3 Taller de Principios de Bioquímica Jonathan David Sánchez González – Juan Diego Carvajal García

1. Utilizando la gráfica de Lineweaver-Burk, calcule Vmax y KM para una enzima que se ajusta al modelo de
Michaelis-Menten según los siguientes datos

Gráfica de Lineweaver-Burk
6
4,76190476
5 4,16666667
3,57142857
4 3,03030303
2,5
3 2,22222222
2
1
0
y = 4,2663x + 1,9978
0 0,2 0,4 0,6 0,8

1/s 1/vo
0,66666667 4,76190476
0,5 4,16666667
0,33333333 3,57142857
0,25 3,03030303
0,125 2,5
0,0625 2,22222222

1-

2-

3-

4-

5-

6-

7-

8-

9-

10-

11-

12-
 2. Calcular la KM y Vmáx con los valores [S] y vo determinados para la enzima fosfatasa ácida usando: Modelo de
Michaelis-Menten Gráfica de Lineweaver-Burk Gráfica de Eadie-Hofstee

Michaelis-Menten

Vmax: 0.230 mM/min

KM: 1.2 mM.

Lineweaver-Burk

1/s 1/vo Gráfica de Lineweaver-Burk

2 13,3333333 15 13,3333333
11,1111111
1,33333333 11,1111111
0,5 6,57894737 10
6,57894737
0,25 5,10204082 5,10204082
4,76190476
4,6728972
4,34782609
0,16666667 4,76190476 5
0,12195122 4,6728972
0,1 4,34782609 0 y = 4,8572x + 4,0267
0 0,5 1 1,5 2 2,5
 Vmax: 0.25 mM/min
KM: 1.21 mM.

Eadie-Hofstee

Gráfica de Eadie-Hofstee vo/s vo

0,15 0,075
0,25
0,12 0,09
0,2
0,076 0,152
0,15
0,049 0,196
0,1
0,035 0,21
0,05 y = -1,2527x + 0,2525 0,0261 0,214
0 0,023 0,23
0 0,05 0,1 0,15 0,2
3. Con base en los siguientes datos experimentales, determine si la inhibición de la enzima invertasa, la cual
utiliza sacarosa como sustrato, es competitiva o no competitiva pura:

1/[sucrosa] 1/Vo 1/Vo +inhibidor

34,2465753 5,49450549 12,04819277

17,1232877 3,77358491 8,403361345
11,4155251 3,21543408 6,493506494
8,54700855 3,03030303 5,988023952
5,71428571 2,68817204 5,208333333
La inhibición de la enzima invertasa es NO COMPETITIVA PURA. V Max. Es diferente con y sin inhibidor, por lo que hay
distancia sobre el punto de corte en el eje Y, = NO COMPETITIVA. Las rectas no se intersecan en el eje X, = PURA