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LABORATORIO DE QUMICA ANALTICA - UNIVERSIDAD DEL VALLE

DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE NITRGENO POR EL MTODO DE


MICROKJELDAHL.
Prctica realizada 21 marzo 2014
Entregado el 6 de abril de 2014. Departamento de Qumica Universidad del Valle.
Introduccin
El mtodo Kjeldahl se utiliza en qumica analtica para la determinacin del contenido de nitrgeno en muestras
orgnicas lo cual es de gran inters en mbitos de tanta transcendencia hoy en da como son el alimentario y el
medioambiental. En esta tcnica se digieren las protenas y otros compuestos orgnicos de los alimentos en una
mezcla con cido sulfrico en presencia de catalizadores. El nitrgeno orgnico total se convierte en sulfato de amonio
mediante la digestin. La mezcla resultante se neutraliza con una base y se destila. El destilado se recoge en una
solucin de cido brico. Los aniones de borato as formado se titulan con HCL estandarizado para determinar el
nitrgeno contenido en la muestra.
En general, el mtodo Kjeldahl tiene la ventaja de poderse ejecutar mediante equipos no muy sofisticados y puede ser
realizado por tcnicos poco experimentados.1

1 mol Na2 CO 3
2 mol HCl

106 g Na 2 CO3 1mol Na 2 CO3


=0
0.0206 L HCl

0.0208 g Na2 CO 3

Datos, clculos y resultados.


El objetivo principal de la prctica es determinar el
contenido de nitrgeno y protena en una muestra

M 2=
Promedio: 0.019M

problema, comprendiendo el fundamento terico del


mtodo de microkjeldahl. Para ello se pesaron 0.0500g
de la muestra, le aadimos 0.1027 g de la mezcla de

% de N en la muestra:

%N =

CuSO4-MgO y 2.0015 g K2SO4


tabla 1. medidas de los reactivos usados para el mtodo Kjeldahl

reactivo

Na 2 CO 3
HCl
Muestra
HCl

cantidad

funcion

0.0206 y 0.0208 g
20.70 y 20.60 mL
0.0500 g
7mL

Patrn primario
Gasto estandarizacin
Muestra a analizar
Titulacin s/n final

Se realiz la estandarizacin del HCl por triplicado:

mL gastados HCl (HCl estan .)W N


100
g Muestra

7 mL HCl
%N =

0.019 mmol HCl 1mmol N


14 mg N

mL
1 mmolHCl 1 mmolN
0.0500 g

%N =3.72
% de Protena en la muestra:

1 mol Na2 CO 3
2 mol HCl %P= g N
factor de conversion 100

g Muestra
106 g Na2 CO3 1 mol Na 2 CO 3
=0.019 M
0.0206 L HCl
%P=3.72 5.71

0.0208 g Na2 CO 3
M 1=

%P=21.24
1 mol Na2 CO3
2 mol HCl
0.0204 g Na2 CO 3

Discusin de resultados.
106 g Na 2 CO 3 1 mol Na2 CO3
M 2=
=0.019
M
Muchos
compuestos
nitrogenados, calentados con cido
0.0207 L HCl
sulfrico concentrado a elevadas temperaturas y en
presencia de un catalizador, se descomponen con
formacin de amoniaco, que es fijado por el cido en

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forma de ion amonio. Se alcaliniza fuertemente

acido/sales. Se aade tambin un exceso de hidrxido

con NaOH y se calienta a ebullicin; el amoniaco

sdico a la solucin, luego, para asegurar la completa

que destila se recoge en un exceso de cido patrn.

volatilizacin del amoniaco se destila hasta que haya

Valorando por retroceso con base patrn se obtiene la

pasado al menos una tercera parte del volumen. Es muy

cantidad de amoniaco y de esta el contenido de la

importante y vital para el procedimiento que el escape del

muestra. La determinacin consta de 3 etapas, la

destilador este sumergido en una solucin medida de

digestin, la destilacin y la valoracin.

cido brico (cido patrn) en exceso (junto con un

En la digestin se calienta la muestra con H2SO4

indicador mixto para la valoracin posterior), el cual

concentrado junto con el sulfato potsico, esta adicin de

absorber

sal es til para elevar la temperatura de ebullicin del

estequiometricas llevadas a cabo en este proceso fueron:

H2SO4. Dependiendo del tipo de sales empleadas, la

(NH4)2SO4 + 2NaOH NaOH + 2NH3 + 2H2O

temperatura puede pasar de ser de 330C estando el

2NH3 + 2H2O 2NH4+OH-

cido sulfrico slo, a una de 400C, con lo que se

NH4OH + H3BO3 (NH4)3BO3 + H2O

acelera el ritmo de la descomposicin y se acorta el

El indicador en presencia de cido es rojo, cuando es

tiempo de la digestin de forma considerable . El

neutralizado pasa de rojo a incoloro y luego a verde.

catalizador que se uso fue el 3:1 CuSO4-MgO. Se

La ltima etapa es la de valoracin en donde el ion

observa entonces que los compuestos orgnicos se

borato formado

carbonizan por la accin del cido sulfrico, el carbono

fuertes); el borato de amonio en la solucin forma la base

se oxida a dixido de carbono que luego se reduce a

conjugada H3BO3, resaltamos entonces que en el punto

dixido de azufre, este reductor fuerte hace pasar el

estequiometrico la solucin no es neutra por la presencia

nitrgeno a su estado ms bajo de oxidacin, que en el

de los iones amonio.

medio acido se transforma en amonio. El tiosulfato se

El cido consumido en la valoracin es equivalente al

agrega a los nitratos y nitrocompuestos para su digestin.

amoniaco obtenido y al contenido de nitrgeno en la

Los azocompuestos y derivados de la hidracina se

muestra.

reducen previamente mediante reductores. Finalmente se

Las reacciones estequiometricas llevadas a cabo en este

deja enfriar la solucin obtenida de sulfato de amonio y

proceso fueron:

se aaden no ms de 5mL de agua destilada para

H2BO3 + H3O H3BO3 + H2O

disolver los slidos.

Finalmente se hall el porcentaje de nitrgeno en la

Las reacciones estequiometricas llevadas a cabo en este

muestra obteniendo un 3.72 % y seguidamente el

proceso fueron:

porcentaje de protena que fue 21.24 %. Parece ser que

el

amoniaco

liberado.

Las

reacciones

se valora con HCl (rxn acido-base

H2SO4 SO3 + H2O

el porcentaje de protena obtenido es cercano al real, ya

2SO3 2SO2 + O2

que se especula que es del 18% (muestra Soy Plus),

C + O2 CO2

valor que fue dado por los estudiantes ya que la muestra

2H2 + O2 2H2O

era desconocida.

2NH3 + H2SO4 (NH4)2SO4

Conclusiones
Este mtodo posee la ventaja de que tan slo es

En la segunda etapa que es la de neutralizacin y

necesaria una disolucin patrn. Dependiendo del tipo de

destilacin, el producto de la digestin suele ser diluido

sustancias nitrogenadas que se traten, es necesario

con agua libre de amoniaco para minimizar los efectos de

realizar

las

El mtodo que nos ocupa puede resultar engaoso en

mezclas

que

contienen

altas

proporciones

algunas

modificaciones

del

mtodo

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algunas sustancias nitrogenadas, como es el caso

anlisis

como

el

que

realiza

el

mtodo.

de los compuestos de nitrgeno no proteico


(NNP), unos compuestos que pueden llegar a ser

Como se obtiene el factor de conversin de nitrgeno en

convertidos en protenas por algunos organismos, e

protena y de que depende.

inclusive en sustancias de tipo txico o sin valor desde el

El contenido de protena cruda de un ingrediente se

punto

nutricional.

determina usualmente por medio del mtodo Kjeldahl en

Constituyen fuentes de error en este mtodo son: la

el cual se mide el contenido de nitrgeno total en la

inclusin de nitrgeno no proteico como parte de la

muestra, convirtiendo luego este resultado a un valor

protena; la prdida de nitrgeno durante la digestin, la

total de protena cruda, mediante una multiplicacin por

digestin incompleta de la muestra. Las proporciones

el factor emprico 6.25 (este factor de conversin se basa

excesivas de sulfato de sodio o potasio que se aaden al

en la suposicin de que la protena promedio, contiene

cido (para elevar el punto de ebullicin) pueden resultar

alrededor de 16% de nitrgeno por unidad de peso, an

en una descomposicin por calor y la consecuente

cuando en la prctica es posible una variacin entre 12 y

prdida de amonaco.

Generalmente se recomiendan

19% de nitrgeno entre protenas individuales). 3 Depende

temperaturas de digestin de 370-410C. Tambin puede

de la materia prima de la que est compuesto,

ocurrir prdida de nitrgeno si se utiliza demasiado

generalmente se usa el factor de conversin de 6.25,

selenio o la temperatura de la digestin no se controla

pero para este caso usamos el 5.71 correspondiente a la

cuidadosamente; las condiciones son an ms crticas

soya.

de

vista

que con el cobre o el mercurio cuando se usan como


catalizadores. 2

Por qu el factor de conversin de nitrgeno en protena


vara entre determinados grupos de sistemas biolgicos.
La mayor desventaja del mtodo Kjeldahl, es que no
diferencia entre nitrgeno protico y no-protico (NNP).

Respuestas a las preguntas.

Consecuentemente,

Cules pueden ser los objetivos de la cuantificacin de

generalmente satisfactorio para ingredientes alimenticios

nitrgeno en los sistemas biolgicos destinados al

convencionales (ya que estos solo contienen pequeas

consumo humano y animal.

cantidades de NNP), no es el caso para protenas

an

cuando

este

mtodo

es

El mtodo Kjeldahl es muy utilizado en la industria

microbianas unicelulares (protena unicelular; bacterias,

alimentaria,

microalgas, levaduras) y ciertos productos animales de

para

poder

estimar

la

cantidad

de protenas que contiene la comida o los diferentes

desecho,

productos alimentarios. Los otros componentes que

considerables de NNP. Por ejemplo, la gallinaza seca

forman parte de los alimentos, es decir las grasas,

tiene un alto contenido de nitrgeno, equivalente a 28%

hidratos

compuestos

de protena cruda, del cual solo cerca de un tercio es

posiblemente presentes, no presentan en ninguno de los

verdadera protena y el resto es NNP, principalmente en

casos nitrgeno, en cambio, los aminocidos que

la forma de cido rico (Blair, 1974). En vista de la muy

conforman las protenas si contiene dicho elemento.

limitada (si no total) capacidad de los peces y camarones

Algunas otras sustancias, como pueda ser el caso de las

para utilizar NNP diettico, es esencial que ambos, la

vitaminas, tambin tienen en su composicin nitrgeno,

protena verdadera y el nitrgeno no-proteico, sean

pero lo hacen en una proporcin bastante pequea, por

determinados por separado en los nuevos ingredientes

lo que prcticamente no influyen en los resultados de un

alimenticios.3

de

carbono

incluso

otros

los

cuales

pueden

contener

cantidades

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Cul es el criterio para presentar los resultados de

Explique al menos 6 mtodos de anlisis para determinar

la cuantificacin del nitrgeno como % de nitrgeno total

el contenido de protenas en alimentos a parte del

o como porcentaje de protena.

mtodo de Kjeldahl.

En los anlisis de rutina se suele determinar el contenido


de nitrgeno total y expresar el conjunto de sustancias
nitrogenadas como porcentaje de nitrgeno total o
como porcentaje de protenas.

Referencias.
1.

www.grupo-selecta.com/notasdeaplicaciones/sincategoria/metodo-kjeldahl/

Explicar los trminos:

2.

docencia.izt.uam.mx/lyanez/analisis/practicas/KJEL
DAHL.rtf. Octubre 12 de 2009
www.fao.org/docrep/field/003/ab492s/ab492s06.htm

a) % de protena cruda

3.

b) % de protena

4. Anlisis qumico cuantitativo. Ayres. Mtodos de

c) % de nitrgeno proteico

neutralizacin. pg. 342-343