Diagrama de flujo de la extracción, separación y purificación de antocianinas.

Optimización de la extracción de antocianinas de arándanos

Materia prima Obtención de los extractos de antocianina

Arándanos de la variedad O´Neal Lavado de los frutos En una bandeja bajo

chorro de agua.
Procedentes de la provincia de
Con una microprocesadora
Entre Ríos (Argentina). Triturado de mano.

Pesado

Extracción solido – liquido

A 4000 rpm
Centrifugado durante 20 min.

Cuantificación de antocianinas totales

y rendimiento de extracción de Sobrenadante Residuo
antocianinas totales (RAT).

1. (EDA). Extracto diluido de antocianina.

 (EDA)1

A 59±2°C hasta reducir

Concentrado en rotavapor
6 veces su volumen.

Se caracterizo mediante: Para conseguir un

Concentrado en rotavapor (2) extracto de calidad.
 Antocianinas totales.
 Perfil de antocianinas
 Fenoles totales Extracto de antocianina (EA)
 Capacidad antioxidante
 Composición mineral
 pH
Extracción solido – liquido de antocianinas (ESLA)

1er serie de experiencias de ESLA

Variables del proceso

Temperatura: 3, 20, 45, 70 y 87°C. Solvente: solución etanol – agua (50:50 v/v).
pH: 1.8, 2.5, 3.5, 4.5 y 5.2 Relación: materia prima / solvente de
Tiempo de extracción: 1.0, 2.0, 3.5, 5.0 y 6.0 h extracción 1:3

34 experiencias de extracción

2da serie de experiencias de ESLA

Tiempo de extracción: 0.5, 2.0, 3.5 h

Solvente: solución etanol con HNO3 al 1%
Relación: materia prima / solvente de
extracción 1:0.4, 1:2.5, 1:4.6 Temperatura: 36±1°C
pH: 3.5

22 experiencias de extracción

1. (EDA). Extracto diluido de antocianina.

Diagrama de análisis de fenoles

Análisis de fenoles

Reducción del reactivo de Folin – Ciocalteu

+ 50 L de Reactivo de
50 L de EA
Folin - Ciocalteu

Se añade 100 μL de NaCO3 al 20% y

800 μL de agua ultrapura.

Agitar 30 segundos a
1600 rpm.

Se incubo a 25±1°C durante 30 min

en la oscuridad.
Blanco de 850 μ L de
agua ultrapura, 100 μL
Medir la absorbancia a 760 nm de NaCO3 al 20% y 50
μL de Reactivo de
Folin – Ciocalteu.

1. (EDA). Extracto diluido de antocianina.

 Diagrama de flujo para el análisis de antioxidantes

Análisis de antioxidantes

Se determino por 2 métodos.

Método ABTS Método DPPH

Preparación del radical ABTS Preparación del radical DPPH

Dilución 1/10 de DPPH con

Persulfato de potasio
ABTS 3.5 mM + metanol
125 mM

Medición de la capacidad antioxidante

Incubado durante 12 h
990 L de DPPH
10 L de EA +
ABTS
Agitar durante 30 s a
Se diluyo con tampón 1600 rpm
fosfato a pH 7.4.
Incubado a T. ambiente (25±1°C)
Hasta obtener 0.70 A a 743 nm.
en oscuridad por 30 min

Medición de la capacidad
antioxidante del EA Medición de la absorbancia a
517 nm
960 L de ABTS
40 L de EA +
Control

Agitar 30 s a 1600 rpm 10 L de agua 990 L de DPPH

+
ultrapura

Se incubo a 25±1°C durante 20 min Seguir el procedimiento anterior

en la oscuridad.
Calcula el cambio de
absorbancia a los 30 min
Medición de la Absorbancia
a 734 nm

1. (EDA). Extracto diluido de antocianina.