UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

MICROBIOLOGIA I

GUIA PRACTICA DE LABORATORIO

COMPETENCIAS ESPECÍFICAS A SER EVALUADAS EN LA CLASE PRÁCTICA DE MICROBIOLOGIA I
SABER EVALUACIÓN DE PRÁCTICA Revisión y aplicación de conocimiento previo (examen) previo) SABER HACER SER NOTA FINAL Nota Examen parcial parcial

ESTUDIANTES

Calidad de Desarrollo trabajo de la (mapas, práctica. casos (Uso Puntualidad clínicos, correcto resolución de de Material) cuestionario)

Disciplina (Uso de vestimenta adecuada)

PUNTAJE

0 - 9

0-3

1

1

1

15

15

30

1

UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. 1

NORMAS BASICAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO: Las medidas de seguridad en laboratorios son un conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la salud de los que allí se desempeñan frentre a los riesgos propios derivados de la actividad, para evitar accidentes y contaminaciones tanto dentro de su ámbito de trabajo, como hacia el exterios. En ese entendido la OMS se dio a la tarea de estudiar estos riesgos y clasificar a los laboratorios, para luego dar recomendaciones en lo que se refiere a normas de bioseguridad. Los laboratorios se clasifican en :

2

Nuestro laboratorio se encuentra en el grupo de riesgo 1, nivel básico, en este nivel la OMS recomienda que es necesario para minimizar riesgos :  El Símbolo internacional de peligro biológico debe estar colocado en las puertas de los lugares donde se manipulen microorganismos que puedan resultar patógenos al humano.  Sólo se podrá entrar a las zonas de trabajo personal autorizado.  Las puertas del laboratorio deben mantenerse cerradas.  No se autoriza la entrada de niños en las zonas de trabajo del laboratorio. Protección personal:  Se usarán en todo momento batas o guardapolvos especiales para el trabajo de laboratorio.  Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que pueden entrañar contacto directo o accidental con sangre, líquidos corporales y otros materiales potencialmente infecciosos. Una vez utilizados los guantes, se retiraran de forma aséptica y a continuación se lavarán las manos.  El personal y los estudiantes se lavaran las manos después de manipular muestras y antes de salir del laboratorio.  Se usarán lentes y caretas de seguridad para protección de los ojos y el rostro de salpicaduras, impactos y fuentes de radiación ultravioleta artificial.  Está prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio.  Debe usarse calzado cerrado, prohibido entrar con sandalias.  Está prohibido comer, fumar o beber en el laboratorio. 3

 No debe almacenarse comida para consumo humano en el laboratorio. Procedimientos:  Está estrictamente prohibido pipetear con la boca.  No se colocará ningún material en la boca ni se pasará la lengua por las etiquetas.  Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que se reduzca al mínimo la formación de aerosoles .  Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales infecciosos se comunicarán al supervisor del laboratorio. Se mantendrá un registro escrito de estos accidentes e incidentes.  Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de todos los derrames.  Los líquidos contaminados deberán descontaminarse ( por medios químicos o físicos) antes de eliminarlos por el colector de saneamiento. Zonas de trabajo del laboratorio:  El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el trabajo.  Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo derrame de material potencialmente peligroso y al final de cada jornada de trabajo.  Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser descontaminados antes de eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar.  Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que impidan el paso de artrópodos. Clasificación de los residuos:  Desechos generales o comunes son aquellos que no presentan un riesgo adicional para la salud humana y el ambiente y que no requieren de un manejo especial como papel, cartón, plásticos, restos de alimentos.  Desechos peligrosos o especiales son aquellos que presentan un riesgo para la salud humana y el ambiente y que requieren de un manejo especial como sangre y hemoderivados, fluidos corporales, cultivos de agentes infecciosos, vacunas vencidas, cajas de petri, placas de frotis, órganos, tejidos, partes corporales.  Desechos cortopunzantes agujas, hojas de bisturí, hojas de afeitar, objetos de vidrio y cortopunzantes desechables.  Desechos especiales frascos de antibióticos y sachett de medicamentos 2. COMPETENCIAS    Identifica y aplica las normas básicas de bioseguridad en laboratorio de microbiología. Investiga la metodologías correcta para la eliminación de los residuos generados en el laboratorio. Aplica la metodología correcta para la eliminación de los residuos generados en el laboratorio microbiología. 4

CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. MATERIALES   Manual de Higiene y seguridad en Microbiología. Normas de bioseguridad.3. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños 6. 4. Esquematizar un mapa cognitivo en forma personalizado de manejo de residuos. 2. Realizar un mapa conceptual sobre normas de bioseguridad. 3. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA: Dos periodos de 50 minutos 5. Clasifique los residuos. Residuos Jeringa con sangre Hojas de bisturí Cajas petri cultivadas Papel de escritorio Tiras reactivas de orina Frasco con muestra Aguja hipodérmica Infeccioso Cortopunzante Comunes 5 .

Es cierto que muchos materiales se comparten con otros laboratorios. REACTIVOS Y EQUIPOS Entre los materiales que se suelen emplearse con mayor frecuencia en el laboratorio de microbiología se encuentran:                    Portaobjetos Cubreobjetos Tubos de ensayo Tubos de Hemólisis o Kant Cajas Petri Asas bacteriológicas Matraces erlermeyer Pipetas Lavadores o Frascos lavadores Vidrios de reloj Gradillas Varillas de tinción Frascos goteros Probetas Embudos Morteros Bastones o Varillas de vidrio Espátula de Drigalski Pinzas de traspaso Entre los instrumentos que se suelen encontrar en el laboratorio de microbiología se encuentran: 6 . INSTRUMENTOS. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO El trabajo en un laboratorio de Microbiología es significativamente diferente al de otros laboratorios. COMPETENCIAS  Describe y dibuja el material empleado en las prácticas de microbiología. requiriendo de unos cuidados especiales ya que se debe trabajar en condiciones que se evite la contaminación del operario. 2. Ejemplo: el caso de un mechero. sin embargo en microbiología se le da un uso especial porque el objetivo es diferente. de las muestras y del ambiente.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. 3. Por todo ello es necesario reconocer cada uno de los materiales que son utilizados en laboratorio de Microbiología y reconocer el uso que se le da en el mismo. que se utiliza para esterilizar.  Reconoce el uso correcto de la material y equipo en las prácticas de microbiología. 2 MATERIALES E INSTRUMENTOS DE LABORATORIO EMPLEADOS EN MICROBIOLOGIA 1. MATERIALES.

CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1.  Señalar los usos de cada uno de los materiales a utilizar en el laboratorio de Microbiología.  Procedimientos de lavado. 5. 6. secado y protección de los mismos.Indique el uso y realice el dibujo que falta de instrumentos MATERIALES Portaobjetos USOS cada uno de los materiales e DIBUJO Cubreobjetos Tubo de ensayo 7 .. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños.  Descripción ordenada de cada uno de estos y realizar el correspondiente dibujo.           Microscopios Centrifugas Autoclave Hornos de calor seco (Estufas) Incubadoras Baños de agua Cámara de anaerobiosis Refrigeradores y congeladores Campana flujo laminar Mecheros de alcohol y gas Balanzas 4. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos.

Tubos de hemolisis Caja petri Pipetas graduadas Vasos de precipitado Vidrio de reloj 2. Curiosa. que también podía identificarse como pecado. A la enfermedad se le denominaba Shêrtu.Esquematicé un microscopio e identifique sus partes.. El médico lo primero que debía hacer era diagnosticar al paciente identificando cuál de los 6000 posibles demonios era el responsable del problema. 8 .. con técnicas adivinatorias como los vuelos de algunas aves.¿Qué otros tipos de materiales e instrumentos de laboratorio utilizados en Microbiología se pueden añadir a los ya enunciados? 3. CURIOSIDADES Mesopotamia.Cite tipo de microscopios los mas empleados en el diagnostico microbiológico. la posición de los astros o los hígados de algunos animales. es la concepción sobrenatural de la enfermedad. impureza moral. palabra de origen asirio.. ira divina o castigo. que no llamativa. 4.

3 ESTERILIZACIÓN. instrumental). se logra por medios físicos y químicos (Oxido de Etileno). CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO: Un aspecto importante en el control de las infecciones son los principios que rigen la limpieza. equipamiento.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. Lograr una buen asepsia y antisepsia es 9 . del personal sanitario a los pacientes o a la inversa es una prioridad en todos los centros sanitarios. DESINFECCIÓN. DESINFECCIÓN: Es un proceso por el que se destruyen microorganismos patógenos. ASEPSIA: significa ausencia o privación de todos los gérmenes patógenos o no. incluso las esporas bacterianas. se logra mediante métodos químicos sobre superficies u objeto inanimados( mobiliario. Por lo que es indispensable conocer estos conceptos para entender mas claramente en que momento usamos desinfectantes. antisépticos o esterilizantes. ANTISEPSIA : es la creación de un medio disgenesico que obra por destrucción de los microorganismos o impidiendo su desarrollo. Evitar la transmisión de microorganismos potencialmente patógenos ya sea entre enfermos. ASEPSIA Y ANTISEPSIA 1. desinfección y esterilización. pero no siempre todos los microorganismos y esporas. ESTERILIZACIÓN: Es un proceso por el que se eliminan todas las formas de vida microbiana (Microorganismos patógenos y no patógenos).

muestran una actividad antimicrobiana rápida de amplio espectro contra bacterias virus y hongos.fundamental para cualquier procedimiento bacteriológico o quirúrgico básico como curaciones de heridas. Se debe hacer lo posible para evitar contaminación microbiana que llegaría a perjudicar al paciente así como el éxito en la identificación del microorganismo causante de infección. Triclosán: Sustancia no iónica que al ser integrada en jabones en concentración de 0. Posee el tiempo de inicio acción más rápido. Seis (6) horas. Su concentración debe estar entre 0. en concentraciones del 0. etanol.0%. Se inhibe por surfactantes no iónicos.5 al 1. Alcoholes: Alcohol etílico y isopropilico. Actividad optima cuando se diluyen con agua al concentraciones de 60 a 90%.3 y 3. n-propanol o combinaciones de dos productos en concentraciones de 65 al 90%. Posee un periodo de inicio acción intermedio y un efecto residual prolongado. Yodo: Es reconocido como un excelentes antiséptico pero puede genera irritación de la piel. Clorhexidina: Preparaciones de gluconato de clorhexidina.75%. quemaduras. La antisepsia por su baja toxicidad se utiliza para la destrucción de microorganismos presentes en las superficie cutaneomucosa ( piel. suturas etc. mucosas.2 al 2% actúa como antimicrobiano. 10 . no sirve para eliminar la suciedad. Clorhoxylenol: Sustancia fenólica con un sustituto halógeno su eficacia es buena aunque su mayor fortaleza esta en su poca absorción a través de la piel. Las soluciones yodadas se presentan como una alternativa pero requieren una concentración de 8% en jabones y del 10% en soluciones desinfectantes. manos). aniones inorgánicos y orgánicos. SUSTANCIAS QUIMICAS EMPLEADAS EN ASEPSIA Y ANTISEPSIA De acuerdo con las especificaciones de la FDA las sustancias que se utilizan como agentes anti-microbianos son: Alcoholes + glicerina: La mayoría de las soluciones con base alcohólica utilizan isoprophanol. heridas.

pueden ser estériles o desinfectados en alto grado. disminuye la flora transitoria (flora que se adquiere por contacto con objetos contaminados). Se emplea solución jabonosa antiséptica. Deben ser estériles. Se realiza con agua y jabón. los materiales se clasifican en:  Elementos críticos: Nivel de riesgo alto.  Elementos Semicríticos: Tienen contacto con las mucosas sanas.  Elementos No Críticos: Tiene contacto con la piel sana.CATEGORIA DE MATERIALES De acuerdo al nivel de riesgo de infección. 11 . Lavado Antiséptico: Elimina la flora transitoria y disminuye la flora residente (flora que habita normalmente en piel). son elementos que van a entrar en contacto con el torrente circulatorio o áreas del cuerpo a través de una cirugía. cepillo y agua. LAVADO DE MANOS Lavado Higiénico: Es el que se realiza diariamente de forma casera. Solo se cepillan las manos. deberán ser descontaminados.

cepillo y agua. Se cepilla el antebrazo y el codo.Lavado Quirúrgico: Elimina la flora transitoria y disminuye la flora residente (flora que habita normalmente en piel). METODOS DE ESTERILIZACION Incineración Flama directa (fuego) Aire caliente (estufa) Vapor de agua Calor seco Ebullición Calor húmedo Metodos fisicos Pasteurización Tindalización Rayos UV Radiaciones Rayos Gamma Filtración Métodos químicos Oxido de etileno 12 . Se emplea solución jabonosa antiséptica.

Son cintas que cambian de color con la correcta esterilización. pero lleva más tiempo realizarlos. Manómetro.CONTROLES DE ESTERILIZACION Estos controles son necesarios para cerciorarnos de la correcta esterilización del material:  Controles Físicos: Son los más simples y menos precisos. 13 .  Controles Biológicos: Son los más exactos.  Reconoce los métodos de esterilización y su aplicación dependiendo el caso. desinfección. asepsia y antisepsia. Son bolsas selladas que contienen microorganismos. FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA DESINFECCION         Los factores que intervienen en la desinfección son: La Temperatura El tipo de microorganismo La concentración del Antiséptico o Desinfectante La presencia de Materia Orgánica El Tiempo El pH La Naturaleza de la superficie a desinfectar 2. Ej: Termómetro.  Controles Químicos: Son más precisos. Estas bolsas se colocan conjuntamente con el material a esterilizar. Reloj. COMPETENCIAS  Identifica las características de esterilización. y luego de finalizado el proceso de esterilización se cultivan.

).  Realiza la esterilización del material bacteriológico por flameado. bisturíes. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos. hasta que el filamento del asa tome color Rojo vivo. Aire caliente Esto se realiza en los Hornos Pasteur a temperaturas superior a los 180ºC por hora y media. polvos termoestables. Para esterilizar el asa bacteriológica. 5. varillas de vidrio. MATERIAL. etc. 3.  Realiza asepsia de las manos por medio del lavado y cepillado usando técnicas adecuadas. REACTIVOS                     Autoclave de Chamberland Alcohol Mechero Bunsen Asas bacteriológicas Pinzas Cajas Petri Papel madera o papel sábana Hilo de caña Pipetas Tubos de ensayo Algodón Matraz erlenmeyer Recipiente para el flameado Jabón desinfectante Cepillo de uñas Hervidor de agua Pinza de traspaso Alcohol Alcohol yodado Autoclave 4. pinzas. se flamea con un mechero de alcohol o Bunsen. espátulas de vidrio.  Realiza la limpieza y preparación de la piel o lugar en el cual se desee realizar una toma de muestra bacteriológica o un procedimiento quirúrgico básico. De atrás hacia delante. 14 . tijeras. luego se deja enfriar el material para su utilización. material metálico como tijeras. Explica como intervienen los factores ambientales en la desinfección. etc. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños  Flama directa Se realiza colocando un poco de alcohol en un recipiente junto con el material que debe ser de metal (pinzas. espéculos. Se pueden esterilizar pipetas. Se enciende el alcohol y se deja el fuego hasta que se consuma.

La radiación U. Abrir el autoclave y retirar el material esterilizado. Esperar que la presión del manómetro marque 0. jugos y cerveza Tindalización Se conoce como la esterilización fraccionada y consiste en aplicar temperaturas correspondientes a 90ºC y 100ºC por un tiempo. además los líquidos podrían entrar en ebullición expulsando los tapones de algodón y mojarlos. Se emplea principalmente para lácteos. manteniendo la misma por 15 a 20 minutos. PRECAUCION No abrir nunca la válvula de escape del autoclave antes de que enfríe.Calor húmedo Para esto se utiliza el autoclave. como en lámparas que se puede colocar en una habitación o 15 . mangos de bisturí. Uso de radiaciones Se utiliza radiación U. pijamas médicos. etc. (para eliminar el aire residual). Cuando se alcance la Temperatura deseada por ejemplo 121ºC. Se debe colocar agua en el fondo de la caldera. Posteriormente apagar y dejar enfriar. En autoclave se pueden esterilizar: material de vidrio. Adaptar la tapa y ajustar los tornillos para asegurar el cierre hermético del autoclave. hisopos de algodón. con riesgo para el operador. proceder a colocar el material que se desee esterilizar ejemplo: agujas y jeringas de vidrio. Encender el autoclave y calentar hasta la salida de un chorro continuo de vapor de agua por la válvula de escape. sustancias oleosas liquidas. materiales metálicos. Abrir la válvula de escape para asegurarse de que no hay presión en el autoclave. Este método de utiliza para disminuir el número de microorganismos patógenos. La temperatura y el tiempo de pasteurización dependen del microorganismo patógeno más resistente que se quiera destruir.V puede ser letal sin embargo no atraviesa eficazmente el vidrio debido a esto se lo utiliza en pocas situaciones. apagar el autoclave y dejar enfriar espontáneamente. Esto se realiza tres veces. Dejar hervir el agua por 30 minutos. Cerrar la válvula de escape. porque la presión elevada podría proyectar la tapa y el agua caliente hasta el exterior.V y radiación ionizante como por ejemplo: la gamma. Pasteurización Este método fue descubierto por Louis Pasteur en 1860 y se emplea para algunos líquidos termolábiles que no se pueden someter a temperaturas elevadas porque el calor desnaturaliza sus componentes. pinzas. Dispensar los medios de cultivo en el material de laboratorio. Acomodar el material en la cesta metálica. regular la temperatura del autoclave. etc. Verificar si el orificio de escape está abierto. Concluida la esterilización. Ebullición Tomar un recipiente y llenar con agua. luego incubar y al día siguiente otra vez el mismo proceso. medios de cultivos.

Oxido de Etileno Es un gas reactivo. Filtración Se emplea cuando la sustancia a esterilizar son alteradas en sus propiedades físicas y químicas si son sometidas a la acción del calor. Se debe tener cuidado en el manejo de radiación U. agujas y material de metal. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. La radiación gamma es excelente porque penetra profundamente los objetos.V. Enjuagar las manos con alcohol y dejar que se evapore. refregarse en forma ordenada el dorso. jeringas de plástico. Una vez que llegó a la temperatura de ebullición dejar el material 20 minutos y posteriormente se sacará el mismo con una pinza. Esterilización del material Colocar en recipiente agua ¾ y agregar el material que se va esterilizar. 6. Tiene gran poder de penetración y no produce calor por lo que se pueden esterilizar materiales plásticos. Toxinas bacterianas. inflamable. para terminar en los bordes. Enjuagar el jabón con abundante agua haciendo que esta escurra de las manos hacia los codos. Se repite por 3 minutos. mercurio-cromo. El material como por ejemplo: jeringas. debe ser esterilizados en un recipiente y se deja hervir. hormonas. los dedos. merthiolate. con esta radiación se pueden esterilizar en frío antibiótico. Limpieza de la piel del paciente Lavar con agua y jabón Pincelar con alcohol.en una campana de seguridad biológica. Se debe comenzar por el centro del lugar a limpiarse. La operación deberá repetirse dos veces. sondas. las uñas así como el antebrazo. Como es muy toxico luego de su ciclo de esterilización se debe dejar el material esterilizado airear en cámara por 8 horas antes de ser empleado. etc. Por ejemplo: Enzimas. solución yodada. Repetir tres veces. se combina con el agua dando etilenglicol (Producto toxico). incoloro. la palma. ¿De qué forma se esterilizarían mejor los siguientes materiales 16 . suturas. ¿Cuál mecanismo de acción del calor sobre los microorganismos? 2. Lavado de manos Proceder al lavado de manos con agua y jabón antiséptico y con cepillo de uñas.

Semmelweis descubrió en la autopsia que había demasiada similitud entre el corte de dedo sufrido por su maestro durante una autopsia y la fiebre puerperal que lo preocupaba. incluidas las autopsias. en el manicomio de Viena. cuando era un joven médico. Murió antes de los 50 años. y transportaban gérmenes cadavéricos en sus manos. Una de ellas era lavarse las manos. "Allí. las parteras y auxiliares tenían ya un cierto entrenamiento en partos y tomaban precauciones. Semmelweis observaba con preocupación que las parturientas atendidas por los estudiantes avanzados de medicina y médicos recién recibidos tenían una tasa de mortalidad diez veces mayor que las asistidas por parteras y personal idóneo. Austria: el Allgemeines KrankenHaus. ¿Como intervienen cada uno de los factores implicados en la desinfección? 4. destruido ante la conjura de tantos necios. pasaron muchos años hasta que la comunidad médica aceptó su hallazgo.MATERIAL Pipeta vidrio Caja petri de vidrio Medios de solido Guantes cultivo MÉTODO DE ESTERILIZACIÓN TIPO DE CALORTIEMPO OTROS (ESPECIFIQUE) Jeringas desechables Ropa quirúrgica Pinzas quirúrgicas tijeras Hojas de bisturí Mango de bisturí Asa bacteriológica Sala de quirófano 3. marginado y sus colegas lo tomaron por demente. . y siempre debido a la misma causa: una infección llamada fiebre puerperal o septis neonatal. CURIOSIDADES Se llamaba Ignaz Phillipp Semmelweis. En cambio. Cuando murió uno de sus profesores." . Había nacido en Buda. Semmelweis fue atacado.". . . "Y así llegó a la conclusión de que la mayor mortalidad en la sala de parturientas atendida por los estudiantes avanzados de medicina y médicos recién recibidos era causada porque hacían entrenamiento en todo el hospital. en 1847. inició su práctica obstétrica en el hospital general de Viena. Desde su punto de vista cual es la importancia del lavado de manos. en 1818. Semmelweis probó su teoría: los médicos debían lavarse las manos cuidadosamente con agua clorada antes de ingresar en la sala de partos. A mediados del siglo. la ciudad húngara ubicada a la derecha del Danubio. 17 . el doctor Jacob Kolletschka. Pese a la eficacia de la medida.

18 .

 Etiquetar correctamente las muestras. tracto gastrointestinal. técnicas que resultan muy útiles en el diagnóstico precoz de determinadas enfermedades infecciosas. son dos aspectos que diferencian el laboratorio de microbiología de otros laboratorios clínicos. tracto respiratorio inferior. la identificación y la determinación de la sensibilidad a los antimicrobianos de los microorganismos causales de estas enfermedades.  La muestra deberá ser representativa del proceso infeccioso. piel. INDICACIONES PREVIAS A LA RECOLECCION DE MUESTRAS Si el paciente recolectara la muestra las instrucciones deberán ser claras (Mejor si son por escrito). líquidos estériles. orina recolectada por punción suprapúbica). estrechamente relacionados con el éxito del informe final.  Una vez recolectada la muestra deberá ser llevada al laboratorio lo más rápido posible. Por tanto es necesario tener un protocolo que permita la adecuada manipulación de muestras que serán enviadas a otro laboratorio y los resultados obtenidos estarán. La gran diversidad de muestras clínicas y de métodos diagnósticos aplicables. liquido sinovial. Otra parte importante de la actividad de un laboratorio de microbiología consiste en la detección de anticuerpos. liquido cefalorraquídeo. Zonas corporales que poseen flora normal comensal (boca.).Muestras clínicas recomendadas para el diagnóstico microbiológico de las infecciones más comunes 19 .  Toda muestra deberá manejarse como si fuera potencialmente patógena. tracto respiratorio superior. punción de medula ósea. sondas o bolsas recolectoras) Tabla 1. etc. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO La actividad que desarrolla el laboratorio de microbiología está orientada esencialmente al diagnóstico microbiológico de las enfermedades infecciosas. orina recolectada por micción media. liquido peritoneal. liquido pleural.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. Una parte importante de esa actividad consiste en el aislamiento. nariz.  Cuando se realice cultivo y aislamiento de gérmenes el material deberá recolectarse en recipientes estériles. orina.  La recolección deberá realizarse antes de comenzar la terapia antimicrobiana o suspender el antibiótico 48-72 horas antes de la toma de muestra. tracto genital. Cuando se realiza cultivo de material deberá conocerse el lugar de donde proviene la muestra: Zonas corporales que normalmente son estériles (sangre. antígenos y ácidos nucleícos en diversas muestras (sangre.. 4 TOMA DE MUESTRA 1.

punción transtorácica aspirativa. Comentarios Infecciones cardiovasculares y asociadas a dispositivos intravasculares (IV) Líquido pericárdico LCR Aspirados de abscesos Exudado faríngeo Aspirado sinusal Timpanocentesis Exudado oído externo Esputo. broncoaspirado Líquido pleural. piel conexión del catéter pericatéter.agalactiae (también exudado rectal ) 20 . aureus No válidos los exudados nasales Empiema y abscesos pulmonares Nasofaríngeo Infecciones oculares Conjuntivitis Queratitis Endoftalmitis Infecciones gastrointestinales Diarrea Infecciones intraabdominales Peritonitis Abscesos intraperitoneales y abscesos viscerales Colecistitis Tracto urinario Infección urinaria Orina (micción media. víricas Detección de S.Tipo de infección Bacteriemia Endocarditis Infección del catéter Pericarditis Sistema nervioso central Meningitis Abscesos cerebrales Tracto respiratorio Faringoamigdalitis Sinusitis Otitis media Otitis externa Neumonia Muestra Hemocultivos Hemocultivos/Válvula/Verrugas Catéter IV. muestras obtenidas por fibrobroncoscopia. sonda) Líquido peritoneal Aspirados de abscesos Líquido biliar Heces/Biopsia Aspirado duodenal intestinal/ Exudado conjuntival/raspado Raspado corneal Líquido intraocular Orina obtenida mediante punción Diagnóstico de bacteriuria suprapúbica anaerobios y de ITU en niños Tracto genital Úlceras genitales Nódulos genitales Uretritis Vulvovaginitis Raspado de la úlcera Aspirado del nódulo Exudado uretral Exudado vaginal por Detección de S. punción transtraqueal. abscesos Nasal aspirados de Diagnóstico tosferina/Infecc.

y Bordetella spp. La muestra se introduce en el interior de una bolsa impermeable en cuyo interior se introduce un catalizador y un generador de hidrógeno y CO2. Útiles para la toma de muestra de conexiones de catéteres intravasculares. 21 . aspirados de abscesos y heridas Tubo estéril con medio de transporte (Cary Blair) para enteropatógenos en heces.. urealyticum y virus. biopsias. gonorrhoeae. esputos. lavados broncoalveolares. Útiles para la investigación de Chlamydia spp.Sistemas de transporte para la investigación de microorganismos anaerobios Sistema de transporte Torundas con sistemas de transporte específicos para anaerobios Viales y tubos con atmósfera anaerobia Comentarios Bolsas de anaerobiosis Contienen un medio de transporte semisólido con un agente reductor y un indicador.Sistemas de transporte para la investigación de microorganismos aerobios Sistema de transporte Torundas con medio de transporte Comentarios Torundas en tubos de plástico con medio de transporte que mantiene un pH favorable y previene la desecación de la muestra. U. erisipela.. úlceras. Cualquier coloración azul de dicho medio indica exposición al aire. Tubo con fijador (alcohol polivinílico) para parásitos en heces. Mantiene la población bacteriana durante 48 h a temperatura ambiente sin necesidad de refrigeración. escamas cutáneas y uñas Torundas de alginato cálcico Torundas de dacrón Torundas de algodón Torundas para exudados nasofaríngeos Tubos estériles de boca ancha Tubos estériles Tubos estériles con transporte o conservante medio de Placas de Petri estériles Tabla 5. Útiles para la investigación de virus Pueden inhibir a Chlamydia spp. heces. Tubo con conservante (ácido bórico–formiato de sodio) para orinas. Torundas flexibles que emplean alambre en lugar de madera Útiles para el transporte de orinas. abscesos cutáneos. puede inactivar a virus del grupo Herpes e interferir con las pruebas de identificación de Ureaplasma. infecciones gangrenosas. Líquidos estériles. Son menos recomendables las muestras tomadas con torundas Líquido sinovial Biopsia ósea o exudado 4. Útiles para pelos. Cuando la torunda es de madera.Tipo de infección Cervicitis Prostatitis Piel y tejidos blandos Impétigo. Pueden ser tóxicas para N. celulitis. catéter telescopado. broncoaspirados. foliculitis. heridas y quemaduras Hueso y articulaciones Artritis Osteomielitis Muestra Exudado endocervical Secreción prostática Comentarios Acompañada de orina pre y post masaje prostático Preferiblemente aspirados tomados con jeringa y biopsias de tejido.

REACTIVOS Y EQUIPOS                Bajalenguas Hisopos de algodón estériles Portaobjetos Mechero de alcohol Pinzas metálicas Colorantes de Gram Varillas de Tinción Guantes Jeringas y agujas Tubos de hemólisis Gradillas Anticoagulante Algodón Alcohol Ligaduras 4. colocar tampón vaginal. 2. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos. En el caso de niños se podrá emplear bolsa recolectora. recoger el chorro medio después de eliminar los 22 .  Conoce los diferentes medios de transporte y técnicas de envío de muestras al laboratorio microbiológico. Para ello hay que eliminar el aire y taponar la aguja con un tapón de goma. puede utilizarse la misma jeringa con la que se ha obtenido. METODOLOGIA Trabajo en grupos pequeños Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales El recipiente donde se recolecta la muestra deberá ser estéril y no tocar la piel del paciente. 5. COMPETENCIAS  Emplea y describe métodos y técnicas para la obtención adecuada de muestras para el diagnóstico microbiológico.Jeringa para la obtención de aspirados Cuando no se dispone de ninguno de los sistemas anteriores o bien la cantidad de muestra es mínima. Orina chorro medio Mujeres: limpiar la previa higiene zona con agua y jabón. luego enjuagar con agua. manteniendo separados los labios mayores y comenzar e evacuar en el inodoro. MATERIALES.  Realiza una solicitud correcta para el examen microbiológico 3.

sin tocar paladar. Vías respiratorias La muestra El paciente debe inferiores recolectada es Esputo. con la ayuda de un baja lengua. Liquido Se realiza mediante cefalorraquídeo (LCR) punción lumbar (PL) entre la 3º y 4º vertebra lumbar. suprapúbica previa asepsia de la región con alcohol yodado Sangre venosa Limpiar el sitio de Extraer sangre durante punción venosa con alcohol el episodio febril. Tracto genital Limpiar el glande con Recolectar las masculino agua y jabón. Cite 2 medios de transporte y explicar cuando los usaría. Tracto genital Limpiar la piel antes Se puede aspirar el femenino de la recolección. retraer la piel del glande. que muestras requiere y que exámenes solicita y por que? 3. no extraer más de tres muestras en un periodo de 24 horas. ¿En que tipo de fluido no encontramos ningún microorganismo contaminante (Zonas normalmente estériles)? 23 . secreciones con hisopo o en tubo. En un paciente con onicomicosis. extraer dos al 70 % o con alcohol muestras. luego enjuagar con agua. Enjuagar o hacer gárgaras con agua antes de la recolección. obtenerlo por tos profunda.Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales primeros ml de orina. Orina por Punción Punción en la vejiga. ¿Cómo se toma la muestra? 2. En un paciente con sospecha de fiebre reumática. y derecho. úvula y dientes. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. previa asepsia de la zona con alcohol yodado 6. líquido o se puede realizar un hisopado. Vías respiratorias Enjuagar con agua Pasar el hisopo por la superiores faringe antes de la recolección de faringe posterior y las la muestra amígdalas. Varones: limpiar el glande con agua y jabón. o recolectar las secreciones con ayuda de un hisopo. de brazo izquierdo yodado. recoger el chorro medio después de eliminar varios mL. 4.

después de la cura. el filósofo alemán Friedrich Nietzsche y el rey Enrique VIII de Inglaterra. que fue castigado por los dioses a sufrir una terrible enfermedad Por esta época y durante mucho tiempo se utilizaron los mercuriales para el tratamiento de la sífilis. médico y poeta verones. G. y califico a la sífilis como el mal francés. tenían algo en común: padecían de sífilis 24 . le propinaban al enfermo una tunda de palos para castigar "la carne pecadora". Elabore una orden de laboratorio para extracción de una muestra para un examen microbiológico CURIOSIDADES Europa renacentista: G. El nombre sífilis proviene del griego siph: cerdo y philus: amor. Este tratamiento mató más enfermos que la propia sífilis. el líder comunista Vladimir Lenin. llamado Syphilo. En una zona normalmente estéril cuantos microorganismos son necesarios encontrar para indicar infección. si a esto añadimos que en algunos hospitales. entre otras personalidades famosas. Tratamiento de la sífilis en las tinas de sudación utilizadas por Jean Fernel Se dice que el gángster (delincuente) americano Al Capone. Recuerda al personaje de una obra.5. llego a la conclusión de que las infeccones se debían a la transmisión de contagios por cuerpos diminutos que estaán vivos y siempre producen la misma enfermedad.Fracastoruis (1478-1553). 6.Fracastoruis (1478-1553).

el tiempo de realización es menor al de las técnicas de cultivo tradicional. Una vez que el microorganismo ha ingresado y ha establecido el sitio primario de infección. se refiere a antígenos. El estudio de la inmunología. Esta infección puede ser transitoria o persistente.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. en las infecciones intervienen principalmente dos inmunoglobulinas IgG (Infecciones crónicas) e Ig M (Infecciones agudas). Es así que en una infección también se puede detectar el inmunocomplejo utilizando estas técnicas que poseen una ventaja. Ante esta situación se genera una respuesta inmune de defensa. se propagan de manera directa a través de los tejidos o por medio del sistema linfático a la corriente sanguínea. En general se genera una respuesta humoral y celular y la medición de una u otra puede ser la base para diagnosticar una infección. es un área amplia que cubre la investigación y aplicación clínica. La reacción de antígeno y anticuerpo da lugar al complejo antígeno-anticuerpo el cual es revelado por alguna técnica inmunológica. que según el tipo de antígeno se producen anticuerpos de diferente especificidad. puede medirse o valorarse por hipersensibilidad dérmica. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO Una infección provoca respuesta inmunológica dirigida contra uno o mas antígenos. USOS DE LAS TECNICAS INMUNOLOGICAS   Diagnosticar infecciones Identificar microorganismos 25 . Es necesario remarcar que en otros casos es imprescindible el cultivo. anticuerpos y funciones de defensa del huésped mediada por células. La inmunidad celular (Mediada por LiT). La inmunidad Humoral (mediada por anticuerpos). 5 TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS 1. en especial en lo que se refiere a la inmunidad y enfermedad.

etc. IgE. Estas reacciones de precipitación se pueden llevar a cabo en dos medios: Medios Líquidos: En donde el anticuerpo se encuentra en solución. TIF Chagas Reacción de Radioinmunoanálisis: En esta reacción el antígeno se marca con un radioisotopo. volviéndose insoluble en el medio dando lugar a un precipitado. Ej: HA para Chagas. Ej: Hormonas. Puede ser: Aglutinación directa: El antígeno particulado insoluble es aglutinado por el anticuerpo. Ej: TIF Toxoplasmosis (Test de inmunofluorescencia para Toxoplasmosis). Tambien podemos tener Inhibición de la Hemoaglutinación: Ej: AELO (Antiestreptolisina O) Hemoaglutinación Reverso pasiva: Donde a los hematíes se adhiere el anticuerpo. Marcadores tumorales. Hormonas. Hematíes: En este caso la técnica recibe el nombre de Hemoaglutinación. Esos transportadores pueden ser: Partículas de Látex: como ejemplo encontramos: Reacción de Proteína C reactiva. IgAs Reacción de Aglutinación: Aquí el antígeno esta en forma de partícula. IgD. IgA. IgG. HCG. HIV. Ej: Reacción de VDRL Medios Gelosados: Aquí el antígeno o anticuerpo esta en un soporte (agar-agar. HIV.   Tipificar sangre para bancos de sangre Tipificar tejidos de trasplantes Cuantificar inmunoglobulinas. Marcadores tumorales. Hepatitis Reacción de Enzimoinmunoánalisis: Se emplea una enzima como marcador que actúa sobre un sustrato que desarrolla color. poliacrilamida). Ej: Hepatitis Reacción de Inmunofluorescencia: Se basa en la fluorescencia que emiten determinadas sustancias y se observa en un microscopio especial de fluorescencia. Ej: Hormonas. Marcadores tumorales TECNICAS INMUNOLOGICAS Reacción de Precipitación: Se forma un inmunocomplejo que con el tiempo aumenta de tamaño. Hepatitis 26 . agarosa. factor reumatoideo. IgE. Ej: Huddleson y Widal Aglutinación Indirecta: Aquí se emplean transportadores a los que se adhiere en la superficie el antígeno particulado insoluble. Determinación de Grupo sanguíneo y factor. HA para Toxoplasmosis. Ej: IDRS (inmunodifusión radial simple. que sirve para cuantificar IgM.

Ej: Virus de Herpes simple 2. Conoce otras pruebas empleadas en el diagnostico microbiológico. Analiza el fundamento de las pruebas serológicas.Pruebas cutáneas: la hipersensibilidad dérmica ofrece ciertas ventajas al determinar con facilidad y rapidez la respuesta inmunológica (celular) del individuo a la exposición previa a los agentes infecciosos. REACTIVOS Y EQUIPOS  Portaobjetos  Guantes  Jeringas y agujas  Lancetas  Gradillas  Anticoagulante  Algodón  Alcohol  Ligaduras  Reactivo de PCR  Reactivo de Grupo y Factor sanguíneo  Mondadientes 4. MATERIALES. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5.METODOLOGIA 27 . Realiza e interpreta la determinación de proteína C reactiva. Realiza e interpreta la determinación de grupo y factor sanguíneo. COMPETENCIAS      Identifica las pruebas serológicas empleadas en el diagnóstico microbiológico . 3.

CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES: 1.     Trabajo en grupos pequeños Determinación de Grupo y Factor Determinación de PCR latex Determinación de Factor Reumatoideo Determinación de la prueba de widal 6. 28 . explique brevemente el fundamento y ¿cual su utilidad para el diagnostico? 2. Explique el fundamento de la Reacción de polimerasa en cadena y sus aplicaciones. 4. 3. Cite la diferencia entre las pruebas de PCR y PCR latex. Dibuje los tipos de ELISA. En qué consiste y la utilidad del inmunoblot o Western Blot.

está mediada por anticuerpos citotóxicos. La tipo IV está mediada por células. o inmediata.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. La tipo II. o citotóxica. La tipo III es una hipersensibilidad por inmunocomplejos. es aquella que está mediada por anticuerpos tipo IgE. III y IV. en 1963. La hipersensibilidad tipo I. Gell y Coombs. II. las clasificaron en cuatro: hipersensibilidades tipo I. 6 HIPERSENSIBILIDAD Las reacciones de hipersensibilidad pueden ser de diferentes tipos. 29 .

Sx de Goodpasture. La unión de la IgE fijadas a las superficies de los mastocitos y el Alergeno desencadena la reacción de hipersensibilidad. Como ya lo mencionamos se describen cuatro tipos de reacciones de Hipersensibilidad: Tipo I (Inmediata o Anafilactica). anemia hemolítica autoinmune. miastenia gravis. Esta respuesta anómala. Tromboxanos. La hipersensibilidad tipo II: son reacciones medidas por la interacción de anticuerpos IgG e IgM preformados con antígenos presentes en la superficie celular y otros componentes tisulares. Son típicas en un individuo dado. La Hipersensibilidad Tipo I se manifiesta por reacciones tisulares a los minutos que el alergeno se combina con el anticuerpo compatible en las personas que previamente se han sensibilizado frente a el. Activando al sistema del complemento. Prostaglandinas. da lugar a una reactividad de la que deriva lesión tisular u orgánica de grado variable. cuadros de alergia como fiebre del heno y asma. por la liberación de mediadores vasoactivos (Histamina.Alergia o Hipersensibilidad denota un estado en el cual una respuesta inmunitaria desencadena reacciones exageradas o inapropiadas que son nocivas para el huésped. Esta hipersensibilidad esta mediada principalmente por IgE. Serotonina. El primer contacto (que ocurre al principio de la vida del individuo) es un hecho preliminar necesario e induce a la sensibilización a ese alergeno (antígeno especifico) y es así como los siguientes contactos con dicho antígeno desencadenaran una respuesta hipersensible. exagerada o inapropiada. La hipersensibilidad tipo III: son reacciones producidas por la existencia de inmunocomplejos (IgG) circulantes que al depositarse en los tejidos provocan activación 30 . eritroblastosis fetal. después del primer contacto con un antígeno o alergeno. etc)( ver figuras)ejemplos choque anafiláctico por inyección de fármacos y picaduras de insectos. Tipo II (Por Citotoxica). ejemplos reacciones transfusionales. Tipo III (Por Complejo Inmunitario) y Tipo IV (Retardada).

2. CURIOSIDADES 31 . como sucede en lupus eritematoso sistémico. 2.  Observar. rechazo de tejidos trasplantados. enfermedad del suero. La hipersensibilidad tipo IV son reacciones de hipersensibilidad celular o mediada por células. Indique la importancia de la Reacción de Tuberculina. COMPETENCIAS  Identifica los diferentes tipos de hipersensibilidad. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños  Cargar en la jeringa de insulina 0. Como en la prueba de la tuberculina o reacción de Mantoux. causadas por linfocitos T sensibilizados al entrar en contacto con el antígeno especifico. 6.1 ml del preparado. 3. Lápiz dérmico Prednisona o Dexametasona 4. Enumere tres mediadores liberados en la anafilaxia. pudiendo producir una lesión inmunológica por efecto tóxico directo o a través de la liberación de sustancias solubles como las linfocinas. inyectar el antígeno. observando la formación de un habón (no debe sangrar).de la fagocitosis y daño tisular por activación del complemento. 3.  Con el bisel arriba. introducir en la dermis. Compare y contraste las características de las cuatro tipos de hipersensibilidad y cite un ejemplos de cada uno de ellos. dermatitis de contacto.  Realiza la prueba de hipersensibilidad a la penicilina.  Seleccionar el sitio de la inyección intradérmica (tercio externo y superior del antebrazo). reacción de Arthur. MATERIALES.  Interpreta los resultados de la prueba. REACTIVOS Y EQUIPOS        Penicilina sódica o potásica o ampicilina Jeringas Agujas de bisel corto #26 Mechero de alcohol Regla transparente calibrada en mm.  Marcar con un lápiz dérmico el sitio de la inyección. Interpretar e informar los resultados de la prueba. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5. enfermedad de addison. artritis reumatoidea. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1.

en fases avanzadas. puede llegar a provocar desagradables mutilaciones en las que orejas y nariz aparecen como corroídas. también puede estar relacionada con esta enfermedad. la piel se recubre de ampollas y los huesos se corroen. Además. Parece que los ajos contienen sustancias químicas que pueden provocar que el efecto de la luz se haga más intenso y se agrave la enfermedad. etc. los vampiros no son personajes reales.Sobre los vampiros En la porfiria. lo que da lugar a nuevos compuestos que destruyen los tejidos cercanos y. los huesos y los dientes. esta enfermedad reúne muchas de las características que se atribuyen a los vampiros. y que necesitan sangre fresca para reponer la suya. lo que provoca una gran debilidad y una palidez casi cadavérica. En definitiva. Algunas de estas porfirinas sufren una reacción química por acción de la luz. otra de las características típicas de los vampiros. Esto. Pero. las encías descarnadas. En el proceso también se produce una fuerte anemia. seres pálidos que necesitan vivir en la oscuridad porque la luz solar les debilita y corroe hasta destruirlos. como consecuencia. En definitiva. Que tipo de hipersensibilidad presentan???? 32 . unos compuestos químicos denominados porfirinas se acumulan en la piel. los labios deformados. el horror a los ajos. si parece que algunas de sus características se han inspirado en una enfermedad muy humana: la porfiria.

El pueblo chino desde el siglo X practicaba la variolización con el fin de inocular el virus de la viruela de un enfermo a una persona susceptible. De acuerdo con la composición química de las vacunas se clasifican de la siguiente forma: 33 . a partir de experimentos que realizaba con gérmenes del a viruela que atacaba a la vaca. En Bolivia el PAI funciona desde el año 1979. Las vacunas fueron descubiertas en 1771. En 1994 se ha certificado la erradicación de la poliomielitis en la América. cuando budistas indios ingerían veneno de serpiente con el fin de ser inmune a sus efectos. Los datos más antiguos son del siglo VII. La inmunización o vacunación es una forma de activar al sistema inmune. por Edward Jenner. El programa ampliado de inmunizaciones de segunda generación. en Bolivia . 7 INMUNIDAD ACTIVA ARTIFICIAL: VACUNAS CONOCIMENTO TEORICO REQUERIDO En el intento de encontrar protección real contra las enfermedades infecciosas que diezmaban pueblos enteros a hecho que el hombre con el tiempo des cubra un medio de protección. existe a nivel mundial un programa ampliado de vacunación (PAI) liderado por la OMS. De ahí proviene su nombre. en ese entonces la cobertura de menores de un año no alcanzaba ni al 20%. Esta exposición ayuda al sistema inmune a reconocer y crear defensas contra esa enfermedad de forma eficiente.ha introducido nuevas vacunas en el esquema tradicional. Debido al beneficio que causan las vacunas. pero que a los trabajadores de las granjas hacia inmunes hacia esta enfermedad. expone a las personas a una cantidad muy pequeña y muy segura de algunos agentes infecciosos (microorganismos vivos atenuados o muertos o sus fracciones antigénicas ) causantes de enfermedad. Se reemplazó la vacuna DPT con la pentavalente y la antisarampionosa fue remplazada por la tripe viral que inmuniza contra sarampión.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. en Bolivia el último caso registrado ocurrió en 1987. de la palabra latina vacca y este invento fue el inicio de todo un programa de inmunizaciones que ha permitido prevenir muchas enfermedades mortales o incapacitantes y evitar grandes epidemias. alcanzando por ejemplo un 98% con la vacuna antisarampionosa y un 93% con la BCG. rubéola y parotiditis. Actualmente el incremento de la cobertura de vacunación en muy bueno. El individuo genera su propia respuesta inmune frente a un estímulo antigénico.

Las contraindicaciones de la vacunación: 34 .

35 .

36 . Conoce las características de los diferentes tipos de vacunas. toxoide. 7. gérmenes muertos. 2. MATERIALES    Diapositivas Data display Auditórium 4. Determina la importancia de la cadena de frio para el manejo de las vacunas. 4. Cuáles son las vacunas que se deben aplicar a niños menores de un año. METODOLOGIA  Trabajos en grupos pequeños 6. 3. COMPETENCIAS     Explica los principios de la vacunación.2. Cite las vías de administración de las vacunas. Justifique. Cite ejemplos de vacunas con microorganismos atenuados. muertos o partes antigénicas de los mismos. vacuna recombinante. En un paciente de dos meses con infección de vías aéreas superiores y fiebre de 38ºC que vacunas aplicaría. Defina los siguientes conceptos: vacunas de gérmenes vivos atenuados. Comprende el esquema de inmunización del PAI y las No gratuitas. Cite vacunas contra virus y bacterias mas empleadas. 6. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5. 3. 5. Que entiende usted por la cadena de frio. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1.

37 .

Rimantadina: derivado 4-10 veces mas activa que la amantadina.su efecto principal es inhibir la decapsidacion viral o el desensamblaje del virion durante la endocitosis. Oseltamivir: inhibe la actividad de neuraminidasa del virus influenza. 8 SEMINARIO: ANTIVIRALES 1. Los fármacos antivíricos actualmente disponibles sólo son eficaces mientras el virus se esta replicando. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO Dado que los virus comparten muchos de los procesos metabólicos de la célula huésped es difícil encontrar fármacos que sean selectivos para el patógeno. Sin embargo existen algunas enzimas que son especificas de los virus que son los posibles objetivos para el tratamiento medico. 38 .UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. Los fármacos antivirales actúan por los siguientes mecanismos: : Ciclo viral Inhibición de la penetración en la célula huésped Amantadina: actúa sobre el virus influenza A. Inhibe la formación de la cubierta .

Zanamivir:inhibe la actividad de neuraminidasa del virus influenza. Vidarabina. puede tener efectos indeseados graves. (DDI) se usan en combinación con inhibidores de las Inhibición de los acontecimientos postraducción.  Indica los principales mecanismos de acción de los antivirales. es bastante eficaz en la infección por CMV. también un derivado de la guanosina. es un inhibidor relativamente selectivo de la ADN polimerasa vírica. Imiquimod: modificador de la respuesta inmunitaria topica. Se usan en combinación con inhibidores de la transcriptasa inversa. Los inhibidores de las proteasas (por ejemplo indinavir y saquinavir) inhiben la escisión de la proteína inerte traducida en las proteínas funcionales y estructurales. lo que contribuye a un estado de resistencia viral. Ganciclovir. Interferón alfa: producen proteínas efectoras en las células expuestas. COMPETENCIAS  Identifica los principales antivirales y sus usos mas frecuentes. Es de uso topico. La gammaglobulina: Neutraliza los virus Inhibidores de la DNA polimerasa: Aciclovir un derivado de la guanosina. Zalcitabina y didanosina proteasas. MATERIAL Y EQUIPOS: Data display 4. especialmente en pacientes con SIDA y retinitis por CMV. utilizado en la infección por citomegalovirus (CMV). eficaz contra herpesvirus. un derivado de la adenosina. 3. inducen en los ribosomas de las células del huésped. puede tener efectos indeseados graves.TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA 39 . Inhibidores de la transcriptasa inversa ITI: Zidovudina (AZT) . puede inhibir a muchos virus ADN y ARN. eficaz contra herpes simple y varicela zoster. Foscarnet inhibe la ADN polimerasa vírica fijándose al lugar de unión del pirofosfato. inhibe selectivamente la ADN polimerasa vírica. un análogo de timina. se fosforila y posteriormente se incorpora en el ADN vírico impidiendo su replicación. es relativamente eficaz en VIH/ SIDA. 2. Docosanol: interfiere en la fusion del VHS-1 y VHS-2 a las membranas de las celulas del huesped. mínimos efectos indeseados. se usan en la infección de la hepatitis B y pueden ser útiles en el SIDA. enzimas que inhiben el ARNm vírico. Inmunomoduladores Los interferones. Tribavirin es similar a la guanosina y se cree que interfiere con la síntesis del ARNm vírico.

Investigue cual es el tratamiento para un paciente portador de VIH? 2. METODOLOGIA Seminario. Investigue cual es el tratamiento para un paciente con SIDA? 3.Dos periodos de 50 minutos 5. CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. Complete el siguiente cuadro: Enfermedad Herpes virus 1 Citomegalovirus Influenza A Mononucleosis Infecciosa Dengue Hepatitis A Hepatitis B Fiebre amarilla Paludismo Varicela Tratamiento 40 . 6.

De ellas la Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es la más utilizada. Sin embargo. etc. Igualmente la detección del genoma viral puede favorecer la precocidad del diagnóstico viral y su confirmación.). según persigan demostrar la presencia del virus o de alguno de sus constituyentes (antígeno o genoma viral) o bien la respuesta de anticuerpos específicos por parte del huésped en el curso de la infección. la tendencia en el diagnóstico virológico consiste en emplear nuevas y más sensibles tecnologías de detección de antígenos y de investigación de ácidos nucleicos con el propósito de lograr un diagnóstico viral más rápido. 9 DIAGNOSTICO VIRAL 1. sensible y específica de los virus. En algunas infecciones virales es posible detectar la presencia de antígenos virales previamente al desarrollo de la seroconversión. Enzimoinmunoanálisis (EIA). La presencia de antígenos virales (técnicas inmunológicas): Inmunofluorescencia (IF). etc. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO: Los métodos utilizados para reconocer las infecciones por virus humanos pueden clasificarse en DIRECTOS e INDIRECTOS. En el momento actual. siendo esta prueba la única evidencia de la exposición al virus cuando no existe aumento de los niveles de anticuerpos circulantes (pacientes inmunodeprimidos). Gran parte de las técnicas utilizadas en el diagnóstico clínico se basan en pruebas serológicas que identifican anticuerpos específicos frente a diversas proteínas antigénicas. La presencia de ácidos nucleicos virales (PCR. En la última década se han desarrollado una serie de técnicas para el diagnóstico viral basadas en la detección de ácidos nucleicos. ROTAVIRUS Generalidades: Es un género de virus perteneciente a la familia Reoviridae. una necesidad. B y C) infectan a los humanos. METODOS DIRECTOS Son aquellos que detectan:     El virus como agente infeccioso (aislamiento viral). medidas profilácticas.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA PRÁCTICA NO.). existen circunstancias en las cuales son necesarias pruebas que detecten precozmente la infección viral (tratamientos específicos. El desarrollo de quimioterapia antiviral efectiva es responsable de esta tendencia que hace de la identificación rápida. Test de Aglutinación. El 41 . El virus como partícula viral (microscopía electrónica). Se han identificado siete grupos. tres de los cuales (Grupo A.

la célula queda infectada por el virus. Desde su ingreso a la célula hospedadora. los rotavirus pueden producir hasta un millón de fallecimientos al año. De esta manera. La enfermedad está caracterizada por vómito y diarrea acuosa de 3 a 8 días. durante el parto o en la lactancia a través de la leche materna (vía perinatal o materno-infantil).grupo A es el más común. Es la causa mas importante de gastroenteritis infantil en todo el mundo. causando el 90% de las infecciones.  No se transmite el VIH por:    Compartir baños con otras personas o con personas que viven con el VIH-SIDA Compartir alimento y utensilios de cocina con otras personas o con personas que viven con el VIH-SIDA Picadura de insectos 42 . Transmisión: Fecal-ora. o bien. Suele remitir en un plazo de 12 a 60 horas sin complicaciones. o herirse con instrumentos cortopunzantes infectados (vía parenteral o sanguínea). la cadena simple de ácido ribonucleico (ARN) viral comienza su transformación en una doble cadena de ácido desoxirribonucleico (ADN) por acción de la enzima transcriptasa inversa que forma parte del virus. Es responsable de aproximadamente el 50% de todos los casos de diarrea infantil que requieren hospitalización a causa de deshidratación en Estados Unidos. Existen dos tipos del VIH. llamados VIH-1 y VIH-2. La integrasa y otros cofactores actúan para que el ADN del virus se fusione con el ADN de la célula hospedadora a través de la transcripción en el genoma de la célula que aloja al virus. que el virus comience a replicarse activamente y libere viriones capaces de infectar otras células. la diarrea es acuosa color amarillento con aspecto a yogurt. uso de agujas contaminadas y tatuajes. Este vía incluye entre otras cosas transfusiones de sangre o productos de sangre. los lentivirus reaccionan de dos maneras posibles: puede ocurrir que el virus entre en latencia mientras la célula infectada continúa en funciones. En los países subdesarrollados. Después de este proceso. Diagnostico: Detección de anticuerpos por AGLUTINACIÓ indirecta O ELISA en materia fecal y PCR-TI. periodo de incubación de 24 a 48 hrs. Estos constituyen un grupo dentro de la familia Retroviridae. Transmisión vertical de una madre que vive con el VIH a su hijo a través de la placenta durante el embarazo. Transmisión:   Transmisión sexual: relaciones sexuales sin condón con personas que viven con el VIH-SIDA. HIV El virus de inmunodeficiencia adquirida forma parte del género Lentivirus. Transmisión a través de sangre y productos de sangre contaminados con el virus.

apretón de manos.    Por compartir vida social Por compartir el ambiente del trabajo Abrazos. besar o cuidar de una persona que vive con el VIH-SIDA 43 . besos Abrazar.

Diagnóstico: Detección de anticuerpos por Elisa. El Elisa posee un periodo de ventana 44 . Un resultado positivo debe ser corroborado con Westen blot o Reacción de Polimerasa en cadena.

Anti HBe por ELISA 2. de ARN Virus Periodo Incubación Edad Niños y adultos jóvenes Familia a la que Picornaviridae. Saliva Si HEPATITIS C (HCV) 14-120 días Adultos Flaviviridae. pertenece Heparnavirus. HEPATITIS A. Independientemente del tipo de virus. Virus de ADN Parenteral. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 5.  Elige adecuadamente el método diagnósticos correspondiente para cada enfermedad viral. B y C Las Hepatitis virales son enfermedades generalizadas que afectan primariamente al hígado. . 45 . síntomas gastrointestinales tales como nauseas y vómitos e ictericia. 4. Trasplacentaria. Leche materna. Anti HBs. Trasplacentaria.de 3 meses (periodo en el cual el virus esta en el paciente y no puede ser detectado en el laboratorio) por ello ante un accidente con un elemento cortante o relación sexual insegura se deberá corroborar un nuevo test a los 3 meses. IgG e IgM para HVC por ELISA HBeAg.  Diferencia las características clínicas básicas de algunas enfermedades virales. Virus de ARN Vía de Transmisión Fecal-oral Parenteral. Leche materna. HBcAg. HEPATITIS A (HAV) de 15-45 días HEPATITIS B (HBV) 50-180 días 15-29 años Hepadnaviridae. Estos virus producen una inflamación aguda del hígado que trae como consecuencia una enfermedad clínica caracterizada por fiebre. No Existencia Vacuna Diagnostico serológico de Si Determinación de Determinación de Determinación de IgG e IgM para HVA HBsAg. sexual. MATERIALES Data display. IgG e IgM por ELISA HBc. METODOLOGIA Trabajo en grupos pequeños con socialización. sexual. COMPETENCIAS  Identifica los métodos de diagnostico para las enfermedades virales. durante la enfermedad aguda se observan lesiones histopatológicas idénticas. 3.

CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES Resuelva los siguientes cuadros clínicos: 1. Interprete el siguiente cuadro: 46 . el mismo proviene de una mujer seropositiva para HIV. Cite y explique en que consisten las pruebas de presunción y de confirmación para el diagnostico del VIH. Se dosaron los siguientes antigenos y anticuerpos para hepatitis e interprete el cuadro: HBsAg + + + - Anti HBs +/++ Anti HBc (IgG) + +++ +/+++ - Anti HBc (IgM) + +/- HBeAg + + - Anti Hbe + 4. En el caso de sospechar que un neonato esté infectado. 3. Referente al diagnóstico ¿Qué tipo de acciones deberíamos tomar y por qué? 2.6.

Sin embargo. vagina o piel) 47 . CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO Las infecciones fúngicas se denominan micosis y en general pueden dividirse en: infecciones superficiales (que afectan piel. esto ha conllevado un aumento del predominio de infecciones oportunistas. las infecciones superficiales graves eran relativamente raras y las sistémicas eran muy raras (al menos en zonas relativamente climáticas frías y templadas). En estas zonas una infección fúngica normalmente consiste en un pie de atleta o candidiasis oral o vaginal que producen molestias. es decir infecciones por hongos que normalmente son inocuos o que se eliminan rápidamente en personas inmunocompetentes.UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Práctica No. cuero cabelludo o membranas mucosas) y sistémicas (que afectan tejidos mas profundos y órganos). pero. hasta tiempos recientes. en los últimos 30 años ha habido un constante aumento en la incidencia de infecciones fúngicas sistémicas secundarias graves. Clasificación de las micosis: Micosis sistémicas. Uno de los motivos es la utilización generalizada de antibióticos de amplio espectro que eliminan o merman poblaciones bacterianas no patógenas que normalmente compiten con los hongos. 10 SEMINARIO: MICOSIS 1. uñas causados por dermatofitos) los mas comunes tiñas  Candidiasis superficial (boca. Muchos de los hongos que pueden producir micosis viven en asociaciones con humanos como comensales. o están presentes en el ambiente.  Candidiasis sistémica oportunista  Meningitis  Endocarditis criptocosica  Aspergilosis pulmonar oportunista  Mucormicosis rinocerebral  Blatomicosis  Histoplasmosis  Coccidiomicosis  Paracoccidiomicosis Micosis superficiales pueden clasificarse en:  Dermatomicosis ( piel. uñas. Otro es el aumento en el número de pacientes con una respuesta inmune reducida debido al SIDA o a la acción de fármacos inmunodepresores o antineoplásicos. pelo. pero apenas significan un riesgo para la vida.

itraconazol Anfotericina. tópica Oral. flucitosina Anfotericina. COMPETENCIAS  Comprender las principales infecciones fúngicas. Un azol tópico.4 alfa desmetilasa dependiente de citocromo p-450 Enzimas lanosterol Unen al ergosterol y daño oxidativo de la membrana Unen al ergosterol y daño oxidativo de la membrana Inhibición del esculeno Enzimas lanosterol Vía Oral Oral. tópica Oral. Oral. fluconazol Anfotericina. flucitosina. nistatina tópica Un azol o nistatina tópica. itraconazol. itraconazol Anfotericina. itraconazol Anfotericina. Fluconazol. tópica. clotrimazol Fluconazol Anfotericina B Nistatina Terbinafina Itraconazol Mecanismos de acción Inhibición síntesis de DNA y RNA Inhibe enzimas lanosterol 1. itraconazol. 2. fluconazol Anfotericina. ketoconazol. 48 . Un azol tópico. fluconazol Anfotericina. amorolfina tópica.Mecanismos de acción de los antimicóticos Antifúngico Flucitosina Ketoconazol. fluconazol Anfotericina. terbinafina oral Itraconazol oral Terbinafina oral. IV IV. tópica bifonazol. Oral. itraconazol. itraconazol Un azol tópico o itraconazol oral Un azol tópico o itraconazol oral. fluconazol oral. IV Indicaciones de los antifúngicos: Enfermedad Infección sistémica Candidiasis sistémica Criptococosis (meningitis) Aspergilosis sistémica Blastomicosis Histoplasmosis Coccidiomicosis Paracoccidiomicosis Mucormicosis Esporotricosis diseminada Infecciones superficiales Dermatomicosis Pie de atleta Tiña cutánea Tinea capitis Onicomicosis Candidiasis Piel Boca Vagina Candidiasis mucocutánea crónica Fármacos Anfotericina. fluconazol oral.

6. Identifica los fármacos antifúngicos en las principales infecciones fúngicas. de las siguientes micosis: Patología Medicamento Vía de administración Tiempo de tratamiento Complicaciones Pie de atleta Pitiariaisis Tiña corporis Rubeola 49 .TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos. 5. via de administración . CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES 1. MATERIALES    Laminas teñidas Aceite de inmersión Microscópios 4.Indicar los principales mecanismos de acción de: Fármaco Azoles Nistatina Terbinafina Flucitosina Anfotericina Mecanismo de acción 2. 3. METODOLOGIA  Trabajo en grupos pequeños . tiempo de tratamiento y complicaciones.- Cite el tratamiento incluya medicamento.  Observación en microscopio de las láminas teñidas.

Tiña capis Histoplasmosis Onicomicosis Esporotricosis Criptococosis Mucormicosis Candidiasis oral Carbunco 50 .

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