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Parasitología Veterinaria 158 (2008) 57–66

www.elsevier.com/locate/vetpar

Cisticercosis porcina por Taenia solium: viabilidad de los cisticercos y

persistencia de anticuerpos y antígenos cisticercos después
tratamiento con oxfendazol
d
CS Sikasunge a , MV Johansen b, *, AL Willingham IIIc , p.d. leifsson , ik firi a

a
Escuela de Medicina Veterinaria, Universidad de Zambia, PO Box 32379, Lusaka, Zambia DBL, Centro de
b
Investigación y Desarrollo en Salud, Departamento de Patobiología Veterinaria, Facultad de Ciencias de la Vida,
Universidad de Copenhague, Thorvaldsensvej 57, DK-1870 Frederiksberg C, Dinamarca Centro Colaborador
C
OMS/FAO para Zoonosis Parasitarias, Facultad de Ciencias de la Vida, Universidad de Copenhague,
Dyrlægevej 100, 1870 Frederiksberg C, Dinamarca Departamento
d
de Patobiología Veterinaria, Facultad de Ciencias de la Vida, Universidad de Copenhague, Ridebanevej 3,
1870 Frederiksberg C, Dinamarca

Recibido el 30 de junio de 2008; recibido en forma revisada el 11 de agosto de 2008; aceptado el 18 de agosto de 2008

Resumen

El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto del tratamiento de cerdos infectados con Taenia solium con oxfendazol (OFZ) sobre la viabilidad
y eliminación de cisticercos y la correspondiente persistencia de isotipos de anticuerpos específicos (IgGtotal, IgG1, IgG2 e IgA) y
antígeno cisticerco circulante (CCA). Los isotipos de anticuerpos y las respuestas de CCA se midieron mediante ELISA de anticuerpos (Ab-ELISA) y
antígeno ELISA (Ag-ELISA), respectivamente. Se realizaron correlaciones entre anticuerpos, CCA y el número total de cisticercos
enumerados en la necropsia. Cuarenta cerdos con cisticercosis fueron distribuidos aleatoriamente en dos grupos: el grupo de tratamiento (n = 20) fue
tratados con OFZ a 30 mg/kg por vía oral mientras que el grupo de control de tratamiento (n = 20) no recibió tratamiento. Cinco cerdos no infectados sirvieron como
controles negativos. Los cerdos se sacrificaron a las 1, 4, 8 y 26 semanas después del tratamiento (wkpt). En general, el recuento total medio de quistes en los cerdos tratados
fue 2904 5397 (DE media) mientras que en los controles fue 6235 6705. La viabilidad media del quiste fue 5 11% (DE media) y
97 4% en cerdos tratados y control, respectivamente. Los resultados mostraron que OFZ eliminó los cisticercos musculares durante un período de 4 semanas, pero
no logró matar los cisticercos cerebrales. Los anticuerpos, las respuestas de CCA y la eliminación de quistes muertos de la carne dependían del quiste
intensidad de los cerdos individuales en el momento del tratamiento, ya que tanto el anticuerpo como el CCA se correlacionaron con la intensidad de los cisticercos en la necropsia
(r = 0,441, P = 0,005; r = 0,654, P < 0,001), respectivamente. Las respuestas de IgG1 fueron el mejor indicador de la eficacia del tratamiento porque
fueron predominantes tanto en los cerdos infectados tratados como en los de control y desaparecieron poco tiempo después del tratamiento. Ambos Ab/Ag-ELISA fallaron en
detectar quistes en el cerebro. Aunque los cisticercos muertos tardaron algún tiempo (26 semanas) en eliminarse de la carne, el tratamiento de la cisticercosis porcina
con OFZ debe considerarse, en combinación con otras medidas de intervención, como una medida importante y rentable en el
control de la teniosis/cisticercosis.
# 2008 Elsevier BV Todos los derechos reservados.

Palabras clave: Taenia solium; viabilidad del quiste; Oxfendazol; Anticuerpo; Antígeno; tratamiento porcino

1. Introducción

La teniosis humana y la cisticercosis son importantes

* Autor correspondiente. Tel.: +45 35 33 14 38; fax: +45 35 33 14 33. desafíos para el desarrollo socioeconómico, público
Dirección de correo electrónico: mvj@life.ku.dk (MV Johansen). la salud y la seguridad alimentaria y, por lo tanto, continúan

0304-4017/$ – consulte el asunto anterior n.° 2008 Elsevier BV Todos los derechos reservados.
doi:10.1016/j.vetpar.2008.08.014
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amenazas a la producción animal a nivel mundial (Hoberg, 2002). El
ciclo de vida de este cestodo incluye a los humanos como
hospedadores definitivos, albergando la tenia adulta en los intestinos
y los cerdos como hospedadores intermedios, albergando las
vesículas larvales o cisticercos en los músculos, el cerebro y otras
partes del cuerpo. Los seres humanos también pueden actuar como
huéspedes intermedios y desarrollar la forma quística cuando
ingieren accidentalmente huevos de Taenia solium en materiales
contaminados con heces o por autoinfección y, por lo tanto,
adquieren cisticercosis (Garcia et al., 2003). Cuando los cisticercos
se alojan en el cerebro, la condición se llama neurocisticercosis. La
neurocisticercosis humana contribuye de manera importante a las
anormalidades neurológicas en las áreas endémicas de la
enfermedad (Garcia-Garcia et al., 1999). La transmisión de la
enfermedad puede ser interrumpida por el aumento de las medidas
higiénicas como ocurrió en Europa (Garcia Garcia et al., 1999) que,
sin embargo, son difíciles de implementar en los países en desarrollo.
Por lo tanto, se están desarrollando medidas alternativas para la
reducción de la transmisión, como educación sanitaria, quimioterapia
masiva en humanos y cerdos y vacunación de cerdos (Flisser et al.,
2003; García et al., 2007).
El oxfendazol (5[6]-fenilsulfinil-2-benzi midazolcarbamato de
metilo) (OFZ), un miembro del grupo de antihelmínticos
benzimidazol, tiene una actividad de amplio espectro contra los
estadios larvales inhibidos de lombrices intestinales, tenias y
lombrices pulmonares en muchos animales. ( Marriner y Bogan,
1981). Se ha demostrado que elimina todos los cisticercos viables
de T. solium en cerdos infectados (Gonzalez et al., 1997, 1998).
La respuesta del huésped y las interacciones huésped-parásito
después del tratamiento de la cisticercosis solo se han dilucidado
brevemente. Con el fin de proporcionar recomendaciones seguras
para el control y la prevención de la cisticercosis porcina, está muy
justificado el conocimiento detallado de la viabilidad y longevidad de
los cisticercos después del tratamiento y la correspondiente
persistencia de las respuestas de anticuerpos y antígenos.
Comprender el progreso de la infección en la cisticercosis porcina
proporcionará información sobre el progreso de la infección en la
cisticercosis humana, donde el único indicador disponible para el
éxito terapéutico son las técnicas de neuroimagen que no están
disponibles en muchas partes del mundo donde la enfermedad es
endémica (Handali et al., 2004).
Por lo tanto, los objetivos de este estudio fueron investigar la
viabilidad y longevidad de los cisticercos y la correspondiente
persistencia de respuestas de isotipo de anticuerpos específicos y
antígeno cisticerco circulante (CCA) en cerdos con cisticercosis
después del tratamiento con OFZ.
2. Materiales y métodos
2.1. Diseño de estudios experimentales
Se compraron un total de 40 cerdos naturalmente infectados con
T. solium en el mercado de ganado de Lusaka.
Los cerdos que resultaron positivos para la cisticercosis por T.
solium en el examen de la lengua cumplieron con los criterios de
selección para el estudio. Los cerdos seleccionados fueron
transportados y alojados en los alojamientos de animales de la
Escuela de Medicina Veterinaria y fueron alimentados con alimento
seco para cerdas comprado a una empresa de molienda local. El
Comité de Ética de Zambia concedió permiso para realizar un estudio de este tip
Se utilizó un método aleatorio simple para asignar los 40 cerdos
infectados (22 machos y 18 hembras) en dos grupos: El grupo de
tratamiento (n = 20) se trató con una dosis oral de 30 mg/kg de OFZ
(Interzol, lote n.º 6104621, Alvetra Werfft AG, Wienna, Austria) (una
formulación de alimento) mientras que el grupo de control de
tratamiento (n = 20) no recibió tratamiento.
El grupo de tratamiento comprendía 9 machos y 11 hembras,
mientras que el grupo de control tenía 12 machos y 8 hembras. Los
cerdos que fueron seleccionados para el tratamiento recibieron
pequeñas porciones de alimento medicado OFZ de acuerdo con su
peso, después de lo cual fueron alimentados normalmente. Una
semana después del tratamiento (sem), un subgrupo (n = 5) de los
Grupos 1 y 2 se eliminó usando Euthasol1 al 20 % administrado por
vía intravenosa (200 mg/ml) (Produlab Pharma, Raams donksveer,
Países Bajos) para lograr el efecto y se sangró inmediatamente. .
Se realizaron matanzas posteriores a las 4, 8 y 26 semanas para
evaluar la viabilidad del quiste y la respuesta del huésped a la infección.
2.2. Recogida de sangre
Se recogió sangre de los cerdos quincenalmente hasta las 26
semanas y en cada momento del sacrificio. Se obtuvieron muestras
de sangre de la vena cava craneal utilizando jeringas de 20 ml y
agujas de calibre 18 en tubos de recogida de sangre simples y se
dejaron coagular. La sangre coagulada se incubó a 37 8C durante 1
h y el suero se separó por centrifugación a 3000 g durante 15 min,
se dispensó en alícuotas de 2 ml y se almacenó en viales etiquetados
y se mantuvo a 20 8C hasta su uso.
2.3. Disección de canales y recuento de quistes
En la necropsia, se extrajeron el corazón, el cerebro, la lengua y
el músculo esquelético (masetero externo, isquiotibiales, psoas y
tríceps) de la mitad (lado derecho) de la canal. Cada uno de estos
tejidos se diseccionó para estimar el número de quistes y la viabilidad
de los quistes por órgano/tejido. El recuento total de quistes se
calculó como la suma total de los quistes enumerados de todos los
órganos y músculos
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investigado en la mitad de la canal. El corte se hizo de tal manera
que todos los quistes completamente desarrollados pudieran ser
revelados y enumerados (es decir, cada corte tenía menos de 0,5
cm de grosor) (Phiri et al., 2006).
2.4. Evaluación de la viabilidad del quiste
La recolección de quistes de órganos seleccionados se realizó
mediante un método descrito por González et al. (1998) con ligeras
modificaciones. Brevemente, se extirparon hasta 50 cisticercos o
cualquier número dependiendo de la intensidad del quiste de la
canal, de cada uno de los órganos o tejidos (corazón, cerebro, lengua
y músculos esqueléticos). Después de la eliminación, los quistes se
lavaron en solución salina tamponada con fosfato estéril (PBS).
Luego, los quistes lavados se incubaron en una solución que contenía
bilis bovina y solución salina normal (1:1) a 37 °C durante 1 a 2 h o
hasta la evaginación completa. Los cisticercos se consideraron
viables si presentaban tres de seis de los siguientes: (1) movimientos
ondulatorios del quiste, (2) una pared intacta (blanco-amarillenta), (3)
una membrana semitransparente, (4) movimientos del cuello y el
escólex (ventosas y ganchos) dentro de la vesícula, (5) líquido
transparente del quiste o (6) evaginación completa o incompleta del
escólex. Se consideraron no viables (calcificados) si presentaban
dos de cuatro de los siguientes: (1) pared dañada, (2) ausencia de
líquido del quiste, (3) ausencia de movimientos de cuello y escólex o
(4) incapacidad del escólex para evaginar (Rodríguez-Canul et al.,
2002).
2.5. ELISA de anticuerpos IgGtotal e IgA específicos de
suero
Se usó antígeno de líquido de quiste de T. solium (TsCF) crudo
para sensibilizar microplacas ELISA-Nunc MaxiSorp como se
describió previamente por Pouedet et al. (2002) con una ligera
modificación. En resumen, se usaron para el recubrimiento 100 ml
de TsCF que contenían 34 mg de proteína/ml en tampón de carbonato
(0,06 M, pH 9,6). Se añadieron como anticuerpos detectores 100 ml
de IgGtotal e IgA anti-porcino conjugados con peroxidasa (CAPPEL,
MP Biomedicals, OHIO, EE. UU.) diluidos a 1:80.000 y 1:20.000 en
PBS-T20/1% NBCS, respectivamente. Para visualizar los complejos
antígeno-anticuerpo, se utilizó ortofenilendiamina (OPD) (DAKO,
DINAMARCA). Las densidades ópticas delta (DOD) se calcularon de
acuerdo con la fórmula:
DOD ¼ DOx DOneg;
donde ODx es el valor promedio de OD individual del suero de
prueba duplicado, y ODneg es la media OD + SD
59
de ocho muestras negativas conocidas (Gabriel et al., 2004).
Las muestras de suero negativas se obtuvieron de estudios previos
realizados por Phiri et al. (2006).
2.6. Anticuerpos IgG1 e IgG2 específicos de suero-ELISA
Los isotipos de anticuerpos específicos contra la cisticercosis
por T. solium se determinaron como se describe anteriormente,
excepto que después de la incubación con las muestras de prueba
(1:200 para IgG1; 1:100 para IgG2), las placas se incubaron con
anticuerpos monoclonales contra IgG1 porcina (MCA 635 ) o IgG2
(MCA 636) (Serotec, Oxford, Reino Unido) diluidos a 1:500 y 1:100,
respectivamente, en PBS-T20/1% NBCS.
A continuación, las placas se incubaron con IgG anti-ratón de cabra
conjugada con HRP (Southern Biotech, Birmingham, AL, EE. UU.)
diluida a 1:8000 y 1:4000 para IgG1 e IgG2 porcina, respectivamente.
2.7. Detección serológica de CCA de cisticercos de T.
solium (Ag-ELISA)
El Ag-ELISA se realizó como se describió previamente por
Sikasunge et al. (2007). Brevemente, dos anticuerpos monoclonales
(MoAb) utilizados en el ELISA fueron B158C11A10 diluidos a 11,8
mg/ml en tampón de carbonato (0,06 M, pH 9,6) para el recubrimiento
y un MoAb B60H8A4 biotinilado diluido a 3,2 mg/ml en solución
salina tamponada con fosfato-Tween 20 (PBS-T20) + 1% de suero
de ternero recién nacido (NBCS) como anticuerpo detector. Se
añadió estreptavidina peroxidasa de rábano picante (Jackson
Immunoresearch Lab, Inc.) diluida a 1/10.000 en PBS-T20/1% NBCS
para actuar como conjugado. Se leyeron las placas y se calcularon
las densidades ópticas delta como se describe anteriormente.
2.8. análisis estadístico
Las intensidades de los parásitos, las respuestas de isotipos de
anticuerpos específicos y los niveles de CCA para los cerdos
infectados tratados y los cerdos de control infectados en cada
matanza y punto de muestreo de suero se compararon mediante la
prueba t de Student y solo cuando la variable dependiente no podía
seguir una distribución normal, realizamos la prueba no aleatoria.
Prueba paramétrica de Mann-Whitney. Las diferencias entre grupos
en anticuerpos de isotipo específico y respuestas de CCA en suero
se investigaron mediante ANOVA usando análisis de medidas
repetidas y la prueba post hoc de Scheffe. Se realizaron correlaciones
para establecer si existía una relación entre el anticuerpo y el CCA y
el recuento total de quistes en la necropsia. Los valores de P < 0,05
se consideraron estadísticamente significativos. Para el análisis se
utilizó STATA para Windows versión 10 (Statacorp, TEXAS, USA) y
el
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tabla 1
Intensidad media de los quistes en órganos y músculos seleccionados en cerdos tratados y de control en varios puntos de sacrificio

Grupo de trabajo Quiste total Intensidad media (DE) de quistes por órgano

Cerebro Lengua Corazón masetero tríceps Psoas isquiotibiales

1 Tratado 6654 9787 17 18 547 703 1628 1627 279 386 1136 1927 14 21 920 483 760 2564 4467
Controles 7376 11564 1685 1283 2028 293 403 1735 2767 675 768 2455 3980

4 tratado 1377 1291 41 48 247 295 257 305 72 49 176 123 128 129 455 393
Controles 3032 2259 55 59 223 204 572 344 152 81 709 666 280 194 1040 983

8 Tratado 2950 2324 26 27 332 361 800 655 204 168 546 345 315 260 726 642
Controles 6304 5833 65 23 741 950 1182 759 270 235 1190 1363 1008 972 1849 1734

26 tratado 329 652 47 29 55 96 213 59 127 276 39 67 28 39

Controles 8230 4611 128 95 380 302 1978 1968 450 236 1716 1373 1012 731 2566 1143

hoja de cálculo Microsoft Excel 2003 (Microsoft Corp.)
fueron usados.
3. Resultados
3.1. Disección y viabilidad del quiste
Los 40 cerdos que dieron positivo en la lengua
se encontró que tenían cisticercos de T. solium en
necropsia. El peso medio de los cerdos al sacrificio fue
(media SD) 59 13 kg y 49 16 kg para tratados
y grupos de control, respectivamente. En general, 82,5% (33/40)
de los cerdos tenía cisticercosis cerebral y la media total
el recuento de quistes en los cerdos tratados fue (media SD) 2904
5397 mientras que en los controles fue 6235 6705 (Tabla 1).
Recuento medio total de quistes de los cerdos tratados sacrificados a los 26
macroscópicamente parecían viables y habían reducido la capacidad de
invasión (Fig. 1). Las paredes del quiste estaban opacas con
poco o nada de líquido. Quistes cardíacos en estos cerdos tratados
parecía haber sido más afectado que los quistes en otros
músculos medidos por viabilidad. La aparición de la
carne 1 wkpt era muy desagradable, como quistes en el
los cadáveres aparecían en forma de huso que se asemejaban a pequeños
abscesos Dos de los tratados y uno de los no tratados.
los cerdos no tenían cisticercos en el cerebro. Quistes cerebrales en el
los cerdos tratados no parecían haber sido afectados por el
droga. Todavía estaban intactos con líquido de quiste claro y
escólices claramente visibles. En los cerdos no tratados, los cisticercos
eran viables y la viabilidad del quiste en todos los órganos seleccionados
y los músculos era casi el 100%. Los quistes tenían quiste claro
líquido contenido en las membranas de los quistes transparentes con visible
escólices

wkpt fueron significativamente más bajos que los controles
(P < 0,001) (Cuadro 1). En general, la viabilidad media del quiste
fue (media SD) 5 11% y 97 4% en tratados y
cerdos control, respectivamente (Cuadro 2).
Los cerdos tratados que fueron sacrificados en 1 wkpt tenían ambos
cisticercos vivos y muertos. Los cisticercos mostraron marcados
degeneración y la proporción de las que
A las 4 semanas, los cinco cerdos tratados tenían todos los quistes en
los músculos, el corazón y la lengua se calcificaron. sin embargo, el
el grado de calcificación de los cisticercos varió mucho
entre los cerdos tratados. La carne de los cerdos tratados fue
en un estado no apto para el consumo humano porque
los quistes calcificados eran claramente visibles y eran similares
a los observados en 1 wkpt. En los cerdos no tratados,

Tabla 2
Viabilidad media de los quistes en órganos y músculos seleccionados en cerdos tratados y de control en varios puntos de sacrificio

Grupo de trabajo Viabilidad total media Viabilidad media (DE) del quiste por órgano
Cerebro Lengua Corazón masetero tríceps Psoas isquiotibiales

1 tratado 18 17 45 41 13 0.0 28 37 10 22 32 39 35 29
Control S 92 5 55 36 89 14 91 12 90 12 97 5 91 10 95 7

4 tratado 92 10 0
Control S 0 99 1 85 7 0 100 1 0 98 3 0 100 1 0 99 1 0 98 4 100 0

8 tratado 73 41 0
Control S 0 99 1 91 10 0 99 2 0 96 5 0 100 0 0 98 4 0 100 0.0 99 1

26 tratado 0 36 49 0 0 0 0 0 0
Control S 99 1 91 8 99 1 99 1 98 3 97 5 99 2 100 1
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Fig. 1. (A) Quiste que muestra una viabilidad del 99% de los controles infectados. Los cisticercos recolectados de los músculos se incubaron durante 1 a 2 horas a 37 °C en
una solución que contenía bilis bovina y solución salina normal mezclada en una proporción de 1:1; (B) quistes que muestran un 0 % de viabilidad de un cerdo tratado
sacrificado en 1 wkpt; (C) cisticercos viables de músculos isquiotibiales de un cerdo de control infectado sacrificado a las 8 semanas; (D) músculos isquiotibiales de un cerdo
tratado infectado sacrificado a las 8 semanas. No se observó viabilidad de los cisticercos recogidos de varios músculos en estos cerdos tratados. La carne todavía tenía
muchos quistes calcificados y no estaba en un estado atractivo para recomendarla para el consumo humano. (E) Los músculos isquiotibiales de un cerdo de control infectado
(26 semanas) mostraron cisticercos viables como se observó en el sacrificio. (F) Músculos isquiotibiales de un cerdo tratado infectado sacrificado a las 26 semanas. La carne
estaba limpia, sin quistes residuales visibles y, por lo tanto, era estéticamente apta para el consumo humano.

los cisticercos eran viables y la viabilidad de los quistes en todos
los órganos y músculos seleccionados era casi del 100% (Tabla
2). Tanto los cerdos tratados como los no tratados tenían quistes
viables en el cerebro con la excepción de un cerdo no tratado
que no tenía quistes cerebrales.
A las 8 semanas, todos los quistes en los músculos, el
corazón y la lengua de los cerdos tratados estaban calcificados.
Las canales presentaban quistes calcificados visibles y la carne
aún no presentaba un aspecto estético como para merecer
recomendación para consumo humano (Fig. 1D).
Los quistes cerebrales no se vieron afectados en cuatro de los pacientes tratados.
cerdos ya que uno de ellos no tenía quistes cerebrales. En solo
un cerdo tratado observamos que los cisticercos en la superficie
del cerebro, en las circunvoluciones y los surcos tenían signos
de degeneración y, sin embargo, los cisticercos dentro del
parénquima cerebral y los ventrículos eran viables (Fig. 2 , panel
B).
A las 26 semanas, cuatro de cada cinco cerdos tratados
tenían canales con apariencia normal y, por lo tanto, la carne era
apta para el consumo humano (Fig. 1F). El quinto cerdo tratado
tenía quistes calcificados visibles en los músculos, la lengua y el
corazón además de los quistes cerebrales viables.
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Fig. 2. Panel A: quistes cerebrales de un cerdo de control sacrificado 8 wkpt que muestran quistes viables en la superficie del cerebro y en el parénquima. Panel
B: Quistes cerebrales de un cerdo tratado sacrificado 8 wkpt mostrando quistes degenerados en la superficie del cerebro y quistes ventriculares viables.

3.2. Respuestas de isotipos de anticuerpos específicos después del entre los dos grupos (P > 0.05) en cualquier punto de muestreo.
tratamiento con OFZ

Las respuestas de isotipos de anticuerpos específicos en suero
después del tratamiento de cerdos infectados con cisticercosis por T.
solium con OFZ se presentan en la Fig. 3A–D. En general, las respuestas
de anticuerpos específicos de isotipo en suero entre los dos grupos
fueron estadísticamente significativas (P < 0,001). Sin embargo, todos los
cerdos tratados tenían las respuestas de isotipo de anticuerpos específicos
más altas a las 2 semanas. Cuando todas las respuestas de isotipos
específicos se analizaron mediante comparación por pares (Scheffe), las
respuestas de IgGtotal e IgG1 en los dos grupos fueron estadísticamente
significativas a partir de las 6 semanas (P = 0,029 y P = 0,005,
respectivamente), mientras que una diferencia significativa en Se
observaron respuestas específicas de IgG2 atribuibles al tratamiento
desde las 20 semanas en adelante (P = 0,025). Los resultados mostraron
que después de 14 semanas, las respuestas específicas de IgG1 no eran
detectables en el suero de los cerdos tratados. Las respuestas específicas
de IgG2 en los cerdos tratados disminuyeron gradualmente y
permanecieron sustancialmente más bajas durante todo el período de
seguimiento.
No hubo diferencia estadística en las respuestas de IgA
3.3. Niveles de CCA después del tratamiento con OFZ
Aunque el gráfico mostró una marcada disminución en los niveles de
CCA en el grupo tratado en comparación con el grupo no tratado, solo
fue estadísticamente significativo a partir de las 8 semanas (P = 0,003)
(Fig. 3E). El gráfico también mostró que después del tratamiento, los
niveles de CCA disminuyeron gradualmente durante 10 semanas. Los
cerdos tratados dieron positivo en la prueba Ag ELISA hasta las 18
semanas. El CCA alcanzó niveles indetectables 20 semanas.
3.4. Correlación de las respuestas de anticuerpos y los niveles de
CCA con el recuento total de quistes
Para establecer si las respuestas de anticuerpos y los niveles de CCA
se correlacionaban con el número total de quistes contados en la
necropsia, se usaron muestras de suero a las 1, 4, 8 y 26 semanas. La
transformación logarítmica se realizó sobre el número total de quistes
contados en la necropsia para que los datos pudieran seguir una
distribución normal. para lo especifico
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Fig. 3. Respuestas medias a isotipos de anticuerpos específicos en sueros de
cerdos tratados con OFZ (n = 5) e infectados no tratados (n = 5) infectados
naturalmente con cisticercosis por T. solium. Se recogieron sueros de cerdos
quincenalmente hasta las 26 semanas y en el momento del sacrificio. Las
respuestas de isotipos de anticuerpos específicos y los niveles de CCA se
expresaron como DOD calculado según Gabriel et al. (2004). La línea punteada
indica el valor de corte con un IC del 95 % (media + SD de ocho muestras
negativas conocidas) (barras de error = SD).
isotipos de anticuerpos, solo se usaron los datos de IgG total.
Los resultados mostraron que cuanto mayor era la intensidad del
quiste, mayores eran las respuestas de anticuerpos y los niveles
de CCA (Fig. 4). Las correlaciones entre anticuerpos
63
Fig. 4. Las correlaciones entre las respuestas de anticuerpos (IgGtotal) y los
niveles de CCA con el logaritmo del número total de quistes contados en el
sacrificio de los órganos seleccionados en la mitad de la canal en infectados
tratados (n = 20) y control infectado ( n = 20) cerdos. (A)
Correlación entre el anticuerpo y el registro del recuento total de quistes. (B)
correlación entre CCA y registro del recuento total de quistes. En el análisis de
correlación se usaron sueros muestreados a las 1, 4, 8 y 26 semanas. Las
respuestas de anticuerpos y los niveles de CCA se expresaron como DOD
calculado según Gabriel et al. (2004).
las respuestas y la intensidad del quiste en el momento de la
necropsia fue r = 0,441, P = 0,005, mientras que la de CCA y la
intensidad del quiste fue r = 0,654, P < 0,001.
4. Discusión
Los resultados del presente estudio mostraron que después
del tratamiento con 30 mg/kg de OFZ, los quistes mueren en 4
semanas, excepto los que se encuentran en el cerebro. En 1
semana, más del 50 % de los quistes musculares estaban
muertos, lo que indica un efecto muy rápido de OFZ. Los quistes
en el corazón parecían haber sido más afectados en 1 semana
en comparación con otros quistes musculares. Esto podría
sugerir que la disponibilidad de OFZ es mayor en los músculos
del corazón en comparación con los otros grupos musculares
investigados. La variabilidad observada en la calcificación de
quistes entre cerdos individuales en este estudio probablemente se deba al h
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estaban naturalmente infectados, cuya infección ocurrió en
diferentes momentos, por lo que los cerdos del estudio tenían
quistes de diferentes edades y tamaños. El oxfendazol en la dosis
utilizada en este estudio no logró eliminar los quistes cerebrales
parenquimatosos y ventriculares. Esto podría atribuirse al hecho
de que OFZ puede tener dificultades para cruzar la barrera
hematoencefálica (BBB) o, si lo hace, podría estar en
concentraciones no efectivas o suficientes para matar los quistes
(Peniche-Carden˜a et al., 2002). ). Otra posibilidad que puede
estar relacionada con el fracaso de OFZ en eliminar los quistes
cerebrales es que, a diferencia de los quistes extracerebrales, los
quistes cerebrales porcinos están rodeados por una cápsula
huésped gruesa (resultados no mostrados) que puede interferir
con la penetración del fármaco. Estudios previos de González et
al. (1997, 1998, 2001) también informaron de muy poco efecto de
OFZ en la eliminación de quistes cerebrales. En otro estudio
realizado por Peniche-Carden˜a et al. (2002), el sulfóxido de
albendazol administrado a 15 mg/kg durante un período de 8 días
pudo eliminar los quistes en los músculos, pero tampoco logró eliminar loshumana.
quistes cerebrales.
González et al. (1998) informaron que los cerdos tratados con
OFZ tenían canales con una apariencia normal y se consideraban
aptos para el consumo humano 12 semanas después del
tratamiento. Los resultados del estudio actual mostraron que la
eliminación de los quistes muertos completos lleva más tiempo y
que esto puede depender, entre otros factores, de la intensidad
del quiste del cerdo tratado. La mayoría de los cerdos del estudio
estaban gravemente infectados y, por lo tanto, la eliminación del
quiste hasta el punto en que su carne sería apta para el consumo
humano tomó entre 8 y 26 semanas e incluso a las 26 semanas,
aún se podían observar quistes calcificados en uno de los cerdos
tratados. cerdos Peniche-Carden˜a et al. (2002) concluyeron que
aunque el sulfóxido de albendazol fue capaz de matar los quistes
en los músculos, se necesitaba más tiempo para la desaparición
total de los cisticercos degenerados de la carne.
Aunque el examen de la lengua es un método menos sensible
pero altamente específico para detectar cisticercosis porcina
(Gonzalez et al., 1990; Phiri et al., 2006), sigue siendo una
herramienta de detección valiosa para usar en el campo, ya que
todos los animales reclutados en se encontró que el estudio tenía
cisticercos de T. solium en la necropsia. De los estudios de
disección que se han realizado en Zambia (Phiri et al., 2002,
2006), los quistes de la lengua son indicativos de infecciones
graves.
Este estudio ha demostrado que los cisticercos de T. solium
en cerdos provocaron respuestas IgGtotal, IgG1, IgG2 e IgA a TsCF.
El análisis de isotipos de anticuerpos específicos indicó un
predominio de la respuesta de IgG1 tanto en los controles
infectados como en los tratados infectados. IgG1 pareció ser el
principal isotipo de anticuerpo específico en el suero de cerdos
infectados con cisticercosis por T. solium, seguido de IgGtotal. Los
resultados de este estudio sugirieron además que podríamos usar
Respuestas específicas de IgG1 para seguir cuantitativamente el
progreso de la infección después del tratamiento de la cisticercosis
en cerdos. En los países en desarrollo, es difícil desarrollar y
utilizar antígenos purificados y, como tal, el uso de TsCF para el
diagnóstico aún podría ser muy útil. Muchos antígenos purificados
(Handali et al., 2004; da Silva et al., 2006; Sato et al., 2006;
Hancock et al., 2006; Ferrer et al., 2007) para la detección de
cisticercosis por T. solium en cerdos han desarrollado, pero puede
llevar tiempo comercializarlo y estar disponible para el mundo en
desarrollo. La única limitación de detectar respuestas IgG1
específicas a TsCF para evaluar el efecto del tratamiento fue que
no pudo detectar la respuesta de anticuerpos específicos en 4/4
(100 %) de los cerdos con quistes viables solo en el cerebro. Lo
más probable es que los quistes viables en el cerebro no indujeran
respuestas altas de anticuerpos debido al hecho de que el cerebro
se considera un sitio privilegiado para las funciones inmunitarias
(Xiao y Link, 1998; Ferguson y Griffith, 2007). Esta situación tiene
grandes implicaciones a la hora de diagnosticar la neurocisticercosis
Sin embargo, Handali et al. (2004) experimentaron el
mismo problema cuando siguieron la cinética de las respuestas de
anticuerpos contra antígenos purificados de T. solium (sTs18var1
y rGp50) en cerdos con cisticercosis tratados con OFZ.
Además, también se informó que este problema de no detectar
quistes cerebrales viables ocurre con el EITB en pacientes
humanos con neurocisticercosis (Garcia et al., 1994).
El oxfendazol mata el quiste por diferentes mecanismos, uno
de los cuales es la ruptura de la pared del quiste (Liu et al., 2003).
Después de la interrupción, el material antigénico del cisticerco se
libera en la circulación sanguínea. Los datos del presente estudio
mostraron que los niveles de CCA se correspondían con la
velocidad a la que se eliminaban los quistes del cuerpo. La
respuesta al antígeno cisticerco circulante también parecía
depender de la intensidad de los cisticercos en el cuerpo del
cerdo, ya que los cerdos con una intensidad alta de quistes tenían
niveles más altos de CCA (Fig. 4B). La correlación positiva de
anticuerpos y CCA con el recuento total de quistes sugiere que
existe una fuerte relación entre el título y el recuento de quistes.
Aunque con una predicción baja, este hallazgo sugiere que
podríamos usar el título de anticuerpos o CCA para predecir la
intensidad de los cisticercos en los cerdos infectados sin tener que
diseccionar necesariamente, ya que cuanto mayor sea el recuento
de quistes (intensidad de quistes), mayor será la títulos
Nuestros resultados sugieren que la prueba Ag-ELISA
empleada en este estudio no detecta exclusivamente los productos
secretores/excretores de los cisticercos de T. solium, sino que
también detecta material somático del parásito. Aunque el Ag-
ELISA es muy sensible y capaz de detectar una infección de quiste
única y viable en cerdos después de una infección experimental
(Nguekam et al., 2003), esto puede no ser cierto .
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CS Sikasunge et al. / Parasitología Veterinaria 158 (2008) 57–66
para la detección de material antigénico de cisticercos en
degeneración después del tratamiento. También debe tenerse
en cuenta que esta prueba se preparó contra el epítopo de
carbohidratos que se encuentra en las glicoproteínas adherentes
de lentejas-lectina presentes en la superficie (somática) y en las
secreciones (excretoras-secretoras) de los cisticercos de T.
saginata (Harrison et al., 1989) , pero fue adoptado para su uso
en cerdos (Phiri et al., 2002; Pouedet et al., 2002; Nguekam et
al., 2003; Sikasunge et al., 2008). Sin embargo, se podría
argumentar que la longevidad de CCA en el suero de los cerdos
tratados podría estar influenciada por el quiste cerebral, ya que
permanecieron viables a pesar del tratamiento con OFZ. A partir
de nuestro estudio, parece que los quistes cerebrales no son
detectados por Ab-ELISA o Ag-ELISA porque si lo fueran,
entonces la prueba Ag-ELISA no debería haber sido negativa más allá de las 18 semanas.
Los resultados presentados aquí mostraron que el tratamiento
con OFZ de cerdos infectados con cisticercosis eliminó los
cisticercos durante un período de 4 semanas. El tratamiento de
cerdos infectados provocó la degeneración de los cisticercos en
la carne infectada y mejoró su apariencia y valor en comparación
con la carne de cerdos infectados no tratados.
Sin embargo, la eliminación de los quistes muertos pareció
tardar unas 26 semanas o incluso más y dependió de la
intensidad de los quistes de los cerdos individuales en el
momento del tratamiento. Especulamos que la protección se
pierde después de las 12 semanas, como se ve en los bajos
niveles de respuestas IgG1/IgG2, ya que la resistencia y la
susceptibilidad a diferentes enfermedades parasitarias se han
asociado con el predominio de respuestas inmunitarias de tipo
Th1 o Th2 (Terrazas et al., 1999). . Los resultados mostraron
además que las respuestas específicas de IgG1 podrían
brindarnos más información sobre la eficacia del tratamiento
que los otros isotipos investigados porque predominaron tanto
en los cerdos infectados tratados como en los de control y
desaparecieron temprano en los cerdos tratados. Por lo tanto,
es posible usar un ELISA de anticuerpos simple usando TsCF
para evaluar cuantitativamente la eficacia del tratamiento en
cerdos con cisticercosis. Los niveles de antígeno cisticerco
circulante tardan algún tiempo en desaparecer de la circulación
después del tratamiento y también parecen depender de la
intensidad de los cisticercos en el cerdo tratado, ya que se
correlacionan con la intensidad de los cisticercos. Además de la
cantidad de quistes, las respuestas de isotipos de anticuerpos
específicos y la CCA podrían verse influenciadas por factores
derivados del huésped y del parásito, como el estado
inmunológico del huésped, la ubicación (cerebro versus músculo)
y el tamaño de los quistes o diferencias genéticas ( Deckers et
al., 2008). El Ag-ELISA actual parece tener algunas limitaciones
con respecto a su uso como herramienta de control para
monitorear la efectividad del tratamiento en cerdos. A pesar de
algunas limitaciones, el tratamiento de cerdos infectados con
OFZ debe considerarse una medida importante y rentable en el control de la teniosis/cisticercosis.
sesenta y cinco
Agradecimientos
Este trabajo fue patrocinado por DBL-Centre for Health
Research and Development, Dinamarca. Se agradece
enormemente el apoyo de la Escuela de Medicina Veterinaria
de la Universidad de Zambia. También queremos rendir
homenaje a los Sres. P. Zulu, B.
Chulu, J. Kaumba, M. Masuku, M. Chembensofu y M. Kankomba
de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad de
Zambia por la asistencia prestada durante el trabajo de disección.
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