Instituto tecnológico de Minatitlán

INGENIERIA QUÍMICA

PRACTICA N°1: Conocimiento y operación de un

espectrofotómetro UV-VIS de absorción molecular.

Equipo: 2 “B”

Integrantes del equipo:

 Dafne Sugey Gutiérrez Guexpal 20230702

 Arlet carrillo Velázquez 20230649
 Karla Andrea cruz Pérez 20230661
 Gabriel Isaí Rasgado De Jesús 20230767
 Nuri Arlett Morales Contreras 20231134

Docente: Rosa María Haces Márquez

Fecha de entrega: Lunes 19 de septiembre del 2022.

 PRACTICA N°1: Conocimiento y operación de un espectrofotómetro UV-VIS de
absorción molecular.

Objetivo: Identificar los componentes principales de un espectrofotómetro UV-VIS de

absorción molecular, adquiriendo los conocimientos fundamentales para su operación.

Generalidades: Los sistemas de instrumentación para análisis y control químico son

ampliamente aceptados como ahorro de tiempo, requieren menos separación química y
son métodos seguros y sensibles. Su ventaja sobre los métodos analíticos clásicos se
deriva directamente de su determinación de la composición química mediante la
medición de las propiedades físicas.

El tamaño del campo de medición del instrumento se puede percibir simplemente

recordando una serie de propiedades físicas de una sustancia (índice de refracción,
color, susceptibilidad magnética, conductividad térmica, acidez, etc.). Los instrumentos
analíticos constan de componentes típicos (generadores de señales, sensores o
detectores de entrada, procesadores de señales y sensores de salida) que aseguran su
correcto funcionamiento siempre que funcionen correctamente. El método óptico es
conocido como el primer método de instrumentación espectroscópica diseñado para la
región visible del espectro electromagnético.

Los sistemas de instrumentación para análisis y control químico son ampliamente

aceptados como ahorro de tiempo, requieren menos separación química y son métodos
seguros y sensibles. Su ventaja sobre los métodos analíticos clásicos se deriva
directamente de su determinación de la composición química mediante la medición de
las propiedades físicas. El término todavía se usa hoy en día, pero incluye casi todas
las áreas del espectro. Estos métodos utilizan colectivamente la radiación
electromagnética como elemento básico del análisis, así como dispositivos ópticos
como lentes, espejos, rendijas, etc.
Los métodos instrumentales ópticos han evolucionado desde colorímetros que
utilizaban filtros coloreados como selectores de longitud de onda, pasando por los
espectrómetros de masas. Los selectores de longitud de onda más utilizados son los
monocromadores, que pueden ir variando la longitud de onda haciendo barridos
espectrales. Generalmente se ubican entre la fuente y la muestra o bien entre la
muestra y el detector. Los recipientes para la muestra (denominadas celdas o cubos)
pueden ser de acrílico (metacrilato) o de cuarzo, siendo éstas últimas las más indicadas
para el espectro visible. La espectrofotometría es un método que es utilizado para medir
las concentraciones de las sustancias. Para realizar estas mediciones se usan aparatos
llamados espectrofotómetros, estos aparatos miden la absorción de luz monocromática
de una longitud de onda conocida.

Origen y características del espectro de absorción UV-VIS: La región UV está definida

en el rango de longitudes de onda de 195 a 400 nm, es una región de energía muy alta,
por lo que provoca daño al ojo humano, así como quemaduras comunes en la piel y en
algunos casos puede producir cáncer.

En la región VIS, la cual se encuentra comprendida entre 400 y 700 nm, apreciamos el
color visible de una solución y que corresponde a las longitudes de onda de luz que
transmite, no que absorbe. El color que absorbe es el complementario del color que
transmite. Por tanto, para realizar mediciones de absorción es necesario utilizar la
longitud de onda en la que absorbe luz la solución coloreada. Cuando la materia
absorbe energía de la región UV- VIS se producen transiciones de tipo electrónico.
 La absorción molecular de la radiación en la región UV-VIS del espectro
electromagnético, depende de la estructura electrónica de la especie absorbente, como
por ejemplo átomos, moléculas, iones o complejos. Esta se da cuando se hace incidir
un haz de luz ultravioleta o visible sobre la molécula absorbente aumentando su
energía hasta la energía (hν) del fotón incidente, lo cual produce una transición
electrónica desde un estado energéticamente menor a otro mayor.

Luego de esto, emite un fotón con la misma cantidad de energía absorbida. La unión
de todas las transiciones se representa por medio de un conjunto de bandas llamado
espectro de absorción molecular.

La espectrofotometría o espectrometría UV-visible utiliza el principio de absorción para

determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las
moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz
absorbida depende de forma lineal de la concentración. Para hacer este tipo de
medidas se emplea un espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar la longitud de
onda de la luz que pasa por una solución y medir la cantidad de luz absorbida o
transmitida por la misma.

Partes de un espectrofotómetro

 Lámpara o fuente de luz

 Rendija 1
 Monocromador
 Cubeta con muestra
 Detector y transductor
 Registro de señal.
Para obtener un espectro UV-VIS de una muestra en solución se irradia en un rango de
longitudes de onda. Empleando una radiación monocromática a la vez, es decir, una
radiación de una sola longitud de onda. Este proceso se denomina de exploración. La
cantidad de la radiación absorbida en cada longitud de onda se mide y se traza frente a
la longitud de onda para obtener el espectro. Así, un espectro UV-Vis típico es un
gráfico de longitud de onda o la frecuencia frente a la intensidad de la absorción.
Absorción de especies moleculares Cuando un haz incidente de radiación que tiene una
longitud de onda adecuada golpea una molécula, se lleva a cabo la absorción de un
fotón y la molécula se excita. Cuando las moléculas se excitan estas perderán la
energía de excitación en forma de calor o emitiendo fotones (luminiscencia).

La absorción de la radiación UV-Vis es capaz de afectar a la excitación de los

electrones de enlace y otros electrones de valencia. Por lo tanto, la excitación de los
electrones en los enlaces químicos (π y sigma) o electrones no apareados (n) es el
resultado de la absorción de una longitud de onda adecuada de radiación UV-Vis. La
absorción por lo tanto será dependiente de la disponibilidad de enlaces π y sigma o
electrones n que puedan absorber la radiación incidente.

EQUIPOS Y MATERIALES

Equipo: Espectrofotómetro UV-VIS de absorción molecular Marca Genesys.

Materiales: Celdas de cuarzo y de metacrilato para lectura en espectrofotómetro

Metodología:

 Obtenga una introducción a la espectrofotometría del profesor e identifique

visualmente los componentes principales de los instrumentos ópticos existentes
en el laboratorio.
 Anotar las observaciones realizadas
 En concreto, identificar de la misma forma los componentes principales del
espectrofotómetro UV-VIS marca Genesys.
  Encender el espectrofotómetro UV-VIS marca Genesys y seguir el protocolo de
encendido indicado por el docente.
 Espera unos 30 minutos para que la luz alcance su máxima intensidad.
 Una vez transcurridos los 30 minutos, prestar atención a las instrucciones del
profesor para entender el funcionamiento del instrumento.
 Al manipular celdas de cuarzo y/o metacrilato, siga las precauciones que le
indique su instructor durante su manipulación.
 Sostenga la parte opaca de la celda y limpie el exterior con un paño limpio y
suave para evitar rayones.
 Anotar las observaciones.

Al inicio de esta sencilla práctica, la docente nos comentó sobre la importancia y el uso
de los Espectrofotómetros de Absorción Molecular UV-Vis, y lo más destacado que
mencionó fue lo siguiente:

“Este tipo de herramientas determinan la composición química midiendo propiedades

físicas del equipo. A la hora de utilizar este tipo de equipos, tenemos que saber qué

queremos hacer con ellos, darles un buen uso y cuidarlos.”

Es de suma importancia calibrar para que así se tenga la certeza de que se está

obteniendo un buen resultado, al hacer esto se debe de manejar con mucho cuidado el

aparato y verificar que se encuentre en buen estado y bien colocado.

Dentro de las indicaciones para la manipulación de estas celdas fueron que el nivel de

colocación de la muestra es hasta el triángulo invertido que la celda contiene, por otra

parte se menciona la forma correcta de tomar las celdas (por los lados opacos),

también la importancia de verter de manera correcta la solución, la que no debe llevar

basura, polvo, burbujas, ya que puede influir en la lectura.

 Espectrofotómetro
Genysis 20

Celda de metacrilato: deben

de tomarse por los lados
opacos, no tener ralladuras, ni
residuos de agua, polvo o
algún tipo de burbujas
producidas por la solución.
Del procesador de señales
se observó que los primeros
dos botones son para
aumentar o disminuir la
longitud.
El siguiente se usa para la
calibración y muestra la
absorbancia o absorción de
la energía del analito y la
transmitancia.
El siguiente da opciones de
absorbancia transmitancia y
concentración.
Conclusiones:
Es importante tener el conocimiento de cuáles son los materiales o equipos que
utilizaremos para saber cómo funcionan con la finalidad de no cometer errores que
podrían causar daño A los equipos que se utilizan, La espectrofotometría UV-visible es
una técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto. Se
basa en que las moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez que
la cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la concentración. Para hacer
este tipo de medidas se emplea un espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar
la longitud de onda de la luz que pasa por una solución y medir la cantidad de luz
absorbida por la misma. - (Nuri Arlett Morales Contreras)-

Al terminar esta práctica comprendí la importancia del espectrofotómetro, que dentro de

su uso principal es determinar la concentración de un compuesto, gracias a esta
práctica pude observar detalladamente las partes de este equipo e identificar desde el
generador de señal, el transductor de entrada que en este caso es el foto tubo, el
procesador de señal, el cuidado que debemos tener al utilizarlo, como manipular
correctamente las celdas, etc. Comprendí que al utilizar este aparato se debe de saber
cómo hacerlo y como manipularlo, pero sobre todo siguiendo cada una de las
indicaciones de nuestro profesor para así obtener buenos resultados. – (Dafne Sugey
Gutiérrez Guexpal) -

Un espectrofotómetro es esencial en un estudio de análisis químico, son equipos cada

vez más compactos pero con mayor eficacia, estos equipos ópticos nos permiten
identificar los compuestos de un analito por su espectro de absorción y conocer su
concentración, para con ello seguir con procesos de reacciones químicas, al igual el
determinar enzimas y proteínas incluidas en ella. Estos equipos están conformados por
3 bases, un sistema de iluminación, un monocromador y un detector. El usar un
espectrofotómetro nos permite ahorrar tiempo, ser más precisos en la medición y a un
bajo costo, cubriendo lo que es la detección de grupos funcionales, detección de
impurezas, análisis cualitativo y cuantitativo de analitos, entre otras cosas. – (Gabriel
Isaí Rasgado De Jesús) -

Como conclusión puedo comentar que antes de cualquier práctica se tiene que
investigar los parámetros de seguridad y saber muy bien cómo se maneja el tipo de
máquinas que utilizaremos en la práctica, saber su funcionamiento, conocimos
diferentes tipos de espectrofotómetros y la función que tiene cada uno de ellos, vimos
cómo es una celda, la manera en que se agarra y como se debe introducir al equipo y el
verter los líquidos que vamos a examinar saber su absorción y transmitancia. – (Arlet
carrillo Velázquez) –

Bibliografías:

Espectrofotómetro: ¿Qué es y para qué se utiliza? (2020, 18 febrero). Instrumentos de

Medición. Recuperado 13 de septiembre de 2022, de
https://instrumentosdemedicion.org/general/espectrofotometro/

Espectrofotómetro. (2019, 9 junio). Materiales de Laboratorio. Recuperado 11 de

septiembre de 2022, de https://materialeslaboratorio.com/espectrofotometro/