PRACTICO N°2:

Glúcidos

Integrantes:
- Gabriel Mazo
- Felipe Cárdenas
Curso: Bioquímica CS1008C
Grupo: 1
Sección: 1

1
Introducción

Los glúcidos carbohidratos, o glícidos, son compuestos orgánicos que contienen carbono,
oxígeno e hidrógeno en diferentes combinaciones, constituyendo una parte muy importante
en la alimentación humana además de generar una gran fuente de energía inmediata, ya que
se desdoblan de manera muy rápida, formando grandes cadenas de glucógeno, el cual se
transforma en glucosa en el momento en el que el organismo requiere energía., pero además
de proporcionar glucosa, forman cantidades mínimas de fructuosa y galactosa, estas últimas
no son azúcares esenciales (Mollinedo 2014).
Estos se pueden clasificar como azucares reductores y no reductores siendo el primero el
más abundante. Los azucares reductores son aquellos azucares con un grupo carbonilo
libre, el cual es oxidado generando un grupo carboxilo y los azucares no reductores son
aquellos que en su grupo carbonilo se encuentra combinado en unión glicosídica. Para
poder determinar si el azúcar es reductor o no, existen varios métodos, entre los cuales se
pueden encontrar el test de Benedict y el método Folín y Wu.
El test o prueba de Benedict permite determinar si una solución o compuesto contiene en su
composición azucares reductores, basándose principalmente en si hay o no reacción entre
un azúcar y el ion Cu2+ (Valentinetti et al., 2011). Para esto se utiliza el llamado “reactivo
de Benedict” el cual está compuesto de carbonato de sodio (el cual otorga a la solución un
pH alcalino), citrato de sodio (el cual mantiene al ion de cobre en la solución) y sulfato de
cobre (el responsable de generar cambios en el color de la solución) (Valentinetti et al.,
2011). Cuando este reactivo entra en contacto con un azúcar reductor y es calentado hasta
punto de ebullición, el azúcar se romperá en 2 fragmentos altamente reductores, los que
reaccionaran con el ion de cobre formando hidróxido de cobre y otorgándole a la solución
una coloración amarilla, anaranjada o rojo ladrillo en presencia de un azúcar reductor
(Valentinetti et al., 2011).
El método de Folín y Wu, al igual que el de Benedict, recurre a la reducción de iones de
cobre en una solución alcalina caliente por efecto de azucares u otras sustancias, sin
embargo, el óxido de cobre que se forma en el transcurso de la reacción reduce el ácido
fosfomolibdico transformándolo en azul de molibdeno, el cual es capaz de otorgar la
concentración de glucosa mediante técnicas de espectrofotometría (Gil, 2017).
El ácido fosfomolíbdico es un compuesto amarillo verdoso, soluble en agua y en
disolventes orgánicos polares como el etanol, el cual se utiliza como materia prima para
catálisis y adicionalmente se emplea como reactivo en cromatografía de capaz finas para
teñir fenoles, ceras, alcaloides, esteroides y usos analíticos (Todini, 2022).

2
Objetivos

 Adquirir la habilidad para interpretar distintos ensayos de azúcares.

 Adquirir la habilidad para construir curva de calibración, para glicemia de acuerdo
con el método de Folín- Wu.
 El estudiante será capaz de calcular la concentración de una muestra problema, a
partir de la construcción de la curva de calibración.

3
Resultados
I.- Test de Benedict-I
I-1.- si el ensayo resulta positive, explique lo que indica esta característica, para la
glucosa. Explique por qué los azucares (Glucosa) pueden dar negativo al ensayo.
Además, debe determinar el % de glucosa que tiene en la muestra de orina MP-1, su
muestra problema.
Si un azúcar reacción o tiene un resultado positivo, se debe a que este posee un azúcar
reductor, por lo que reaccionará con el reactivo y reducirá un ion de cobre, afectado su
coloración y volviendo de un rojo ladrillo
Si un azúcar no reacciona o se obtuvo un resultado negativo, se deberá a que no es un
azúcar reductor y por lo que no abra reacción con el reactivo y su ion de cobre, por lo que
no afectara a la coloración de la muestra.
I.- Test de Benedict-II
Tabla 1 Observación de % de glucosa con reactivo de Benedict

% De glucosa en Reactivo de Observaciones después del tiempo de reacción en caliente.

las soluciones Benedict Colores o cantidad de producto.
 Reacción positiva con solución de color rojo ladrillo, sin
1.- 0.25% 5 ml precipitado.
 Reacción positiva con solución de color amarillo, sin
2.- 1% 5 ml precipitado.
Reacción positiva con solución de color amarillo, sin
3.- 2% 5 ml precipitado.
 Reacción positiva con solución de color rojo ladrillo, sin
4.- MP-1 5 ml precipitado.

A partir de la tabla de resultados se puede deducir que la muestra problema se asemeja en

color a la muestra con una solución de 0.25 % de glucosa en solución, por lo que se deduce
que posee una concentración similar.

4
Parte II: determinación de glucemia por el método Folín y Wu
A.- Grafique la curva de calibración Absorbancia versus Concentración

Absorbancia v/s Concentracion

0.045
0.04
0.035 f(x) = 0.0178 x + 0.001
0.03 R² = 0.902678062678063
Absorbancia

0.025
0.02
0.015
0.01
0.005
0
0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2 2.2
Concentracion (mg%)

Figura 1: Curva de calibración de absorbancia a diferentes concentraciones (mg%)

B.- Interpole el valor de la muestra problema. Mediante la recta que se forma, aprendida en
el laboratorio N°1, o sea debe determinar la absorbancia de la solución MP-2 y con la recta
y su ecuación determinar la concentración de la Glucemia en su muestra problema.
Para el cálculo de la concentración de la muestra problema se utilizó la fórmula
de:
Y= mx + n
Basados en los valores del grafico (Fig.1) donde Y es la absorbancia y X es la
concentración, lo que resulta en:
Absorbancia de la muestra problema: 0,075
0,075 = 0,0178x + 0,001
0,074 = 0,0178x
0,074/0,0178 = x
4,157 = x
C.- ¿Qué significa este valor de la glucemia en concentración? Compare con los valores de
literatura del ensayo.
R: Dicho valor, significa que hay un alto nivel de glucosa en la sangre, por lo que, si se
hace una comparativa con los valores de referencia en la literatura de ensayo, este duplica y
sobrepasa el máximo establecido de 200 mg%, llegando a tener un valor de 415,7 mg%.

5
Discusión

En nuestro primer experimento, los resultados de los análisis aplicados a nuestras

soluciones de glucosa con diferentes porcentajes fueron usados para poder determinar el
porcentaje de glucosa en nuestra muestra problema, dando como resultado un aproximado
de 0.25% de glucosa, con una reacción visual de color rojo ladrillo. Sin embargo, esto se
contradice con lo estipulado por Pérez & Ramírez (s. f. ) en su manual de procedimientos
para el urianálisis, ya que, como ellos indican para niveles insignificantes de glucosa en la
orina, la solución adquiere una tonalidad de color azul o verde, mientras que, para
cantidades grandes de glucosa, las muestras suelen tomas una coloración amarilla o roja,
por lo que se puede deducir que el porcentaje de glucosa en la muestra problema era del 2%
o más, y este fallo según lo dicho por Pérez & Ramírez (s. f. ), se puede deber a varias
fuentes de error, ya sean, errores en la medición del volumen total, mala limpieza de los
utensilios, mala conservación y recolección de la muestra, etc.

En nuestro segundo experimento, los resultados arrojados al determinar el porcentaje de

glucemia mediante el método de Folín y Wu de nuestra segunda muestra problema nos dio
un valor de 415,7 mg%, lo cual deja en claro que hay un exagerado nivel de glucosa en la
sangre, esto se infiere ya que, según Sáenz et al., (1972) con tener arriba de los 120mg% de
glucosa en sangre se considera hiperglucemia. Y al tener cantidades frecuentemente
elevadas, muy variables e imprevisibles de sustancias reductoras y que no son propiamente
glucosa, pero que se incluyen como tal en el método clásico de Folin y Wu provocan serios
errores analíticos y de interpretación, por lo tanto, dicho método debe abandonarse, y optar
por uno fácil y exacto.

6
Conclusión

Se puede concluir que debido a las complicaciones que hubo en el laboratorio para realizar
el primer experimento los resultados arrojados no fueron los esperados. Con respecto al
segundo experimento se puede concluir que la concentración de glucosa en la sangre es tan
alta que la persona sufre de hiperglicemia. Por otro lado, el poder preparar soluciones y
compararlas con nuestra muestra problema, nos permite identificar fácilmente el % de
glucosa en dicha muestra. Por último, tanto el test de Benedict como el método de Folín y
Wu, se encuentra desactualizados, hoy en día debido a su poca precisión y se encuentran
reemplazados o modificados.

7
Bibliografía

 Valentinetti, E. C., Cebollada, M. G., Velasco, F., Peña, C. G. D. C., & Galiano, P.
M. (2011). Metabolismo de los Hidratos de Carbono. DE LAS MUESTRAS, 273.
 Gil Saavedra, M. P. (2017). Prevalencia de Glucosa Basal Alterada y su Relación
con el nivel de Insulina Basal en Pacientes de 5 a 15 años que asisten a un
Policlínico de Surco de Enero a Junio del 2016.
 Mollinedo Patzi, M. A., & Benavides Calderón, G. L. (2014).
Carbohidratos. Revista de Actualización Clínica Investiga, 41, 2133.
 Ácido fosfomolíbdico - Distribuidor & Proveedor | CAS 51429-74-4 | Todini.com.

(s. f.). Recuperado 18 de septiembre de 2022, de

https://www.todini.com/es/productos-quimicos/molibdeno/acido-fosfomolibdico

 Pérez, B. A. L. P., & Ramírez, B. E. L. (s. f. ). Manual de procedimientos en

urianálisis.
 Saenz, G., Vinocour, E., Valenciano, E., Arroyo, G., & Ametlla, F. (1972).

Mediciones de glucosa verdadera en sangre venosa, sangre capilar y suero, en

adultos sanos costarricenses.