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ESTRUCTURA DEL ESMALTE Y AMELOGÉNESIS

Cátedra de Bioquímica y Biofísica


Facultad de Odontología
2020
Dra. Lucía Minini
Objetivos de la clase:

Ø Composición del esmalte maduro


Ø Niveles de organización del esmalte dental
Ø Sustituciones en la composición del esmalte
Ø Fases de la amelogénesis – Formación del esmalte dental
Ø Fisicoquímica de la cristalización
Ø Proteínas del esmalte
COMPOSICIÓN DEL ESMALTE MADURO

Ø Estructura acelular

Ø Composición mineral alta (95 %) mayor que en hueso y


dentina.

Ø Presenta un gran número de cristales, a su vez éstos son unas


1000 veces más voluminosos que los encontrados en hueso y
dentina.

Ø Los cristales están formados por HA cálcica carbonatado no


estequiométrica.

Ø Se forma por biomineralización mediado por una matriz, su


desarrollo esta a cargo de células epiteliales denominadas
ameloblastos.
NIVELES DE ORGANIZACION DEL ESMALTE DENTAL
Ø Prismas del esmalte constituyen la unidad básica del esmalte.
→ esmalte prismático (cristales a lo largo del del eje longitudinal)
→ esmalte interprismástico (cristales con un ángulo de 50-65 respecto al eje longitudinal)

Vista longitudinal

Vista transversal
Esmalte Prismas
Cristalitos Celda unitaria de HA
Robinson C, The Chemistry of Enamel Caries. Critical Reviews in Oral Biology & Medicine. 2000;11(4):481-495.
Imágenes tomadas por microscopía electrónica de barrido. A la izquierda se muestra la superficie del esmalte
luego de ser tratado mediante grabado ácido. A la derecha se observa un corte a lo largo del eje longitudinal de
los prismas del esmalte donde se distingue la orientación de los cristales de HA del esmalte prismático y del
interprismático.
Corte longitudinal eje mayor de cristalitos del esmalte Corte transversal eje mayor de cristalitos del esmalte
maduro. Los cristalitos se encuentran en íntimo maduro. Esttructura caracteristica de los critalitos de
contacto pero no contiguos. hexagonos aplandos.
CISRTALITOS DEL ESMALTE

Ejes Ángulo Plano


bc 𝛂 100 Celdilla unitaria de HA
ac 𝛽 010
ab 𝛄 001
Ø La sección transversal de los cristales que coincide con el Aposiciones en Crecimiento del
plano 001 de la celdilla tiene la forma de hexágono achatado. el plano cristalito
100 espesor
Ø Los planos 100 y 010 son estructuralmente idénticos pero
presentan consecuencias distintas en el crecimiento del 010 ancho
cristal. 001 largo
SUSTITUCIONES EN LA COMPOSICIÓN DEL ESMALTE

• Sustitución/modificaciones de PO43- por HPO42- siendo en un 22 % en las capas más externas del esmalte y
disminuyendo en las capas más profundas.

• Sustitución con CO32- representa del 3-4 % de los cristales del


esmalte. Entre un 10-15 % reemplaza a OH- y el restante 85-90 %
sustituye al PO43-. Hacia la superficie del diente estas sustituciones
disminuyen a un 2.25 %.

• Sustitución con F- sustituyen a una fracción de los OH- . Estas


sustituciones hacen más estable a la fluorohidroxiapatita que a la HA
por la formación del puentes de H con los OH, produciendo una
disminución en la susceptibilidad a las caries.
AMELOGÉNESIS

Ø Proceso de formación del esmalte.

Ø Se encuentra a cargo de células epiteliales denominadas


ameloblastos.

→ Fase secretoria: síntesis de matriz proteica, nucleación y


comienzo la mineralización. (Proceso de Tomes).

→ Fase de maduración: la gran parte de la matriz proteica


es degradada y los cristales aumentan de espesor hasta formar
el esmalte maduro.
Fase secretoria: Nucleación cristalina

Ø Solución sobresaturada en iones Ca2+, PO4-3 y OH- (PI > Kps


de HA).

Ø Formación de núcleo cristalino.

Ø Radio crítico de un núcleo cristalino, probabilidad de


disminuir de tamaño es igual a la probabilidad de seguir
creciendo.

Ø Para obtener el radio crítico necesario para la formación del


cristal se requiere de energía.

Ø Nucleación heterogenea (epitaxial) disminuye la energía


necesaria para obtener el radio crítico.

Ø En la amelogenesis la obtención del radio crítico se obtiene


mediante una nucleación epitaxial dirigida por las proteínas de
la matriz orgánica. También podría participar la sal de fosfato
octacálcico (OCP) como agente nucleador.
Nucleación cristalina: posible función del OCP (Teoría de Brown)

Los cristales del esmalte se forman por un mecanismo de tres etapas:

1) Formación de un germen cristalino, un acúmulo estáble de iones.

2) Crecimiento bidimensional del germen: crece en largo y en ancho pero


no en espesor, primeramente como un cristal de OCP con un espesor de sólo
una celdilla unitaria.

3) Crecimiento tridimensional, que comprende dos pasos:

a) etapa de precipitación: sobre la cara (100) del cristal precipita


una capa de OCP de una celdilla de espesor.
b) etapa de hidrólisis: una capa, de una celdilla unitaria espesor, de
OCP se hidroliza transformándose en otra, de dos celdillas
unitarias de espesor, de HA. La reacción de hidrólisis puede
describirse de la siguiente forma:
Proyección del eje C de seis celdillas de HA Proyección del eje c de tres celdillas de HA

HA

OCP
Crecimiento de los cristalitos
Ø Crecimiento anisotrópico de los cristalitos.

Ø Crecen por aposición de iones sobre las caras.

Ø Se forman y crecen cerca de la membrana celular del proceso de Tomes en los


ameloblastos.

Ø En el esmalte maduro la densidad de cristales disminuye en un 55 % respecto al recién


formado, se debe a que en la maduración se dan fusiones de cristalitos del esmalte.

Ø Durante la maduración la morfología de los cristales cambia de prismática a forma de


bastón.

Aposiciones Crecimiento Velocidad de


en el plano del cristalito crecimiento
100 espesor Menor
010 ancho Media
001 largo Mayor
FISICOQUÍMICA DE LA CRISTALIZACIÓN

Kps HA = 10-117
Proceso acidogénico

En la amelogenesis este cambio en el pH es amortiguado por:

→ Fase secretoria: proteínas del esmalte (amelogeninas)


→ Fase de maduración: por amortiguador bicarbonato (HCO3-)
Isotermas de solubilidad
Grado de saturación (DS) de un fluido con respecto al
mineral del esmalte en función del incremento de cuatro
variables: calcio total, fosfato total, pH y la concentración de
ligandos de calcio en el fluido del esmalte.

→ El factor más importante que afecta al DS del fluido del


esmalte es la concentración de Ca total.
PROTEINAS DEL ESMALTE
AMELOGENINAS:

Ø Grupo heterogéneo de proteínas espacíficas del esmalte

Ø Comprenden más del 90% de las proteínas del esmalte inmaduro.

Ø Ricas en prolina, glutamina, leucina e histidina (ROL AMORTIGUADOR).

Ø Solubles a pH por debajo de 6 y por encima de 8 y a bajas temperaturas.

Ø Insolubles a temperatura y pH fisiológico (forman agregados mediante interacciones hidrofóbicas)

Ø Mutaciones en el gen de la amelogenina son una de las causas de la enfermedad hereditaria


amelogénesis imperfecta

Ø Función: amortiguación del pH durante la cristalización


AMELOBLASTINA:

Ø Es la segunda proteína más abundante en el esmalte inmaduro

Ø Posee varias modificaciones post-traduccionales (glucosilación, fosforilación).

Ø Es escindida en dos fragmentos, uno N-terminal y uno C-terminal, que se localizanen distintas
regiones del esmalte en crecimiento.

Ø El fragmento C-terminal se une a calcio.

Ø Función:es fundamental para la nucleación y crecimiento de los cristalitos del esmalte.


ENAMELINAS:

Ø Grupo heterogéneo de proteínas

Ø Son glucoproteínas ácidas (presentan enlaces O-glucosídicos pero no N-glucosídicos).

Ø Constituyen menos del 5% de las proteínas del esmalte

Ø Presentan gran afinidad con la hidroxiapatita.

Ø Comprenden a las tuftelinas, proteínas de los penachos del límite amelodentinario; permanecen
presentes en el esmalte maduro.

Ø Función: nucleadoras de la mineralización; participan en el crecimiento cristalino orientado (regulan la forma del
cristal).
PROTEINASAS:

Ø Serin, cistein, aspartato y metaloproteinasas.

Ø Presentes en muy pequeña concentración en la matriz del esmalte.

Ø Función: Degradación específica de amelogeninas, lo que facilita la mineralización.


Funciones de las proteínas en la formación del Esmalte:

Ø Nucleación heterogénea: Un posible nucleador en la matriz es la tuftelina, una glucoproteína ácida


fosforilada perteneciente al grupo de las enamelinas

Ø Adsorción a las caras laterales de los cristales, favoreciendo el crecimiento longitudinal. Anisotropía.
Amelogeninas

Ø Función amortiguadora: Amelogeninas, son ricas en histidina, un aminoácido con una cadena lateral
que puede unirse a un protón a pH fisiológico.

Ø Amortiguadores de los iones calcio. Para que el crecimiento de los cristales se limite al las fases
sólidas de fosfato de calcio más estables, las concentraciones de calcio iónico deben mantenerse
bajas. De este modo la solución está sobresaturada para la HA y OCP pero insaturada para otras
fases menos estables pero cuya formación está cinéticamente favorecida.

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