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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIAPAS

ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS


MANUAL DE LABORATORIO DE
FARMACOLOGÍA I
REVISIÓN: 01/08/2022 CLAVE DEL DOCUMENTO: PRÓXIMA SEMESTRE: SEXTO
REVISIÓN:01/ENERO/2023

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIAPAS


ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS, OCOZOCOAUTLA

LICENCIATURA EN QUÍMICO
FARMACOBIÓLOGO
ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS, OCOZOCOAUTLA

MANUAL DE LABORATORIO
DE FARMACOLOGÍA I

Nombre Cargo Firma Fecha


Elaboró DR. JOSUE VIDAL ESPINOSA JUAREZ DOCENTE 01/08/2022
Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
Autorizó DR. ABUMALÉ CRUZ SALOMÓN SECRETARIO ACADÉMICO 08/08/2022
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ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS
MANUAL DE LABORATORIO DE
FARMACOLOGÍA I
REVISIÓN: 01/08/2022 CLAVE DEL DOCUMENTO: PRÓXIMA SEMESTRE: SEXTO
REVISIÓN:01/ENERO/2023

Directorio

Dr. Héctor Armando Esquinca Avilés


Encargado de la Dirección

Dr. Abumalé Cruz Salomón


Encargado de la Secretaría Académica

Mtro. Luis Zárate Palacios


Coordinador de Planeación, Seguimiento y Evaluación

Dra. Erica Patricia Culebro Cruz


Coordinadora de Diseño Curricular

Mtra. Deissy Yuliana Rivas Champo


Coordinadora de Extensión y Vinculación

Dr. Josué Vidal Espinosa Juárez


Coordinador de Investigación

Nombre Cargo Firma Fecha


Elaboró DR. JOSUE VIDAL ESPINOSA JUAREZ DOCENTE 01/08/2022
Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
Autorizó DR. ABUMALÉ CRUZ SALOMÓN SECRETARIO ACADÉMICO 08/08/2022
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MANUAL DE LABORATORIO DE
FARMACOLOGÍA I
REVISIÓN: 01/08/2022 CLAVE DEL DOCUMENTO: PRÓXIMA SEMESTRE: SEXTO
REVISIÓN:01/ENERO/2023

Contenido
IDENTIFICACIÓN............................................................................................................................4
FICHA DE IDENTIFICACIÓN DEL DOCENTE...........................................................................4
CRONOGRAMA DE PRÁCTICAS................................................................................................4
REQUISITOS E INDICACIONES PARA EL INGRESO AL LABORATORIO.........................6
REGLAMENTO....................................................................................................................................6
SEGURIDAD E HIGIENE.......................................................................................................................7
EVALUACIÓN....................................................................................................................................12
REQUISITOS E INDICACIONES PARA LA ENTREGA DEL REPORTE DE PRACTICAS
.........................................................................................................................................................13
INTRODUCCIÓN...........................................................................................................................14
PRACTICA 1..................................................................................................................................18
PRACTICA 2..................................................................................................................................23
PRÁCTICA NO. 2...............................................................................................................................24
PRACTICA 3......................................................................................................................................29
PRÁCTICA NO. 4...............................................................................................................................35

Nombre Cargo Firma Fecha


Elaboró DR. JOSUE VIDAL ESPINOSA JUAREZ DOCENTE 01/08/2022
Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
Autorizó DR. ABUMALÉ CRUZ SALOMÓN SECRETARIO ACADÉMICO 08/08/2022
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FARMACOLOGÍA I
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REVISIÓN:01/ENERO/2023

IDENTIFICACIÓN

Nombre del manual: MANUAL DE PRÁCTICAS FARMACOLOGÍA I


Programa académico: QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO
Semestre en el que se imparte: SEXTO
Elaboró: JOSUÉ VIDAL ESPINOSA JUÁREZ
Fecha de elaboración: 01/08/2022
Actualizó: JOSUE VIDAL ESPINOSA JUAREZ
Fecha de actualización: 01/08/2022
Fecha de revisión y validación por 05/08/2022
la Academia de Ciencias Básicas
Número total de prácticas: 4

FICHA DE IDENTIFICACIÓN DEL DOCENTE


JOSUÉ VIDAL ESPINOSA JUAREZ
Químico farmacobiólogo, FCQ, UNACH
Maestría en Neurofarmacología y terapéutica experimental, CINVESTAV, IPN
Doctorado en Neurofarmacología y terapéutica experimental, CINVESTAV, IPN

CRONOGRAMA DE PRÁCTICAS

No. Nombre de la práctica Fecha


1 MANEJO DE ANIMALES Y VÍAS DE ADMINISTRACIÓN
2 INFLUENCIA DE LA VÍA DE ADMINISTRACIÓN SOBRE LA RESPUESTA
Nombre Cargo Firma Fecha
Elaboró DR. JOSUE VIDAL ESPINOSA JUAREZ DOCENTE 01/08/2022
Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
Autorizó DR. ABUMALÉ CRUZ SALOMÓN SECRETARIO ACADÉMICO 08/08/2022
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FARMACOLÓGICA
3 VARIABILIDAD DE LA RESPUESTA BIOLÓGICA
4 CURVA DOSIS-RESPUESTA CUANTAL

5 SOLUBILIDAD DE FÁRMACOS
6 EVALUACIÓN DEL EFECTO ANALGÉSICO EMPLEANDO UN CURSO
TEMPORAL
7 DEMOSTRACIÓN DEL EFECTO SINERGISTA Y ANTAGONISTA EN UN
SISTEMA SIMULADO
8 HERRAMIENTAS INFORMÁTICAS PARA LA PREDCCIÓN DE LA
FARMACOCINÉTICA Y FARMACODINAMIA

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Elaboró DR. JOSUE VIDAL ESPINOSA JUAREZ DOCENTE 01/08/2022
Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
Autorizó DR. ABUMALÉ CRUZ SALOMÓN SECRETARIO ACADÉMICO 08/08/2022
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REVISIÓN: 01/08/2022 CLAVE DEL DOCUMENTO: PRÓXIMA SEMESTRE: SEXTO
REVISIÓN:01/ENERO/2023

REQUISITOS E INDICACIONES PARA EL INGRESO AL


LABORATORIO

REGLAMENTO
1.- Es obligatorio el uso de bata y lentes de seguridad en el laboratorio. No está permitido quitarse
el equipo de seguridad durante la sesión experimental.
2.- Se deberán conservar limpiar las instalaciones (en especial las campanas de extracción,
canaletas y tarjas de las mesas de trabajo del laboratorio), el material y el equipo de trabajo
(incluyendo la balanza analítica) al inicio y al final de cada sesión experimental.
3.- Se deberá guardar orden y disciplina dentro del laboratorio y durante la sesión experimental,
quedando prohibida la entrada a persona ajenas al mismo.
4.- Queda estrictamente prohibido fumar y consumir alimentos dentro del laboratorio, ya que
muchas de las sustancias químicas que se emplean son inflamables y/o tóxicas. Asimismo, queda
prohibido utilizar equipos de comunicación o algún otro aparato electrodoméstico (Celulares,
Laptops, Reproductores de música, etc.) mientras trabaja en el laboratorio.
5.- Es importante que antes de trabajar, el estudiante conozca las características de las sustancias
químicas que va a utilizar para que pueda manipularlas adecuadamente (se deberá apoyar en la
consulta de las fichas de seguridad). Leer antes su práctica, en ocasiones se les pedirá traer
material extra y si no los trae no podrá efectuar la práctica. Tendrá que traer su diagrama de flujo
para que pueda realizar la práctica.
6.- El alumno deberá de llevar consigo material adicional, de acuerdo al Reglamento de
Laboratorio de la Escuela de Ciencias Químicas, Sede Ocozocoautla, marcado en el Artículo 55.
7.- No colocar mochilas sobre la mesa de trabajo, únicamente tendrá consigo su manual de
prácticas o diagrama de flujo, así como un cuaderno de apuntes.
8.- Para la extracción de reactivos líquidos se deberán emplear pipetas y nunca succionar con la
boca, antes de utilizarlas lávelas y séquelas para que no contamine los reactivos.
9.- Los reactivos químicos no deberán ser manipulados directamente. Se deberán usar los
implementos adecuados como pipetas, espátulas, cucharas, etc.
10.- Después de manipular sustancias químicas es necesario lavarse las manos con agua y jabón.
11.- Si se utilizan mecheros, parrillas o cualquier otro aparato, se deberá estar atento en su
manejo para evitar un accidente.
12.- En caso de ingestión, derrame o inhalación de algún reactivo por parte de algún estudiante,
deberá ser notificado al asesor del grupo, el cual tomará las acciones pertinentes, previa consulta
de las fichas de seguridad.
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Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
Autorizó DR. ABUMALÉ CRUZ SALOMÓN SECRETARIO ACADÉMICO 08/08/2022
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13.- Al término de la sesión experimental, el asesor de grupo deberá regresar las disoluciones
empleadas a su lugar de resguardo. En los alumnos al término de la sesión experimental, dejara
siempre limpia su mesa de trabajo y lavado bien el material utilizado con agua y jabón, y con un
enjuague de agua destilada al final de ella.
14.- Los residuos de cada experimento deberán tratarse y eliminarse adecuadamente por los
alumnos, previa consulta del diagrama ecológico incluido en el manual de prácticas y con el apoyo
del asesor.
15.- Cuando el residuo no pueda ser eliminado, el alumno deberá resguardarlo en un contenedor
adecuado y debidamente etiquetado y colocarlo en el anaquel destinado para ello.
16.- Antes de iniciar las actividades experimentales se le solicitará al laboratorista el material y
equipo necesarios, para ello, todo el equipo dejará su credencial en depósito y firmará un vale por
el material y equipo recibidos. En caso de que existiera un defecto en el material o equipo
recibido, éste deberá ser anotado en el vale.
17.- Es responsabilidad del alumno revisar el estado en que recibe el material, ya que al término
de la sesión experimental lo debe regresar en las mismas condiciones en las que lo recibió y
perfectamente limpio.
18.- En caso de extravío o daño del material o equipo de laboratorio, se resguardará el vale de
solicitud de material y la credencial del estudiante responsable del daño o extravío hasta su
reposición, la cual será el doble del material.
19.- Los alumnos que adeuden material de laboratorio deberán reponerlo a la mayor brevedad
posible o a más tardar el último día de realización de prácticas, de lo contrario los deudores serán
reportados al Departamento de Servicios Escolares y no podrán inscribirse en el siguiente
semestre.
20.- Al concluir con la práctica, quítese la bata y lávese las manos. (Recuerde que la bata es
exclusivamente utilizada en el laboratorio).

SEGURIDAD E HIGIENE
1. Se deberá conocer la ubicación de los elementos de seguridad en el lugar de trabajo,
tales como: matafuegos, salidas de emergencia, lavabos, etc.

2. No se debe comer, beber, fumar o maquillarse en el laboratorio.

3. No se debe guardar alimentos en heladeras que contengan sustancias o preparados.

4. Se debe utilizar vestimenta apropiada para realizar trabajos de laboratorio,

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Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
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guardapolvo abrochado (preferentemente de algodón y de mangas largas) y zapatos


cerrados. Evitar el uso de accesorios colgantes (aretes, pulseras, collares, etc.). y
cabello recogido.

5. Las mesadas de trabajo, deben estar despejadas, sin libros, ni abrigos ni objetos
personales. Es imprescindible mantener el orden y la limpieza. Cada persona es
responsable directa de la zona que le ha sido asignada y de todos los lugares comunes.

6. Las manos deben lavarse cuidadosamente después de cualquier manipulación de


laboratorio y antes de retirarse del mismo.

7. Se deben utilizar guantes apropiados para evitar el contacto con sustancias química o
material biológico. Toda persona cuyos guantes se encuentren contaminados no
deberá tocar objetos, ni superficies, tales como: teléfono, lapiceras, manijas de
cajones o puertas, cuadernos, etc.

8. No se permite correr en los laboratorios.

9. No se deben bloquear las rutas de escape o pasillos con bancos, sillas, equipos,
máquinas u otros elementos que entorpezcan la correcta circulación.

10. De aviso inmediato al docente responsable si encuentra instalaciones eléctricas y de


gas precarias o provisorias.

11. No utilice equipos (Ej. columnas de destilación, hornos etc.) sin haber recibido
entrenamiento previo y sin supervisión durante su uso.

12. Toda herida o abrasión, aún los pequeños cortes que puedan producirse durante el
trabajo práctico deben ser informados al Docente.

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Elaboró DR. JOSUE VIDAL ESPINOSA JUAREZ DOCENTE 01/08/2022
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13. Respete las señales de advertencia. (ej.: riesgo eléctrico, alta temperatura,
radiaciones, etc.)

14. Todo residuo generado debe colocarse en los recipientes destinados para tal fin según
las indicaciones del docente o del encargado del laboratorio.

15. No se permite pipetear con la boca.

16. Siempre que sea necesario proteger los ojos y la cara de salpicaduras o impactos se
utilizarán anteojos de seguridad, viseras o pantallas faciales u otros dispositivos de
protección. Cuando se manipulen productos químicos que emitan vapores o puedan
provocar proyecciones, se evitará el uso de lentes de contacto.

17. No utilice el contenido de un recipiente que no esté identificado. Los envases que
contengan agentes químicos deben adecuadamente etiquetados con la denominación
del compuesto y el tipo de riesgo ( Ej.: corrosivo, tóxico, inflamable, oxidante,
radiactivo, explosivo o nocivo).

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Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
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18. Cuando sea necesario manipular grandes cantidades de materiales inflamables (más
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de 5 litros) deberá tenerse a mano un extintor apropiado para ese material en


cuestión.

19. Al almacenar sustancias químicas se debe considerar las incompatibilidades que dan
lugar a reacciones peligrosas. Consultar con el Docente.

20. No almacenar en estantes sobre mesadas sustancias corrosivas y en caso de ácidos o


álcalis concentrados (mayor de 2N) deben ser mantenidos en bandejas de material
adecuado.

21. Las prácticas que produzcan gases, vapores, humos o partículas, y que puedan ser
riesgosas por inhalación deben llevarse a cabo bajo campana.

22. Se debe verificar la ausencia de vapores inflamables antes de encender una fuente de
ignición.

23. No se debe trabajar con materiales inflamables o solventes sobre llamas directa o
cerca de las mismas.
Está prohibido descartar líquidos inflamables o tóxicos o corrosivos por los desagües
de las piletas, sanitarios o recipientes comunes para residuos.

24. El material de vidrio roto no se depositará con los residuos comunes. Será conveniente
envolverlo en papel y ubicarlo en cajas resistentes.

25. Todo recipiente que hubiera contenido agentes químicos puede ser descartado junto a
los residuos comunes vaciado totalmente, enjuagado apropiadamente y sin etiquetas.

26. Está terminantemente prohibido hacer experimentos no autorizados por el Docente.


No substituya nunca, un producto químico por otro en una

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Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
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EVALUACIÓN
La evaluación incluye los siguientes aspectos:

ACTIVIDAD PORCENTAJE DE CALIFICACIÓN

Examen Previo 30%

Desempeño 20%

Reporte de laboratorio 40%

Diagrama de flujo o lista de


cotejo 10%

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REQUISITOS E INDICACIONES PARA LA ENTREGA DEL


REPORTE DE PRACTICAS

Reporte de práctica:
Para el reporte de práctica deberán entregar un escrito por equipos, el cual debe
incluir:
Hoja de Presentación
Título de la práctica
Introducción (Elaborada por ustedes)
Objetivo de la práctica
Metodología
Resultados
Discusión:
Conclusión
Bibliografía

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INTRODUCCIÓN

Marco conceptual del laboratorio de farmacología

INTRODUCCIÓN

La farmacología es una ciencia experimental por excelencia. Los métodos utilizados para evaluar la
seguridad y la eficacia de los fármacos utilizan sistemas biológicos que van desde fragmentos
celulares o macromoléculas aisladas hasta poblaciones enteras. En una gran parte del proceso de
investigación farmacológica se utilizan animales de laboratorio íntegros. Sin embargo, la creciente
sensibilidad respecto a la práctica de la experimentación en animales en la investigación y en la
enseñanza de las ciencias biomédicas, y la búsqueda de enfoques nuevos en los aspectos prácticos
de la misma son parte de un debate actual (Jukes y Chiuia, 2003).

La utilización de animales de experimentación en la enseñanza de las prácticas de diferentes


asignaturas de las Ciencias Biomédicas y en especial de la farmacología, ha venido siendo la
metodología más empleada por todos los profesores de esta disciplina. Gracias a la utilización de
estos animales, los estudiantes han podido apreciar los diferentes efectos farmacológicos y los
principios de la acción farmacológica. Entre las prácticas clásicas que se han realizado en la
mayoría de los laboratorios de farmacología, algunas de ellas tienen un componente importante
de crueldad y son de poca aceptación por algunos de los estudiantes. Una de las prácticas que no
se puede aceptar es la determinación de la dosis letal 50 (DL 50) en ratas o ratones, parámetro que
está en duda su utilidad como parámetro para estimar la seguridad de los fármacos y sustancias
nuevas. Es obvio que el uso de animales era el único método del que disponían los profesores hace
algunos años para enseñar farmacología. Pero en los últimos años las cosas han cambiado y el
avance de la informática, de las tecnologías de la imagen y la disposición de líneas celulares ha
permitido el desarrollo de numerosas alternativas que no requieren el uso de los animales para
lograr los objetivos docentes que se plantean en las prácticas de laboratorio de farmacología (Van
der Valk, et al., 1998; Vinardell, 2003; Eder et al., 2006).

Los métodos utilizados en la investigación, para la evaluación de la seguridad y/o toxicidad y en la


enseñanza están en continuo progreso ya que los científicos están en permanente búsqueda de
posibles alternativas que mejoren la calidad de su trabajo. Ello es debido, en parte, a la lógica
evolución de los conocimientos científicos y de sus aplicaciones tecnológicas, y en parte, a
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consideraciones éticas, logísticas, económicas, sociopolíticas y legales (Sterling y Rispin, 2002). El


número de animales utilizados en Europa con fines educativos es relativamente pequeño
comparado con el número total de animales utilizados en investigación y se ha venido reduciendo
en los últimos años, pero a pesar de ello todavía se puede reducir más.

En México el uso de animales en docencia es alto, aunque no se cuentan con datos precisos de
cuantos animales se sacrifican en cada ciclo escolar. Por otro lado, la aplicación de la Norma Oficial
Mexicana (NOM‐062‐ZOO‐1999) ha sido lenta en los laboratorios de enseñanza de las ciencias
biomédicas.

En cambio, en el artículo 25 de la Convención Europea para la Protección de los Animales


Vertebrados utilizados en Experimentación y otros Fines Científicos se especifica:

"aquellos procedimientos llevados a cabo con fines educativos o de entrenamiento … se deben


restringir a los absolutamente necesarios para los fines relativos a la enseñanza y el
entrenamiento y se permitirán únicamente si sus objetivos no pueden ser conseguidos por
métodos audiovisuales u otros que sean suficientemente efectivos". En las legislaciones
relacionadas con la protección de los animales de todos los países de la Comunidad Europea se
considera fundamental aplicar el principio de las 3Rs, promulgado por Russell y Burch en 1959
(Russell y Burch, 1959). Este principio nos indica la necesidad de Reemplazar los animales de
experimentación por otros métodos, siempre que sea posible y que el nuevo método nos aporte el
mismo grado de información, de Reducir el número de animales de experimentación cuando su
uso sea necesario y se presente como el único método válido y finalmente, de Refinar las técnicas
empleadas con los animales, con el fin de mejorar su eficacia o disminuir el dolor o el grado de
sufrimiento infligido (van der Valk, et al., 1998; Vinardell, 2003).

En el caso de la docencia se plantea el reemplazo de los animales de experimentación por otros


métodos. Entre los métodos propuestos se pueden citar:

a) Modelos, maniquíes y simuladores mecánicos.

b) Películas y vídeos.

c) Simulaciones de ordenador y sistemas de realidad virtual.

d) Autoexperimentación en el propio individuo.

e) Experimentos con vegetales incluyéndose hongos y algas.

f) Uso de material procedente de los rastros.

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g) Estudios in vitro con líneas celulares, organismos inferiores como bacterias, nematodos,
insectos o peces en etapa temprana.

h) Aprovechamiento de animales muertos de forma natural o utilizados después de un


procedimiento científico (Van der Valk, et al., 1998; Vinardell, 2003).

En el Laboratorio de Farmacología I se plantea el desarrollo de procedimientos experimentales y


actividades en los que bajo el principio de las “tres erres” se reduzca, se reemplace y se refine el
uso de animales de laboratorio para cubrir los objetivos de la enseñanza experimental de la
farmacología.

Considerando lo anterior, en el laboratorio de farmacología se realizarán actividades de tres tipos:

Simulaciones. Se realizarán simulaciones en la computadora que permita a los estudiantes la


comprensión de aspectos que sin la necesidad de repetir muchos experimentos puedan
comprender los conceptos y los procedimientos para definir parámetros farmacológicos.

Prácticas. Desarrollo de prácticas sencillas, con lo que se pretende conozca técnicas y hábitos del
laboratorio de farmacología.

Demostraciones. En esta categoría se realizan experimentos los cuales debido a las siguientes
razones no es posible que la realicen los estudiantes en forma individual o en grupos pequeños:

El experimento requiere de cierta destreza que en una o dos sesiones no es posible que las
aprenda el estudiante.

La existencia de equipo de laboratorio en un número reducido.

El tiempo limitado para la sesión de laboratorio.

4) Autoexperimentación. Sin poner en riesgo en ningún grado la integridad y la salud de los


estudiantes. Se pueden realizar prácticas para observar algunos procesos farmacocinéticos de un
fármaco.

Cualquiera que sea la modalidad del procedimiento que se realice cada uno de ellos debe
comprender las siguientes partes: familiarización con el procedimiento, ejecución del
procedimiento y discusión del procedimiento.

Con estos procedimientos se pretende:

• Facilitar el aprendizaje de los aspectos fundamentales de la farmacología.

• Familiarizar a los estudiantes con el método científico en experimentos de


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farmacología.

• Enseñar técnicas y hábitos del laboratorio de farmacología.

• Motivar a los futuros farmacéuticos hacia la investigación y estudio de la farmacología como


área de desarrollo profesional.

REFERENCIAS Y BIBLIOGRAFÍA
• Eder C, Falkner E, Nehrer S, Losert U y Schoeffl H. (2006). Introducing the concept of the 3Rs into
tissue engineering research. Altex‐Alternativen Zu Tierexperimenten. 23:17‐23.
• Jukes N, Chiuia M. (2003). From Guinea Pig to Computer Mouse. 2ª Edición. InterNICHE. Lóndres.

• Meyer B, Ferrigni N, Putnam J, Jacobsen L, Nichols D, McLaughlin J. (1982). Brine Shrimp: A


convenient general bioassays for active plant constituents. Planta Medica. 45:31‐34.
• Russell W, Burch R. (1959). The Principles of Humane Experimental Technique. Methuen,
Lóndres.

• Tallarida R. (2000). Drug synergism and dose‐effect data analysis. Chapman & Hall/CRC. EUA.

• Van der Valk J, Dewhurst D, Hughes I, Atkinson J, Balcombe J, Braun H, Gabrielson K, Gruber F,
Miles J, Nab J, Nardi J, Van Wilgenburg H, Zinko U y Zurlo J. (1998). Alternatives to the use of
animals in higher education. ATLA 27:39‐52

• Vinardell P. (2003). Alternativas al uso de animales de experimentación en las prácticas de


fisiología. Boletín de la Sociedad Española de Ciencias Fisiológicas. 6(1)

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Elaboró DR. JOSUE VIDAL ESPINOSA JUAREZ DOCENTE 01/08/2022
Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
Autorizó DR. ABUMALÉ CRUZ SALOMÓN SECRETARIO ACADÉMICO 08/08/2022
UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIAPAS
ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS
MANUAL DE LABORATORIO DE
FARMACOLOGÍA I
REVISIÓN: 01/08/2022 CLAVE DEL DOCUMENTO: PRÓXIMA SEMESTRE: SEXTO
REVISIÓN:01/ENERO/2023

PRACTICA 1

MANEJO DE ANIMALES Y VÍAS DE ADMINISTRACIÓN

COMPETENCIAS A DESARROLLAR
 El profesional en formación será competente en el manejo de animales de laboratorio

 El profesional en formación será competente y hábil en la forma de administración de fármacos en


modelos experimentales

OBJETIVOS

 Conocer la importancia de los animales de laboratorio en la experimentación


 Desarrollar las destrezas necesarias para manejar apropiadamente a los animales de
laboratorio y la administración de fármacos.

INTRODUCCIÓN

Los experimentos de farmacología, efectuados para estudiar las propiedades biológicas de las
sustancias químicas, se realizan en animales de laboratorio. En general, los experimentos son de
tres tipos:
1. In vivo. Cuando se utiliza al animal íntegro, vivo y consciente para registrar el cambio que ocurre
en el animal como un todo.
2. In situ. Cuando se utilizan animales conscientes o inconscientes, sometidos a cirugía para
exponer, sin separar, algunos de sus órganos o tejidos en que se intenta registrar algún efecto.
Habitualmente están anestesiados, desmedulados y/o descerebrados, con respiración asistida.
3. In vitro. Consiste en obtener de un animal, que fue sacrificado bajo el efecto anestésico o sin él,
un órgano completo o un fragmento Y mantener dicho órgano en condiciones de temperatura Y
nutrición similares a las fisiológicas.
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FARMACOLOGÍA I
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REVISIÓN:01/ENERO/2023

El investigador y el estudiante deben ser capaces de llevar a cabo la manipulación de los animales
de laboratorio para poder administrarles un fármaco, anestesiarlos, obtener muestras de algún
órgano o someterlos a cirugía.
Es muy frecuente el uso de ratón, rata, conejo, gato, perro, cobayo y con menor frecuencia los
primates.
Es importante recalcar que ES ABSOLUTAMENTE INDISPENSABLE EVITAR EL SUFRIMIENTO
INNECESARIO DE LOS ANIMALES EN EL LABORATORIO DE EXPERIMENTACION.

MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS


a) Material biológico

• 3 ratones (25-30 gr) de cualquier sexo (por equipo) *

b) Materiales, cristalería y equipo

• vaso de precipitados de 20 ml
• vaso de precipitados de 5º ml
• 4 Jeringas de 1 y 4 jeringas de 3 mL *
• Cánula para administración esofágica
• Balanza para pesar animales
 Estuche de disección
• Marcador indeleble *
- Guantes de cirujano *
• Cubrebocas *
• Franela *
• Restrictor acrílico
• Soluciones limpiadoras *
• Sanitas o toallas para limpieza *

c) Fármacos y reactivos

• solución salina fisiológica (0.9%)


• Azul de metileno (0.9%).

* El material marcado con (*) deberán llevarlo los estudiantes

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PROCEDIMIENTO O DESARROLLO
1) Pesado y marcaje de animales

2) Desarrollo del experimento


Cada grupo de trabajo tendrá 2 roedores.

-Manipulación e identificación de los animales.


Se procede a sexar a las especies animales proporcionadas. Asimismo, se darán
indicaciones acerca de la identificación de varios animales durante un experimento agudo
o crónico.
Marque a sus animales con el marcador de tinta indeleble, péselos y registre el peso de
cada animal.
El profesor realizará una demostración práctica de diferentes técnicas de
manipulación de ratón. Esta actividad se realizará en cada una de las mesas de trabajo.
Cada estudiante manipulará a los animales de acuerdo a las indicaciones del profesor.
Esta actividad será vigilada de cerca para facilitar el manejo del animal y disminuir el
estrés en el alumno. Aquí se recomienda el uso de equipo de protección personal, tal
como lo indica la normatividad vigente.
Se practicará la administración de azul de metileno por vía intramuscular, intraperitoneal,
subcutánea y oral que son las vías de administración más comúnmente utilizadas en los
animales de laboratorio
Al final de la sesión, los estudiantes limpiarán y desinfectarán la balanza con la que
pesaron a los animales de laboratorio, así como otros instrumentos como
inmovilizadores y su mesa de trabajo.
Si se generan residuos químicos o biológicos, realizar su disposición de acuerdo a lo
referido en las NOM-052-SEMARNAT-2005 y NOM-087-ECOL-SSA1-2002

a) Administre 0.1 mL por cada 100 g de peso de la solución de azul de metileno por la vía de
administración que le corresponde a cada animal y registre el tiempo al que lo administró
en el cuadro de abajo.
Animal p.o. s.c. i.p. i.m. i.v.
ml/kg ml/kg ml/kg ml/kg ml/kg

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Rata (ml/Kg) 2-4 1-2 1-2 1 0.5


Ratón 1-2 0.5-1 0.5-1 0.5 0.5
ml/100g)

VIA ORAL:

Se realiza con la ayuda de una aguja con oliva, la cual se introduce por el diastema, hasta las 2/3
partes de la aguja. También puede utilizarse una sonda gástrica procurando no introducirla en
tráquea.

VIA PARENTERAL:

I) Vía subcutánea: Se realiza en la región dorsal de la espalda del animal, la aguja debe quedar
debajo de la piel para realizar la administración. Se administra el mismo volumen de solución,
observando la formación de una ámpula.

II) Vía intraperitoneal: Es la vía que más facilidades nos ofrece cuando el material biológico es
pequeño y es la vía que más se utiliza en prácticas de farmacología. Se toma al animal firmemente
por la nuca con una mano, ejerciendo presión para inclinar la cabeza y llevarla sobre el lomo,
manteniendo al animal en esta posición. Con la otra mano se sujeta de las extremidades inferiores
y otra persona administra en el área abdominal, tomando como referencia la parte superior de la
misma extremidad. La aguja se introduce en un ángulo de aproximadamente 45°, cuidando no
perforar los intestinos.

III) Vía intramuscular: Cuando una sustancia es de naturaleza oleosa, se utiliza de preferencia esta
vía, ya que si usáramos la vía endovenosa por ejemplo: tendríamos el peligro de producir un
embolo graso que puede ser fatal. Se localiza el músculo superior de la pata del ratón.

OBSERVACIONES

RESULTADOS
Se anotarán las observaciones y recomendaciones para la manipulación de los animales de
laboratorio indicadas por cada equipo, acompañadas de fotos ilustrativas de cada proceso
aprendido.

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DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Se contrastarán las formas de manipulación de acuerdo al tipo de modelo animal (rata, ratón,
conejo), con información de fuentes bibliográficas fidedignas, señalando el uso principal de cada
técnica, sus ventajas y desventajas

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO
1) ¿Qué es un animal de laboratorio?
2) ¿Cuáles son sus características de los animales de laboratorio
3) Da el significado de
• • Cepa, bioterio, murino, ciclo luz-oscuridad, dimorfismo sexual, bolo fecal, vibrisa.

4) ¿Cuáles son lineamientos éticos que rigen el trabajo con animales de experimentación a
nivel nacional e internacional? Describe las principales normas, guías o leyes.
4) ¿Qué especies son las más usadas en experimentación farmacológica?

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PRACTICA 2

INFLUENCIA DE LA VÍA DE ADMINISTRACIÓN SOBRE LA RESPUESTA FARMACOLÓGICA

OCOZOCOAUTLA DE ESPINOSA, CHIAPAS.

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PRÁCTICA NO. 2
INFLUENCIA DE LA VÍA DE ADMINISTRACIÓN SOBRE LA RESPUESTA FARMACOLÓGICA

COMPETENCIAS A DESARROLLAR
 El profesional en formación será competente en el manejo de animales de laboratorio

 El profesional en formación será competente y hábil en la forma de administración de fármacos en


modelos experimentales

 El profesional en formación será competente en conocer la importancia en la elección de la vía de


administración

OBJETIVOS

 Determinar la influencia de la vía de administración en la acción farmacológica


 Comprender el significado del periodo de latencia de la acción farmacológica.

INTRODUCCIÓN
La respuesta farmacológica se puede ver modificada en función de la vía por la cual se administra
el fármaco. La modificación puede consistir en un simple retraso en la acción y en otros casos
puede cambiar o anular totalmente el efecto del fármaco. Algunos fármacos pueden sufrir
transformaciones en el sitio de aplicación, dando origen a nuevas moléculas que no
necesariamente van a presentar el mismo efecto farmacológico o van a seguir la misma
farmacocinética. En otros casos, debido a las propiedades fisicoquímicas del fármaco, no es
posible administrarlo por una vía determinada, por ejemplo, un fármaco no soluble en soluciones
acuosas no es posible administrarlo por vía intravenosa. Los fármacos irritantes también limitan su
aplicación por alguna vía determinada, así que la elección de la vía de administración más
adecuada para un fármaco es importante para lograr que se consiga el efecto deseado a una
velocidad y a una intensidad adecuada.

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En esta práctica se evaluará la forma en la cual la vía de administración modifica la respuesta de un


fármaco bien caracterizado como es el pentobarbital, para el cual se medirán el período de
latencia y la duración del efecto cuando se administra por distintas vías.

MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS

a) Material biológico

• 4 ratones machos de 25‐30 g de peso *

b) Materiales, cristalería y equipo

• Vaso de precipitados de 20 mL
• Matraz volumétrico de 10 mL *

• Jeringas de 1 y 3 mL *
• Cánula para administración esofágica
• Balanza para pesar animales
• Cronómetro *
- Guantes de cirujano *
• Cubrebocas *
- Marcador indeleble

• Franela *
• Jeringas De 1 mL *
• Franela *
• Restrictor acrílico
• Soluciones limpiadoras *
• Sanitas o toallas para limpieza *
 Bolsas para depositar desechos orgánicos*
 Frasco de vidrio pequeño con tapa*

c) Fármacos y reactivos

• Anestesal® (pentobarbital sódico 6.3 g/100 mL, uso veterinario). Pfizer.

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• Disolución de Pentobarbital sódico 40 mg/mL. (u anestesico que lograron conseguir en una


veterinaria) Transfiera 6.35 mL de Anestesal® a un matraz volumétrico de 10 mL y llévelo al aforo
con disolución salina.
• solución salina fisiológica (0.9%) *

* El material marcado con (*) deberán llevarlo los estudiantes

PROCEDIMIENTO O DESARROLLO
3) Pesado y marcaje de animales

Cada grupo de trabajo trabajará con 3 ratones. Marque a sus animales con el marcador de tinta
indeleble, péselos y registre el peso de cada animal.

4) Desarrollo del experimento

a) Asigne aleatoriamente el tratamiento que recibirá cada animal: vía oral, intraperitoneal,
subcutánea. Administre 0.1 mL por cada 100 g de peso de la solución del fármaco por la vía de
administración que le corresponde a cada animal y registre el tiempo al que lo administró en el
cuadro de abajo.

VIA ORAL:

Se realiza con la ayuda de una aguja con oliva, la cual se introduce por el diastema, hasta las 2/3
partes de la aguja, de esta manera se administra un volumen de 0.5 ml de solución. También
puede utilizarse una sonda gástrica procurando no introducirla en tráquea.

VIA PARENTERAL:

I) Vía subcutánea: Se realiza en la región dorsal de la espalda del animal, la aguja debe quedar
debajo de la piel para realizar la administración. Se administra el mismo volumen de solución,
observando la formación de una ámpula.

II) Vía intraperitoneal: Es la vía que más facilidades nos ofrece cuando el material biológico es
pequeño y es la vía que más se utiliza en prácticas de farmacología. Se toma al animal firmemente
por la nuca con una mano, ejerciendo presión para inclinar la cabeza y llevarla sobre el lomo,
manteniendo al animal en esta posición. Con la otra mano se sujeta de las extremidades inferiores
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y otra persona administra en el área abdominal, tomando como referencia la parte superior de la
misma extremidad. La aguja se introduce en un ángulo de aproximadamente 45°, cuidando no
perforar los intestinos.

III) Vía intramuscular: Cuando una sustancia es de naturaleza oleosa, se utiliza de preferencia esta
vía, ya que si usáramos la vía endovenosa por ejemplo: tendríamos el peligro de producir un
embolo graso que puede ser fatal. Se localiza el músculo superior de la pata del ratón,
inyectándole 0.5 ml de solución.

b) Registre el tiempo en el cual el animal pierde el reflejo de enderezamiento, que se caracteriza


por el hecho que al ponerlo sobre su dorso no presenta resistencia para intentar volver a su
posición natural.

c) La duración del efecto corresponde al lapso de tiempo entre la pérdida del reflejo de
enderezamiento y el tiempo en el cual el animal vuelve a su posición natural.

d) Cubra al animal con un lienzo de franela para reducir la hipotermia producida por el fármaco.

e) Registre sus datos en el cuadro siguiente.

Vol. a Tiempo de Efecto


Núm. Peso (g) Vía a administrar administrar administración Inicio Término Duración
(ml) (min) (min) (min) (min)

f) Construya una gráfica donde se ilustre el período de latencia y la duración del efecto en función
de la vía de administración.

g) Recopile la información de todos los compañeros del grupo, obtengan el promedio y el erro
estándar de cada dosis y realice el análisis estadístico correspondiente para indicar si hay o no
influencia de la vía de administración en el efecto del pentobarbital.

OBSERVACIONES

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RESULTADOS

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

¿En qué casos la administración de un fármaco por vía intramuscular es plenamente justificada
y por qué?
2. ¿Cómo será el nivel de concentración de un fármaco cuando se aplica por vía intravenosa y
cuáles son sus desventajas fundamentales?
3. El nivel de absorción de un fármaco por vía parenteral (subcutánea o intramuscular) depende
de algunos factores. Diga cuáles son.
4. La absorción en un sitio subcutáneo puede ser lenta en presencia de insuficiencia circulatoria
periférica. Diga por qué.
5. ¿Cuáles serán las causas de que algunos fármacos no sean absorbidos a nivel del intestino?
Enumérelas y discuta cada una de ellas

REFERENCIAS Y BIBLIOGRAFÍA
• Rowland M y Tozer T. (1995). Clinical pharmacokinetics. 3rd Edition. Lea and Febiger,
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EUA.

• Shargel L, Wu‐Pong S y Yu A. (2004). Applied biopharmaceutics and Pharmacokinetics. 5th


Edition. McGraw‐Hill Medical, EUA.

PRACTICA 3
VARIABILIDAD DE LA RESPUESTA BIOLÓGICA

OCOZOCOAUTLA DE ESPINOSA, CHIAPAS.

ENERO DE 2022

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PRÁCTICA NO. 3
Variabilidad biológica

COMPETENCIAS A DESARROLLAR
 El profesional en formación valorar la respuesta biológica y expresar los resultados de forma
cuantitativa
 El profesional en formación entenderá y explicará las variaciones que existen las respuestas a
los fármacos

OBJETIVOS
• El alumno conocerá conceptos sobre la variación biológica cuantitativa.
• El alumno conocerá conceptos básicos sobre estadística.

INTRODUCCIÓN
La Estadística es la ciencia que estudia las variaciones y tiene que ver con la colección, análisis,
presentación e interpretación de información para evaluar hipótesis en termino de probabilidad,
cuando la estadística se utiliza en medicina experimental, medicina clínica o medicina preventiva,
se hace con el propósito de valorar y analizar numérica o cuantitativamente los fenómenos
biológicos, fundamentalmente en tres casos:

a) Distribución de las frecuencias de una magnitud relativamente constante en una especie, pero
variable en un individuo a otro y en diversas condiciones.

b) Establecer las diferencias y las relaciones entre dos o más fenómenos y descartar la influencia
del azar en términos de probabilidades.

c) Correlación de dos magnitudes variables que pueden depender o no, una de la otra.

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El análisis estadístico de los fenómenos físicos, químicos o biológicos es el único medio de estudiar
con certeza las magnitudes sujetas a influencias del azar. En ciencia no es válida una conclusión
que esté basada en expresiones tales como “según nuestra experiencia”, “en nuestra opinión”,
etc.

La estadística se basa en la “teoría de conjuntos”, que es fundamental en la estructura de las


matemáticas, un conjunto tiene como sinónimos palabras como:

nuestra clase, agregado, colección, tanteo. Un conjunto está compuesto de “elementos”, que a su
vez lo caracterizan, y que pueden ser cualquier cantidad. Es esencial que el conjunto sea definido,
esto significa que dado un elemento u objeto, se debe establecer con certeza si pertenece o no a
un conjunto determinado.

La medición de los fenómenos biológicos puede variar a causa de factores imponderables o


accidentales y los valores obtenidos serán diferentes. Si se hace cada medida por separado, cada
valor se aproxima más o menos a un valor medio, por lo puede decirse que ese conjunto de
valores se distribuye en torno a la media.

Cuando mayor sea el número total de medidas, el valor de la media se acercará al valor verdadero
del fenómeno de referencia y la distribución de esas medidas será simétrica porque las variaciones
positivas o negativas se equilibran mutuamente.

El valor verdadero lo es teóricamente, en un conjunto infinitamente grande o “universo”, pero


ante la imposibilidad de obtener ese conjunto o universo, podemos obtener un valor cercano al
verdadero si estudiamos una parte de tal universo, o sea efectuar un número finito de medidas,
experimentos u observaciones, que constituyen lo que se llama una “Muestra” colección del
ensayo o tanteo. La diferencia entre el valor verdadero de un Universo y la distribución de los
valores en

un Universo se representa con una gráfica que tiene la forma de una campana simétrica que
recibe el nombre de campana de Gauss. Entonces se dice que la distribución de todos los valores
es normal.

MATERIAL Y EQUIPO
Material biológico:
* Voluntarios
* 1 ratón macho (25-30 gr)
* 1 ratón hembra (25-30 gr)

MATERIAL Y EQUIPO:
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• • Palillos de dientes con punta redonda


• • Hielo
• • Algodón
• Frasco de vidrio de boca ancha con tapa o desecador
• Cronómetro
• Jeringas de insulina con aguja desmontable

REACTIVOS Y FÁRMACOS:
• Hielo *
• Lidocaína
• anestésico de uso veterinario
• Cloruro de etilo
*Este material lo deberán llevar los estudiantes

PROCEDIMIENTO O DESARROLLO

Anestesia local
1) Los estudiantes serán los sujetos experimentales y se agruparán de acuerdo al sexo
(hombres y mujeres) y al anestésico local a emplear (hielo, lidocaína, cloruro de etilo).
2) Para poder evaluar la efectividad de cada sustancia como anestésico local se colocarán las
sustancias sobre el dorso de la mano entre el dedo pulgar y anular.
3) Una vez transcurridos 10 min, se pinchará con la punta de un palillo de dientes la zona en la
que se colocaron las sustancias y determinará si se tiene sensibilidad. Se repite la prueba a los
20 y 30min post-administración.
4) Anotar las sensaciones de los sujetos participantes y estimar la duración del efecto,
evaluando cuánto tiempo tardan en recuperar la sensibilidad en la zona.

Anestesia general
5) Para esta segunda parte de la práctica se emplearán ratones (1 macho y 1 hembra por
equipo), la cuales serán distribuidas de acuerdo al sexo (hembras y machos)
6) Se pesa cada roedor y se realizan los cálculos necesarios para estimar la cantidad de
anestésico general parenteral a administrar en los ratones seleccionados.
7) Se anestesian a los roedores de acuerdo a las indicaciones de proveedor farmacéutico.

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8) Inmediatamente después de administrar las sustancias, observar cuidadosamente el


comportamiento de las ratas e identificar las diferentes fases de anestesia. Asimismo, estimar
la duración del efecto, evaluando cuánto tiempo tarda la recuperación de los animales de
experimentación.
9) Lavar los envases de plástico y depositar los residuos de algodón y gasa en la basura
general.
10) Al final de la sesión, los estudiantes limpiarán y desinfectarán la balanza con la que
pesaron a los animales de laboratorio, así como otros instrumentos como inmovilizadores y su
mesa de trabajo.

ANÁLISIS DE RESULTADOS
Con los datos obtenidos en los experimentos simulados:

a) Construir las curvas dosis respuesta de los fármacos utilizados.


b) Calcular la DE50 para la actividad principal de los fármacos utilizados mediante la
Ecuación de Hill.

OBSERVACIONES

RESULTADOS
Realice una tabla con la latencia y la duración de la anestesia para cada modelo ensayado, agrupe los
resultados con los de todos los equipos.

Construya una curva de distribución que ilustre las respuestas en cada modelo.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Discutir las diferencias con que se presenta el efecto de anestesia con respecto a las
características de los individuos (especie, género, edad y estado nutricional).
CONCLUSIONES

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Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
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FARMACOLOGÍA I
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CUESTIONARIO
1.- ¿Qué importancia tiene analizar los efectos en diferentes individuos?
2.- ¿Qué factores intervienen para observar diferentes repuestas biológicas en los seres vivos
aun empleando el mismo principio activo y las mismas condiciones?
3.- ¿Cuál es la forma correcta de representar los resultados cuando se realizan pruebas en una
muestra?
REFERENCIAS Y BIBLIOGRAFÍA
Katzung B; Masters SB, Trevor AJ. (2013). Farmacología Básica y Clínica.
España: Editorial Lange.
Bonet R. (2011). Anestésicos locales. Offarm 30 (5): 42 – 47.
Brunton LL, Chabner BA, Knollmann BC. (2012) Goodman & Gilman: Las Bases
farmacológicas de la terapéutica 12ª ed. México: McGraw-Hill Intera

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PRÁCTICA NO. 4

CURVA DOSIS-RESPUESTA CUANTAL

COMPETENCIA A DESARROLLAR:

Que el alumno conozca la importancia de la dosis en la respuesta farmacológica

Que alumno aprenda a construir una curva dosis respuesta

OBJETIVO

1. Demostrar el efecto concentración dependiente de un fármaco


2. Determinar la DE50 para los efectos sedante e hipnóticos y la DL50

INTRODUCCIÓN
Es importante reconocer la relación entre las dosis de un fármaco y la proporción de individuos o
animales que exhiben un efecto farmacológico. A este tipo de relación dosis-efecto se le conoce
como cuántico o todo o nada. En este caso se asume que, a partir de la dosis umbral, la magnitud
de la respuesta es independiente de la dosis. Bajo este criterio los individuos responden con su
máxima capacidad o no responden; por ejemplo, se puede la relación que existe entre la dosis de
un analgésico y el número de individuos que reportan alivio total de un dolor específico. La
relación dosisrespuesta cuantal es una expresión de la frecuencia con la cual una dosis de un
fármaco produce una respuesta; mientras que la dosis-respuesta gradual es una expresión de la
intensidad de una respuesta.

MATERIAL Y EQUIPO
-6 vasos de precipitados de 10 ml
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-6 ratones machos adultos (20-30 9 de peso) por mesa.

1 plumón para marcar animales.*

-1 jeringa de 1 ml, tipo tuberculina*

-1 balanza para pesar animales.

-1 frasco con solución salina (0.9%)*

-pentobarbital sódico,

*Material que deberán traer los alumnos de cada equipo de trabajo.

PROCEDIMIENTO

- Preparar 4 frascos con solución de pentobarbital sódico, en concentraciones de 0.1, 0.42, 17.5 Y
31.5 mg/ml.

- Cada mesa de trabajo recibirá 4 ratones. Péselos, numérelos y anote información

-Asigne una dosis de pentobarbital a cada ratón. En este experimento se probarán las siguientes
dosis de pentobarbital sódic: 1.0, 4.2, 17.8 Y 315.0 mg/kg de peso.

- Administre la dosis correspondiente por vía i.p. a cada uno de los animales, intervalos de 1 min
entre cada administración; en todos los casos el volumen debe ser 0.1 ml/10 g de peso. Anote el
tiempo de administración

-En todos los casos, determine si se presentan (+) o no (-), en un lapso de 30 min, sedación
(disminución de la actividad locomotora, marcha irregular, tambaleante), hipnosis (pérdida del
reflejo de enderezamiento) y muerte (paro respiratorio).

Resultados

- Anote los resultados de la mesa en una Tabla

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- Reporte al profesor los resultados de la mesa con el fin de reunir e informar de los mismos a todo
el grupo.

-Utilizando los resultados de todo el grupo, construya las siguientes curvas dosis- respuestas
cuantales (sedación, hipnosis y muerte).

a) % de respuesta-dosis en progresión aritmética

b) % de respuesta-logaritmo de la dosis

c) Probits-logarito de la dosis

Discusión

Con fundamento en los antecedentes descritos, en la información disponible sobre los distintos
elementos del tema y considerando los objetivos del estudio, analice críticamente los resultados
obtenidos. Discuta las razones por las cuales sus resultados confirmaron los datos disponibles
sobre el tema o mostraron diferencias significativas. Finalmente, derive conclusiones de este
estudio, buscando su relación con los objetivos de trabajo.

Referencias

Levine, RR. Pharmacology: Drug Actions and Reactions. 4a ed. Boston. Little, Brown and Company,
1991.

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Tallarida, RJ, Jacob LC. The dose-response relation in pharmacology. Nueva York. Springer-Verlag,
1979. Goldstein, A. Biostatistics: an introductory text. Nueva York. MacMillan, 1964.

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PRÁCTICA NO. 5
Solubilidad de Fármacos

COMPETENCIAS A DESARROLLAR
 El profesional en formación conocerá la importancia de la solubilización de fármacos en el
proceso de absorción de fármacos

OBJETIVOS
• El alumno conocerá evidenciará como se solubilizan los diferentes medicamentos una
vez ingeridos oralmente. Se verá como actúa el jugo gástrico y los jugos intestinales sobre los
preparados y asi se tendrá una idea de lo que ocurre en el estómago y su relación con la
absorción en el tracto gastrointestinal

INTRODUCCIÓN
La biodisponibilidad sistémica de un fármaco depende de la fracción absorbida y del metabolismo
intestinal o hepático que pueda darse. Esta fracción absorbida corresponde a la cantidad de
fármaco que pasa del lumen intestinal al torrente sanguíneo y que puede ser obtenida a partir de
las concentraciones plasmáticas. Este paso del fármaco del sitio de administración a la sangre
involucra su absorción, definida a su vez por los procesos de disolución y permeación del mismo.
Existen muchos factores del TGI que limitan tanto la velocidad de disolución de un fármaco como
su velocidad de permeación. Esto es especialmente crítico para fármacos poco solubles en agua,
para los cuales la solubilidad puede verse influida por variables como el volumen de los fluidos
gastrointestinales, el pH y la presencia de sales biliares y alimentos

MATERIAL Y EQUIPO
Soluciones de HCl de diferentes pH (3-6).

Soluciones de NaOH de diferentes pH (8-10).

Grageas con y sin capa entérica*.

Comprimidos simples y de larga acción*.

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Cápsulas duras y blandas*.

12 vasos de precipitados de 100 mL

Parrilla de agitación

Agitador magnético

Probeta de 100 mL

Pipeta de 5 ml

Pipeta de 1 ml

Agua destilada

PROCEDIMIENTO

Depositar las grageas, cápsulas o comprimidos en los frascos los cuales contienen las soluciones de
diferentes pH. Para ver mejor como se disuelven a unos frascos se les dejará en reposo mientras
otros permanecerán en agitación constante.

RESULTADOS

DISUCUSIÓN

CUESTIONARIO

Explique de que forma la solubidad se relaciona con la absorción de fármacos

Explique la participación del Jugo gástrico y jugos intestinales en la solubilidad de fármacos

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PRÁCTICA NO. 6
Evaluación del efecto analgésico empleando un curso
temporal
COMPETENCIA A DESARROLLAR:

Que el alumno conozca la importancia de la evaluación experimental de los efectos de los


fármacos

Que alumno aprenda a construir un curso temporal de loes efectos farmacológicos

OBJETIVO

1. Evaluar el efecto analgésico de tramadol en un modelo experimental


2. Construir un curso temporal con los efectos analgésicos empleando el modelo de
formalina

INTRODUCCIÓN
El efecto farmacológico tiene un curso temporal que está determinado por la cinética del fármaco,
(su absorción, distribución, biotransformación, almacenamiento y eliminación) y las características
funcionales de la unidad biológica. El análisis de este curso temporal forma parte de la
farmacometría.

La farmacometría es la ciencia integrativa que utiliza modelos matemáticos in silico para


comprender las relaciones entre fármaco-paciente-enfermedad, a fin de optimizar la terapia
farmacológica mediante el análisis de dosis-exposición-respuesta y respaldar la toma de decisiones
cuantitativas en el desarrollo farmacológico

Como rama de estudio individual, la farmacodinamia genera los conocimientos necesarios para
comprender la acción de un fármaco en el organismo o estructura en la que actúa. Sin embargo,
para entender ampliamente el comportamiento de un fármaco en el organismo, no es suficiente
conocer su acción específica, sino complementar esta información con los que se adquieren a
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partir de la farmacocinética y la farmacometría. Estas ramas de la farmacología ayudan a entender


realmente como interactúa el fármaco, desde el momento de su aplicación hasta su eliminación, y
cómo sus efectos se ven modificados por las diversas dosis del mismo.

MATERIAL Y EQUIPO
-1 matraz volumetrico de 50 mL

-2 vaso de precipitados de 20 ml

-1 ratones machos adultos (20-30 g de peso) por mesa.

1 plumón para marcar animales.*

-1 jeringa de 1 ml tipo tuberculina*

-1 balanza para pesar animales.

-1 frasco con solución salina (0.9%)*

-Tramadol inyectable *

*Material que deberán traer los alumnos de cada equipo de trabajo.

PROCEDIMIENTO

- Preparar 1 frasco con la dosis de 31.6 mg/kg de pesos tramadol.

-Prepare una disolución de 2 ml de formaldehído al 2 %

- Cada mesa de trabajo recibirá 1raton. Péselos, numérelos y anote información

-Habitúe al roedor en una jaula de acrílico por 15 minutos

- Administre la dosis de tramadol por vía subcutánea

-después de 30 minutos administrar 20 µL de formaldehído al 2 % por vía intraplantar

-coloque inmediatamente al roedor en la jaula de acrílico y evalúe por un minuto las sacudidas de
la extremidad en la que realizó la administración de formalina. Repita esta evaluación cada 5
minutos durante una hora

-reúna la información de los demás equipos, obtenga el promedio y error estándar de cada
medición, con esos datos construya el curso temporal
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-Con el otro roedor realice el mismo procedimiento, administrando únicamente el vehículo

-compare los cursos temporales de cada grupo

-Posteriormente obtenga el área bajo la curva de cada curso temporal y grafique.

Resultados

- Reporte al profesor los resultados de la mesa con el fin de reunir e informar de los mismos a todo
el grupo.

Discusión

Con fundamento en los antecedentes descritos, en la información disponible sobre los distintos
elementos del tema y considerando los objetivos del estudio, analice críticamente los resultados
obtenidos. Discuta las razones por las cuales sus resultados confirmaron los datos disponibles
sobre el tema o mostraron diferencias significativas. Finalmente, derive conclusiones de este
estudio, buscando su relación con los objetivos de trabajo.

Referencias

Levine, RR. Pharmacology: Drug Actions and Reactions. 4a ed. Boston. Little, Brown and Company,
1991.

Tallarida, RJ, Jacob LC. The dose-response relation in pharmacology. Nueva York. Springer-Verlag,
1979. Goldstein, A. Biostatistics: an introductory text. Nueva York. MacMillan, 1964.

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PRÁCTICA NO. 6
Demostración del efecto sinergista y antagonista en un
sistema simulado.

OCOZOCOAUTLA DE ESPINOSA, CHIAPAS.

SEPTIEMBRE DE 2022

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PRÁCTICA NO. 7.
Demostración del efecto sinergista y antagonista en un
sistema simulado.
COMPETENCIA A DESARROLLAR:

Que el alumno identifique los efectos que pueden presentarse con la administración simultanea
de diferentes fármacos

Que alumno aprenda a analizar los datos obtenidos en las interacciones farmacológicas

OBJETIVO

3. Demostrar el efecto concentración dependiente de la Histamina y Carbacol en un


sistema simulado.
4. Determinar el tipo de interacción farmacológica de la Atropina, Mepiramina y
Tubocurarina sobre la actividad de la Histamina y Carbacol en un sistema simulado.

INTRODUCCIÓN
Las lecciones prácticas son una parte importante de la enseñanza de la farmacología en diversas
áreas como la medicina, enfermería y farmacia. Los experimentos in vivo e in vitro han sido
ampliamente utilizados en las lecciones prácticas para ayudar a los estudiantes a adquirir
habilidades en los experimentos farmacológicos, reforzando su conocimiento aprendido con las
clases teóricas y libros.

Aunque los experimentos tradicionales en animales vivos son invaluables, tienen desventajas: alto
consumo de tiempo, dinero y sacrificio de animales; sólo pueden probarse un número limitado de
fármacos en un periodo de tiempo y requieren frecuentemente de un trabajo constante e intenso.

Una variedad de software ha sido desarrollado para la enseñanza de la farmacología en pregrado y


posgrado. Evidencia previa ha mostrado que esta técnica innovadora de enseñanza junto con los

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métodos de enseñanza tradicionales, facilita al estudiante el aprendizaje y mejora su desempeño


en farmacología.

En esta sesión se utilizará un sistema de simulación para construir curvas concentración-respuesta


de agonistas, tal y como se realizarían en un modelo de órgano o tejido aislado.

MATERIAL

a) Software

• Se utilizará el software Organ Bath Simulation 2006 ver. 1.2 desarrollado por la Universidad de
Strathclyde, Escocia.

PROCEDIMIENTO

A) Manejo del software Organ Bath Simulation 2006 ver. 1.2

Para el uso adecuado del software se dividirá su manejo por procedimiento con referencia al
esquema siguiente:

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Inicio del programa y comienzo de un nuevo experimento.
Para iniciar el programa se debe oprimir el siguiente icono:

Para comenzar un nuevo experimento:

a) Seleccione en Tissue type, el tejido Guinea Pig Ileum. Este tejido es el que será colocado dentro
de la cámara de órgano aislado.

b) Oprima el botón New Experiment.

c) Oprime el botón Record, para comenzar la lectura dentro del área de registro.

d) Seleccione y aplique fármacos de la lista de agonistas o antagonistas como se indica a


continuación.

Adición de agonistas a la cámara de órgano aislado.

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a) En el apartado Agonist, seleccione el agonista que se utilizará.

b) Seleccione la concentración molar que se utilizará.

c) Introduzca en el volumen a utilizar: 0.10 mL

d) Oprima el botón Add to Organ Bath, para agregar el agonista a la cámara. Registre por 12
segundos (un cuadro en la línea de tiempo) que equivale a 3 minutos en la simulación.

e) Para curvas acumulativas, agregue la siguiente concentración de agonista. Para curvas por lotes
o no acumulativas, oprima el botón, Flush Reservoir to Bath, para lavar el tejido con disolución
Krebs.

Adición de antagonistas a la cámara de órgano aislado.

a) En el apartado Antagonist, seleccione el antagonista que se utilizará.

b) Seleccione la concentración molar que se utilizará.

c) Introduzca en el volumen a utilizar: 0.10 mL

d) En la lista desplegable que se encuentra a la derecha del botón Add to, seleccione

Organ Bath, y oprima el botón Add to para agregar el antagonista a la cámara.

Medición de la respuesta del tejido.

Para medir la amplitud de los picos de las contracciones del tejido:

a) Oprima el botón Stop, para terminar el experimento.

b) Usando la barra de desplazamiento horizontal del área de registro, seleccione la sección que
contiene las contracciones del tejido que serán medidas.

c) Arrastre el cursor de medición al punto de la gráfica de registro que será medido. La fuerza de
contracción (en gramos) será mostrada debajo del cursor.

d) Se sugiere tomar al menos 5 lecturas cercanas dentro de la meseta o área de medida y obtener
el promedio de las lecturas para un mejor resultado.

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Experimentos a realizar en el software de simulación.

Experimento 1. Curvas concentración respuesta de agonistas.

a) Seleccione como tejido al íleon de cobayo e inicie un nuevo experimento.

b) Seleccione a Histamina (Histamine) como el agonista a utilizar a una concentración de

1x10‐8 M y un volumen de 0.10 mL.

c) Oprima el botón Record para iniciar el experimento.

d) Se deja estabilizar la muestra por 3 minutos (12 segundos reales o un cuadro del área de
registro) y se oprime el botón Add to Organ Bath.

e) Cuando la contracción del músculo se estabilice (se registre una meseta) o hayan transcurrido 3
minutos de la simulación (si es que no hay contracción), se agrega la concentración de 1x10 ‐7 M y
así sucesivamente hasta agregar la concentración de 1x10 0M.

f) Al terminar la curva, se oprime el botón Stop, se guarda el registro. Y se calcula la fuerza de


contracción por cada concentración agregada.

g) Se realiza el mismo experimento, ahora con Carbacol (Carbachol).

Experimento 2. Efecto de un antagonista en la curva concentración respuesta de agonistas.

a) Seleccione como tejido al íleon de cobayo e inicie un nuevo experimento.

b) Seleccione a Histamina como el agonista a utilizar a una concentración de 1x10‐8 M y un


volumen de 0.10 mL.

c) Seleccione a Mepiramina (Mepyramine) como el antagonista a utilizar a una concentración de


1x10‐6 M y un volumen de 0.10 mL.

d) Oprima el botón Record para iniciar el experimento.

e) Se deja estabilizar la muestra por 3 minutos (12 segundos reales o un cuadro del área de
registro) y se agrega el antagonista a Organ Bath oprimiendo el botón Add to del apartado
Antagonist. Se deja incubar por 3 minutos de simulación.

f) Después de terminada la incubación. Se construye la curva concentración respuesta de la


Histamina como se describe en el experimento 1.

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g) Se realiza el mismo experimento, ahora con Carbacol como agonista y Atropina

(Atropine) como antagonista.

h) Adicionalmente realice el mismo experimento utilizando dos concentraciones más del


antagonista con el objeto de tener el efecto del antagonista a tres diferentes concentraciones, en
la acción del agonista.

Nota: Se puede experimentar con combinaciones de agonistas y antagonistas con los que cuenta
el software para demostrar la selectividad de estos últimos.

Experimento 3. Efecto relajante de antagonistas.

a) Seleccione como tejido al íleon de cobayo e inicie un nuevo experimento.

b) Seleccione a Histamina como el agonista a utilizar a una concentración de 1x10 ‐1 M y un


volumen de 0.10 mL.

c) Oprima el botón Record para iniciar el experimento.

d) Se deja estabilizar la muestra por 3 minutos (12 segundos reales o un cuadro del área de
registro) y se oprime el botón Add to Organ Bath.

e) Cuando la contracción del músculo se estabilice (se registre una meseta) o hayan transcurrido 3
minutos de la simulación (si es que no hay contracción), se construye una curva concentración
respuesta con concentraciones crecientes de Mepiramina (de 1x10 ‐8 M a 1x100 M). Tome en
cuenta que ahora la fuerza de contracción disminuirá en lugar de aumentar.

f) Al terminar la curva, se oprime el botón Stop, se guarda el registro. Y se calcula la fuerza de


contracción por cada concentración agregada.

g) Se realiza el mismo experimento, ahora con Carbacol a una concentración de 1x10 ‐3 M y como
antagonista Atropina.

Nota importante: Al igual que en los experimentos in vitro, la concentración real en la cámara de
órgano aislado es 100 menor debido a la dilución 1:100 que se realiza al agregar 0.01 mL de
muestra en 10 mL de disolución que contiene la cámara.

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Elaboró DR. JOSUE VIDAL ESPINOSA JUAREZ DOCENTE 01/08/2022
Revisó DR. REFUGIO CRUZ TRUJILLO PRESIDENTE DE ACADEMIA DE FARMACIA 05/08/2022
Autorizó DR. ABUMALÉ CRUZ SALOMÓN SECRETARIO ACADÉMICO 08/08/2022
UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIAPAS
ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS
MANUAL DE LABORATORIO DE
FARMACOLOGÍA I
REVISIÓN: 01/08/2022 CLAVE DEL DOCUMENTO: PRÓXIMA SEMESTRE: SEXTO
REVISIÓN:01/ENERO/2023

ANÁLISIS DE RESULTADOS
1. Con los datos obtenidos del experimento 1:
a) Construir las curvas concentración respuesta de Histamina y de Carbacol.
b) Determinar el modelo al que se ajustan los datos.
c) Calcular la CE50 para la Histamina y el Carbacol de acuerdo con modelo determinado en el inciso
anterior.

2. Con los datos del experimento 2.


a) Construir las curvas concentración respuesta de Histamina y de Carbacol con cada uno de los
antagonistas utilizados.

b) Calcular la CE50 para las combinaciones de Histamina y de Carbacol con los antagonistas
utilizados de acuerdo con modelo determinado en experimento anterior.

c) Calcular cuántas veces se disminuyó el efecto del Carbacol y de la Histamina por la presencia de
sus antagonistas.

d) Con las tres curvas concentración‐respuesta de los antagonistas a diferente concentración,


calcule la potencia o pA2 del antagonista.

3. Con los datos del experimento 3.

a) Construir las curvas concentración respuesta de Histamina y de Carbacol con cada uno de los
antagonistas utilizados.

b) Determinar el modelo al que se ajustan los datos.

c) Calcular la CI50 (Concentración Inhibitoria media) para las combinaciones de Histamina y de


Carbacol con los antagonistas utilizados de acuerdo con modelo determinado en el inciso anterior.

OBSERVACIONES

RESULTADOS

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FARMACOLOGÍA I
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REVISIÓN:01/ENERO/2023

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

CONCLUSIÓN

BIBLIOGRAFÍA
• Samuelsson G. (1991). Assays for pharmacological activity: Non‐specific assays. Methods in Plant
Biochemistry. Volume 6. Assay for bioactivity. Academic Press Limited, EUA, 261‐280.

• Schwinghammer T y Kroboth P. (1988). Basic concepts in pharmacodynamic modeling.


Journal of Clinical Pharmacology. 28:388‐394.

• Tallarida R. (2000). Drug sinergism and dose‐effect data analysis. Chapman & Hall/CRC, EUA.

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REVISIÓN:01/ENERO/2023

PRÁCTICA NO. 8
HERRAMIENTAS INFORMÁTICAS PARA LA PREDCCIÓN DE LA
FARMACOCINÉTICA Y FARMACODINAMIA

COMPETENCIA
-El estudiante identificará la importancia de la evaluación computacional en el desarrollo de
fármacos
-El estudiante utilizará los servidores disponibles para predecir la farmacocinética y actividad
farmacodinámica de las moléculas en fase de investigación

OBJETIVO
-Realizar ensayos computaciones para la predicción de la farmacocinética y farmacodinamia de
principios activos

MATERIALES
-computadora
-acceso a internet

PROCEDIMIENTO
- Obtener el código SMILE de un principio activo a través de PUBCHEM o
molinspiration (https://www.molinspiration.com/). Seguir las indicaciones del
docente
- Realizar las predicciones farmacocinéticas en el servido admetSAR
(http://lmmd.ecust.edu.cn/admetsar2/). seguir las indicaciones del docente
- Realizar las predicciones de los blancos farmacológicos en el servidor Swisstraget
prediction (http://www.swisstargetprediction.ch/). Seguir las indicaciones del
docente
-
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REVISIÓN:01/ENERO/2023

Resutados
Integre los resultados en tablas reportando los resultados de las predicciones
farmacocinéticas y farmacodinámicas
Discusión
Conclusión

Bibliografía

Wu F, Zhou Y, Li L, Shen X, Chen G, Wang X, Liang X, Tan M, Huang Z. Computational


Approaches in Preclinical Studies on Drug Discovery and Development. Front Chem.
2020. 11;8:726.

Daoud NE, Borah P, Deb PK, Venugopala KN, Hourani W, Alzweiri M, Bardaweel SK,
Tiwari V. ADMET Profiling in Drug Discovery and Development: Perspectives of In Silico,
In Vitro and Integrated Approaches. Curr Drug Metab. 2021;22(7):503-522.

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