MICOTOXINA

Universitario (s

Añez Cardona Edwin Alfredo 210052147

Villanueva Choque Allizon 216058112

De Assis Jimenez Yomar Simone 217015573

Auxiliar: Maria Renee Quintanilla V.

Carrera: Ing. De alimentos

Docente: Ing. Jorge Antequera

Materia: Tecnología de los Cereales y Derivados

Fecha: 27/11/21
 Micotoxinas
La palabra “micotoxina” deriva de la palabra griega “mykes”, que significa
“hongo”, y de la palabra latina “toxicum”, que significa “veneno”, por lo
que la expresión greco-latina “mykes toxicum” significa toxina fúngica, o
micotoxina. Las micotoxinas pueden estar presentes en granos
contaminados con hongos micotoxicogénicos, prevaleciendo en el sustrato
aún luego de que el hongo haya desaparecido, como así también en sub-
productos elaborados en base a éstos También pueden estar presentes en
leche, carne y huevos derivados de animales que consumieron dichos
alimentos, siendo la leche el derivado más importante debido a que los
niveles transferidos de micotoxinas pueden ser significativos, mientras que
en carne y huevos se encuentran en niveles traza
La presencia de micotoxinas en granos y alimentos es un problema de gran
importancia a nivel mundial no solo debido a los efectos que puedan causar
a nivel de la salud humana y animal si no también por las pérdidas que se
producen en cuanto a la utilización y comercialización de los mismos. Se
han identificado una gran cantidad de micotoxinas diferentes, sin embargo,
las que se encuentran frecuentemente como contaminantes naturales de
alimentos son: aflatoxinas, ocratoxinas, zearalenona, fumonisinas y
tricotecenos entre otros (Gimeno & Martins, 2011). Estas micotoxinas
presentan en menor o mayor grado una serie de cuadros clínicos
patológicos, trastornos y efectos tóxicos en los animales, por lo cual ocupan
un lugar importante , Una importante consecuencia del crecimiento fúngico
en los granos es la producción de micotoxinas. Si no hay crecimiento
fúngico no habrá producción de micotoxinas, pero la presencia del hongo
no necesariamente implica la producción de toxinas, ya que pueden o no
darse las condiciones adecuadas o ser las cepas de los hongos existentes no
toxicogénicas. Sin embargo, la ausencia del hongo no significa que no haya
micotoxinas en dicho sustrato, ya que puede ser que el hongo toxicogénico
haya estado presente pero que se haya muerto
Hongos
De la gran variedad de microorganismos que colonizan los granos de cereales
desde su formación en la planta hasta su utilización o consumo final, los hongos
filamentosos son los más importantes. Éstos pueden colonizar los granos en el
campo, en diferentes estadios de desarrollo y maduración, dependiendo de las
condiciones en las que se encuentre la planta, o bien en las etapas posteriores
de almacenamiento o procesamiento.
Los hongos de campo que invaden los cultivos lo hacen fundamentalmente
mientras éstos están en activo crecimiento, desde las primeras etapas de
desarrollo hasta antes de la cosecha. Estos hongos están adaptados a la gran
variabilidad de condiciones ambientales a la que están expuestos los cultivos.
Según los requerimientos ecológicos, los hongos que contaminan los granos se
pueden dividir en tres grupos: de campo, intermedios y de almacenamiento. La
distinción se basa principalmente en el momento en que invaden el grano y de
las condiciones que requieren para crecer.
Los hongos de almacenamiento están presentes en bajo número antes de la
cosecha, pero pueden desarrollarse rápidamente durante el almacenamiento .
Estos hongos están sometidos a condiciones mucho más estables, gobernadas
principalmente por la disponibilidad de agua del grano. Requieren para su
desarrollo valores de contenido de humedad del grano de 13-20%,
correspondiente a humedades relativas en equilibrio de 65-80% y condiciones
de bajo porcentaje de oxígeno y alto porcentaje de CO2. Son generalmente
saprófitos y pueden generar grandes pérdidas debido a la disminución en la
germinación, decoloración, pérdida de materia seca, cambios nutricionales y
producción de micotoxinas

La distinción entre hongos de campo y de almacenamiento es relativa, ya que

se ha visto que especies de campo pueden crecer en algunos casos en
condiciones de almacenamiento y viceversa. Por esta razón, se designó un tercer
grupo denominado “hongos intermedios”. Estos invaden los granos antes de la
cosecha y continúan creciendo durante el almacenamiento, cuando la humedad
de los granos es de 20-25%, con requerimientos de humedad relativa de 85-
90%.
SILOS

El muestreo del ensilaje sospechoso se debe realizar con cuidado, pues la

obtención de una muestra representativa es crítica si se trata de valorar los
niveles de micotoxinas en el campo. Los componentes nutricios del alimento
generalmente están distribuidos homogéneamente en toda la ración, pero por lo
general no ocurre así con las micotoxinas. Por ejemplo, es posible que el 75%
de los granos de maíz contaminados estén presentes en la mitad de la instalación
de almacenamiento, y sólo el 25% se encontrará en la otra mitad. Los niveles
de micotoxinas detectados de una muestra tomada al azar, en forma de un
puñado, a partir de un silo o tolva, no indican con precisión el nivel de
micotoxinas que existen en otras áreas selectas de la estructura de
almacenamiento. Será pues necesario desarrollar un procedimiento de toma de
muestras para informar al usuario final cuáles son las micotoxinas que están .

Los ensilajes de maíz y cereales suelen ser los más propensos al crecimiento de
los hongos que los de zacates o leguminosas. En el maíz, el proceso de
descomposición generalmente se inicia por las bacterias aerobias (como
Bacillus spp) seguidas de un incremento en las poblaciones de levaduras. Lo
opuesto suele ser cierto para los ensilajes de leguminosas, zacates y
cereales.resentes realmente en el ingrediente.
MÉTODOS DE ANÁLISIS DE MICOTOXINAS
El análisis de las micotoxinas presenta varias dificultades específicas: Las
toxinas del hongo y el moho son contaminantes naturales. La producción previa
a la cosecha se ve afectada tanto por las condiciones meteorológicas como por
las prácticas agrícolas; la producción tras la cosecha depende de las condiciones
de almacenamiento. Esto añade ciertos retos a la gestión de riesgos relacionados
con las micotoxinas: ¿Dónde, cuándo, con qué frecuencia y cuántas debo
analizar?

Las micotoxinas se dispersan de forma muy inhomogénea por el producto y a

menudo con niveles de concentración muy bajos. Las matrices de las muestras
que se van a analizar pueden ser muy sencillas, como trigo o maíz, o muy
complejas, como especias, café o mezclas complejas de ingredientes (como en
el pienso). Es muy importante elegir el método analítico y de toma de muestras
adecuado para el producto que se va a analizar. R-Biopharm ofrece una amplia
gama de métodos analíticos para el análisis de micotoxinas. Dependiendo de
factores como la matriz, el número de muestras, el tiempo hasta obtención de
resultados, la sencillez de uso y el equipo disponible, podemos ofrecerle el
formato de análisis apropiado

"KITS" DE ELISA PARA LA EVALUACIÓN DE MICOTOXINAS

El método de ELISA para determinar micotoxinas ha estado disponible por más

de quince años. La tecnología se basa en la capacidad de un anticuerpo
específico para distinguir la estructura tridimensional de una micotoxina
determinada. El ELISA directo competitivo se utiliza comúnmente en el análisis
de micotoxinas. Una placa de ELISA convencional de microvaloración consiste
en la reacción en equilibrio del complejo antígenoanticuerpo. 65 Actualmente,
la mayoría de los kits de prueba disponibles comercialmente de ELISA para las
micotoxinas están trabajando en la fase de la cinética de la unión antígeno-
anticuerpo, lo que reduce el tiempo de incubación a minutos. Aunque la
reducción en el tiempo de incubación puede conllevar a una cierta pérdida de la
sensibilidad del ensayo, la técnica puede proporcionar resultados exactos y
reproducibles. Una descripción general del principio del ELISA directo
competitivo se muestra en la Figura Nº6.
Stat Fax 4700 Analizador de Elisa

es un sistema abierto semiautomatizado para ensayos de Elisa. Es compacto,

confiable y económico. Diseñado específicamente para ofrecer acceso de
pruebas con esta metodología a cualquier laboratorio

Especificaciones Técnicas del Analizador Elisa:

• Capacidad de alimentar hasta 3 tiras con las pruebas deseadas

• Pantalla táctil interactiva LCD con la opción de uso con ratón de USB

• Los porta-tiras vienen en dos estilos, 3x12 ó 3x8

• Capacidad de lectura de Bicromática

• El modelo estándar incluye cuatro filtros: 405, 450, 492 y 630 y tiene

capacidad de hasta seis filtros a su elección.

• Filtros disponibles desde 340nm hasta 700 nm.

• Lleva a cabo cálculos de curvas solicitadas por el usuario

• Impresora incluida con capacidad de impresión de gráficos

• La memoria permanente almacena hasta 120 resultados

• Cuenta con 50 canales para almacenaje de pruebas

• Los lectores del Stat Fax® utilizan los filtros del IAD

• Certificaciones: CE NRTL

Propósito del Analizador de ELISA El analizador de ELISA se utiliza para

leer el resultado de las pruebas efectuadas, utilizando la técnica de ELISA.

Como se realiza

El desarrollo actual de estos sistemas ELISA permite que las determinaciones

de aflatoxinas, toxina T-2 o de deoxinivalenol, se realicen en menos de una
hora, después del proceso de extracción. La sensibilidad del sistema ELISA se
mejora cuando se realizan procesos de purificación de extractos. La sensibilidad
de los sistemas ELISA es especifica para cada micotoxina,

AFLATOXINA

En un análisis preliminar para determinar el límite de cuantificación se realizó

una serie de pruebas que constaron en el análisis de muestras reales a diferentes
concentraciones (numerales 7.2.1 y 7.2.2) de las cuales, para fines prácticos sólo
se muestran los resultados más significativos (pruebas 1, 2 y 3)

Las muestras con concentraciones de 2,5ppb y la de 5ppb se prepararon por

dilución a partir de un patrón de mayor concentración contenido en el kit ELISA

Para la calibración a través del método espectrométrico se analizaron patrones

con concentraciones que van desde el blanco 0ppb hasta llegar a 50ppb que es
la máxima concentración de los patrones incluidos en el kit ELISA. Después se
realizó la curva de calibración y se eligió la que presenta el coeficiente de
correlación (R2) más cercano a 1. En la Figura Nº18 se consolidan los resultados
de esta curva.
la concentración de Aflatoxina en la muestra y la absorbancia leída por el equipo
es inversamente proporcional, es decir, a mayor intensidad de color, menor es
la concentración de Aflatoxina, este comportamiento es debido a que este es un
enzimoinmunoanalizis de adsorción directo competitivo, donde se permite que
la Aflatoxina libre de las muestras y controles compita con la Aflatoxina
enzimomarcada (el conjugado) por los sitios de adsorción de los anticuerpos.