UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA

UNIDAD XOCHIMILCO

DIVISIN DE CIENCIAS BIOLGICAS Y DE LA

SALUD

MDULO:

EVALUACIN DE MATERIAS PRIMAS PARA LA

PRODUCCIN DE MEDICAMENTOS
INVESTIGACIN:

VALIDACIN DEL CIDO ASCRBICO POR EL

MTODO REDOX
AUTORES:
ANTUNEZ SALGADO ROSALID
CORNEJO GARCA BRENDA
GUERRERO BARRERA ANGELICA DANAE
PADILLA FLORES INGRID
RUZ SERRANO ORLANDO GUSTAVO
SANTIAGO SANTANDER GEMIMA JOANA

DOCENTES:
DRA. MARCELA HURTADO Y DE LA PEA
M. en C. MARA MERCEDES PALAO RINCON

GRUPO:

TRIMESTRE:

15-I

MXICO D. F. MARZO DE 2015

NDICE

Contenido
INTRODUCCIN .................................................................................................... 3
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .................................................................... 4
OBJETIVOS ............................................................................................................ 5
MARCO TERICO ................................................................................................. 6
MTODOS ANALTICOS ....................................................................................................................... 6

Definicin.................................................................................................................. 6
Validacin de mtodo analtico ............................................................................... 6
Clasificacin de los mtodos analticos ................................................................. 6
Parmetros de desempeo ..................................................................................... 7
Determinaciones, metodologa y criterios de aceptacin ..................................... 8
Especificaciones establecidas del principio activo de un frmaco...................... 9
MTODOS DE ANLISIS .................................................................................................................... 12

Espectroscopia ultravioleta-visible (UV-Vis) ........................................................ 12

Valoracin acido-base del cido ascrbico ......................................................... 16
Mtodo de Tillmans................................................................................................ 18
Mtodo colorimtrico de Roe ................................................................................ 18
Valoracin directa 2,6-diclofenol indol ................................................................. 18
CIDO ASCRBICO .................................................................................................................... 19

Definicin................................................................................................................ 19
Antecedentes ......................................................................................................... 19
Caractersticas generales ...................................................................................... 19
Espectros de RMN ................................................................................................. 20
Fisiologa ................................................................................................................ 22
Formas de presentacin y su relacin con la actividad vitamina C: .................. 22
Deficiencia .............................................................................................................. 23
Uso teraputico ...................................................................................................... 23
Toxicidad ................................................................................................................ 23
Solubilidad.............................................................................................................. 23
Biodisponibilidad del cido ascrbico en los alimentos .................................... 23
Mecanismo de accin ............................................................................................ 25
Interacciones .......................................................................................................... 26
Dosis recomendada ............................................................................................... 26
Contraindicaciones ................................................................................................ 28
Reacciones adversas ............................................................................................. 29

ANEXOS ............................................................................................................... 30
GLOSARIO ........................................................................................................... 31
BIBLIOGRAFA .................................................................................................... 33

INTRODUCCIN
Un mtodo analtico es la descripcin de la secuencia de actividades, recursos
materiales y parmetros que se deben cumplir, para llevar a cabo el anlisis de un
componente especifico (analito) de una muestra. La validacin es el proceso por el
cual se demuestra, por estudio de laboratorio, que la capacidad del mtodo
satisface los requisitos para la aplicacin analtica deseada, esta actividad se
justifica por los siguientes aspectos:
Moral y tica
Aseguramiento de calidad
Economa
regulatoria
La validacin de los mtodos analticos se fundamenta en la determinacin de
diversos parmetros, que se aplican de acuerdo con la categora a la que
pertenezcan (et. al. 1991). Los parmetros de validacin que se deben considerar
varan segn los requisitos legales exigidos por distintas organizaciones (et. al.
1991). Para este mtodo debe evaluarse la linealidad, la exactitud (repetitividad) y
precisin, (reproducibilidad).

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Para el desarrollo qumico-farmacutico de un nuevo medicamento es necesaria la
utilizacin de un mtodo analtico que nos permita cuantificar el producto
mayoritario en forma de materia prima o como ingrediente activo de una
formulacin. Para asegurar la confiabilidad, los mtodos analticos se someten a
un proceso de validacin. Estos mtodos se fundamentan en la determinacin de
diversos parmetros que se aplican de acuerdo a la categora a la que
pertenezcan. La validacin es un requisito muy importante que est establecido
por rganos regulatorios y por comisiones de Farmacopeas (et. al. 1991). En estos
mtodos la exactitud y la precisin son criterios imprescindibles debido a que
estos estn asociados a mrgenes de error que no se pueden evitar, por ello es
necesario realizar la validacin de las materias primas bajo normas establecidas
por la farmacopea. La finalidad del presente trabajo de investigacin es realizar la
validacin del cido ascrbico por el mtodo REDOX (Iodomtrico) y as
establecer ciertos parmetros en relacin a la confiabilidad del mtodo y la tcnica
empleada en la farmacopea.

OBJETIVOS

OBJETIVO GENRAL:
Validar el cido ascrbico mediante el mtodo analtico REDOX
OBJETIVO ESPECIFICO:
Aplicar los diferentes aspectos tericos y metodolgicos del anlisis cualitativo y
cuantitativo, para determinar la calidad del cido ascrbico, el cual es utilizado
para la elaboracin de productos farmacuticos.

MARCO TERICO
Mtodos analticos
Definicin
Un mtodo analtico es aquel mtodo de investigacin que consiste en la
desmembracin de un todo, descomponindolo en sus partes o elementos para
observar las causas, la naturaleza y los efectos.
Los mtodos analticos se realizan para asegurar la confiabilidad de los productos
qumicos-farmacuticos.

Validacin de mtodo analtico

La validacin es una especificacin que se sobreentiende cuando se est
desarrollando cualquier procedimiento farmacutico, ya sea de anlisis o de
produccin. En la cual existen parmetros bsicos a asegurar la calibracin de los
equipos y el mantenimiento del proceso (Castillo et. al, 1997). En general se
refiere al Proceso por el cual se demuestra, con estudios de laboratorio, la
capacidad del mtodo y la satisfaccin de requisitos para la aplicacin analtica
deseada. (CNQFBs, 2015)
El concepto de validacin, en concordancia con la fabricacin de medicamentos,
surgi cuando la FDA (Food and Drug Administration) revis las normas relativas
al control de la fabricacin de los productos farmacuticos. Estas normas son
conocidas como las GMP2 (Good Manufacturing Practices) o cGMP3 (current
Good Manufacturing Practices). En 1978, la palabra validacin apareci por vez
primera en algunas secciones de las GMP. Sin embargo, en el captulo de
definiciones, el trmino no apareca. Ms tarde en un documento interno de la
FDA se defina validacin de forma sencilla: un proceso de fabricacin validado es
uno que ha sido comprobado que hace lo se propona o intentaba hacer. (Garca,
2001).
Clasificacin de los mtodos analticos
Los mtodos se clasifican bajo los siguientes criterios:

En funcin de su estado regulatorio

a) Mtodos farmacopeicos
b) Mtodos no farmacopeicos
En funcin de su aplicacin (NOM-059-SSA1 y NOM-073-SSA1)
a) Mtodos para producto a granel
b) Mtodos para producto terminado
c) Mtodos para muestra primaria
d) Mtodos indicadores de estabilidad
6

En funcin de la naturaleza analtica

a) Mtodos fsico-qumicos (cuando la respuesta es de carcter fsico
(absorcin de luz, emisin de luz, voltaje, etc.) o qumico (consumo
de iones- OH, consumo de acomplejante, et.))
b) Mtodos biolgicos (cuando la respuesta es de carcter biolgico
(crecimiento de microorganismos, proteccin, muerte, etc.))
En funcin de su propsito analtico
a) Mtodo para cuantificar el analito (contenido o potencia)
b) Mtodos para establecer la presencia del analito a un limite
c) Mtodo para identificar el analito

Esta clasificacin se utiliza para establecer los parmetros de desempeo a

estudiar en la validacin de mtodo analtico. Cualquier mtodo analtico puede
estar constituido por tcnicas de separacin, extraccin, etc., y por tcnicas de
medicin (espectrofotometra, volumetra, colorimetra, potenciometra, etc.,) que
permiten medir la respuesta del analito en la muestra. (A esta tcnica se le
denomina tcnica de medicin.) (CNQFBs,2015).
En funcin de la naturaleza del sistema de medicin
a) Mtodos en los cuales el instrumento de medicin de la respuesta
analtica, permite medir una sea de ruido (cromatgrafo de lquidos
y de gases, espectrofotmetros, etc.)
b) Mtodos en los cuales el instrumento de medicin no permite medir
una seal de ruido (buretas, medidor de halos, potencimetros, etc.)
(CNQFBs,2015).
Parmetros de desempeo
Tabla 1.- Parmetros de desempeo a estudiar (en funcin de la aplicacin
de un mtodo) (CNQFBs,2015).
Prueba de impurezas
Parmetro de desempeo
Contenido/ Contenido Limite
identif
potencia/v /valoraci
icaci
aloracin
n
n
Precisin
/adecuabilidad
del Si
Si
Si
*
sistema
Linealidad del sistema
Si
Si
no
No
Exactitud y repetibilidad
Si
Si
No
No
Linealidad del mtodo
Si
Si
No
No
Precisin del mtodo o precisin Si
Si
No
No
intermedia
*Puede ser requerido dependiendo de la naturaleza del mtodo.

Determinaciones, metodologa y criterios de aceptacin

Precisin del sistema:
Metodologa: preparar por lo menos un sextuplicado de soluciones a a
concentracin del analito que represente la concentracin de la solucin de
referencia utilizada o en ciertos casos, la concentracin represente el 100% de la
muestra procesada para su medicin; preparadas por dilucin o por pesadas
independientes. Medir la respuesta analtica bajo las mismas condiciones.
Calcular s y CV de la respuesta analtica (CNQFBs,2015).
Criterios de la aceptacin: CV 1.5% para mtodos fsicos-qumicos, CV 3%
para mtodos biolgicos, valores superiores u otro criterio de aceptacin deben
ser justificados (CNQFBs,2015).
Linealidad del problema:
Metodologa: prepara por lo menos por triplicado 5 niveles de concentracin de la
solucin de referencia ya sea por disolucin o por pesadas independientes la
concentracin central debe ser igual a la que se prepara la solucin de referencia
en el mtodo o la que represente al 100% en la muestra preparada para su
medicin. Medir la respuesta analitica bajo las mismas condiciones de medicin,
reportar la relacin concentracin vs respuesta analita. Calcular b1, b0, r2, IC (1).
El intervalo est en funcin del propsito del metodo y se expresa como % de la
concentracin de la solucin de referencia o en funcin del contenido del analito
en la muestra. Para contenido/potencia/valoracin se sugiere un mnimo de 20%
Para contenido/valoracin de impurezas desde un nivel apropiado hasta un 20%
por arriba de la especificacin. Para mtodos indicadores de estabilidad desde un
nivel apropiado hasta un 120%. Es crtico que el intervalo no excluya valores de
concentracin que potencialmente puedan dar lugar al contenido del analito en la
muestra.
Criterios de aceptacin: r2 0.98,
IC (1), no debe incluir el cero
(CNQFBs,2015).
Exactitud y Repetibilidad del mtodo:
Metodologa:
a) Conociendo los componentes de la muestra se preparar el placebo
analtico. A la cantidad de placebo analito equivalente a una muestra
analtica por sextuplicado, se adicionara la cantidad de analito
correspondiente al 100% de este en la muestra. Seleccionar dos niveles
superior e inferior de la cantidad por sextuplicado, se adicionara la cantidad
de analito correspondiente al 100% de este en la muestra. El mismo
analista analizara los placebos adicionados utilizando de referencia la
sustancia empleada en la adicin al placebo analtico en las mismas
condiciones. Determinar la cantidad recuperada del analito.

b) Si no se conocen los componentes de la muestra, con el mtodo se

determina el contenido del analito y se preparan 6 muestras adicionadas
del analito hasta completar el 100% de ste en la muestra. Las muestras
adicionadas se analizan usando como referencia la sustancia empleada en
la adicin de la muestra.
Determinar la cantidad recuperada del analito: La adicin del analito debe ser en
las primeras etapas del mtodo.
Calcular el porcentaje de recobro de cada placebo analtico, al obtener el cociente
de la cantidad recuperada respecto de la cantidad adicionada expresada en
porcentaje.
Calcular , S, CV e IC() del porcentaje de recobro.
Criterios de aceptacin:
IC () debe incluir el 100% o que el promedio aritmtico del % de recobro se
incluya en el intervalo:
98-102% mtodo cromatogrfico
98-102% mtodo volumtrico
97-103% mtodo qumico o espectrofotomtrico
95-105% mtodo microbiolgico
CV del porcentaje de recobro:
No mayor de 2% en mtodo cromatogrfico
No mayor de 2% en mtodo volumtrico
No mayor de 3% en mtodo qumico o espectrofotomtrico
No mayor de 5% en mtodo microbiolgico
No mayor a una magnitud preestablecida, acorde a la especificacin del
analito en la muestra (CNQFBs,2015).
El mtodo no oficial deber tener una precisin igual a mejor que el mtodo oficial,
o que su precisin sea aceptable para la aplicacin analtica.
Inicialmente se debe establecer el mtodo de referencia y el mtodo a comparar.
Metodologa.-Tanto con el mtodo de referencia como el mtodo a comparar, dos
analistas en dos das
deben analizar por triplicado muestras independientes
(pesadas o alcuotas) de un lote homogneo de producto, cuyo nivel de analito
est incluido dentro de la especificacin.
Reportar el contenido/potencia/valoracin del analito de todas las muestras en %
para ambos mtodos.
Criterios de aceptacin: El intervalo de confianza unilateral inferior, para la razn
de varianzas del mtodo a comparar respecto del mtodo de referencia, no debe
exceder el valor de 1 (cualquier otro criterio de aceptacin deber justificarse).
Especificaciones establecidas del principio activo de un frmaco
La materia prima para elaborar la forma farmacutica tiene que tener un grado de
pureza la cual tiene el riesgo de contaminarse estando en granel introducidas en la
materia prima, intermedio o frmaco durante la produccin, muestreo, empaque,
9

reempaque, almacenamiento o transporte, teniendo que los contaminantes son las

impurezas indeseables de naturaleza qumica o microbiolgica, o materia extraa,
se realizan las siguientes pruebas (DOF 2013, NOM-001-SSA1-93 y NOM-059SSA1):

Identidad; Confirmacin de la presencia del frmaco, como tal o incluido

en un medicamento, por sus
Calidad; la aptitud de un frmaco o medicamento para su uso previsto.
Potencia; actividad teraputica del producto farmacutico tal como es
indicada por pruebas apropiadas de laboratorio o por datos clnicos
controlados y desarrollados en forma adecuada.

Purezas; Grado en el que una entidad qumica o biolgica est presente en una
substancia.
Documentacin: Las actividades de la validacin de un mtodo analtico deben
ser sustentadas por los siguientes documentos:
a) Protocolo, cuyo contenido es:
1. Titulo
2. Propsito u Objetivo
3. Responsabilidades
4. Plan de prueba describiendo los parmetros de desempeo
que permitan verificar la aplicacin analtica deseada
5. Criterios de aceptacin para cada parmetro
6. Formato de registro de resultados
b) Reporte, cuyo contenido es:
7. Ttulo
8. Resultados
9. Anlisis de resultados
10. Confrontacin contra los criterios de aceptacin
11. Conclusin
Es crtico documentar los registros analticos; dicha documentacin deber estar
ordenada y disponible, en responsabilidad del rea de calidad (CNQFBs,2015).
Los ensayos o mediciones realizadas sern con el fin de poder realizar las
siguientes pruebas de parmetros de validacin:
Selectividad
Limites
Robustez
Linealidad
Exactitud
Aplicabilidad
Sensibilidad
Precisin

10

El analista o responsable de la validacin deber realizar los clculos matemticos

con los resultados obtenidos de cada prueba, comparativos y/o estadsticos
correspondientes a cada ensayo para lo cual podr utilizar para ese fin un
software estadstico, calculadora o una planilla de clculo.
ESTRATEGIA METODOLGICA
Mtodos de anlisis
La validacin de un mtodo analtico es un paso fundamental para asegurar que
los resultados entregados por dicho mtodo son confiables. Cuando se realiza la
validacin de un mtodo por parte del laboratorio, lo que se busca es determinar
con fundamento estadstico que el mtodo es adecuado para los fines previstos.
Los productos qumicos-farmacuticos se someten a un proceso de validacin.
(Castillo et. al, 1997). Algunos mtodos utilizados en la validacin del cido
ascrbico son los siguientes:
Espectroscopia ultravioleta-visible (UV-Vis)
El uso de la espectroscopa Ultravioleta-Visible (UV-Vis), para la determinacin del
cido Ascrbico, es ampliamente utilizado en investigaciones con alimentos, pues
este cido presenta transiciones electrnicas fuertes en la regin UV, facilitando
su identificacin y cuantificacin por esta tcnica. (M. Gutirrez et. al. 2007).

Figura 1. Reactivos mtodo validacin cido

ultravioleta-visible (UV-Vis), (INEN 0384,1979).

ascrbico, Espectroscopia

REACTIVOS

Solucin de hidracina. Disolver 2 g de 2,4

dinitrofenilhidracina en 100 cm3 de solucin 9 N de
cidosulfrico.

Carbn activado. Exento de hierro y secado a

110C durante 12 h.

Solucin de cidos metafosfrico y actico. Debe

contener 5% (m/v) de cido metafosfrico y 10%
(m/v) de cido actico.

Solucin al 85% de cido sulfrico.

Solucin al 10% da tiorea. Disolver 10 g de

tiorea en alcohol tnico de 50GL y llevar a 100
cm3 con el alcohol indicado.

Solucin patrn de cido dehidro-ascrbico. Disolver 25 mg de

cido ascrbico en 25 cm3 de solucin al 5% (m/v) de cido
metafosfrico. Aadir dos gotas de agua de bromo, agitar hasta
coloracin amarilla y transferir a un tubo grande de ensayo.
Airear agitando suavemente, hasta decoloracin.

13

Figura 1.1 Calibracin mtodo validacin cido ascrbico, Espectroscopia

ultravioleta-visible (UV-Vis), (INEN 0384,1979).

CURVA DE CALIBRACIN

Preparar, en los vasos de precipitacin de 50 cm3,

soluciones que contengan los mg de cido dehidroascrbico, diluyendo la solucin patrn mediante adicin de
la solucin de cidos metafosfrico y actico.

Aadir en cada recipiente una gota de solucin al 10% de

tiorea y 1 cm3 de la solucin de hidracina.

Colocar los vasos de precipitacin en el bao de agua a 37

1C durante tres horas; luego, colocarlos en bao de agua
fra y hielo, adicionando en cada uno 5 cm3 de solucin al
85% de cido sulfrico.

Determinar la absorbancia de las soluciones usando el

espectrofotmetro. Se sugiere trabajar a 540 nm.

14

Figura 1.2 Procedimiento mtodo validacin cido ascrbico, Espectroscopia

ultravioleta-visible (UV-Vis), (INEN 0384,1979).

PROCEDIMIENTO

Homogeneizar convenientemente la muestra. Pesar, con

aproximacin al 0,1 mg, 10 g de muestra y colocar en un
matraz volumtrico de 100 cm3.

Aadir 70 cm3 de solucin de cidos metafosfrico y actico;

agitar varias veces y diluir a volumen.
Filtrar y recibir el lquido filtrado en un matraz volumtrico de 100
cm3. Transferir 50 cm3 del filtrado a un matraz Erlenmeyer de
125 cm3. Agregar 1 g de carbn activado, agitar y filtrar. Repetir
esta operacin hasta que el filtrado aparezca completamente
decolorado.
Transferir porciones de 5 cm3 del filtrado a dos tubos de ensayo
grandes y adicionar en cada uno de ellos una gota de solucin al
10% de tiorea. En el tubo A se realiza el ensayo de referencia y en
el tubo B se efecta la reaccin de coloracin.

Aadir en el tubo B 1 cm3 de solucin de hidracina y colocarlo

en el bao de agua a 37 1C durante tres horas.

Luego, colocar los dos tubos en un bao de agua fra y hielo y

aadir en ambos 5 cm3 de solucin al 85% de cido sulfrico,
efectuando esta adicin en un tiempo no menor de un minuto.

Agitar vigorosamente los dos tubos mientras permanecen en

el bao por un tiempo de 30 min.

Calibrar el espectrofotmetro en absorbancia cero con agua

destilada, a la longitud de onda utilizada en 5.5.

Determinar la absorbancia de las soluciones contenidas en los dos tubos.

Restar el valor de la absorbancia determinado para el contenido del tubo A
del valor correspondiente al tubo B, y, utilizando la curva de calibracin,
establecer la concentracin de cido dehidroascrbico en la solucin de
muestra.

15

Tabla 2. Colores de la radiacin visible. (Frederick, et. al,

2005).
(nm)
color
complemento
400-465
violeta
verde amarillo
465-482
azul
Amarillo
482-487
azul verdoso
Anaranjado
487-493
azul verde
rojo anaranjado
493-498
verde azulado
rojo
498-530
verde
rojo prpura
530-559
verde amarillento
prpura rojizo
559-571
amarillo verde
prpura
571-576
amarillo verdoso
violeta
576-580
amarillo
azul
580-587
anaranjado amarillento
azul
587-597
anaranjado
azul verdoso
597-617
anaranjado rojizo
azul verde
617-780
rojo
azul verde
Absorcin cido ascrbico 540-570nm. (Cea, et. al.)
Valoracin acido-base del cido ascrbico
Cuando se habla de una reaccin acido base se habla del tipo de cambio que
ocurre cuando se mezclan una solucin acida y una solucin bsica. La titulacin
acido-base es una tcnica que se usa con frecuencia en el laboratorio, el
procedimiento general consiste en determinar la cantidad de cido por la adicin
de una cantidad medida y equivalente de una base o viceversa. (Canales, et al,
1999). El cido ascrbico tiene una constante cida de disociacin grande y al
neutralizar parcialmente un protn cido de una disolucin acuosa de cido
ascrbico (AH2 con una base fuerte, estn presentes en la disolucin AH2 y AH - ,
formndose una disolucin reguladora AH2/AH - . Por tanto, si a una determinada
cantidad de cido ascrbico en disolucin, se le aaden volmenes conocidos,
para su total neutralizacin, se determina la cantidad presente de este acido.
(Rodrguez, et. al, 2009). (Ver figura 2,2.1).

16

Figura 2. Materiales y reactivos mtodo cido-base validacin cido ascrbico,

(NMX-F-229-1972).
MATERIALES Y REACTIVOS

Agua destilada.

Solucin al 10% de cido metafosfrico. Se pesan de 60 a

70 g barras de cido metafosfrico (HPO3), se disuelven en
500 ml de agua y se filtra la solucin en papel plisado.

cido metafosfrico al 2%. Se diluye con agua 1:5 en

volumen, la solucin al 10%.

Solucin acuosa de cido actico al 10%. de sal sdica del

2.6 diclorofenol indofenol.

Solucin de cido metafosfrico

Solucin de cido metafosfrico-actico. Se disuelven agitando 15 g de

barras de cido metafosfrico glacial recientemente pulverizado, en 40
ml de cido actico y 200 ml de agua; se diluyen hasta cerca de 500 ml
y se filtra por papel filtro plegado en un frasco con tapn esmerilado. El
cido metafosfrico (HPO3) se transforma en cido fosfrico (H3PO4).
Determinacin del titulante de la solucin de la sal sdica
del 2.6 diclorofenol-indofenol.

17

Figura. 2.1. Mtodo cido-base valoracin de cido ascrbico, (NMX-F-229-1972).

VALORACION AA.

Se pesan exactamente 50 mg de cido ascrbico grado

farmacutico y se pasan a un matrazaforado de 100 ml. Se
disuelven con la solucin de cido metafosfrico al 2% y se
afora con el mismo cido a 20C.

Se toman con pipeta 10 ml de esta solucin en el Erlenmeyer y se

aaden 10 ml de cido actico al 10% ms el agua necesaria pare
igualar el volumen de las diferentes determinaciones, y se titula con
la solucin de sal sdica del 2,6-diclorofenol-indofenol hasta
coloracin rosa persistente por 15 segundos.

Mtodo de Tillmans
El mtodo de Tillmans se basa en valorar la vitamina C al estado de cido
ascrbico, eliminando previamente el extracto de cido (tricloroacetico, oxlico o
metafosfrico), con solucin de acetato de mercurio al 20 por 100 al que junto con
eliminar sustancias colorantes y reductoras, lo transforma en cido
dehidroascrbico. Este acido se reduce luego a ascrbico, mediante una corriente
de hidrogeno sulfurado, y una vez eliminado este procede a la titulacin con el
reactivo de Tillmans, cuyo ttulo ha sido determinado previamente por medio de
una solucin conocida de cido ascrbico puro. (Cea, et al, 1981).
Mtodo colorimtrico de Roe
Se basa en valorar el cido dehidroascrbico, previa transformacin del cido
ascrbico por medio del carbn Nori A activado. El cido resultante copula con la
2-4 dinitrofenil-hidracina, dando un precipitado de color amarillo anaranjado que es
proporcional al contenido de vitamina y que se disuelve en cido sulfrico, virando
a este color. (Cea, et. al, 1981).
Valoracin directa 2,6-diclofenol indol
Dentro de los mtodos oficiales descritos para el anlisis de la vitamina C en
tabletas, uno de los ms empleados es la valoracin directa con 2,6-diclorofenol
indofenol por resultar simple y rpido.3 El mtodo es vlido si se conoce que en la
composicin de la muestra no existen sustancias interferentes y la concentracin
de cido dehidroascrbico es inapreciable, por tanto, se puede aplicar a una
18

muestra recin preparada, pero no resulta de utilidad en estudios de estabilidad de

la vitamina C.(Rodriguez, et. al, 2009)

CIDO ASCRBICO
Definicin
El cido ascrbico o vitamina C es una estructura enol-diol en los carbonos 2 y 3,
que tiene caractersticas reductoras por sus dos grupos donadores de protones.
Es un compuesto muy inestable y se oxida fcilmente a cido dehidroascrbico, es
hidrosoluble y termolbil, interviene en muchas reacciones metablicas
importantes. La falta de la dieta de cido ascrbico en la especie humana
ocasiona la enfermedad carencial denominada escorbuto LEHNINGER) (CEA, et.
al. 1981)
Antecedentes
La enfermedad del escorbuto fue combatida durante siglos con la introduccin de
ctricos en la dieta pero la relacin entre los ctricos (ricos en vitamina C) y la
enfermedad (provocada por carencia de vitamina C) no se descubri hasta el siglo
XX. La vitamina C fue aislada por primera vez en 1928 por el cientfico hngaro
Albert Szent-Gyorgy, que trabajaba en las oxidaciones de los nutrientes y su
relacin con la produccin de energa, descubri un factor reductor en las
glndulas suprarrenales en forma cristalina, que bautiz con el nombre de cido
hexurnico, y determin su frmula emprica C6H8O6. En la misma poca, en
1932 King y Waugh encontraron este mismo cido en el zumo de limn, poco
despus en 1933 Hirst y Hawoth determinaron la estructura y sugirieron junto con
Szent-Gyrgy el cambio de nombre a cido L-ascrbico por la influencia de sus
propiedades antiescorbticas.
En 1937 Hawoth y Szent-Gy6rgy obtuvieron el premio Nobel de Medicina por sus
trabajos sobre el cido ascrbico. Se llama con el nombre de vitamina C a todos
los compuestos que poseen la actividad biolgica del cido ascrbico.
Caractersticas generales
El cido ascrbico, C6H8O6 son unos cristales blancos o muy ligeramente
amarillentos, en estado seco es estable en el aire.
En preparaciones farmacuticas y en muchos productos naturales, la vitamina se
oxida por exposicin al aire y a la luz. El cido L-ascrbico (AA) es un compuesto
afn a los carbohidratos con propiedades cidas y reductoras debidas al resto 2,3enodiol es un compuesto muy polar (CEA, et. al. 1981).
Posee un relativamente fuerte poder reductor, de colorante a diversas colorantes.
Las soluciones acuosas se oxidan rpidamente al aire: la reaccin se exalta en
medio alcalino y en presencia de indicios de metales, principalmente hierro y
cobre. Debe conservarse en recipientes bien cerrados, protegidos de la luz y de la
humedad. A rasgos generales, se utiliza como antioxidante para alimentos, para
evitar el enrancimiento de sustancias grasas, el ennegrecimiento de frutos
cortados (para uso mdico, se usa en forma de vitamina C).

19

Figura 3. Estructura qumica del cido ascrbico

Tabla 3. Propiedades fsicas y qumicas del cido ascrbico

Peso molecular
pKa
Temperatura ctrica
Densidad
Punto de ebullicin
Calor especifico de vaporizacin
Punto de inflamabilidad
Punto de autoignicin
Formula molecular
Punto de fusin
Apariencia
Solubilidad en agua

176.12 g/mol

4.090.10
783 K
1.694 g/cm3
553 C
0.8443 kJ/g
276 C
380 C
C6H8O6
190 - 192 C
Solido blanco o amarillo claro
soluble

Espectros de RMN
Figura 4.- Espectro de RMN de protn

20

Figura 5.- Espectro de RMN de 13C

Figura 6.- Espectro de absorcion IR

21

Figura 7.- Espectro de masas

Fisiologa
Las funciones de la vitamina C al parecer reflejan su capacidad redox. Por lo tanto,
participa en algunas reacciones de hidroxilacin en las cuales mantiene actividad
enzimtica ptima por donacin de electrones.La vitamina tambin incrementa la
absorcin de hierro no hem y sirve como un mecanismo importante para inactivar
radicales sumamente reactivos en las clulas de los tejidos. Asimismo, retarda la
formacin de nitrosaminas en el cuerpo, que son posibles carcingenos. La
evidencia acumulada vincula el cido ascrbico a muchos elementos del sistema
inmunitario.
Formas de presentacin y su relacin con la actividad vitamina C:
La vitamina C puede presentarse en distintas formas:
a) cido L-ascorbico: es el de ms clara actividad antiescorbtica. El aspecto
es el de cristales blancos, con sabor cido, propiedades fuertemente
reductoras, sensibles a la luz y a ciertos metales pesados y solubles en
agua.
b) cido dehidroascrbico: tambin con actividad antiescorbtica. Por
reduccin se transforma en cido ascrbico, se presenta en forma de
cristales blancos, solubles en agua.
c) E acido 2-cetp-Lgulnico: precursor del cido ascrbico. No tiene actividad
antiescorbtica, se presenta en forma de cristales blancos.
Su oxidacin, con prdida de hidrgeno, conduce al cido dihidroascrbico. En
presencia de agua se produce la apertura del ciclo conduciendo a cido 2,3dicetogulnico sin las propiedades biolgicas de la vitamina C.
22

Deficiencia
Humanos, monos, cobayos y murcilagos frugvoros han perdido la capacidad de
sintetizar el cido ascrbico a partir de glucosa (estas especies perdieron la ltima
enzima de la serie, oxidasa de L-gulonolactofla). Por tanto, la deficiencia de cido
ascrbico en la dieta da lugar, en estas especies, a los sntomas de escorbuto que
incluyen lesiones patolgicas de huesos, dientes, encas, piel y vasos sanguneos.
Todos stos parecen deberse a despolimerizacin del tejido conectivo y es un
problema.
Uso teraputico
En la tuberculosis, lcera pptica y otras situaciones de estrs, por ejemplo en una
ciruga, hay una necesidad creciente de cido ascrbico. Esta se puede satisfacer
mediante 100 a 200 mg por da. La tirosinemia transitoria observada en algunos
neonatos se puede tratar con 100 mg por da. Por lo regular, la teraputica del
escorbuto comprende 1 a 2 g/da hasta que se logra la saturacin del tejido.
Toxicidad
Las concentraciones normales en la dieta carecen de toxicidad. La ingestin alta
(ms de 1 g/da) puede causar diarrea y en algunos individuos sensibles favorece
la precipitacin de clculos de cistina o de oxalato en las vas urinarias. Con
niveles de ingestin ms al-tos de ascorbato debe considerarse la posibilidad de
efectos de rebote y de abstinencia. En recin nacidos de madres que durante el
embarazo ingirieron gran des cantidades de ascorbato hay un peligro de
escorbuto. Tambin se han publicado informes de respuesta falsa en algunas
pruebas diagnsticas. En la dosis oral tratada en ratones durante 10 das a 50
mg/Kg.dia induce a una actividad immunoestimulante activando limfocitos para
facilitar la produccin de DNA y RNA.
Solubilidad
Agua: 333 g/l. Solvente en etanol, 30 de etanol, 50 de etanol absoluto, 100 de
glicerina Toxicidad.
LD50 cutnea en ratones. 2630-3120 mg/Kg LD50
intravenosa en ratones. 518 mg/Kg . Insoluble en ter, cloroformo, benceno, ter
de petrleo, aceites, disolventes de grasas. Las soluciones deben esterilizarse por
filtracin.
Biodisponibilidad del cido ascrbico en los alimentos
La vitamina C es el trmino genrico para cido L ascrbico y su forma oxidada
cido dehidroascrbico, ambos muestran actividad de vitamina C. Las dos formas
pueden convertirse con facilidad una en la otra.
Las principales fuentes de AA de la dieta son las frutas, hortalizas, zumos y
alimentos fortificados (por ej., cereales de desayuno). Se ha observado en sujetos
humanos que la biodisponibilidad del AA del brcol, gajos de naranja y zumo de
naranja es equivalente a la de las tabletas minerales de la vitamina. La
biodisponibilidad del AA del brcol crudo es de un 20% ms baja que la del cocido,
lo que puede deberse a una incompleta masticacin y/o digestin. La diferencia
relativamente escasa entre la biodisponibilidad del AA del brcol y de otras
hortalizas crudas en relacin con sus formas cocidas puede tener escaso
23

significado nutricional. Puede concluirse que el AA de la mayora de las frutas y

hortalizas es altamente disponible para el hombre.
El cido ascrbico es sintetizado por las plantas superiores y todos los animales,
con excepcin de los humanos, cobaya (un ave tropical) y un roedor de la india. Al
parecer los microorganismos no forman cido ascrbico pero tampoco lo
necesitan para su crecimiento, por lo tanto en la naturaleza se encuentra en las
frutas y verduras frescas y en algunas glndulas animales (suprarrenales, hipfisis
y cuerpo lteo) (CEA, et. al. 1981).
Tabla 2.- Contenido de vitamina C de distintas frutas, expresado en mg/100 g de
sustancia comestible.
Tabla 4.- Contenido de vitamina C de distintas frutas, expresado
en mg/100 g de sustancia comestible
Albaricoque fresco
Cereza fresca
Ciruela fresca
Fresa fresca
Limn fresco /jugo)
Mandarina fresca (Citrus nobilis)
Manzana fresca (Malus pumija)
Melocotn fresco
Meln fresco
Sandia
Naranja
Pera fresca

7
10
6
60
50
45
31
5
7
33
50
4

Fuente: (CEA, et. al. 1981).

Propiedades farmacolgicas
El cido ascrbico o vitamina C, es una vitamina hidrosoluble presente en frutas y
vegetales tales como los ctricos y las verduras frescas. El cido ascrbico es una
antioxidante y captador de radicales libres y es considerado en este sentido ms
eficaz que la vitamina E o el beta-caroteno. El cido ascrbico es esencial para
mantener la integridad del organismo, en especial para la reparacin de los tejidos
y la formacin de colgeno. Dado que el hombre no puede sintetizar el cido
ascrbico, la carencia del mismo ocasiona una enfermedad carencial, el
escorbuto.
La vitamina C se usa sobre todo como suplemento nutricional. Tambin se utiliza
para el tratamiento de la metahemoglobinemia idioptica y, con la desferoxamina,
para tratar la intoxicacin crnica por hierro.
El cido ascrbico ha sido utilizado para tratar una gran variedad de dolencias
como el catarro comn, las infecciones de las encas, el acn, la depresin entre
otras, aunque todas estas indicaciones no han sido suficientemente probadas. Por
lo tanto, no se recomienda la vitamina C para ellas.

24

Mecanismo de accin
El cido ascrbico es necesario para la formacin y la reparacin del colgeno. Es
oxidado, de forma reversible a cido dehidroascrbico, estando ambas formas
implicadas en las reacciones de xido-reduccin. La vitamina C participa en el
metabolismo de la tirosina, carbohidratos, norepinefrina, histamina, fenilalanina y
hierro. Otros procesos que requieren del cido ascrbico son la sntesis de lpidos,
de protenas y de carnitina; la resistencia a las infecciones; hidroxilacin de la
serotonina; mantenimiento de la integridad de los vasos sanguneos y respiracin
celular.
La vitamina C tambin regula la distribucin y almacenamiento del hierro evitando
la oxidacin del tetrahidrofolato. El cido ascrbico potencia el efecto quelante de
la desferoxamina durante el tratamiento crnico con este frmaco para el
trataminto de una intoxicacin por hierro.
Las manifestaciones del escorbuto, que se deben sobre todo a una formacin de
colgeno defectuosa, es el resultado de la deficiencia de la hidroxilacin del
procolgeno y de la formacin de colgeno en ausencia de la vitamina C. El
colgeno sin hidroxilar es inestable y no puede proceder a la reparacin normal de
los tejidos. Esto se traduce en una fragilidad caplar con procesos hemorrgicos,
retrasos en la cicatrizacin de heridas y anormalidades seas.
No se conoce muy el mecanismo antioxidante del cido ascrbico. La vitamina C
puede proteger de la oxidacin a las LDLs, aunque el papel que esta propiedad
juega en la posible atenuacin de unos procesos arteriosclerticos es objeto de
controversias. En efecto, dado que la vitamina C es hidrosoluble es difcil que
pueda ser incorporada a las LDLs como ocurre con la vitamina E o el probucol,
ambos muy liposolubles. Pudiera ser por la capacidad que tiene la vitamina C de
regenerar la capacidad anti-oxidante de la vitamina E.
Farmacocintica
La vitamina C se absorbe bien en el intestino delgado gracias a un proceso de
transporte activo saturable. La eficacia de la absorcin disminuye con el
incremento de la ingestin. La vitamina se distribuye en casi todos los tejidos a
travs del cuerpo; en el adulto la reserva es de casi 1 500 mg. El exceso de
vitamina C no se almacena y los niveles en leucocitos se emplean para estimar las
concentraciones en los tejidos. En valores plasmticos menores de 1.4 mg/dL (80
mmol/ L), el cido ascrbico se reabsorbe en el rin; por arriba de estos niveles
se excreta el cido ascrbico.
Tambin aparecen en la orina gran nmero de metabolitos. La excrecin urinaria
de cido ascrbico refleja de manera estrecha la ingestin reciente en la dieta.
Cuando la concentracin en plasma es entre 1 y 2 mg/dL (56.8 y 113,6 mol/L)
ocurre la saturacin de tejidos; las mujeres muestran concentraciones ms altas
que los varones. El hbito de fumar cigarrillos, y tambin algunos tipos de estrs,
puede reducir de manera drstica a concentracin plasmtica de ascorbato.
Cuando se reduce la ingestin de cido ascrbico luego de suplemento a largo
plazo con 250 mg/da o ms, el rin contina excretando cido ascrbico. Esto
da como resultado un fenmeno de rebote en el cual el ascorbato del plasma
puede descender a concentraciones escorbticas (en especial si la ingestin
previa fue de 2 g o ms por da).
25

Interacciones
El cido ascrbico se utiliza para mejorar las propiedades quelantes de la
desferoxamina y aumentar la excrecin de hierro. La administracin concomitante
de cido ascrbico y desferoxamina puede, sin embargo, aumentar la toxicidad del
hierro y descompensacin cardaca, en particular en los ancianos. La evidencia
sugiere que estos efectos tienen lugar cuando se administran dosis de cido
ascrbico de 500 mg al da o ms. La administracin de la dosis de cido
ascrbico 1-2 horas despus de la desferoxamina es suficiente, por lo general,
para evitar esta reaccin
En grandes dosis, el cido ascrbico puede bajar el pH urinario causando la
reabsorcin tubular de muchos compuestos cidos. Por el contrario, los
compuestos de carcter bsico pueden mostrar una reabsorcin reducida. En
grandes dosis, el cido ascrbico puede acelerar la excrecin renal de la
mexiletina.
La absorcin del hierro no-heme (fundamentalmente de las plantas) por el tracto
digestivo depende de que el hierro se encuentre en su estado reducido. El cido
ascrbico, por sus propiedades antioxidantes mantiene el hierro como hierro
ferroso y, por lo tanto aumenta la absorcin de este elemento, aumento que puede
llegar a ser del 10% y que ocurre con grandes dosis de vitamina C, de 500 mg o
ms. Algunos pacientes pueden beneficiarse de este efecto, recibiendo una dosis
de cido ascrbico con el suplemento de hierro en forma de sales ferrosas o de
complejos de hierropoliscaridos.
Se ha observado que la coadministracin de cido ascrbico en dosis de 2 g
reduce substancialmente las AUCs del propranolol, disminuyendo tambin su
efecto bradicrdico. Como al mismo tiempo se observ una reduccin en la
excrecin de los metabolitos del propranolol se ha postulado que el cido
ascrbico reduce la biodisponibilidad del beta-bloqueante. Hasta que se disponga
de una mayor informacin, los clnicos debe ser advertidos acerca de esta
interaccin.
Existen informes que describen que grandes dosis de cido ascrbico (ms de 5
g/da) pueden reducir los efectos anticoagulantes de la warfarina. No obstante, no
parecen necesarias intervenciones clnicas a menos que se consuman grandes
dosis de cido ascrbico.
Dosis recomendada
El cido ascrbico no es sintetizable por el organismo, por lo que se debe ingerir
desde los alimentos que lo proporcionan vegetales verdes, frutas ctricas y patatas
El Food and Nutrition Board of the National Research Council recomienda en la
dieta un suministro entre 35 a 60 mg/da. Linus Pauling, premio Nobel de Qumica
en 1954 y premio Nobel de la Paz en 1962, estudi los efectos de la vitamina C
como preventivo del resfriado comn y sobre los mecanismos de defensa natural
del organismo frente a las enfermedades y concluy que la vitamina C forma parte
en la mayora de las reacciones qumicas del organismo por lo que aconsej un
suplemento mayor diario de vitamina C (por lo menos 2 g al da). Este punto de
vista ha suscitado controversias en muchos cientficos ya que, aunque la vitamina
C es muy importante por su carcter antioxidante, no se ha podido demostrar que
26

intervenga directamente en la prevencin del catarro, de cualquier forma la

vitamina C no es txica en el organismo y se elimina fcilmente.

Tabla 5.- Dosis recomendada para el tratamiento del escorbuto dosis orales o
parenterales:
Dosis
Adultos
100250 mg p.os., s.c., i.m. o i.v. 1 o 2 veces al da (Se han llegado a
utilizar dosis ms elevadas en el escorbuto, pero sin observarse
beneficios adicionales )
Nios
100300 mg p.os., s.c., i.m. o i.v. en dosis divididas
Bebs
50100 mg p.os., s.c., i.m. o i.v. en dosis divididas

Tabla 5.1.- Dosis recomendada para el tratamiento de metahemoglobinemia

idioptica: dosis orales
Dosis
Adultos No se han establecido las dosis como coadyuvante en el tratamiento de la
intoxicacin por hierro en le terapia con desferoxamina, dosis orales.
Nios
100300 mg p.os., s.c., i.m. o i.v. en dosis divididas

Tabla 5.2.- Dosis recomendada para la acidificacin

de la orina, dosis orales o parenterales
Dosis
Adultos 412 g p.os., i.v., i.m. o s.c. en tres o cuatro
dosis
Nios
500 mg p.os., i.v., i.m. o s.c. cada 6-8 horas

Para el tratamiento de forunculosis crnica recurrente en pacientes con disfuncin

de neutrfilos: Dosis orales de 1 g/da de cido ascrbico durante 4 a 6 semanas
han mostrado ser eficaces en el tratamiento de episodios mltiples de forunculosis
en la que existe disfuncin de los neutrfilos, normalizndose estos en el plazo de
un ao. El cido ascrbico no mejora la forunculosis si no hay disfuncin
neutrfila.
Tabla 6.-Pacientes especiales
Dosis
Pacientes con disfuncin No existen directrices especficas para el ajuste de dosis
heptica
en estos pacientes.
Pacientes con disfuncin No existen directrices especficas para el ajuste de dosis
renal
en estos pacientes.
Hemodilisis intermitente
No hay directrices especifcas sobre las dosis en la
hemodilisis intermitente. Sin embargo, no se
recomiendan dosis superiores a los 200 mg/da

27

Tabla 7.- necesidades diarias de vitamina C, que se debe aportar con la

dieta
Dosis
Mujeres adultas o adolescentes durante el 8085 mg/da
embarazo
Mujeres adultas o adolescentes durante la 115120 mg/da
lactancia
Varones adultos
90 mg/da
Mujeres adultas
75 mg/da
Adolescentes entre 14 y 18 aos
65 mg/da (hembras); 75 mg/da
(varones)
Nios entre 913 aos
45 mg/da
Nios entre 48 aos
25 mg/da
Nios entre 13 aos
15 mg/da
Bebs
4050 mg/da
Para prevenir la deficiencia en vitamina C en 100 mg/da
pacientes bajo nutricin parenteral total

NOTA: el ascorbato sdico contiene 5 mEq de sodio a tener en cuenta en casos

de dietas hiposdica.
Contraindicaciones
El cido ascrbico est clasificado en la categora C en lo que se refiere a su
toxicidad durante el embarazo. Las concentraciones plasmticas en el cordn
umbilical son 2 a 4 veces mayores que las presentes en la sangre materna. No se
han documentado problemas bajo una ingesta normal en vitamina C, pero la
administracin de grandes dosis durante el embarazo ha provocado escorbuto en
el neonato. En efecto, el uso prolongado de dosis altas ocasiona un aumento del
metabolismo de la vitamina C, pudindose originar escorbuto cuando la ingesta
diaria vuelve a la normalidad.
La vitamina C se excreta en la leche materna en concentraciones 2 a 3 veces
mayores que las presentes en la sangre de la madre. No se han documentado
problemas durante la lactancia bajo una ingesta de vitamina C normal. Sin
embargo, dosis elevadas repetidas pueden ocasionar un aumento del
metabolismo del cido ascrbico que originen escorbuto cuando la ingesta sea
normalizada.
Dosis crnicas en exceso de vitamina C aumentan la probabilidad de formacin de
clculos renales de oxalato en pacientes con historia de nefrolitiasis, hiperoxaluria
u oxalosis.
Dosis grandes orales o i.v. de cido ascrbico pueden ocasionar anemia
hemoltica en pacientes con deficiencia en G6PD (glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa).
Grandes dosis de cido ascrbico pueden interferir con las determinaciones de
glucosa en sangre cuando se utiliza el mtodo de la glucosa-oxidasa. Los
pacientes diabticos que reciban vitamina C deben ser advertidos acerca de la
posibilidad de falsos positivos.

28

Como el cido ascrbico puede aumentar el riesgo de una toxicidad por hierro en
pacientes con hemocromatosis, estos pacientes debern limitar su ingesta de
vitamina a no ms de 500 mg/da
En algunos casos, muy raros, se ha asociado la ingesta de grandes dosis de cido
ascrbico on arritmias fatales en pacientes con sobrecargas de hierro.
Los pacientes con anemias (anemia sideroblstica, talasemia, etc) pueden mostrar
una reduccin de la absorcin de hierro durante un tratamiento con grandes dosis
de cido ascrbico, pudiendo aparecer crisis en casos de anemia falciforme.
Reacciones adversas
Despus de grandes dosis de cido ascrbico pueden producirse piedras renales
de oxalato, urato o cistina por obstruccin de los tbulos renales, con dolor de
espalda o vertebral. En el 5% de los pacientes que toman grandes dosis de
vitamina C se desarrolla oxaluria. Los sujetos con mayores riesgos son los que
tienen insuficiencia renal, historia de nefrolitiasis o se encuentran bajo
hemodilisis.
El cido ascrbico es, por regla general, no txico. Las reacciones adversas que
se han comunicado incluyen sofocos, jaquecas, naseas y vmitos y calambres
abdominales. La diarrea es el resultado de dosis superiores a 1 g/da.
Despus de su administracin intravenosa pueden observarse vrtigo, mareos o
debilidad. Se ha observado anemia hemolitica debida a hemolisis en algunos
pacientes con deficiencia en glucosa 6-fosfato deshidrogenasa (G6PD) despus
de grandes dosis por va oral o intravenosa de cido ascrbico. En casos muy
raros, se ha producido anemia falciforme debido a una disminucin del pH
sanguneo.
EL CONSUMO EXCESIVO DE CHICLES CONTENIENDO CIDO ASCRBICO
PUEDE OCASIONAR CARIES DENTALES DEBIDO A QUE EL CIDO
ASCRBICO ATACA AL ESMALTE.

29

ANEXOS

30

GLOSARIO
Analita: componente especifico de una muestra a medir.
Calibracin: conjunto de operaciones que determinan la relacin entre los valores
indicados por un instrumento de medicin y los valores conocidos correspondiente
a un patrn de referencia.
Error aleatorio: Es aquel error inevitable que se produce por eventos nicos
imposibles de controlar durante el proceso de medicin. Se contrapone al
concepto de error sistemtico. Las fuentes de los errores aleatorios son difciles de
identificar o sus efectos no pueden corregirse del todo. Son numerosos y
pequeos. Este error ocurre o est dado por el azar. Ejemplo: Errores de
apreciacin, tales como el paralaje, que depende del observador y su capacidad
en cuanto al lmite separador del ojo.
Error Sistemtico: Es aquel que se produce de igual modo en todas las
mediciones que se realizan de una magnitud. El error sistemtico: est
condicionado por algn factor distinto al azar. Ejemplo: el error de las masas
patrn del laboratorio se transfiere sistemticamente al momento de calibrar la
balanza. El VIM, lo define como componente del error de medicin que al reiterar
las mediciones se mantiene constante o bien varia de manera predecible.
Especificidad: capacidad de un mtodo analtico para obtener una respuesta
debida nicamente al analito de inters.
Exactitud: concordancia entre un valor obtenido empleando el mtodo y el valor de
referencia.
Incertidumbre: de una medicin es el parmetro asociado al resultado, es decir,
caracteriza la dispersin de los valores que razonablemente pueden ser atribuidos
al mesurando.
Linealidad: habilidad para asegurar que los resultados obtenidos directamente o
por transformacin matemtica, son proporcionales a la concentracin del analito.
Mtodo analtico: descripcin de la secuencia de actividades, materiales y
parmetros que se deben cumplir para llevar a cabo el anlisis de un componente
especifico de la muestra.
Metodologa de prueba: procedimiento para determinar si un producto o materia
prima cumple con las especificaciones establecidas.
Muestra analtica: porcin de material a evaluar de acuerdo al mtodo analtico.
Muestra: porcin del material a evaluar.
Parmetros de desempeo: parmetro especifico a estudiar en un protocolo de
validacin.
Precisin intermedia: precisin de un mtodo analtico, expresada como la
concordancia relativa obtenida entre determinaciones independientes realizadas
en un mismo laboratorio, por diferentes analistas, en distintos das.
Precisin: grado de concordancia entre resultados analticos individuales, cuando
el procedimiento se aplica repetidamente a diferentes porciones de una muestra
homognea.
Repetibilidad: precisin de un mtodo analtico, expresada como la concordancia
entre determinaciones independientes realizadas por un solo analista, usando los
mismos instrumentos y mtodos.

31

Reproducibilidad: precisin de un mtodo analtico, expresada como la

concordancia entre determinaciones independientes realizadas por diferentes
laboratorios.
Revalidacin: comprobacin de que el mtodo analtico mantiene su desempeo
cuando existen cambios en la composicin del producto, en el mtodo analtico.
Robustez: es una medida de la capacidad de un procedimiento analtico de no ser
afectado por variaciones pequeas pero deliberadas de los parmetros del
mtodo; proporciona una indicacin de la fiabilidad del procedimiento en un uso
normal. En este sentido el objetivo de la prueba de robustez es optimizar el
mtodo analtico desarrollado o implementado por el laboratorio, y describir bajo
qu condiciones analticas (incluidas sus tolerancias), y a travs de este se
pueden resultados confiables.
Selectividad: es el grado en que un mtodo puede cuantificar o cualificar al analito
en presencia de interferentes. Estos interferentes normal o frecuentemente se
encuentran en la matriz de inters.
Sensibilidad: es el cociente entre el cambio en la indicacin de un sistema de
medicin y el cambio correspondiente en el valor de la cantidad objeto de la
medicin.
Validacin de mtodo analtico: proceso por el cual se demuestra, por estudios de
laboratorio, que la capacidad del mtodo satisface los requisitos para la aplicacin
analtica deseada, o tambin puede entenderse como verificacin de
determinados parmetros de un mtodo en la que los requisitos especificados
para estos, demuestran que el mtodo es idneo para un uso previsto (VIM,
2007).

32

BIBLIOGRAFA
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33