MGB 1 - Teoría

Mecanismos Geneticos Basicos 1
µ A
Transcripción Traducción
O
ADN ARN PROTEÍNA
Retrotranscripción
Replicación
/
Reparación PROTEÍNA
/
Recombinación
Las secuencias de nucleótidos del ADN codifican la estructura primaria de todos los ARN y proteínas celulares, y a
través de las enzimas, influyen indirectamente en la síntesis del resto de constituyentes celulares, determinando el
tamaño, forma y función de todos los seres vivos
Las proteínas son las herramientas por las cuales se llevan a cabo las acciones de la célula.
El ADN contiene la info para sintetizar esas proteínas.
Apoyo para biología 221 6822889

Replicacion
-
La doble hélice de ADN actúa como patrón para su propia duplicación:

Dado que las bases de A solamente se aparean con éxito con bases de T, y las bases G solamente con C, la cadena
de ADN puede actuar de patrón para especificar la secuencia de bases de ADN. De este modo, se copia de forma
exacta una molécula de ADN de doble hélice.
Extremo 3’
Extremo 5’
Durante la replicación del ADN en la célula, cada
una de las dos cadenas de ADN originales actúa s C
,
como patrón para la formación de una nueva C C

]
cadena completa. s
La reacción fundamental mediante la cual se Cadena Cadena

sintetiza el ADN es la adición de un cebadora patrón
s
C
,
desoxirribonucleótido al extremo 3’-OH libre de una

]
e
cadena de polinucleótidos (la cadena cebadora).
El apareamiento de bases entre el
desoxirribonucleósido trifosfato entrante y una C
,
Extremo 3’ C C
cadena de ADN ya existente (la cadena patrón) ]
s s I C
dirige la formación de la nueva cadena de ADN y y
hace que su secuencia de nucleótidos sea Pirofosfato

complementaria. C
,
La replicación del ADN es llevada a cabo por la Desoxirribonucleosido trifosfato entrante
:
ADN polimerasa, la dirección de síntesis es 5’ a 3’.
Extremo 5’

La síntesis del ADN es catalizada por la
Desoxirribonucleósido 5’ trifosfato
Pirofosfato
trifosfsto entrante
Cadena Crecimiento de la
cebadora cadena en sentido
5’ a 3’
Cadena
patrón
Como se indica, la ADN polimerasa cataliza la adición por etapas de un desoxirribonucleótido al extremo 3’-OH de
una cadena polinucleotídica, la cadena cebadora, que está apareada a una segunda cadena patrón. De este modo, la
cadena de ADN sintetizada de novo crece en sentido 5’ a 3’. Cada desoxirribonucleósido trifosfato entrante tiene que
aparearse con la cadena patrón para que la ADN polimerasa lo reconozca, por lo que esta cadena determina cuál de
los cuatro desoxirribonucleótidos (A, C, G o T) será añadido. La reacción está impulsada por una variación muy
favorable de energía, provocada por la liberación de pirofosfato y su posterior hidrólisis en dos moléculas de fosfato
inorgánico.
“Dedos” “Pulgar”
Desoxirribonucleósido
trifosfato entrante
D.)
Cadena
patrón
Incorporación de un
Posicionamiento del nucleótido seguido de la
desoxirribonucleósido translocación del ADN
trifosfato entrante
Cadena
cebadora
ADN polimerasa
Desoxirribonucleósido
Forma de una molécula de ADN polimerasa, determinada por cristalografía trifosfsto entrante
de rayos X. De un modo gráfico, las ADN polimerasas se parecen a una
mano derecha, con los dedos y el pulgar sujetando el ADN y formando el
Pulgar
centro activo. En la secuencia de figuras que se muestra, el posicionamiento
Cadena
correcto de un desoxirribonucleósido trifosfato entrante provoca que los patrón
dedos de la polimerasa se cierren e inicien así la reacción de adición de un
nucleótido. La disociación de un pirofosfato provoca la relajación de los
dedos y la translocación del ADN de un nucleótido de manera que el centro
activo de la polimerasa quede preparado para recibir al siguiente Dedos Cadena
cebadora
desoxirribonucleósido trifosfato.
Palma
REQUERIMIENTOS DE LA ADN POLIMERASA:
- En primer lugar necesita los sustratos, que para el caso de la ADN polimerasa son los desoxirribonucleósidos
trifosfato, el desoxirribonucleótido entrante también aporta la energía necesaria para síntesis de ADN.
- Segundo, es necesario un cebador. Un cebador es un segmento de cadena (complementario del molde) con un
grupo 3’-OH libre apareado al cual pueden añadirse nucleótidos. Dicho de otra forma, parte de la cadena nueva ya
tiene que encontrarse en su lugar. Los cebadores son a menudo oligonucleótidos de ARN, en lugar de ADN, enzimas
especializadas sintetizan los cebadores donde y cuando son requeridos.
- Además, todas las ADN polimerasas requieren un molde. La reacción de polimerización está dirigida por una
cadena molde de ADN según las reglas de apareamiento de bases A-T y C-G.

Hebras parentales
sintetizadas en15N
ADN pesado
( 15N)
Nueva Nueva
Luego de la primera Vieja
replicación en 14 N
ADN híbrido
( 15 N — 14 N)
ADN ligero
( 14 N)
Luego de la segunda ADN híbrido
replicación en14N
Resultados:
Experimento de Meselson y Stahl
Densidad → Densidad →
1- Se cultivaron células durante muchas generaciones en un medio que contenía
sólo nitrógeno pesado, 15N, de modo que todo el nitrógeno del ADN era 15 N, tal
como lo muestra la presencia de una única banda (azul) cuando el ADN fue
centrifugado en un gradiente de CsCl.
2- seguidamente, se transfirieron las células a un medio que sólo contenía
nitrógeno ligero, 14N. El ADN celular aislado después de la primera generación
alcanzó el equilibrio en una posición superior del gradiente de CsCl (banda
púrpura).
3- La segunda generación dio dos híbridos y dos ADN ligeros (rojo), confirmando la
replicación semiconservativa.
El resultado del experimento, por tanto, contradecía la replicación conservadora.

En esa hipótesis alternativa, una molécula de ADN de la progenie estaría formada
por dos cadenas de ADN recién sintetizado, mientras que la otra contendría dos
cadenas parentales; este mecanismo no daría moléculas de ADN híbridas en el
experimento de Meselson y Stahl.
La replicación del ADN es semiconservativa: las estrictas secuencia de apareamiento (complementariedad)

implican que cada cadena de ADN actúa como molde para la síntesis de una cadena hermana, cuya secuencia es
predecible y complementaria. El resultado son dos moléculas de ADN nuevas, cada una con una hebra nueva y la
otra vieja. Este proceso se denomina REPLICACIÓN SEMICONSERVATIVA

Helicasas
EBoggaagaihgaaa.pro
Desenrollamiento
Elaboraba : TENDERME
•
2 Síntesis del primer de la cadena conductora
Elaborada : TENDERME
•
3 Elongación de la cadena conductora
EBaawaaazg.ee
: TENERME
•
Desenrollamiento
→
irregulares
Elongación de la cadena conductora
¥ :#
6 Síntesis del primer de la cadena rezagada
# :#
Elongación de la cadena rezagada
→ E-
.
Ligación de la hebra
La replicación empieza en un punto de origen (origen de

replicación) y normalmente avanza de forma
Horquilla de replicación Horquilla de replicación
bidirecccional. La replicación es un proceso altamente '
coordinado, en el que las cadenas parentales se 5’ 3’
desenrollan y replican simultáneamente. 5’

5’
3’
5’
3’ 5’
Cuando se separan las dos hebras complementarias de
3’ 5’
ADN en el origen de replicación, se abre la “burbuja de
replicación” que posee dos “horquillas de replicación” en
Burbuja de replicación
cada extremo de la burbuja, que avanzan en direcciones Origen de replicación
opuestas produciendo una extensión de esa burbuja de
replicación.

' '
.mg?j.....3
s o
÷
'
/ ¡
'
* ° s
Fragmentos de mahoma
:
¡
iii.
↳ a.
f./
µ
si • .
µ • No M. ADN más
:÷÷
• •
mi g. No @
µ
www.
•
My qq.TW recientemente my wo
Ñam
qu _
• G. A• •
o.am
%
pr ¡ v." % -
ii. sintetizados
:
Besaya
¥:*
" ogami
www.
¡ ?! Ó
• v.
• ←
g. No
G. No
mi:
•
÷. No masa -9%
3
'
Hebra Besaya
Y EY
g. B.
Hebra conductora z
,
:-.
a.
{
.
¥!¡
rezagada Mimosas
BB May Mr
. -99kg
www.oamna
•
•Miau masa
-
www.ooamlha-Bzqgg La polimerizacion ocurre en www. masa -9%

AreasWham Big
la misma dirección de la We
÷,
Bag
"
La polimerizacion ocurre Arozamena

apertura de la horquilla
]
Ray
Big
Mr
÷:| TÚ
. .
en dirección opuesta a la AreaMar
Mag Mr
}
www.oaam 3%
apertura de la horquilla Moana
•
3
'
msn.am
:
Bo
. - Se abre como un cierre
}
Arozamena
|!
Arozamena
Arozamena
Arozamena
Arozamena
en esta dirección
www.oaamnammha.oaankk
www.oaa
www.eaankk
Arozamena
www.eaanhha.m.aa.MY
AreaKlan
www.eaamna www.eaamna
AreaKlan Arozamena
Características de la replicación:
www.eaamna
q q.aa.mg
SEMICONSERVATIVA
Arozamena Arozamena
www.eaanhhammha.oaamna
BIDIRECCIONAL
www.eaamna
)
www.eaamna
÷ Mecanismo
SEMIDISCONTINUA
Minerva Minerva
Arozamena
' '
3
'
s
'
3 s
La hebra nueva de ADN (rojo) se sintetiza siempre en la dirección 5’ → 3’, siendo el 3’–OH libre el punto de
elongación del ADN. Debido a que las dos candas de ADN son antiparalelas, la cadena que sirve de molde es leída
en dirección opuesta, 3’ → 5’.
Si la síntesis transcurre siempre en la dirección 5’ → 3’, ¿cómo pueden sintetizarse las dos cadenas
simultáneamente? Si las dos fuesen sintetizadas continuamente a medida que se desplaza la horquilla de
replicación, una tendría que ser sintetizada en dirección 3’ → 5’. Este problema fue resuelto por Reiji Okazaki, quien
descubrió que una de las cadenas nuevas de ADN se sintetiza en forma de trozos cortos, denominados
fragmentos de Okazaki.
Una de las cadenas es sintetizada de modo continuo y la otra de modo discontinuo. La cadena continua, o cadena
conductora o líder, es aquella cuya síntesis en dirección 5’ → 3’ es transcurre en la misma dirección que el
movimiento de la horquilla de replicación. La cadena discontinua, o cadena rezagada, es aquella cuya síntesis en
dirección 5’ → 3’ transcurre en dirección opuesta a la dirección del movimiento de la horquilla (llamada “punto hacia
atrás”)
En las bacterias, los fragmentos de Okazaki tienen una
longitud de 1.000 a 2.000 nucleótidos. En las células
Horquilla de replicación Horquilla de replicación
eucariotas tienen de 150 a 200 nucleótidos.
Los fragmentos de Okazaki son unidos a continuación 5’ 3’
por la ADN ligasa. 5’ 3’
=
5’
5’
5’
_
3’
3’ 5’
Burbuja de replicación
Origen de replicación

La replicación tiene lugar com un grado extraordinario de fidelidad.
En E. Coli se comete un error sólo cada 10^9 ó 10^10 nuecleótidos Cadena
cebadora
incorporados.
Durante la polimerización, la discriminación entre nucleótidos *
correctos e incorrectos se basa no solamente en los puentes de

hidrógeno que especifican el apareamiento correcto entre bases
complementarias, sino también en la geometría común de los pares Una forma tautomérica rara de C (C*) se
Cadena aparea con A y así se incorpora a la cadena
de bases estándar A-T y C-G. El centro activo de la ADN polimerasa cebadora mediante la ADN polimerasa, pero el
patrón
acomoda solamente pares de bases con esta geometría. Un rápido cambio tauromérico de C* a citosina
normal (C) destruye su apareamiento con A
nucleótido incorrecto puede ser capaz de formar Puentes de
hidrógeno con una base del molde, pero generalmente no encajaría
en el centro activo. Las bases incorrectas pueden ser desechadas
antes de que se forme el enlace fosfodiéster.
El extremo 3’-OH no apareado de la cadena

La precisión de la reacción de polimerización es, no obstante, cebadora bloquea su posterior alargamiento
insuficiente para explicar el elevado grado de fidelidad de la por acción de la ADN polimerasa
replicación. In vivo se ha demostrado que las ADN polimerasas
insertan un nucleótido incorrecto de cada 10^4 a 10^5 correctos.
Estos errores se cometen, a veces, porque una base está

momentáneamente en una forma tautomérica infrecuente, que La actividad de la exonucleasa correctora
permite el apareamiento con una base incorrecta. La tasa de error 3’ a 5’ unida a la ADN polimerasa genera
un extremo 3’-OH con bases apareadas
disminuye in vivo gracias a mecanismos enzimáticos adicionales. en la cadena cebadora
Un mecanismo intrínseco de virtualmente todas las ADN polimerasas
es una actividad exonucleolítica 3’ → 5’ independiente, que hace
posible realizar una segunda comprobación de cada nucleótido una
vez ha sido añadido. Esta actividad nucleasa permite eliminar un
nucleótido recién incorporado y es altamente específica para pares La ADN polimerasa continúa el
de bases incorrectos. proceso de adición de nucleótidos al
extremo 3’-OH de la cadena cebadora
Si la polimerasa ha añadido un nucleótido incorrecto, se inhibe la
translocación de la enzima a la posición donde ha de incorporarse el
siguiente nucleótido. Esta pausa cinética proporciona una
oportunidad para la corrección. La actividad exonucleasa 3’ → 5’
elimina el nucleótido mal apareado y la polimerasa vuelve a empezar.
Esta actividad se denomina corrección de pruebas o corrección
de galeradas.
Tautomerización: reordenamiento de
modo tal que una base, en forma
transitoria, puede ser similar a otra. Este
proceso es rápidamente reversible.
En la edición de libros, las pruebas de

galeras son las versiones preliminares de
las publicaciones hechas con el fin de que
sean revisadas por autores, editores, y
correctores, a menudo con márgenes
POLIMERIZADORA CORRECTORA extraanchos.

La fidelidad del proceso de copia durante la replicación del ADN es tan alta que sólo se produce,
aproximadamente, un error en la replicación cada 10^9 pares de bases. Esta fidelidad es mucho mayor de la que
se esperaría teniendo en cuenta la exactitud del apareamiento de bases complementarias y que los pares
estándar de bases complementarias no son los únicos posibles. Por ejemplo, solamente unos pequeños cambios
en la geometría de la hélice permitirían que se formen dos Puentes de hidrógeno entre G y T en el ADN. Además,
en el ADN normal aparecen transitoriamente formas tauroméricas raras de las cuatro bases del ADN, en
proporciones de 1 parte por cada 10^4 o 10^6. Estas formas no se aparean correctamente a no ser que haya
cambios en la geometría de la hélice: por ejemplo, una forma tautomerica rara de C puede aparearse con A en
lugar de con G.
Si la ADN polimerasa no actuará cuando se forman apareamientos incorrectos de bases entre un
desoxirribonucleósido trifosfato entrante y el patrón de ADN, el nucleótido incorrecto sería incorporado a menudo
a la nueva cadena de ADN, dando lugar a mutaciones frecuentes. Sin embargo, la elevada fidelidad del proceso
de replicación del ADN no depende sólo del proceso de apareamiento de bases, sino también de varios
mecanismos de corrección de galeradas que actúan secuencialmente corrigiendo cualquier apareamiento
incorrecto inicial.
El primer paso en el proceso de “corrección de galeradas” lo lleva a cabo la ADN polimerasa y tiene lugar justo
antes de la adición de un nuevo nucleótido a la cadena en crecimiento. El nucleótido correcto tiene mayor
afinidad por la polimerasa en movimiento que el nucleótido incorrecto porque solamente el que es correcto puede
aparearse adecuadamente con el patrón. Además, después de la unión del nucleótido, pero antes de que sea
incorporado covalentemente a la cadena en crecimiento, la enzima ha de sufrir un cambio conformacional. Un
nucleótido incorrecto es más probable que se disocie durante este paso que otro correcto. Por lo tanto, este paso
permite que la polimerasa compruebe dos veces la geometría exacta de las bases apareadas antes de que
catalice la adición de nucleótidos.
La reacción siguiente es la corrección de galeradas exonucleotídica y actúa inmediatamente en los casos

raros en los que un nucleótido incorrecto se ha unido covalentemente a la cadena en crecimiento.
Las enzimas de ADN polimerasa no pueden empezar una cadena de nucleótidos uniendo dos nucleósidos
trifosfato, necesitan la presencia de un extremo 3’—OH libre de una cadena cebadora sobre la que añadir los
nucleotidos siguientes.
Las moléculas de ADN que presentan errores de apareamiento (o con falta de algún apareamiento) de
nucleótidos en el extremo 3’–OH de la cadena cebadora no son efectivas como cadena patrón porque la
polimerasa no puede alargar tal cadena. Las moléculas de ADN polimerasa son capaces de trabajar con cadenas
de ADN defectuosas de este tipo usando un sitio catalítico diferente (ya sea en otra subunidad o en un dominio
distinto de la molécula de polimerasa). Esta exonucleasa correctora 3’ a 5’ corta cualquier residuo desapareado
del final de la cadena cebadora y continúa hasta que se ha eliminado un número suficiente de nucleotidos del
extremo 3’ como para regenerar un extremo con bases apareadas que pueda cebar la síntesis del ADN. Así, la
ADN polimerasa actúa como una enzima “autocorrectora” que va eliminando sus propios errores de
polimerizacion a medida que avanza por el ADN.
El requerimiento de la presencia de un extremo de ADN formado por un apareamiento perfecto de bases es
esencial para que se den las propiedades de “autocorrección” de la ADN polimerasa.

Únicamente la replicación del ADN en dirección 5’ a 3’ permite la existencia de un proceso de
corrección de errores eficiente.
Si existiera una ADN polimerasa que añadiera desoxirribonucleósidos trifosfato de forma que produjera el
crecimiento de la cadena en dirección 3’ a 5’, el extremo 5’ en crecimiento transportaría el trifosfato activador
en lugar de hacerlo el mononucleótido entrante. En este caso, los errores de polimerización no serían
simplemente eliminados por hidrólisis ya que la síntesis de un extremo 5’ desnudo terminaría inmediatamente
la síntesis delADN.
El crecimiento en dirección 5’ a 3’ (derecha)

permite que la cadena se alargue de forma
continua cuando se ha eliminado un error
en la polimerización mediante la corrección
exonucleolítica.
Cuando se elimina
un nucleótido por
“corrección de pruebas”
se produce un extremo 5’
desoxirribonucleósido
trifosfato correcto
entrante
En cambio, la corrección exonucleolítica en el

caso de la hipotética polimerización de 3’ a 5’
(izquierda) provocaría el bloqueo en el
crecimiento de la cadena.

Los apareamientos incorrectos se corrigen casi siempre de acuerdo con la información contenida en la cadena
molde, de manera que el sistema ha de discriminar de algún modo entre la cadena molde y la recién sintetizada.
Las bacterias consiguen este objetivo marcando el ADN molde con grupos metilo para distinguirla de las cadenas
recién sintetizadas.
La discriminación de la hebra se basa en la acción de la Dam metilasa, que metila el ADN en la posición N 6 de todas
las adeninas presentes en la secuencia GATC (en el origen de replicación).
ÍÍ
Inmediatamente después del paso de la horquilla de replicación,
hay un corto período de tiempo (unos pocos segundos o
C 3
minutos), durante el cual la hebra molde está metilada mientras
: que la cadena recién sintetizada no lo está. El estado transitorio
'
s
'
3
s MutS sin metilar de las secuencias GATC de cadena recién sintetizada

MutL
] 3 3 .
permite distinguir entre ésta y la hebra molde, los apareamientos

C z
C 3 incorrectos en la vecindad de una secuencia GATC semimetilada
cochazo
Doo se reparan seguidamente de acuerdo con la información
Complejo
]
MutH
MutL-MutS contenida en la hebra parental (molde) metilada.
] 3 3 .
El reconocimiento de la secuencia GATC y del apareamiento

incorrecto son funciones especializadas de las proteínas MutH y
MutS, respectivamente. La proteína MutL forma un complejo con
MutS en el apareamiento incorrecto. El ADN pasa a través de
C z BOMBEO c , este complejo, de manera que el complejo se mueve
joo
simultáneamente en ambas direcciones a lo largo del ADN hasta
MutH
MutH corta la hebra
que encuentra una proteína MutH unida a una secuencia GATC
no modificada
semimetilada. MutH corta la hebra no metilada en el lado 5’ de la
-
C 3
G en la secuencia GATC.
C 3 C 3
' '
3 o
°
" °
MutS
°
Mut L Finalización de la reparación de
] 3 3 MutH
.
apareamientos incorrectos:
La acción combinada de la ADN helicasa II, la
C 3 C 3 C 3 C 3 SSB y una de entre 4 exonucleasas diferentes
-
elimina un segmento de la hebra nueva entre el

÷ MutL-MutS
ADN helicasa II
MutL-MutS
ADN helicasa II
sitio de corte de MutH y un punto más allá del
exonucleasa VII exonucleasa I
] 3 3 .
o ] 3 3 .
o apareamiento incorrecto. El hueco resultante es

Reej nucleasa exonucleasa X
C z C 3 C 3 C 3
rellenado por la ADN polimerasa III y la mella es
-
-
sellada por la ADN ligasa.
ADN polimerasa III ADN polimerasa III
SSB SSB

Las dos proteínas que se muestran están presentes tanto en bacterias
como en células eucariotas: MutS se une específicamente a un par de
bases mal apareado, mientras que MutL rastrea el ADN cercano en
busca de una muesca. Cuando encuentra una, MutL provoca la
degradación hacia atrás de la cadena que contiene la muesca, hasta
las bases mal apareadas.

Recordemos que para funcionar la ADN polimerasa necesita un extremo 3’–OH
libre que es proporcionado por un cebador (o primer) de ARN.
Para el caso de la cadena conductora, únicamente es necesario un cebador al
inicio de la replicación, en el caso de la cadena rezagada, son necesarios
múltiples cebadores que se vayan ubicando más adelante a medida que se va
abriendo la doble hebra.
La ADN primasa utiliza ribonucleósidos trifosfato para sintetizar cortas cadenas
cebadoras de ARN sobre la cadena retrasada. En los eucariotas, estos
cebadores tienen aproximadamente 10 nucleótidos de longitud y son sintetizados
a intervalos de 100-200 nucleótidos sobre la cadena retrasada.
La ADN polimerasa utiliza el extremo 3’–OH libre apareado del cebador y elonga
la cadena de ADN a partir de este extremo para empezar un fragmento de
Okazaki. La síntesis de cada fragmento de Okazaki acaba cuando esta ADN
polimerasa se encuentra con el cebador de ARN del fragmento anterior de ADN.
Para producir una cadena continua de ADN a partir del gran número de
fragmentos sintetizados sobre la cadena rezagada, rápidamente actúa un
sistema especial de reparación del ADN que elimina el cebador de ARN y
lo sustituye por ADN. A continuación, una enzima llamada ADN Ligasa
une el extremo 3’ de cada nuevo fragmento de ADN al extremo 5’ del
fragmento anterior, completando así el proceso.
¿Por qué se sintetiza un cebador que luego de tendrá que eliminar en

lugar de utilizar un cebador de ADN que no sería necesario eliminar? El
argumento de que una polimerasa autocorrectora no puede iniciar
cadenas de novo también implica lo contrario: una enzima capaz de iniciar
cadenas de novo no puede presentar un sistema eficiente de
autocorreccion. Por consiguiente, cualquier enzima que inicie la síntesis
de los fragmentos de Okazaki producirá, necesariamente, una copia
relativamente incorrecta.
Las ARN polimerasas (y la ADN primasa) no tiene capacidad

autocorrectora. Las ARN polimerasas implicadas en la transcripción
genica no necesitan ser autocorrectoras: los errores en la transcripción del
ARN no pasan a la generación siguiente y la existencia ocasional de una
molécula defectuosa no es relevante (los ARN se degradan y las
proteínas igual, no son “eternos”). Así, las ARN polimerasas son capaces
de iniciar una cadena de polinucleótidos en ausencia de un cebador.
La ADN ligasa utiliza una

molécula de ATP para
activar el extremo 5’ en la
hendidura antes de formar
el nuevo enlace.

I II III
GEN ESTRUCTURAL Pol A Pol B Pol C (dna E)
SUBUNIDADES I >4 > 10

Todas tienen
capacidad Mr 103000 88000 830000
autocorrectora
ACTIVIDAD EXONUCLEASA 3’–5’ SI SI SI
ACTIVIDAD EXONUCLEASA 5’–3’ SI NO NO
Sirve para VELOCIDAD DE POLIMERIZACIÓN 16-20 N/s 40 N/s 250-1000 N/s

eliminar los
cebadores
PROCESIVIDAD (nucleótidos añadidos 3-200 1.500 > 500.000
antes de la disociación de la polimerasa)
Esto no lo tienen que saber pero lo agregué porque me

pareció fantástico:
La actividad exonucleasa 5’–3’ le permite reemplazar un

segmento de ADN (o ARN) apareado con la hebra
molde, en un proceso denominado translación de la
mella (una hebra de ARN o de ADN apareada con el
molde de ADN es simultáneamente degradada por la
actividad exonucleasa 5’–3’ de la ADN polimerasa I y
reemplazada por la actividad polimerasa de la misma
enzima. Estas actividades son importantes tanto en la
reparación del ADN como en la eliminación de los
cebadores de ARN durante la replicación.
La hebra de ácido nucleico (ADN o ARN) que debe ser
eliminada se muestra en verde, la hebra de reemplazo
en rojo. La síntesis de ADN comienza en una mella (un
enlace fosfodiéster roto que deja un 3’–OH libre y un
fosfato en 5’ libre). La polimerasa I extiende la hebra de
ADN que no hace de molde y desplaza la mella a lo
largo del ADN. Este proceso se denomina traslado de la eran
Mella
mella. En el sitio donde se disocia la ADN polimerasa I
queda una mella, hasta que otra enzima la sella.

ADN
:-|
Absorción de luz de 260-nm
monohebra
Porcentaje de pares G–C
Tm: temperatura de melting -

temperatura a la cual las dos hebras
de ADN se separan.
ADN
doblehebra .
. ]
3 3
Temperatura (ºC) Tm (ºC)

Para abrir la doble hélice y poner al descubierto la cadena patrón del ADN
que será copiada por la ADN polimerasa, son necesarias dos proteínas
adicionales: la ADN helicasa y las proteínas de unión a monohebra (SSB).
Las proteínas de unión a monohebra (SSB de Single Strand DNA-binding) se unen fuertemente y de un modo
cooperativo a cadenas de ADN abiertas, sin tapar las bases de la cadena, las cuales, por lo tanto, quedan
disponibles para actuar como patrón.
Estas proteínas no son capaces de abrir

directamente una larga cadena de ADN, pero
colaboran con las helicasas estabilizando la
conformación desenrollada de las cadenas
sencillas. Además, su unión cooperativa
recubre completamente las regiones de ADN
de cadena sencilla en la cadena rezagada
evitando así la formación de cortas hélices en
forma de horquilla que se forman rápidamente
en cadenas sencillas de ADN.

og
Abrazadera
deslizante adora
cargador de
la abrazadera
La mayoría de las ADN polimerasas solo sintetizan, por sí mismas, cortas

cadenas de nucleotidos antes de separarse del ADN patrón. Esta
tendencia a dejar rápidamente la molécula de ADN permite a la molécula
de ADN Polimerasa que acaba de sintetizar un fragmento de Okazaki
sobre la cadena rezagada reciclarse rápidamente, empezando en nuevo a
sintetizar el siguiente fragmento de Okazaki sobre la misma cadena. Sin
embargo, esta rápida disociación supondría una dificultad para que la
polimerasa sintetizara largas cadenas de ADN en la horquilla de
replicación, si no existiera una proteína accesoria que actuase como
abrazadera reguladora.
Esta abrazadera mantiene a la polimerasa firmemente unida al ADN

cuando se desplaza, pero la libera en cuanto la polimerasa se detiene
ante una región de doble cadena.
Esta proteína forma un amplio anillo alrededor de la hélice de

ADN. Un lado se une a la parte trasera de la ADN polimerasa y
el anillo completo se desliza libremente a medida que la
polimerasa se desplaza por la cadena de ADN. El ensamblaje
de la abrazadera alrededor del ADN requiere hidrólisis de ATP
mediante un complejo de proteínas especial, el cargador de la
abrazadera, que hidroliza ATP cuando una la abrazadera al
patrón cebador.
En la cadena conductora patrón, la ADN polimerasa

que se desplaza está fuertemente unida a la
abrazadera y ambas permanecen asociadas durante
un largo período de tiempo. En cambio, en la cadena
retrasada patrón, la polimerasa se libera cada vez
que llega al extremo 5’ del fragmento de Okazaki
precedente; entonces, esta molécula de polimerasa
se asocia a una nueva abrazadera en el cebador de
ARN del siguiente fragmento de Okazaki.

Cadena conductora patrón
Abrazadera deslizanre
ADN polimerasa sobre
Cadena recién la cadena conductora
sintetizada
El próximo fragmento de
Okazaki empezar aquí a o h E a a i a @ M 4 i B G .d l G
.ua
Cebador de ARN
BABETTE ADN helicasa
ADN primasa Primosoma
Fragmento de Okazaki nuevo
go.gov.sa Proteínas de unión
apago
a monohebra (SSB)
T.I.ae
Cadena retrasada patrón
una Cargador de la abrazadera
ADN polimerasa sobre la cadena retrasada

(acabando de sintetizar un fragmento de Okakazi)
En la horquilla actúan dos moleculas de ADN polimerasa, una en la cadena conductora y la otra en la retrasada. La
hélice de ADN se va abriendo mediante la acción de la Helicasa que se va desplazando por las cadenas que tiene
por delante. La apertura de la hélice esta favorecida por moléculas de proteínas de unión cooperativa al ADN
monohebra (las SSB). Mientras que la molécula de ADN polimerasa que actúa sobre la cadena conductora puede
proceder de una forma continua, la que actúa sobre la cadena rezagada (o retrasada) ha de volver a empezar a
intervalos, usando como cebador cortos segmentos de ARN sintetizados por una molécula de ADN Primasa.
La eficiencia de la replicación aumenta notablemente gracias a la estrecha asociación de todos estos componentes
proteicos.
En procariotas, la molécula de primasa se une directamente a la ADN helicasa, formando un complejo doble la
cadena rezagada, denominado primosoma. El primosoma se desplaza con la horquilla y a medida que va
avanzando va sintetizando cebadores (o primers) de ARN. De forma similar, la molécula de ADN polimerasa que
sintetiza ADN sobre la cadena retrasada se desplaza de forma coordinada con el resto de las proteína, sintetizando
una sucesión de nuevos fragmentos de Okazaki.
Cadena
conductora patrón ADN polimerasa sobre
Parece que para acomodar este ordenamiento, la
la cadena conductora
cadena retrasada se va plegando de nuevo tal como se
indica en la imagen inferior derecha. Este ordenamiento Cadena recién
aurga.w.mg
también facilita la unión de la abrazadera de la sintetizada ADN helicasa
polimerasa cada vez que se sintetiza un fragmento de Proteínas
AMEBLO.HN?aeagGnuao.Baaaa.
Okazaki: el cargador de la abrazadera y la ADN de unión a ADN primasa
monohebra
polimerasa de la cadena retrasada se mantienen en su (SSB) Cadena retrasada
Taaaan
aBBbggiwG⑨
lugar como parte de la maquinaria proteica, incluso
cuando se separan del ADN. Así pues, las proteínas de Da patrón
replicacion se mantienen unidas formando una gran Rohan .

-
Gamora
unidad (PM > 10^6 Da) que se desplazará rápidamente
Cebador Cargador de
a lo largo del ADN, permitiendo su síntesis en las dos de ARN la abrazadera Cadena
direcciones de la horquilla. Fragmento de recién
Okazaki nuevo sintetizada
Luego, la ADN polimerasa I remueve el cebador y la
Ligasa sella la muesca. ADN polimerasa sobre la cadena retrasada
(acabando de sintetizar un fragmento de Okakazi)

A medida que una horquilla de replication se va desplazando a lo largo
de una doble cadena de ADN, genera lo que se ha llamado un
“problema de enrollamiento y empaquetamiento”. Para resolverlo la
célula cuenta con la ayuda de las Topoisomerasas.
Puede considerarse que una topoisomerasa es una especie de

nucleasa reversible que se une covalentemente a un fosfato del ADN
rompiendo un enlace fosfodiester de una cadena del ADN. Esta
reacción es reversible y el enlace fosfodiester se vuelve a formar en
cuanto la proteína se separa.
Topoisomerasa I: genera transitoriamente una rotura de una sola

cadena (o una muesca). Esta rotura en el esqueleto fosfodiester
permite a las dos cadenas de la hélice del ADN situadas a cada lado
de la muesca girar libremente una respecto a la otra. Cualquier tensión
que se genere en la hélice del ADN dirigirá la rotación en la dirección
en la que esta tensión se disipe. Dado que el enlace covalente que une
la topoisomerasa al fosfato del ADN retiene la energía del enlace
fosfodiester roto, la nueva formación del enlace fosfodiester es rápida y
no requiere ningún aporte adicional de energía.

④
Importante en procariotas donde pueden quedar “enganchadas”
las dos moléculas de ADN luego de la replicación
Topoisomerasa II: forma una unión covalente con ambas

cadenas de la hélice de ADN al mismo tiempo, generando
transitoriamente una rotura en las dos cadenas de ADN. Estas
enzimas son activadas por determinadas zonas del cromosoma
en las que dos hélices se cruzan entre sí. Cuando la
topoisomerasa II se une a un lugar de cruce así, la proteína
utiliza la hidrolisis del ATP para llevar a cabo de forma eficiente
las siguientes reacciones:
1) rompe una de las dobles hélices, de forma reversible
generando una “puerta” en el ADN.
2) hace que la otra doble hélice pase a través de esta rotura.
3) vuelve a unir las cadenas de ADN que había roto y se
separa del ADN

Cadena conductora patrón
Cadena recién ADN polimerasa δ

sintetizada
ao
Fragmento de
Cebador
de ARN
aREoa.w a@%aBaa.-Boaro y.Ee%ga .BR
aaaaa.edu
Okazaki nuevo
.
ADN helicasa
Abrazadera ADN polimerasa α / primasa
deslizanre
apaña
D••⑤%
Proteínas de unión
a monohebra (SSB)
Cadena retrasada patrón
nada
Cargador de la abrazadera
ADN polimerasa δ
En eucariotas, las máquinas de replicación están formadas por más componentes proteicos que en sus homólogos
de bacterias, a pesar de que las funciones básicas son las mismas.
Así, por ejemplo, la proteína de unión a ADN monohebra (SSB) en eucariotas está formada por tres subunidades,
mientras que en bacterias solamente tiene una subunidad.
De forma similar, la ADN primasa se incorpora a una enzima con varias subunidades llamada polimerasa α. La
polimerasa α empieza cada fragmento de Okazaki en la cadena retrasada con ARN y luego alarga este cebador de
ARN con un corto fragmento de ADN, antes de ceder el extremo 3’ de este cebador a una segunda enzima, la
ADN polimerasa δ. Esta segunda ADN polímeros sintetiza entonces el resto de cada fragmento de Okazaki con la
ayuda de una proteína abrazadera.
En eucariotas hay múltiples orígenes de replicación, las

células eucariotas tienen moléculas de ADN más
grandes y sus polimerasas tiene menor procesividad.
Las horquillas de replicación se forman de a pares y
generan una burbuja de replicación a medida que se
van desplazando en direcciones opuestas desde un
punto de origen común. Solamente se detienen cuando
chocan con otra horquilla de replicación que se
desplaza en la dirección opuesta (o cuando llegan al
final del cromosoma).

La síntesis de ADN comienza en los orígenes de
replicación
Para poder utilizar el ADN como patrón, en primer

lugar la doble hélice ha de abrirse y permitir que las
dos cadenas separadas expongan las bases
desapareadas. El proceso de replicacion del ADN
empieza mediante proteínas iniciadoras especiales
que se unen a la doble cadena de ADN y separan
ambas cadenas rompiendo los puente de hidrógeno
entre las bases.
La doble hebra se une en los orígenes de

replicación, que suelen ser regiones de ADN
enriquecidas en pares A–T.
Estos orígenes están especificados por secuencias
de ADN de varios centenares de pares de
nucleótidos. Este ADN contiene secuencias cortas
que atraen a las proteínas iniciadoras.
Los cromosomas bacterianos tienen un solo origen de replicación
La replicación del ADN empieza en un solo origen de replicación y las dos

horquillas de replicación que se ensamblan en él se desplazan en
direcciones opuestas hasta que se encuentran aproximadamente a medio
camino del cromosoma.
El único punto en el que las bacterias pueden

controlar la replicación del ADN es en su inicio:
una vez la horquilla se ha ensamblado en el
origen, se desplaza a una velocidad relativamente
constante hasta terminar la replicación.
Comienza cuando varias copias de las proteínas
iniciadoras se unen a lugares específicos del
origen de replicación, de manera que el ADN
envuelve a las proteínas formando un gran
complejo proteína-ADN. Este complejo se une
después a la ADN helicasa y la carga sobre una
cadena sencilla de ADN adyacente, cuyas bases
han quedado expuestas tras el ensamblaje del
complejo iniciador proteína-ADN. La ADN primasa
se une a la helicasa, formando el primosoma, que
sintetizará el cebador. Luego las proteínas
restantes se ensamblan rápidamente.

Como vimos, la síntesis de la cadena retrasada en la horquilla de replicación se produce de forma discontinua a
través de un proceso de “punto hacia atrás” que produce fragmentos cortos de ADN. Este mecanismo tiene un
problema especial cuando la horquilla de replicación llega al final de un cromosoma lineal: no hay lugar para producir
el cebador del ARN necesario para iniciar el último fragmento de Okazaki al final de una molécula lineal de ADN.
Para evitar perder material genético importante (codificante), los

cromosomas eucariotas tienen secuencias repetitivas no
codificantes en los extremos, denominados Telómeros, estos
consisten en muchas repeticiones en tándem de secuencias cortas
que contienen un grupo de nucleotidos G cercanos. En humanos,
esta secuencia es GGGTTA y abarca aproximadamente unos
10.000 nucleotidos.
Estas secuencias son reconocidas por la Telomerasa, esta enzima
reconoce la punta de una cadena rica en G de la secuencia
repetitiva de un telómero de ADN ya existente y la a larga en
dirección 5’ a 3’.
La telomerasa sintetiza una nueva copia de

la secuencia repetitiva, utilizando un patrón
de ARN que es un componente de la propia
enzima (es una retrotranscriptasa).
Después de varios ciclos de extensión de la

cadena paterna de ADN mediante la
telomerasa, la replicación de la cadena
retrasada en el extremo del cromosoma se
puede completar utilizando estas
extensiones como patrón para la síntesis de
la cadena complementaria utilizando una
molécula de AND polimerasa.
Supongamos que pudimos poner un cebador bien en el extremo...

igual al removerlo queda el bache
Este mecanismo asegura que el extremo 3’ del ADN de cada telomero sea
siempre un poco más largo que el extremo 5’ con el que está apareado,
dejando un extremo protuberante de cadena sencilla. Se ha demostrado que
este extremo protuberante se curva hacia atrás introduciendo su extremo de
cadena sencilla en el ADN dúplex de la secuencia telomérica repetitiva. De
este modo, el extremo normal de un cromosoma tiene una sola estructura, que
lo protege de las enzimas degradativas y lo distingue claramente de los
extremos de moléculas de ADN rotas que la célula repara rápidamente.

Oxidaciones
Hidrólisis
Metilaciones
El tamaño de las flechas representa la frecuencia relativa de acontecimientos
El ADN sufre cambios importantes como resultado de fluctuaciones térmicas, por ejemplo:
Cada día, el ADN de una célula humana pierde aprox 5.000 bases púricas (A y G) porque los enlaces N-
glicosídicos entre estas bases y la desoxirribosa se hidrolizan espontáneamente: despurinación
También se produce la desaminación de citosina a uracilo a una tasa de aprox 100 bases por célula y día.
Las bases de ADN también se pueden dañar ocasionalmente mediante metabolitos reactivos (como las
formas reactivas del oxígeno) o por productos químicos del ambiente.
Asimismo, a luz UV del sol puede favorecer a la formación de un enlace covalente entre dos bases de
pririmidina del ADN, formándose un dímero de pirimidina.
DESPURINACIÓN Y DESAMINACIÓN DÍMERO DE TIMINA

Son las dos reacciones químicas espontáneas más frecuentes que se sabe Este tipo de alteración puede
que provocan daños importantes en el ADN de las células. aparecer en el ADN de células
La despurinación puede liberar guanina a partir de ADN, además de expuestas a radiación UV (como
adenina. la luz solar). Puede formarse un
El tipo mayoritario de desaminación transforma citosina en una base de dímero similar entre dos bases
ADN alterada, uracilo, pero la desaminación también se puede producir de pirimidinas vecinas
sobre otras bases. cualesquiera (residuos de C o T)
en el ADN

La supervivencia del individuo requiere estabilidad genética. Para mantenerla, no sólo hacen falta mecanismos muy
exactos para la replicación, sino también mecanismos para la reparación de muchas lesiones accidentales que
ocurren continuamente en el ADN. Muchos de estos cambios espontáneos son transitorios porque son corregidos
inmediatamente por una serie de procesos denominados reparación del ADN. Menos de 1 de cada 100 cambios
accidentales de bases en el ADN da lugar a una mutación permanente, el resto son eliminados con una eficacia
extraordinaria.
La importancia de la reparación del ADN queda ilustrada por la enorme inversión que hacen las células en enzimas
reparadoras de ADN (y de energía).
Defectos en los genes que actúan reparando las bases del ADN mal apareadas en el proceso de replicación
pueden causar una predisposición hereditaria a ciertos cánceres, lo cual refleja un aumento de la frecuencia de
mutación. En la xerodermia pigmentosa, los individuos afectados tienen una sensibilidad extrema a la radiación UV
porque no pueden reparar los diméros de pirimidina. Este defecto da lugar a un aumento de la frecuencia de
mutaciones que conduce a graves lesiones de la piel y un alto riesgo de desarrollo de CA de piel.
Las alteraciones espontáneas, de no corregirse, podrían llevar a la eliminación de uno o más pares de bases, o
bien a la sustitución de un par de bases de la cadena de ADN hija. Entonces la mutación se propagaría a la
siguiente generación celular cuando el ADN se replica. Una tasa tan alta de cambios al azar en la secuencia de
ADN tendría consecuencias desastrosas para un organismo.
Cómo producen mutaciones las modificaciones químicas de los nucleótidos
La desaminación de la citosina, si no se corrige, da lugar a la sustitución de una base por otra cuando se replica el
ADN. La desaminación de la citosina produce un uracilo. El uracilo difiere de la citosina en sus propiedades de
apareamiento de bases y preferentemente se aparea con adenina. Así, cuando la maquinaria de replicación del ADN
se encuentre con un uracilo en la cadena patrón, añade una adenina.
Si no se corrige, la despurinación puede dar lugar a la sustitución o a la pérdida de un par de nucleótidos. Cuando
la maquinaria de replicación detecta la ausencia de una purina en la cadena patrón, puede saltar al siguiente
nucleótido completo produciendo de este modo la eliminación del nucleótido en la cadena recién sintetizada, que
como consecuencia generará un corrimiento del marco de lectura (que alteraría completamente la secuencia de AA
de una proteína por ejemplo).
Los enlaces covalentes entre bases (como los dimeros de pirimidina) generan una anormalidad estructural en el
ADN

Reparacion
µ
La estructura de doble hélice del ADN es muy adecuada para la reparación porque lleva dos copias separadas de
toda la información genética, una en cada una de sus dos cadenas. Así, cuando se daña una de las cadenas, la
cadena complementaria retiene una copia intacta con la misma información y esta copia generalmente es utilizada
para restaurar la secuencia correcta de nucleótidos en la cadena dañada.
Cada célula tiene muchos sistemas de reparación del ADN, cada uno de los cuales tiene sus propias enzimas y
preferencias por el tipo de alteración que reconocen. Muchos de estos sistemas utilizan la cadena no alterada de la
doble hélice como patrón para reparar la cadena dañada.
Vas vías de reparación más comunes son la reparación por eliminación de base y la reparación por eliminación de
nucleótidos. En ambos casos, la porción del ADN dañada es eliminada, se restablece la secuencia original de ADN
mediante una ADN polimerasa que utiliza la cadena no dañada como patrón y la rotura que queda en la doble hélice
de sella mediante la ADN ligasa. Se diferencian en cómo se elimina la alteración de la cadena de ADN.
Implica la activación de una batería de enzimas llamadas ADN

glicosilasas. Cada enzima reconoce un tipo de base de ADN alterada
y cataliza su eliminación por hidrólisis (existen al menos 6).
Acá, la enzima uracilo ADN glicosilasa (o uracil glicosilasa) elimina

del ADN una citosina desaminada.
Cuando se ha reconocido una base dañada, la reacción de la ADN
glicosilasa produce un azúcar desoxirribosa que ha perdido su base
(genera un sitio AP: apúrico o apirimídico). Esta ausencia es
reconocida por una AP endonucleasa y una fosfodiesterasa, que
cortan el esqueleto de fosfodiester. El hueco dejado por el nucleótido
es rellenado mediante la ADN polimerasa, utilizando como molde la
hebra complementaria (la I según el Lehninger) y finalmente la ADN
Ligasa sella la muesca.
En el caso de la despurinación, que es el tipo de alteración más

frecuente del ADN, también da lugar a un sitio AP. Las
despurinaciones son reparadas directamente empezando con la AP
endonucleasa + fosfodiesterasa y siguiendo como en el caso de la
desaminación.

Este mecanismo es capaz de eliminar casi cualquier tipo
de gran lesión del ADN que genere un cambio importante
en la estructura de la doble hélice del ADN (ej: los dimeros
de pirimidina, causados por la radiación UV, y las lesiones
que se generan por reacción covalente de las bases del
ADN con grandes moléculas de hidrocarburos como el
Benzopireno
benzopireno).
En esta vía existe un gran complejo multienzimático que

rastrea el ADN buscando, más que cambios específicos
de bases, distorsiones en la doble hélice.
Después de que un complejo reconoce una gran lesión,

como un dímero de pirimidina, una Endonucleasa
produce un corte a cada lado de la lesión y una ADN
helicasa asociada elimina toda la porción de la cadena
dañada. En las bacterias, este complejo multienzimático
deja un hueco de 12 nucleótidos; en humanos, el número
de nucleótidos eliminados es más del doble.
Luego, la ADN polimerasa rellena el espacio y la Ligasa
sella la muesca.
Los mecanismos de reparación descriptors no pueden operar en virus que poseen como material
genético ADN o ARN de cadena simple.
Un indicio de la importancia que tiene una hélice de doble cadena

para el almacenamiento seguro de la información genética es que
las células la utiliza; solamente unos cuantos virus pequeños
utilizan ADN o ARN de cadena sencilla como material genético.
Los tipos de procesos de reparación descritos no pueden actuar
sobre estos ácidos nucleicos. La probabilidad de que un cambio de
nucleótido resulte ser permanente en los genomas de cadena
sencilla de estos virus es muy alta, esto explicaría las altas tasas de
mutación que presentan.

Cualquier posible suceso de desaminación en el ADN da lugar a una base no natural, que puede ser reconocida y
eliminada mediante una ADN glicosilasa específica.
La desaminación de la C da U, pero la U puede ser reconocida como extraña en la molécula de ADN.
El problema está en la 5-metil citosina:

En los vertebrados, algunos nucleótidos de C (aproximadamente el 3%) están metilados en secuencias C-G
específicas de genes inactivos (regula la expresión génica). La desaminación de estos nucleótidos C metilados
dan lugar a una T, el cual forma un apareamiento erróneo con el nucleótido G de la otra cadena.
En los apareamientos T–G, se toma a la timina como errónea y se elimina, esto es llevado a cabo por una
glicosilasa particular, sin embargo, este mecanismo de reparación ha de ser relativamente ineficiente, ya que los
nucleotidos C metilados son lugares habituales de mutación en el ADN de los vertebrados, aunque sólo el 3% de
C están metilados, las mutaciones en estos nucleótidos constituyen 1/3 de las mutaciones de una sola base
observadas en enfermedades hereditarias humanas.

Cuando las dos cadenas de la doble hélice del ADN se rompen, se produce un tipo potencialmente peligroso de
alteración del ADN, porque no queda ninguna cadena patrón que permita la reparación. Las roturas de este tipo
están causadas por radiación ionizante, por agentes oxidantes, por errores de replicación y por ciertos productos
metabólicos de la célula. Si se dejaran sin reparar, llevarían al rápido fraccionamiento de los cromosomas en
pequeños trozos. Sin embargo, existen dos mecanismos para mejorar este daño potencial.
El más sencillo es la unión de extremos no homólogos, en el cual los

extremos rotos se yuxtaponen y se vuelven a unir mediante la ligadura del ADN,
generalmente con la pérdida de uno o más nucleótidos en el punto de unión.
Este mecanismo es común en mamíferos y puede considerarse una solución de
emergencia para reparar las roturas de la doble cadena del ADN. A pesar de la
aparición de un cambio en la secuencia de ADN (mutación) en el lugar de
rotura, en mamíferos la porción del genoma que codifica proteínas es tan baja
que aparentemente este mecanismo es aceptable para conseguir mantener
intactos los cromosomas.
Otro tipo de reparación todavía más efectivo aprovecha el hecho de que las células diploides contienen dos copias
de cada doble hélice. En la unión de extremos homólogos se recurre al mecanismo de recombinación general
para transferir la información de la secuencia de nucleótidos desde una doble hélice intacta al lugar de la rotura de
la otra doble hélice. Esto requiere proteínas de recombinación especiales que reconozcan áreas de la secuencia de
ADN que coincidan en los dos cromosomas, y que las acerquen. A continuación, se repara el cromosoma dañado
sin que se haya producido ningún cambio en la secuencia del ADN, mediante un proceso de replicación del ADN en
el que se utiliza al cromosoma no dañado como patrón para transferir la información al cromosoma roto.
En las células que han replicado su ADN pero que aún no se han dividido, este tipo de reparación puede darse
rápidamente entre las dos moleculas hermanas de ADN en cada cromosoma; en este caso, no es necesario que los
extremos rotos encuentren la secuencia de ADN coincidente en el cromosoma homólogo.
A pesar de estar presente en humanos, este tipo de reparación predomina en bacterias.

Ruptura de los cromosomas
Dada la importancia de mantener el ADN intacto y si daños de una generación

a la siguiente, las células disponen de otro mecanismo que las ayuda a
responder a la alteración del ADN: retrasan la progresión del ciclo celular hasta
completar la reparación del ADN.
P53


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Mecanismos Geneticos Basicos 1

Apoyo para biología 221 6822889

La doble hélice de ADN actúa como patrón para su propia duplicación:

como patrón para la formación de una nueva C C

La reacción fundamental mediante la cual se Cadena Cadena

desoxirribonucleótido al extremo 3’-OH libre de una

hace que su secuencia de nucleótidos sea Pirofosfato

La replicación del ADN es llevada a cabo por la Desoxirribonucleosido trifosfato entrante

Apoyo para biología 221 6822889

REQUERIMIENTOS DE LA ADN POLIMERASA:

Apoyo para biología 221 6822889

El resultado del experimento, por tanto, contradecía la replicación conservadora.

La replicación del ADN es semiconservativa: las estrictas secuencia de apareamiento (complementariedad)

Apoyo para biología 221 6822889

2 Síntesis del primer de la cadena conductora

3 Elongación de la cadena conductora

La replicación empieza en un punto de origen (origen de

coordinado, en el que las cadenas parentales se 5’ 3’

desenrollan y replican simultáneamente. 5’

Apoyo para biología 221 6822889

www.ooamlha-Bzqgg La polimerizacion ocurre en www. masa -9%

La polimerizacion ocurre Arozamena

por la ADN ligasa. 5’ 3’

Apoyo para biología 221 6822889

correctos e incorrectos se basa no solamente en los puentes de

El extremo 3’-OH no apareado de la cadena

Estos errores se cometen, a veces, porque una base está

En la edición de libros, las pruebas de

Apoyo para biología 221 6822889

La reacción siguiente es la corrección de galeradas exonucleotídica y actúa inmediatamente en los casos

Apoyo para biología 221 6822889

El crecimiento en dirección 5’ a 3’ (derecha)

En cambio, la corrección exonucleolítica en el

Apoyo para biología 221 6822889

s MutS sin metilar de las secuencias GATC de cadena recién sintetizada

permite distinguir entre ésta y la hebra molde, los apareamientos

El reconocimiento de la secuencia GATC y del apareamiento

elimina un segmento de la hebra nueva entre el

o apareamiento incorrecto. El hueco resultante es

Apoyo para biología 221 6822889

Apoyo para biología 221 6822889

¿Por qué se sintetiza un cebador que luego de tendrá que eliminar en

Las ARN polimerasas (y la ADN primasa) no tiene capacidad

La ADN ligasa utiliza una

Apoyo para biología 221 6822889

SUBUNIDADES I >4 > 10

ACTIVIDAD EXONUCLEASA 5’–3’ SI NO NO

Sirve para VELOCIDAD DE POLIMERIZACIÓN 16-20 N/s 40 N/s 250-1000 N/s

Esto no lo tienen que saber pero lo agregué porque me

La actividad exonucleasa 5’–3’ le permite reemplazar un

Apoyo para biología 221 6822889

Tm: temperatura de melting -

Temperatura (ºC) Tm (ºC)

Apoyo para biología 221 6822889

Estas proteínas no son capaces de abrir

Apoyo para biología 221 6822889

La mayoría de las ADN polimerasas solo sintetizan, por sí mismas, cortas

Esta abrazadera mantiene a la polimerasa ﬁrmemente unida al ADN

Esta proteína forma un amplio anillo alrededor de la hélice de

En la cadena conductora patrón, la ADN polimerasa

Apoyo para biología 221 6822889

una Cargador de la abrazadera

ADN polimerasa sobre la cadena retrasada