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microbiologia 1

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UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

MICROBIOLOGIA I

GUIA PRACTICA DE LABORATORIO

COMPETENCIAS ESPECÍFICAS A SER EVALUADAS EN LA CLASE PRÁCTICA DE MICROBIOLOGIA I
SABER EVALUACIÓN DE PRÁCTICA Revisión y aplicación de conocimiento previo (examen) previo) SABER HACER SER NOTA FINAL Nota Examen parcial parcial

ESTUDIANTES

Calidad de Desarrollo trabajo de la (mapas, práctica. casos (Uso Puntualidad clínicos, correcto resolución de de Material) cuestionario)

Disciplina (Uso de vestimenta adecuada)

PUNTAJE

0 - 9

0-3

1

1

1

15

15

30

1

UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. 1

NORMAS BASICAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO: Las medidas de seguridad en laboratorios son un conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la salud de los que allí se desempeñan frentre a los riesgos propios derivados de la actividad, para evitar accidentes y contaminaciones tanto dentro de su ámbito de trabajo, como hacia el exterios. En ese entendido la OMS se dio a la tarea de estudiar estos riesgos y clasificar a los laboratorios, para luego dar recomendaciones en lo que se refiere a normas de bioseguridad. Los laboratorios se clasifican en :

2

Nuestro laboratorio se encuentra en el grupo de riesgo 1, nivel básico, en este nivel la OMS recomienda que es necesario para minimizar riesgos :  El Símbolo internacional de peligro biológico debe estar colocado en las puertas de los lugares donde se manipulen microorganismos que puedan resultar patógenos al humano.  Sólo se podrá entrar a las zonas de trabajo personal autorizado.  Las puertas del laboratorio deben mantenerse cerradas.  No se autoriza la entrada de niños en las zonas de trabajo del laboratorio. Protección personal:  Se usarán en todo momento batas o guardapolvos especiales para el trabajo de laboratorio.  Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que pueden entrañar contacto directo o accidental con sangre, líquidos corporales y otros materiales potencialmente infecciosos. Una vez utilizados los guantes, se retiraran de forma aséptica y a continuación se lavarán las manos.  El personal y los estudiantes se lavaran las manos después de manipular muestras y antes de salir del laboratorio.  Se usarán lentes y caretas de seguridad para protección de los ojos y el rostro de salpicaduras, impactos y fuentes de radiación ultravioleta artificial.  Está prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio.  Debe usarse calzado cerrado, prohibido entrar con sandalias.  Está prohibido comer, fumar o beber en el laboratorio. 3

 No debe almacenarse comida para consumo humano en el laboratorio. Procedimientos:  Está estrictamente prohibido pipetear con la boca.  No se colocará ningún material en la boca ni se pasará la lengua por las etiquetas.  Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que se reduzca al mínimo la formación de aerosoles .  Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales infecciosos se comunicarán al supervisor del laboratorio. Se mantendrá un registro escrito de estos accidentes e incidentes.  Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de todos los derrames.  Los líquidos contaminados deberán descontaminarse ( por medios químicos o físicos) antes de eliminarlos por el colector de saneamiento. Zonas de trabajo del laboratorio:  El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el trabajo.  Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo derrame de material potencialmente peligroso y al final de cada jornada de trabajo.  Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser descontaminados antes de eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar.  Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que impidan el paso de artrópodos. Clasificación de los residuos:  Desechos generales o comunes son aquellos que no presentan un riesgo adicional para la salud humana y el ambiente y que no requieren de un manejo especial como papel, cartón, plásticos, restos de alimentos.  Desechos peligrosos o especiales son aquellos que presentan un riesgo para la salud humana y el ambiente y que requieren de un manejo especial como sangre y hemoderivados, fluidos corporales, cultivos de agentes infecciosos, vacunas vencidas, cajas de petri, placas de frotis, órganos, tejidos, partes corporales.  Desechos cortopunzantes agujas, hojas de bisturí, hojas de afeitar, objetos de vidrio y cortopunzantes desechables.  Desechos especiales frascos de antibióticos y sachett de medicamentos 2. COMPETENCIAS    Identifica y aplica las normas básicas de bioseguridad en laboratorio de microbiología. Investiga la metodologías correcta para la eliminación de los residuos generados en el laboratorio. Aplica la metodología correcta para la eliminación de los residuos generados en el laboratorio microbiología. 4

Esquematizar un mapa cognitivo en forma personalizado de manejo de residuos. 4. 3. Normas de bioseguridad.3. 2. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA: Dos periodos de 50 minutos 5. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños 6. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. Realizar un mapa conceptual sobre normas de bioseguridad. MATERIALES   Manual de Higiene y seguridad en Microbiología. Residuos Jeringa con sangre Hojas de bisturí Cajas petri cultivadas Papel de escritorio Tiras reactivas de orina Frasco con muestra Aguja hipodérmica Infeccioso Cortopunzante Comunes 5 . Clasifique los residuos.

de las muestras y del ambiente. 2. Ejemplo: el caso de un mechero. Por todo ello es necesario reconocer cada uno de los materiales que son utilizados en laboratorio de Microbiología y reconocer el uso que se le da en el mismo. 2 MATERIALES E INSTRUMENTOS DE LABORATORIO EMPLEADOS EN MICROBIOLOGIA 1. INSTRUMENTOS. requiriendo de unos cuidados especiales ya que se debe trabajar en condiciones que se evite la contaminación del operario. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO El trabajo en un laboratorio de Microbiología es significativamente diferente al de otros laboratorios. sin embargo en microbiología se le da un uso especial porque el objetivo es diferente. MATERIALES. que se utiliza para esterilizar. Es cierto que muchos materiales se comparten con otros laboratorios.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No.  Reconoce el uso correcto de la material y equipo en las prácticas de microbiología. COMPETENCIAS  Describe y dibuja el material empleado en las prácticas de microbiología. 3. REACTIVOS Y EQUIPOS Entre los materiales que se suelen emplearse con mayor frecuencia en el laboratorio de microbiología se encuentran:                    Portaobjetos Cubreobjetos Tubos de ensayo Tubos de Hemólisis o Kant Cajas Petri Asas bacteriológicas Matraces erlermeyer Pipetas Lavadores o Frascos lavadores Vidrios de reloj Gradillas Varillas de tinción Frascos goteros Probetas Embudos Morteros Bastones o Varillas de vidrio Espátula de Drigalski Pinzas de traspaso Entre los instrumentos que se suelen encontrar en el laboratorio de microbiología se encuentran: 6 .

CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños.. 6.  Señalar los usos de cada uno de los materiales a utilizar en el laboratorio de Microbiología.  Descripción ordenada de cada uno de estos y realizar el correspondiente dibujo.Indique el uso y realice el dibujo que falta de instrumentos MATERIALES Portaobjetos USOS cada uno de los materiales e DIBUJO Cubreobjetos Tubo de ensayo 7 . TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos. 5.           Microscopios Centrifugas Autoclave Hornos de calor seco (Estufas) Incubadoras Baños de agua Cámara de anaerobiosis Refrigeradores y congeladores Campana flujo laminar Mecheros de alcohol y gas Balanzas 4.  Procedimientos de lavado. secado y protección de los mismos.

4.Cite tipo de microscopios los mas empleados en el diagnostico microbiológico. impureza moral.¿Qué otros tipos de materiales e instrumentos de laboratorio utilizados en Microbiología se pueden añadir a los ya enunciados? 3.Esquematicé un microscopio e identifique sus partes.Tubos de hemolisis Caja petri Pipetas graduadas Vasos de precipitado Vidrio de reloj 2. El médico lo primero que debía hacer era diagnosticar al paciente identificando cuál de los 6000 posibles demonios era el responsable del problema. 8 . la posición de los astros o los hígados de algunos animales. que no llamativa. CURIOSIDADES Mesopotamia. con técnicas adivinatorias como los vuelos de algunas aves... Curiosa. A la enfermedad se le denominaba Shêrtu. palabra de origen asirio.. que también podía identificarse como pecado. es la concepción sobrenatural de la enfermedad. ira divina o castigo.

del personal sanitario a los pacientes o a la inversa es una prioridad en todos los centros sanitarios. 3 ESTERILIZACIÓN. antisépticos o esterilizantes. ASEPSIA: significa ausencia o privación de todos los gérmenes patógenos o no. pero no siempre todos los microorganismos y esporas. Lograr una buen asepsia y antisepsia es 9 .UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. se logra por medios físicos y químicos (Oxido de Etileno). instrumental). equipamiento. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO: Un aspecto importante en el control de las infecciones son los principios que rigen la limpieza. DESINFECCIÓN: Es un proceso por el que se destruyen microorganismos patógenos. ESTERILIZACIÓN: Es un proceso por el que se eliminan todas las formas de vida microbiana (Microorganismos patógenos y no patógenos). incluso las esporas bacterianas. Por lo que es indispensable conocer estos conceptos para entender mas claramente en que momento usamos desinfectantes. DESINFECCIÓN. Evitar la transmisión de microorganismos potencialmente patógenos ya sea entre enfermos. ASEPSIA Y ANTISEPSIA 1. ANTISEPSIA : es la creación de un medio disgenesico que obra por destrucción de los microorganismos o impidiendo su desarrollo. desinfección y esterilización. se logra mediante métodos químicos sobre superficies u objeto inanimados( mobiliario.

0%. Su concentración debe estar entre 0. Posee el tiempo de inicio acción más rápido. Clorhexidina: Preparaciones de gluconato de clorhexidina. suturas etc. en concentraciones del 0. heridas. manos). Alcoholes: Alcohol etílico y isopropilico. quemaduras. mucosas.fundamental para cualquier procedimiento bacteriológico o quirúrgico básico como curaciones de heridas. Las soluciones yodadas se presentan como una alternativa pero requieren una concentración de 8% en jabones y del 10% en soluciones desinfectantes. Seis (6) horas. Se inhibe por surfactantes no iónicos. SUSTANCIAS QUIMICAS EMPLEADAS EN ASEPSIA Y ANTISEPSIA De acuerdo con las especificaciones de la FDA las sustancias que se utilizan como agentes anti-microbianos son: Alcoholes + glicerina: La mayoría de las soluciones con base alcohólica utilizan isoprophanol.3 y 3. Yodo: Es reconocido como un excelentes antiséptico pero puede genera irritación de la piel. Se debe hacer lo posible para evitar contaminación microbiana que llegaría a perjudicar al paciente así como el éxito en la identificación del microorganismo causante de infección.5 al 1.2 al 2% actúa como antimicrobiano. La antisepsia por su baja toxicidad se utiliza para la destrucción de microorganismos presentes en las superficie cutaneomucosa ( piel. muestran una actividad antimicrobiana rápida de amplio espectro contra bacterias virus y hongos. etanol. aniones inorgánicos y orgánicos. no sirve para eliminar la suciedad. 10 . Posee un periodo de inicio acción intermedio y un efecto residual prolongado. n-propanol o combinaciones de dos productos en concentraciones de 65 al 90%. Actividad optima cuando se diluyen con agua al concentraciones de 60 a 90%.75%. Clorhoxylenol: Sustancia fenólica con un sustituto halógeno su eficacia es buena aunque su mayor fortaleza esta en su poca absorción a través de la piel. Triclosán: Sustancia no iónica que al ser integrada en jabones en concentración de 0.

disminuye la flora transitoria (flora que se adquiere por contacto con objetos contaminados). deberán ser descontaminados. cepillo y agua. Se emplea solución jabonosa antiséptica.CATEGORIA DE MATERIALES De acuerdo al nivel de riesgo de infección. Solo se cepillan las manos. 11 . Deben ser estériles.  Elementos Semicríticos: Tienen contacto con las mucosas sanas. Lavado Antiséptico: Elimina la flora transitoria y disminuye la flora residente (flora que habita normalmente en piel). pueden ser estériles o desinfectados en alto grado.  Elementos No Críticos: Tiene contacto con la piel sana. los materiales se clasifican en:  Elementos críticos: Nivel de riesgo alto. Se realiza con agua y jabón. LAVADO DE MANOS Lavado Higiénico: Es el que se realiza diariamente de forma casera. son elementos que van a entrar en contacto con el torrente circulatorio o áreas del cuerpo a través de una cirugía.

METODOS DE ESTERILIZACION Incineración Flama directa (fuego) Aire caliente (estufa) Vapor de agua Calor seco Ebullición Calor húmedo Metodos fisicos Pasteurización Tindalización Rayos UV Radiaciones Rayos Gamma Filtración Métodos químicos Oxido de etileno 12 . cepillo y agua.Lavado Quirúrgico: Elimina la flora transitoria y disminuye la flora residente (flora que habita normalmente en piel). Se emplea solución jabonosa antiséptica. Se cepilla el antebrazo y el codo.

Son cintas que cambian de color con la correcta esterilización. Ej: Termómetro. Estas bolsas se colocan conjuntamente con el material a esterilizar. y luego de finalizado el proceso de esterilización se cultivan. Manómetro. Reloj. COMPETENCIAS  Identifica las características de esterilización. desinfección. 13 . Son bolsas selladas que contienen microorganismos.  Controles Biológicos: Son los más exactos.CONTROLES DE ESTERILIZACION Estos controles son necesarios para cerciorarnos de la correcta esterilización del material:  Controles Físicos: Son los más simples y menos precisos.  Controles Químicos: Son más precisos. pero lleva más tiempo realizarlos. asepsia y antisepsia.  Reconoce los métodos de esterilización y su aplicación dependiendo el caso. FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA DESINFECCION         Los factores que intervienen en la desinfección son: La Temperatura El tipo de microorganismo La concentración del Antiséptico o Desinfectante La presencia de Materia Orgánica El Tiempo El pH La Naturaleza de la superficie a desinfectar 2.

De atrás hacia delante. Se pueden esterilizar pipetas. Para esterilizar el asa bacteriológica.  Realiza asepsia de las manos por medio del lavado y cepillado usando técnicas adecuadas. 14 . 5. material metálico como tijeras. 3. se flamea con un mechero de alcohol o Bunsen.  Realiza la esterilización del material bacteriológico por flameado. etc. hasta que el filamento del asa tome color Rojo vivo. MATERIAL. luego se deja enfriar el material para su utilización. espátulas de vidrio. REACTIVOS                     Autoclave de Chamberland Alcohol Mechero Bunsen Asas bacteriológicas Pinzas Cajas Petri Papel madera o papel sábana Hilo de caña Pipetas Tubos de ensayo Algodón Matraz erlenmeyer Recipiente para el flameado Jabón desinfectante Cepillo de uñas Hervidor de agua Pinza de traspaso Alcohol Alcohol yodado Autoclave 4. espéculos. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños  Flama directa Se realiza colocando un poco de alcohol en un recipiente junto con el material que debe ser de metal (pinzas. pinzas. bisturíes. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos. Se enciende el alcohol y se deja el fuego hasta que se consuma. polvos termoestables.  Realiza la limpieza y preparación de la piel o lugar en el cual se desee realizar una toma de muestra bacteriológica o un procedimiento quirúrgico básico. Explica como intervienen los factores ambientales en la desinfección. etc. varillas de vidrio. Aire caliente Esto se realiza en los Hornos Pasteur a temperaturas superior a los 180ºC por hora y media.). tijeras.

como en lámparas que se puede colocar en una habitación o 15 .V puede ser letal sin embargo no atraviesa eficazmente el vidrio debido a esto se lo utiliza en pocas situaciones. La radiación U. Cerrar la válvula de escape. Abrir la válvula de escape para asegurarse de que no hay presión en el autoclave. hisopos de algodón. proceder a colocar el material que se desee esterilizar ejemplo: agujas y jeringas de vidrio. Abrir el autoclave y retirar el material esterilizado.V y radiación ionizante como por ejemplo: la gamma. Encender el autoclave y calentar hasta la salida de un chorro continuo de vapor de agua por la válvula de escape. Uso de radiaciones Se utiliza radiación U. Esto se realiza tres veces. manteniendo la misma por 15 a 20 minutos. mangos de bisturí. pijamas médicos. medios de cultivos. pinzas. apagar el autoclave y dejar enfriar espontáneamente. etc. PRECAUCION No abrir nunca la válvula de escape del autoclave antes de que enfríe. materiales metálicos. etc. Se emplea principalmente para lácteos. Concluida la esterilización. Cuando se alcance la Temperatura deseada por ejemplo 121ºC. Este método de utiliza para disminuir el número de microorganismos patógenos. Pasteurización Este método fue descubierto por Louis Pasteur en 1860 y se emplea para algunos líquidos termolábiles que no se pueden someter a temperaturas elevadas porque el calor desnaturaliza sus componentes. Posteriormente apagar y dejar enfriar. Dejar hervir el agua por 30 minutos. Se debe colocar agua en el fondo de la caldera. Esperar que la presión del manómetro marque 0. porque la presión elevada podría proyectar la tapa y el agua caliente hasta el exterior. Dispensar los medios de cultivo en el material de laboratorio. En autoclave se pueden esterilizar: material de vidrio. regular la temperatura del autoclave. luego incubar y al día siguiente otra vez el mismo proceso. sustancias oleosas liquidas. además los líquidos podrían entrar en ebullición expulsando los tapones de algodón y mojarlos. Adaptar la tapa y ajustar los tornillos para asegurar el cierre hermético del autoclave. La temperatura y el tiempo de pasteurización dependen del microorganismo patógeno más resistente que se quiera destruir. Acomodar el material en la cesta metálica. (para eliminar el aire residual).Calor húmedo Para esto se utiliza el autoclave. Ebullición Tomar un recipiente y llenar con agua. con riesgo para el operador. jugos y cerveza Tindalización Se conoce como la esterilización fraccionada y consiste en aplicar temperaturas correspondientes a 90ºC y 100ºC por un tiempo. Verificar si el orificio de escape está abierto.

Se repite por 3 minutos. La radiación gamma es excelente porque penetra profundamente los objetos. Filtración Se emplea cuando la sustancia a esterilizar son alteradas en sus propiedades físicas y químicas si son sometidas a la acción del calor. ¿De qué forma se esterilizarían mejor los siguientes materiales 16 . se combina con el agua dando etilenglicol (Producto toxico). etc. Como es muy toxico luego de su ciclo de esterilización se debe dejar el material esterilizado airear en cámara por 8 horas antes de ser empleado. mercurio-cromo. sondas. incoloro. suturas. Oxido de Etileno Es un gas reactivo. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. debe ser esterilizados en un recipiente y se deja hervir.V. merthiolate. Una vez que llegó a la temperatura de ebullición dejar el material 20 minutos y posteriormente se sacará el mismo con una pinza. Se debe tener cuidado en el manejo de radiación U. 6. con esta radiación se pueden esterilizar en frío antibiótico. ¿Cuál mecanismo de acción del calor sobre los microorganismos? 2. inflamable. El material como por ejemplo: jeringas. Se debe comenzar por el centro del lugar a limpiarse. refregarse en forma ordenada el dorso. Repetir tres veces. Lavado de manos Proceder al lavado de manos con agua y jabón antiséptico y con cepillo de uñas. Enjuagar las manos con alcohol y dejar que se evapore. jeringas de plástico. Toxinas bacterianas.en una campana de seguridad biológica. hormonas. para terminar en los bordes. Limpieza de la piel del paciente Lavar con agua y jabón Pincelar con alcohol. Enjuagar el jabón con abundante agua haciendo que esta escurra de las manos hacia los codos. Esterilización del material Colocar en recipiente agua ¾ y agregar el material que se va esterilizar. Por ejemplo: Enzimas. los dedos. las uñas así como el antebrazo. la palma. La operación deberá repetirse dos veces. Tiene gran poder de penetración y no produce calor por lo que se pueden esterilizar materiales plásticos. solución yodada. agujas y material de metal.

" . . . CURIOSIDADES Se llamaba Ignaz Phillipp Semmelweis. marginado y sus colegas lo tomaron por demente. Una de ellas era lavarse las manos. pasaron muchos años hasta que la comunidad médica aceptó su hallazgo. en 1818. A mediados del siglo. "Y así llegó a la conclusión de que la mayor mortalidad en la sala de parturientas atendida por los estudiantes avanzados de medicina y médicos recién recibidos era causada porque hacían entrenamiento en todo el hospital. En cambio. Desde su punto de vista cual es la importancia del lavado de manos. Murió antes de los 50 años. Austria: el Allgemeines KrankenHaus. cuando era un joven médico. 17 . las parteras y auxiliares tenían ya un cierto entrenamiento en partos y tomaban precauciones. Semmelweis observaba con preocupación que las parturientas atendidas por los estudiantes avanzados de medicina y médicos recién recibidos tenían una tasa de mortalidad diez veces mayor que las asistidas por parteras y personal idóneo. en el manicomio de Viena. incluidas las autopsias. "Allí. ¿Como intervienen cada uno de los factores implicados en la desinfección? 4. Semmelweis descubrió en la autopsia que había demasiada similitud entre el corte de dedo sufrido por su maestro durante una autopsia y la fiebre puerperal que lo preocupaba. inició su práctica obstétrica en el hospital general de Viena. Pese a la eficacia de la medida. Cuando murió uno de sus profesores. . el doctor Jacob Kolletschka. Semmelweis probó su teoría: los médicos debían lavarse las manos cuidadosamente con agua clorada antes de ingresar en la sala de partos.MATERIAL Pipeta vidrio Caja petri de vidrio Medios de solido Guantes cultivo MÉTODO DE ESTERILIZACIÓN TIPO DE CALORTIEMPO OTROS (ESPECIFIQUE) Jeringas desechables Ropa quirúrgica Pinzas quirúrgicas tijeras Hojas de bisturí Mango de bisturí Asa bacteriológica Sala de quirófano 3. en 1847. Había nacido en Buda. la ciudad húngara ubicada a la derecha del Danubio.". y transportaban gérmenes cadavéricos en sus manos. y siempre debido a la misma causa: una infección llamada fiebre puerperal o septis neonatal. Semmelweis fue atacado. destruido ante la conjura de tantos necios.

18 .

orina recolectada por micción media.).  Toda muestra deberá manejarse como si fuera potencialmente patógena. tracto respiratorio inferior. 4 TOMA DE MUESTRA 1. líquidos estériles.  Una vez recolectada la muestra deberá ser llevada al laboratorio lo más rápido posible.  Cuando se realice cultivo y aislamiento de gérmenes el material deberá recolectarse en recipientes estériles..  La recolección deberá realizarse antes de comenzar la terapia antimicrobiana o suspender el antibiótico 48-72 horas antes de la toma de muestra. Cuando se realiza cultivo de material deberá conocerse el lugar de donde proviene la muestra: Zonas corporales que normalmente son estériles (sangre. estrechamente relacionados con el éxito del informe final. piel.Muestras clínicas recomendadas para el diagnóstico microbiológico de las infecciones más comunes 19 . tracto gastrointestinal.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. Por tanto es necesario tener un protocolo que permita la adecuada manipulación de muestras que serán enviadas a otro laboratorio y los resultados obtenidos estarán. Una parte importante de esa actividad consiste en el aislamiento. tracto genital. orina recolectada por punción suprapúbica). nariz.  La muestra deberá ser representativa del proceso infeccioso. son dos aspectos que diferencian el laboratorio de microbiología de otros laboratorios clínicos. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO La actividad que desarrolla el laboratorio de microbiología está orientada esencialmente al diagnóstico microbiológico de las enfermedades infecciosas. etc. tracto respiratorio superior. Otra parte importante de la actividad de un laboratorio de microbiología consiste en la detección de anticuerpos. liquido sinovial. liquido pleural. orina. técnicas que resultan muy útiles en el diagnóstico precoz de determinadas enfermedades infecciosas. liquido peritoneal. Zonas corporales que poseen flora normal comensal (boca. INDICACIONES PREVIAS A LA RECOLECCION DE MUESTRAS Si el paciente recolectara la muestra las instrucciones deberán ser claras (Mejor si son por escrito). La gran diversidad de muestras clínicas y de métodos diagnósticos aplicables. antígenos y ácidos nucleícos en diversas muestras (sangre.  Etiquetar correctamente las muestras. sondas o bolsas recolectoras) Tabla 1. liquido cefalorraquídeo. la identificación y la determinación de la sensibilidad a los antimicrobianos de los microorganismos causales de estas enfermedades. punción de medula ósea.

punción transtorácica aspirativa.Tipo de infección Bacteriemia Endocarditis Infección del catéter Pericarditis Sistema nervioso central Meningitis Abscesos cerebrales Tracto respiratorio Faringoamigdalitis Sinusitis Otitis media Otitis externa Neumonia Muestra Hemocultivos Hemocultivos/Válvula/Verrugas Catéter IV. Comentarios Infecciones cardiovasculares y asociadas a dispositivos intravasculares (IV) Líquido pericárdico LCR Aspirados de abscesos Exudado faríngeo Aspirado sinusal Timpanocentesis Exudado oído externo Esputo. aureus No válidos los exudados nasales Empiema y abscesos pulmonares Nasofaríngeo Infecciones oculares Conjuntivitis Queratitis Endoftalmitis Infecciones gastrointestinales Diarrea Infecciones intraabdominales Peritonitis Abscesos intraperitoneales y abscesos viscerales Colecistitis Tracto urinario Infección urinaria Orina (micción media. abscesos Nasal aspirados de Diagnóstico tosferina/Infecc. piel conexión del catéter pericatéter. muestras obtenidas por fibrobroncoscopia. víricas Detección de S. sonda) Líquido peritoneal Aspirados de abscesos Líquido biliar Heces/Biopsia Aspirado duodenal intestinal/ Exudado conjuntival/raspado Raspado corneal Líquido intraocular Orina obtenida mediante punción Diagnóstico de bacteriuria suprapúbica anaerobios y de ITU en niños Tracto genital Úlceras genitales Nódulos genitales Uretritis Vulvovaginitis Raspado de la úlcera Aspirado del nódulo Exudado uretral Exudado vaginal por Detección de S.agalactiae (también exudado rectal ) 20 . punción transtraqueal. broncoaspirado Líquido pleural.

broncoaspirados. foliculitis. escamas cutáneas y uñas Torundas de alginato cálcico Torundas de dacrón Torundas de algodón Torundas para exudados nasofaríngeos Tubos estériles de boca ancha Tubos estériles Tubos estériles con transporte o conservante medio de Placas de Petri estériles Tabla 5. Son menos recomendables las muestras tomadas con torundas Líquido sinovial Biopsia ósea o exudado 4. U. heridas y quemaduras Hueso y articulaciones Artritis Osteomielitis Muestra Exudado endocervical Secreción prostática Comentarios Acompañada de orina pre y post masaje prostático Preferiblemente aspirados tomados con jeringa y biopsias de tejido. infecciones gangrenosas. aspirados de abscesos y heridas Tubo estéril con medio de transporte (Cary Blair) para enteropatógenos en heces. biopsias.. Útiles para pelos. Útiles para la toma de muestra de conexiones de catéteres intravasculares. celulitis. puede inactivar a virus del grupo Herpes e interferir con las pruebas de identificación de Ureaplasma. catéter telescopado. úlceras. abscesos cutáneos. gonorrhoeae. lavados broncoalveolares. Líquidos estériles. Tubo con conservante (ácido bórico–formiato de sodio) para orinas.Tipo de infección Cervicitis Prostatitis Piel y tejidos blandos Impétigo. La muestra se introduce en el interior de una bolsa impermeable en cuyo interior se introduce un catalizador y un generador de hidrógeno y CO2. Cualquier coloración azul de dicho medio indica exposición al aire. 21 . Tubo con fijador (alcohol polivinílico) para parásitos en heces. urealyticum y virus.. Cuando la torunda es de madera.Sistemas de transporte para la investigación de microorganismos aerobios Sistema de transporte Torundas con medio de transporte Comentarios Torundas en tubos de plástico con medio de transporte que mantiene un pH favorable y previene la desecación de la muestra. Torundas flexibles que emplean alambre en lugar de madera Útiles para el transporte de orinas. Útiles para la investigación de Chlamydia spp. esputos. Pueden ser tóxicas para N. heces. Mantiene la población bacteriana durante 48 h a temperatura ambiente sin necesidad de refrigeración.Sistemas de transporte para la investigación de microorganismos anaerobios Sistema de transporte Torundas con sistemas de transporte específicos para anaerobios Viales y tubos con atmósfera anaerobia Comentarios Bolsas de anaerobiosis Contienen un medio de transporte semisólido con un agente reductor y un indicador. y Bordetella spp. erisipela. Útiles para la investigación de virus Pueden inhibir a Chlamydia spp.

En el caso de niños se podrá emplear bolsa recolectora.  Realiza una solicitud correcta para el examen microbiológico 3. recoger el chorro medio después de eliminar los 22 . MATERIALES. REACTIVOS Y EQUIPOS                Bajalenguas Hisopos de algodón estériles Portaobjetos Mechero de alcohol Pinzas metálicas Colorantes de Gram Varillas de Tinción Guantes Jeringas y agujas Tubos de hemólisis Gradillas Anticoagulante Algodón Alcohol Ligaduras 4. puede utilizarse la misma jeringa con la que se ha obtenido. Para ello hay que eliminar el aire y taponar la aguja con un tapón de goma. 5.  Conoce los diferentes medios de transporte y técnicas de envío de muestras al laboratorio microbiológico. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos. colocar tampón vaginal. 2.Jeringa para la obtención de aspirados Cuando no se dispone de ninguno de los sistemas anteriores o bien la cantidad de muestra es mínima. manteniendo separados los labios mayores y comenzar e evacuar en el inodoro. COMPETENCIAS  Emplea y describe métodos y técnicas para la obtención adecuada de muestras para el diagnóstico microbiológico. luego enjuagar con agua. Orina chorro medio Mujeres: limpiar la previa higiene zona con agua y jabón. METODOLOGIA Trabajo en grupos pequeños Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales El recipiente donde se recolecta la muestra deberá ser estéril y no tocar la piel del paciente.

úvula y dientes. suprapúbica previa asepsia de la región con alcohol yodado Sangre venosa Limpiar el sitio de Extraer sangre durante punción venosa con alcohol el episodio febril. no extraer más de tres muestras en un periodo de 24 horas. con la ayuda de un baja lengua. En un paciente con onicomicosis. Vías respiratorias Enjuagar con agua Pasar el hisopo por la superiores faringe antes de la recolección de faringe posterior y las la muestra amígdalas. En un paciente con sospecha de fiebre reumática. Vías respiratorias La muestra El paciente debe inferiores recolectada es Esputo. y derecho. sin tocar paladar. extraer dos al 70 % o con alcohol muestras. 4. Tracto genital Limpiar la piel antes Se puede aspirar el femenino de la recolección. que muestras requiere y que exámenes solicita y por que? 3. de brazo izquierdo yodado. Orina por Punción Punción en la vejiga. o recolectar las secreciones con ayuda de un hisopo. ¿En que tipo de fluido no encontramos ningún microorganismo contaminante (Zonas normalmente estériles)? 23 . líquido o se puede realizar un hisopado. Liquido Se realiza mediante cefalorraquídeo (LCR) punción lumbar (PL) entre la 3º y 4º vertebra lumbar. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1.Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales primeros ml de orina. Varones: limpiar el glande con agua y jabón. ¿Cómo se toma la muestra? 2. Cite 2 medios de transporte y explicar cuando los usaría. previa asepsia de la zona con alcohol yodado 6. luego enjuagar con agua. obtenerlo por tos profunda. retraer la piel del glande. Tracto genital Limpiar el glande con Recolectar las masculino agua y jabón. secreciones con hisopo o en tubo. Enjuagar o hacer gárgaras con agua antes de la recolección. recoger el chorro medio después de eliminar varios mL.

6. y califico a la sífilis como el mal francés. El nombre sífilis proviene del griego siph: cerdo y philus: amor. si a esto añadimos que en algunos hospitales. después de la cura. que fue castigado por los dioses a sufrir una terrible enfermedad Por esta época y durante mucho tiempo se utilizaron los mercuriales para el tratamiento de la sífilis. tenían algo en común: padecían de sífilis 24 . G. Elabore una orden de laboratorio para extracción de una muestra para un examen microbiológico CURIOSIDADES Europa renacentista: G. médico y poeta verones.Fracastoruis (1478-1553). le propinaban al enfermo una tunda de palos para castigar "la carne pecadora".5. el filósofo alemán Friedrich Nietzsche y el rey Enrique VIII de Inglaterra.Fracastoruis (1478-1553). Este tratamiento mató más enfermos que la propia sífilis. llamado Syphilo. Recuerda al personaje de una obra. Tratamiento de la sífilis en las tinas de sudación utilizadas por Jean Fernel Se dice que el gángster (delincuente) americano Al Capone. entre otras personalidades famosas. En una zona normalmente estéril cuantos microorganismos son necesarios encontrar para indicar infección. llego a la conclusión de que las infeccones se debían a la transmisión de contagios por cuerpos diminutos que estaán vivos y siempre producen la misma enfermedad. el líder comunista Vladimir Lenin.

anticuerpos y funciones de defensa del huésped mediada por células. que según el tipo de antígeno se producen anticuerpos de diferente especificidad. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO Una infección provoca respuesta inmunológica dirigida contra uno o mas antígenos. Es así que en una infección también se puede detectar el inmunocomplejo utilizando estas técnicas que poseen una ventaja. se propagan de manera directa a través de los tejidos o por medio del sistema linfático a la corriente sanguínea. el tiempo de realización es menor al de las técnicas de cultivo tradicional. Es necesario remarcar que en otros casos es imprescindible el cultivo. en especial en lo que se refiere a la inmunidad y enfermedad. En general se genera una respuesta humoral y celular y la medición de una u otra puede ser la base para diagnosticar una infección. El estudio de la inmunología. La inmunidad Humoral (mediada por anticuerpos). Esta infección puede ser transitoria o persistente.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. es un área amplia que cubre la investigación y aplicación clínica. puede medirse o valorarse por hipersensibilidad dérmica. La reacción de antígeno y anticuerpo da lugar al complejo antígeno-anticuerpo el cual es revelado por alguna técnica inmunológica. en las infecciones intervienen principalmente dos inmunoglobulinas IgG (Infecciones crónicas) e Ig M (Infecciones agudas). Una vez que el microorganismo ha ingresado y ha establecido el sitio primario de infección. La inmunidad celular (Mediada por LiT). se refiere a antígenos. 5 TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS 1. USOS DE LAS TECNICAS INMUNOLOGICAS   Diagnosticar infecciones Identificar microorganismos 25 . Ante esta situación se genera una respuesta inmune de defensa.

HCG. Ej: Hormonas. agarosa. Puede ser: Aglutinación directa: El antígeno particulado insoluble es aglutinado por el anticuerpo. IgA. etc. Hematíes: En este caso la técnica recibe el nombre de Hemoaglutinación. que sirve para cuantificar IgM.   Tipificar sangre para bancos de sangre Tipificar tejidos de trasplantes Cuantificar inmunoglobulinas. Estas reacciones de precipitación se pueden llevar a cabo en dos medios: Medios Líquidos: En donde el anticuerpo se encuentra en solución. HA para Toxoplasmosis. Hepatitis 26 . HIV. Ej: Reacción de VDRL Medios Gelosados: Aquí el antígeno o anticuerpo esta en un soporte (agar-agar. poliacrilamida). Hepatitis Reacción de Enzimoinmunoánalisis: Se emplea una enzima como marcador que actúa sobre un sustrato que desarrolla color. Esos transportadores pueden ser: Partículas de Látex: como ejemplo encontramos: Reacción de Proteína C reactiva. HIV. Ej: HA para Chagas. Ej: TIF Toxoplasmosis (Test de inmunofluorescencia para Toxoplasmosis). IgD. Marcadores tumorales. TIF Chagas Reacción de Radioinmunoanálisis: En esta reacción el antígeno se marca con un radioisotopo. Ej: IDRS (inmunodifusión radial simple. IgE. Ej: Hormonas. factor reumatoideo. Marcadores tumorales TECNICAS INMUNOLOGICAS Reacción de Precipitación: Se forma un inmunocomplejo que con el tiempo aumenta de tamaño. Hormonas. Marcadores tumorales. IgE. volviéndose insoluble en el medio dando lugar a un precipitado. Ej: Hepatitis Reacción de Inmunofluorescencia: Se basa en la fluorescencia que emiten determinadas sustancias y se observa en un microscopio especial de fluorescencia. IgG. Ej: Huddleson y Widal Aglutinación Indirecta: Aquí se emplean transportadores a los que se adhiere en la superficie el antígeno particulado insoluble. Tambien podemos tener Inhibición de la Hemoaglutinación: Ej: AELO (Antiestreptolisina O) Hemoaglutinación Reverso pasiva: Donde a los hematíes se adhiere el anticuerpo. IgAs Reacción de Aglutinación: Aquí el antígeno esta en forma de partícula. Determinación de Grupo sanguíneo y factor.

Pruebas cutáneas: la hipersensibilidad dérmica ofrece ciertas ventajas al determinar con facilidad y rapidez la respuesta inmunológica (celular) del individuo a la exposición previa a los agentes infecciosos. REACTIVOS Y EQUIPOS  Portaobjetos  Guantes  Jeringas y agujas  Lancetas  Gradillas  Anticoagulante  Algodón  Alcohol  Ligaduras  Reactivo de PCR  Reactivo de Grupo y Factor sanguíneo  Mondadientes 4.METODOLOGIA 27 . Ej: Virus de Herpes simple 2. Conoce otras pruebas empleadas en el diagnostico microbiológico. Realiza e interpreta la determinación de grupo y factor sanguíneo. MATERIALES. COMPETENCIAS      Identifica las pruebas serológicas empleadas en el diagnóstico microbiológico . TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5. 3. Realiza e interpreta la determinación de proteína C reactiva. Analiza el fundamento de las pruebas serológicas.

Explique el fundamento de la Reacción de polimerasa en cadena y sus aplicaciones. Dibuje los tipos de ELISA. En qué consiste y la utilidad del inmunoblot o Western Blot.     Trabajo en grupos pequeños Determinación de Grupo y Factor Determinación de PCR latex Determinación de Factor Reumatoideo Determinación de la prueba de widal 6. 4. 3. explique brevemente el fundamento y ¿cual su utilidad para el diagnostico? 2. Cite la diferencia entre las pruebas de PCR y PCR latex. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES: 1. 28 .

o citotóxica. 6 HIPERSENSIBILIDAD Las reacciones de hipersensibilidad pueden ser de diferentes tipos. La tipo IV está mediada por células. La hipersensibilidad tipo I. en 1963.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. es aquella que está mediada por anticuerpos tipo IgE. II. III y IV. La tipo III es una hipersensibilidad por inmunocomplejos. está mediada por anticuerpos citotóxicos. 29 . La tipo II. las clasificaron en cuatro: hipersensibilidades tipo I. o inmediata. Gell y Coombs.

La hipersensibilidad tipo III: son reacciones producidas por la existencia de inmunocomplejos (IgG) circulantes que al depositarse en los tejidos provocan activación 30 . Esta respuesta anómala. por la liberación de mediadores vasoactivos (Histamina. Tipo II (Por Citotoxica). ejemplos reacciones transfusionales. anemia hemolítica autoinmune. Como ya lo mencionamos se describen cuatro tipos de reacciones de Hipersensibilidad: Tipo I (Inmediata o Anafilactica). miastenia gravis. cuadros de alergia como fiebre del heno y asma. La unión de la IgE fijadas a las superficies de los mastocitos y el Alergeno desencadena la reacción de hipersensibilidad. La Hipersensibilidad Tipo I se manifiesta por reacciones tisulares a los minutos que el alergeno se combina con el anticuerpo compatible en las personas que previamente se han sensibilizado frente a el. da lugar a una reactividad de la que deriva lesión tisular u orgánica de grado variable. Tromboxanos. Sx de Goodpasture. El primer contacto (que ocurre al principio de la vida del individuo) es un hecho preliminar necesario e induce a la sensibilización a ese alergeno (antígeno especifico) y es así como los siguientes contactos con dicho antígeno desencadenaran una respuesta hipersensible. Prostaglandinas. Serotonina. Esta hipersensibilidad esta mediada principalmente por IgE. Son típicas en un individuo dado. Tipo III (Por Complejo Inmunitario) y Tipo IV (Retardada). Activando al sistema del complemento. eritroblastosis fetal. etc)( ver figuras)ejemplos choque anafiláctico por inyección de fármacos y picaduras de insectos. La hipersensibilidad tipo II: son reacciones medidas por la interacción de anticuerpos IgG e IgM preformados con antígenos presentes en la superficie celular y otros componentes tisulares. después del primer contacto con un antígeno o alergeno. exagerada o inapropiada.Alergia o Hipersensibilidad denota un estado en el cual una respuesta inmunitaria desencadena reacciones exageradas o inapropiadas que son nocivas para el huésped.

2.  Seleccionar el sitio de la inyección intradérmica (tercio externo y superior del antebrazo). Indique la importancia de la Reacción de Tuberculina.de la fagocitosis y daño tisular por activación del complemento. Enumere tres mediadores liberados en la anafilaxia. La hipersensibilidad tipo IV son reacciones de hipersensibilidad celular o mediada por células. 6. Interpretar e informar los resultados de la prueba. CURIOSIDADES 31 . Lápiz dérmico Prednisona o Dexametasona 4. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. inyectar el antígeno. causadas por linfocitos T sensibilizados al entrar en contacto con el antígeno especifico.  Realiza la prueba de hipersensibilidad a la penicilina. Compare y contraste las características de las cuatro tipos de hipersensibilidad y cite un ejemplos de cada uno de ellos.  Observar. observando la formación de un habón (no debe sangrar).  Con el bisel arriba. artritis reumatoidea. enfermedad del suero. REACTIVOS Y EQUIPOS        Penicilina sódica o potásica o ampicilina Jeringas Agujas de bisel corto #26 Mechero de alcohol Regla transparente calibrada en mm. Como en la prueba de la tuberculina o reacción de Mantoux. 3. 3. 2. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5. enfermedad de addison. como sucede en lupus eritematoso sistémico. rechazo de tejidos trasplantados.  Marcar con un lápiz dérmico el sitio de la inyección. pudiendo producir una lesión inmunológica por efecto tóxico directo o a través de la liberación de sustancias solubles como las linfocinas. reacción de Arthur. MATERIALES.1 ml del preparado.  Interpreta los resultados de la prueba. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños  Cargar en la jeringa de insulina 0. introducir en la dermis. dermatitis de contacto. COMPETENCIAS  Identifica los diferentes tipos de hipersensibilidad.

En definitiva. los vampiros no son personajes reales. la piel se recubre de ampollas y los huesos se corroen. las encías descarnadas. también puede estar relacionada con esta enfermedad. seres pálidos que necesitan vivir en la oscuridad porque la luz solar les debilita y corroe hasta destruirlos. otra de las características típicas de los vampiros. Algunas de estas porfirinas sufren una reacción química por acción de la luz. si parece que algunas de sus características se han inspirado en una enfermedad muy humana: la porfiria. etc. Además. esta enfermedad reúne muchas de las características que se atribuyen a los vampiros. lo que provoca una gran debilidad y una palidez casi cadavérica. Pero. en fases avanzadas.Sobre los vampiros En la porfiria. lo que da lugar a nuevos compuestos que destruyen los tejidos cercanos y. Que tipo de hipersensibilidad presentan???? 32 . los labios deformados. unos compuestos químicos denominados porfirinas se acumulan en la piel. Esto. como consecuencia. Parece que los ajos contienen sustancias químicas que pueden provocar que el efecto de la luz se haga más intenso y se agrave la enfermedad. el horror a los ajos. En definitiva. En el proceso también se produce una fuerte anemia. puede llegar a provocar desagradables mutilaciones en las que orejas y nariz aparecen como corroídas. y que necesitan sangre fresca para reponer la suya. los huesos y los dientes.

La inmunización o vacunación es una forma de activar al sistema inmune. En Bolivia el PAI funciona desde el año 1979. en Bolivia . Debido al beneficio que causan las vacunas. El pueblo chino desde el siglo X practicaba la variolización con el fin de inocular el virus de la viruela de un enfermo a una persona susceptible. a partir de experimentos que realizaba con gérmenes del a viruela que atacaba a la vaca. Las vacunas fueron descubiertas en 1771.ha introducido nuevas vacunas en el esquema tradicional. cuando budistas indios ingerían veneno de serpiente con el fin de ser inmune a sus efectos. Esta exposición ayuda al sistema inmune a reconocer y crear defensas contra esa enfermedad de forma eficiente. Actualmente el incremento de la cobertura de vacunación en muy bueno. existe a nivel mundial un programa ampliado de vacunación (PAI) liderado por la OMS. expone a las personas a una cantidad muy pequeña y muy segura de algunos agentes infecciosos (microorganismos vivos atenuados o muertos o sus fracciones antigénicas ) causantes de enfermedad. Se reemplazó la vacuna DPT con la pentavalente y la antisarampionosa fue remplazada por la tripe viral que inmuniza contra sarampión. 7 INMUNIDAD ACTIVA ARTIFICIAL: VACUNAS CONOCIMENTO TEORICO REQUERIDO En el intento de encontrar protección real contra las enfermedades infecciosas que diezmaban pueblos enteros a hecho que el hombre con el tiempo des cubra un medio de protección. en ese entonces la cobertura de menores de un año no alcanzaba ni al 20%. de la palabra latina vacca y este invento fue el inicio de todo un programa de inmunizaciones que ha permitido prevenir muchas enfermedades mortales o incapacitantes y evitar grandes epidemias. De acuerdo con la composición química de las vacunas se clasifican de la siguiente forma: 33 . De ahí proviene su nombre. alcanzando por ejemplo un 98% con la vacuna antisarampionosa y un 93% con la BCG. rubéola y parotiditis. por Edward Jenner. pero que a los trabajadores de las granjas hacia inmunes hacia esta enfermedad. El individuo genera su propia respuesta inmune frente a un estímulo antigénico. Los datos más antiguos son del siglo VII. El programa ampliado de inmunizaciones de segunda generación. En 1994 se ha certificado la erradicación de la poliomielitis en la América.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. en Bolivia el último caso registrado ocurrió en 1987.

Las contraindicaciones de la vacunación: 34 .

35 .

muertos o partes antigénicas de los mismos.2. 4. 7. 2. Cite vacunas contra virus y bacterias mas empleadas. 3. COMPETENCIAS     Explica los principios de la vacunación. toxoide. 6. Cite las vías de administración de las vacunas. Conoce las características de los diferentes tipos de vacunas. En un paciente de dos meses con infección de vías aéreas superiores y fiebre de 38ºC que vacunas aplicaría. gérmenes muertos. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. Cuáles son las vacunas que se deben aplicar a niños menores de un año. vacuna recombinante. 5. MATERIALES    Diapositivas Data display Auditórium 4. Cite ejemplos de vacunas con microorganismos atenuados. Determina la importancia de la cadena de frio para el manejo de las vacunas. Justifique. METODOLOGIA  Trabajos en grupos pequeños 6. Comprende el esquema de inmunización del PAI y las No gratuitas. 3. 36 . TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5. Que entiende usted por la cadena de frio. Defina los siguientes conceptos: vacunas de gérmenes vivos atenuados.

37 .

Sin embargo existen algunas enzimas que son especificas de los virus que son los posibles objetivos para el tratamiento medico.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. Inhibe la formación de la cubierta . Los fármacos antivirales actúan por los siguientes mecanismos: : Ciclo viral Inhibición de la penetración en la célula huésped Amantadina: actúa sobre el virus influenza A. 8 SEMINARIO: ANTIVIRALES 1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO Dado que los virus comparten muchos de los procesos metabólicos de la célula huésped es difícil encontrar fármacos que sean selectivos para el patógeno. 38 . Los fármacos antivíricos actualmente disponibles sólo son eficaces mientras el virus se esta replicando. Rimantadina: derivado 4-10 veces mas activa que la amantadina.su efecto principal es inhibir la decapsidacion viral o el desensamblaje del virion durante la endocitosis. Oseltamivir: inhibe la actividad de neuraminidasa del virus influenza.

Vidarabina. especialmente en pacientes con SIDA y retinitis por CMV. Docosanol: interfiere en la fusion del VHS-1 y VHS-2 a las membranas de las celulas del huesped. COMPETENCIAS  Identifica los principales antivirales y sus usos mas frecuentes. enzimas que inhiben el ARNm vírico. 3. Es de uso topico. puede tener efectos indeseados graves.  Indica los principales mecanismos de acción de los antivirales. 2. eficaz contra herpesvirus. Se usan en combinación con inhibidores de la transcriptasa inversa. MATERIAL Y EQUIPOS: Data display 4. es relativamente eficaz en VIH/ SIDA. La gammaglobulina: Neutraliza los virus Inhibidores de la DNA polimerasa: Aciclovir un derivado de la guanosina.Zanamivir:inhibe la actividad de neuraminidasa del virus influenza. también un derivado de la guanosina. lo que contribuye a un estado de resistencia viral. un análogo de timina. Interferón alfa: producen proteínas efectoras en las células expuestas. inducen en los ribosomas de las células del huésped. inhibe selectivamente la ADN polimerasa vírica. es bastante eficaz en la infección por CMV. es un inhibidor relativamente selectivo de la ADN polimerasa vírica. Tribavirin es similar a la guanosina y se cree que interfiere con la síntesis del ARNm vírico. Foscarnet inhibe la ADN polimerasa vírica fijándose al lugar de unión del pirofosfato. se fosforila y posteriormente se incorpora en el ADN vírico impidiendo su replicación. Inhibidores de la transcriptasa inversa ITI: Zidovudina (AZT) . se usan en la infección de la hepatitis B y pueden ser útiles en el SIDA.TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA 39 . mínimos efectos indeseados. Zalcitabina y didanosina proteasas. puede inhibir a muchos virus ADN y ARN. Ganciclovir. un derivado de la adenosina. utilizado en la infección por citomegalovirus (CMV). eficaz contra herpes simple y varicela zoster. Imiquimod: modificador de la respuesta inmunitaria topica. puede tener efectos indeseados graves. Inmunomoduladores Los interferones. Los inhibidores de las proteasas (por ejemplo indinavir y saquinavir) inhiben la escisión de la proteína inerte traducida en las proteínas funcionales y estructurales. (DDI) se usan en combinación con inhibidores de las Inhibición de los acontecimientos postraducción.

METODOLOGIA Seminario. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. Investigue cual es el tratamiento para un paciente portador de VIH? 2. 6. Complete el siguiente cuadro: Enfermedad Herpes virus 1 Citomegalovirus Influenza A Mononucleosis Infecciosa Dengue Hepatitis A Hepatitis B Fiebre amarilla Paludismo Varicela Tratamiento 40 .Dos periodos de 50 minutos 5. Investigue cual es el tratamiento para un paciente con SIDA? 3.

B y C) infectan a los humanos. La presencia de ácidos nucleicos virales (PCR. siendo esta prueba la única evidencia de la exposición al virus cuando no existe aumento de los niveles de anticuerpos circulantes (pacientes inmunodeprimidos). El 41 .UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA PRÁCTICA NO. Test de Aglutinación.).). CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO: Los métodos utilizados para reconocer las infecciones por virus humanos pueden clasificarse en DIRECTOS e INDIRECTOS. según persigan demostrar la presencia del virus o de alguno de sus constituyentes (antígeno o genoma viral) o bien la respuesta de anticuerpos específicos por parte del huésped en el curso de la infección. ROTAVIRUS Generalidades: Es un género de virus perteneciente a la familia Reoviridae. una necesidad. De ellas la Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es la más utilizada. Igualmente la detección del genoma viral puede favorecer la precocidad del diagnóstico viral y su confirmación. Gran parte de las técnicas utilizadas en el diagnóstico clínico se basan en pruebas serológicas que identifican anticuerpos específicos frente a diversas proteínas antigénicas. etc. etc. medidas profilácticas. En el momento actual. En algunas infecciones virales es posible detectar la presencia de antígenos virales previamente al desarrollo de la seroconversión. sensible y específica de los virus. Se han identificado siete grupos. En la última década se han desarrollado una serie de técnicas para el diagnóstico viral basadas en la detección de ácidos nucleicos. Enzimoinmunoanálisis (EIA). tres de los cuales (Grupo A. Sin embargo. La presencia de antígenos virales (técnicas inmunológicas): Inmunofluorescencia (IF). la tendencia en el diagnóstico virológico consiste en emplear nuevas y más sensibles tecnologías de detección de antígenos y de investigación de ácidos nucleicos con el propósito de lograr un diagnóstico viral más rápido. 9 DIAGNOSTICO VIRAL 1. METODOS DIRECTOS Son aquellos que detectan:     El virus como agente infeccioso (aislamiento viral). El desarrollo de quimioterapia antiviral efectiva es responsable de esta tendencia que hace de la identificación rápida. existen circunstancias en las cuales son necesarias pruebas que detecten precozmente la infección viral (tratamientos específicos. El virus como partícula viral (microscopía electrónica).

HIV El virus de inmunodeficiencia adquirida forma parte del género Lentivirus. La enfermedad está caracterizada por vómito y diarrea acuosa de 3 a 8 días. uso de agujas contaminadas y tatuajes. Este vía incluye entre otras cosas transfusiones de sangre o productos de sangre. causando el 90% de las infecciones. durante el parto o en la lactancia a través de la leche materna (vía perinatal o materno-infantil). Transmisión a través de sangre y productos de sangre contaminados con el virus. la cadena simple de ácido ribonucleico (ARN) viral comienza su transformación en una doble cadena de ácido desoxirribonucleico (ADN) por acción de la enzima transcriptasa inversa que forma parte del virus. o herirse con instrumentos cortopunzantes infectados (vía parenteral o sanguínea).grupo A es el más común. Transmisión: Fecal-ora. La integrasa y otros cofactores actúan para que el ADN del virus se fusione con el ADN de la célula hospedadora a través de la transcripción en el genoma de la célula que aloja al virus. Estos constituyen un grupo dentro de la familia Retroviridae.  No se transmite el VIH por:    Compartir baños con otras personas o con personas que viven con el VIH-SIDA Compartir alimento y utensilios de cocina con otras personas o con personas que viven con el VIH-SIDA Picadura de insectos 42 . Desde su ingreso a la célula hospedadora. los rotavirus pueden producir hasta un millón de fallecimientos al año. los lentivirus reaccionan de dos maneras posibles: puede ocurrir que el virus entre en latencia mientras la célula infectada continúa en funciones. Diagnostico: Detección de anticuerpos por AGLUTINACIÓ indirecta O ELISA en materia fecal y PCR-TI. que el virus comience a replicarse activamente y libere viriones capaces de infectar otras células. De esta manera. la célula queda infectada por el virus. Suele remitir en un plazo de 12 a 60 horas sin complicaciones. periodo de incubación de 24 a 48 hrs. o bien. Existen dos tipos del VIH. Es responsable de aproximadamente el 50% de todos los casos de diarrea infantil que requieren hospitalización a causa de deshidratación en Estados Unidos. En los países subdesarrollados. Después de este proceso. Es la causa mas importante de gastroenteritis infantil en todo el mundo. Transmisión:   Transmisión sexual: relaciones sexuales sin condón con personas que viven con el VIH-SIDA. llamados VIH-1 y VIH-2. Transmisión vertical de una madre que vive con el VIH a su hijo a través de la placenta durante el embarazo. la diarrea es acuosa color amarillento con aspecto a yogurt.

    Por compartir vida social Por compartir el ambiente del trabajo Abrazos. besos Abrazar. apretón de manos. besar o cuidar de una persona que vive con el VIH-SIDA 43 .

El Elisa posee un periodo de ventana 44 .Diagnóstico: Detección de anticuerpos por Elisa. Un resultado positivo debe ser corroborado con Westen blot o Reacción de Polimerasa en cadena.

síntomas gastrointestinales tales como nauseas y vómitos e ictericia. Virus de ARN Vía de Transmisión Fecal-oral Parenteral. HEPATITIS A. . sexual. Leche materna. HBcAg. 4.de 3 meses (periodo en el cual el virus esta en el paciente y no puede ser detectado en el laboratorio) por ello ante un accidente con un elemento cortante o relación sexual insegura se deberá corroborar un nuevo test a los 3 meses. B y C Las Hepatitis virales son enfermedades generalizadas que afectan primariamente al hígado. Virus de ADN Parenteral. sexual. Independientemente del tipo de virus. IgG e IgM por ELISA HBc. 45 . Leche materna. Anti HBe por ELISA 2. Anti HBs.  Diferencia las características clínicas básicas de algunas enfermedades virales. 3. Estos virus producen una inflamación aguda del hígado que trae como consecuencia una enfermedad clínica caracterizada por fiebre. No Existencia Vacuna Diagnostico serológico de Si Determinación de Determinación de Determinación de IgG e IgM para HVA HBsAg. de ARN Virus Periodo Incubación Edad Niños y adultos jóvenes Familia a la que Picornaviridae. Trasplacentaria. HEPATITIS A (HAV) de 15-45 días HEPATITIS B (HBV) 50-180 días 15-29 años Hepadnaviridae. IgG e IgM para HVC por ELISA HBeAg. Saliva Si HEPATITIS C (HCV) 14-120 días Adultos Flaviviridae. MATERIALES Data display. pertenece Heparnavirus. METODOLOGIA Trabajo en grupos pequeños con socialización. Trasplacentaria. COMPETENCIAS  Identifica los métodos de diagnostico para las enfermedades virales. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5.  Elige adecuadamente el método diagnósticos correspondiente para cada enfermedad viral. durante la enfermedad aguda se observan lesiones histopatológicas idénticas.

3. Cite y explique en que consisten las pruebas de presunción y de confirmación para el diagnostico del VIH.6. Referente al diagnóstico ¿Qué tipo de acciones deberíamos tomar y por qué? 2. el mismo proviene de una mujer seropositiva para HIV. Se dosaron los siguientes antigenos y anticuerpos para hepatitis e interprete el cuadro: HBsAg + + + - Anti HBs +/++ Anti HBc (IgG) + +++ +/+++ - Anti HBc (IgM) + +/- HBeAg + + - Anti Hbe + 4. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES Resuelva los siguientes cuadros clínicos: 1. En el caso de sospechar que un neonato esté infectado. Interprete el siguiente cuadro: 46 .

vagina o piel) 47 . o están presentes en el ambiente. Uno de los motivos es la utilización generalizada de antibióticos de amplio espectro que eliminan o merman poblaciones bacterianas no patógenas que normalmente compiten con los hongos. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO Las infecciones fúngicas se denominan micosis y en general pueden dividirse en: infecciones superficiales (que afectan piel. pero apenas significan un riesgo para la vida. Muchos de los hongos que pueden producir micosis viven en asociaciones con humanos como comensales. Clasificación de las micosis: Micosis sistémicas. 10 SEMINARIO: MICOSIS 1. uñas. en los últimos 30 años ha habido un constante aumento en la incidencia de infecciones fúngicas sistémicas secundarias graves. pero.  Candidiasis sistémica oportunista  Meningitis  Endocarditis criptocosica  Aspergilosis pulmonar oportunista  Mucormicosis rinocerebral  Blatomicosis  Histoplasmosis  Coccidiomicosis  Paracoccidiomicosis Micosis superficiales pueden clasificarse en:  Dermatomicosis ( piel. es decir infecciones por hongos que normalmente son inocuos o que se eliminan rápidamente en personas inmunocompetentes. Sin embargo. uñas causados por dermatofitos) los mas comunes tiñas  Candidiasis superficial (boca. pelo. hasta tiempos recientes. Otro es el aumento en el número de pacientes con una respuesta inmune reducida debido al SIDA o a la acción de fármacos inmunodepresores o antineoplásicos. esto ha conllevado un aumento del predominio de infecciones oportunistas. En estas zonas una infección fúngica normalmente consiste en un pie de atleta o candidiasis oral o vaginal que producen molestias.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. las infecciones superficiales graves eran relativamente raras y las sistémicas eran muy raras (al menos en zonas relativamente climáticas frías y templadas). cuero cabelludo o membranas mucosas) y sistémicas (que afectan tejidos mas profundos y órganos).

Fluconazol. 48 . nistatina tópica Un azol o nistatina tópica. tópica. 2. fluconazol Anfotericina. IV Indicaciones de los antifúngicos: Enfermedad Infección sistémica Candidiasis sistémica Criptococosis (meningitis) Aspergilosis sistémica Blastomicosis Histoplasmosis Coccidiomicosis Paracoccidiomicosis Mucormicosis Esporotricosis diseminada Infecciones superficiales Dermatomicosis Pie de atleta Tiña cutánea Tinea capitis Onicomicosis Candidiasis Piel Boca Vagina Candidiasis mucocutánea crónica Fármacos Anfotericina. COMPETENCIAS  Comprender las principales infecciones fúngicas. Un azol tópico. itraconazol Un azol tópico o itraconazol oral Un azol tópico o itraconazol oral. itraconazol. tópica bifonazol. itraconazol Anfotericina. fluconazol Anfotericina. ketoconazol. fluconazol oral. tópica Oral. flucitosina Anfotericina. Un azol tópico. itraconazol Anfotericina. fluconazol oral.4 alfa desmetilasa dependiente de citocromo p-450 Enzimas lanosterol Unen al ergosterol y daño oxidativo de la membrana Unen al ergosterol y daño oxidativo de la membrana Inhibición del esculeno Enzimas lanosterol Vía Oral Oral. fluconazol Anfotericina. fluconazol Anfotericina. tópica Oral. Oral. terbinafina oral Itraconazol oral Terbinafina oral. flucitosina. clotrimazol Fluconazol Anfotericina B Nistatina Terbinafina Itraconazol Mecanismos de acción Inhibición síntesis de DNA y RNA Inhibe enzimas lanosterol 1. itraconazol. itraconazol Anfotericina. itraconazol.Mecanismos de acción de los antimicóticos Antifúngico Flucitosina Ketoconazol. Oral. amorolfina tópica. IV IV.

 Identifica los fármacos antifúngicos en las principales infecciones fúngicas. 6.  Observación en microscopio de las láminas teñidas. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños .TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos. via de administración . MATERIALES    Laminas teñidas Aceite de inmersión Microscópios 4. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. 5.Indicar los principales mecanismos de acción de: Fármaco Azoles Nistatina Terbinafina Flucitosina Anfotericina Mecanismo de acción 2. de las siguientes micosis: Patología Medicamento Vía de administración Tiempo de tratamiento Complicaciones Pie de atleta Pitiariaisis Tiña corporis Rubeola 49 . 3.- Cite el tratamiento incluya medicamento. tiempo de tratamiento y complicaciones.

Tiña capis Histoplasmosis Onicomicosis Esporotricosis Criptococosis Mucormicosis Candidiasis oral Carbunco 50 .

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