Reporte

Nombre: Matrícula:
Carlos Enrique Loyo Díaz A01552354
Patricio Cervantes Miranda A01552353
José Andrés Vaquera García A01736718
Elisa Monserrat López Pérez A01707583
Rubén Daniel López Suárez A01736640

Nombre del curso: Nombre del profesor:

Aplicación del análisis químico (Gpo Dr. Julián Alejandro Yunes Rojas
203)
Actividad:
Tarea 1 AD22. Validación y Control de Métodos
Fecha:
30 de Septiembre de 2022

Bibliografía:
1. U.S. Department of Health and Human Services Food and Drug Administration
(Mayo, 2001). “Guidance for Industry. Bioanalytical Method Validation.
https://permanent.fdlp.gov/websites/www.fda.gov/pdf-archive/ucm070107.pdf

2. Skelly, J.P., Shah, V.P., Maibach, H.I. et al. (1987). FDA and AAPS Report of
the Workshop on Principles and Practices of In Vitro Percutaneous Penetration
Studies: Relevance to Bioavailability and Bioequivalence. Pharm Res 4,
265–267. https://doi.org/10.1023/A:1016428716506

3. Shah, V. P., Midha, K. K., Findlay, J. W., Hill, H. M., Hulse, J. D., McGilveray,
I. J., McKay, G., Miller, K. J., Patnaik, R. N., Powell, M. L., Tonelli, A.,
Viswanathan, C. T., & Yacobi, A. (2000). Bioanalytical method validation--a
revisit with a decade of progress. Pharmaceutical research, 17(12), 1551–1557.
https://doi.org/10.1023/a:1007669411738

4. Vinagre, Julia (s.f.). Calidad de métodos analíticos.

https://www.fao.org/3/ah833s/Ah833s15.htm

5. Millan, F. (2016) Conceptos y Procedimientos del Análisis Químico

Contemporaneo.https://www.researchgate.net/figure/Figura-5-Caracteristicas-de
l-metodo-analitico_fig1_305954593

Objetivo
- Reforzar los conceptos de validación y control de métodos.

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 Reporte

Procedimiento
La manera en que se realizó esta tarea se dividió en 4 etapas
1. Primera lectura del texto “Guidance for Industry Bioanalytical Method
Validation”
2. Segunda lectura más rápida rescatando los puntos más importantes
3. Búsqueda de términos que no se entendían
4. Realización del resumen
Resultados
Guía para la Industria
Introducción. La presente guía proporciona información de apoyo para nuevas
aplicaciones de medicamentos en investigación (IND), nuevas aplicaciones de
medicamentos (NDA), solicitudes abreviadas de nuevos medicamentos (ANDA) y
suplementos en desarrollar información de validación de métodos bioanalíticos
utilizados en farmacología clínica humana, estudios de biodisponibilidad (BA) y
bioequivalencia (BE) que requieren evaluación farmacocinética (PK).
La información generalmente se aplica a procedimientos como Cromatografía de gas
(GC), Cromatografía de líquidos de alta presión (LC), Espectrometría de masas (MS)
combinado con GC y LC, todo esto se realiza con la intención de determinar de forma
cuantitativa de drogas y/o metabolitos en matrices biológicas tales como sangre, suero,
plasma u orina.

Antecedentes. Esta guía ha tomado como referencia dos talleres para su desarrollo. El
primero; con el nombre de Validación de Métodos Analíticos: Estudios de
biodisponibilidad, bioequivalencia y farmacocinética de 1990 [2] y el segundo;
Validación de Métodos Analíticos: Volviendo a Visitar con una Década de Progreso de
2000 [3].

Mientras que los métodos analíticos son cruciales para un correcto desarrollo de
estudios preclínicos y/o biofarmaceútico y farmacológicos, el método bioanalítico
incluye los procesos para medir cuantitativamente los analitos de una matriz biológica
dada. La validación cuenta con los siguientes parámetros:
1. exactitud
2. precisión

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3. selectividad
4. sensibilidad
5. reproducibilidad
6. estabilidad

Imagen 1. Características método analítico [5].

Muchas veces los métodos analíticos son modificados para adaptarse a los
requerimientos que los laboratorios tienen para llevar a cabo el análisis. Para esto se
necesita una validación y dependiendo de sus características puede ser:

De completa validación
➢ Cuando se implementa un método bioanalítico por primera vez
➢ Cuando es necesaria por la identidad de un nuevo medicamento
➢ Cuando se le agregan metabolitos a un análisis ya existente (para cuantificación)

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 Reporte

De validación parcial
Esta validación es la más variable (desde tan solo una determinación de exactitud y
precisión hasta una determinación casi completa) ya que puede ir desde un simple
análisis hasta una casi determinación completa. Cabe aclarar que esta se da cuando ya
ha sido analizada por métodos bioanalíticos. Los cambios típicos del método
bioanalítico que caen en esta categoría incluye, pero no son limitados a:
- Transferencias de métodos bioanalíticos entre laboratorios o analistas.
- Cambios en metodología analítica.
- Cambios en anticoagulantes en la recolección de fluido biológico.
- Cambio de matriz en la misma especie (ej. plasma humana a orina humana).
- Cambio de procedimiento en el proceso de muestra.
- Cambio en un rango relevante de concentración.
- Cambios en instrumentos y/o plataformas de software.
- Límite de volumen de muestra.
- Matrices raras.
- Demostración selectiva de un analito en presencia de medicaciones
concomitantes.
- Demostración selectiva de un analito en la presencia de metabolitos específicos.

De validación cruzada.
Como hace referencia su nombre, es una comparación entre dos o más métodos
bioanalíticos de sus parámetros. Generalmente un método bioanalítico sirve como
referencia y el otro como comparador. Aquí, todas las modificaciones deben de ser
juzgadas con un alto nivel de validación (inclusive más que las otras dos). La validación
cruzada debe ser considerada cuando los datos generados usan diferentes técnicas de
análisis. (ej. LC-MS-MS vs. ELISA) en estudios diferentes son incluidos en una
presentación regulatoria.
Todas las modificaciones deben ser evaluadas para determinar el grado de validación
recomendado. Estas evaluaciones se deben de adherir a las Prácticas del buen
laboratorio de FDAs y a los principios de la evaluación de calidad durante todo el
proceso de prueba. Los estudios del laboratorio analítico deben ser escritos en base a
(SOPs) procedimientos de operación estándar para asegurar un sistema de control
completo y garantía.

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El proceso por el cual un proceso bioanalitico específico es desarrollado, validado y

usado como un análisis de muestra de rutina, puede ser dividido en:
1. Preparación de una referencia estándar.
2. Método bioanalítico de desarrollo y establecimiento del procedimiento de
ensayo.
3. La aplicación de métodos bioanalíticos validados, métodos para el análisis
rutinario de fármacos y criterios de aceptación para la corrida analítica y/o el
lote.
Estándar de referencia. El análisis de drogas y sus metabolitos en una matriz biológica
se lleva a cabo al usar muestras enriquecidas con estándares de calibración (referencia)
y con un uso de muestras de control de calidad (QC). La pureza del estándar de
referencia determina los datos del estudio, por lo que se usa un patrón analítico de
referencia de identidad y purezas conocidas para poder preparar disoluciones de
concentraciones. Normalmente se trata de que el estándar de referencia sea idéntico al
analito. Cuando esto no es posible se recurre a usar una fórmula química establecida de
la cual su pureza conocida sea usada (base libre o ácido, sal o éster).
Existen tres tipos de estándares de referencia:
1. Estándares certificados de referencia.
2. Estándares de referencia obtenidos de forma comercial.
3. Materiales con pureza sintetizada y documentada por un laboratorio analítico u
otro establecimiento no comercial.
Para cada estándar de referencia se debe de establecer el origen y el número de lote,
fecha de expiración, certificados de los análisis cuando aplique y/o evidencia generada
de forma interna o externa de la identidad y pureza.
Desarrollo del método: Ensayo químico. Los parámetros fundamentales para la
validación de los métodos bioanalíticos son:
- Exactitud
- Precisión
- Selectividad
- Sensibilidad
- Reproducibilidad
- Estabilidad
En cuanto al desarrollo de los métodos típicos de desarrollo y establecimiento para los
métodos bioanaliticos incluyen la determinación de:

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 Reporte

1. Selectividad
2. Exactitud, precisión y recuperación
3. Curva de calibración
4. Estabilidad del analito en muestras enriquecidas
5. Principios del método bioanalítico, validación y establecimiento
6. Recomendaciones específicas

Selectividad
Esta es la habilidad de un método analítico para diferenciar y cuantificar un analito en la
presencia de otros componentes en la muestra. Por selectividad, los análisis de las
pruebas vacías de las matrices biológicas apropiadas (plasma, orina y otras matrices)
deben ser obtenidos de al menos seis fuentes.
Algunas sustancias que interfieren en una matriz biológica incluyen componentes
endógenos de la matriz, metabólicos, productos de descomposición y, en el estudio real,
medicación concomitante y otros xenobióticos exógenos. En caso de que el método esté
destinado a cuantificar más de un analito. Cada analito debe ser probado para asegurar
que no existe una interferencia.

Exactitud, precisión y recuperación

La exactitud de un método analítico describe lo cerca a lo que se llega en términos de
resultados de prueba por el método del valor real (concentración) del analito. La
exactitud está determinada al replicar los análisis de las pruebas que contienen
cantidades conocidas del analito. Un mínimo de tres concentraciones en un rango de
concentraciones esperadas es recomendado. El valor debe de estar dentro del rango de
15% del valor actual, excepto por el LLOQ, donde no se debe de desviar más de 20%.
La desviación del valor verdadero sirve como una medida para la exactitud.
La precisión de un método analítico describe la cercanía de las medidas individuales de
un analito cuando el procedimiento es aplicado de forma repetida por múltiples
alícuotas de un mismo volumen homogéneo de una matriz biológica. La precisión debe
ser medida usando mínimo 5 determinaciones por concentración. Un mínimo de tres
concentraciones en un rango de concentraciones esperadas es recomendada. La
precisión determinada a cada nivel de concentración no debe de exceder de 15% del
coeficiente de variación (CV) excepto por el LLOQ, donde no debe pasar el 20% del
CV.

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 Reporte

La recuperación de un analito en un ensayo es una detector respuesta obtenido de una

cantidad del analito agregado y extraído de la matriz biológica, comparado con el
detector respuesta obtenido de una concentración verdadera del estándar puro y
auténtico. La recuperación se relaciona con la eficiencia de extracción de un método
analítico en los límites de la variabilidad. La recuperación del analito debe ser 100%,
pero la extensión de recuperación de un analito.

Gráfico 1. Muestra la respuesta en función de la concentración del analito, atributos de

los métodos [4].
Aplicación del análisis rutinario de fármacos
La documentación de la aplicacion de metodos bioanaliticos validados por un analisis
rutinario de fármacos debe de incluir:
- Evidencia de pureza y estándares de identidad del fármaco, estándares de
metabolitos, y estándares internos usados durante los análisis de rutina.
- Tablas de resumen que contiene información del procesado y el
almacenamiento. Las tablas deben incluir la identificación de pruebas,
recolección de datos, prioridad de envío del almacén y un análisis de la prioridad
de almacenamiento. La información debe incluir fechas, horarios, condiciones
de ensamble, y cualquier otra información dentro de los protocolos.
- Tablas de resumen de corridas analíticas de pruebas clínicas y preclínicas. La
información debe incluir identificación de corridas de ensayos, fechas y tiempos
de análisis, métodos de ensayo, analistas, tiempos de inicio y fin, duración,
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 Reporte

equipos significativos, cambios de material y cualquier potencial problema o

desviación del método establecido.
- Ecuaciones usadas en los cálculos de los resultados.
- Tablas de calibración de la curva en datos usados para analizar las muestras y la
curva de calibración de los datos resumidos.
-
Estabilidad del analito en muestras enriquecidas
La estabilidad del analito es particular al sistema de contención y únicamente relevante
para el mismo, no debe de ser extrapolado para otras matrices ni contenedores. Los
procedimientos de estabilidad evalúan la estabilidad de los analitos durante el manejo y
recolección a largo plazo y corto plazo. Las condiciones usadas para evaluar la
estabilidad experimentalmente deben reflejar situaciones similares a sus contrapartes
realistas. A su vez, el procedimiento debe incluir una evaluación de la estabilidad del
analito en una solución.
1. Estabilidad congelada y descongelada
La estabilidad del analito debe ser determinada después de tres ciclos de congelación y
descongelación. Las muestras deben ser congeladas por 24 horas y descongeladas a
temperatura ambiente sin ninguna asistencia externa, cuando sean descongeladas deben
de ser congeladas por 12 o 24 horas bajo las mismas condiciones. Al final del tercer
ciclo deben de ser analizadas, si el analito es inestable a la temperatura de almacenaje
que se pretende, las muestras deben de ser congeladas a menos setenta grados celsius
durante los tres ciclos.
2. Estabilidad de temperatura a corto plazo
Tres alícuotas, cada una de alta y baja concentración, deberán de ser descongeladas a
temperatura ambiente y mantenidas así de 4 a 24 horas para ser posteriormente
analizadas.
3. Estabilidad a largo plazo
La prueba de estabilidad a largo plazo debe ser evaluada excediendo el tiempo entre la
primera recolección de la muestra y la fecha del primer análisis. Debe ser determinada
con al menos tres alícuotas de alta y baja concentración bajo las mismas condiciones de
estudio. El volumen de las muestras debe ser suficiente para el análisis en tres ocasiones
distintas.
4. Estabilidad de la solución base
Deberá de ser evaluada a temperatura ambiente durante al menos seis horas, si las
soluciones son refrigeradas o congeladas por un periodo de tiempo relevante, debe de
ser documentado. Después de completar el tiempo deseado, la estabilidad debe de ser
probada y comparada con soluciones recién preparadas.
5. Estabilidad después del proceso
La estabilidad de las muestras procesadas debe incluir el tiempo de residencia en el

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 Reporte

autosampler. La estabilidad debe de ser medida con el tiempo anticipado para el tamaño
del lote determinando las concentraciones de calibración estándar original.

Principios del método bioanalítico, validación y establecimiento

● Los parámetros fundamentales para asegurar el desempeño correcto de un

método bioanalítico son la asertividad, precisión, selectividad, sensibilidad,
reproducibilidad, y estabilidad.
● Una descripción detallada del método bioanalítico debe de ser escrita. Ya sea en
forma de protocolo, plan de estudio, reporte, etc.
● Cada paso en el método debe de ser investigado para determinar qué tan
afectado puede ser por el ambiente, ,matriz, material, variables procedimentales
del analito
● Debe de ser considerada la variabilidad de la matriz debido a la naturaleza
psicológica de la naturaleza de la muestra.
● Un método bioanalítico debe de ser validado para el uso deseado. Todos los
experimentos usados para desarrollar inferencias y conclusiones acerca del
método, deben de ser presentados en un reporte de validación.
● Cuando sea posible, las mismas matrices biológicas para el proceso deseado
deben de ser usadas para propósitos de validación.
● La estabilidad del analito debe de ser probada preferentemente antes del análisis
de muestras
● La precisión, exactitud, reproducibilidad, y selectividad del método para
sustancias conocidas con degradación deben de ser establecidas en las matrices
biológicas.
● El rango de concentraciones en las que será analizado el analito debe ser
determinada y definida en el método bioanalítico.
● Un número suficiente de estándares debe de ser usado para definir
adecuadamente la relación entre la concentración y la respuesta. Esta relación
debe demostrarse su continuidad y reproducibilidad.
● La habilidad para diluir muestras sobre el límite original debe de ser demostrada
con asertividad y precisión.
● Para que el método bioanalítico sea válido, criterios específicos deben de ser
determinados previamente para lograr precisión y asertividad.

Recomendaciones específicas

● La curva estándar basada en la matriz debe de consistir de un mínimo de seis

puntos de estándar, excluyendo los espacios vacíos, usando muestras únicas o
replicables.

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 Reporte

● La curva estándar aplicada es determinada aplicando el modelo matemático más

sencillo que se adecue a la descripción de la relación entre la concentración y la
respuesta.
● LLOQ es el estándar de concentración más bajo para la curva estándar que
puede ser medido con precisión aceptable. Este debe de ser establecido usando
al menos cinco muestras independientes.
● Para validación del método de bioanálisis, la precisión y acertividad deben de
ser determinadas usando al menos cinco muestras independientes por nivel de
concentración
● La precisión y acertividad con la que las concentraciones de analito en la matriz
biológica pueden ser determinadas deberá de ser demostrado. Esto puede ser
logrado con un análisis de series de muestras de analitos.
● Los reportes de validación para los datos y determinación de precisión deben
incluir todos los valores atípicos encontrados.
● La estabilidad del analito en la matriz a temperatura ambiente debe de ser
evaluada durante un periodo de tiempo igual o típico a la preparación de la
muestra, manejo, y análisis.
● La metodología específica del ensayo debe de ser establecida usando un mínimo
de seis fuentes independientes de la misma matriz.
● El criterio de aceptación y rechazo de los estándares de calibración basados en
la matriz deberá de ser basada en la concentración teórica de la concentración de
los analitos.

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 Reporte

Desarrollo del método: Microbiológico y Unificación Ligando Ensayos. Los

parámetros y principios de validación bioanalítica discutidos anteriormente también son
aplicables a ensayos microbiológicos y de unión a ligandos.

Problemas de Selectividad
Al igual que con los métodos cromatográficos, se tienen que mostrar ensayos
microbiológicos y de unión a ligandos para ser selectivo para el analito. Las
recomendaciones que se deben seguir:
1. Interferencia de sustancias fisicoquímicamente similares al analito. Puede
mejorarse para algunos analitos mediante la incorporación de la separación
pasos previos al inmunoensayo. Su linealidad dilucional con respecto a la norma
de referencia debe evaluarse mediante un estudio (incurridas) muestras. La
Reactividad cruzada de metabolitos, medicamentos concomitantes o endógenos
compuestos deben ser evaluadas individualmente y en una combinación con el
analito interesado. Si el inmunoensayo es comparado con una referencia de un
artículo válido con el método LC-MS que utiliza muestras incurridas y criterios
predeterminados de acuerdo con la precisión del inmunoensayo y método de
referencia.
2. Efectos de matriz no relacionados con el analito. Su curva estándar en fluidos
biológicos debe compararse con la curva estándar en búfer para detectar efectos
de matriz. Debe determinarse la vinculación inespecífica y el paralelismo de las
muestras de estudio diluidas debe evaluarse con estándares diluidos para
detectar efectos de matriz.

Problemas de Cuantificación
Las curvas estándares microbiológicas e inmunoensayo no son lineales y generalmente
se puede recomendar puntos de concentración para lograr definir el ajuste del rango de
curva estándar para ensayos químicos. Se recomienda cuando hay un mínimo de seis
concentraciones de calibrador distintas de cero, se recomienda ejecutar por duplicado ya
que el error de respuesta es la relación para las curvas estándar de inmunoensayo en una
función no constante de la respuesta media. La relación concentración-respuesta se
ajusta con mayor frecuencia a un modelo logístico de 4 o 5 parámetros, aunque otros
pueden ser utilizados con la validación adecuada. El uso de puntos de anclaje en los

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 Reporte

extremos asintóticos de alta y baja concentración del patrón, la curva puede mejorar el
ajuste general de la curva.
Para cada uno de estos ensayos, el factor clave es la precisión de los resultados
informados. Esta precisión puede ser mejorada por el uso de muestras repetidas. En este
caso están replicadas las muestras deben ser medidas durante la validación para mejorar
la precisión, se debe seguir el mismo procedimiento que para muestras desconocidas.
Algunas recomendaciones para la aplicación en los problemas de cuantificación:
● Los reactivos claves, como el anticuerpo, el marcador, el estándar de referencia
y la matriz, deben ser caracterizados apropiadamente y almacenados bajo
condiciones definidas.
● Las evaluaciones de la estabilidad del analito deben realizarse en la matriz de
estudio real.
● La optimización o validación del ensayo puede ser importante cuando hay
cambios clave (labeled analyte, anticuerpo o matrix) .

Los experimentos deben incluir un mínimo de seis ejecuciones realizadas durante varios
días, con al menos cuatro concentraciones (LLOQ, baja, media y alta) analizadas por
duplicado en cada corrida.

Aplicación del método validado en el análisis de fármacos de rutina. Los ensayos

de todas las muestras de un analito en una matriz biológica deben completarse dentro
del período de tiempo para qué datos de estabilidad están disponibles. En la biología las
muestras se pueden analizar con un solo determinación sin análisis duplicado o
replicado si el método de ensayo tiene una variabilidad aceptable como definida por los
datos de validación. Las muestras se pueden analizar con un solo determinación sin
análisis duplicado o replicado si el método de ensayo tiene una aceptable como definido
por los datos de validación. Se debe generar una curva de calibración para cada analito
para analizar las muestras en cada corrida analítica y debe usarse para calcular la
concentración del analito en las muestras desconocidas en el proceso.
La curva de calibración (estándar) debe cubrir el rango de concentración de muestra
desconocido esperado además de una muestra de calibrador en LLOQ. Igual debe
definirse o las muestras con mayor concentración deben diluirse y ensayar. Es preferible
analizar todas las muestras de estudio de un sujeto en una sola ejecución.

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 Reporte

Una vez que el método analítico ha sido validado para uso rutinario, su exactitud y
precisión deben ser monitoreado regularmente para asegurar que el método continúa
funcionando satisfactoriamente

Recomendaciones específicas
● Una curva estándar basada en una matriz debe constar de un mínimo de seis
puntos estándar, excluyendo los espacios en blanco (singulares o duplicados),
cubriendo toda la gama.
● Las muestras de control de calidad deben usarse para aceptar o rechazar la serie.
Estas muestras de control de calidad son matrices enriquecidas con analito.
● Idoneidad del sistema: según el analito y la técnica, se debe establecer un SOP
(o muestra) específico, identificarlo para garantizar un funcionamiento óptimo
del sistema utilizado.
● Cualquier dilución de muestra requerida debe usarse como matriz (por ejemplo,
humano a humano) obviando la necesidad de incorporar muestras reales de
control de calidad de la matriz de dilución dentro del estudio.
● Debe elaborarse un POE o una directriz para la reintegración de datos de
muestra establecidos. Este POE o directriz debe explicar las razones de la
reintegración y cómo se va a realizar la reintegración. La justificación de la
reintegración debe ser claramente descrita y documentada. Se deben informar
los datos originales y de reintegración.
● La función de respuesta se determina mediante pruebas estadísticas apropiadas
basadas en los puntos estándar durante cada corrida en la validación. Cambios
en la función de respuesta la relación entre la validación previa al estudio y la
validación de ejecución de rutina indican potencial problemas.
● Los ensayos deben hacerse por triplicado si el volumen de la muestra lo permite
la justificación de la repetición del análisis y el informe de la repetición del
análisis debe ser claramente documentado.
Criterios de aceptación:
● Al menos el 67% (cuatro de seis) de las muestras de control de calidad deben
estar dentro del 15% de sus respectivas valores nominales (teóricos); 33% de las
muestras de control de calidad (no todas las réplicas al mismo concentración)
puede estar fuera del ±15% del valor nominal.

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 Reporte

● La colocación de estándares y muestras de control de calidad dentro de una serie

debe diseñarse para detectar errores de ensayo.
● Las muestras de curva estándar, los espacios en blanco, los controles de calidad
y las muestras de estudio se pueden organizar como se considere apropiado.
● Los estándares y las muestras de control de calidad se pueden preparar a partir
de la misma solución madre de adición, siempre que se haya verificado la
estabilidad y precisión de la solución. Una sola fuente de matriz también se
puede utilizar, siempre que se haya verificado la selectividad.
● El número mínimo de muestras (en múltiplos de tres) debe ser al menos el 5 %
del número de muestras desconocidas o seis controles de calidad totales, lo que
sea mayor.
● Las muestras que involucren múltiples analitos no deben rechazarse en base a
los datos de un analito que no cumple los criterios de aceptación.
Documentación
La validez de un método analítico debe establecerse y verificarse mediante estudios de
laboratorio, y en el informe de validación del ensayo debe proporcionarse la documentación de
la finalización exitosa de dichos estudios.

Los datos generados para el establecimiento del método bioanalítico y los controles de calidad
deben documentarse y estar disponibles para la auditoría e inspección de datos. La
documentación para presentar a la Agencia debe incluir (1) información resumida, (2)
desarrollo y establecimiento de métodos, (3) informes bioanalíticos de la aplicación de
cualquier método al análisis de muestras de rutina y (4) otra información aplicable al
desarrollo y establecimiento de métodos.

1. Información Resumida
Debe de incluir
● Cuadro resumen de los informes de validación, incluidos los informes de
validación de métodos analíticos, revalidación parcial y validación cruzada.

● Cuadro resumen con una lista, por protocolo, de los métodos de ensayo
utilizados.

● Una tabla de resumen que permita la referencia cruzada de múltiples códigos de

identificación.

2. Desarrollo y Establecimiento de Métodos

Debe de incluir

● Una descripción operativa del método analítico.

● Evidencia de pureza e identidad de estándares de fármacos, estándares de

metabolitos y estándares internos utilizados en experimentos de validación

● Una descripción de los estudios de estabilidad y los datos de apoyo.

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 Reporte

● Una descripción de los experimentos realizados para determinar la exactitud, la

precisión, la recuperación, la selectividad, el límite de cuantificación, la curva
de calibración y los datos relevantes obtenidos de estos estudios.

● Documentación de precisión y exactitud.

● Cromatogramas anotados legibles o espectrogramas de masas.

● Cualquier desviación de los SOP, protocolos o GLP y justificaciones de las

desviaciones.

3. Informes Bioanalíticos de la Aplicación de Cualquier Métodos al Análisis de

Muestras de Rutina
Debe incluir

● Evidencia de pureza e identidad de estándares de fármacos, estándares de

metabolitos y estándares internos utilizados durante los análisis de rutina

● Tablas de resumen que contienen información sobre el procesamiento y

almacenamiento de muestras.

● Tablas de resumen de corridas analíticas de muestras clínicas o preclínicas.

● Ecuaciones utilizadas para el cálculo retrospectivo de los resultados.

● Tablas de datos de la curva de calibración utilizados en el análisis de muestras y

datos de resumen de la curva de calibración.

● Información resumida sobre los valores intraensayo e interensayo de las

muestras de control de calidad y datos sobre la exactitud y precisión de las
curvas de calibración y las muestras de control de calidad utilizadas para
aceptar la serie analítica.

● Tablas de datos de corridas analíticas de muestras clínicas o preclínicas.

● Razones por las que faltan muestras

● Documentación para análisis repetidos.

● Documentación para datos reintegrados

● Desviaciones del protocolo de análisis o SOP, con las razones y justificaciones

de las desviaciones

4. Otra Información.
Aplicable tanto al desarrollo como al establecimiento de métodos y/o al análisis de muestras de
rutina podría incluir:

● Listas de abreviaturas y cualquier código adicional utilizado, incluidos códigos de

condición de muestra, códigos de integración y código de informe.

● Listas de referencia

● SOP o protocolos que cubren las siguientes áreas:

● Criterios de aceptación o rechazo del estándar de calibración

15
 Reporte

● Criterios de aceptación o rechazo de la curva de calibración

● Criterios de aceptación o rechazo de muestras de control de calidad y análisis

● Criterios de aceptación para los valores informados cuando todas las muestras
desconocidas se analizan por duplicado

● Designaciones de código de muestra, incluidos códigos de muestra clínica o

preclínica y código de muestra de bioensayo

● Asignación de muestras clínicas o preclínicas a lotes de ensayo

● Recolección, procesamiento y almacenamiento de muestras

● Repita los análisis de muestras

● Reintegración de muestras

Conclusión
grupal:
El primer paso para la ejecución exitosa de cualquier método analítico es conocer los
pilares del mismo, así como todos los parámetros necesarios para obtener resultados
útiles. Una vez se hayan dominado todos los lineamientos y se conozcan las
recomendaciones generales así como particulares de los diversos métodos, se podrán
emplear con éxito. Se puede observar dentro de los parámetros que se buscan en los
métodos analíticos que para llegar a la exactitud, precisión, etc, es importante llevar de
forma cuantitativa rangos de medición, ya sea en forma de porcentajes hasta la cantidad
de veces que se puede realizar un estudio, en otros casos se involucra la cantidad de
volumen que se puede extraer la muestra como en el caso de los métodos bioanalíticos y
en casos más específicos en estudios pediátricos.

A continuación se tiene con lo que cada integrante se queda y le gustaría resaltar de este
trabajo:

individuales:
Patricio Cervantes Miranda :
El pilar de cualquier método analítico tiene que ser su exactitud, y precisión, a la vez
que sus bases científicas y parámetros por el que se rige. Sin un control riguroso de los
métodos que empleemos corremos el riesgo de obtener datos totalmente adulterados y
de poca calidad. Es importante estar informado de todos estos parámetros para poder así
proceder con tranquilidad con nuestros análisis.

16
 Reporte

Elisa López:
Los conceptos repasados en el resumen anterior son de gran utilidad para cualquier
investigación, es de suma importancia que estos conceptos como lo son, validación y
control de los metodos analiticos, sean seguidos y aplicados a la hora de realizar
cualquier investigación que se vaya a publicar, estos conceptos están estrechamente
relacionados con la ética de un investigador, las investigaciones que se van a publicar
tienen que pasar por este proceso y es primordial que estos sean validados y exista un
control en estos.
Jose Vaquera:
Reforzar los conceptos de validación y control de métodos analíticos, al igual que tomar
en cuenta las recomendaciones de este artículo realmente sin duda alguna servirá en un
futuro cercano al realizar ensayos experimentales. Al ser esta una guía de información
para conocer los parámetros y recomendaciones que se tiene que llevar a cabo en los
reportes experimentales de los métodos analíticos.

Carlos Loyo:
Al ser una conclusión de un resumen muy extenso es difícil meter todo en pocas líneas.
Principalmente, al estar llevando la materia de química analítica, es de valor conocer las
bases de los métodos analíticos y poder identificarlos. Estos métodos son la base para
cualquier estudio pues sus parámetros – como lo son exactitud, precisión, selectividad,
sensibilidad, estabilidad y reproducibilidad – permiten realizar análisis con alto grado
de confiabilidad. Toda la información no solo se tomará en cuenta en prácticas de la
universidad, si no también, son de bastante utilidad para un profesionista del área.

Daniel López:
Dentro de los métodos ya estandarizados en el laboratorio de química analítica, se
puede observar que el método científico se lleva a cabo de una forma más avanzada al
tener siempre un estándar del cual basarse al analizar las pruebas. Lo que se ha visto
dentro de las clases de laboratorio de química en estos semestres difiere en cierta
manera con los métodos y protocolos que se ven en el texto debido a los conceptos que
se buscan, ya sea precisión, exactitud, etc.

17
 Reporte

Glosario
INDs. Nueva aplicación de drogas en investigación.
NDAs. Nueva aplicación de drogas.
ANDAs. Nueva aplicación de drogas abreviadas.
BA. Suplementos en desarrollar información de validación de métodos bioanalíticos
utilizados en farmacología clínica humana, biodisponibilidad.
BE. Bioequivalencia.
PK. Evaluación farmacocinética.
GC. Cromatografía de gas.
LC. Cromatografía de líquidos de alta presión.
MS. Espectrometría de masas.
Medicación concomitante. Corresponde a otros medicamentos que también esté
utilizando el paciente durante el uso del medicamento sospechoso.

RÚBRICA Y PUNTOS OBTENIDOS en Reporte

FORMA

Puntos
Puntos Variable Descripción
Obtenidos
Nombre, matrícula, nombre del profesor, nombre del
Datos
3 curso, tema, actividad, fecha, equipo (en caso de ser
generales
un trabajo grupal), título del reporte.
Inclusión apropiada de datos bibliográficos. Formato
7 Bibliografía
MLA.
Ortografía: Sin errores.
Ortografía y
10 Redacción: Ideas claras, lógicas y secuenciadas en
redacción
todos los párrafos.

18
 Reporte

FONDO

Puntos
Puntos Variable Descripción
Obtenidos

5 Objetivo Propósito del reporte.

15 Procedimiento Descripción organizada y detallada de la ejecución del t

40 Resultados Se presentan los hallazgos del ejercicio.

20 Conclusión Reflexión personal sobre la actividad de aprendizaje.

19