Proyecto FIC “HÁBITAT: TARAPACÁ SE PROYECTA EN INVESTIGACIÓN

DE AMBIENTES EXTREMOS”
Concurso de Innovación, Ciencia y Tecnología en HÁBITAT.

Biogenerador eléctrico usando la

bacteria “Geobacter Sulfurreducens”
como fuente de energía para futuras
colonizaciones a marte.

Estudiantes Kamila Espejo

Fernanda Chamorro
Docente Tutor Miguel Espinace
Establecimiento Liceo Aníbal Pinto Garmendia
educacional
Contenido
Ilustraciones. ......................................................................................................................... 3
Figuras .............................................................................................................................. 3
Tablas ............................................................................................................................... 3
Resumen. ............................................................................................................................. 4
Introducción .......................................................................................................................... 5
Objetivo General. .................................................................................................................. 7
Objetivos Específicos. ........................................................................................................... 7
Hipótesis. .............................................................................................................................. 7
Materiales y métodos. ........................................................................................................... 7
Medio de cultivo base para Geobacter Sulfurreducens. ..................................................... 8
1) Sales. ........................................................................................................................ 8
2) Solución de minerales (10ml/l). .................................................................................. 8
3) Solución de vitaminas. ............................................................................................... 9
3) Fe (III)-citrato a una concentración final de 100μM. ................................................... 9
4) Acetato 20mM como fuente de carbono y donador de electrones. ............................. 9
Segundo Medio: “Medio de cultivo continuo o batch”......................................................... 9
Tercer Medio: Desechos domiciliarios líquidos. ............................................................... 10
Celda de combustible microbiana experimental. .............................................................. 10
Celda de combustible microbiana .................................................................................... 11
Sistema de generación eléctrica. ..................................................................................... 13
Proyección de resultados. ................................................................................................... 13
Conclusiones de investigación. ........................................................................................... 16
Referencias......................................................................................................................... 17
 Ilustraciones.

Figuras
Figura 1: Descripción de una MFC y movimiento de la bacteria. .......................................................................................... 6
Figura 2: Movimiento de electrones generado por la Bacteria.............................................................................................. 6
Figura 3: Descripción de (a) reactor experimental (b) Fieltro de grafito ....................................................................... 11
Figura 4: Izquierda, fotografía del prototipo MFC en posición frontal de donde se distinguen en la parte
inferior las conexiones de entrada a la celda. A la derecha, perfil del prototipo donde se aprecia cada uno de
los casetes y marcos que la constituyen. ....................................................................................................................................... 12
Figura 5: Propuesta del sistema de generación eléctrica....................................................................................................... 13
Figura 6: Resultados de Borjas, 2012 utilizando el medio de cultivo por batch y continuo. .................................... 14
Figura 7Resultados de Borjas, 2012 utilizando el medio de cultivo por desechos domiciliarios. .......................... 15

Tablas
Tabla 1: Composición de sales para el medio de cultivo base. ____________________________________________________ 8
Tabla 2: Composición de minerales para el medio de cultivo base. _______________________________________________ 8
Tabla 3: Composición de vitaminas para el medio de cultivo base. _______________________________________________ 9
Tabla 4: Composición del medio de cultivo continuo o batch. __________________________________________________ 10
Tabla 5: Composición del medio de cultivo a partir de desechos domiciliarios líquidos. ______________________ 10
 Resumen.

Con la intención de apoyar una futura colonización del Planeta Rojo y así mismo satisfacer
parte de las necesidades más importantes del ser humano, se presenta la investigación de
un generador biológico a través de un cultivo de bacterias anaeróbicas tipo ¨Geobacter
Sulfurreducens¨ y gracias a este, obtener energía y posteriormente O2, mediante la
electrólisis de CO2 que está presente en Marte. Se presenta la información para el uso de
dicha bacteria que tiene la capacidad de producir energía eléctrica mediante la oxidación de
compuestos orgánicos y se propone la complementación con un circuito para producir,
transformar y almacenar la energía eléctrica obtenida para su consumo libre o bien,
sustentar el proceso de electrólisis del CO2 a O2. Los materiales y métodos a utilizar en este
sistema son optados según biocompatibilidad y estabilidad química, para obtener así, una
celda microbiana exitosa, junto también con la evaluación del uso de residuos domiciliarios
líquidos como medio de cultivo para la bacteria. En este proceso, trabajamos como equipo
en la investigación, selección, estudio y examinación-composición de la bacteria junto a su
correspondiente circuito.
 Introducción
El término “bacteria” generalmente es asociado a infecciones, enfermedades y
descomposición. Sin embargo, hay microorganismos de la especie Geobacter que el ser
humano ha empleado como aliado en la investigación de múltiples aplicaciones favorables.
El género de bacterias denominado Geobacter de la familia Geobacteraceae de la cual
sobresalen dos especies, el metallireducens y el sulfurreducens, poseen características
sobresalientes que bien administradas, pueden contribuir en múltiples trabajos a la
humanidad.

Con el descubrimiento de bacterias capaces de generar electricidad (microorganismos

eléctricos) dio origen al concepto de bioelectricidad (T. Wang, 2021), un nuevo sistema
conformado en forma de una fuente de potencial en la búsqueda de nuevas alternativas
energéticas.

Las bacterias del género Geobacter tiene la capacidad de transferir electrones a algunas
moléculas como sustancias de alto peso molecular formadas por la degradación química y
biológica de restos de plantas y de animales. Además permite la transferencia de electrones
de forma directa a electrodos de una celda, generando pequeñas corrientes eléctricas.

El principal impulsor de la bioenergía es lo que se conoce como pila microbiana. (Pilas de

combustible microbiológicas, MFC) (Amha, 2019).
El MFC es un reactor bioelectroquímico capaz de convertir energía química en energía
eléctrica mediante reacciones químicas catalizadas por Geobacter en condiciones anóxicas,
en ausencia de oxígeno puro, pero con presencia de sustancias como nitratos o sulfatos como
agentes oxidantes en descomposición orgánica (Borjas, 2012).
 Figura 1: Descripción de una MFC y movimiento de la bacteria (Borjas, 2012).

Un MFC está constituida básicamente por dos cámaras. Una cámara anódica anaerobia y
una catódica aireada. Los microorganismos, localizados en la cámara anódica, metabolizan
sustratos orgánicos transfiriendo extracelularmente los electrones obtenidos a la superficie
del electrodo (GONZÁLEZ, 2012). Estos electrones son transferidos al cátodo a través de una
red eléctrica. Ambas cámaras se encuentran separadas por una membrana de intercambio
catiónico a través de la cual se crea un flujo de protones (del ánodo al cátodo) que,
combinados con los electrones generados y con el oxígeno presente en la parte aerobia,
forman agua.

Figura 2: Movimiento de electrones generado por la Bacteria (Borjas, 2012).

Teniendo en cuenta este fenómeno, las posibles aplicaciones de una MFC se pueden dividir
en dos: la producción de energía eléctrica a partir de energía química y la biorrecuperación
de suelos y aguas.

Objetivo General.

Proponer la implementación de un sistema de generación bioeléctrica utilizando un cultivo de

bacterias Geobacter Sulfurreducens, en donde su energía eléctrica será para libre consumo
y/o apoyar en la producción de oxígeno mediante la electrólisis de CO2 en la atmósfera
marciana.

Objetivos Específicos.
1. Comparar medios de cultivo enfocando el estudio en la producción de electricidad.
2. Seleccionar un medio de cultivo para su posterior escalabilidad de cultivo en el generador
biológico.
3. Diseñar un sistema bioeléctrico para la bacteria.
5. Diseñar un circuito de baterías para almacenar la energía producida.
6. Usar la corriente eléctrica almacenada para consumo cotidiano.
7. Usar la corriente eléctrica para la electrólisis de CO2 disponible en la atmósfera marciana
a O2.

Hipótesis.
El cultivo de bacterias tipo “Geobacter Sulfurreducens” produce energía eléctrica para
implementar un sistema de generación biológica en una posible colonización en marte, y
usando esta energía apoya la producción de O2 aplicando electrólisis al CO2 disponible en el
ambiente del planeta rojo.

Materiales y métodos.
A continuación se desglosan los materiales y la metodología empleados en la etapa de
experimentación del proyecto:
Medio de cultivo base para Geobacter Sulfurreducens.
Con la finalidad de disponer a lo largo de todo el proyecto un stock de microorganismo
preparado para la experimentación, se debe inocular G. sulfurreducens al 10% en un volumen
final de 50 ml en botellas de vidrio pyrex de 100ml. Para lograr una atmósfera anaerobia el
oxígeno se desplazó con una mezcla de N2/CO2 en una proporción 80:20 (Borjas, 2012).
El medio de cultivo utilizado es un medio mínimo FWM (freshwater medium) con la siguiente
composición:

1) Sales.

Tabla 1: Composición de sales para el medio de cultivo base.

Sustancia Concentración

Bicarbonato sódico 2,5g/l

Cloruro de amonio 0,5g/l

Bifosfato sódico dihidratado 0,06g/l

Cloruro potásico 0,1g/l

2) Solución de minerales (10ml/l).

Tabla 2: Composición de minerales para el medio de cultivo base.

Sustancia Concentración

MgSO4-7H2O 3,0g

MnSO4-H2O 0,5g

NaCl 1,0g

FeSO4-7H2O 0,1g

CaCl2-2H2O 0,1g

CoCl2-6H2O 0,1g

ZnCl 0,13g

CuSO4-5H2O 0,01g

AlK(SO4)2-12H2O 0,01g

H3BO3 0,01g

Na2MoO4 0,025g
 NiCl2-6H2O 0,024g

Na2Wo4-2H2O 0,025g

3) Solución de vitaminas.

Tabla 3: Composición de vitaminas para el medio de cultivo base.

Sustancia Concentración mg/l

Biotina 2 mg

Ácido fólico 2 mg

Piridoxina-H2O 10 mg

Riboflavina 5 mg

Tiamina 5 mg

Ácido nicotínico 5 mg

Ácido pantoténico 5 mg

Cianocobalamina 0,1 mg

Ác. p-aminobenzoico 5mg

Ácido tióctico 5mg

3) Fe (III)-citrato a una concentración final de 100μM.

4) Acetato 20mM como fuente de carbono y donador de electrones.

Se utilizó a una concentración de 40mM como aceptor de electrones (T. Wang, 2021). El pH
se ajusta a 6,8-7,0. Los medios de cultivo anaerobios se autoclavan mediante un ciclo de 15
minutos a una temperatura de 121°C y una presión de 1 atm en autoclave (Borjas, 2012).

Segundo Medio: “Medio de cultivo continuo o batch”.

Para la multiplicación de la bacteria a través de un medio continuo o batch se propone el uso
de un medio de cultivo en base a Acetato, que es la sustancia principal en base a Carbono
para el crecimiento de la bacteria.
 Tabla 4: Composición del medio de cultivo continuo o batch (Amha, 2019) (Borjas, 2012).

Sustancia Concentración

Base a Acetato 20mM.

Bicarbonato sódico 2,5g/l

Cloruro de amonio 0,5g/l

Bifosfato sódico dihidratado 0,06g/l

Cloruro potásico 0,1g/l

Tercer Medio: Desechos domiciliarios líquidos.

Para el uso de medios disponibles en un ambiente extremo, se propone el uso del medio a
base de desechos domiciliarios líquidos propuesto por Borjas 2012, la cual se debe cumplir
con las siguientes condiciones:

Tabla 5: Composición del medio de cultivo a partir de desechos domiciliarios líquidos (Borjas, 2012).

pH Conductividad DBO ppm DQO N-NO3 O2 Acetato

(mS/cm) ppm

7 1,5 280 458 0,5 2 1 mM

El residuo se debe someter a filtración a vacío con un matraz kitasato y se burbujear con gas
para desplazar el oxígeno que pudiera disolverse durante su transporte y filtración.

Para los medios de cultivo se proponen las siguientes variables de trabajo óptimas de
crecimiento, se encontró que el crecimiento óptimo de esta especie se produce cuando el pH
se encuentra en el rango de 6,2-7,4 y la temperatura en el rango de 16°C-30°C (T. Wang,
2021).

Celda de combustible microbiana experimental.

La bacteria Geobacter Sulfurreducens es capaz de transformar internamente energía química

en energía eléctrica, transfiriendo los electrones derivados de la oxidación de compuestos
orgánicos (acetato) a electrodos, esta característica se puede aprovechar de manera
experimental según (T. Wang, 2021) a través de una celda de combustible microbiana con las
siguientes características:
Botellas de vidrio para la creación de dos cámaras de intercambio de electrones (anódica y
catódica), electrodos de fieltro de grafito, una membrana de intercambio de protones y un
circuito externo con una resistencia de 1000 ῼ.

Figura 3: Descripción de (a) reactor experimental (b) Fieltro de grafito

Celda de combustible microbiana

Para la escalabilidad del proyecto segun Borjas, 2012 se propone el uso de una celda de
combustible comercial, que según sus estudios, utilizó una celda fabricada por la empresa
danesa de celdas combustible ElectroCELL (figura 4), mencionar que el principio de
funcionamiento es el mismo que en una pila convencional por lo cual el dispositivo debe
cumplir con las condiciones siguientes.
 Figura 4: Izquierda, fotografía del prototipo MFC en posición frontal de donde se distinguen en la parte inferior
las conexiones de entrada a la celda. A la derecha, perfil del prototipo donde se aprecia cada uno de los casetes
y marcos que la constituyen.

● Estructura compacta formada por casetes de PVC.

● Marcos de neopreno que ayudan a su sellado.
● La celda se cierra con tornillos dispuestos a lo largo de todo el diámetro de la estructura
y se ajustan con llave dinamométrica a una determinada presión con el fin de evitar
pérdida del sistema.
● Se debe lograr la misma estructura que la Celda de combustible microbiana
experimental, una de dos cámaras (anódica y catódica).
● Conexiones de entrada y salida de la celda con un mix de gas para la eliminación de
oxígeno.

En el ánodo se utilizará un lecho de 17mm de partículas de grafito.

El ánodo se debe separar del cátodo por una membrana de intercambio catiónico, en este
caso uno comercial, Nafion 324, en la cámara catódica, se debe colocar un área adecuada de
fieltro de carbono y como catolito se debe utilizar una solución de sulfato de sodio 0,5M.
En el ánodo del sistema se propone que se polarice con un potenciostato (VoltaLab) a 0,0mV
respecto al electrodo de referencia de Ag/AgCl.

Para la inoculación en la celda, se puede realizar a través de los diferentes medios propuestos
anteriormente, pero teniendo en cuenta que las condiciones de desarrollo de la bacteria se
deben mantener las variables de esterilidad de la forma más rigurosa posible antes y después
de la inoculación. Esto es agregando el medio junto con la bacteria a la celda, y esterilizando
las conexiones con etanol diluido al 70% para luego gasear el sistema para la evaporación
del mismo.
Sistema de generación eléctrica.
Para el sistema de obtención de electricidad se propone el esquema de la Figura 5, en donde
estará constituido por las siguientes partes:

Generador de MFC: Celda de combustión microbiana.

Regulador de Carga: Un regulador de carga para la protección del sistema de sobrecargas y
neutralización de voltajes generada por la MFC.
Inversor de Corriente: Dispositivo electrónico que convierte corriente continua en corriente
alterna para el consumo domiciliario.
Baterías de recarga: Son dispositivos que almacenan energía eléctrica en forma química y la
liberan después como corriente continua de forma controlada.3
Equipo de electrólisis: Es equipo que realizará el proceso de separar los elementos de un
compuesto, en este caso el CO2 a O2, por medio de la electricidad.

Figura 5: Propuesta del sistema de generación eléctrica.

Proyección de resultados.
Se proyecta obtener los mismos resultados que los obtenidos por Borjas 2012 tanto para el
medio de Medio de cultivo continuo o batch (medio de cultivo validado por Borjas 2012 y Ren
2021) y los Deshechos domiciliarios líquidos para la obtención de energía eléctrica.

Proyección de resultados con 500 ml Medio de cultivo continuo y batch:

Se inoculó la MFC con un cultivo discontinuo de G.sulfurreducens mediante la circulación del
mismo y siguiendo la metodología descrita en el apartado de Materiales y Métodos.
El resultado obtenido por Borjas 2012 fue el siguiente:
 Figura 6: Resultados de Borjas, 2012 utilizando el medio de cultivo por batch y continuo.

El máximo de corriente obtenido con estas condiciones fue de 190mA tras 19 días. Los dos
primeros días corresponden a las condiciones estanco del sistema, la operación en continuo
del sistema (recirculación de medio fresco) dio lugar a un aumento progresivo de la corriente
especialmente a partir del sexto, cuando la corriente aumentó exponencialmente.
Los saltos de corriente que se observan en los días 6, 11 y 16 se corresponden con la
sustitución del medio recirculado por medio fresco autoclavado.

Proyección de resultados con agua residual:

Previamente a su introducción en la celda ECELL, el agua se sometió a la limpieza presentada

anteriormente en los materiales y métodos. Como se pudo observar en la tabla de
características del agua residual, la concentración de acetato
presente en el agua es 20 veces menor que lo utilizado en los ensayos con medio mínimo,
con la finalidad de poder obtener una corriente medible y comparar resultados de los distintos
ensayos, el agua residual debe ser suplida con acetato hasta una concentración final de
20mM.

Los resultados obtenidos fueron los siguientes:

Figura 7: Resultados de Borjas, 2012 utilizando el medio de cultivo por desechos domiciliarios.
 Conclusiones de investigación.
La bacteria tiene características que se pueden controlar fácilmente en celdas de combustible
microbiana como la presentada en la sección de materiales y métodos, para lo cual se puede
optimizar su crecimiento, desarrollo y producción de electricidad.

Aunque se debe resaltar que el desarrollo de esta tecnología está en sus inicios por lo que la
implementación de un sistema de generación eléctrica y la proyección de resultados debe de
ser estudiada y optimizada para ofrecer resultados competitivos.

El fin de esta investigación fue demostrar que el uso beneficioso microorganismos con fines
energéticos debería convertirse en un desafío científico que muestre el compromiso de la
ciencia en general, de la ingeniería y de la microbiología por implementar tecnologías que no
afecten el medio ambiente, y logre ser una tecnología que pueda ser utilizada para futuras
colonizaciones espaciales sin afectar el medio con el uso de fuentes no renovables.

La propuesta entregada entra en la categoría de tecnología innovadora y beneficiosa para el

medio ambiente espacial, ya que el control de desechos es a nivel del desarrollo bacteriano,
esto quiere decir que no existe contaminación fósil por el uso de este instrumento.
Referencias
Amha, Y. C. (2019). Two-phase improves performance of anaerobic membrane bioreactor
treatment of food waste at high organic load-ing rates. . Environ. Sci. Technol, 9572–
9583.
Borjas, Z. (2012). BIODREGADACIÓN ELECTROGÉNICA DE ACETATOEN PILAS DE
COMBUSTIBLE MICROBIANAS.
GONZÁLEZ, A. A. (2012). bacterias, fuente de energía para el futuro. Tecnura, Vol. 16
No.32.
T. Wang, G. Z. (2021). Novel insights into the anaerobic digestion of propionate via
Syntrophobacter fumaroxidans and Geobacter sulfurreducens: Process and
mechanism. Water Research, Volume 200, Article 117270.