Journal of Chromatography A, 1109 (2006) 267–272

Determinación cualitativa y cuantitativa de extractivos en duramen de

Pino silvestre Pinus sylvestris L.) por cromatografía de gases

Dag Ekeberg a , ∗ , Per-Otto Flæte B , Morten Eikenes B ,

Monica Fongen B , Carl Fredrik Naess-Andresen a
a Universidad de Ciencias de la Vida, Departamento de Química, Biotecnología y Ciencias de los Alimentos, PO Box 5003, N-1432 Ås, Noruega
B Instituto Noruego de Investigaciones Forestales, Høgskoleveien 8, N-1432 Ås, Noruega

Recibido el 9 de noviembre de 2005; recibido en forma revisada el 5 de enero de 2006; aceptado el 10 de enero de 2006

On-line el 3 de febrero de 2006

Resumen

Un método para la determinación cuantitativa de extractos de duramen de pino silvestre ( Pinus sylvestris L.) utilizando cromatografía de gases (GC) con
Se desarrolló la detección de ionización de llama (FID). El límite de detección (LOD) fue de 0,03 mg / g de madera y el rango lineal ( r = 0.9994) fue de hasta 10 mg / g con precisión dentro de ± 10% y
precisión de 18% de desviación estándar relativa. La identificación de los extractos se realizó mediante cromatografía de gases combinada con espectrometría de masas (GC-MS). Los rendimientos
de extracción por Soxhlet se probaron para madera maciza, partículas pequeñas y polvo fino. Se eligieron partículas pequeñas para un análisis adicional. Este tratamiento dio buenos rendimientos
de los extractos más importantes: pinosilvin, monometiléter de pinosilvin, ácidos resínicos y ácidos grasos libres. El método se utiliza para demostrar la variación de estos extractos a través de los
tallos y las diferencias en la dirección norte-sur.

© 2006 Elsevier BV Todos los derechos reservados.

Palabras clave: Extractos de madera de pino; Pinosilvin; Ácidos de resina; Ácidos grasos libres; GC – FID; GC – MS

1. Introducción de extractos en duramen de pino silvestre ( Pinus sylvestris L.)

Dado que la Autoridad Noruega de Control de la Contaminación ha propuesto
recientemente la prohibición de los métodos tradicionales de conservación de la madera
como el CCA (cobre, cromo, arsénico) o la impregnación con creosota, ha aumentado el
interés en la durabilidad de la madera natural y otros agentes protectores menos
peligrosos. Esto ha despertado interés en el uso de duramen y madera clara como
madera de construcción con mayor durabilidad natural. [1] . El duramen es la parte interior
del tallo y a menudo se puede detectar visualmente por su color oscuro (ver Figura 1 ),
causado por una mayor cantidad de extractos [2] . Los extractos de madera son
componentes químicos como ácidos resínicos, ácidos grasos libres y compuestos
fenólicos que existen en el duramen del pino silvestre entre otros árboles. Históricamente,
los carpinteros han utilizado con frecuencia madera de pino silvestre, especialmente el
duramen, ya que es famoso por sus cualidades estructurales y durabilidad. En un estudio
sobre la mejora de la durabilidad de la madera natural, un método para la determinación
cualitativa y cuantitativa
∗ Autor correspondiente. Fax: +47 64965901.
Dirección de correo electrónico: dag.ekeberg@umb.no (D. Ekeberg).
se desarrolló utilizando cromatografía de gases (GC) combinada con detección de
ionización de llama (FID) o espectrometría de masas (MS). Algunos de estos
extractos aumentan la durabilidad de la madera natural frente a la destrucción por
microorganismos e insectos. Un compuesto fenólico llamado pinosilvin, que se
clasifica como estilbeno, ha demostrado una gran influencia en la durabilidad de la
madera natural y los ácidos resínicos tienen un efecto restrictivo sobre los hongos. [2] .
En 1999, Bergstrøm et al. [3] describieron los cambios de concentración y distribución
de pinosilvin en la albura y el duramen. Descubrieron que no había pinosilvin en la
albura y que la cantidad de pinosilvin en el duramen interior era menor que en el
exterior. La técnica utilizada fue la espectroscopia Raman de infrarrojo cercano con
transformada de Fourier (FT-NIR).
El duramen y la madera clara de pino silvestre son repelentes al agua debido a la gran
cantidad de ácidos hidrófobos que bloquean los grupos hidroxilo de las paredes de las
células de la madera y las cavidades de las células incrustadas. [4,5] . Además, la pinosilvin
y el metil éter de pinosilvin se consideran factores determinantes activos contra la
descomposición.
[6] .
El objetivo de este trabajo fue desarrollar un método para la determinación
cualitativa y cuantitativa de extractos de madera utilizando

0021-9673 / $ - ver la portada © 2006 Elsevier BV Todos los derechos reservados. doi: 10.1016 /
j.chroma.2006.01.027
268
Fig. 1. La selección de 10 muestras de los discos del tronco A y B para medir la distribución de
extractos en duramen y albura.
GC – FID o GC – MS. Este método se utilizará para describir las variaciones en la
durabilidad natural del duramen de pino silvestre.
Se han publicado métodos que utilizan diferentes disolventes para la extracción
de pinosilvin y metil éter de pinosilvina. En 2000, Ingram et al. [7] publicaron un
método en el que utilizaron diclometano y 1,4-diclorobenceno en una extracción
Soxhlet. Se ha usado benceno anteriormente [8] . Dado que se ha demostrado que el
benceno es cancerígeno y que los disolventes halogenados son mutagénicos, es
necesario utilizar disolventes alternativos. Varios trabajadores han descubierto que la
acetona es un disolvente adecuado para el análisis de extractos en muestras de
pulpa y papel. [9 y referencias en el mismo] . También se ha utilizado acetona en
combinación con otros disolventes como, por ejemplo, agua. En 2004, Venäläinen et
al. [10]
publicó un método en el que se utilizó acetona / agua 80/20 v / v.
El trabajo consistió en estimar el límite de detección, determinar rango lineal,
exactitud y precisión e identificar los extractos de madera. Para obtener el mayor
rendimiento de extractos de madera de las muestras, se realizaron estudios sobre
cómo procesar las muestras de madera antes de la extracción. La última parte de
este trabajo se realizó para ver cómo se distribuían los extractos de madera en el
duramen y la albura, y en las direcciones norte-sur y este-oeste del duramen.
2. Experimental
2.1. Productos químicos y estándares
Los estándares utilizados para la calibración e identificación eran pinosilvin
y éter monometílico de pinosilvin (número CAS 22139-77-1 y 35302-70-6,
respectivamente, Apinchemicals, Abingdon, Reino Unido), ácido palústrico
(90-95%, número CAS 194553- 5), ácido pirárico (75-80%, número CAS
127-27-5), levopi-
109 (2006) 267–272
ácido marico (95%, número CAS 79-54-9) y ácido neoabiético (> 99%, CAS
471-77-2) todos Helix Biotech, New Westminster, Canadá). Se utilizaron ácido
heptadecanoico (99%, número CAS 506-12-7, Fluka, Steinheim, Alemania) y
dietilestilbestrol (99%, número CAS 56-53-1, Sigma, Steinheim, Alemania)
como patrón interno y para la evaluación del rendimiento. .
Se utilizó acetona (grado reactivo analítico, Merck, Darmstadt, Alemania)
para preparar soluciones madre del patrón interno y para el procedimiento de
extracción. Los extractos fueron redis-
resuelto en piridina seca absoluta (puriss, H 2 O <0.05%, Fluka) y sililado con NO-
bis (trimetilsilil) trifluoroacetamida
(BSTFA, ≥ 99%, número CAS 25561-30-2, Sigma) que se mantuvo en 4 ◦ C en
atmósfera de argón.
Se prepararon soluciones madre del ácido heptadecanoico y dietilestilbestrol
disolviendo 140 y 200 mg en 50 ml de acetona, respectivamente. Ambas soluciones
madre se mantuvieron en la oscuridad a 4ºC. ◦ C.
2.2. Muestras de madera
Las muestras se tomaron de cinco árboles diferentes, A – E. Todas las muestras
fueron de pino silvestre, P. sylvestris L. El tallo de un pino silvestre se compone de albura
y duramen. Todas las muestras de madera utilizadas en este estudio se prepararon a
partir de discos de muestras transversales tomados de pinos silvestres maduros a una
altura de tronco de unos 5 m por encima de la base. La altura media de los árboles fue de
21 y el diámetro medio del tallo a nivel del suelo fue de 41,5 cm.
2.3. Extracción de muestras de madera
Se colocaron muestras de madera molida (200 mg) en filtros de celulosa (10
mm × Filtros Munktell de 50 mm, Grycksbo, Suecia), que luego se sellaron con
bolitas de algodón. Tanto los filtros como las bolitas de algodón se lavaron con
acetona antes de su uso. Se añadieron acetona (proanálisis, 25 ml) y solución
madre de patrón interno (100 L) a las botellas de extracción. Los filtros y las
botellas se colocaron en una unidad de extracción Soxhlet (FexIKA 50, IKA
Werke, Staufen, Alemania). La unidad de extracción se calentó a 78 ◦ C y se
mantuvo allí durante 4 minutos. A continuación, el disolvente se enfrió a 40ºC. ◦ C.
El ciclo de calentamiento y enfriamiento se repitió 36 veces con un tiempo total
de 9 h. Las extracciones se iniciaron por la tarde y el disolvente se eliminó por
evaporación al vacío en un rotavapor (RV06-ML, IKA Werke) a 50ºC. ◦ C al día
siguiente. Los extractos se redisolvieron luego en piridina seca absoluta (1 ml) y
se sililaron con la adición de NO- bis (trimetilsilil) trifluoroacetamida (500 L) y se
deja a temperatura ambiente durante al menos 1 h antes del análisis por GC-FID
o GC-MS.
2.4. Evaluación de muestreo
Un trozo de duramen de pino silvestre se dividió en 3 × 3 submuestras de igual
tamaño (10 mm × 5 mm × 30 mm) en las direcciones longitudinal y tangencial. Se
eligieron tres subconjuntos de tres muestras de modo que ninguna de las muestras
dentro de un subconjunto tuviera un origen junto a la otra en la muestra original. Los
tres subconjuntos se extrajeron luego como (a) madera maciza, (b) pequeños

Fig. 2. La selección de muestras de las partes interior y exterior del duramen en las direcciones
norte-sur y este-oeste.
partículas, típicamente 2 mm × 1 mm × 1 mm, molido con un molinillo IKA Basic y
(c) polvo fino de un molino Retch (RM2000) usando dos bolas de wolframcarburo.
2.5. Distribución de extractos en duramen y albura
Se investigó la distribución de extractos en duramen y albura en dos discos de
tronco de dos árboles A y B. Se tomaron diez muestras de cada uno de los dos
discos de tronco, como se muestra en Figura 1 .
2.6. Determinación de la eficacia de extracción del duramen
Se entregaron muestras de duramen de cinco árboles para la determinación
de extractos. Las muestras se tomaron de discos de tronco. Las muestras se
tomaron del interior (a 2 cm del centro) y del exterior del duramen en las
direcciones norte-sur y este-oeste ( Figura 2 ). Las muestras se trataron como se
describe para la extracción de muestras de madera.
Muestras de duramen y albura (10mm × 5 mm ×
30 mm) se trataron como se describe en la Sección 2.4 . Se utilizó una mezcla
de polvo de madera de varias muestras para la determinación del rango lineal,
exactitud y precisión.
2.7. Análisis GC – FID
La separación y cuantificación de los analitos se logró mediante un
cromatógrafo de gases (Agilent 6890 Series, Agilent Technology, Wilmington,
DE, EE. UU.) Con un sistema FID, un muestreador automático (Agilent 7683
Series) y un inyector split / splitless (Agilent 7683 Series) ). El cromatógrafo de
gases estaba equipado con una columna capilar CP-SIL 8 CB de 30 m × 0,25 mm
DI y 0,25 m de espesor de película con 5% de fenilo y 95%
1109 (2006) 267–272 269
dimetilpolisiloxano como fase estacionaria (Chrompack, Middelburg, Países
Bajos). Se utilizó helio (99,9999%, de Hydro Gas and Chemicals, Rjukan,
Noruega) como gas portador, a un flujo constante de 1,0 ml / min.
La inyección splitless (el tiempo splitless se estableció en 2 min) de extractos
de 1 L se realizó con un muestreador automático en un inyector a 250ºC. ◦ C. La
temperatura de la columna de GC se programó de la siguiente manera: 10 ◦ C / min
de 40 a 190 ◦ C, 4 ◦ C / min de 190 a 300 ◦ C y 300 ◦ C isotermo durante 7,5 min. El
sistema FID se operó a 300 ◦ C con un flujo gaseoso de hidrógeno (99,9999%, de
Hydro Gas and Chemicals) a 40 ml / min y de aire artificial (99,9995%, de Hydro
Gas and Chemicals) a 450 ml / min.
2.8. Análisis GC – MS
La separación e identi fi cación de los analitos se realizó mediante un
cromatógrafo de gases GC8000 Top de instrumentos CE, acoplado a un
espectrómetro de masas cuadrupolo Voyager Finnigan con el mismo tipo de
columna y programa de temperatura utilizado en el sistema GC-FID y con helio
como gas portador. Las inyecciones se realizaron manualmente. El cromatógrafo
de gases estaba equipado con una columna capilar CP-SIL8CB de bajo sangrado /
MS de 30 m × ID de 0,25 mm (espesor de película de 0,25 m). El gas portador helio
estaba a un flujo constante de 1,0 ml / min.
La temperatura de la columna de GC se programó de la siguiente manera: 10 ◦ C / min de
40 a 190 ◦ C, 4 ◦ C / min de 190 a 300 ◦ C y 300 ◦ C durante 7,5 min. Volumen de inyección 1 L,
el espectrómetro de masas se hizo funcionar en modo de ionización electrónica (EI) a 70 eV y
el rango de masas fue de m / z 40 a 500 con un tiempo de exploración de 2,3 s. La línea de
transferencia se llevó a cabo en 250 ◦ C.
2.9. Determinación de rango lineal, exactitud y precisión.
El rango lineal (0,03 a 10 mg de ácido heptadecanoico / g de muestra de madera,
16 niveles) se determinó con la adición estándar de ácido heptadecanoico a las
muestras de madera. Las muestras fueron extraídas y analizadas por GC-FID. La
exactitud y precisión se determinaron con tres niveles de adición estándar de
dietilestilbestrol que van desde 0,5 a 5 mg / g de madera ( n = 6). El método se evaluó
tanto con el área del pico como con la altura para verificar su precisión.
2.10. Manejo de datos y estadísticas
El análisis estadístico se realizó mediante el programa estadístico SAS v. 8.0 (SAS
Institute, EE. UU.) O SigmaPLOT v. 8.0 (SPSSASC, Países Bajos). La identificación de
compuestos se realizó utilizando la biblioteca y estructuras del Instituto Nacional de
Estándares y Tecnología (NIST) de EE. UU., Versión 98, a menos que se indique lo
contrario. Se utilizó el área de pico para la cuantificación a menos que se indique lo
contrario.
3. Resultados y discusión
3.1. Consideraciones cromatográficas
La extracción con acetona Soxhlet de las muestras de madera dio una gran
cantidad de extractos de madera, lo que requiere un alto
270 D. Ekeberg y col. / J. Chromatogr. A 1109 (2006) 267–272

tabla 1 Tabla 3
Datos para la precisión del método basados en la adición estándar de dietilestilbestrol ( n = 6) basado Identi fi cación de extractos de madera en pino silvestre ( Pinus sylvestris L.)
en el área de los picos
Derivados de TMS t R ( min) Mach Número pico
Adición estándar Cantidad encontrada Recuperación relativa RSD (%) factor (%) en Fig. 3
(mg / g madera) (mg / g madera) (%)
Ácido hexadecanoico B 23,5 84 1
0.508 0.529 104 10 Rodoviolascina a 24,5 54 2
1,52 1,44 95 1 Ácido heptadecanoico (IS) 25,1 84 ES

5,08 5.56 109 7 Ácido linolénico B 26,0 60 4

Podocarpio-8 (14) -en-15al, 13a- 26,2 57 6
metil-13-vinilo a
Ácido linoleico 26,4 97 7
método de resolución como GC capilar. Se asumió que las respuestas del detector
Ácido oleico 26,5 80 8
para todos los extractos de madera eran iguales a la respuesta del detector para el
Éter monometílico de pinosilvin B 28,2 96 11
ácido heptadecanoico, que se utilizó como patrón interno (IS). Los resultados se Ácido pimarico B 28,4 94 12
basan en el área de los picos, porque este método dio una mayor precisión que los Ácido sandaracopimárico 28,7 94 13

resultados para la altura del pico, ± 9% y ± 19%, respectivamente. La precisión del Pinosilvin B 28,9 96 14
Ácido isopimárico B 29,0 90 Dakota del Norte
método se midió como recuperación de dietilestilbestrol en base a la adición
Dietilestilbestrol B 29,3 89 15
estándar. La precisión del método se basó en el análisis de una muestra de madera
Ácido palustrico B 29,4 92 dieciséis
y 17 réplicas. Los datos dieron precisión dentro ± 9%. Los datos de precisión se Ácido araquidónico 29,8 22 Dakota del Norte

presentan en Ácido deshidroabiético 29,9 93 18

Ácido 11,14-eicosadenoico 30,1 40 19
Ácido abiético 30,6 95 20
tabla 1 . Los datos analíticos dieron una precisión de 18% de desviación estándar relativa
Ftalato de bis (2-etilhexilo) a 32,5 29 Dakota del Norte
o mejor, dependiendo de los analitos. Los datos de precisión se presentan en Tabla 2 .
Ácido retinoico 32,7 61 22
Se probó el rango lineal del método y se encontró linealidad de hasta 10 mg / g de Ácido 15-hidroxi-deshidroabiético 33,4 89 23
extractos en muestras de madera ( r = 0,9994). Se estimó que el límite de detección Ácido 7-oxodehidroabiético 33,7 96 Dakota del Norte

(LOD), basado en tres veces la relación de ruido de la señal, era de 0.03 mg / g de Ácido behénico 34,3 67 24
15-hidroxi-7-oxodehidroabiético 36,9 88 Dakota del Norte
extractos en las muestras de madera y se estimó el límite de cuantificación (LOQ),
ácido
basado en 20 veces la relación de señal a ruido. ser de 0,17 mg / g de extractos en
ß-sitosterol 46,2 81 25
muestras de madera.
La identificación se logró mediante el emparejamiento por computadora de los espectros de masas con la biblioteca NIST o

con los espectros de masas obtenidos a partir de compuestos puros. nd: no detectado.
La identificación de los extractos de madera sililada se logró mediante el
emparejamiento por computadora de los espectros de masas de la biblioteca NIST y a No es un derivado de TMS.

B También se identifica con un compuesto de referencia.

mediante índices de retención. Para aquellos espectros de masas de extractos que no se
encontraron en la biblioteca NIST, los compuestos de referencia se analizaron con
GC-MS para su comparación. Las muestras contenían una gran cantidad de extractos de
ples. En el área de retención de 9 a 20 min se identificaron muchos carbohidratos. Los
madera y, por lo tanto, buscamos identificar solo los extractos de madera con una
carbohidratos se encuentran en todos los organismos vivos y no son de interés en este
concentración superior al LOQ en al menos una de las muestras.
método. Los extractos de madera identificados en el área de retención de 20 a 50min se
presentan en Tabla 3
con tiempo de retención y probabilidad basados en la biblioteca NIST o espectros de
Tabla 2
masas de estándares. Fig. 3 muestra un cromatograma en la retención
Datos de precisión del método para extractivos con cantidad por encima del LOQ ( n = 18) basado en
el área de los picos
parte exterior de
Compuesto Media (mg / g) ± Dakota del Sur

Ácido linolénico 0,75 0,05

Podocarp-8 (14) -en-15al, 13a-metil-13-vinilo 0,22 0,02
Ácido linoleico 3.12 0,19
Ácido oleico 2,93 0,18
Compuesto desconocido 0,18 0,01
Éter monometílico de pinosilvin 1,72 0,14
Ácido pimarico 2,08 0,18
Ácido sandaracopimárico 0,36 0,03
Pinosilvin 1,57 0,12
Ácido isopimárico 1,38 0,11
Ácido palustrico 4.12 0,50
Ácido levopimárico 1,47 0,27
Ácido deshidroabiético 4.05 0,29
Ácido abiético 5.16 0,67
Fig. 3. Cromatograma de la muestra C, dirección este, parte exterior del duramen. La identificación de pico
Ácido neoabiético 2,76 0,42
está en Tabla 3 . Los picos 5, 9, 10, 17 y 21 no se identificaron. El pico 17 puede ser TMS con ácido
Ácido retinoico 0.44 0,06
levopimárico y el pico 21 puede ser TMS con ácido neoabiético.
Ácido 7-oxodehidroabiético 0,18 0,03
 D. Ekeberg y col. / J. Chromatogr. A 1109 (2006) 267–272 271

Cuadro 4

Prueba de comparación múltiple basada en diferencias de medias LS (Tukey HSD, α = 0.05) en tres pretratamientos diferentes para rendimientos de extracción de pinosilvin monometil éter, pinosilvin, ácidos resínicos totales y ácidos

grasos totales (los niveles no conectados por la misma letra son significativamente diferentes)

Tratamiento Pinosilvin mono-metil Pinosilvin Ácidos resinosos totales Ácidos grasos totales (mg / g

éter (mg / g madera) (mg / g madera) (mg / g madera) madera)

Significar Significar Significar Significar

Polvo fino A 1,69 A 0,61 A 1,30 A 0,80

Pequeñas partículas A 1,66 A 0,61 B 2,03 B 1,78
Madera maciza B 1.06 B 0,41 B 2.10 C 2,63

n = 3 ± 2 std.

3.2. Resultados para la evaluación del proceso de molienda, pretratamiento

de muestras de madera.

Los diferentes pretratamientos, (a) madera maciza, (b) partículas pequeñas y (c)
polvo, dieron diferentes rendimientos para diferentes extractos. Los rendimientos de
pinosilvin y pinosilvin monometil éter fueron significativamente más altos para partículas
pequeñas (2 mm × 1 mm × 1 mm) y polvo de madera que para madera maciza (5 mm × 10
mm × 30 mm), mientras que el rendimiento de ácidos resínicos fue significativamente
mayor para la madera maciza y partículas pequeñas que para el polvo de madera. El
rendimiento de ácidos grasos fue signi fi cativamente más alto para las muestras de
madera maciza que para las partículas de madera pequeñas, por lo que el rendimiento
fue signi fi cativamente más alto que el del polvo de madera. Las comparaciones
múltiples entre los tres tratamientos ( Cuadro 4 ) se basaron en el método estadístico
llamado diferencia significativa honesta de Tukey (HSD de Tukey) ( α = 0,05) [11] . El
método se basó en comparar pares de medias en un análisis equilibrado de problemas
de varianza. Se hizo un compromiso entre los mejores resultados de diferentes extractos
y se eligieron partículas pequeñas para un análisis posterior, porque este pretratamiento
dio buenos rendimientos de pinosilvin, pinosilvin monometiléter, ácidos resínicos y ácidos
grasos libres, los extractos más importantes.

3.3. Distribución de extractos en duramen y albura

En el experimento donde se midió la distribución de extractos en duramen y

albura, los dos árboles A y B dieron resultados diferentes. Los resultados del árbol
Awere corresponden a trabajos anteriores de Bergstrøm et al. [3] ( Figura 4 ,
mostrando los resultados para pinosilvin y pinosilvin monometil éter), mientras que
los resultados para el árbol B fueron extraños. Se esperaba que la muestra 8 en
particular, tuviera una concentración más alta (alrededor de 4 a 5 mg / g de madera)
de pinosilvin y éter monometílico de pinosilvin que las muestras de origen más
central en el tallo [3] . Con base en esta observación, hay razones para creer que la
muestra 8 del árbol B puede ser una mezcla de duramen y albura. Dado que el
alcance es describir la variación del contenido de pinosilvin en el duramen, en este
estudio no se analizan las muestras con una mezcla de albura y duramen. Las
muestras 2 y 10 para el árbol B dieron resultados más altos para la cantidad total de
extractos de lo esperado. Las muestras para el árbol A mostraron que la cantidad
total de extractos fue mayor en duramen que en albura. Los resultados del árbol B
no mostraron esto con tanta claridad. Sin pinosilvin o pinosilvin monometil

Fig. 4. La distribución de pinosilvin y pinosilvin monometil éter a través del duramen y la albura en los
discos del tronco de (a) tallo A y (b) tallo B.
272 D. Ekeberg y col. / J. Chromatogr. A 1109 (2006) 267–272
se midió el éter en la albura. Además, las cantidades de pinosilvin y
pinosilvinmonometil éter en el duramen fueron más altas en la parte exterior y
disminuyeron hasta el centro del disco del tronco.
3.4. Determinación de extractos en direcciones norte-sur y
este-oeste del duramen
La determinación de extractivos en las direcciones norte-sur y este-oeste
del duramen se realizó en los tres árboles C, D y E. Se realizó una prueba
estadística sobre la cantidad total de extractivos, sobre la cantidad de
pinosilvin, la cantidad de pinosilvin éter monometílico, la cantidad total de
ácidos resínicos y la cantidad total de ácidos grasos. La prueba estadística se
realizó para ver si había diferencias significativas en la cantidad de extractos
entre las direcciones norte-sur y este-oeste del duramen. Además, se probaron
las diferencias en la cantidad de extractos entre las partes internas y externas
del duramen. En el modelo estadístico también se probaron la variación entre
árboles y las interacciones entre árbol y dirección, árbol y parte del duramen, y
dirección y parte del duramen.
Los resultados para la determinación de extractivos en las direcciones norte-sur y
este-oeste no arrojaron diferencias significativas, sin embargo, hubo una tendencia
que mostró una mayor cantidad de extractivos en la dirección sur en comparación con
las otras direcciones. El número de observaciones en este experimento fue
demasiado pequeño para determinar con certeza estas diferencias.
La prueba de variaciones en la cantidad de extractos entre las partes
interior y exterior del duramen no mostró diferencias significativas para la
cantidad total de extractos. Por otro lado, los resultados para las cantidades de
pinosilvin y pinosilvin monometil éter, la cantidad total de ácidos resínicos y la
cantidad total de ácidos grasos, mostraron diferencias significativas entre las
partes internas y externas del duramen. Las cantidades de
pinosilvin y pinosilvin monometil éter en la parte exterior del duramen eran más
altos que en el interior. Las cantidades totales de ácidos resinosos y ácidos grasos
en la parte exterior del duramen fueron menores que en la interior.
La variación entre árboles fue significativa para la cantidad total de
extractos y para las cantidades de extractos específicos pinosilvin, pinosilvin
monometil éter, ácidos resínicos y ácidos grasos.
Agradecimientos
Este estudio fue posible gracias al apoyo financiero del Instituto Noruego de
Investigaciones Forestales y el Consejo de Investigación de Noruega. También
estamos agradecidos a Sigrun Kolstad por el pretratamiento de las muestras,
Øystein Johnsen por el apoyo estadístico y Nicholas Clarke por la valiosa ayuda.
Referencias
[1] LE Lindberg, SM Willfor, BR Holmbom, J. Ind. Microbiol. Biotecnología
nol. 31 (2004) 137.
[2] PO Flæte, A. Øvrum, Wood Focus Norway 25 (2002) 1.
[3] B. Bergstrøm, G. Gustafsson, R. Gref, A. Ericsson, Árboles - Estructura
and Function, Springer, Berlín, 1999.
[4] JH Hart, JF Wardell, RW Hemingway, Phytopathology 65 (1975)
412.
[5] JH Hart, en: JW Rowe (Ed.), Productos naturales de plantas leñosas II,
Springer, Berlín, 1989, pág. 861.
[6] H. Erdtman, E. Ernnerfelt, Sven. Papperstidn. 47 (1944) 45.
[7] LL Ingram Jr., MC Templeton, GW McGraw, RW Hemingway, J.
Wood Chem. Technol. 20 (2000) 415.
[8] JW Rowe, CL Bower, ER Wagner, Phytochemistry 8 (1969)
235.
[9] BB Sithole, Appita J. 45 (1992) 260.
[10] M. Venäläinen, AM Harju, P. Sartanpää, P. Kainulainen, M. Tiitta, P.
Velling, Wood Sci. Technol. 38 (2004) 109.
[11] R. Christensen (Ed.), Análisis de varianza, diseño y regresión.
Métodos estadísticos aplicados, CRC Press, Londres, 1996, pág. 156.