índice

índice 1

Introducción 3

La microscopia 4

Tipos de microscopio 5
Microscopio según la iluminación 5
Microscopio según el número de lentes 8
Microscopio según la transmisión de la luz 8
Microscopio según el número de oculares 9

Tinciones 10
Las tinciones diferenciales 10
Tinciones de Gram 11
Tinción Ziehl-Nirve 13
Tinción de Wirtz-Conklin 14

conclusiones 15

Bibliografías 16
Introducción
Hablemos un poco de la microbiología. ¿Qué es la microbiología? La microbiología es la
ciencia encargada de estudiar los microorganismos, bacterias, protistas, parásitos, y otros
agentes como priones, virus, y viroides.
La Microbiología permite conocer los microorganismos, entender su importancia y
aprovechar la diversidad de sus funciones para utilizarlos a su favor y así mejorar la calidad
de vida del hombre.

En la microbiología hay muchas herramientas que ayudan a desarrollarla. Sin embargo, hay
dos que son las primordiales que sin una de ellas no se podría visualizar; Se llama
microscopía y las tinciones.

Empezaremos con lo que fue un parteaguas para que la microbiologia sea lo que es hoy en
dia y empezaremos a hablar con la microscopia
La microscopia
La microscopía es el encargado de estudiar las células, tejidos de animales vegetales, eso se
refiere a que necesitan un instrumento para ampliar muchas veces mas la imagen de las
estructuras que la constituyen.

El nombre etimológicamente deriva de dos raíces griegas: mikrós, que significa pequeño y
skopéoo, que significa observar. entonces el microscopio significa observas algo pequeño

En 1595, en la ciudad flamenca de Mildebourg, el óptico Zacarías Janssen (1583-1638)

montó un pequeño aparato que tenía apenas veinticinco centímetros con lentes en dos tubos
de latón que se deslizaban uno dentro del otro. De esta manera fabricó el primer microscopio
de la historia .

Posterior a esto nace Antonie van Leeuwenhoek (1632-1723), en la población neerlandesa de

Delft era un comerciante de paños. Realmente se llamaba Thonis Philipszoon; Pero como
nació en la esquina de la entrada de Delft, la llamada “puerta de león” entonces era conocido
como Antonie van Leeuwenhoek que en holandes significa “desde la esquina de leon”

Tenía muchas aficiones. Pero lo más importante era tallar lentes de vidrio lo que aprendió en
una óptica de su ciudad natal.
Gracias a eso logró tallar una lupa con 3 aumentos lo que le ayudo a ver la fila de los hilos de
las telas que vendía y así mejorar la calidad de las mismas.

En esa época vivía un científico que era Robert Hook fue la persona que diseñó el
microscopio a través del modelo de Janssen.
Tiempo después lanza un libro que se llama “micrographia” Con dibujos de las imágenes
vistas a través de su diseño y es donde por primera vez se ve la palabra “célula”, una palabra
con la que él se refería a unas celdillas que había en una lámina de corcho
Al leer este libro el comerciante de paños Antonie van Leeuwenhoek se motivó a hacer un
lente más pequeño (entre tres y cuatro milímetros de diámetro) con lo que consiguió
aumentar la imagen 10 veces.

Deicidio observar una gota de lluvia con lo que logro visualizar unos microorganismos.
Posterior a esto decide enseñarle a su hija Maria y ella decide llamarlos “animálculos”.

Ya que conocemos un poco de la historia pasaremos a conocer los diferentes tipos de

microscopios, que caso tendria solo saber la historia y no saber qué microscopios hay y como
se desarrollan los mismos.

Tipos de microscopio
Hay diferentes tipos de microscopios dependiendo que es lo que y claramente debe haber
algunos criterios para poder ser clasificados.

Microscopio según la iluminación

1. Microscopio óptico
En este microscopio se ve la muestra a través de la luz visible. hay un foco apuntando hacia
la muestra, la luz llega al objetivo y así es como se observa por el ojo observador. El aumento
máximo que se puede alcanzar es de 1500x

así es como se ve la muestra en un microscopio óptico

2. Microscopio electrónico
La muestra no se visualiza con luz, esta se visualiza por medio de electrones. los electrones
chocan con la muestra dentro de una camara de vacio, por lo tanto no es posible observar
muestras biológicas vivas

así es como se puede visualizar una muestra en un microscopio electrónico

Se dividen en dos que son el microscopio electrónico de barrido y el microscopio electrónico
de transmisión.

2.1 Microscopio de barrido

Este no ilumina toda la muestra. el va escaneando la muestra por distintos puntos de la
misma. El aumento de este es menor del que se puede alcanzar con el Microscopio
electrónico de transmisión.

así se ve una muestra en un microscopio electrónico de barrido.

2.2 Microscopio electrónico de transmisión

Este microscopio se utiliza atravesando la muestra. no podríamos preguntar ¿cómo? bueno
los electrones atraviesan la muestra de tal manera que los electrones que logren atravesar los
captará un detector para así dar una imagen. por eso se necesita que la muestra sea muy
delgada.

Así es como se ve una muestra en un microscopio de transmisión.

3. Microscopio de luz ultravioleta

El microscopio ilumina la muestra con una luz ultravioleta, esto permite que se tenga una
mejor resolución que con el microscopio óptico. e igual algunas muestras en el óptico tienden
a tornarse transparentes por lo que no se aprecian como debería, y con el ultravioleta no
tenemos ese conflicto.

4. Microscopia de luz polarizada

Este microscopio realmente es un microscopio óptico al que se le agregaron dos
polarizadores. esto refiere a que la onda es oscilatoria. y se ocupa para observar estructuras
cristalinas de rocas y minerales.

así es como se ve una muestra de un microscopio de luz polarizada

 5. Microscopio de fluorescencia
Los microscopios fluorescentes son aquellos que ocupan alguna tinción fluorescente. permite
observar sustancias que emitan luz propia. La muestra se ilumina con lámpara de xenón o
una de vapor de mercurio. Se adjunta un filtro de luz para aislar la luz correspondiente.

así es como se ve una muestra en un microscopio de fluorescencia

Microscopio según el número de lentes

1. Microscopio simple
Solo tiene un lente que es mayor conocido como lupa. Puedes conseguir un mayor aumento

2. Microscopio compuestos
Este microscopio está compuesto por lo menos dos lentes y este es el más utilizado en los
microscopios modernos. y esto se compone del objetivo y el ocular para corregir las
aberraciones de la imagen y tener una buena calidad.

Microscopio según la transmisión de la luz

1. Microscopio de luz trasmina

En este tipo de microscopio se atraviesa la luz atraviesa la muestra. y las muestras se deben
cortar de una manera muy fina . Es el sistema más usado en los microscopios ópticos
así se visualiza una muestra en un microscopio de luz trasmina

Microscopio según el número de oculares

1. Microscopio monoculares
Este microscopio dispone de solo un lente
 2. Microscopio binoculares
Este microscopio dispone de dos lentes. esto permite que sea más cómodo para el usuario

3. Microscopio trinoculares
Este es de dos oculares más uno extra para poder conectar a una cámara y el monitor.

Tinciones
La tinción es un auxiliar para poder estudiar de manera adecuada una muestra, junto con la
microscopia hacen que hoy en día conozcamos más sobre el mundo microbiológico.

1. Las tinciones diferenciales

Estas son las más utilizadas en la microbiología por todas las aplicaciones que se tienen.
Estas se diferencian por poseer más de un color ya que con diversos colores podemos
visualizar que es que en la muestra que se tiene. Esto se debe a la reacción química que tiene
y por lo tanto podemos saber la clasificación y los grupos de los microorganismos.
 2. Tinciones de Gram
por medio de esta tinción se divide en: Gram positivo y Gram negativo
La positiva contiene un capa gruesa de peptidoglicano con numerosos enlaces de ácido
teicoico y las negativas en las que la capa de peptidoglicano es más delgada.la gran cantdad
de enlaces cruzados de ácido teicoico de los microorganismos Gram positivos aporta a su
capacidad de resistir la decoloración con alcohol.

Colorantes
● Cristal violeta. Da color azul o violáceo a las bacterias gram positivas.
● Safranina. Da color rojizo o anaranjado a las bacterias gram negativa

se ocupará el lugol como mordiente y posterior a esto se ocupara alcohol al 96, siempre se
agrega el cristal violeta el alcohol retira a los fosfolípidos y cierra los poros de la pared
celular, por lo que el cristal violeta queda atrapado. en el gram positiva logra aguantar por lo
que se queda ahí el cristal violeta, sin embargo, el el gram negativo no aguanta, se retira y
queda cristalino
Preparación .
El proceso de tinción consta de los siguientes pasos:

1. Con el asa de cultivo se toman varias muestras, y se extienden por el

portaobjetos. No se añade agua destilada.
2. El proceso de fijación se realiza por calor a la llama.
3. Se añade cristal violeta, recubriendo con este colorante el portaobjetos durante
2 o 3 minutos.
4. Ahora se añade lugol (yoduro potásico 2% + yodo) durante 1 minuto. El
mordiente se acopla con el colorante y facilita su absorción por parte del
microorganismo.
5. Se lava el portaobjetos con agua destilada. El agua no debe tocar directamente
la muestra.
6. Decolorar con alcohol 96%. Se añade el alcohol gota a gota, y de la muestra
saldrán gotas violáceas. Paramos de añadir alcohol cuando salga la primera gota
transparente de la muestra.
7. Se añade el colorante de contraste, la safranina, durante 5 minutos.
8. Por último se lava el portaobjetos y se seca.
Tinción Ziehl-Nirve
para reconocer bacterias ácido-alcohol resistentes. ejemplo M.tuberculosis no se puede
detectar con la de gram pero si con esta

Colorantes
● Fucsina fenicada. Da un color rojizo a las bacterias AAR.
● Azul de metileno. Da un color azulado al resto de bacterias que no son AAR.

Preparación El
proceso de tinción consta de los siguientes pasos:

1. Con el asa de cultivo se toman varias muestras y se extienden por el

portaobjetos. No se añade agua destilada.
2. Se fija la muestra con calor.
3. Se añade fucsina fenicada, cubriendo totalmente el portaobjetos durante 3
minutos.
4. Más tarde, se pasa el mechero varias veces, durante 5 minutos, pero sin permitir
que hierva el colorante, ni que se seque, ya que sino el colorante se consume.
5. El exceso de colorante se quita con agua destilada.
 6. Se añade alcohol-ácido para la decoloración durante 10 minutos a intervalos de
1 minuto y medio.
7. Ahora se añade el colorante de contraste, el azul de metileno, durante 3
minutos.
8. Por último, se lava el portaobjetos y se seca al aire.

su principal función. es reconocerlas micobacterias, reconocer la tuberculosis o la lepra

también se pueden detectar corinebacterias de gran interés para la biotecnología por su
producción de aditivos, formadora de diversos antibióticos

Tinción de Wirtz-Conklin
Se usa para las endosporas bacterianas. debe estar en una fase de cultivo estacionaria. Entra
en las tinciones selectivas

Colorantes
● Verde malaquita. Tiñe las endosporas de verde.
● Safranina. Sirve para colorear el resto de la célula con un color anaranjado.

Preparación
El proceso de tinción consta de los siguientes pasos:
 1. Con el asa de cultivo se ponen varias cargas, y se extienden por el portaobjetos.
No se añade agua destilada.
2. Se fija la muestra con calor.
3. Se añade verde malaquita, cubriendo totalmente el portaobjetos durante 9
minutos.
4. Ahora se aplica calor de 3 a 6 minutos para que el colorante entre en las paredes
de la endospora. El calor es aplicado hasta que aparezcan emisión de vapores.
5. Se lava con agua el portaobjetos para retirar el colorante de la célula (a
excepción de las endosporas).
6. Ahora se añade el colorante de contraste, la safranina, durante 5 minutos.
7. Por último, se lava con agua y se seca el portaobjetos.

conclusiones

En conclusión, cada tinción se agrega dependiendo que es lo que busques. hay unas que te
sacan una cosa y otras que funcionan para otra, y esto también por parte del microscopio.
ya que si lo vemos de alguna manera hay tinciones que son compatibles con los
microscopios. Por ejemplo hay una tinción que es fluorescente y el microscopio igual,
entonces solo se ocupan para esos modelos por así decirlo.
como lo escribe no hay microbiología sin microscopio o sin tinciones.
hasta aquí mi reporte.
Bibliografías
1. Cuevas Marian, B. E., Cuevas Marian, E., Orduña Sánchez, M. & González

Meléndez, R. C. G. M. (2020, noviembre). Tinciones básicas en el

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https://www.zaragoza.unam.mx/wp-content/Portal2015/publicaciones/libros/c

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3. MONTALVO ARENAS, C. E. (2010, agosto). Microscopia. microscopia.

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4. (2018). Tipos de microscopio. mundo microscopio. Recuperado 16 de

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https://www.mundomicroscopio.com/tipos-de-microscopios/

5. Gargantilla, P. (2021, 1 enero). El microscopio, el invento que llevó a un

pañero a hacer uno de los hallazgos más asombrosos de la Historia. abc.

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https://www.abc.es/ciencia/abci-microscopio-invento-llevo-panero-hacer-halla

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6. (2021, 26 octubre). 🔬 Tinciones y Colorantes principales 🔬 . Microbiología.

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