ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

VICERRECTORADO ACADÉMICO

DIRECCIÓN DE DESARROLLO ACADÉMICO

FACULTAD: CIENCIAS

CARRERA: INGENIERIA AMBIENTAL

GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIOS,

TALLERES Y CENTROS DE SIMULACIÓN DE
ANALISIS INSTRUMENTAL

LUGAR DONDE SE REALIZA LA PRÁCTICA:

DOMICILIO
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GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIOS,
TALLERES Y CENTROS DE SIMULACIÓN

ASIGNATURA: ANALISIS AMBIENTAL

PRÁCTICA No. 02
ELECTROFORESIS

FECHA: 2022-12-01

1. OBJETIVO:

Observar la migración de las moléculas atravez de objeto según su peso molecular o

tamaño lo cual su movimiento será generado por un campo electromagnético.

2. INSTRUCCIONES

Describir la metodología, recursos, materiales y equipos necesarios para el desarrollo de

la práctica.

3. PROCEDIMIENTO:

3.1 Concepto

Según su tamaño y carga eléctrica, se utilizan técnicas de laboratorio como la electroforesis para
separar moléculas de ADN, ARN o proteínas. Las moléculas se mueven a través de un gel u otra
matriz utilizando una corriente eléctrica (logo, 2022).

Los poros del gel o de la matriz funcionan como tamiz, lo que permite que las moléculas más
pequeñas se muevan más rápidamente que las más grandes. Él tamaño de las moléculas en una
muestra se determina utilizando estándares de tamaño conocidos que se separan del mismo gel y
luego se comparan con la muestra(logo, 2022).

Se suele hablar de 3 tipos de electroforesis:

De frente móvil: los componentes de la muestra están presentes en toda la

disolución y se determina ópticamente la posición del frente de avance o frontera
con el disolvente.
Zonal: la muestra se aplica como una mancha o banda y sus componentes migran
a través de un disolvente, utilizando además un medio que da soporte a éste. En
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este caso no se determina la movilidad, sino que el único objetivo de la técnica es

separar los componentes de la muestra.
Continua: la muestra se aplica también en una zona, pero se suministra
continuamente a lo largo del proceso (para más información, véanse las pp.250-2
de Freifelder, 1999).

3.2 Materiales

Cinco baterías de 9 voltios Palillos , esponja

Bicarbonato de sodio Recipiente plásticos
Cables eléctricos Gelatina sin sabor
Agua destilada Tazas y cucharas de medida
Papel aluminio 3 colorantes ,3 jeringas

3.3 Pasos

Preparamos la celda de electroforesis agregamos un sobre de gelatina en polvo y 230 ml

de agua

Colocar la mescla en un recipiente mas grande y agregar dos tazas de agua hirviendo,
cerrar y mesclar para tener un a buena homogenización
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Utilizar el papel de aluminio en los extremos del embace de plástico asegurándonos de

que tope la base

Procederemos a verter la mezcla

Colocar la esponja con los palillos como un soporte dos en cada lateral y tres en la base
evitando que topen el fondo
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Realizaremos el buffer añadiendo en un vaso de agua una cucharada de bicarbonato de

sodio este será nuestro conductor de electricidad

Armar el sistema eléctrico colocar 5 pilas con polos negativos y positivos estas tienen que
ser de nueve voltios

Conectamos los cables uno en un polo positivo y el otro en un negativo

Colocamos los colorantes en pocillos hechos para una mejor visualización

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Por ultimo conectamos el sistema eléctrico en cada esquina se lo hace con la finalidad
para pasar corriente y esperar los resultados

4. RESULTADOS

El volumen de ADN y de buffer de carga debe ser exacto (15μl) si esto no ocurre la
práctica no podrá realizarse con éxito ya que impedirá una adecuada observación de los
resultados finales.
La observación final los colores agregados se fueron separando simultáneamente cada
uno en una dirección diferente.
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5. CONCLUSIONES

La electroforesis en gel de la gelarina es una de las técnicas más adecuadas para la

visualización del ADN ya que además de ser de fácil preparación, los colorantes como el
SYBR Safe permiten su observación al someterse a luz fluorescente.
El volumen de ADN y de buffer de carga debe ser exacto (15μl) si esto no ocurre la
práctica no podrá realizarse con éxito ya que impedirá una adecuada observación de los
resultados finales.

6. RECOMENDACIONES

Se ha de recomendar que durante la ejecución de este proceso de electrólisis se deben

utilizar guantes, que tienen este requisito especial que es el aislamiento eléctrico,
ya que el trabajo se realizará con conductores eléctricos.
También hay que mencionar que al instalar el electrolizador se debe conectar el ánodo al
cable positivo y el cátodo al cable negativo, para que los electrones pasen por el
cátodo y así cubrir todo el cátodo.
Se recomienda limpiar el cátodo, ya que debe estar libre de contaminación, corrosión u
otras impurezas, y se recomienda lavar la solución o solventes orgánicos para eliminar las
mencionadas impurezas.
Posteriormente, en cuanto a la energía a generar, debe ser una aproximadamente, 2.4
voltios, para que así, los recubrimientos, se ha más o menos lenta, ya que, si el voltaje es
mayor, este pueda que recubra, muy fuertemente. Otro punto a mencionar, es que el
ánodo, ha de tener una determinada pureza, para cuando se realice el proceso
de electrolisis.

7. BIBLIOGRAFÍA

logo, N. (23 de Agosto de 2022). Electroforesis. Obtenido de

https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Electroforesis
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Elaborado por:

Yajaira Estefanía TrujilloArcos 721

Wendy Anayely Alava Cevallos 543
Marcos Josué Chiliquinga Collaguazo 563

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NOMBRE Y FIRMA DEL/LOS PROFESORES
DE LA ASIGNATURA

Revisado por:

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NOMBRE Y FIRMA DEL DIRECTOR DE CARRERA/
COORDINADOR ACADÉMICO DE SEDE
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