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APORTES AL ESTUDIO DE PARVOVIRUS PORCINO*

Alvaro A. Romero G. * *
Luis Carlos Vil/amil J. **
Jose"llaflo Mogol/on
, ***

RESUMEN ción de 102 úteros preñados en . sultados obtenidos son promiso- fluidos corporales para tener cer-
los mataderos Central, Guadalupe rios para en el futuro estan- teza sobre posible,s causas de
y San Martín; en ellos se ana- darizarla como una prueba de uso falla gestacional, lo mismo que
El parovirus porcino se en-
lizaron 979 fetos; además se adi- rutinario. técnicas de inmunodiagnóstico
cuentra en aproximadamente el
cionaron 20 fetos provenientes de complementarias y de relativa fa-
90% de las explotaciones porci-
Granjas; de estos, se tomaron 224 cilidad en su realización.
nas en Colombia. Su presencia en INTRODUCCION
muestras de líquido torácico. A los
nuestro país se reporta desde la
fluídos de fetos menores de 65
década de los 70s y al respecto Dentro de las limitantes tec- REVISION DE LITERATURA
días se les hizo hemaglutinación
se han hecho numerosos estudios nológicas para el desarrollo de la
(HA), a los mayores de 65, se les
serológicos lográndose el primer Industria Porcina, los problemas El virus de la parvovirosis por-
corrió HI. La distribución porcen- .
aislamiento en 1987 (González y reproductivos son de gran inci- cina está ampliamente disemi-
tual de positividad fue: 7.45 % para
Torres, 1987). dencia en la dinámica pobla- nado en el mundo y se considera
el Guadalupe, 17.8% para el Cen-
cional. Entre éstos, el parvovirus al cerdo como su único hospedero
En el presente estudio se plan- tral, 43.8% para Granjas, y no po-
porcino (PVP) es uno de los más natural; fue aislado por primera
tearon 4 experimentos: sitivos en el San Martín.
relevantes en Colombia. En- vez en Surrey (Inglaterra) por
cuestas serológicas realizadas en Cartwright y Huck en 1967. En
A. Estudio serológico en ani- C. En el tercer experimento, se
los Departamentos de Antioquia, 1968, se clasificó como un DNA-
males adultos: se tomaron 148 seleccionaron de cinco granjas al
Valle del Cauca y Cundinamarca, virus y en 1970-73, se le dio el
muestras de sangre en tres azar 77 cerditas de reemplazo, 28
se han encontrado sero-reactores nombre de Parvoviridae a la familia
frigoríficos de la ciudad de Santafé en Antioquia, 34 en Cundi-
positivos que oscilan entre 36%, a la que pertenece este agente;
de Bogotá y en cinco granjas de los namarca y 15 en el Valle, reparti-
51.7% y 42-66% respectiva- (parvum = pequeño) (Berns, 1990,
Departamentos de: Antioquia (2), das en cinco granjas. Las dos del
mente; en cuanto a ganjas la po- Thacker, 1988).
Cundinamarca (2) y Valle (1). departamento de Antioquia meto-
sitividad está alrededor del 93%,
dológicamente se agruparon El parvovirus igual que sus
lo que demuestra que la entidad
Por la prueba de HI se obtu- como una. A los animales selec- congéneres es un virus que tiene
está distribuida dentro de los di-
vieron títulos que oscilaron entre cionados al azar, se les determinó probablemente 32 capsómeras y
ferentes núcleos poblacionales en
1:20 y > 81920, con promedio catabolismo de anticuerpos ma- 21-25 nm de diámetro. El genoma
el país (González y Torres 1986,
geométrico (GMT) de 2518.1 ternales; se practicaron sangrías consiste de una cadena sencilla
Velasco 1991).
para hembras y 798.8 para sucesivas cada tres semanas, em- de DNA con un peso de 1.5-2 x
machos; Frigorífico Suizo: 20 pezando al momento del destete La información que se tiene en 10·s; posee 3 polipéptidos VP1,
muestras, títulos entre 1: 160 - y culminando hacia la semana 23, el país es fragmentaria, se desco- aproximadamente el 10%, VP2
1:10240, GMT de de 735.2 para en total se hicieron 6-7 tomas por nocen coberturas vacuna les, presente en forma apreciable en
machos y 788 para hembras; animal. Los títulos oscilaron entre tipos de biológicos más usados, partículas vacías y completas y
Frigorífico San Martin, 53 sueros, 1:10 a > 81920. El comporta- rutinas y en general todo lo con- VP3 el más abundante. El virus se
títulos de 1:20 - > 81920, con miento de medias fue el siquiente: cerniente a inmunización activa. replica intracelularmente y el sitio
GMT de 546 para machos y 4300 Antioquia 396.1, Cundinamarca En cuanto al virus de campo, la de maduración es el núcleo, para
para hembras. Los porcentajes de 1355.5 y 235.8, Valle 2288.2. En información no es muy amplia y ello requiere de células en proceso
positividad en el chequeo, fueron el análisis de varianza y estudio de se remite a estudios serológicos y activo de división, especialmente
de 77.5%, 100% Y 28.3% res- medias (SNK), las diferencias a intentos de aislamiento, exi- en fases S o G2.
pectivamente. Al comparar los fueron altamente significativas (p tosos y fallidos (González y To-
tres frigoríficos y hacer el análisis < 0.01), entre los tres Depar- rres, 1986, Silva y Suárez, 1989). Todos los parvovirus porcinos
de varianza se encontraron difer- tamentos. tienen propiedades hemagluti-
encias estadísticas altamente sig- Con base en lo anterior y para nantes y se ha determinado que
nificativas (p < 0.01). En Granjas D. El cuarto experimento con- tener datos complementarios se la temperatura a la cual se pre-
se tomaron 91 muestras de sue- sistió en montar un preliminar de planteó la investigación en varios senta una mayor aglutinación es
ro, los títulos oscilaron entre estandarizáción de la prueba de frentes como: serología en ani- a 4°C. De la misma manera pre-
1: 160 a 1:40960, se presentaron inmunoperoxidasa, para diag- males adultos de granjas y a nivel sentan mayor grado de agluti-
diferencias estadísticamente sig- nóstico de parvovirus porcino de plantas de sacrificio, cata- nación con cierto tipo de eritroci-
nificativas (p < 0.05). (PVP); se trabajaron cultivos celu- bolismo de anticuerpos mater- tos como son los de cobayo, por
lares de la línea PK-15 de 24 horas nales para conocer los rasgos de tanto son los que se usan de ru-
B. La segunda parte de la in- de crecimiento e infectados con inmunidad pasiva; nuevas alter- tina en el laboratorio para la
vestigación consistió en la recolec- parvovirus porcino (PVP). Los re- nativas de diagnóstico a partir de prueba de HI. Debido a la estruc-

Este artículo representa parte de la tesis de rnaestrta del primer autor, desarrollado en el posgrado de Salud y Producción animal de la Universidad Nacional.
Respectivamente, MV., MSc. y DMV., MSc., PhD., profesor Asistente y Asociado de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional.
DMV., MSc., PhD., investigador Corpoica Santafé de Bogotá.

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..,
tura simple de la partícula viral, la ceptibles a la infección de campo. derado en la mortalidad neo natal a. Estudio serológico de ani-
hemaglutinación es idéntica ya sea Los anticuerpos maternales tienen (Dial y Morrison, 1992; Mengeling, males adultos: A nivel de planta
con cápsides vacías, partículas in- importancia pues pueden interferir 1990; Wrathal, 1984). de sacrificio se hizo un muestreo
completas, viriones completos o de con los procesos de inmunización totalmente al azar tomando mues-
diferentes densidades (Mengeling, activa. Debido a la persistencia de Los índices de prevalencia se-
tras al momento de eyugulado de
1990, Silva y Suárez, 1989). los anticuerpos adquiridos por rológica en .anlmales, para difer-
los animales. A nivel de granjas,
medio del calostro, las cerditas entes sitios y países son muy al-
el muestreo fue también aleatorio
La historia de los parvovirus pueden no ser susceptibles sino tos, 67-88% para USA, 68% en
y se tomó por venipunción de la
porcinos está asociada a fallas re- hasta una época cercana al primer Francia, 80-100% en Argentina,
yugular. El total de muestras
productivas, desde las primeras servicio o los estad íos tempranos 100% en Eslovenia, 84% para Ca-
recolectadas fue de 239, 148 en
observaciones hechas por Cart- de gestación (Donaldson-Wood y nadá, 90-95% en Inglaterra, 93%
wright y Huck, cuando em- mataderos y 91 a nivel de granjas.
Joo, 1984, Hogg y Lenghaus, Australia, Colombia 45-85% (Dial
pezaron a estudiar la posible par- 1977, Pointon et. al., 1983). y Morrison; Foil y Solignac, 1987;
b. Recolección de úteros
ticipación de este agente en Morrison y Joo, 1985; Reynolds,
preñado s a nivel de planta de sac-
disturbios gestacionales, hasta el Las instalaciones contami- 1984; Ramírez, 1991; Robinson,
rificio: se hizo en los frigoríficos
presente, se ha reportado la pre- nadas y las cohortes en ellas pre- Cartwright y Danson, 1985).
sencia de sólo un tipo de PVP, Central, Guadalupe y San Martín;
sentes constituyen el mayor re-
aunque se han observado cepas La habilidad del PVP para se colectaron 102 úteros gestan-
servorio para la presentación de
de virulencia variable como la brotes de características epizoóti- cruzar la barrera placentaria en tes; se hizo estudio y análisis de
NADl-8 que se considera como la cas o para mantener la entidad en cerdas gestantes varía un poco de útero por útero y de absolu-
más agresiva. La infección por forma enzoótica. El virus de acuerdo a la cepa de campo y al tamente todos los feto s presentes
parvo virus se puede considerar campo puede persistir dentro de estado inumunológico específico. en ellos, se determinó la edad de
enzoótica dentro de muchos de los planteles por períodos de La secuela de la infección trans- gestación mediante la fórmula:
los planteles porcinos; la mayoría tiempo apreciables, dadas las placentaria depende en gran parte largo del feto x 3 + 21 = edad'
de los animales dedicados a la re- propiedades físicoquímicas del del tiempo de gestación y puede aproximada de gestación. De los
producción poseen algún grado agente (Johnson y Donaldson- traducirse en muerte embrionaria feto s presentes, se tomaron
de inmunidad activa adquirida por Wood, 1986). con reabsorción si la infección es muestras de líquidos torácicos,
la exposición natural al virus de muy temprana; posteriormente se dos por cada útero, una por cada
campo (Dial y Morrison, 1992; En los casos epidémicos, el puede presentar muerte fetal con cuerno, se rotularon por sitio de
Morrison y Joo, 1985). El PVP se primer signo observado a nivel de momificación; si la infección del procedencia y tiempo de ges-
difunde en forma horizontal y se explotación es la reducción de la feto es posterior a los 70 días de tación; además se procesaron 20
adquiere por vía oronasal primor- fertilidad;las cerdas que se infec- desarrollo, estos pueden controlar muestras adicionales de Ifquidos
dialmente; aunque la via genital tan durante las dos primeras se- inmunológicamente el virus, aun- torácicos de fetos provenientes
puede tener alguna importancia manas de gestación pierden sus que ocasionalmente se presentan
de granjas; en total se procesaron
en ciertas condiciones de campo. embriones y retornan al estro en pérdidas aún en fase de protec-
224 muestras de fluidos toráci-
Las cerditas de reemplazo y las períodos irregulares; al cabo de ción (Huvsrnan, 1991; Walton,
coso A las provenientes de feto s
cerdas primerizas son el grupo unas seis semanas de iniciado el 1987).
menores de 65 días se les hizo
más susceptible; sin embargo brote se hace evidente la presen-
hemaglutinación (HA); a los ma-
tienen algún grado de protección cia de fetos momificados. En ca-
pasiva por medio de los anticuer- sos endémicos, se observa pre- yores de esta edad se les corrió la
pos maternales derivados del sencia esporádica de momias, MATERIALES Y METODOS prueba de HI. Además se hicieron
calostro proveniente de madres hay tendencia a la reducción del observaciones y anotaciones por
infectadas; Estos anticuerpo s son número de lechones por camada, aspecto macroscópico de los fe-
de relativa larga duración y per- abortos esporádicos, seudopreñe- La metodología que se siguió tos, si eran normales se anotaba
sisten por unas 16-21 semanas, ces, camadas disparejas y en al- dentro de los diferentes experi- N, si presentaban algún grado de
luego los animales se hacen sus- gunos casos incremento mo- mentos fue la siguiente: momificación se cualificó:

+ feto s ligeramente edematosos.


++ feto s francamente edematosos.
+++ fetos edematosos en proceso de momificación.
+++ feto s francamente momificados.

c. Catabolismo de anticuerpos sueros colectados se les hizo HI, de prueba, con algunas variantes jación y los respectivos lavados,
maternales: Se tomaron al azar 77 se determinó GMT por cohortes, de acuerdo a las recomendacio- se adicionó el antisuero con título
cerditas de reemplazo en los de- regresión, curva de declinación de nes de varios autores. 1: 10280, diluído 1:5, titulo final
partamentos de Antioquia 28, títulos y análisis de varianza. El 1:2448. Se dejó en incubación
Cundinamarca 34, Valle 15. Estas título se expresa como el inverso La variante principal dentro de por espacio de 20 minutos. Pos-
cerditas estuvieron repartidas en de la máxima dilución en la cual la metodología usual, fue la de teriormente se adicionó el conju-
cinco granjas, Antioquia 2, Cundi- se presentó inhibición de la he- adicionar albúmina al 0.5% al PBS gado proteína G-peroxidasa di-:
namarca 2, Valle 1. Se hicieron maglutinación. empleado para los enjuagues, en luido 1:500, luego se dejó nueva-
sangrías períodicas cada 3 se- la fase de fijación. La solución de mente en incubación a 37°oC por
manas, a partir de la fecha de d. En el cuarto experimento se revelado se preparó con 3-amino 40 minutos. Finalmente se adi-
destete que fue de aproximada- hicieron los preliminares para la 9-etilcarbazole, así: se disolvieron cionó la solución de revelado
mente 35 días (5 semanas); en estandarización de la prueba de 10 mgrs de 3-amino 9-etilcarba- preparada con el aminoetilcarba-
total se hicieron siete tomas de inmunoperoxidasa; para ello se zole en 3 mis de N N-dimetil for- zole y se dejó en ella por 20 mi-
sangre por cerdita seleccionada y trabajaron cultivos celulares de la famida, se adicionaron 25 mis de nutos. Los demás pasos del pro-
se concluyó el muestreo hacia las línea PK-15, infectados con PVP buffer acetato pH 5.0, de concen- cedimiento son similares a los de
23 semanas, época en que los porcino; los cuales se fijaron en tración 0.05M, al que se le habían un procedimiento estandar para
animales entran en pleno al grupo acetona y luego se siguió un pro- adicionado 100 uls de peróxido de correr pruebas de inmunoperoxi-
dedicado a la reproducción. A los cedimiento general para este tipo hidrógeno al 3%. Luego de la fi- dasa.

30 REVISTA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

..,
RESULTADOS Y DISCUSION tividad se presentó en los Ifquidos
TABLA 1·B
torácicos colectados de feto s
SEROLOGIAA NIVEL DE GRANJAS
Los resultados de serologfa a provenientes de granjas; a nivel
nivel de frigoríficos y de granjas de planta de sacrificio los porcen- GRANJA 086·216 STA. CRUZ STA. RITA
muestran gran variabilidad; los tajes fueron menores (Tabla 2). Títulos GMT:
porcentajes de positividad (títulos
Catabolismo de anticuerpos Hembras 3244 6894.4 4315
~ 1:160), oscilaron entre 2~.3%
al 100% para los sitios de sacrifi- maternales: en este experimento Título menor 1 :160 1 :160 1 :320
cio de animales, y en granjas la también se determinó una signifi-
cativa variabilidad del compor- Título mayor 1 :40960 1 :40960 1:20480
positividad fue del 100%.
tamiento de los títulos y de la Machos 4256
En cuanto a machos y hem- curva de regresión de los mismos.
Título menor 1:10240
bras, hubo diferencias entre los Al analizar las medias presen-
mataderos en forma individual, tadas por los sitios de muestreo Título mayor 1:10240
pero al análisis de todos los sitios observamos lo siguiente: Media aritmética 6098 1272 1168
de muestreo en conjunto, no se
presentaron diferencias estadísti- Tecniagro 396.1 % positivos 100 100 100

,
camente significativas entre Santa Cruz 1355.5
sexos. Santa Rita 235.8
J Porcilandia 2288.2 tipo exponencial (cuadrática), con tamento de Cundinamarca (Figuras
Las cifras correspondientes a una acelerada pendiente al prin- 3 y 4), se hizo análisis inde-
este ensayo están consignadas En el análisis de varianza, se cipio del ensayo y luego un pendiente para las granjas, pues
en las Tablas Nos. 1-A y 1-8. encontraron diferencias estadísti- descenso moderado. El porcen- éstas tienen algunas diferencias en
taje de declinación de los títulos cuanto al manejo de los animales
durante el ensayo fue aproxi- y el nivel de tecnología empleado
TABLA '·A madamente del 98%. lo mismo que la procedencia de los
SEROLOGIA A NIVEL DE MATADEROS animales. Otro aspecto importante
Las cifras globales de los re-
FRIGORIFICO GUADALUPE SUIZO SAN MARTIN es que las dos explotaciones mues-
sultados en el experimento de
treadas están ubicadas en pisos
Títulos GMT: catabolismo de anticuerpos ma-
térmicos diferentes.
ternales derivados, están consig-
Hembras 2518.8 735.2 546
nados en la Tabla 4. Las Figuras 5 y 6, nos mues-
Título menor 1:20 1 :160 1:20
tran en conjunto el compor-
Título mayor >81920 1 :5120 1 :10240 En las figuras 1, 2, 3 y 4 se
tamiento de las curvas de re-
aprecian las curvas de regresión
Machos 789.8 788 4300 gresión, con sus respectivos
presentadas en cada uno de los
grados de deflexión. En el ensayo
Título menor 1 :160 1 :160 1 :20 departamentos y en cada una de
de estandarización de peroxidasa
las granjas. En el departamento
Título mayor 1:10240 1 :10240 > 81920 (Figuras E-1 y E-2), los resultados
de Antioquia (Figura 1), todas las
Media aritmética 14006 2216 3403 obtenidos son promisorios, en es-
muestras provenían de una sola
tudios posteriores se puede ya
% positivos 77.5 100 28.3 empresa productora de cerdos,
trabajar directamente con impron-
por lo tanto se analizaron como
tas de tejidos para comparar re-
una sola cohorte, pues el nivel de
En cuanto a las pruebas reali- cas altamente significativas (p< tecnología empleado es el mismo sultados. Esta es una meto-
zadas en los flufdos corporales, se 0.01 ). y la procedencia de los animales dología que se puede implantar en
presentó una gran variabilidad en es interna. un laboratorio con limitaciones de
el comportamiento de títulos de- En el análisis de regresión se equipos; esta es una ventaja com-
pendiendo del sitio de toma de observó en todos los casos que la La Figura 2, muestra a la curva parativa con pruebas de funda-
muestras; los fndices de positivi- declinación de los títulos no fue de regresión de los tftulos de las mento similar como inmunofluo-
dad variaron de 0.0% hasta simplemente lineal; la regresión cerditas muestreadas en el depar- rescencia que necesitan de equi-
43.75%. El mayor índice de posi- que presentaron las curvas fue de tamento del Valle. Para el depar- pos muy costosos.

TABLA 2
SEROLOGlA EN lI0UlDOS TORACICOS
SITIO GUADALUPE CENTRAL SANMARTIN GRANJAS
PROCEDENCIA
Fetos positivos:
HA 6 8 - -
Tftulo menor 1 :2 1 :2 - -
Título mavor 1 :4 1 :4 - -
HI 4 2 - 7
Título menor 1 :20 1 :20 - 1 :20
Título mavor 1 :40 1 :40 - 1 :10240
% eositivos 7.45 17.8 0.0 43.75

REVISTA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA 31

'4
TABLA 3
CATABOLlSMO OE ANTICUERPOS MATERNALES
SANGRIA 1 2 3 4 5 6 7

Títulos GMT:

Porcilandia/1 583.6 208 210.6 76.4 40.0 21.9 10.0


Santa Cruz/2 2958 1436.8 604.1 203.7 130.7 50.4 30.0

Santa Rita/3 686 320 226.3 85.7 34.8 17.4 8.7

086-216/4 820 312.2 215.4 141.4 110.3 40.0 7.0

Semanas 5 8 11 14 17 20 23

Porcentaje:

/1 100 35.7 34.5 13.1 6.8 3.7 1.7

/2 100 48.6 20.4 6.9 4.4 1.7 1.0

/3 100 46.6 33.0 12.5 5.1 2.5 1.3

/4 100 40.0 27.6 18.1 14.4 5.3 0.9

FIGURA E-1. Peroxidasa Positiva (150 X).

FIGURA E-2. Control negativo peroxidasa (150 xi.

32 REVISTA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

.,
1000 :itUIOS GMT I

800

600

400

200

01 ~ ?3t:"" 4i I

-200 I I I I I I I I ,

O 5 8 11 14 17 20 23 26
Semanas.

-- Pendiente -+- Regresion lin. -*- Regre.exp


FIGURA 1. Catabolismo de anticuerpos maternales (Tecniagro - Medellín).

Titulos GMT
700, ,

600 ----.-
...
-..
---

500 -.-.-
.....
-.

400

300
200 --------

100

01 ~~~ * 1
-100 I I I I I I I I I

5 8 11 14 17 20 23 26
Semanas

- Pendiente -+- Regre.lin --*- Regres.exp


FIGURA 2. Catabolismo de anticuerpos maternales (granjas Valle del Cauca).

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Titulos GMT
35 O O ..------.-------.-.------------.-.--.-------.- ..---.-.-.---- --.-..-. - .---.--.--.--.- ..-----.--.---.-.----.-----.-,
3000 ~- . . .
2500 ,-.. .. .. . . '
2000- . ch_ .. '.. . .

1500 1'-' .'.. . . .\ .'..;.


...•.~ . ....

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- 100O L .~ __. L. .__
. ~_. .-l__ . ~ . I --1 _

O 5 8 11 14 17 20 23 26
Semanas
-~-- Pe nd ien te --+- regres lin -4.- Regres exp.
FIGURA 3. Catabolismo de anticuerpos maternales (Gachancipá).

Titulos GMT
800 ¡-o --------.

600 ~.- - --.- .

400 ~-..-- ....

200

01 ~"'>4: * I

-200! I I I I ! I I I

O 5 8 11 14 17 20 23 26
Semanas

-- Pendiente -+- RegresUn -4- Regre.exp


FIGURA 4. Catabolismo de anticuerpos maternales (Silvania).

34 REVISTA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA


Indices de deflexion
/1

//1

/1
3.53 ~/...
.. ..' iI
I

2.5 .¡... !I

1.:~ /L .
1 /

0.5
O v ¡ / / I / I / I e i /' I /
-i'-=-'/L--,-
r I

5 8 11 14 17 20 23 26

Semanas
•• Porcilandia ~ Santa Cruz 1:):1 Santa Rita 11II Tecniagro
FIGURA 5. Comportamiento curva de regresión (parámetros de deflexión).

Indices de deflexion

//1
//1
/ / .: i
3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
O v
I
/
I
/
I
/'
I
/
I
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I I j
r
I
/

5 8 11 14 17 20 23 26

Semanas
•• Porcilandia ~ Santa Cruz L::¡ti¡ Santa Rita 11II Tecniagro
FIGURA 6. Comportamiento curva de regresión (índices de deflexión).

REVISTA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA 35


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