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I. INTRODUCCIÓN 5
II. OBJETIVOS DEL CUADERNO 5
III. INSTRUCCIONES PARA EL USO ADECUADO DEL CUADERNO DE
AUTOAPRENDIZAJE 5
IV. MÓDULO 1. ADMINISTRACIÓN DE RECURSOS HUMANOS, MATERIALES,
FÍSICOS Y TÉCNICOS 6
1. INTRODUCCIÓN 6
2. OBJETIVO DEL MÓDULO 6
3. OBJETIVO DEL TEMA 6
4. RECURSOS HUMANOS 7
5. RECURSOS MATERIALES 7
6. RECURSOS FÍSICOS 8
7. RECURSOS TÉCNICOS 8
8. CUADRO DE PRÁCTICA 10
9. AUTOEVALUACIÓN 12
10. RESPUESTAS DE LA AUTOEVALUACIÓN 13
V. MÓDULO 2. FUNCION DIRECTIVA Y ACTIVIDADES TÉCNICO
ADMINISTRATIVAS DEL QUÍMICO CLÍNICO JEFE DE SECCIÓN (2ª CATEGORÍA) 14
1. INTRODUCCIÓN 14
2. OBJETIVO DEL MODULO 14
3. FUNCIÓN DIRECTIVA 14
4. OBJETIVO DEL TEMA 14
5. CUADRO DE PRÁCTICA 19
6. AUTOEVALUACIÓN 20
7. RESPUESTAS A LA AUTOEVALUACIÓN 21
VI. MÓDULO 3. PROTOCOLO DE PROCEDIMIENTOS EN EL LABORATORIO 22
1. METODOLOGÍA PARA LA TOMA DE MUESTRA 22
2. ANÁLISIS DE LIPOPROTEÍNAS Y COLESTEROL 23
3. PRUEBAS DE FUNCIONAMIENTO HEPÁTICO 25
3.1. Albúmina. 25
3.2. A1AT. 27
3.3. Fosfatasa alcalina. 28
3.4. ALT. 30
3.5. AST. 30
3.6. GGT 31
3.7. TP. 32
3.8. Bilirrubina total 33
3.9. Bilirrubina en Orina 35
4. PRUEBAS DE FUNCIONAMIENTO TIROIDEO 37
4.1. Examen de Captación de yodo, RAIU 37
4.2. T3 (Triyodotironina) 39
4.3. T4 (Tiroxina) 40
5. URIANÁLISIS 42
5.1. Recolección de orina en 24 horas; Volumen urinario 42
5.2. Recolección de orina (toma limpia); Espécimen de Orina de Toma Limpia para Cultivo
de Orina 44
5.3. Examen General de Orina 45
5.4. DENSIDAD URINARIA. 49
6. BACTERIOLOGÍA 50
6.1. Exudado Faríngeo. 51
6.2. Cultivos diversos 52
6.2.1. Cultivo de drenaje del oído 52
6.2.2. Coprocultivo 53
6.2.3. Cultivo de la nasofaringe; 54
6.2.4. Cultivo de exudado uretral 55
6.2.5. Hemocultivo 56
6.2.6. Urocultivo. 57
6.2.7. Cultivo cervicovaginal. 58
7. La Reacción en cadena de la Polimerasa (PCR). 60
8. Western Blot 63
9. ELISA 63
10. Citometría de Flujo (FACS). 64
11. Electroforesis. 65
12. REFERENCIAS 66
I. INTRODUCCIÓN
La importancia de los servicios que presta el Instituto Mexicano del Seguro Social requiere
de fortalecer la interacción con el personal para la salud que interviene en el proceso integral
de la atención médica. Por ello es necesario que el Químico Clínico Jefe de Sección (2ª
Categoría) posea los conocimientos, habilidades y destrezas y una actitud propositiva en la
que impere el buen trato al derechohabiente en el desempeño de sus funciones que, de
acuerdo con las normas institucionales, le permitan una participación efectiva y certera en la
ejecución de sus labores. De este modo se enriquecerá asimismo el resultado de las acciones
de su departamento y se reafirmará el compromiso institucional, así como el espíritu de
servicio del propio trabajador.
AUTOAPRENDIZAJE
2. Compare las respuestas al cuadro de práctica con el texto y, si alguna está equivocada,
lea nuevamente la información correspondiente hasta que la domine.
10. Se recomienda que el Estudio de cada tema sea continuo, ya que, si lo interrumpe,
correrá el riesgo de perder la secuencia lógica. Las pausas deberán hacerse al final
del tema.
FÍSICOS Y TÉCNICOS
1. INTRODUCCIÓN
En este módulo se dará a conocer a los aspirantes las normas, manuales, instructivos y formas
institucionales que se utilizan para facilitar la administración de los siguientes rubros:
Recursos humanos
Recursos físicos
Recursos materiales
Recursos técnicos (normoteca)
Función directiva
Actividades técnico-administrativas
Cronograma de actividades
Supervisión y seguimiento
Esta información permitirá a los aspirantes tener un conocimiento amplio de las funciones y
actividades que se llevan a cabo en esta categoría.
Al finalizar el estudio del tema el participante conocerá los elementos que se administran en
el laboratorio, así como los formatos institucionales de registro requeridos.
4. RECURSOS HUMANOS
Plantilla teórica
La plantilla teórica permite al Químico Clínico Jefe de Sección (2ª Categoría) tener control
sobre el personal con el que interactúa (relaciones de mando de CCT). Su contenido es:
nombre, matrícula, categoría, jornada, horario, turno, descansos y centro de costos del
personal adscrito a la unidad médica donde presta sus servicios.
El adecuado manejo del cuadro de distribución le permite al Químico Clínico Jefe de Sección
(2ª Categoría) tener una distribución por áreas según necesidades del servicio. Comprende
los siguientes datos: nombre, turno, horarios, días de descanso y rol de servicio.
Rol de vacaciones
Descanso semanal
Descanso diario
Se refiere al tiempo de descanso para la toma de alimentos durante la jornada laboral. Está
contemplado en la cláusula 46 del Contrato Colectivo de trabajo del Instituto.
Guardias
5. RECURSOS MATERIALES
Son aquéllos que coadyuvan al logro de los objetivos del servicio, los cuales deben ser de
acuerdo con los análisis que se realizan en el laboratorio. Incluye los formatos oficiales que
se requieren en cada proceso de laboratorio, por ejemplo: hojas o libretas de trabajo,
bitácoras, para los diferentes registros (mantenidos al día) de resultados de exámenes,
controles, calibraciones, reactivos utilizados; funcionamiento y mantenimiento de equipos,
etc.
6. RECURSOS FÍSICOS
▪ El espacio donde el Químico Clínico Jefe de Sección (2ª Categoría) desarrolla las
actividades administrativas y operativas de sus funciones y del personal a su cargo.
7. RECURSOS TÉCNICOS
Normoteca:
Leyes:
Manuales de:
• Organización,
• Procedimientos administrativos,
• Todos los métodos analíticos, en idioma español
• Manejo de equipo, en idioma español
• Seguridad e higiene ocupacional
• Procedimientos para el manejo de desechos peligrosos de acuerdo con la NOM-087-
SEMARNAT SSA1-2002
Programas:
Esta norma corresponde a las normas ISO, y es específica para cubrir todos los aspectos del
funcionamiento del laboratorio clínico. Establece estándares internacionales a través de un
sistema de gestión de la calidad, por lo que su implantación y cumplimiento garantiza la
calidad total de los resultados informados por el laboratorio y pueden ser comparables.
Existen otras NMX aplicables y de gran importancia como la ISO-9000-2008 Sistema de
gestión de calidad- Fundamentos y vocabulario
8. CUADRO DE PRÁCTICA
7.- NOM.087 SEMARNAT ( 4 ) Indica tener una guía para la toma, identificación,
2002 manejo, conservación y transporte de muestras.
8.- General de Salud, Metrología (10) Normas obligatorias para el funcionamiento del
y Normalización laboratorio.
1. Mencione los elementos que va a administrar el Químico Clínico Jefe de Sección (2ª
Categoría) en el cumplimiento de sus actividades técnico-administrativas.
5. Describa qué son los recursos físicos y mencione dos áreas de trabajo.
7. ¿Qué recurso técnico permite tener una evaluación sistematizada de las actividades
del personal que desempeña sus funciones en el laboratorio clínico
8. ¿Qué recurso técnico permite conocer los procedimientos que rigen al personal
operativo del laboratorio?
9. ¿Cuál es el recurso que permite conocer los métodos y manejo del equipo utilizado
en la determinación de los exámenes?
3. Permite distribuir el personal con un adecuado manejo por áreas. Contiene: nombre,
turno, horario y días de descanso.
4. Son aquéllos que coadyuvan al logro de los objetivos del servicio, los cuales deben
ser de acuerdo a los análisis que se realizan en el laboratorio. Incluye los formatos
oficiales que se requieren en cada proceso de laboratorio, por ejemplo: hojas o libretas
de trabajo, bitácoras, para los diferentes registros (mantenidos al día) de resultados
de exámenes, controles, calibraciones, reactivos utilizados; funcionamiento y
mantenimiento de equipos, etc.
7. Guías de supervisión.
8. Normoteca.
10. Programa interno de control de calidad en las tres fases analíticas de los exámenes
realizados en el laboratorio.
V. MÓDULO 2. FUNCION DIRECTIVA Y ACTIVIDADES TÉCNICO
CATEGORÍA)
1. INTRODUCCIÓN
El Químico Clínico Jefe de Sección (2ª Categoría) asume una función directiva ante el
personal del laboratorio para dar cumplimiento a las funciones y actividades de su
competencia. En este módulo se dan a conocer sus actividades técnico-administrativas
generales y de supervisión.
3. FUNCIÓN DIRECTIVA
• Elaborar los informes requeridos en las fechas preestablecidas, así como los
extemporáneos y proporcionarlos oportunamente al jefe inmediato. Igualmente, dar
cuenta del resultado de las supervisiones efectuadas al personal bajo su
responsabilidad y del cumplimiento de los programas de la unidad médica y del
servicio, relacionados con su sección.
Actividades de supervisión
¿Qué es la supervisión?
Es un proceso dinámico y democrático que tiene por objeto encauzar las actividades de un
grupo de acuerdo con normas establecidas, para lograr la máxima eficiencia con satisfacción
mutua.
En los procesos realizados en el área de trabajo, el Químico Clínico Jefe de Sección (2ª
Categoría) debe propiciar las relaciones interpersonales satisfactorias para el usuario y el
personal.
El Químico Clínico Jefe de Sección (2ª Categoría) debe efectuar supervisiones diarias y
exhaustivas, para lo cual debe contar con una guía de supervisión., instrumento donde se
registre el cumplimiento de las actividades del personal, que facilite la observación de
irregularidades o incumplimiento de la norma en los procesos del laboratorio.
• Etapa preanalítica y sus variables. Incluye las condiciones previas del paciente, las
indicaciones proporcionadas, material y toma de muestra, su manejo y conservación,
condiciones de transporte si requiere.
1.- Químico jefe de sección (3) Efectúa toma de muestras para análisis clínicos;
numera, clasifica, revisa su estado y distribuye
muestras y solicitudes para laboratorio.
Sangra donadores en bancos
de sangre y unidades móviles. Ejecuta análisis clínicos
de laboratorio y procesa la sangre proveniente de
donadores Efectúa muestreo de medio ambiente,
superficies y alimentos.
2.- Supervisión fase analítica (4) incluye las condiciones previas del paciente, las
indicaciones proporcionadas, material y toma de
muestra, su manejo y conservación, condiciones de
transporte si requiere.
3.- Químico clínico (2) incluye la evaluación de los resultados de los controles
indicados en cada método con la aplicación del control
estadístico de los procesos
6. AUTOEVALUACIÓN
Esta fase incluye además la evaluación de los resultados de los controles indicados
en cada método por el fabricante y de acuerdo al diseño del propio laboratorio, con la
aplicación del control estadístico de los procesos utilizando diferentes herramientas,
como son los gráficos de Levey-Jennings, de Suma acumulada (cusum), de los
valores medios o de los datos de pacientes; las reglas de Westgard, las
especificaciones de operación (OPSpecs). También se incluyen en esta fase las
acciones derivadas de dicha evaluación.
Cada laboratorio debe establecer sus propios protocolos de examen, y considerar en su diseño
las condiciones del paciente antes de la toma de muestra y las instrucciones dadas para asistir
al laboratorio; el material necesario en el procedimiento para la toma de las diferentes
muestras, su identificación, condiciones de transporte si lo hay, y las condiciones de
conservación, antes y después de su análisis. Todo esto debe quedar asentado en la Guía de
toma de muestras para ser referido en cada protocolo o bien anotar lo correspondiente en
cada uno de éstos.
Es necesario considerar que los protocolos elaborados contengan la información completa
del método, del material y del procedimiento a utilizar tomando como base las indicaciones
del fabricante del equipo (inserto), así mismo anotar si se hace alguna modificación a las
indicaciones del fabricante con su respectiva validación para demostrar que se continúa
cumpliendo con el desempeño del método y los resultados obtenidos con estos cambios son
confiables.
Definición
Un perfil de riesgo coronario consiste en una serie de exámenes de sangre utilizados para
evaluar el colesterol y los triglicéridos, los cuales son indicadores de riesgo de cardiopatía.
La sangre se extrae de una vena, localizada en la parte interior del codo o del dorso de la
mano. El sitio de punción se limpia con un antiséptico y luego se coloca una banda elástica
alrededor del antebrazo con el fin de aplicar presión en la zona y hacer que las venas se llenen
de sangre. Se introduce una aguja en la vena y se recoge la sangre en un tubo especial de
recolección de sangre o en una jeringa; durante el procedimiento se retira la banda para
restablecer la circulación y, una vez que se ha recogido la sangre, se retira la aguja y se cubre
el sitio de punción con gasa o con un vendaje para detener cualquier sangrado.
En los bebés o niños pequeños, el área se limpia con un antiséptico y se punza con una aguja
o lanceta puntiaguda. La sangre se puede recoger en una pipeta, en un portaobjetos, en una
tira reactiva o en un tubo pediátrico. Finalmente, se puede aplicar un vendaje o algodón en el
sitio de la punción si hay algún sangrado persistente.
Valores normales
Los valores ideales para pacientes con arteriopatía coronaria conocida son diferentes de
aquellos que no padecen enfermedad coronaria. Los valores altos de HDL (60 o más) son
protectores y por lo tanto deseables.
Los exámenes de sangre adicionales, como la proteína C reactiva (PCR), se le pueden agregar
al perfil en algunos laboratorios.
• Sangrado excesivo
• Desmayo o sensación de mareo
• Hematoma (acumulación de sangre debajo de la piel)
• Infección (un riesgo leve cada vez que se presenta ruptura de la piel)
• Punciones múltiples para localizar las venas
• Consideraciones especiales
• Ataque cardíaco
• Enfermedad renal ateroembólica
• Hiperlipidemia familiar
• Hipertrigliceridemia familiar
• Hipercolesterolemia familiar
• Hiperlipidemia
• Miocardiopatía isquémica
• Accidente cerebrovascular secundario a la ateroesclerosis
• Accidente isquémico transitorio AIT)
Definición
Las pruebas que comúnmente se utilizan para evaluar la función hepática son, entre otras:
• Albúmina
• A1AT
• FA
• ALT
• AST
• GGT
• TP
• Bilirrubina en suero
• Bilirrubina en orina
3.1. Albúmina.
Este examen ayuda a determinar si un paciente sufre de una enfermedad hepática o de una
enfermedad renal o si no hay una absorción suficiente de proteína por parte del organismo.
Valores normales
• Ascitis
• Quemaduras (extensas)
• Glomerulonefritis
• Enfermedad hepática, como hepatitis, cirrosis o necrosis hepatocelular
• Síndromes de malabsorción (como enfermedad de Crohn, esprúe o enfermedad de
Whipple)
• Desnutrición
• Síndrome nefrótico
Otras afecciones bajo las cuales se puede realizar este examen son:
• Nefropatía/esclerosis diabética
• Encefalopatía hepática
• Síndrome hepatorrenal
• Nefropatía membranosa
• Esprúe tropical
• Enfermedad de Wilson
• Consideraciones especiales
3.2. A1AT.
Este examen sirve para determinar la causa de una forma poco frecuente de enfisema en los
adultos y una rara forma de cirrosis en los niños. En ausencia de A1AT, ciertas enzimas
digestivas liberadas por los glóbulos blancos pueden pasar inadvertidas y causar un extenso
daño en los pulmones y en el hígado.
Toda persona tiene dos copias del gen que produce la A1AT. La mayoría de las personas que
padecen la enfermedad poseen un gen normal para A1AT y otro anormal. Estas personas
presentan niveles de A1AT por debajo de lo normal, aunque no tan bajos como los individuos
que tienen dos copias anormales de los genes y generalmente una enfermedad más severa.
Valores normales
Los niveles de A1AT por debajo de lo normal pueden estar asociados con:
• Cirrosis
• EPOC o enfisema
• Tumores hepáticos
• Ictericia obstructiva
• Hipertensión portal
Es una proteína que se encuentra en todos los tejidos corporales. Los tejidos con cantidades
particularmente altas de FA abarcan el hígado, las vías biliares y los huesos.
La persona no debe comer ni beber nada durante un período de 6 horas antes del examen.
• Alopurinol
• Antibióticos
• Medicamentos antinflamatorios
• Píldoras anticonceptivas
• Algunos medicamentos para la artritis
• Algunos medicamentos para la diabetes
• Clorpromazina
• Cortisona
• Hormonas masculinas
• Metildopa
• Analgésicos narcóticos
• Propranolol
• Tranquilizantes
• Antidepresivos tricíclicos
Este examen se hace para diagnosticar enfermedad del hígado y del hueso o para ver si los
tratamientos para dichas enfermedades están funcionando. Puede incluirse como parte de las
pruebas de la función hepática de rutina.
Valores normales
Los valores normales pueden variar ligeramente de un laboratorio a otro, al igual con la edad
y el sexo de la persona. Los niveles altos de FA normalmente se observan en niños que
presentan un aumento repentino en su crecimiento y en las mujeres embarazadas.
• Anemia
• Obstrucción biliar
• Enfermedad ósea
• Consolidación de una fractura
• Hepatitis
• Hiperparatiroidismo
• Leucemia
• Enfermedad hepática
• Cánceres óseos osteoblásticos
• Osteomalacia
• Enfermedad de Paget
• Raquitismo
• Desnutrición
• Deficiencia de proteína
Algunas afecciones adicionales bajo las cuales se puede hacer el examen son:
Este examen se usa para determinar si un paciente tiene lesión hepática. La ALT es una
enzima involucrada en el metabolismo del aminoácido alanina. Esta enzima se encuentra en
muchos tejidos, pero las mayores concentraciones se dan en el hígado y, cuando hay una
lesión en dicho órgano, se presenta liberación de la enzima a la sangre.
Valores normales
• El rango normal puede variar de acuerdo con muchos factores que incluyen la edad y
el sexo.
3.5. AST.
Valores normales
3.6. GGT
Este examen se utiliza para detectar enfermedades del hígado, de las vías biliares y de los
riñones; e igualmente para diferenciar trastornos del hígado o de las vías biliares de la
osteopatía.
3.7. TP.
Tiempo de Protrombina
El médico le puede solicitar al paciente dejar de tomar ciertos medicamentos antes del
examen, un ejemplo de ello son los anticoagulantes que pueden afectar los resultados.
No se debe dejar de tomar ningún medicamento sin hablar primero con el médico.
Valores normales
El médico puede indicar la suspensión del uso de cualquier medicamento que pueda afectar
los resultados.
Los medicamentos que pueden aumentar las mediciones de bilirrubina abarcan alopurinol,
esteroides anabólicos, algunos antibióticos, antipalúdicos, azatioprina, cloropropamida,
colinérgicos, codeína, diuréticos, epinefrina, meperidina, metotrexato, metildopa,
inhibidores de la monoaminoxidasa (IMAO), morfina, ácido nicotínico, anticonceptivos
orales, fenotiazinas, quinidina, rifampina, salicilatos, esteroides, sulfonamidas y teofilina.
Los medicamentos que pueden disminuir las mediciones de bilirrubina abarcan barbitúricos,
cafeína, penicilina y las dosis altas de salicílico
Este examen sirve para determinar si el paciente tiene una enfermedad hepática o una
obstrucción en las vías biliares.
Valores normales
Si hay una obstrucción de las vías biliares, la bilirrubina directa se acumula, escapa del hígado
y termina en la sangre. Si los niveles son lo suficientemente altos, una parte aparecerá en la
orina. Sólo la bilirrubina directa aparece en la orina. El aumento de la bilirrubina directa
generalmente significa que las vías biliares (secreción hepática) están obstruidas.
• Síndrome de Crigler-Najjar
• Eritoblastosis fetal
• Enfermedad de Gilbert
• Cicatrización de un hematoma grande (sangrado bajo la piel)
• Anemia hemolítica
• Enfermedad hemolítica del recién nacido
• Ictericia fisiológica (normal en los recién nacidos)
• Anemia drepanocítica
• Reacción a una transfusión
• Anemia perniciosa
• Resolución de un gran hematoma
Otras afecciones bajo las cuales se puede realizar este examen son:
• Estenosis biliar
• Colangiocarcinoma
• Colangitis
• Coledocolitiasis
• Anemia hemolítica debido a deficiencia de G6PD
• Encefalopatía hepática
• Anemia aplásica idiopática
• Anemia hemolítica autoinmunitaria idiopática
• Anemia hemolítica inmunitaria (incluyendo anemia hemolítica inmunitaria inducida
por medicamentos)
• Anemia aplásica secundaria
• Púrpura trombocitopénica trombótica
• Enfermedad de Wilson
• Consideraciones especiales
• Alopurinol
• Barbitúricos
• Píldoras anticonceptivas
• Algunos antibióticos
• Clorpromazina
• Diuréticos
• Etoxazeno
• Fenazopiridina
• Esteroides
• Sulfamidas
Los medicamentos que pueden reducir el nivel de bilirrubina abarcan indometacina y ácido
ascórbico.
Este examen se puede realizar para diagnosticar problemas del hígado o de la vesícula biliar.
Valores normales
• Estenosis biliar
• Cirrosis
• Cálculos en el tracto biliar
• Hepatitis con una obstrucción biliar asociada
• Trauma quirúrgico que afecta el tracto biliar
• Tumores del hígado o de la vesícula biliar
4. PRUEBAS DE FUNCIONAMIENTO TIROIDEO
RAIU de Yodo
T3
T4
La captación de yodo radiactivo (RAIU) es un tipo de examen nuclear que mide qué tanto
yodo radiactivo es captado por la tiroides en un determinado período de tiempo. Para el
examen, se le solicita a la persona ingerir yodo radiactivo (I-123 o I-131) en cápsulas o
líquido y después de un período que generalmente es de 6 a 24 horas, la persona debe regresar
para que se le mida la radiactividad
Se coloca una sonda gama en la glándula tiroides en el cuello para medir la cantidad de
radiactividad presente en esta glándula. Esta cantidad se compara con la dosis original de
radiactividad y se reporta luego como un porcentaje de la dosis original.
La persona no debe consumir alimentos durante las 8 horas anteriores a la realización del
examen.
En caso de tener antecedentes de factores que puedan afectar el resultado del examen, esta
información se debe suministrar al médico. Es posible que el médico recomiende suspender
el yodo y los medicamentos tiroideos o antitiroideos una semana antes de la realización del
examen.
El examen se realiza para evaluar la función tiroidea, en especial cuando los exámenes de
sangre de función tiroidea, como por ejemplo los niveles de T3 ó T4, han arrojado resultados
anormales.
Valores normales
Nota: algunos laboratorios solamente realizan la medición a las 24 horas. Es posible que se presente
cierta variabilidad en los valores con la ingestión de yodo en la dieta y con las diferencias en los
procedimientos de los laboratorios.
• Hipertiroidismo
• Tiroiditis de Hashimoto (temprana)
• Bocio
Disminuidos:
• Hipotiroidismo
• Tiroiditis subaguda
• Sobrecarga de yodo (ingestión excesiva de yodo)
• Ver también "Consideraciones especiales".
Algunas afecciones adicionales bajo las cuales se puede realizar este examen son:
Consideraciones especiales
Algunos de los medicamentos que pueden disminuir los resultados son la ACTH, los
antihistamínicos, los corticosteroides, la solución de Lugol, los nitratos, la solución saturada
de yoduro de potasio (SSKI), los medicamentos tiroideos y antitiroideos y la tolbutamida.
4.2. T3 (Triyodotironina)
Algunas veces, cuando se está controlando la función tiroidea, es de mucha utilidad medir
ambas hormonas, la T3 y la T4. Por ejemplo, en algunos casos de hipertiroidismo, la T4
puede estar normal pero la T3 elevada.
La mayoría de la hormona T4 y T3 del cuerpo está unida a las proteínas de la sangre que
sirven como transportadoras. La prueba que mide la T3 mide ambas, la T3 unidas a las
proteínas y la T3 "libre" flotando en la sangre. La fracción libre es la hormona que está activa.
Las condiciones que aumentan los niveles de las proteínas transportadoras -como el
embarazo y las enfermedades del hígado- elevan de manera falsa el nivel de la T3. En estos
casos, es aconsejable medir ya sea el nivel de la hormona T3 libre o realizar la prueba RT3U,
que da una medida de la cantidad de la proteína transportadora.
Las hormonas T3 y T4 son importantes en la regulación del metabolismo. No se comprenden
los mecanismos exactos, pero se sabe que la hormona T4 aumenta las concentraciones de
numerosas enzimas involucradas en la producción de energía en el cuerpo.
Valores normales
• Enfermedad crónica
• Hipotiroidismo (por ejemplo, enfermedad de Hashimoto)
• Inanición
Las drogas que pueden aumentar las mediciones de T3 son: clofibrato, estrógenos, metadona
y anticonceptivos orales.
Las drogas que pueden disminuir las mediciones de T3 son: esteroides anabolizantes,
andrógenos, drogas antitiroideas (por ejemplo, el propiltiouracilo), litio, fenitoína y
propranolol.
4.3. T4 (Tiroxina)
Este examen puede realizarse como parte de la evaluación de la función tiroidea que es
compleja y depende de la acción de muchas hormonas diferentes:
La mayoría de las T3 y T4 son transportadas por la globulina fijadora de tiroxina (TBG), pero
cantidades más pequeñas se encuentran en la prealbúmina y albúmina. Cuando no están
unidas a las proteínas, son llamadas T3 y T4 "libres".
Valores normales
Los niveles de T4 superiores a los normales junto con niveles bajos de TSH pueden indicar
afecciones hipertiroideas, tales como:
• Enfermedad de Graves
• Bocio multinodular tóxico
• Tiroiditis subaguda o crónica
• Enfermedad de Hashimoto temprana
• Hipertiroidismo inducido por yodo
• Tumores de células madre
• Enfermedad trofoblástica
• Hipopituarismo
• Hipotiroidismo primario
• Hipotiroidismo secundario
• Parálisis periódica tirotóxico
Algunos de los medicamentos que pueden aumentar las mediciones de T4 son: clofibrato,
estrógenos, metadona, amiodarona y pastillas anticonceptivas.
Algunas de los medicamentos que pueden disminuir las mediciones de T4 son: esteroides
anabolizantes, andrógenos, fármacos antitiroideos (por ejemplo, el propiltiouracilo y
metimazol), litio, fenitoína, propranolol, amiodarona, interferón alfa e interlucina 2.
5. URIANÁLISIS
El examen del volumen urinario en 24 horas mide la cantidad de orina producida en un día.
Para los bebés, es necesario lavar completamente el área alrededor de la uretra y abrir una
bolsa colectora de orina (bolsa plástica con una cinta adhesiva en un extremo) y luego colocar
la bolsa en el bebé. A los niños se les puede introducir todo el pene dentro de la bolsa y pegar
el adhesivo a la piel; mientras que a las niñas se les coloca la bolsa sobre los labios mayores.
El pañal se coloca como de costumbre sobre la bolsa asegurada.
Es posible que se tenga que repetir el procedimiento, dado que los bebés activos pueden
desplazar la bolsa, haciendo que la muestra sea absorbida por el pañal. Se debe revisar al
bebé frecuentemente y retirar la bolsa después de que éste haya orinado en ella. La orina se
vierte de la bolsa al recipiente suministrado por el médico o el laboratorio.
Se debe entregar la muestra al laboratorio tan pronto como sea posible después de terminar
de recogerla.
De ser necesario, el médico le dará instrucciones a la persona para dejar de tomar cualquier
medicamento que pueda interferir con los resultados del examen.
Valores normales
• Rango normal es de 800 a 2000 mililitros por día (con una ingesta de líquido normal
de aproximadamente 2 litros por día).
Nota: los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios.
Los trastornos que causan disminución del volumen de orina son, entre otros: deshidratación,
ingesta inadecuada de líquidos o insuficiencia renal.
Algunas de las afecciones que causan aumento del volumen de orina son, entre otras:
Para este examen, se necesita la recolección de orina de 24 horas u orina obtenida por micción
limpia.
La toma limpia es un método de obtención de una muestra de orina que se envía para hacer
varias pruebas, incluyendo análisis (examen general de orina) y/o cultivo de orina.
Para obtener la muestra de orina limpia, los hombres y los niños deben tener limpia la cabeza
del pene y las mujeres deben lavar el área que hay entre los labios con agua y jabón y enjuagar
muy bien. Algunas veces, se suministra un equipo para tomar la muestra limpia, el cual trae
una solución de limpieza y pañuelos estériles.
Después de orinar una pequeña cantidad dentro de la taza del baño para limpiar la uretra de
sustancias contaminantes, se recoge una muestra de orina en un recipiente limpio o estéril.
Se necesitan aproximadamente de una a dos onzas de orina para el examen. Se retira luego
el recipiente del chorro de orina sin dejar de orinar y se termina con el proceso de micción.
Luego, se lleva la muestra al laboratorio en un máximo de 2 horas para su análisis.
Para bebés:
Se limpia y se seca el área genital y luego se adhiere la bolsa colectora para recoger la muestra
de orina. Si al adulto le piden que recoja la muestra de orina, debe asegurarse que el
dispositivo de recolección esté bien ajustado para prevenir filtraciones. Después de que el
bebé ha orinado, se transfiere la orina (al menos 20 cm3) a un recipiente limpio o estéril según
sea el caso.
consta de muchos exámenes para detectar y medir diversos compuestos que salen a través de
la orina.
El examen general de orina permite analizar algunos aspectos físicos, químicos y la presencia
de elementos anormales en la orina como:
Con una tira especial ("tira reactiva") se evalúan diversas sustancias en la orina. La tira
reactiva contiene pequeñas almohadillas de químicos que cambian de color cuando entran en
contacto con las sustancias que interesa analizar.
• Apariencia microscópica:
La muestra de orina se examina bajo un microscopio. Esto se hace para observar células,
cristales urinarios, moco y otras sustancias, al igual que para identificar elementos anormales
como sangre, espermatozoides, cilindros, cristales y cualquier tipo de bacterias, levaduras u
otros microorganismos que pudieran estar presentes.
• Cloroquina
• Suplementos de hierro
• Levodopa
• Nitrofurantoína
• Fenazopiridina
• Fenotiazinas
• Fenitoína
• Riboflavina
• Como parte de un examen médico de rutina para detectar los signos iniciales de una
enfermedad.
• Si la persona tiene signos de diabetes o enfermedad renal, o para vigilar si está
recibiendo tratamiento para tales afecciones
• Para verificar la presencia de sangre en la orina
• Para diagnosticar infecciones urinarias
Otras afecciones por las cuales se puede realizar el examen son:
Valores normales
Nota: el examen general de orina no debe ser utilizado por si solo para el diagnóstico de algún
problema urinario.
Se recomienda comer una dieta balanceada y normal durante varios días antes del examen.
Este examen ayuda a evaluar el equilibrio hídrico y la concentración de orina del cuerpo.
Valores normales
• Deshidratación
• Diarrea
• Sudoración excesiva
• Glucosuria
• Insuficiencia cardiaca (relacionada con la disminución del flujo sanguíneo a los
riñones)
• Estenosis de la arteria renal
• Síndrome de secreción inadecuada de hormona antidiurética (SIADH)
• Vómitos
• Restricción hídrica
Consideraciones especiales
6. BACTERIOLOGÍA
Un cultivo se puede llevar a cabo empleando una muestra de sangre, tejido, materia fecal,
orina u otro líquido del cuerpo. Como, por ejemplo:
Cultivo bronquial
Cultivo de LCR
Cultivo endocervical
Coprocultivo
Cultivo de exudado faríngeo
Cultivo de secreción uretral
Urocultivo
6.1. Exudado Faríngeo.
Es una prueba de laboratorio que se hace para aislar e identificar organismos que puedan
causar una infección en la garganta.
Se inclina la cabeza hacia atrás con la boca bien abierta y se frota la parte posterior de la
garganta con un hisopo o aplicador de algodón estéril cerca de las amígdalas y en cualquier
zona enrojecida o llaga. La persona debe contener las náuseas y no cerrar la boca mientras el
aplicador toca la parte posterior de la garganta cerca de las amígdalas.
Con el fin de mejorar las probabilidades de detectar bacterias, el aplicador se puede utilizar
para raspar la parte posterior de la garganta varias veces.
No se deben usar enjuagues bucales antisépticos antes del examen, tener un ayuno mínimo
de 8 horas, sin haber tomado antibiótico de 3 a 4 días antes.
La garganta puede doler al momento del examen e igualmente se puede experimentar una
sensación de náuseas cuando se toca la parte posterior de la garganta con el aplicador de
algodón, pero el examen sólo dura unos cuantos segundos.
Este examen se realiza cuando se sospecha de una infección en la garganta, en particular, una
faringitis estreptocócica.
Valores normales
Se necesita una muestra de secreción del oído. Se empleará un medio de transporte con
hisopo o aplicador de algodón para recolectar la muestra del interior del conducto auditivo
externo. En algunos casos, se recoge una muestra del oído medio durante una cirugía de oído.
La muestra se envía al laboratorio y se coloca en una placa Petri con medio de cultivo que
permite que las bacterias crezcan en el laboratorio
El personal de laboratorio revisa la caja todos los días para ver si ha habido proliferación de
bacterias, hongos o virus. Se pueden hacer exámenes adicionales para identificar
específicamente al microorganismo y determinar el mejor tratamiento.
No se presenta ningún dolor relacionado con el hecho de usar un hisopo de algodón para
tomar una muestra de secreción del oído externo. Sin embargo, se puede presentar dolor de
oído si éste está infectado.
El examen se puede realizar si hay:
Una infección del oído externo (ver otitis externa)
Una infección del oído con un tímpano roto y secreción de líquido
Una infección del oído que no está respondiendo al tratamiento
También se puede hacer como parte rutinaria de una miringotomía.
Nota: las infecciones del oído se diagnostican con base en los síntomas más que en un cultivo.
Valores normales
Los resultados anormales pueden ser un signo de infección por una bacteria, un virus o un
hongo.
Los resultados del examen pueden revelar cuál microorganismo específico está
causando la infección.
6.2.2. Coprocultivo
Es un examen de laboratorio para encontrar organismos en las heces (materia fecal) que
puedan causar enfermedad y síntomas gastrointestinales.
Hay muchas formas de recolectar las muestras. Una forma es recoger las heces en un
envoltorio plástico que se coloca suelto sobre la taza del inodoro y se sostiene en su lugar
con el asiento. Luego, se coloca la muestra en un recipiente limpio. Un equipo para
recolección de la muestra trae una gasa especial que se usa para recogerla y que luego debe
colocarse en un recipiente limpio.
Para bebés y niños pequeños en pañales, se cubre el pañal con un envoltorio plástico, tratando
de colocarlo de tal forma que separe las heces de la orina, a fin de obtener una mejor muestra.
El personal de laboratorio coloca una pequeña muestra en un medio de cultivo para estimular
el crecimiento de microorganismos, posteriormente se transfiere con un asa bacteriológica a
un medio selectivo. Se vigila el cultivo para verificar el crecimiento y, si éste se presenta, se
identifican los organismos y se realiza exámenes de sensibilidad de antibióticos para
determinar la forma como responde el organismo al tratamiento.
La persona recibirá el recipiente colector para recoger la muestra de materia fecal, la cual se
debe retornar al laboratorio lo más pronto posible. La muestra no debe incluir papel higiénico
ni orina.
Valores normales
Es una muestra de las secreciones de la parte superior de la garganta, detrás de la nariz. Estas
secreciones se colocan en un medio de cultivo para detectar la presencia de posibles
microorganismos patológicos.
Se le pide al paciente que tosa antes de comenzar el examen y que incline su cabeza hacia
atrás. Se pasa un aplicador (hisopo) de algodón con suavidad a través de la fosa nasal hasta
la nasofaringe, la porción de la faringe que se encuentra sobre el techo de la boca. Se hace
rotar el aplicador (hisopo) rápidamente y luego se retira.
El paciente puede experimentar una leve molestia, sentir náuseas o querer estornudar
Con este examen se identifican los microorganismos que causan los síntomas del tracto
respiratorio superior. Los cultivos nasofaríngeos sirven para identificar virus respiratorios y
bacterias tales como Staphyloccus aureus, Bordetella pertussis y Neisseria meningitidis.
El cultivo puede usarse para ayudar a determinar la terapia con antibióticos apropiada.
Valores normales
La presencia de cualquier virus, bacteria u hongo patógeno significa que hay una infección.
Es un examen de laboratorio que se lleva a cabo en los hombres para identificar organismos
en la uretra y en el tracto genital que causan infecciones.
Se limpia el orificio de la uretra (en el extremo del pene) del paciente con un algodón o gasa
estéril, para luego insertar, con suavidad, un aplicador (hisopo) de algodón cerca de 3/4 de
pulgada en la uretra y girarlo suavemente. La muestra es recolectada por lo menos una hora
después de orinar, para asegurar una buena calidad de esta.
El paciente no puede orinar durante una hora antes del examen debido a que la micción
arrastra algunos de los organismos necesarios para obtener un cultivo confiable.
Este examen se realiza para detectar enfermedades de transmisión sexual, como gonorrea y
Clamidia, y a menudo cuando hay secreción uretral.
Valores normales
Los resultados anormales pueden indicar infección dentro del aparato genital, lo cual puede
abarcar infecciones como gonorrea o Clamidia
Ocasionalmente, se presentan desmayos producidos por la estimulación del nervio vago
cuando el aplicador (hisopo) es introducido en la uretra. Hay otros riesgos como infecciones
o sangrado.
6.2.5. Hemocultivo
Cultivo de sangre
Se necesita una muestra de sangre. Clásicamente, la sangre se extrae de una vena, por lo
general de la parte interior del codo o del dorso de la mano. El sitio de punción se limpia con
un antiséptico (Iodo). Se coloca una banda elástica alrededor de la parte superior del brazo
con el fin de aplicar presión en el área y hacer que la vena se llene de sangre.
Una vez que se ha recogido la muestra de sangre, se retira la aguja y se cubre el sitio de
punción para detener cualquier sangrado. Es importante llevar a cabo las medidas de
bioseguridad, como el uso de guantes.
Se recomienda realizar dos tomas de hemocultivo por punción de vena periférica y otra a
través del catéter.
El médico puede ordenar este examen si la persona tiene síntomas de una infección en la
sangre, como bacteriemia o septicemia.
Consideraciones especiales
Una infección bacteriana de la sangre algunas veces aparece y desaparece, de forma que se
puede realizar una serie de tres hemocultivos para confirmar los resultados.
6.2.6. Urocultivo.
La toma limpia es un método de obtención de una muestra de orina que se envía para hacer
varias pruebas, incluyendo análisis y cultivo de orina.
Para obtener la muestra de orina limpia, los hombres y los niños deben tener limpia la cabeza
del pene y las mujeres deben lavar el área que hay entre los labios con agua y jabón y enjuagar
muy bien. Algunas veces, se suministra un equipo para tomar la muestra limpia, el cual trae
una solución de limpieza y pañuelos estériles.
Después de orinar una pequeña cantidad dentro del inodoro (para limpiar la uretra de
sustancias contaminantes), se recoge una muestra de orina en un recipiente limpio o estéril.
Se necesitan aproximadamente de una a dos onzas de orina para el examen. Se retira luego
el recipiente del chorro de orina sin dejar de orinar y se termina con el proceso de micción.
Luego, se lleva la muestra al laboratorio.
Para bebés:
Se limpia y se seca el área genital y luego se adhiere la bolsa colectora para recoger la muestra
de orina. Si al adulto le piden que recoja la muestra de orina, debe asegurarse que el
dispositivo de recolección esté bien ajustado para prevenir filtraciones. Después de que el
bebé ha orinado, se transfiere la orina (al menos 20 cm3) a un recipiente estéril.
No se deben usar antisépticos, ya que pueden impedir el crecimiento de bacterias durante el
cultivo.
Se utiliza el método de toma limpia para evitar la contaminación de la muestra de orina con
bacterias que suelen estar presentes en la uretra y que aparecen en las muestras de orina
excretada. Para realizar un cultivo de orina se requieren muestras de orina no contaminadas
para que los resultados sean precisos.
Valores normales
Si la muestra de orina fue enviada para hacer un cultivo, el crecimiento de bacterias puede
indicar una infección del tracto urinario o una infección en la vejiga.
Consideraciones especiales
Cultivo endocervical; cultivo del tracto genital femenino; cultivo vaginal; cultivo del
cuello uterino
Es un examen de laboratorio que implica tomar muestras del endocérvix y utilizarlas para
aislar e identificar el (los) organismo(s) causantes de una infección en el tracto genital
femenino.
Se siente una presión producida por el espéculo (instrumento que se inserta en la vagina para
mantener abierto el canal de nacimiento) con el fin de poder observar el cuello uterino y
recolectar la muestra. Puede haber una leve sensación de cólico cuando se toca el cuello
uterino con el aplicador (hisopo).
El examen se puede realizar para determinar la causa de una vaginitis, de una secreción
vaginal inusual o de otros signos y síntomas de infección. También se usa para la detección
de enfermedades de transmisión sexual.
Valores normales
Los resultados anormales indican la presencia de una infección en el tracto genital femenino.
Mediante un cultivo se pueden detectar Clamidia, gonorrea, herpes simple, E. coli, C.
trachomatis, estreptococos del grupo A u otros microorganismos.
Otras condiciones para las cuales se puede realizar este examen son:
• Clamidia en la mujer
• Uretritis crónica
• Gonococcemia (diseminada)
• Enfermedad inflamatoria pélvica (EIP)
Técnicas de Biología Molecular más comunes en el Diagnóstico Clínico.
La reacción en cadena de la polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en inglés
(Polymerase Chain Reaction), es una técnica de biología molecular descrita en 1986 por
Kary Mullis, cuyo objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN
particular, partiendo de un mínimo; en teoría basta partir de una única copia de ese fragmento
original, o molde.
Esta técnica sirve para amplificar un fragmento de ADN; su utilidad es que, tras la
amplificación, resulta mucho más fácil identificar y con una mayor probabilidad a los virus
o bacterias causante de una enfermedad, identificar personas (cadáveres) o hacer
investigación científica sobre el ADN amplificado.
El ADN amplificado por PCR se puede secuenciar, visualizar por electroforesis en gel o en
un plásmido para otros experimentos
Estos usos derivados de la amplificación han hecho que se convierta en una técnica muy
extendida, con el consiguiente abaratamiento del equipo necesario para llevarla a cabo.
Fundamento e importancia
Esta técnica se fundamenta en la propiedad natural de las ADN polimerasas para replicar
hebras de ADN, para lo cual emplea ciclos de altas y bajas temperaturas alternadas para
separar las hebras de ADN recién formadas entre sí tras cada fase de replicación y, a
continuación, dejar que vuelvan a unirse a polimerasas para que vuelvan a duplicarlas.
Puesto que las temperaturas del ciclo (95 ºC en las fases de desnaturalización del ADN)
suponen la inmediata desnaturalización de toda proteína, se emplean ADN polimerasas
termoestables, extraídas de microorganismos adaptados a vivir a esas temperaturas,
restrictivas para la mayoría de los seres vivos. Dichos microorganismos, generalmente
arqueas, son: Thermus aquaticus (polimerasa Taq), Pyrococcus furiosus (Pfu),
Thermococcus litoralis (Vent) y Thermus termophilus (Tth). Generalmente se emplean
mezclas de polimerasas muy procesivas (Taq) con otras con corrección de errores (Pfu,
Vent).
Un ciclo de PCR consta de tres etapas: desnaturalización, anillamiento y extensión. Los
productos de la PCR se duplican, teóricamente, después de cada ciclo. Por eso, después de n
ciclos de PCR la secuencia de la diana se puede amplificar 2n veces.
Todo el procedimiento se lleva a cabo en un termociclador programable que controla con
exactitud la temperatura a la que se producen las etapas, la cantidad de tiempo en el que se
mantiene la reacción a las diferentes temperaturas y el número de ciclos
Aplicaciones
Investigación
La PCR convencional se emplea como base para multitud de técnicas en el laboratorio debido
a su robustez y rapidez. De este modo, la PCR de punto final permite controlar y detectar los
fragmentos de ADN de interés.
Clonación de un segmento de ADN mediante amplificación con cebadores que contienen una
secuencia apta para la recombinación dirigida con un plásmido.
Una aplicación de la PCR de extrema importancia es la clonación de secuencias de ADN en
vectores, como pueden ser los plásmidos. Para ello, se emplean cebadores que contienen en
su extremo 5' una corta secuencia que permite la interacción posterior con otra
complementaria situada en el vector de clonación a emplear. Por ejemplo, se puede incluir
una diana de restricción en dichos cebadores, de modo que, y si ésta no existía previamente
en el fragmento y es única en el vector, pueda efectuarse una ligación mediante la ligasa de
T4 tras la digestión con la enzima de restricción apropiada de ambos elementos. Otro método
asimilable a esta vía es el empleo de la recombinación dirigida; esto es, se adapta al 5' de los
cebadores una secuencia que faculta a una recombinasa la recombinación dirigida con un
vector dado.
Medicina
• La PCR también se puede usar en revisiones médicas rutinarias, como en los servicios
de donantes de sangre, para test de rutina. A través de esta técnica se pueden detectar
infecciones peligrosas en el donante (como VIH o Hepatitis B) mientras aún están en
el periodo de incubación. Dada la sensibilidad de los test de PCR se pueden tomar
muestras colectivas o "pools" (por ejemplo, 96 pruebas individuales). Si una de estas
muestras colectivas da positivo, se toman a partir de ella muestras progresivamente
menores hasta que se encuentra el causante.
8. Western Blot
9. ELISA
Este método ha tenido una enorme aplicación en todos aquellos campos en los que se
precisaba la cuantificación de productos mediante anticuerpos: diagnóstico clínico, detección
viral, clasificación de anticuerpos en isotipos, búsqueda de anticuerpos monoclonales, etc.
La citometría de flujo es una técnica de análisis celular ampliamente utilizada en los equipos
de Hematología Clínica, que implica medir las características de dispersión de luz y
fluorescencia que poseen las células conforme se las hace pasar a través de un rayo de luz.
Para su análisis por citometría de flujo, las células deben encontrarse individualmente en
suspensión en un fluido. Las células sanguíneas pueden analizarse prácticamente de manera
directa, las células de tejidos sólidos deben primero dispersarse. Las células pueden hacerse
pasar a muy altas velocidades (pueden llegar a alcanzarse velocidades cercanas a las 100,000
células por segundo).
Al atravesar el rayo de luz, las células interaccionan con este causando dispersión de la luz,
basándose en la difracción de la luz en sentido frontal, se puede evaluar el tamaño de las
células que pasan y al medir la reflexión de la luz de manera lateral se evalúa la granularidad
o complejidad de estas. Además de la dispersión de la luz, si previamente a su análisis se
coloca a las células en presencia de anticuerpos monoclonales marcados con moléculas
fluorescentes, se pueden evaluar que células poseen los antígenos complementarios a los
anticuerpos monoclonales usados.
11. Electroforesis.
Electroforesis en gel
La electroforesis en gel es un grupo de técnicas empleadas por los científicos para separar
moléculas basándose en propiedades como el tamaño, la forma o el punto isoeléctrico. La
electroforesis en gel se utiliza generalmente con propósitos analíticos, pero puede ser una
técnica preparativa para purificar moléculas parcialmente antes de aplicar una espectroscopía
de masas, una PCR, una clonación o una secuenciación de ADN.
Significado
La segunda parte del nombre, gel se refiere a la matriz usada para separar las moléculas. En
muchos casos un gel es un polímero entrelazado de porosidad controlable. Cuando la
separación es de proteínas, ADN o ácidos nucleicos pequeños (ADN, ARN o
ribonucleótidos), el gel está compuesto por diferentes concentraciones de acrilamida/bis-
acrilamida y un iniciador de la polimerización, para producir redes de poliacrilamida de
diferentes tamaños. Para separar ácidos nucleicos grandes (más de unos centenares de bases),
la matriz empleada es agarosa purificada. En ambos casos, el gel forma una matriz sólida
pero porosa. La acrilamida, en contraste con la poliacrilamida, es una neurotoxina y debe ser
manejada cuidadosamente para evitar envenenamientos.
12. REFERENCIAS