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Histologia Tarea Bio
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Biología Celular y Molecular 2022
INDICE
Contenido Pags.
-Práctica N°1:
Identificación de ácidos nucleicos 7
-Práctica N°2:
Identificación de las propiedades de los carbohidratos 12
-Práctica N°3:
Identificación de proteínas 17
-Práctica N°4:
Microscopía 22
-Práctica N°5:
Observación de células eucariotas y procariotas 34
-Práctica N°6:
Las mitocondrias y el envejecimiento celular 38
-Práctica N°7:
Sangre 41
-Práctica Nª 8:
Organelas no membranosas 53
-Práctica N°9:
Transporte a través de la membrana 60
-Práctica N° 10
Ciclo celular y organización del material genético 66
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Biología Celular y Molecular 2022
PRESENTACIÓN
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Biología Celular y Molecular 2022
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Biología Celular y Molecular 2022
MATERIAL DE LABORATORIO
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Biología Celular y Molecular 2022
Práctica N° 1
IDENTIFICACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS
Nombre:
Código:
OBJETIVOS
-Observa y analiza pruebas químicas sencillas para aislar ácidos nucleicos e
identificar sus características estructurales y propiedades.
MARCO TEÓRICO
Desde el punto de vista químico, el ADN es un polímero de nucleótidos, es
decir, un polinucleótido. Un polímero es un compuesto formado por muchas
unidades simples conectadas entre sí, como si fuera un largo tren formado por
vagones. En el ADN, cada vagón es un nucleótido, y cada nucleótido, a su vez,
está formado por un azúcar (la desoxirribosa), una base nitrogenada (que
puede ser adenina→A, timina→T, citosina→C o guanina→G) y un grupo
fosfato que actúa como enganche de cada vagón con el siguiente. Lo que
distingue a un vagón (nucleótido) de otro es, entonces, la base nitrogenada, y
por ello la secuencia del ADN se especifica nombrando sólo la secuencia de
sus bases. La disposición secuencial de estas cuatro bases a lo largo de la
cadena (el ordenamiento de los cuatro tipos de vagones a lo largo de todo el
tren) es la que codifica la información genética: por ejemplo, una secuencia de
ADN puede ser ATGCTAGATCGC... En los organismos vivos, el ADN se
presenta como una doble cadena de nucleótidos, en la que las dos hebras
están unidas entre sí por unas conexiones denominadas puentes de hidrógeno.
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PROCEDIMIENTO
OBSERVACIONES Y RESULTADOS
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ACTIVIDADES
-Coloque el término correcto a las estructuras que se señalan y los espacios
que se presentan a continuación.
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Práctica N° 2
IDENTIFICACIÓN DE LAS PROPIEDADES DE CARBOHIDRATOS
Nombre:
Código:
OBJETIVOS
-Analiza pruebas químicas sencillas para identificar carbohidratos en diferentes
tipos de muestras.
MARCO TEÓRICO
Los hidratos de carbono también llamados azúcares, glúcidos o sacáridos son
un grupo de biomoléculas cuya característica química es su naturaleza
polihidroxílica con otra función más oxidada, el grupo carbonilo de aldehídos y
cetonas. En estas funciones se centra su reactividad.
Las propiedades reductoras de los azucares son importantes para la
identificación de azúcares. El grupo carbonilo de los hidratos de carbono es
fácilmente oxidable por diversos reactivos, aunque el poder reductor de estos
compuestos depende de la entidad que el grupo tenga en la molécula, es
decir de la naturaleza mono-, di- o poli- sacárida del azúcar y la posición en que
se encuentren los posibles enlaces glicosídicos. El agente oxidante suave más
empleado en este tipo de reacciones es el catión Cu (II), cuyas sales son de
coloración azul. En todos los casos este ión se reduce a Cu (I), formándose
oxido cuproso, lo que origina turbidez en el medio de reacción, que concluye
con la aparición de un precipitado marrón-rojizo. Es esta aparición la que
indica que el glúcido tiene carácter reductor.
Existen diversas pruebas muy similares basadas en reacciones de reducción
como la prueba de Benedict, en la cual se utiliza el Cu (II) en medio alcalino,
favoreciendo la reacción de los monosacáridos reductores.
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PROCEDIMIENTOS
Experiencia N°01: Reacción de Molisch por formación de furfurales o
hidroximetilfurfurales
-Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de solución de azúcar al 20%y agregarle 2
ml del reactivo de Molisch (0,5 g de alfa naftol en 10 ml de etanol 95%
almacenado protegido de la luz).
-Con pipeta Pasteur dejar resbalar por la pared del tubo 2 ml de ácido sulfúrico
concentrado (tener cuidado es causitico). Sin mezclar para que se forme capa
en el fondo del preparado.
-Observar positividad con formación de anillo violeta oscuro leve en la interfase.
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ACTIVIDADES
-Haga un esquema de la clasificación de los carbohidratos colocando a los
representantes de cada grupo.
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-Señale:
Dos triosas……………………………………………………………………………..
Dos pentosas………………………………………………………………………….
Cinco aldohexosas……………………………………………………………………
Dos cetohexosas………………………………………………………………………
Dos disacáridos…………………………………………………………………………
Tres trisacáridos……………………………………………………………………….
Dos polisacáridos estructurales………………………………………………………
Dos polisacáridos con función energética………………………………………….
CUESTIONARIO
-¿Cuál es el fundamento de la prueba de Benedict? porque se da el viraje de
su color en base a los componentes que posee el reactivo y los componentes
de los carbohidratos que participan de la reacción?
PRÁCTICA N°3
IDENTIFICACIÓN DE LAS PROTEÍNAS
Nombre:
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Código:
OBJETIVOS
-Evalúa procedimientos de identificación de proteínas
-Reforzar los conocimientos al respecto de la estructura y propiedades de las
proteínas.
MARCO TEÓRICO
Las funciones de las proteínas son específicas de cada una de ellas y permiten
a las células mantener su integridad, defenderse de agentes externos, reparar
daños, controlar y regular funciones, etc...Todas las proteínas realizan su
función de la misma manera: por unión selectiva a moléculas. Las proteínas
estructurales se agregan a otras moléculas de la misma proteína para originar
una estructura mayor. Sin embargo, otras proteínas se unen a moléculas
distintas: los anticuerpos a los antígenos específicos, la hemoglobina al
oxígeno, las enzimas a sus sustratos, los reguladores de la expresión génica al
ADN, las hormonas a sus receptores específicos, etc. Entre algunas de las
funciones más conocidas de las proteínas fuera de su función estructural están
la de transporte, protectora, inmunológica, amortiguadora y hasta energética.
Hay ciertas reacciones coloreadas que dan las proteínas y dependen de los
aminoácidos presentes en la molécula proteica. Todas dan positivo a la
reacción de BIURET debida a la presencia de más de dos grupos NH - CO. Las
que contienen tirosina dan las reacciones Xantoproteica y de Millon, las que
contienen triptófano dan la reacción de este nombre, y las que contienen cistina
dan la reacción de la cistina (azufre).
PROCEDIMIENTOS
-
Problema Blanco
Agua destilada - 1ml
Ovoalbúmina diluida 1ml -
(clara de huevo)
Reactivo Biuret 1ml 1ml
- Mezclar bien cada tubo colocándole una tapita de plástico y observar si hay
cambio de color del reactivo .
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CUESTIONARIO
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Práctica N° 4
MICROSCOPÍA
Nombre:
MARIA GUADALUPE RAMIREZ MAMANI
Código:
2022073921
OBJETIVOS
Identificar correctamente las partes de un microscopio compuesto.
Reconocer la técnica de preparar y observar diferentes materiales, así como el
ajuste y enfoque correctos de sus imágenes según el tipo de muestra.
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MARCO TEÓRICO
El microscopio es un instrumento óptico que permite observar seres o estructuras que
no se pueden percibir a simple vista. Durante la Edad Media ya se conocían lentes
que eran capaces de aumentar las imágenes hasta diez veces. El tipo más simple de
lente es la lupa común.
Hasta ahora, la microscopía depende tanto de las técnicas para la preparación del
espécimen como del rendimiento del propio microscopio.
Veremos en este práctico las características y el modo de uso de distintos
microscopios y también la manera de preparar las muestras para su observación.
Además de las clases de microscopios mencionados existen otros como el
microscopio de luz ultravioleta, el microscopio de contraste de fases, etc
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Biología Celular y Molecular 2022
líneas o dos puntos que están a 120 micrómetros uno de otro, puede distinguirlos
fácilmente.
Nótese que poder de resolución y aumento son dos cosas diferentes. Si uno toma una
fotografía de dos líneas que estén separadas por lo menos de 0,3 micrómetros,
usando el mejor microscopio puede ampliarse esa fotografía indefinidamente pero las
dos líneas seguirán confundidas en una sola. Usando lentes más potentes se puede
incrementar el aumento pero esto no mejorará la resolución.
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Precauciones generales:
-Para transportar el microscopio tome el brazo del mismo con una mano y con la
otra sostenga su base. Nunca transporte el microscopio invertido ni muy inclinado ya
que la lente ocular no está fijo y puede caer al piso.
-No emplee el pañuelo o los dedos para limpiar las lentes ya que puede rayar la
superficie óptica. Siempre use el papel para lentes que provea la cátedra.
-Cuando termine con las observaciones apague la fuente de luz y coloque el
objetivo de menor aumento en la posición de observación. Nunca deje el microscopio
con el objetivo de mayor aumento en la posición de observación.
Parte mecánica:
Tubo: proporciona sostén a los oculares y objetivos y mantienen a unos y otros
separados por la distancia de trabajo correcta.
Revolver portaobjetivos: permite colocar en posición de trabajo alternativamente a los
objetivos con que cuenta el microscopio.
Brazo: une al tubo con la platina.
Tornillo de cremallera o de avance rápido o macrométrico: mueve el tubo hacia arriba
o hacia abajo acercando rápidamente el objetivo a la distancia de trabajo aproximada
con respecto al objeto.
Tornillo de ajuste fino o micrométrico: permite enfocar con precisión moviendo muy
lentamente el tubo hacia arriba o hacia abajo.
Platina: sostiene las preparaciones del objeto a observar, que se coloca sobre una
perforación que tiene en el centro y que deja pasar la luz que proviene de la lámpara
de proyección.
Pinzas: sostienen la preparación con firmeza sobre la platina.
Base: sirve de soporte al microscopio y por su peso da estabilidad al aparato.
Parte óptica:
Ocular: compuesto por lentes que multiplican el aumento, puede ser reemplazado por
otro ocular de mayor o menor aumento.
Objetivo: compuesto por lentes de diferentes aumentos. Generalmente el objetivo más
corto es el de menor aumento (4X), y el más largo es el de mayor aumento. Además
posee un objetivo de inmersión (100X).
Condensador: concentra el haz luminoso en la preparación.
Diafragma: regula la cantidad de luz que va a pasar a través de la preparación.
Espejo: refleja hacia arriba la luz que habrá de atravesar el diafragma, la platina, la
preparación y el sistema óptico del microscopio hasta el ojo. Se emplea cuando la
fuente de luz no está incorporada al microscopio.
Instalación del microscopio
El microscopio debe tomarse por el brazo con una mano, colocando la otra bajo la
base del mismo, luego de quitar el forro de plástico o donde se encuentre guardado
deposítelo con cuidado sobre la mesa que deber ser lisa y fija, orientándolo con el lado
libre de la platina hacia el observador y con el brazo hacia el lado opuesto.
Gire el revolver para que el objetivo de menor aumento se oriente hacia el eje de
observación. Posee un tope que deberá sentirse al llegar al lugar debido. Abra el
diafragma lo más posible. Moviendo el tornillo macrométrico hacia el observador, se
aumenta la distancia entre el objetivo y la platina, lo que permitirá colocar luego
cómodamente el preparado sobre ésta, retirando previamente los sujetadores de
resorte. Moviendo los tornillos ubicados a ambos lados de la platina, se produce el
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Biología Celular y Molecular 2022
Para limpiar el portaobjetos, sosténgalos por los bordes entre el dedo índice y el
pulgar, y sumérjalos en el agua. Enjuague y séquelos usando un trozo de paño suave
y limpio.
Los cubreobjetos son mucho más frágiles que los portaobjetos, sosténgalos por los
bordes, usando el índice y el pulgar de una mano y sumérjalos en agua. Retire y
seque con un trozo de paño limpio, realizando un movimiento suave y circular, que es
el más efectivo. Evite tocar las superficies de los portaobjetos y cubreobjetos con sus
dedos. Manéjelos siempre por sus bordes.
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Biología Celular y Molecular 2022
el ocular, solo deja pasar la luz con longitud de onda correspondiente a la de la luz
emitida por ese material fluorescente.
Responda como observa la posición de la letra “e” que coloco al verlo a través del
microscopio
Se observa la E alreves
Respuesta:
2) ¿Convierta los milímetros a micrómetros (um) considerando que 1000 um equivales
a 1 ml?
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Experiencia N° 2: Observación de Células epiteliales de mucosa oral
Responda:
-¿Cuándo paso al objetivo de 4x a 10x la imagen se observaba un poco
menos nítida, con que tornillo se mejora básicamente la nitidez o el
enfoque?
Se mejora la nitidez o
enfoque, con el tonillo
micrométrico.
TORNILLO
MICROMETRIC
OO
DESCOMPOSICIÓN DE UNA
CÉLULA VIVA, ATRAVEZ DEL
-¿Cuándo se observan muestras frescas hasta que objetivo pueden ser
observadas y porque?
EJEMPLO DE
MUESTRAS A
MAYOR
RESOLUCIÓN
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Muestra:
Observación:
Aumentos:
ACTIVIDADES
Observación de organoides celulares a nivel de microscopía electrónica
La figura muestra dos imágenes de un núcleo de célula de cebolla. Una es
una fotografía de la célula vista con un microscopio óptico. La otra es una
microfotografía electrónica. Note que la ampliación de ambas es
aproximadamente igual. ¿Por qué entonces las células se ven tan diferentes?
La razón es que el microscopio óptico y el electrónico difieren en su habilidad
para resolver o distinguir detalles finos. Un microscopio electrónico es capaz de
resolver dos estructuras como separadas cuando sólo las apartan 0,0001 um,
mientras que el óptico puede resolver objetos separados 0,5 um.
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A. B.
Organela:Reticulo
Organela: Nucleolo Endoplasmatico Rugoso
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D.
C.
Organela: Aparato de Golgi
Organela: Mitocondria
Función: Encargado de
Función: Encargados de producir
direccionar las proteínas al
ATP.
RER.
F.
E.
Organela: Microtubulos
Organela: Cloropastos
Función: Encargados de
Función: Se encargan de llevar a
movilizar vesículas u
cabo la fotosíntesis en las células
organelos de un lado para
vegetales.
otro.
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G.
H.
Organela: Pared celular vegetal
Organela:
Función: Es proteger el contenido
de la célula, aparte que le da Función:
rigidez y forma a esta célula.
Fotografías al microscopio electrónico
CUESTIONARIO
- Indique cuáles son los componentes de la parte óptica de un
microscopio óptico compuesto.
Componentes de la parte óptica del microscopio:
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El principio de funcionamiento del
microscopio electrónico se basa en
utilizar electrones en lugar de luz visible
donde nos dice también que la longitud de
onda con la que se mueve un electrón es
inversamente proporcional a su velocidad,
esto significa que si los electrones son
acelerados a altas velocidades pueden
obtenerse longitudes de onda muy cortas.
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Práctica N° 5
OBSERVACIÓN DE CÉLULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS
Nombre:
Código:
OBJETIVOS
Analiza las características de las células eucariotas y procariotas.
Evaluar la realización de la coloración Gram y otras técnicas de tinción
de células eucariotas.
MARCO TEÓRICO
Hoy día la célula se define como "la unidad viva más pequeña capaz de
crecimiento autónomo y reproducción, así como de utilizar sustancias
alimenticias químicamente diferentes de sí misma". La reconocida unidad
morfológica y fisiológica de la materia viva.
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Si bien cada tipo de célula tiene una estructura y tamaño definidos, las células
no deben considerarse cuerpos inalterables: una célula es una unidad dinámica
que constantemente sufre cambios y sustituye sus partes. Incluso si no está
creciendo, toma continuamente materiales de su medio y los transforma en
sustancia propia. A1 mismo tiempo, arroja constantemente a su medio
materiales celulares y productos de desecho. Una célula es, por tanto, un
sistema abierto siempre cambiante que permanece siempre el mismo. Todas
las células vivas son fundamentalmente semejantes. Están constituidas por el
protoplasma (del griego 'protos' -primario- y 'plasma' -formación-) que es un
complejo orgánico compuesto básicamente de proteínas, grasas y ácidos
nucleicos; todas están rodeadas por membranas limitantes o paredes celulares
y todas poseen un núcleo o sustancia nuclear equivalente.
La célula procariota
La célula eucariota
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PROCEDIMIENTOS
Experiencia N° 01: Análisis de las bacterias del yogur mediante tinción Gram.
yogur (Lactobacillus bulgaricus, Streptococcus thermophilus)
- Preparar una lámina porta objetivos bien limpio y colocarle una gota de
agua.
- Flameamos el asa de siembra hasta que adopte un color rojo, ya que de esa
manera podremos esterilizarlo.
- Luego cogeremos una muestra del líquido del yogurt intentando no tocar con
el asa la parte sólida de la materia del yogurt, pues contiende demasiada
grasa y esto podría dificultarnos la observación. Hacer una extensión muy
delgada sobre el portaobjetos. Secar la extensión con mucho cuidado a la
llama del mechero.
- Agregar unas gotas de cristal violeta o violeta de genciana, hasta cubrir el
preparado y dejar en reposo por espacio de 1 a 2 minutos.
- Eliminar el exceso de colorante haciendo caer un delgado chorro de agua en
una de las esquinas de la lámina con la muestra (no sobre la muestra).
- Agregar lugol,(fijador) hasta cubrir el preparado y dejar en reposo por
espacio de 2 minuto.
- Lavar la lámina de la misma forma descrita en el paso 5.
- Decolorar con alcohol-acetona hasta que no se observe el color azulado.
- Lavar nuevamente.
- Aplicar fucsina básica o en su lugar safranina por 30 segundos.
- Lavar el preparado y dejar secar al medio ambiente o a calor moderado.
- Observar con el objetivo de inmersión
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- Graficar lo observado.
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ACTIVIDADES
-Dibuje una célula procariota y una célula eucariota animal .Señale sus
subcomponentes
-Dibuje la pared celular de una bacteria Gram positiva y una Gram negativa,
señalando sus sub componentes.
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Práctica N° 6:
LAS MITOCONDRIAS Y EL ENVEJECIMIENTO
Nombre:
Código:
OBJETIVO
-Reafirmar los conocimientos al respecto de la estructura y funciones de las
mitocondrias.
MARCO TEÒRICO
Las mitocondrias (las estructuras que producen energía en las células) existen
en redes que cambian de forma en función de la demanda de energía. Su
capacidad para hacerlo disminuye con la edad, pero el impacto que esto tiene
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ACTIVIDADES
CUESTIONARIO
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Práctica N° 7:
SANGRE
Nombre:
Código:
OBJETIVOS
Analizar la realización de algunas técnicas de laboratorio médico que
apoyan el diagnóstico de diversas enfermedades.
Que el estudiante reconozca los componentes y las reacciones
antígeno-anticuerpo en sangre.
MARCO TEÓRICO
LA SANGRE
La sangre es un tejido líquido que recorre el organismo transportando células, y
todos los elementos necesarios para realizar sus funciones vitales (respirar,
formar sustancias, defenderse de agresiones) y todo un conjunto de funciones
muy complejas y muy importantes para la vida.
La cantidad de sangre de una persona está en relación con su edad, peso, sexo
y altura, una persona adulta se puede considerar que tiene entre 4,5 y 6 litros de
sangre. Todos los órganos del cuerpo humano funcionan gracias a la sangre que
circula por arterias, venas y capilares.
La sangre tiene dos partes, una llamada plasma y otra elementos figurados (se
llama así porque tiene forma tridimensional: glóbulos rojos, glóbulos blancos y
plaquetas; estos últimos son fragmentos de células).
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EL PLASMA
- Proteínas
La Albúmina
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Biología Celular y Molecular 2022
Las Globulinas
Fibrinógeno
Otras proteínas
- Sales inorgánicas:
- Sustancias de transporte:
COAGULACIÓN Y HEMOFILIA
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Biología Celular y Molecular 2022
ósea junto con los glóbulos rojos. Los tres contienen gránulos citoplásmicos
que difieren en tamaño y propiedades tintoriales: neutrófilos teñidos de rojo y
son 60-70%, basófilos teñidos de azul y son .5%, eosinófilos teñidos de r y a y
son 3 - 4%
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El Sistema ABO
Fenotipo Bombay
Algunas personas clasificadas como tipo “O” pueden tener en realidad el muy
raro fenotipo Bombay, al haber heredado dos alelos recesivos del gen “H”, es
decir poseen un genotipo “hh” y su grupo sanguíneo es “Oh”, por lo que no
producen la proteína “H” que es la precursora de los antígenos “A” y “B”. De
esta forma no supone ningún problema la presencia de anticuerpos “A” y “B” en
el suero, pues los antígenos respectivos no son producidos al no existir el
precursor.
Las escasas personas con este fenotipo no expresan el antígeno “H” en sus
glóbulos rojos y por tanto tampoco producen antígenos “A” o “B”. Sin embargo
si producen anticuerpos para “H” (que está presente en todos los glóbulos rojos
excepto en aquellos con fenotipo “hh” ) así como para “A” y “B” por lo que solo
son compatibles con donantes del mismo tipo “hh” es decir con otros bombay.
Este raro fenotipo puede traer errores en las determinaciones de paternidad por
el sistema ABO, ya que por esta situación una pareja de progenitores de
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Biología Celular y Molecular 2022
grupos sanguíneos “A” y aparentemente “O” pueden tener hijos “AB” por
ejemplo.
El Sistema Rh
Existen otros grupos sanguíneos, también clasificados por letras como, por
ejemplo M, N, S y P y otros conocidos por el nombre de las personas en las
que se identificaron los anticuerpos por primera vez (Kell, Duffy, etc.).
TIEMPO DE SANGRÍA
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Biología Celular y Molecular 2022
Es un examen que mide el tiempo que tarda el cierre de los vasos sanguíneos
pequeños para detener el sangrado de sangre. Mide principalmente la función
plaquetaria. En el método de Duke los valores normales van de 1 a 4 minutos.
TIEMPO DE COAGULACIÓN
Es un examen que mide el tiempo que tarda en coagular la sangre. El tiempo
de coagulación se alarga cuando existe deficiencia de cualquier factor de
coagulación. Gran parte del tiempo corresponde a la activación de los factores
de contacto, por lo que las alteraciones de la fase final de la coagulación, que
son las que tienen verdadero interés práctico, pueden quedar encubiertas. Por
tanto , no es de utilidad más que en las coagulopatías graves.
PROCEDIMIENTOS
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ACTIVIDADES
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CUESTIONARIO
-¿Qué es la hemólisis?
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Biología Celular y Molecular 2022
-¿Que es la hemofilia?
Práctica N° 8
REPASANDO LAS CARACTERÍSTICAS Y FUNCIONES DE LAS
ORGANELAS NO MEMBRANOSAS
Nombre:
Código:
OBJETIVOS
-Reafirmar en los estudiantes los conocimientos al respecto de las organelas
no membranosas: ribosomas y centriolos, así como también repasar los
conocimientos al respecto de estructuras de movilidad como los cilios y los
flagelos.
MARCO TEÓRICO
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Biología Celular y Molecular 2022
A nivel del cuerpo basal si hacemos un corte longitudinal veríamos que las
fibras externas no están constituidas por dobletes sino por tripletes (A, B, C); lo
que ocurre que la C no se extiende al tallo. El cuerpo basal presenta unas
prolongaciones que se extienden en el interior del citoplasma, recibiendo el
nombre de radículas o raíces. El número de raíces en cada cilio es constante
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Biología Celular y Molecular 2022
Los cilios se mueven de forma sincrónica, es decir que todos los cilios están en
la misma posición, esto implica la presencia de algún mecanismo regulador. En
el cilio se produce una excitación en un momento determinado intraciliar debido
a un impulso nervioso, produciéndose como consecuencia el movimiento, esta
excitación se transmite al cilio siguiente y así sucesivamente. En el caso de los
flagelos el movimiento puede ser helicoidal o látigo.
EUCARIOTAS PROCARIOTAS
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(a) (b)
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En el Paramecium sp.…………………………….
En epitelio respiratorio…………………………….
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18.Indica por qué consideras importante el rol que los centriolos desempeñan
en la célula.
Práctica N° 9
TRANSPORTE A TRAVÉS DE LA MEMBRANA
Nombre:
Código:
OBJETIVOS
Analizar y reconocer el cambio de volumen que sufren las células al
exponerlas a soluciones de diferentes tonicidad.
Evaluar el efecto de diversas sustancias en la en la permeabilidad
de la membrana
MARCO TEÓRICO
La membrana plasmática regula la entrada y salida de materiales, permitiendo
la entrada de unos y restringiendo el paso de otros. Esta propiedad se llama
permeabilidad selectiva .La membrana es permeable cuando permite el paso,
más o menos fácil, de una sustancia. La permeabilidad de la membrana
depende de varios factores relacionados con las propiedades físico-químicas
de la sustancia:
-Solubilidad en los lípidos: Las sustancias que se disuelven en los lípidos
(moléculas hidrófobas, no polares) penetran con facilidad en la membrana dado
que esta está compuesta en su mayor parte por fosfolípidos.
-Tamaño: la mayor parte de las moléculas de gran tamaño no pasan a través
de la membrana. Sólo un pequeño número de moléculas no polares de
pequeño tamaño pueden atravesar la capa de fosfolípidos
-Carga: Las moléculas cargadas y los iones no pueden pasar, en condiciones
normales, a través de la membrana. Sin embargo, algunas sustancias cargadas
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Biología Celular y Molecular 2022
pueden pasar por los canales proteicos o con la ayuda de una proteína
transportadora.
También depende la permeabilidad de una membrana de la naturaleza de las
proteínas de membrana existentes:
-Canales: algunas proteínas forman canales llenos de agua por donde pueden
pasar sustancias polares o cargadas eléctricamente que no atraviesan la capa
de fosfolípidos.
-Transportadoras: otras proteínas se unen a la sustancia de un lado de la
membrana y la llevan del otro lado donde la liberan.
En general, estos canales y proteínas transportadoras muy altamente
selectivas permitiendo el paso a una única sustancia.
La técnica escogida para la ruptura celular tiene que considerar el origen del
tejido para evaluar su facilidad o dificultad de destrucción. Además el método
debe ser compatible con la cantidad de material que será procesado y las
aplicaciones de este.
Existen dos tipos de lisis: la lisis tradicional y la lisis por medio de detergentes.
Lisis tradicional
Lisis celular por medio de detergentes es una manera más suave de romper la
membrana celular.
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Biología Celular y Molecular 2022
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Biología Celular y Molecular 2022
Experiencia N° 1: Osmosis
En este experimento se utilizará sangre oxalatada.
Rotular 3 tubos de centrífuga y adicionarles respectivamente:
T1 T2 T3
NaCl 0.9% 8
(ml)
NaCl 0,22% 8
(ml)
NaCl 6% (ml) 8
Sangre 1 gota 1 gota 1 gota
obtenida con
EDTA
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Biología Celular y Molecular 2022
ACTIVIDADES
-¿Que compuestos atraviesan la membrana por difusión simple y que otros por
proteínas canal?
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Practica N°10
ORGANIZACIÓN DEL MATERIAL GENÉTICO Y CICLO CELULAR
Nombre:
Código:
OBJETIVOS
Que el estudiante reconozca los niveles de organización del ADN en
las diferentes etapas del ciclo celular.
Adiestrar al alumno en el reconocimiento de las características más
relevantes de las diferentes etapas del ciclo celular
Que el estudiante reconozca correctamente las partes de los
cromosomas y las técnicas para poder realizar su observación.
MARCO TEÓRICO
EL ADN presenta diferentes estados de condensación desde su estado más
laxo de cromatina como se encuentra en el grueso de las etapas del ciclo
celular y el máximo de cromosomas logrado en la mitosis. Estos se reflejan en
los llamados niveles de condensación pasando por el de nucleosomas, fibra
cromatínica o en solenoide, asas o bucles, minibanda hasta alcanzar su estado
de cromosomas.
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Cariotipo
También llamado cariograma, es el ordenamiento sistematizado de los
cromosomas de una célula. Para tal ordenamiento deben seguirse ciertas
normas o pautas como es el tamaño de los cromosomas y la posición del
centrómero.
Siguiendo la pauta de la posición del centrómero podemos hablar de varios
tipos de cromosomas:
Cromosomas metacéntricos: poseen un centrómero de posición central cuyos
brazos largos y cortos son en realidad de medidas semejantes.
Cromosomas submetacéntricos: poseen un centrómero de posición subcentral,
es decir más cercano a un extremo del cromosoma que del otro, por lo tanto los
brazos cortos y largos son aún más de tamaños desiguales.
Cromosomas acrocéntricos: el centrómero está muy de un extremo del
cromosoma y los dos brazos son de tamaño muy desigual.
Cromosomas telocéntricos: el centrómero está en un extremo del cromosoma y
sólo está definido el brazo largo, el corto está ausente.
No existe este tipo de cromosoma en la especie humana.
Confección de un cariotipo
1. Para la siembra se utilizan unas cuantas gotas de sangre integra o
bien, unos dos centímetros cúbicos de plasma de la persona cuyo
cariotipo se desea conocer; pero en realidad lo que se pretende es
sembrar los linfocitos, los que deben llegar en las mejores condiciones.
2. El medio de cultivo viene ya preparado y listo para ser utilizado; los
frascos que contienen dicho medio sirven como cámaras de desarrollo.
3. Los linfocitos al encontrar en el medio la fitohemaglutinina (sustancia
que se extrae de la habichuela roja) empiezan a dividirse; es decir esta
sustancia es responsable de la multiplicación de los linfocitos que de
otro modo habrían permanecido en interfase.
4. Se coloca el frasco de cultivo en una estufa a 37°C durante 3 a 4 días,
lapso en el que se aprecia a simple vista un buen desarrollo celular.
5. Al final de este periodo de multiplicación se agrega colchicina al medio
para detener la mitosis en la metafase y se deja en incubación 3 a 6
horas a 37 °C.
6. Se transfiere a un tubo el sedimento de la centrifugación (a 800 rpm
durante 10 minutos) de la mezcla anterior, retirándole así el medio de
cultivo.
7. Se le agrega una solución hipotónica para hinchar las células.
8. Se vuelve a centrifugar y al sedimento separado se le agrega un fijador
y se le deja en reposo.
9. Se resuspenden las células.
10. Se colocan unas gotas de esta suspensión de linfocitos sobre una
lámina portaobjetos.
11. Se seca rápidamente y se colorea la muestra con orceína o Giemsa.
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PROCEDIMIENTOS
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CUESTIONARIO
1. ¿Cuándo es indicado un cariotipo?
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