UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

MICROBIOLOGIA I

GUIA PRACTICA DE LABORATORIO

COMPETENCIAS ESPECÍFICAS A SER EVALUADAS EN LA CLASE PRÁCTICA DE MICROBIOLOGIA I
SABER EVALUACIÓN DE PRÁCTICA Revisión y aplicación de conocimiento previo (examen) previo) SABER HACER SER NOTA FINAL Nota Examen parcial parcial

ESTUDIANTES

Calidad de Desarrollo trabajo de la (mapas, práctica. casos (Uso Puntualidad clínicos, correcto resolución de de Material) cuestionario)

Disciplina (Uso de vestimenta adecuada)

PUNTAJE

0 - 9

0-3

1

1

1

15

15

30

1

UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. 1

NORMAS BASICAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO: Las medidas de seguridad en laboratorios son un conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la salud de los que allí se desempeñan frentre a los riesgos propios derivados de la actividad, para evitar accidentes y contaminaciones tanto dentro de su ámbito de trabajo, como hacia el exterios. En ese entendido la OMS se dio a la tarea de estudiar estos riesgos y clasificar a los laboratorios, para luego dar recomendaciones en lo que se refiere a normas de bioseguridad. Los laboratorios se clasifican en :

2

Nuestro laboratorio se encuentra en el grupo de riesgo 1, nivel básico, en este nivel la OMS recomienda que es necesario para minimizar riesgos :  El Símbolo internacional de peligro biológico debe estar colocado en las puertas de los lugares donde se manipulen microorganismos que puedan resultar patógenos al humano.  Sólo se podrá entrar a las zonas de trabajo personal autorizado.  Las puertas del laboratorio deben mantenerse cerradas.  No se autoriza la entrada de niños en las zonas de trabajo del laboratorio. Protección personal:  Se usarán en todo momento batas o guardapolvos especiales para el trabajo de laboratorio.  Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que pueden entrañar contacto directo o accidental con sangre, líquidos corporales y otros materiales potencialmente infecciosos. Una vez utilizados los guantes, se retiraran de forma aséptica y a continuación se lavarán las manos.  El personal y los estudiantes se lavaran las manos después de manipular muestras y antes de salir del laboratorio.  Se usarán lentes y caretas de seguridad para protección de los ojos y el rostro de salpicaduras, impactos y fuentes de radiación ultravioleta artificial.  Está prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio.  Debe usarse calzado cerrado, prohibido entrar con sandalias.  Está prohibido comer, fumar o beber en el laboratorio. 3

 No debe almacenarse comida para consumo humano en el laboratorio. Procedimientos:  Está estrictamente prohibido pipetear con la boca.  No se colocará ningún material en la boca ni se pasará la lengua por las etiquetas.  Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que se reduzca al mínimo la formación de aerosoles .  Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales infecciosos se comunicarán al supervisor del laboratorio. Se mantendrá un registro escrito de estos accidentes e incidentes.  Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de todos los derrames.  Los líquidos contaminados deberán descontaminarse ( por medios químicos o físicos) antes de eliminarlos por el colector de saneamiento. Zonas de trabajo del laboratorio:  El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el trabajo.  Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo derrame de material potencialmente peligroso y al final de cada jornada de trabajo.  Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser descontaminados antes de eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar.  Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que impidan el paso de artrópodos. Clasificación de los residuos:  Desechos generales o comunes son aquellos que no presentan un riesgo adicional para la salud humana y el ambiente y que no requieren de un manejo especial como papel, cartón, plásticos, restos de alimentos.  Desechos peligrosos o especiales son aquellos que presentan un riesgo para la salud humana y el ambiente y que requieren de un manejo especial como sangre y hemoderivados, fluidos corporales, cultivos de agentes infecciosos, vacunas vencidas, cajas de petri, placas de frotis, órganos, tejidos, partes corporales.  Desechos cortopunzantes agujas, hojas de bisturí, hojas de afeitar, objetos de vidrio y cortopunzantes desechables.  Desechos especiales frascos de antibióticos y sachett de medicamentos 2. COMPETENCIAS    Identifica y aplica las normas básicas de bioseguridad en laboratorio de microbiología. Investiga la metodologías correcta para la eliminación de los residuos generados en el laboratorio. Aplica la metodología correcta para la eliminación de los residuos generados en el laboratorio microbiología. 4

Residuos Jeringa con sangre Hojas de bisturí Cajas petri cultivadas Papel de escritorio Tiras reactivas de orina Frasco con muestra Aguja hipodérmica Infeccioso Cortopunzante Comunes 5 . Esquematizar un mapa cognitivo en forma personalizado de manejo de residuos. Realizar un mapa conceptual sobre normas de bioseguridad. 3. Normas de bioseguridad. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA: Dos periodos de 50 minutos 5. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños 6. 2. Clasifique los residuos.3. MATERIALES   Manual de Higiene y seguridad en Microbiología. 4.

2. Es cierto que muchos materiales se comparten con otros laboratorios. COMPETENCIAS  Describe y dibuja el material empleado en las prácticas de microbiología. Ejemplo: el caso de un mechero.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. INSTRUMENTOS. de las muestras y del ambiente. 2 MATERIALES E INSTRUMENTOS DE LABORATORIO EMPLEADOS EN MICROBIOLOGIA 1. sin embargo en microbiología se le da un uso especial porque el objetivo es diferente. Por todo ello es necesario reconocer cada uno de los materiales que son utilizados en laboratorio de Microbiología y reconocer el uso que se le da en el mismo. MATERIALES. requiriendo de unos cuidados especiales ya que se debe trabajar en condiciones que se evite la contaminación del operario.  Reconoce el uso correcto de la material y equipo en las prácticas de microbiología. que se utiliza para esterilizar. REACTIVOS Y EQUIPOS Entre los materiales que se suelen emplearse con mayor frecuencia en el laboratorio de microbiología se encuentran:                    Portaobjetos Cubreobjetos Tubos de ensayo Tubos de Hemólisis o Kant Cajas Petri Asas bacteriológicas Matraces erlermeyer Pipetas Lavadores o Frascos lavadores Vidrios de reloj Gradillas Varillas de tinción Frascos goteros Probetas Embudos Morteros Bastones o Varillas de vidrio Espátula de Drigalski Pinzas de traspaso Entre los instrumentos que se suelen encontrar en el laboratorio de microbiología se encuentran: 6 . 3. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO El trabajo en un laboratorio de Microbiología es significativamente diferente al de otros laboratorios.

 Señalar los usos de cada uno de los materiales a utilizar en el laboratorio de Microbiología.  Descripción ordenada de cada uno de estos y realizar el correspondiente dibujo. 5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos.Indique el uso y realice el dibujo que falta de instrumentos MATERIALES Portaobjetos USOS cada uno de los materiales e DIBUJO Cubreobjetos Tubo de ensayo 7 .  Procedimientos de lavado. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños. 6. secado y protección de los mismos.           Microscopios Centrifugas Autoclave Hornos de calor seco (Estufas) Incubadoras Baños de agua Cámara de anaerobiosis Refrigeradores y congeladores Campana flujo laminar Mecheros de alcohol y gas Balanzas 4. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1..

ira divina o castigo. impureza moral.. 8 .Tubos de hemolisis Caja petri Pipetas graduadas Vasos de precipitado Vidrio de reloj 2.¿Qué otros tipos de materiales e instrumentos de laboratorio utilizados en Microbiología se pueden añadir a los ya enunciados? 3.. 4. la posición de los astros o los hígados de algunos animales. El médico lo primero que debía hacer era diagnosticar al paciente identificando cuál de los 6000 posibles demonios era el responsable del problema. Curiosa. que también podía identificarse como pecado. palabra de origen asirio.Cite tipo de microscopios los mas empleados en el diagnostico microbiológico.. que no llamativa. CURIOSIDADES Mesopotamia. es la concepción sobrenatural de la enfermedad. A la enfermedad se le denominaba Shêrtu. con técnicas adivinatorias como los vuelos de algunas aves.Esquematicé un microscopio e identifique sus partes.

se logra mediante métodos químicos sobre superficies u objeto inanimados( mobiliario.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. ESTERILIZACIÓN: Es un proceso por el que se eliminan todas las formas de vida microbiana (Microorganismos patógenos y no patógenos). DESINFECCIÓN. desinfección y esterilización. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO: Un aspecto importante en el control de las infecciones son los principios que rigen la limpieza. DESINFECCIÓN: Es un proceso por el que se destruyen microorganismos patógenos. pero no siempre todos los microorganismos y esporas. del personal sanitario a los pacientes o a la inversa es una prioridad en todos los centros sanitarios. Lograr una buen asepsia y antisepsia es 9 . ANTISEPSIA : es la creación de un medio disgenesico que obra por destrucción de los microorganismos o impidiendo su desarrollo. incluso las esporas bacterianas. instrumental). Evitar la transmisión de microorganismos potencialmente patógenos ya sea entre enfermos. ASEPSIA Y ANTISEPSIA 1. Por lo que es indispensable conocer estos conceptos para entender mas claramente en que momento usamos desinfectantes. se logra por medios físicos y químicos (Oxido de Etileno). 3 ESTERILIZACIÓN. antisépticos o esterilizantes. equipamiento. ASEPSIA: significa ausencia o privación de todos los gérmenes patógenos o no.

quemaduras. Su concentración debe estar entre 0. manos).5 al 1. 10 .75%. Yodo: Es reconocido como un excelentes antiséptico pero puede genera irritación de la piel. Clorhoxylenol: Sustancia fenólica con un sustituto halógeno su eficacia es buena aunque su mayor fortaleza esta en su poca absorción a través de la piel. Clorhexidina: Preparaciones de gluconato de clorhexidina. Posee un periodo de inicio acción intermedio y un efecto residual prolongado. Actividad optima cuando se diluyen con agua al concentraciones de 60 a 90%. n-propanol o combinaciones de dos productos en concentraciones de 65 al 90%. aniones inorgánicos y orgánicos. SUSTANCIAS QUIMICAS EMPLEADAS EN ASEPSIA Y ANTISEPSIA De acuerdo con las especificaciones de la FDA las sustancias que se utilizan como agentes anti-microbianos son: Alcoholes + glicerina: La mayoría de las soluciones con base alcohólica utilizan isoprophanol. Alcoholes: Alcohol etílico y isopropilico.3 y 3. etanol. no sirve para eliminar la suciedad.2 al 2% actúa como antimicrobiano. heridas.0%. Posee el tiempo de inicio acción más rápido. mucosas. Se inhibe por surfactantes no iónicos. suturas etc. La antisepsia por su baja toxicidad se utiliza para la destrucción de microorganismos presentes en las superficie cutaneomucosa ( piel.fundamental para cualquier procedimiento bacteriológico o quirúrgico básico como curaciones de heridas. Se debe hacer lo posible para evitar contaminación microbiana que llegaría a perjudicar al paciente así como el éxito en la identificación del microorganismo causante de infección. muestran una actividad antimicrobiana rápida de amplio espectro contra bacterias virus y hongos. en concentraciones del 0. Triclosán: Sustancia no iónica que al ser integrada en jabones en concentración de 0. Las soluciones yodadas se presentan como una alternativa pero requieren una concentración de 8% en jabones y del 10% en soluciones desinfectantes. Seis (6) horas.

deberán ser descontaminados. 11 . disminuye la flora transitoria (flora que se adquiere por contacto con objetos contaminados).CATEGORIA DE MATERIALES De acuerdo al nivel de riesgo de infección. Lavado Antiséptico: Elimina la flora transitoria y disminuye la flora residente (flora que habita normalmente en piel). Solo se cepillan las manos. LAVADO DE MANOS Lavado Higiénico: Es el que se realiza diariamente de forma casera. pueden ser estériles o desinfectados en alto grado. cepillo y agua. Deben ser estériles. Se emplea solución jabonosa antiséptica. los materiales se clasifican en:  Elementos críticos: Nivel de riesgo alto.  Elementos No Críticos: Tiene contacto con la piel sana. son elementos que van a entrar en contacto con el torrente circulatorio o áreas del cuerpo a través de una cirugía. Se realiza con agua y jabón.  Elementos Semicríticos: Tienen contacto con las mucosas sanas.

Lavado Quirúrgico: Elimina la flora transitoria y disminuye la flora residente (flora que habita normalmente en piel). Se emplea solución jabonosa antiséptica. METODOS DE ESTERILIZACION Incineración Flama directa (fuego) Aire caliente (estufa) Vapor de agua Calor seco Ebullición Calor húmedo Metodos fisicos Pasteurización Tindalización Rayos UV Radiaciones Rayos Gamma Filtración Métodos químicos Oxido de etileno 12 . Se cepilla el antebrazo y el codo. cepillo y agua.

 Controles Químicos: Son más precisos. FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA DESINFECCION         Los factores que intervienen en la desinfección son: La Temperatura El tipo de microorganismo La concentración del Antiséptico o Desinfectante La presencia de Materia Orgánica El Tiempo El pH La Naturaleza de la superficie a desinfectar 2. Estas bolsas se colocan conjuntamente con el material a esterilizar. desinfección.  Controles Biológicos: Son los más exactos. Son cintas que cambian de color con la correcta esterilización. Reloj. y luego de finalizado el proceso de esterilización se cultivan. asepsia y antisepsia. Ej: Termómetro. Son bolsas selladas que contienen microorganismos. 13 .  Reconoce los métodos de esterilización y su aplicación dependiendo el caso.CONTROLES DE ESTERILIZACION Estos controles son necesarios para cerciorarnos de la correcta esterilización del material:  Controles Físicos: Son los más simples y menos precisos. pero lleva más tiempo realizarlos. Manómetro. COMPETENCIAS  Identifica las características de esterilización.

espátulas de vidrio. 14 . etc. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños  Flama directa Se realiza colocando un poco de alcohol en un recipiente junto con el material que debe ser de metal (pinzas. pinzas. polvos termoestables. material metálico como tijeras. 5. Aire caliente Esto se realiza en los Hornos Pasteur a temperaturas superior a los 180ºC por hora y media. tijeras. 3.).  Realiza la limpieza y preparación de la piel o lugar en el cual se desee realizar una toma de muestra bacteriológica o un procedimiento quirúrgico básico. Explica como intervienen los factores ambientales en la desinfección. Se pueden esterilizar pipetas. REACTIVOS                     Autoclave de Chamberland Alcohol Mechero Bunsen Asas bacteriológicas Pinzas Cajas Petri Papel madera o papel sábana Hilo de caña Pipetas Tubos de ensayo Algodón Matraz erlenmeyer Recipiente para el flameado Jabón desinfectante Cepillo de uñas Hervidor de agua Pinza de traspaso Alcohol Alcohol yodado Autoclave 4. etc. hasta que el filamento del asa tome color Rojo vivo.  Realiza asepsia de las manos por medio del lavado y cepillado usando técnicas adecuadas. De atrás hacia delante. luego se deja enfriar el material para su utilización. se flamea con un mechero de alcohol o Bunsen. bisturíes. espéculos. Para esterilizar el asa bacteriológica. MATERIAL.  Realiza la esterilización del material bacteriológico por flameado. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos. Se enciende el alcohol y se deja el fuego hasta que se consuma. varillas de vidrio.

Encender el autoclave y calentar hasta la salida de un chorro continuo de vapor de agua por la válvula de escape. Esperar que la presión del manómetro marque 0. Cuando se alcance la Temperatura deseada por ejemplo 121ºC. regular la temperatura del autoclave. (para eliminar el aire residual). pinzas. Se debe colocar agua en el fondo de la caldera.Calor húmedo Para esto se utiliza el autoclave. Este método de utiliza para disminuir el número de microorganismos patógenos. Ebullición Tomar un recipiente y llenar con agua. Abrir la válvula de escape para asegurarse de que no hay presión en el autoclave. Dejar hervir el agua por 30 minutos. hisopos de algodón. Se emplea principalmente para lácteos. Abrir el autoclave y retirar el material esterilizado. porque la presión elevada podría proyectar la tapa y el agua caliente hasta el exterior. medios de cultivos. PRECAUCION No abrir nunca la válvula de escape del autoclave antes de que enfríe. jugos y cerveza Tindalización Se conoce como la esterilización fraccionada y consiste en aplicar temperaturas correspondientes a 90ºC y 100ºC por un tiempo. Esto se realiza tres veces. En autoclave se pueden esterilizar: material de vidrio. La temperatura y el tiempo de pasteurización dependen del microorganismo patógeno más resistente que se quiera destruir. luego incubar y al día siguiente otra vez el mismo proceso. manteniendo la misma por 15 a 20 minutos. como en lámparas que se puede colocar en una habitación o 15 . Dispensar los medios de cultivo en el material de laboratorio. Cerrar la válvula de escape. sustancias oleosas liquidas. con riesgo para el operador. Pasteurización Este método fue descubierto por Louis Pasteur en 1860 y se emplea para algunos líquidos termolábiles que no se pueden someter a temperaturas elevadas porque el calor desnaturaliza sus componentes. además los líquidos podrían entrar en ebullición expulsando los tapones de algodón y mojarlos. Concluida la esterilización. Posteriormente apagar y dejar enfriar.V puede ser letal sin embargo no atraviesa eficazmente el vidrio debido a esto se lo utiliza en pocas situaciones. Adaptar la tapa y ajustar los tornillos para asegurar el cierre hermético del autoclave. Acomodar el material en la cesta metálica. etc. materiales metálicos. proceder a colocar el material que se desee esterilizar ejemplo: agujas y jeringas de vidrio. Uso de radiaciones Se utiliza radiación U. mangos de bisturí. Verificar si el orificio de escape está abierto. etc. apagar el autoclave y dejar enfriar espontáneamente. pijamas médicos. La radiación U.V y radiación ionizante como por ejemplo: la gamma.

Como es muy toxico luego de su ciclo de esterilización se debe dejar el material esterilizado airear en cámara por 8 horas antes de ser empleado. Tiene gran poder de penetración y no produce calor por lo que se pueden esterilizar materiales plásticos. Enjuagar el jabón con abundante agua haciendo que esta escurra de las manos hacia los codos. Lavado de manos Proceder al lavado de manos con agua y jabón antiséptico y con cepillo de uñas. jeringas de plástico. Se debe tener cuidado en el manejo de radiación U. Enjuagar las manos con alcohol y dejar que se evapore.V. ¿Cuál mecanismo de acción del calor sobre los microorganismos? 2. La radiación gamma es excelente porque penetra profundamente los objetos. con esta radiación se pueden esterilizar en frío antibiótico. debe ser esterilizados en un recipiente y se deja hervir. 6. suturas. los dedos. Se debe comenzar por el centro del lugar a limpiarse. solución yodada. Toxinas bacterianas. se combina con el agua dando etilenglicol (Producto toxico). Oxido de Etileno Es un gas reactivo. inflamable. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. sondas. La operación deberá repetirse dos veces. mercurio-cromo. El material como por ejemplo: jeringas. incoloro. Repetir tres veces. etc.en una campana de seguridad biológica. merthiolate. las uñas así como el antebrazo. refregarse en forma ordenada el dorso. Filtración Se emplea cuando la sustancia a esterilizar son alteradas en sus propiedades físicas y químicas si son sometidas a la acción del calor. Limpieza de la piel del paciente Lavar con agua y jabón Pincelar con alcohol. Una vez que llegó a la temperatura de ebullición dejar el material 20 minutos y posteriormente se sacará el mismo con una pinza. para terminar en los bordes. Se repite por 3 minutos. Por ejemplo: Enzimas. la palma. agujas y material de metal. ¿De qué forma se esterilizarían mejor los siguientes materiales 16 . hormonas. Esterilización del material Colocar en recipiente agua ¾ y agregar el material que se va esterilizar.

destruido ante la conjura de tantos necios. . incluidas las autopsias. y transportaban gérmenes cadavéricos en sus manos. . . en 1847. Semmelweis probó su teoría: los médicos debían lavarse las manos cuidadosamente con agua clorada antes de ingresar en la sala de partos. En cambio. Había nacido en Buda. pasaron muchos años hasta que la comunidad médica aceptó su hallazgo. Austria: el Allgemeines KrankenHaus. Una de ellas era lavarse las manos. en el manicomio de Viena. "Allí. Semmelweis observaba con preocupación que las parturientas atendidas por los estudiantes avanzados de medicina y médicos recién recibidos tenían una tasa de mortalidad diez veces mayor que las asistidas por parteras y personal idóneo. el doctor Jacob Kolletschka. Semmelweis descubrió en la autopsia que había demasiada similitud entre el corte de dedo sufrido por su maestro durante una autopsia y la fiebre puerperal que lo preocupaba.". Cuando murió uno de sus profesores. inició su práctica obstétrica en el hospital general de Viena. CURIOSIDADES Se llamaba Ignaz Phillipp Semmelweis. en 1818. Semmelweis fue atacado. Murió antes de los 50 años. la ciudad húngara ubicada a la derecha del Danubio. Pese a la eficacia de la medida. Desde su punto de vista cual es la importancia del lavado de manos. y siempre debido a la misma causa: una infección llamada fiebre puerperal o septis neonatal." .MATERIAL Pipeta vidrio Caja petri de vidrio Medios de solido Guantes cultivo MÉTODO DE ESTERILIZACIÓN TIPO DE CALORTIEMPO OTROS (ESPECIFIQUE) Jeringas desechables Ropa quirúrgica Pinzas quirúrgicas tijeras Hojas de bisturí Mango de bisturí Asa bacteriológica Sala de quirófano 3. ¿Como intervienen cada uno de los factores implicados en la desinfección? 4. 17 . "Y así llegó a la conclusión de que la mayor mortalidad en la sala de parturientas atendida por los estudiantes avanzados de medicina y médicos recién recibidos era causada porque hacían entrenamiento en todo el hospital. A mediados del siglo. las parteras y auxiliares tenían ya un cierto entrenamiento en partos y tomaban precauciones. cuando era un joven médico. marginado y sus colegas lo tomaron por demente.

18 .

técnicas que resultan muy útiles en el diagnóstico precoz de determinadas enfermedades infecciosas. la identificación y la determinación de la sensibilidad a los antimicrobianos de los microorganismos causales de estas enfermedades. orina recolectada por punción suprapúbica). INDICACIONES PREVIAS A LA RECOLECCION DE MUESTRAS Si el paciente recolectara la muestra las instrucciones deberán ser claras (Mejor si son por escrito).. orina. liquido sinovial.  Etiquetar correctamente las muestras. son dos aspectos que diferencian el laboratorio de microbiología de otros laboratorios clínicos. tracto genital.  Toda muestra deberá manejarse como si fuera potencialmente patógena. Zonas corporales que poseen flora normal comensal (boca. tracto gastrointestinal. sondas o bolsas recolectoras) Tabla 1.  La recolección deberá realizarse antes de comenzar la terapia antimicrobiana o suspender el antibiótico 48-72 horas antes de la toma de muestra. Una parte importante de esa actividad consiste en el aislamiento. liquido peritoneal.  Una vez recolectada la muestra deberá ser llevada al laboratorio lo más rápido posible. etc.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. punción de medula ósea. líquidos estériles. orina recolectada por micción media. nariz. tracto respiratorio inferior. estrechamente relacionados con el éxito del informe final.). tracto respiratorio superior.  Cuando se realice cultivo y aislamiento de gérmenes el material deberá recolectarse en recipientes estériles. La gran diversidad de muestras clínicas y de métodos diagnósticos aplicables. Cuando se realiza cultivo de material deberá conocerse el lugar de donde proviene la muestra: Zonas corporales que normalmente son estériles (sangre. piel.  La muestra deberá ser representativa del proceso infeccioso. 4 TOMA DE MUESTRA 1. liquido cefalorraquídeo. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO La actividad que desarrolla el laboratorio de microbiología está orientada esencialmente al diagnóstico microbiológico de las enfermedades infecciosas.Muestras clínicas recomendadas para el diagnóstico microbiológico de las infecciones más comunes 19 . Por tanto es necesario tener un protocolo que permita la adecuada manipulación de muestras que serán enviadas a otro laboratorio y los resultados obtenidos estarán. Otra parte importante de la actividad de un laboratorio de microbiología consiste en la detección de anticuerpos. liquido pleural. antígenos y ácidos nucleícos en diversas muestras (sangre.

Tipo de infección Bacteriemia Endocarditis Infección del catéter Pericarditis Sistema nervioso central Meningitis Abscesos cerebrales Tracto respiratorio Faringoamigdalitis Sinusitis Otitis media Otitis externa Neumonia Muestra Hemocultivos Hemocultivos/Válvula/Verrugas Catéter IV. sonda) Líquido peritoneal Aspirados de abscesos Líquido biliar Heces/Biopsia Aspirado duodenal intestinal/ Exudado conjuntival/raspado Raspado corneal Líquido intraocular Orina obtenida mediante punción Diagnóstico de bacteriuria suprapúbica anaerobios y de ITU en niños Tracto genital Úlceras genitales Nódulos genitales Uretritis Vulvovaginitis Raspado de la úlcera Aspirado del nódulo Exudado uretral Exudado vaginal por Detección de S.agalactiae (también exudado rectal ) 20 . punción transtraqueal. broncoaspirado Líquido pleural. muestras obtenidas por fibrobroncoscopia. víricas Detección de S. abscesos Nasal aspirados de Diagnóstico tosferina/Infecc. piel conexión del catéter pericatéter. Comentarios Infecciones cardiovasculares y asociadas a dispositivos intravasculares (IV) Líquido pericárdico LCR Aspirados de abscesos Exudado faríngeo Aspirado sinusal Timpanocentesis Exudado oído externo Esputo. punción transtorácica aspirativa. aureus No válidos los exudados nasales Empiema y abscesos pulmonares Nasofaríngeo Infecciones oculares Conjuntivitis Queratitis Endoftalmitis Infecciones gastrointestinales Diarrea Infecciones intraabdominales Peritonitis Abscesos intraperitoneales y abscesos viscerales Colecistitis Tracto urinario Infección urinaria Orina (micción media.

Útiles para la toma de muestra de conexiones de catéteres intravasculares. Cuando la torunda es de madera. Útiles para la investigación de virus Pueden inhibir a Chlamydia spp. La muestra se introduce en el interior de una bolsa impermeable en cuyo interior se introduce un catalizador y un generador de hidrógeno y CO2. infecciones gangrenosas. broncoaspirados. escamas cutáneas y uñas Torundas de alginato cálcico Torundas de dacrón Torundas de algodón Torundas para exudados nasofaríngeos Tubos estériles de boca ancha Tubos estériles Tubos estériles con transporte o conservante medio de Placas de Petri estériles Tabla 5. Útiles para la investigación de Chlamydia spp. Mantiene la población bacteriana durante 48 h a temperatura ambiente sin necesidad de refrigeración. U. abscesos cutáneos. Pueden ser tóxicas para N. biopsias. Tubo con conservante (ácido bórico–formiato de sodio) para orinas.Tipo de infección Cervicitis Prostatitis Piel y tejidos blandos Impétigo.Sistemas de transporte para la investigación de microorganismos anaerobios Sistema de transporte Torundas con sistemas de transporte específicos para anaerobios Viales y tubos con atmósfera anaerobia Comentarios Bolsas de anaerobiosis Contienen un medio de transporte semisólido con un agente reductor y un indicador.. Torundas flexibles que emplean alambre en lugar de madera Útiles para el transporte de orinas. catéter telescopado. y Bordetella spp. lavados broncoalveolares. aspirados de abscesos y heridas Tubo estéril con medio de transporte (Cary Blair) para enteropatógenos en heces. heces. Líquidos estériles. puede inactivar a virus del grupo Herpes e interferir con las pruebas de identificación de Ureaplasma. Son menos recomendables las muestras tomadas con torundas Líquido sinovial Biopsia ósea o exudado 4. Cualquier coloración azul de dicho medio indica exposición al aire. celulitis. erisipela. esputos. urealyticum y virus. foliculitis.. Tubo con fijador (alcohol polivinílico) para parásitos en heces. Útiles para pelos. gonorrhoeae.Sistemas de transporte para la investigación de microorganismos aerobios Sistema de transporte Torundas con medio de transporte Comentarios Torundas en tubos de plástico con medio de transporte que mantiene un pH favorable y previene la desecación de la muestra. heridas y quemaduras Hueso y articulaciones Artritis Osteomielitis Muestra Exudado endocervical Secreción prostática Comentarios Acompañada de orina pre y post masaje prostático Preferiblemente aspirados tomados con jeringa y biopsias de tejido. 21 . úlceras.

luego enjuagar con agua.  Realiza una solicitud correcta para el examen microbiológico 3. Para ello hay que eliminar el aire y taponar la aguja con un tapón de goma. METODOLOGIA Trabajo en grupos pequeños Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales El recipiente donde se recolecta la muestra deberá ser estéril y no tocar la piel del paciente.Jeringa para la obtención de aspirados Cuando no se dispone de ninguno de los sistemas anteriores o bien la cantidad de muestra es mínima. manteniendo separados los labios mayores y comenzar e evacuar en el inodoro. REACTIVOS Y EQUIPOS                Bajalenguas Hisopos de algodón estériles Portaobjetos Mechero de alcohol Pinzas metálicas Colorantes de Gram Varillas de Tinción Guantes Jeringas y agujas Tubos de hemólisis Gradillas Anticoagulante Algodón Alcohol Ligaduras 4. recoger el chorro medio después de eliminar los 22 . puede utilizarse la misma jeringa con la que se ha obtenido. MATERIALES. 2. colocar tampón vaginal. 5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos.  Conoce los diferentes medios de transporte y técnicas de envío de muestras al laboratorio microbiológico. COMPETENCIAS  Emplea y describe métodos y técnicas para la obtención adecuada de muestras para el diagnóstico microbiológico. Orina chorro medio Mujeres: limpiar la previa higiene zona con agua y jabón. En el caso de niños se podrá emplear bolsa recolectora.

Enjuagar o hacer gárgaras con agua antes de la recolección. extraer dos al 70 % o con alcohol muestras. de brazo izquierdo yodado. Liquido Se realiza mediante cefalorraquídeo (LCR) punción lumbar (PL) entre la 3º y 4º vertebra lumbar. 4.Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales primeros ml de orina. En un paciente con onicomicosis. Cite 2 medios de transporte y explicar cuando los usaría. úvula y dientes. y derecho. secreciones con hisopo o en tubo. con la ayuda de un baja lengua. Varones: limpiar el glande con agua y jabón. o recolectar las secreciones con ayuda de un hisopo. ¿Cómo se toma la muestra? 2. obtenerlo por tos profunda. ¿En que tipo de fluido no encontramos ningún microorganismo contaminante (Zonas normalmente estériles)? 23 . no extraer más de tres muestras en un periodo de 24 horas. Vías respiratorias La muestra El paciente debe inferiores recolectada es Esputo. Tracto genital Limpiar la piel antes Se puede aspirar el femenino de la recolección. sin tocar paladar. previa asepsia de la zona con alcohol yodado 6. En un paciente con sospecha de fiebre reumática. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. Orina por Punción Punción en la vejiga. Vías respiratorias Enjuagar con agua Pasar el hisopo por la superiores faringe antes de la recolección de faringe posterior y las la muestra amígdalas. suprapúbica previa asepsia de la región con alcohol yodado Sangre venosa Limpiar el sitio de Extraer sangre durante punción venosa con alcohol el episodio febril. Tracto genital Limpiar el glande con Recolectar las masculino agua y jabón. luego enjuagar con agua. líquido o se puede realizar un hisopado. recoger el chorro medio después de eliminar varios mL. retraer la piel del glande. que muestras requiere y que exámenes solicita y por que? 3.

le propinaban al enfermo una tunda de palos para castigar "la carne pecadora". Elabore una orden de laboratorio para extracción de una muestra para un examen microbiológico CURIOSIDADES Europa renacentista: G. médico y poeta verones. El nombre sífilis proviene del griego siph: cerdo y philus: amor. Tratamiento de la sífilis en las tinas de sudación utilizadas por Jean Fernel Se dice que el gángster (delincuente) americano Al Capone. después de la cura.5. G. llego a la conclusión de que las infeccones se debían a la transmisión de contagios por cuerpos diminutos que estaán vivos y siempre producen la misma enfermedad. el líder comunista Vladimir Lenin. el filósofo alemán Friedrich Nietzsche y el rey Enrique VIII de Inglaterra. y califico a la sífilis como el mal francés. si a esto añadimos que en algunos hospitales. entre otras personalidades famosas. llamado Syphilo.Fracastoruis (1478-1553). En una zona normalmente estéril cuantos microorganismos son necesarios encontrar para indicar infección. 6. tenían algo en común: padecían de sífilis 24 . que fue castigado por los dioses a sufrir una terrible enfermedad Por esta época y durante mucho tiempo se utilizaron los mercuriales para el tratamiento de la sífilis. Este tratamiento mató más enfermos que la propia sífilis.Fracastoruis (1478-1553). Recuerda al personaje de una obra.

anticuerpos y funciones de defensa del huésped mediada por células. En general se genera una respuesta humoral y celular y la medición de una u otra puede ser la base para diagnosticar una infección. Ante esta situación se genera una respuesta inmune de defensa. es un área amplia que cubre la investigación y aplicación clínica. El estudio de la inmunología. La inmunidad Humoral (mediada por anticuerpos). en especial en lo que se refiere a la inmunidad y enfermedad. 5 TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS 1. Es así que en una infección también se puede detectar el inmunocomplejo utilizando estas técnicas que poseen una ventaja. que según el tipo de antígeno se producen anticuerpos de diferente especificidad. el tiempo de realización es menor al de las técnicas de cultivo tradicional. puede medirse o valorarse por hipersensibilidad dérmica. Es necesario remarcar que en otros casos es imprescindible el cultivo. USOS DE LAS TECNICAS INMUNOLOGICAS   Diagnosticar infecciones Identificar microorganismos 25 . Una vez que el microorganismo ha ingresado y ha establecido el sitio primario de infección. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO Una infección provoca respuesta inmunológica dirigida contra uno o mas antígenos. Esta infección puede ser transitoria o persistente. La reacción de antígeno y anticuerpo da lugar al complejo antígeno-anticuerpo el cual es revelado por alguna técnica inmunológica. La inmunidad celular (Mediada por LiT). en las infecciones intervienen principalmente dos inmunoglobulinas IgG (Infecciones crónicas) e Ig M (Infecciones agudas).UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. se refiere a antígenos. se propagan de manera directa a través de los tejidos o por medio del sistema linfático a la corriente sanguínea.

Marcadores tumorales TECNICAS INMUNOLOGICAS Reacción de Precipitación: Se forma un inmunocomplejo que con el tiempo aumenta de tamaño. Ej: Reacción de VDRL Medios Gelosados: Aquí el antígeno o anticuerpo esta en un soporte (agar-agar. HIV. Ej: Huddleson y Widal Aglutinación Indirecta: Aquí se emplean transportadores a los que se adhiere en la superficie el antígeno particulado insoluble. Hepatitis Reacción de Enzimoinmunoánalisis: Se emplea una enzima como marcador que actúa sobre un sustrato que desarrolla color. IgG. Esos transportadores pueden ser: Partículas de Látex: como ejemplo encontramos: Reacción de Proteína C reactiva. Ej: TIF Toxoplasmosis (Test de inmunofluorescencia para Toxoplasmosis). HCG. HA para Toxoplasmosis. IgE. IgAs Reacción de Aglutinación: Aquí el antígeno esta en forma de partícula. agarosa. que sirve para cuantificar IgM. Estas reacciones de precipitación se pueden llevar a cabo en dos medios: Medios Líquidos: En donde el anticuerpo se encuentra en solución. Marcadores tumorales. Hormonas. Ej: Hormonas. Marcadores tumorales. IgE. volviéndose insoluble en el medio dando lugar a un precipitado.   Tipificar sangre para bancos de sangre Tipificar tejidos de trasplantes Cuantificar inmunoglobulinas. HIV. etc. factor reumatoideo. IgD. Determinación de Grupo sanguíneo y factor. poliacrilamida). Tambien podemos tener Inhibición de la Hemoaglutinación: Ej: AELO (Antiestreptolisina O) Hemoaglutinación Reverso pasiva: Donde a los hematíes se adhiere el anticuerpo. Ej: IDRS (inmunodifusión radial simple. Ej: HA para Chagas. Ej: Hepatitis Reacción de Inmunofluorescencia: Se basa en la fluorescencia que emiten determinadas sustancias y se observa en un microscopio especial de fluorescencia. TIF Chagas Reacción de Radioinmunoanálisis: En esta reacción el antígeno se marca con un radioisotopo. Puede ser: Aglutinación directa: El antígeno particulado insoluble es aglutinado por el anticuerpo. Hepatitis 26 . Hematíes: En este caso la técnica recibe el nombre de Hemoaglutinación. Ej: Hormonas. IgA.

TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5. MATERIALES.Pruebas cutáneas: la hipersensibilidad dérmica ofrece ciertas ventajas al determinar con facilidad y rapidez la respuesta inmunológica (celular) del individuo a la exposición previa a los agentes infecciosos.METODOLOGIA 27 . Ej: Virus de Herpes simple 2. Realiza e interpreta la determinación de grupo y factor sanguíneo. REACTIVOS Y EQUIPOS  Portaobjetos  Guantes  Jeringas y agujas  Lancetas  Gradillas  Anticoagulante  Algodón  Alcohol  Ligaduras  Reactivo de PCR  Reactivo de Grupo y Factor sanguíneo  Mondadientes 4. Conoce otras pruebas empleadas en el diagnostico microbiológico. COMPETENCIAS      Identifica las pruebas serológicas empleadas en el diagnóstico microbiológico . Realiza e interpreta la determinación de proteína C reactiva. Analiza el fundamento de las pruebas serológicas. 3.

     Trabajo en grupos pequeños Determinación de Grupo y Factor Determinación de PCR latex Determinación de Factor Reumatoideo Determinación de la prueba de widal 6. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES: 1. explique brevemente el fundamento y ¿cual su utilidad para el diagnostico? 2. Dibuje los tipos de ELISA. En qué consiste y la utilidad del inmunoblot o Western Blot. 4. 28 . Explique el fundamento de la Reacción de polimerasa en cadena y sus aplicaciones. 3. Cite la diferencia entre las pruebas de PCR y PCR latex.

29 . Gell y Coombs. La tipo II. La hipersensibilidad tipo I. La tipo III es una hipersensibilidad por inmunocomplejos. o inmediata. es aquella que está mediada por anticuerpos tipo IgE. está mediada por anticuerpos citotóxicos. 6 HIPERSENSIBILIDAD Las reacciones de hipersensibilidad pueden ser de diferentes tipos. III y IV. La tipo IV está mediada por células. o citotóxica.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. II. en 1963. las clasificaron en cuatro: hipersensibilidades tipo I.

etc)( ver figuras)ejemplos choque anafiláctico por inyección de fármacos y picaduras de insectos. da lugar a una reactividad de la que deriva lesión tisular u orgánica de grado variable. Esta respuesta anómala. El primer contacto (que ocurre al principio de la vida del individuo) es un hecho preliminar necesario e induce a la sensibilización a ese alergeno (antígeno especifico) y es así como los siguientes contactos con dicho antígeno desencadenaran una respuesta hipersensible. por la liberación de mediadores vasoactivos (Histamina. Esta hipersensibilidad esta mediada principalmente por IgE. después del primer contacto con un antígeno o alergeno. La hipersensibilidad tipo III: son reacciones producidas por la existencia de inmunocomplejos (IgG) circulantes que al depositarse en los tejidos provocan activación 30 . eritroblastosis fetal.Alergia o Hipersensibilidad denota un estado en el cual una respuesta inmunitaria desencadena reacciones exageradas o inapropiadas que son nocivas para el huésped. Como ya lo mencionamos se describen cuatro tipos de reacciones de Hipersensibilidad: Tipo I (Inmediata o Anafilactica). anemia hemolítica autoinmune. Sx de Goodpasture. Tipo III (Por Complejo Inmunitario) y Tipo IV (Retardada). cuadros de alergia como fiebre del heno y asma. La Hipersensibilidad Tipo I se manifiesta por reacciones tisulares a los minutos que el alergeno se combina con el anticuerpo compatible en las personas que previamente se han sensibilizado frente a el. Tipo II (Por Citotoxica). ejemplos reacciones transfusionales. Serotonina. Activando al sistema del complemento. Tromboxanos. exagerada o inapropiada. La unión de la IgE fijadas a las superficies de los mastocitos y el Alergeno desencadena la reacción de hipersensibilidad. Prostaglandinas. La hipersensibilidad tipo II: son reacciones medidas por la interacción de anticuerpos IgG e IgM preformados con antígenos presentes en la superficie celular y otros componentes tisulares. Son típicas en un individuo dado. miastenia gravis.

observando la formación de un habón (no debe sangrar). Enumere tres mediadores liberados en la anafilaxia. introducir en la dermis. La hipersensibilidad tipo IV son reacciones de hipersensibilidad celular o mediada por células.  Observar. enfermedad de addison. Como en la prueba de la tuberculina o reacción de Mantoux.  Con el bisel arriba. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5. CURIOSIDADES 31 . 3. enfermedad del suero. Lápiz dérmico Prednisona o Dexametasona 4.1 ml del preparado. Indique la importancia de la Reacción de Tuberculina. inyectar el antígeno.de la fagocitosis y daño tisular por activación del complemento. 2. MATERIALES. COMPETENCIAS  Identifica los diferentes tipos de hipersensibilidad.  Realiza la prueba de hipersensibilidad a la penicilina. pudiendo producir una lesión inmunológica por efecto tóxico directo o a través de la liberación de sustancias solubles como las linfocinas. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. 6. 2.  Marcar con un lápiz dérmico el sitio de la inyección. causadas por linfocitos T sensibilizados al entrar en contacto con el antígeno especifico. rechazo de tejidos trasplantados. Interpretar e informar los resultados de la prueba. REACTIVOS Y EQUIPOS        Penicilina sódica o potásica o ampicilina Jeringas Agujas de bisel corto #26 Mechero de alcohol Regla transparente calibrada en mm. reacción de Arthur. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños  Cargar en la jeringa de insulina 0. dermatitis de contacto.  Interpreta los resultados de la prueba. artritis reumatoidea.  Seleccionar el sitio de la inyección intradérmica (tercio externo y superior del antebrazo). Compare y contraste las características de las cuatro tipos de hipersensibilidad y cite un ejemplos de cada uno de ellos. como sucede en lupus eritematoso sistémico. 3.

el horror a los ajos. En el proceso también se produce una fuerte anemia. Algunas de estas porfirinas sufren una reacción química por acción de la luz. lo que provoca una gran debilidad y una palidez casi cadavérica. los huesos y los dientes. también puede estar relacionada con esta enfermedad. En definitiva. etc. y que necesitan sangre fresca para reponer la suya. como consecuencia. Pero. puede llegar a provocar desagradables mutilaciones en las que orejas y nariz aparecen como corroídas. las encías descarnadas. Además. los vampiros no son personajes reales. seres pálidos que necesitan vivir en la oscuridad porque la luz solar les debilita y corroe hasta destruirlos. los labios deformados. en fases avanzadas. si parece que algunas de sus características se han inspirado en una enfermedad muy humana: la porfiria. Que tipo de hipersensibilidad presentan???? 32 . esta enfermedad reúne muchas de las características que se atribuyen a los vampiros.Sobre los vampiros En la porfiria. unos compuestos químicos denominados porfirinas se acumulan en la piel. la piel se recubre de ampollas y los huesos se corroen. En definitiva. Esto. lo que da lugar a nuevos compuestos que destruyen los tejidos cercanos y. otra de las características típicas de los vampiros. Parece que los ajos contienen sustancias químicas que pueden provocar que el efecto de la luz se haga más intenso y se agrave la enfermedad.

por Edward Jenner. En Bolivia el PAI funciona desde el año 1979. El pueblo chino desde el siglo X practicaba la variolización con el fin de inocular el virus de la viruela de un enfermo a una persona susceptible. Se reemplazó la vacuna DPT con la pentavalente y la antisarampionosa fue remplazada por la tripe viral que inmuniza contra sarampión. De acuerdo con la composición química de las vacunas se clasifican de la siguiente forma: 33 . La inmunización o vacunación es una forma de activar al sistema inmune.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. rubéola y parotiditis. Actualmente el incremento de la cobertura de vacunación en muy bueno.ha introducido nuevas vacunas en el esquema tradicional. en ese entonces la cobertura de menores de un año no alcanzaba ni al 20%. Las vacunas fueron descubiertas en 1771. Esta exposición ayuda al sistema inmune a reconocer y crear defensas contra esa enfermedad de forma eficiente. de la palabra latina vacca y este invento fue el inicio de todo un programa de inmunizaciones que ha permitido prevenir muchas enfermedades mortales o incapacitantes y evitar grandes epidemias. pero que a los trabajadores de las granjas hacia inmunes hacia esta enfermedad. expone a las personas a una cantidad muy pequeña y muy segura de algunos agentes infecciosos (microorganismos vivos atenuados o muertos o sus fracciones antigénicas ) causantes de enfermedad. El programa ampliado de inmunizaciones de segunda generación. en Bolivia el último caso registrado ocurrió en 1987. a partir de experimentos que realizaba con gérmenes del a viruela que atacaba a la vaca. en Bolivia . cuando budistas indios ingerían veneno de serpiente con el fin de ser inmune a sus efectos. 7 INMUNIDAD ACTIVA ARTIFICIAL: VACUNAS CONOCIMENTO TEORICO REQUERIDO En el intento de encontrar protección real contra las enfermedades infecciosas que diezmaban pueblos enteros a hecho que el hombre con el tiempo des cubra un medio de protección. El individuo genera su propia respuesta inmune frente a un estímulo antigénico. Los datos más antiguos son del siglo VII. Debido al beneficio que causan las vacunas. existe a nivel mundial un programa ampliado de vacunación (PAI) liderado por la OMS. alcanzando por ejemplo un 98% con la vacuna antisarampionosa y un 93% con la BCG. De ahí proviene su nombre. En 1994 se ha certificado la erradicación de la poliomielitis en la América.

Las contraindicaciones de la vacunación: 34 .

35 .

Defina los siguientes conceptos: vacunas de gérmenes vivos atenuados. COMPETENCIAS     Explica los principios de la vacunación. Conoce las características de los diferentes tipos de vacunas. Cite las vías de administración de las vacunas. gérmenes muertos. muertos o partes antigénicas de los mismos. Cite ejemplos de vacunas con microorganismos atenuados. 5. 36 . En un paciente de dos meses con infección de vías aéreas superiores y fiebre de 38ºC que vacunas aplicaría. MATERIALES    Diapositivas Data display Auditórium 4. 3. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. 4. Cite vacunas contra virus y bacterias mas empleadas. Comprende el esquema de inmunización del PAI y las No gratuitas. Determina la importancia de la cadena de frio para el manejo de las vacunas. Justifique. 2. 7. Que entiende usted por la cadena de frio.2. vacuna recombinante. 6. Cuáles son las vacunas que se deben aplicar a niños menores de un año. toxoide. METODOLOGIA  Trabajos en grupos pequeños 6. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5. 3.

37 .

su efecto principal es inhibir la decapsidacion viral o el desensamblaje del virion durante la endocitosis. Los fármacos antivíricos actualmente disponibles sólo son eficaces mientras el virus se esta replicando. Rimantadina: derivado 4-10 veces mas activa que la amantadina. Los fármacos antivirales actúan por los siguientes mecanismos: : Ciclo viral Inhibición de la penetración en la célula huésped Amantadina: actúa sobre el virus influenza A. 8 SEMINARIO: ANTIVIRALES 1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO Dado que los virus comparten muchos de los procesos metabólicos de la célula huésped es difícil encontrar fármacos que sean selectivos para el patógeno. Sin embargo existen algunas enzimas que son especificas de los virus que son los posibles objetivos para el tratamiento medico. Inhibe la formación de la cubierta . 38 .UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. Oseltamivir: inhibe la actividad de neuraminidasa del virus influenza.

Vidarabina.TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA 39 . 3. mínimos efectos indeseados. lo que contribuye a un estado de resistencia viral. La gammaglobulina: Neutraliza los virus Inhibidores de la DNA polimerasa: Aciclovir un derivado de la guanosina. utilizado en la infección por citomegalovirus (CMV). inhibe selectivamente la ADN polimerasa vírica. eficaz contra herpesvirus. Docosanol: interfiere en la fusion del VHS-1 y VHS-2 a las membranas de las celulas del huesped. también un derivado de la guanosina. un derivado de la adenosina.Zanamivir:inhibe la actividad de neuraminidasa del virus influenza. Se usan en combinación con inhibidores de la transcriptasa inversa. eficaz contra herpes simple y varicela zoster. es bastante eficaz en la infección por CMV. 2. puede tener efectos indeseados graves. Los inhibidores de las proteasas (por ejemplo indinavir y saquinavir) inhiben la escisión de la proteína inerte traducida en las proteínas funcionales y estructurales. se usan en la infección de la hepatitis B y pueden ser útiles en el SIDA. enzimas que inhiben el ARNm vírico. Tribavirin es similar a la guanosina y se cree que interfiere con la síntesis del ARNm vírico. es relativamente eficaz en VIH/ SIDA. Imiquimod: modificador de la respuesta inmunitaria topica. Foscarnet inhibe la ADN polimerasa vírica fijándose al lugar de unión del pirofosfato. Interferón alfa: producen proteínas efectoras en las células expuestas. COMPETENCIAS  Identifica los principales antivirales y sus usos mas frecuentes. (DDI) se usan en combinación con inhibidores de las Inhibición de los acontecimientos postraducción. Inhibidores de la transcriptasa inversa ITI: Zidovudina (AZT) . se fosforila y posteriormente se incorpora en el ADN vírico impidiendo su replicación. Es de uso topico. inducen en los ribosomas de las células del huésped. especialmente en pacientes con SIDA y retinitis por CMV. es un inhibidor relativamente selectivo de la ADN polimerasa vírica. Ganciclovir. MATERIAL Y EQUIPOS: Data display 4.  Indica los principales mecanismos de acción de los antivirales. puede tener efectos indeseados graves. puede inhibir a muchos virus ADN y ARN. un análogo de timina. Inmunomoduladores Los interferones. Zalcitabina y didanosina proteasas.

METODOLOGIA Seminario.Dos periodos de 50 minutos 5. Complete el siguiente cuadro: Enfermedad Herpes virus 1 Citomegalovirus Influenza A Mononucleosis Infecciosa Dengue Hepatitis A Hepatitis B Fiebre amarilla Paludismo Varicela Tratamiento 40 . Investigue cual es el tratamiento para un paciente con SIDA? 3. 6. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. Investigue cual es el tratamiento para un paciente portador de VIH? 2.

medidas profilácticas. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO: Los métodos utilizados para reconocer las infecciones por virus humanos pueden clasificarse en DIRECTOS e INDIRECTOS. El virus como partícula viral (microscopía electrónica). etc. En algunas infecciones virales es posible detectar la presencia de antígenos virales previamente al desarrollo de la seroconversión.). ROTAVIRUS Generalidades: Es un género de virus perteneciente a la familia Reoviridae. B y C) infectan a los humanos. De ellas la Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es la más utilizada. En la última década se han desarrollado una serie de técnicas para el diagnóstico viral basadas en la detección de ácidos nucleicos. La presencia de ácidos nucleicos virales (PCR. una necesidad. El desarrollo de quimioterapia antiviral efectiva es responsable de esta tendencia que hace de la identificación rápida. Gran parte de las técnicas utilizadas en el diagnóstico clínico se basan en pruebas serológicas que identifican anticuerpos específicos frente a diversas proteínas antigénicas.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA PRÁCTICA NO. Enzimoinmunoanálisis (EIA). Test de Aglutinación. La presencia de antígenos virales (técnicas inmunológicas): Inmunofluorescencia (IF). Se han identificado siete grupos. 9 DIAGNOSTICO VIRAL 1. METODOS DIRECTOS Son aquellos que detectan:     El virus como agente infeccioso (aislamiento viral). etc. la tendencia en el diagnóstico virológico consiste en emplear nuevas y más sensibles tecnologías de detección de antígenos y de investigación de ácidos nucleicos con el propósito de lograr un diagnóstico viral más rápido. siendo esta prueba la única evidencia de la exposición al virus cuando no existe aumento de los niveles de anticuerpos circulantes (pacientes inmunodeprimidos). El 41 . existen circunstancias en las cuales son necesarias pruebas que detecten precozmente la infección viral (tratamientos específicos. Igualmente la detección del genoma viral puede favorecer la precocidad del diagnóstico viral y su confirmación.). según persigan demostrar la presencia del virus o de alguno de sus constituyentes (antígeno o genoma viral) o bien la respuesta de anticuerpos específicos por parte del huésped en el curso de la infección. tres de los cuales (Grupo A. En el momento actual. Sin embargo. sensible y específica de los virus.

Suele remitir en un plazo de 12 a 60 horas sin complicaciones. durante el parto o en la lactancia a través de la leche materna (vía perinatal o materno-infantil). Transmisión vertical de una madre que vive con el VIH a su hijo a través de la placenta durante el embarazo. Desde su ingreso a la célula hospedadora. Es la causa mas importante de gastroenteritis infantil en todo el mundo. periodo de incubación de 24 a 48 hrs. Diagnostico: Detección de anticuerpos por AGLUTINACIÓ indirecta O ELISA en materia fecal y PCR-TI. la cadena simple de ácido ribonucleico (ARN) viral comienza su transformación en una doble cadena de ácido desoxirribonucleico (ADN) por acción de la enzima transcriptasa inversa que forma parte del virus. La enfermedad está caracterizada por vómito y diarrea acuosa de 3 a 8 días. Transmisión:   Transmisión sexual: relaciones sexuales sin condón con personas que viven con el VIH-SIDA. La integrasa y otros cofactores actúan para que el ADN del virus se fusione con el ADN de la célula hospedadora a través de la transcripción en el genoma de la célula que aloja al virus. causando el 90% de las infecciones. Existen dos tipos del VIH. o herirse con instrumentos cortopunzantes infectados (vía parenteral o sanguínea). HIV El virus de inmunodeficiencia adquirida forma parte del género Lentivirus. Después de este proceso. Este vía incluye entre otras cosas transfusiones de sangre o productos de sangre.  No se transmite el VIH por:    Compartir baños con otras personas o con personas que viven con el VIH-SIDA Compartir alimento y utensilios de cocina con otras personas o con personas que viven con el VIH-SIDA Picadura de insectos 42 . Transmisión: Fecal-ora. uso de agujas contaminadas y tatuajes. los rotavirus pueden producir hasta un millón de fallecimientos al año. o bien. En los países subdesarrollados.grupo A es el más común. Es responsable de aproximadamente el 50% de todos los casos de diarrea infantil que requieren hospitalización a causa de deshidratación en Estados Unidos. Estos constituyen un grupo dentro de la familia Retroviridae. Transmisión a través de sangre y productos de sangre contaminados con el virus. la diarrea es acuosa color amarillento con aspecto a yogurt. que el virus comience a replicarse activamente y libere viriones capaces de infectar otras células. los lentivirus reaccionan de dos maneras posibles: puede ocurrir que el virus entre en latencia mientras la célula infectada continúa en funciones. De esta manera. la célula queda infectada por el virus. llamados VIH-1 y VIH-2.

besos Abrazar.    Por compartir vida social Por compartir el ambiente del trabajo Abrazos. apretón de manos. besar o cuidar de una persona que vive con el VIH-SIDA 43 .

El Elisa posee un periodo de ventana 44 .Diagnóstico: Detección de anticuerpos por Elisa. Un resultado positivo debe ser corroborado con Westen blot o Reacción de Polimerasa en cadena.

de ARN Virus Periodo Incubación Edad Niños y adultos jóvenes Familia a la que Picornaviridae. IgG e IgM por ELISA HBc. Virus de ADN Parenteral. Leche materna. No Existencia Vacuna Diagnostico serológico de Si Determinación de Determinación de Determinación de IgG e IgM para HVA HBsAg. Leche materna.de 3 meses (periodo en el cual el virus esta en el paciente y no puede ser detectado en el laboratorio) por ello ante un accidente con un elemento cortante o relación sexual insegura se deberá corroborar un nuevo test a los 3 meses. B y C Las Hepatitis virales son enfermedades generalizadas que afectan primariamente al hígado.  Elige adecuadamente el método diagnósticos correspondiente para cada enfermedad viral. síntomas gastrointestinales tales como nauseas y vómitos e ictericia. Saliva Si HEPATITIS C (HCV) 14-120 días Adultos Flaviviridae.  Diferencia las características clínicas básicas de algunas enfermedades virales. 4. 45 . METODOLOGIA Trabajo en grupos pequeños con socialización. IgG e IgM para HVC por ELISA HBeAg. durante la enfermedad aguda se observan lesiones histopatológicas idénticas. sexual. Trasplacentaria. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5. Estos virus producen una inflamación aguda del hígado que trae como consecuencia una enfermedad clínica caracterizada por fiebre. 3. HEPATITIS A. COMPETENCIAS  Identifica los métodos de diagnostico para las enfermedades virales. sexual. MATERIALES Data display. HBcAg. Anti HBe por ELISA 2. Anti HBs. Virus de ARN Vía de Transmisión Fecal-oral Parenteral. . HEPATITIS A (HAV) de 15-45 días HEPATITIS B (HBV) 50-180 días 15-29 años Hepadnaviridae. Independientemente del tipo de virus. Trasplacentaria. pertenece Heparnavirus.

Se dosaron los siguientes antigenos y anticuerpos para hepatitis e interprete el cuadro: HBsAg + + + - Anti HBs +/++ Anti HBc (IgG) + +++ +/+++ - Anti HBc (IgM) + +/- HBeAg + + - Anti Hbe + 4. Interprete el siguiente cuadro: 46 . Cite y explique en que consisten las pruebas de presunción y de confirmación para el diagnostico del VIH. Referente al diagnóstico ¿Qué tipo de acciones deberíamos tomar y por qué? 2. el mismo proviene de una mujer seropositiva para HIV. En el caso de sospechar que un neonato esté infectado. 3. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES Resuelva los siguientes cuadros clínicos: 1.6.

CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO Las infecciones fúngicas se denominan micosis y en general pueden dividirse en: infecciones superficiales (que afectan piel.  Candidiasis sistémica oportunista  Meningitis  Endocarditis criptocosica  Aspergilosis pulmonar oportunista  Mucormicosis rinocerebral  Blatomicosis  Histoplasmosis  Coccidiomicosis  Paracoccidiomicosis Micosis superficiales pueden clasificarse en:  Dermatomicosis ( piel. esto ha conllevado un aumento del predominio de infecciones oportunistas. uñas causados por dermatofitos) los mas comunes tiñas  Candidiasis superficial (boca. vagina o piel) 47 . hasta tiempos recientes. pero apenas significan un riesgo para la vida. pero. las infecciones superficiales graves eran relativamente raras y las sistémicas eran muy raras (al menos en zonas relativamente climáticas frías y templadas). Otro es el aumento en el número de pacientes con una respuesta inmune reducida debido al SIDA o a la acción de fármacos inmunodepresores o antineoplásicos. o están presentes en el ambiente. 10 SEMINARIO: MICOSIS 1. En estas zonas una infección fúngica normalmente consiste en un pie de atleta o candidiasis oral o vaginal que producen molestias. Sin embargo. pelo.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. Clasificación de las micosis: Micosis sistémicas. cuero cabelludo o membranas mucosas) y sistémicas (que afectan tejidos mas profundos y órganos). Uno de los motivos es la utilización generalizada de antibióticos de amplio espectro que eliminan o merman poblaciones bacterianas no patógenas que normalmente compiten con los hongos. uñas. en los últimos 30 años ha habido un constante aumento en la incidencia de infecciones fúngicas sistémicas secundarias graves. es decir infecciones por hongos que normalmente son inocuos o que se eliminan rápidamente en personas inmunocompetentes. Muchos de los hongos que pueden producir micosis viven en asociaciones con humanos como comensales.

tópica Oral. itraconazol. itraconazol. Oral. 2. flucitosina. itraconazol Un azol tópico o itraconazol oral Un azol tópico o itraconazol oral. itraconazol. itraconazol Anfotericina. IV IV. amorolfina tópica. fluconazol Anfotericina. Oral. fluconazol oral. nistatina tópica Un azol o nistatina tópica. itraconazol Anfotericina. tópica bifonazol. flucitosina Anfotericina. tópica Oral. terbinafina oral Itraconazol oral Terbinafina oral. fluconazol Anfotericina. COMPETENCIAS  Comprender las principales infecciones fúngicas. ketoconazol. tópica. itraconazol Anfotericina.4 alfa desmetilasa dependiente de citocromo p-450 Enzimas lanosterol Unen al ergosterol y daño oxidativo de la membrana Unen al ergosterol y daño oxidativo de la membrana Inhibición del esculeno Enzimas lanosterol Vía Oral Oral. 48 . clotrimazol Fluconazol Anfotericina B Nistatina Terbinafina Itraconazol Mecanismos de acción Inhibición síntesis de DNA y RNA Inhibe enzimas lanosterol 1. fluconazol oral. Un azol tópico.Mecanismos de acción de los antimicóticos Antifúngico Flucitosina Ketoconazol. Un azol tópico. fluconazol Anfotericina. IV Indicaciones de los antifúngicos: Enfermedad Infección sistémica Candidiasis sistémica Criptococosis (meningitis) Aspergilosis sistémica Blastomicosis Histoplasmosis Coccidiomicosis Paracoccidiomicosis Mucormicosis Esporotricosis diseminada Infecciones superficiales Dermatomicosis Pie de atleta Tiña cutánea Tinea capitis Onicomicosis Candidiasis Piel Boca Vagina Candidiasis mucocutánea crónica Fármacos Anfotericina. fluconazol Anfotericina. Fluconazol.

Indicar los principales mecanismos de acción de: Fármaco Azoles Nistatina Terbinafina Flucitosina Anfotericina Mecanismo de acción 2. MATERIALES    Laminas teñidas Aceite de inmersión Microscópios 4. de las siguientes micosis: Patología Medicamento Vía de administración Tiempo de tratamiento Complicaciones Pie de atleta Pitiariaisis Tiña corporis Rubeola 49 . METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños . 3.  Observación en microscopio de las láminas teñidas.- Cite el tratamiento incluya medicamento. 5. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. via de administración . 6.TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos. tiempo de tratamiento y complicaciones. Identifica los fármacos antifúngicos en las principales infecciones fúngicas.

Tiña capis Histoplasmosis Onicomicosis Esporotricosis Criptococosis Mucormicosis Candidiasis oral Carbunco 50 .

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