Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Ecología Microbiana
Práctica No. 10
“Microorganismos del ciclo del nitrógeno”.
Grupo: 4QM2 Sección: 1 Equipo: 6
Nombre de los alumnos que participaron en el reporte:
● León Rizo Itzel Guadalupe
● Solano Cruz Joan Manuel
Nombre de la profesora responsable de la práctica:

González Moreno Irma

Objetivos:
1. Determinar experimentalmente los principales procesos metabólicos involucrados en el ciclo
del nitrógeno.
2. Enumerar las formas fisiológicas de las bacterias involucradas en estos procesos, en
diferentes muestras de suelo.

Resultados:
Tabla 1: Microorganismos proteolíticos aislados de suelo proveniente de las Cascadas de
Atlihuetzia (Sección 1).

Microorganismos Proteolíticos
Estació % H. del
No. de Colonias UFC/g UFC/g
n suelo Dilución
Placa 1 Placa 2 Promedio (B.H.) (B.S)

1 6 10​-3 35 27 31 3.1x10​5 3.3x10​5

2 20 10​-3 21 16 18.5 1.85x10​5 2.3x10​5

3 1 10​-3 17 10 13.5 1.35x10​5 1.36x10​5

4 20 10​-3 21 15 18 1.8x10​5 2.25x10​5

5 20 10​-3 9 8 8.5 8.5x10​4 1.06x10​5

6 10 10​-4 11 8 9.5 9.5x10​5 1.05x10​6

7 23 10​-3 15 12 13.5 1.35x10​5 1.75x10​5

8 5 10​-2 26 16 21 2.1x10​4 2.21x10​4

 Tabla 2: Microorganismos amonificadores aislados de suelo proveniente de las Cascadas de
Atlihuetzia (Sección 1).

Microorganismos Amonificadores

Estación Tubos (+) por No. NMP NMP/g NMP/g

Dilución
dilución Característico (Tablas) (B.H.) (B.S.)

1 3 3 3 333 >1100 >1100 >1170

2 3 3 0 330 240 240 300

3 2 2 1 221 28 28 28.3

4 3 1 1 311 75 75 94

5 3 2 0 320 93 93 116

6 3 3 3 333 >1100 >1100 >1222

7 3 2 0 320 93 93 121
8 3 0 0 300 23 23 24

Tabla 3: Microorganismos Nitrificantes Fase I aislados de suelo proveniente de las Cascadas de

Atlihuetzia (Sección 1).

Microorganismos Nitrificantes Fase I (Nitritación)

Estación NMP
Tubos (+) por No. NMP/g NMP/g
Dilución (V. de
dilución Característico (B.H.) (B.S.)
Tablas)
1 3 3 3 333 >1100 >1100 >1170
2 0 2 3 023 16 16 20
3 3 3 3 333 >1100 >1100 >1111
4 2 3 1 231 36 36 45

5 3 3 1 331 460 460 575

6 3 3 3 333 >1100 >1100 >1222
7 3 3 0 330 240 240 312
8 0 3 3 033 19 19 20
 Tabla 4: Microorganismos Desnitrificantes aislados de suelo proveniente de las Cascadas de
Atlihuetzia (Sección 1).

Microorganismos Desnitrificadores
Estación Tubos (+) por No. NMP/g NMP/g
Dilución
dilución Característico (B.H.) (B.S.)
1 3 3 3 333 >11000 >11702
2 3 3 3 333 >11000 >13750
3 3 3 3 333 >11000 >11111
4 3 3 3 333 >11000 >13750
5 3 3 3 333 >11000 >13750
6 3 3 3 333 >11000 >12222
7 3 3 2 332 11000 14282
8 3 1 0 310 430 453

Figura 1. Logaritmo de las unidades formadoras de colonias por gramo de suelo en base seca
de microorganismos proteolíticos en 8 sitios de muestreo de suelo cercano al río Zahuapan y
su afluente, Atlihuetzía, Tlaxcala.
Figura 2. Número más probable de microorganismos que participan en el ciclo del nitrógeno.

Discusión:
En el suelo existe nitrógeno, este principalmente es proveniente de la materia orgánica presente en
este, puesto a que este no se puede presentar de forma natural en él.Las plantas, los animales y la
mayoría de los microorganismos necesitan formas de nitrógeno combinado para incorporarlo a su
biomasa celular (Brown y Johnson 1977). El ciclo biogeoquímico del nitrógeno depende en gran
medida de la actividad de los microorganismos. Las diversas transformaciones del nitrógeno
permiten la circulación del nitrógeno de la atmósfera a través de los ambientes terrestres y acuáticos
(Bartha, 2002). Este movimiento del nitrógeno a través de la biosfera determina en gran medida la
productividad ecológica de los ambientes terrestres.La desnitrificación se trata de un proceso de
reducción biológica, que se realiza en el suelo, este es llevado a cabo por microorganismos aerobios
facultativos. Estos organismo utilizará el NO​3​- y el NO​2 en lugar de O​2 como
​ aceptores de electrones,
-​
esto en condiciones de anaerobiosis, los cuales producen gases como N, N​2​ y N​2​O.
La falta de O​2 es un factor bastante importante para que la desnitrificación se lleve a cabo de una
manera óptima, ya que esta comienza a producirse en las zonas del suelo que cuentan con
condiciones de anoxia. ​Es importante la energía para que se lleve a cabo esta reacción, que proviene
principalmente de materia orgánica de fácil descomposición (donde los microorganismos
amonificadores y proteolíticos proliferan), por lo tanto, con su relación podemos observar estos grupos
de microorganismos en conjunto. (Perdomo ​et al, ​s.f.)
Los organismos proteolíticos son afectados por la humedad, capacidad de fertilización del suelo y la
disponibilidad de oxígeno. En la tabla 1 podemos observar que la mayor cantidad de estos
organismos la encontramos en la estación 6 esto puesto a que en esta estación se encuentra una
mayor cantidad de materia orgánica que en las otras, además de otros factores como la humedad
existente en este, por otro lado la estación 8 fue la que menor crecimiento de microorganismos
proteolíticos se obtuvo debido a que posiblemente la humedad de esta sea menor lo cual aumentará
el contenido de oxígeno presente en esta, además de la poca cantidad de materia orgánica lo cual
reducirá la presencia de nitrógeno en esta, debido a que en esta se encuentra una mayor cantidad de
aguas residuales, así como de detergentes, lo que hará que estos microorganismos se vean afectados
en su desarrollo.
Respecto a la figura 2 en donde se observa el log de NMP de microorganismos presentes en el suelo,
en cuestión de los microorganismos amonificadores, se presentaron en mayor cantidad en las
estaciones 1 y 6, mientras que la estación con menor NMP fue la estación 3.
En cuestión de los microorganismos nitrificantes, se presentaron en mayor abundancia en las
estaciones 1, 3 y 6. Las bacterias nitrificantes son quimiolitotrofas y utilizan la energía derivada de la
nitrificación para asimilar el CO2. El proceso de nitrificación parece estar limitado en su mayor parte
a un número restringido de bacterias autótrofas (Focht y Verstraete 1977, Hooper 1990). Los dos
pasos de la nitrificación, es decir, la formación de nitrito y la formación de nitrato los realizan
poblaciones de bacterias distintas. Sin embargo, los dos procesos están muy relacionados y no se
produce una acumulación de nitrito (Bartha, 2002). Relativamente pocos géneros bacterianos
intervienen en el proceso de nitrificación y cualquier tipo de estrés ambiental puede afectar
gravemente este proceso, es por ello, que en algunas estaciones como la 2 y la 8, existe menor
concentración de estos microorganismos.

En la figura 2 es posible observar también a los microorganismos desnitrificantes los cuales fueron el
grupo más abundante respecto a los demás grupos microbianos involucrados en los demás procesos
del ciclo del nitrógeno. Los iones de nitrato se pueden incorporar a la materia orgánica por gran
variedad de organismos mediante un proceso conocido como reducción asimilatoria de nitrato. Un
grupo heterogéneo de microorganismos, que comprende muchas especies de bacterias, de hongos y
de algas, pueden llevar a cabo dicho proceso (Gottschalk, 1986).

Conclusiones:
● Las bacterias desnitrificantes fueron el grupo microbiano más abundante en las estaciones
de la Cascada de Atlihuetzia, Tlaxcala.
● La desnitrificación es más frecuente en aguas estancadas que en aguas corrientes y ríos.
● La desnitrificación suele producirse principalmente en condiciones de anoxia o en
condiciones de presiones de oxígeno bajas.
● Las estaciones presentan baja presión de oxígeno.
● La cantidad de microorganismos proteolíticos es directamente proporcional a la cantidad de
materia orgánica presente en el medio.
● La estación 6 presentó un mayor número de microorganismos proteolíticos debido a su
elevada cantidad de materia orgánica

Bibliografía:
● Bartha, R & Atlas, R. (2002). Ecología microbiana y microbiología ambiental. 4ta edición.
Madrid: Pearson addison Wesley. pp 411-422.
● Blackburn, T. H. 1983. The microbial nitrogen cycle. En W. E. Krumbein (ed.). Microbial
Geochemistry. Blackwell, Oxford, Inglaterra, pp. 63—89
● Brown, C. M., y B. Johnson. 1977. Inorganic nitrogen assimilation in aquatic microorganisms.
Advances in Aquatic Microbiology 1:49-114.
 ● Focht, D. D., y W. Verstraete. 1977. Biochemical ecology of nitrification and denitrification.
Advances in Microbial Ecology 1:135-214
● Gottschalk, G. 1986. Bacterial Metabolism. Springer-Verlag, Nueva York.
● Pajares, S. & Bohannan, B. (2016). Ecology of Nitrogen Fixing, Nitrifying, and Denitrifying
Microorganisms in Tropical Forest Soils. ​Frontiers in Microbiology 07-2016. d ​ oi:
10.3389/fmicb.2016.01045

Cuestionario:
1. Qué factores pueden alterar el número de microorganismos involucrados en el ciclo del
nitrógeno.

El uso de fertilizantes puede tener un impacto negativo sobre las poblaciones microbianas,
debido a que, al agregar estas sustancias, los elementos que necesitan las plantas (incluido el
nitrógeno) se encuentran en formas asimilables, por lo que ya no es necesaria la presencia de
bacterias fijadoras del Nitrógeno.

2. La adición de fertilizantes nitrogenados puede tener consecuencias en los procesos

globales de contaminación. Indique cuáles considera Ud. son estas consecuencias.

Uno de los mayores problemas ambientales por el uso de fertilizantes nitrogenados es la

contaminación del agua por nitratos, lo cual puede ocasionar una eutrofización, disminuyendo el
oxígeno disponible y en casos más extremos, ocasionando la muerte de algunas especies.
Además, hay liberación de gases a la atmósfera que pueden intensificar el efecto invernadero.

3. Cuales son las ecuaciones químicas qué se llevan a cabo en cada uno de los procesos
biológicos analizados.
● Amonificación (Mineralización): La mayoría de las plantas, animales y microorganismos
pueden realizar la amonificación, qué es el proceso de conversión del nitrógeno orgánico en
amonio o amoníaco. El nitrógeno de la materia orgánica, viva o muerta, se encuentra
principalmente en forma amino reducida. Blackburn (1983) destacó la importancia de la
mineralización orgánica de nitrógeno para que el ecosistema continuase siendo productivo.
La liberación de amoníaco desde un compuesto nitrogenado simple como la urea puede ser
descrita como en la Ecuación:

R-NH2 + 2H2O --> 2NH3 + CO2

● Durante la nitrificación: el amoníaco y los iones de amonio se oxidan a iones nitrito

(Ecuación 3, Nitrificación Fase I (Nitritación))y éstos son transformados a iones nitrato
(Ecuación 4):
● Desnitrificación: Los iones de nitrato se pueden incorporar a la materia orgánica por gran
variedad de organismos mediante un proceso conocido como reducción asimilatoria de
nitrato.

4. ¿Qué funciones tienen los bacteroides y la leghemoglobina en la fijación biológica

simbiótica del nitrógeno?

Algunas plantas, como las leguminosas, son capaces de fijar nitrógeno atmosférico en simbiosis
con algunas bacterias, a través de nódulos formados en las raíces de las plantas. Dichos nódulos
son el resultado de una relación de simbiosis entre la planta y las bacterias. Cuando ambos
entran en contacto se produce un cambio de diferenciación en la bacteria, la cual se modifica
dando lugar a un bacteroide. El ​bacteroide expresa su actividad nitrogenasa y gracias al complejo
enzima nitrogenasa va a ser capaz de fijar el nitrógeno. La ​leghemoglobina (Lh) es la proteína
mayoritaria del nódulo, cuya función es transportar oxígeno a los bacteroides, transformada en
oxileghemoglobina.