PRÁCTICA DE

LABORATORIO:

LIMPIEZA,
DESINFECCIÓN Y
ESTERILIZACIÓN
 Nombre: Georgia Martínez Rodríguez y
Carlos Martinez Quesada

CICLO: Grado Superior Química y Salud Ambiental PNT N.º 1

MÓDULO: USA (Unidad de Salud Ambiental)

INTRODUCCIÓN

La limpieza consiste en la eliminación de la suciedad, es decir de la materia

orgánica del medio. Eliminando la suciedad indirectamente le estamos
quitando a los microrganismos patógenos las condiciones favores para su
desarrollo y su sustento, así como gran parte de su alimentación. Por lo tanto,
con la limpieza eliminaremos la materia orgánica y algunos microorganismos
patógenos.

La desinfección es un procedimiento mediante el cual se eliminan la mayoría

de los organismos patógenos. La desinfección puede ser física y química, como
por ejemplo métodos con calor, radiación ultravioleta, ultrasonidos y
desinfectantes. La desinfección no elimina las esporas, ya que estas son estados
mucho más resistentes que los organismos patógenos.

Por último, la esterilización destruye todos los microorganismos que presenta el

medio, también puede darse por medios físicos o químicos. Con este método
logramos eliminar incluso los estados de resistencia, las esporas.

OBJETIVO

Asociar los conocimientos tóricos del tema 4 con la práctica del laboratorio,
pudiendo visualizar en vivo todos los procedimientos, y poder relacionarlos con
las conclusiones finales.

MATERIALES

PLACA DE PETRI HISOPO ESTÉRIL

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Carlos Martinez Quesada

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ESTUFA 31-37ºC AUTOCLAVE

MECHERO BÜNSEN

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REACTIVOS

Agua y jabón (limpieza)

Viricida en gel para manos (Desinfección)

Muestra del telefonillo de la puerta de entrada del IES Escultor Juan Villanueva.

Uno de los reactivos más destacados a la hora de llevar a cabo cualquier

práctica de microbiología es el medio de cultivo. En este caso nuestras placas
de Petri contenían PCA. El PCA es agar para métodos estándar, es un medio de
cultivo muy utilizado en el laboratorio y sirve para el recuento de
microorganismos aerobios por método de inoculación superficial (sembrado) o
en profundidad (inyectando), tiene un alto contenido nutricional de cara a un
amplio rango de microorganismos.

El digerido enzimático de caseína proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y

aminoácidos esenciales para el crecimiento. La dextrosa es el carbohidrato
fermentable que proporciona carbono y energía.

Esta recomendada por la ISO 4833 para la técnica de recuento de colonias de

microorganismos a 30ºCen la cadena alimentaria. Fue el medio de cultivo ideal
en esta práctica ya que al hacer crecer microorganismos de superficies los
cuales desconocíamos, este medio nos da bastante margen para poder
observar muchos tipos diferentes de microorganismos

PROCEDIMIENTO

1. En primer lugar rotularemos las placas de Petri, estableciendo que la zona

sucia es nuestra mano tal cual llegamos, la limpia es después de llevar a cabo
todo el proceso de lavado con agua y jabón, la desinfectada es al echar el
viricida tras el lavado y, por último, la superficie, es el timbre de la entrada del
instituto

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SUCIA LIMPIA
DESINF SUPERF

2. En primer lugar, encendemos el mechero Bünsen para esterilizar el ambiente

a la hora de abrir las placas de Petri e impedir que otros microorganismos que
no sean los de nuestras manos se instalen en el medio.

3. Abrimos la placa y deslizamos el dedo en zigzag por el área que delimita

como sucia, teniendo en cuenta que va a haber un crecimiento y que no
podemos pegarnos mucho a la línea del medio para que no se creen
interferencias entre ambas zonas.

4. Cerramos la placa y llevamos a cabo todo el procedimiento de limpieza con

agua y jabón.

5. Vamos de nuevo a las placas y llevamos a cabo el mismo procedimiento que

en el punto 3.

6. A continuación nos echaremos el viricida en las manos ya limpias dejándolas

secar al aire.

7. Una vez más procedemos a dejar la muestra tal cual os indica el punto 3.

8. Una vez recogidas las muestras pertinentes y llevados a cabo todos los
procedimientos en nuestras placas, las meteremos en la estufa, las placas fueron
metidas por primera vez el día 10 de marzo de 2022 a las 9:10 am, a 37ºC.

9. A las 9:50 am las placas fueron retiradas de la estufa para sembrar la muestra
cogida de la superficie.

10. Por último, recogeremos la muestra con un hisopo estéril del timbre del
instituto, pasándolo bien por todos los lados.

11. Deslizaremos el hisopo por el área arcada como superficie.

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12. Las placas fueron metidas en la estufa hasta el viernes 11 de marzo a 4ª hora,
donde visualizamos estos resultados.

13. El viernes cambiamos las placas de la estufa a 31ºC, y permanecieron allí

hasta el martes, esto fue lo que observamos:

FLAMEADO:
Es un proceso donde se utiliza el mechero Bunsen como esterilizante de
material. En este proceso lo que hacemos es coger un asa de siembra y la
colocamos encima de la llama oxidante del mechero, con una postura
inclinada hasta que el asa se vuelva incandescente. Una vez esterilizado
dejamos enfriar durante unos segundos y podremos sembrar.

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Gestión de residuos:

La gestión de residuos la realizamos a través de la autoclave. Lo primero que

hacemos es meter las placas con cuidado para que no se abran en una bolsa
esterilizante que posteriormente vamos a enrollar la parte superior para cerrarla
y la cerramos con la cinta adhesiva indicadora de esterilización (para que la
bolsa no reviente en la autoclave por la presión hay que hacerle unos pequeños
agujeros antes de meterla). Una vez lo metemos en la autoclave cerramos
herméticamente este y lo encendemos, ponemos el programa con las
características de 1 atm, a 121ºC durante 31 minutos. Una vez acaba la
autoclave, sacamos la bolsa a que enfrié un poco antes de depositarla en la
basura, ya que como va a estar esterilizado no va a ver riesgo biológico.

CONCLUSIONES

En conclusión, sacamos que la practica salió bien, la zona superior de la placa

era la de Georgia, y esta estaba bien organizada, ya que habían salido muchas
levaduras en la zona sucia mientras iban disminuyendo en la limpia y la
desinfectada, en cuanto la zona de Carlos la zona sucia se aprecia bien las
levaduras, pero en la limpieza y desinfección encontramos casi las mismas,
además en la superficie no nos salió nada, eso quería decir que esta super
desinfectada.

Encontrábamos muchas levaduras (La levadura es un hongo unicelular que se

alimenta de azúcares y compuestos hidrogenados a través de las enzimas que
produce) en la parte inferior de esta tienen una forma característica en formas
similares a una nube y las de la zona superior en forma de circulo.

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