Laboratorio de Bacteriología

Elaborado: Dra. Rosario Figueroa

 Género Bacillus y Clostridium

Objetivos:
1. Identificar las características morfológicas celulares y coloniales de los
géneros Bacillus y Clostridium.
2. Utilizar adecuadamente los esquemas y procedimientos de identificación para
diferenciar a nivel de género y especie utilizando esquemas de identificación.
3. Describir los fundamentos de las pruebas bioquímicas claves para la
identificación de las especies más importantes de estos géneros.
4. Determinar las diferencias bioquímicas, morfológicas celulares y coloniales
útiles para diferenciar entre los géneros y especies.
 Introducción:
Género Bacillus y Clostridium
La esporulación

Son formadoras de
esporas muchos
Es un tipo de géneros de bacterias
resistencia que permite siendo las más
Favorecida o
a las bacterias resistir conocidas las
desencadenada por
condiciones pertenecientes al
circunstancias adversas
ambientales género Bacillus son
desfavorables aeróbicas y las del
género Clostridium an
aeróbicas. .
 Introducción:
Género Bacillus

Son bacilos Gram positivos esporulados se disponen comúnmente

en cadenas

Aerobios estrictos o anaerobios facultativos

Se encuentran en el ambiente

La espora se ubica generalmente en el centro de la célula y no suele

agrandar el tamaño de esta.
Crecen en medios usuales de laboratorio y en atmosfera normal a 37
°C en 24 h.
 Introducción:
Género Bacillus

Genero Bacillus

Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus subtilis

Importante Asociado a infecciones en

Causa el ántrax pacientes
patógeno inmunocomprometidos
alimentario
 Introducción:
Género Bacillus
Pruebas bioquímicas: Reactivos:

Cepa Peróxido de
hidrogeno al 3%

Discos con 10 ug de
penicilina
Medios de cultivo:

Placa de Gelosa Placa de gelosa

Sangre con base de yema de huevo
Cassman
 Introducción:
Género Bacillus
Medio: Agar Asa: en anillo Descripción de la Morfología colonial
Gelosa Sangre Método: Estría en Superficial

a. Forma
Cepa b. Borde
c. Tamaño
d. Superficie
e. Opacidad
f. Elevación
g. Color
h. Consistencia
i. Acción sobre el medio
 Introducción:
Género Bacillus
Bacillus cereus Bacillus subtilis Bacillus anthracis

1. Irregular
1. Irregular 1. Irregular 2. Borde irregular
2. Borde irregular 2. Borde irregular 3. Blanquecina
3. Verdosa- Grisácea 3. Rugosa/mate 4. Lisa/ brillante
4. Lisa/ brillante 4. Grisácea 5. Plana
5. Plana 5. Crateriforme 6. Opaca
6. Opaca 6. 2-4 mm 7. 3-8 mm
7. 3-8 mm 7. Opaca 8. Pastosa
8. Pastosa 8. Beta hemolisis 9. Gamma-hemolisis
9. Beta-hemolisis 9. Pastosa
 Introducción:
Género Bacillus
Coloración de Gram

3. Coloración de Gramr
1. Realizar el frotis 2. Coloración de Gramr

4. Reporte del Gram: ______________________r

19/05/2022
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 Introducción:
Género Bacillus
Bacillus cereus Bacillus subtilis Bacillus anthracis

Bacilos Gram positivos esporulados Bacilos Gram positivos esporulados

Bacilos Gram positivos
dispuestos en cadenas dispuestos en cadenas
 Introducción:
Género Bacillus
Prueba de Catalasa en Tubo (Prueba Confirmatoria)

Medio: Caldo
simple

Caldo simple
 Introducción:
Género Bacillus
Prueba de movilidad
 Introducción:
Género Bacillus
Prueba de Hidrolisis de la Gelatina
 Introducción:
Género Bacillus
Prueba de Fermentación de Carbohidratos
Introducción:
Género Bacillus
Introducción:
Género Bacillus
 Introducción:
Género Bacillus
CARACTERISTICAS B. anthracis B. cereus B. subtilis

Respuesta a la Penicilina S R R
Presencia de capsula + - -
Beta hemolisis + +++ -
Movilidad - V V
Cuadro de Catalasa + + +
identificación Lecitinasa + + -
Gelatinasa + + rápida V
Arabinosa - - +
Xilosa - - +
Manitol - - +
 Introducción:
Géneros Clostridium

Bacilos Gram positivos, esporulados (sobresale de la forma del bacilo)

Hábitat el suelo y pueden ser parte de la biota indígena intestinal de los animales

Jarra de anaerobiosis empleando un sistema generador de la mezcla de gases 5 %

CO2, 10 % H y 85 % de N2

Anaerobias (estrictas o aerotolerantes)

Producen toxinas como la tetánica y botulínica.

 Introducción:
Géneros Clostridium
Pruebas bioquímicas: Reactivos:

Cepa Peróxido de Kovac

hidrogeno al 3%

Medios de cultivo:

Placa de Gelosa
Sangre con base de Placa de gelosa
Cassman yema de huevo
 Introducción:
Géneros Clostridium
Medio: Agar Asa: en anillo Descripción de la Morfología colonial
Gelosa Sangre Método: Estría en Superficial

a. Forma
Cepa b. Borde
c. Tamaño
d. Superficie
e. Opacidad
f. Elevación
g. Color
h. Consistencia
i. Acción sobre el medio
 Introducción:
Géneros Clostridium
Jarra anaeróbica: GasPak
La remoción del oxígeno presente en la cámara ocurre por la
reacción con el hidrógeno producido, en presencia de un
catalizador, para formar agua.

El catalizador está compuesto de un pellet

de aluminio revestido de 0.5 % de paladio.
El sobre generador de GasPak contiene un papel de filtro, una
tableta de borohidruro de sodio, una tableta de bicarbonato de
sodio y ácido cítrico.
El sobre es activado al añadir 10 ml de agua y el ambiente se
obtiene en aproximadamente 30 minutos, visualizándose por
una condensación del agua dentro de la jarra.
 Introducción:
Géneros Clostridium
Coloración de Gram

3. Coloración de Gramr
1. Realizar el frotis 2. Coloración de Gramr

4. Reporte del Gram: ______________________r

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 Introducción:
Género Bacillus
Prueba de Catalasa en Tubo (Prueba Confirmatoria)

Medio: Caldo
simple

Caldo simple
 Introducción:
Géneros Clostridium
Prueba de Hidrolisis de la Gelatina
 Introducción:
Géneros Clostridium
Prueba de Fermentación de Carbohidratos
 Introducción:
Géneros Clostridium
Prueba de Hidrolisis de la urea
 Introducción:
Géneros Clostridium
Prueba de Descarboxilacion de la Ornitina
Introducción:
Géneros Clostridium
 Introducción:
Géneros Clostridium

Cuadro de
identificación
Clostridium difficile

Clostridium perfringens

Clostridium tetani