filtro de ventilación. Suele ser una membrana hidrofóbica de 0.2µm que permite evitar
la contaminación externa y la emisión de células al medio ambiente.
● Agitador. Hay mucha variabilidad del tipo y el número de palas según las condiciones
del cultivo.
● Sondas para análisis de parámetros (concentración O2, pH…).
● Entrada aséptica para muestreo y análisis de parámetros.
FILTRO MILLIPORE
Cada tipo tiene un tamaño de poro específico, lo que evita que las
partículas de cierto tamaño atraviesen el filtro. El tamaño de los
poros varía desde 0.2 micrómetros (µm) hasta 12 µm. Un
tamaño de poro de 0.45 µm atrapa las bacterias y los tamaños
de poro más pequeños se utilizan para las muestras químicas. Los tamaños de poro más
grandes son adecuados para los pasos de fabricación que no necesitan eliminar los microbios
del líquido. Analistas de laboratorio de microbiología generalmente usan un filtro Millipore en
forma de membrana delgada en las pruebas de muestras. Estas membranas delgadas
generalmente son estériles y solo se usan una vez. Se colocan en equipos especializados, como
embudos de filtración, se retiran cuando se extrae toda el agua y se prueban.
Otro uso de un filtro Millipore es en forma de cápsula o cartucho. Esta es una carcasa que
tiene una membrana en su interior. Es posible que el filtro no sea estéril, pero puede ser lo
suficientemente resistente para sobrevivir a un proceso de esterilización en un autoclave si es
necesario.
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Pueden usarse para reducir la contaminación de un líquido o para esterilizar el líquido y son
una parte importante de la filtración de materias primas y productos en el proceso de
fabricación.
Material
ASAS BACTERIOLÓGICAS
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CAJAS DE PETRI
Uso: El uso más común de estos instrumentos es el de ser contenedores para el cultivo de
células, bacterias, mohos y otros tipos de microorganismos.
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MECHERO FISHER
El mechero de Fisher está conformado por un tubo vertical que tiene una
base donde conecta con la entrada de gas y sirve además de soporte.
Posee dos maneras de regular el fuego, a través de una llave que permite
el paso del gas y mediante orificios en el tubo, que proporcionan la
entrada del oxígeno, con un anillo móvil para controlar el paso de este.
Modo de empleo
Precauciones
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➢ Utilizar el mechero Bunsen en una zona de trabajo ventilada.
➢ Durante el calentamiento de tubos de ensayo, usar pinzas de madera por la parte
superior.
➢ Nunca modificar ninguna pieza como orificios, pasos, etc.
FRASCOS DE DILUCIÓN
Cuando no se usa el frasco reactivo, se debe deslizar el papel entre el tapón de la botella y la
boca de la botella para evitar la adhesión, ninguna de las botellas de reactivo se puede usar
para calentar.
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De acuerdo con las propiedades físicas y químicas de los reactivos necesarios, las botellas se
deben elegir:
➢ Si el reactivo tiene componentes que son fácil de descomponer a la luz elegir una
botella marrón
➢ Si el reactivo es volátil con bajo punto de ebullición se elige un frasco de vidrio
esmerilado
➢ Si es un reactivo alcalino utilizar un frasco con un tampon de goma
➢ Si el reactivo tiene los múltiples índices físicos y químicos anteriores se puede
seleccionar la botella de reactivo apropiada de acuerdo con los principios anteriores.
➢ Algunos reactivos especiales, como el ácido fluorhídrico, no están disponibles en
ninguna botella de reactivo de vidrio y se utilizan en botellas de plástico.
Reglas de seguridad
1. Para evitar contaminar su ropa deberá presentarse al laboratorio con una bata blanca
adecuada que deberá usar durante la sesión.
2. Las actividades de laboratorio se iniciarán puntualmente. No se permitirá la entrada al
mismo, al alumno que llegue 10 minutos después de la hora de inicio.
3. Los objetos personales (libros, abrigos, etc.) deberán ser colocados en la zona especificada
por el profesor. Nunca se deben depositar en la mesa de laboratorio donde se trabaja, ya
que se pueden contaminar con los diversos materiales utilizados.
4. Como una regla de primordial importancia, queda ESTRICTAMENTE PROHIBIDO
comer, beber, fumar y en general llevarse cosas a la boca dentro del laboratorio.
5. Antes y después de cada sesión, deberán ser limpiadas las mesas con desinfectante
proporcionado por el profesor.
6. El material no contaminado, tal como: algodón, papeles, cerillos, etc., deberá ser
depositado en los recipientes destinados para su uso.
7. Durante el desarrollo del trabajo de laboratorio, debe evitarse entablar conversaciones, así
como comunicarse a voces con los alumnos de otras mesas.
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8. Al concluir cada clase, deje las instalaciones y el equipo de laboratorio en forma ordenada
y limpias. Los papeles de desecho e instrumentos de vidrio contaminados se deberán
colocar en los recipientes apropiados, que el profesor le indicará, para su adecuada
eliminación. Comunique al profesor sobre cualquier equipo defectuoso que sea detectado.
9. Lávese meticulosamente las manos con jabón y agua antes de salir del laboratorio.
10. Al finalizar cada sesión, deberá separar el material debidamente etiquetado, considerando
si está limpio, sucio o para ser esterilizado.
11. Se espera que el alumno lea cada ejercicio de laboratorio y realice las tareas
complementarias antes de llegar a cada sesión .
12. EI material biológico que se indica para la realización de cada práctica tendrá que ser
suministrado por cada equipo de trabajo, a menos que el profesor le dé otras indicaciones.
13. Conforme se vayan desarrollando las prácticas, deberán ser contestados los cuestionarios
que se señalan al final de las mismas. Su cuaderno de apuntes de laboratorio constituye un
valioso registro. Manténgalo al día aplicando los procedimientos que sean señalados por
el profesor.
14. En caso de accidente en el laboratorio como romper o derramar material contaminado
vierta sobre el mismo, el desinfectante proporcionado y déjelo actuar por lo menos 10
minutos antes de limpiar. AVISE INMEDIATAMENTE AL PROFESOR.
15. En caso de producirse un incendio o una herida personal, deberá informar de inmediato al
profesor, para que se tomen las medidas necesarias.5
1. La superficie de su mesa debe limpiarse con una solución germicida (alcohol, cloro,
etc.) al principio y al final de cada sesión.
2. La mesa debe estar libre de todo objeto no útil para desarrollar su trabajo y al final
debe dejarla limpia y libre de material o equipo ajeno a su implementación normal.
3. Durante las prácticas deberá mantener las más estrictas normas de esterilidad, las asas
de siembra deben ser esterilizadas a la llama del mechero antes y después de su uso.
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4. Los tubos que contienen suspensiones de microorganismos deben manipularse al lado
del mechero. Al extraer una muestra (inóculo) desde un tubo, deberá mantenerlo en
posición horizontal para evitar la entrada de microorganismos contaminantes y flamear
la boca del tubo a la llama del mechero antes y después de retirar el inóculo respectivo.
Al retirar los tapones desde la boca del tubo debe hacerlo con ayuda de la palma de la
mano y el dedo meñique, por ningún motivo dejar el tapón de algodón sobre el mesón.
5. Trabaje en la mayor parte posible bajo estrictas normas de asepsia.3
Consideraciones
Las características que deben reunir las normas de laboratorio son variadas, pero recogerán
tres aspectos importantes:
● Seguridad.
● Orden.
● Limpieza.
● Seguir estrictamente las normas de seguridad establecidas por los responsables del
laboratorio.
● Recoger todo el material, colocando cada cosa en su sitio.
● Limpiar todo el material utilizado para que su posterior uso no venga influenciado por
sustancias contaminantes.5
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Conclusiones
La realización de esta práctica es necesaria para conocer los materiales y equipos que vamos a
utilizar en las próximas prácticas de laboratorio, ya que por mucho tiempo no hemos entrado a
laboratorios es mejor conocer el funcionamiento y los cuidados de los equipos de manera
previa a la realización de las siguientes prácticas. Como ingenieros bioquímicos debemos de
conocer muy bien los cuidados de los equipos y materiales ya que muchos de estos son
difíciles de reemplazar debido a su alto costo, asimismo para que nos aseguremos que los
experimentos que realicemos no presenten errores debido al mal manejo de los equipos o
instrumentos. También es importante conocer las normas y el reglamento del laboratorio a
seguir para evitar que ocurran accidentes con los reactivos que se estén manejando, y si
ocurren saber cómo manejar estas situaciones.
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Considero que esta es una buena manera de conocer los instrumentos que vamos a ir
manejando a lo largo de la materia, puesto que al momento de empezar a manipularlos y
querer hacer uso de ellos, es importante saber qué hacen, cómo operan, características bases de
ese aparato que no pueden dejarse pasar por alto, etc. En cuanto al comportamiento dentro del
laboratorio de microbiología, debe ser algo que debemos respetar si queremos tener un buen
ambiente en la realización de la práctica, además de que tenemos que tener cuidado en
mantener la seguridad en nosotros y de nuestros equipos, evitar derramar químicos en
cualquier superficie para que no haya contaminación y poner en riesgo el material, o al
estudiante.
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Referencias
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Recuperado de https://elibro.net/es/ereader/itdurango/40456?page=23.
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(TALQ). http://www.ub.edu/talq/es/node/284
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https://www.anahuac.mx/mexico/noticias/Que-es-una-campana-de-%EF%AC%82ujo-laminar
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