¿Qué es microscopio El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son

demasiado pequeños como para ser vistos por la vista del ser humano. El término microscopio es la

conjunción de dos conceptos, por un lado “micro” que es equivalente a “pequeño” y “scopio” que significa

“observar”, en suma se refiere a la observación pequeña, o en menor grado.

¿Cuándo y quién inventó el microscopio?

Este instrumento fue inventado por Zacharias Janssen en el año 1590. El descubrimiento de este
instrumento fue importantísimo, principalmente por sus aportes en la investigación médica. En 1665
apareció la investigación realizada por William Harvey sobre la circulación sanguínea, al analizar los
capilares sanguíneos. En 1667, Marcello Malpighi, biólogo italiano, fue el primer investigador en estudiar
tejidos vivos gracias a la observación a través del microscopio.

El holandés Anton van Leeuwenhoek, utilizó microscopios para describir por primera vez

diversos organismos, protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos. Se lo puede
considerar como el fundador de la ciencia que estudia el comportamiento de las bacterias, dio origen a la
bacteriología. Lo innovador de su técnica es que él realizaba los estudios con sus propios microscopios,
dedicaba gran parte de su tiempo en dar forma a lupas, dando a los cristales el espesor milimétrico que
necesitaba.

Manejo del microscopio óptico

Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se
recogió correctamente en el uso anterior, ya debería estar en esas condiciones.

Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas.

Comenzar la observación con el objetivo de 4x (ya está en posición) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la
preparación es de bacterias.

Para realizar el enfoque:

Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo macrométrico. Esto debe hacerse
mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación
pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos.

Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparación con el macrométrico
y, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino.

Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el
micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible
volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operación desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca
distancia de la preparación y por ello es fácil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparación si se
descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersión si se observa una preparación que ya se
enfocó con el objetivo de inmersión.

Empleo del objetivo de inmersión:

Bajar totalmente la platina.

Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y
donde habrá que echar el aceite.

Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino entre éste y el de x40.
Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luz.

Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de inmersión.

Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En ese
momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente.

Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersión y la preparación
es mínima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande.

Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre
esa zona, pues se mancharía de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la
operación desde el paso 3.

Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento
girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el
objetivo de inmersión en posición de observación.

Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial para óptica. Comprobar también que el
objetivo 40x está perfectamente limpio.

Mantenimiento y precauciones 😊 cuidados:

1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en        posición de     observación,
asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
2. Cuando no se está  utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien
y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para
protegerlo del polvo.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o,
mejor, con un papel de óptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está  utilizando el microscopio.
5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pañuelos
especiales para óptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasará el papel por la lente en
un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una
mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos
disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico, platina, revólver y
condensador).

7. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la preparación para prevenir el
roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras
se está  observando a través del ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido, secarlo con un paño. Si
se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol.
9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al acabar el curso,
encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los mismos.

Microscopios según el sistema de iluminación

A un nivel básico podemos diferenciar los microscopios según el medio utilizado para iluminar la muestra.
El sistema más habitual es iluminar la muestra con luz visible, dando lugar al microscopio óptico. Sin
embargo, existen alternativas.
1) Microscopio óptico
En el microscopio óptico la muestra es iluminada mediante luz visible. Esto significa que existe un foco de
luz apuntando hacia la muestra. Esa misma luz es conducida a través del objetivo y del ocular hasta llegar
a formar la imagen en el ojo del observador. Este es el tipo de microscopio más habitual pero su
resolución está limitada por la difracción de la luz. El aumento máximo que se puede obtener con este tipo
de microscopio alcanza alrededor de 1500x.
Muestra en un microscopio óptico

2) Microscopio electrónico
En el microscopio electrónico la muestra no es iluminada con luz sino que se utilizan electrones. Los
electrones impactan contra la muestra dentro de una cámara de vacío. Existen diferentes tipos de
microscopio electrónico pero su principio de funcionamiento se basa siempre en capturar los electrones
dispersados u omitidos por la muestra y así poder reconstruir una imagen.
La ventaja principal de este tipo de microscopio es que puede obtenerse un nivel de aumento muy
superior al del resto de microscopios. Sin embargo, es necesario preparar la muestra y colocarla en una
cámara de vacío de modo que no es posible observar muestras biológicas vivas. Los dos tipos de
microscopio electrónicos principales son el microscopio electrónico de barrido y el microscopio
electrónico de transmisión.
Muestra observada en un microscopio electrónico

3) Microscopio de luz ultravioleta

Los microscopios de luz ultravioleta iluminan la muestra, como el nombre indica, con luz ultravioleta.
Este tipo de luz tiene una longitud de onda más corta que la luz visible utilizada en los microscopios
ópticos. La ventaja principal de utilizar esta técnica es que puede alcanzarse una resolución mejor que
con luz visible. Además, el contraste obtenido en la muestra es distinto que en los microscopios ópticos.
De este modo, con el microscopio de luz ultravioleta pueden observar muestras que aparecen
transparentes si son observadas con luz visible.

4) Microscopio de luz polarizada

También conocido como microscopio petrográfico. Este microscopio es en realidad un tipo de
microscopio óptico al que se la han añadido dos polarizadores. Esto significa que la onda de luz utilizada
para observar la muestra tiene una dirección de oscilación concreta. Este tipo de microscopio es muy útil
para observar estructuras cristalinas de rocas y minerales.
5) Microscopio de fluorescencia
Los microscopios de fluorescencia son aquellos que utilizan las propiedades de fluorescencia para
generar una imagen de la muestra. Este microscopio permite observar sustancias que emiten luz
propia cuando son iluminadas con una longitud de onda determinada. Para ello la muestra es
habitualmente iluminada con una lámpara xenón o con una lámpara de vapor de mercurio. Estos
microscopios incorporan además filtros de luz para aislar la luz correspondiente a la muestra.
Muestra observada en un microscopio de fluoresencia (Fuente: Zeiss Microscopy)

Microscopios según el número de lentes

En el caso concreto del microcopio óptico puede hacerse una distinción según el número de lentes de su
sistema óptico.
1) Microscopio simple
Este tipo de microscopio dispone de una única lente y es más habitualmente conocido como lupa. Aún
así, con un microscopio simple pueden conseguirse grandes aumentos. Hay que destacar que durante el
siglo XVII, Antonie van Leeuwenhoek utilizó este tipo de microscopios para conseguir el mayor aumento
alcanzado hasta el momento. A día de hoy, uno de los conceptos basados en la misma idea es
el Foldscope.
2) Microscopio compuesto
Este tipo de microscopio es aquél que dispone de por lo menos dos lentes. Este es el caso más habitual
en todos los microscopios modernos. Normalmente los microscopios disponen de distintas lentes tanto en
el objetivo como en el ocular para corregir las aberraciones ópticas y alcanzar una imagen con buena
calidad. La invención del microscopio está asociada con la invención del microscopio compuesto. Este
apareció en los Países Bajos a finales del siglo XVI.

Microscopios según la transmisión de la luz

Existen dos tipos básicos de microscopio óptico según el camino seguido por la luz hasta llegar el
objetivo: microscopios de luz transmitida y los microscopios de luz reflejada.
1) Microscopio de luz transmitida
En este tipo de microscopio la luz atraviesa la muestra. Para esta clase de microscopios es necesario
preparar la muestra cortándola en láminas muy finas. La muestra se ilumina desde debajo la platina. La
preparación de la muestra hace que esta sea semitransparente y parte de la luz pueda atravesarla y
llegar al objetivo para ser observada posteriormente a través del ocular. En general este es el sistema de
iluminación más utilizado entre los microscopios ópticos.
2) Microscopio de luz reflejada
En este caso la luz ilumina la muestra y parte de esta es reflejada y dirigida al objetivo. De este modo es
necesario iluminar la muestra desde la parte superior de la platina. Este tipo de microscopía es utilizada
para examinar materiales opacos como pueden ser estructuras metálicas, materiales cerámicos, etc.
Existen microscopios ópticos que permiten los dos tipos de iluminación de modo que es posible observar
tanto muestras semitransparentes como opacas. Los microscopios estereoscópicos (permiten observar la
muestra en tres dimensiones) son siempre de luz reflejada.
Microscopios según el número de oculares
Los microscopios también pueden ser clasificados según el número de oculares. En base a este criterio
puede distinguirse entre microscopios monoculares, binoculares o trinoculares.
1) Microscopio monocular
Microscopio monocular

Este tipo de microscopio dispone de un solo ocular a través del cual se puede observar la muestra. Es el
tipo más sencillo y es ideal para aficionados a la microscopía o para alguien que se introduce en este
campo. Su desventaja principal es que puede resultar un poco incómodo si tiene que utilizarse durante
largos periodos de tiempo. Por este motivo los microscopios monoculares no son en general utilizados en
ámbitos profesionales.
2) Microscopio binocular
Los microscopios binoculares disponen, como indica su nombre, de dos oculares. Esto permite observar
la muestra simultáneamente con los dos ojos resultando en una mayor comodidad para el usuario. Este
es el tipo de microscopio más utilizado en los laboratorios de investigación. La distancia entre los dos
oculares puede regularse para adaptarse a las necesidades del usuario. No hay que confundir
el microscopio binocular con el microscopio estereoscópico. El microscopio estereoscópico siempre es
binocular. Sin embargo, no todo microscopio binocular es estereoscópico.
3) Microscopio trinocular
El microscopio trinocular está equipado con dos oculares para observar la muestra además de un tercer
ocular para conectar una cámara. En el caso de conectar una cámara digital esta puede conectarse a un
ordenador para ver la imágenes de la muestra en tiempo real. Con este microscopio es posible observar
la muestra y al mismo tiempo tomar fotografías o videos con la cámara.
Microscopios según la configuración de los elementos
Microscopio invertido (Fuente: Zeiss Microscopy)

Los microscopios convencionales tienen una configuración vertical. Esto significa que el foco de luz se
encuentra en la parte inferior de la estructura. A continuación hay la platina donde se coloca la muestra y
finalmente el cabezal con los objetivos y el ocular en la parte superior. Esta es la configuración más
habitual pero no la única.
Existen también los microscopios invertidos. Esto microscopios tienen una configuración totalmente
opuesta a la del microscopio vertical. La muestra es iluminada desde la parte superior y los elementos
ópticos se encuentran debajo la platina. Con este tipo de microscopio es posible observar muestras
colocadas en el fondo de un recipiente. Esto es muy útil para mantenerlas hidratadas y poder así observar
muestras vivas y procesos biológicos que duran días.
Microscopios digitales
Los microscopios digitales son aquellos que capturan una imagen digital de la muestra. Esto se consigue
conectando una cámara digital en lugar del ocular. Existen microscopios digitales con distintas
configuraciones. Habitualmente deben conectarse al ordenador para poder transmitir las imágenes y a
continuación visualizarlas. También es cierto que existen microscopios digitales con una pantalla
incorporada. Estos permiten ver la muestra en la pantalla y almacenar imágenes que pueden transmitirse
a continuación a un ordenador mediante conexión USB o tarjeta SD.
Un tipo especial de microscopios digitales son los microscopios USB. Estos microscopios consisten
únicamente en una lente de gran aumento y una cámara digital. El aumento que se alcanza es limitado
en comparación con un microscopio óptico convencional. Aún así son instrumentos muy versátiles y útiles
para observar objetos cotidianos. Los microscopios USB se conectan al ordenador mediante conexión
USB y permiten guardar imágenes de la muestra.
Microscopio estereoscópico
El microscopio estereoscópico es un tipo de microscopio que permite observar la muestra de
forma tridimensional. Estos microscopios están equipados siempre con dos oculares. La imagen de la
muestra que llega a cada ocular es ligeramente distinta de modo que cuando se combinan se consigue el
efecto 3D. Este efecto no podría conseguirse si la muestra se observara con un solo ocular.
El aumento que se consigue con el microscopio estereoscópico es inferior al que se consigue con un
microscopio óptico convencional. Sin embargo, los microscopios convencionales solo permiten una
observación bidimensional de la muestra. Los microscopios estereoscópicos son muy utilizados en
aplicaciones donde debe manipularse la muestra mientras se observa. Por ejemplo para el montaje de
circuitos o relojes.
Otros tipos de microscopios
Además de los microscopios anteriormente presentados existen multitud de técnicas de microscopía
adicionales optimizadas para tipos de muestra específicas. Algunos de los que vale la pena mencionar
son:
1) Microscopio confocal
Este es un tipo de microscopio de fluorescencia. En lugar de iluminar la muestra de forma global se
ilumina punto a punto de forma sucesiva y se reconstruye la imagen al final del proceso. Este proceso de
escaneado de la muestra es similar al que se produce en los microscopios electrónicos de barrido. Este
tipo de microscopio fue inventado por Marvin Minsky en 1957.
2) Microscopio de campo oscuro
Esta técnica de microscopía consiste en iluminar la muestra oblicuamente. De este modo los rayos de luz
que llegan al objetivo no provienen directamente del foco de luz sino que han sido dispersados primero
por la muestra. Esta técnica permite ver muestras que de otro modo no serían visibles debido a su
transparencia. También tiene la ventaja que no requiere teñir la muestra para aumentar su contraste y
poder observarla.
Muestra observada en un microscopio de campo oscuro

3) Microscopio de contraste de fases

La luz viaja a distintas velocidades dependiendo del medio de propagación. Esta propiedad es utilizada en
el microscopio de contraste de fases ya que la luz atraviesa la muestra con distintas velocidades en
distintas secciones. Este efecto es amplificado para generar la imagen de la muestra. Mediante esta
técnica no hace falta utilizar tintes y, por lo tanto, pueden observarse células vivas. El microscopio de
contraste de fases fue inventado por Frits Zernike en 1932 y recibió por ello el premio Nobel de física en
1953.
¿Qué partes conforman un microscopio óptico?
El microscopio óptico es uno de los tipos de microscopios más utilizados por su relativa sencillez
tecnológica, ya que está basado en lentes ópticas que utilizan la luz visible para aumentar la imagen de la
muestra.
Todo microscopio óptico tiene unas estructuras mecánicas y otras de ópticas. En este artículo veremos
cuáles son las partes de un microscopio, tanto de la parte mecánica como de la óptica.

Partes mecánicas del microscopio

Las partes mecánicas de un microscopio óptico son aquellos elementos estructurales con la función de dar
estabilidad al aparato y que permiten que los componentes ópticos del microscopio estén en el lugar
adecuado para permitir la visualización de las muestras.
A continuación repasaremos las partes mecánicas de todo microscopio, su nombre y para qué sirven
exactamente.
1. Pie o base
Como su propio nombre indica, el pie es la estructura que se sitúa en la parte inferior del microscopio. Es
la base por encima de la cual se encuentran el resto de componentes.
Para la correcta visualización de muestras es necesario que el microscopio se mantenga lo más inmóvil
posible, pues cualquier mínimo cambio de posición afecta a la tarea. Este equilibrio es proporcionado por la
base, siendo esta la parte más pesada de todo el microscopio.
Además suele incluir unos topes de goma que reducen aún más la inestabilidad, evitando que el microscopio
se deslice por encima de la mesa de trabajo.
2. Tornillo macrométrico
El tornillo macrométrico es una estructura giratoria situada en un lateral del microscopio que hace que la
muestra se desplace verticalmente. Este componente es imprescindible para la visualización, pues cada
muestra requiere estar a una distancia concreta del objetivo.
Girar el tornillo es el primer paso para conseguir un adecuado enfoque de la muestra, pues de lo contrario la
visualización sería imposible. Todo estaría desenfocado.
3. Tornillo micrométrico
Constituyendo un anexo del macrométrico, el tornillo micrométrico es la estructura que permite, una vez
logrado un enfoque preliminar, ajustar la distancia de manera mucho más precisa. El movimiento vertical
que hará la muestra es mucho menor pero permite lograr un enfoque perfecto, cosa que resulta
imprescindible debido al pequeño tamaño de la muestra.
4. Platina
La platina es la superficie sobre la cual se deposita la muestra a observar. Tiene un agujero en el centro a
través del cual la luz llegará a la muestra. Conectada a los tornillos macro y micrométrico, esta se desplaza
verticalmente de acuerdo a lo que decidamos mediante la rotación de estos tornillos.
5. Pinzas
Las pinzas están adheridas a la platina y tienen la función de mantener fija la muestra para no perder el
enfoque una vez ya estemos trabajando en la visualización. Estamos visualizando la muestra a muchos
aumentos, por lo que cualquier movimiento haría que perdiéramos todo el trabajo.
6. Brazo
El brazo es la columna vertebral del microscopio. Naciendo en la base de este, es la pieza estructural que
conecta todos los demás componentes entre sí. Debe ser también muy estable para evitar alteraciones en la
posición de la muestra.
7. Revólver
El revólver es una estructura giratoria situada en la parte superior del microscopio y donde están montados
los objetivos. Mediante su rotación se permite al usuario del microscopio alternar entre los diferentes
objetivos de los que esté dotado el microscopio.
8. Tubo
El tubo es una estructura cilíndrica situada en la parte superior que, unida al brazo del microscopio, conecta
el ocular con el revólver. Es el elemento a través del cual la luz llega hasta el observador.
Partes ópticas del microscopio
Los componentes ópticos son aquellos que se encargan de la visualización de muestras, pues están
incluidos los elementos encargados de generar y dar direccionalidad a la luz.
Las estructuras ópticas que conforman todo microscopio de luz son las siguientes.
 1. Foco o fuente de luz
Los microscopios ópticos más usados tienen un generador de luz, aunque los más tradicionales disponen
de un espejo que refleja la luz natural del lugar donde se está trabajando. Sea del tipo que sea, es un
elemento indispensable del microscopio, pues la visualización depende enteramente de la luz. Ambas
estructuras están en la base del microscopio.
En el caso de contar con su propio foco, este genera un haz de luz que es dirigido hacia arriba en dirección a
la muestra y que la traspasará para llegar a los ojos del observador.
2. Condensador
El condensador es el elemento óptico que concentra el haz de luz, pues los rayos salen del foco de forma
dispersa. Es por ello que, para estar centrados en la muestra, se tienen que aglomerar en un punto concreto.
3. Diafragma
El diafragma es una estructura que abriéndose y cerrándose regula el paso de luz hacia la muestra. Suele
estar junto el condensador en la parte baja de la platina y su punto óptimo de abertura depende de la
transparencia de la muestra observada.
Muestras muy densas requerirán dejar pasar mayor cantidad de luz, pues de lo contrario lo veríamos todo
oscuro. En cambio, muestras muy finas exigen que cerremos más el diafragma porque de estar muy abierto
observaríamos la muestra con demasiada luz, viéndolo todo blanco.
4. Objetivos
Los objetivos son las estructuras mediante las cuales decidimos a cuántos aumentos queremos ver la
muestra. Son un conjunto de lentes ordenados de menor a mayor aumento (con su respectivo aumento de
tamaño) que concentran la luz procedente de la muestra para producir una imagen real que pueda ser
observada.
Cada objetivo tiene un color asociado para identificar rápidamente a cuántos aumentos (x) estamos
trabajando:

 Negro: 1x / 1,5 x
 Marrón: 2x / 2,5x
 Rojo: 4x / 5x
 Amarillo: 10x
 Verde claro: 16x / 20x
 Verde oscuro: 25x / 32x
 Azul cielo: 40x / 50x
 Azul oscuro: 60x / 63x
 Blanco: 100x / 150x / 250x

En función del tamaño de la muestra elegiremos un objetivo u otro.

5. Ocular
El ocular es el componente a través del cual observamos la muestra y, además, es la segunda fase de
ampliación del microscopio. El ocular amplía la imagen que procede de los objetivos, por lo que la
combinación entre los aumentos del ocular y del objetivo nos dice a cuántos aumentos estamos observando
la muestra.
Así, si el ocular tiene un aumento de 2x y el objetivo con el que trabajamos es de 40x, la muestra la estamos
viendo 80 veces ampliada.