UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

FACULTAD DE CIENCIAS
PROGRAMA CURRICULAR DE BIOLOGÍA

Biología de los microorganismos (2017773)

Bitácora de laboratorio

Nombre de Protozoos parásitos

la práctica
Docente(s) Angie Daniela González Galindo
Grupo (x) Martes __x___ Fecha 30/03/2022 Fecha 07/04/2022
Jueves___x___ práctica entrega

Estudiante(s) 1. Valeria Buitrago Arenas 2. Verónica Mazorra Peñuela

Los parásitos del grupo apicomplexa son protistas unicelulares endoparásitos de

animales. Estos parásitos tienen un extremo apical característico que les permite
penetrar a las células hospederas (Kenneth J. Ryan, C. George Ray, 2014), tienen
ciclos de reproduccion tanto sexual como asexual, en este ultimo se genera una
esquizogonia por un proceso de fision dentro del hospedero, finalmente el citoplasma
se condensa para formar merozoitos que seran las celulas hijas las cuales estallan y
van en busca de nuevos hospederos. La fase sexual ocurre porque estos merozoitos
se convierten en gametos femeninos o masculinos, los cuales alcanzan la madurez y
llevan a cabo la fertilización formando un cigoto. El plasmodium, género que se
encuentra dentro de este grupo parásito y provoca la malaria (Kenneth J. Ryan, C.
George Ray, 2014) tiene dos hospederos diferentes donde se completan los ciclos de
reproduccion asexual y sexual, un vector y un anfitrion. Este grupo de parasitos solo
posee estructuras móviles en algunas etapas de gametos los cuales tendran una forma
más alargada, en la etapa de trofozoitos se puede distinguir un nucleo de color morado
intenso, un citoplasma de color azul y la hemozoina, que es principalmente un producto
de desintegracion de la hemoglobina. En el caso del esquizonte se verá una gran célula
Contexto

compuesta por muchos núcleos, los cuales van a estar rodeados de citoplasma. (Angie
D. Gonzales, 2020)

Por otro lado tenemos los parásitos del grupo kinetoplastida los cuales son protistas
unicelulares flagelados, cuya estructura característica es la presencia de una única
mitocondria ubicada cerca del flagelo, la cual contiene un kinetoplasto, que es un
gránulo de ADN mitocondrial (Álvarez, A. R.,2006). Pueden tener ciclos de vida simple
con un solo huésped o varias etapas diferenciadas en dos huéspedes, sin embargo
este grupo solo presenta reproduccion asexual. En el caso de Leishmania, causante
de leishmaniosis, los amastigotes no tienen flagelo visible y se encuentran en el vector,
estos se convierten en promastigotes flagelados los cuales pasan al anfitrión en donde
infectan mayormente a los macrofagos, alli vuelve la etapa de amastigotes que tienen
una forma más circular, los cuales se multiplican hasta romper la célula. Tanto el núcleo
como el kinetoplasto se tiñen de un color intenso. Otro género en este grupo es el
trypanosoma, causante del mal de chagas, cuyo ciclo de vida es similar a la
Leishmania, teniendo un vector y un anfitrión, sin embargo en este ciclo tenemos una
etapa de tripomastigotes, la cual se caracteriza por tener una membrana ondulante
notoria y el kinetoplasto se ubica anterior al núcleo. (Angie D. Gonzales, 2020)

En la sangre de las aves se encuentran diferentes tipos de células; entre ellas tenemos
a los eritrocitos, también conocidos como glóbulos rojos, que posee una forma ovalada
Versión 1-2 enero 2018 , Versión 3. 2021 Diseñado por: Yih Wen Fung
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
PROGRAMA CURRICULAR DE BIOLOGÍA

cuando la célula es madura y una forma más redondeada cuando es inmadura (Gálvez
et al, 2009), su función principal es transportar el oxígeno hacia todo el organismo.
También tenemos a los leucocitos, que incluyen a los trombocitos, con forma
redondeada, de núcleo oscuro y citoplasma claro, con algunos gránulos en su
estructura (Gálvez et al, 2009), cuya función se asemeja a la función de las plaquetas
en los mamíferos (UBA, s.f); otras células sanguíneas (leucocitos, encargados de la
defensa inmune del organismo (Gálvez et al, 2009)) que tienen las aves son los
linfocitos, con un núcleo redondo y central, y escaso citoplasma, los monocitos, de
forma irregular y núcleo redondeado, los eosinófilos, los heterófilos y los basófilos
(Gálvez et al, 2009).

Por otra parte, las células sanguíneas de los mamíferos incluyen: los eritrocitos, que
se conocen como glóbulos rojos y son los más abundantes en la sangre, tienen una
forma redondeada, son anucleados una vez que llegan a la madurez, además no
presentan mitocondrias por lo que obtienen su energía a través de la fermentación
láctica (UBA), su principal componente es la hemoglobina y son producidos
continuamente en la médula ósea; los trombocitos que hace referencia a las plaquetas,
son pequeños fragmentos citoplasmáticos, que se agrupan y forman conglomerados,
son irregulares y no poseen núcleo (UBA), son una fuente de factores de crecimiento
y ayudan en la producción de coágulos sanguíneos; por último tenemos los leucocitos,
conocidos como glóbulos blancos, donde se encuentran los basófilos, neutrófilos
(multinucleados con gránulos) y monocitos (uninucleados sin gránulos), su principal
función es realizar una respuesta inmune, son generados tanto en la médula ósea
como en el tejido linfático y a diferencia de los glóbulos blancos no tienen pigmentos,
presentan un núcleo, mitocondria y otros orgánulos. (Handin, Robert I.; Samuel E. Lux;
Thomas P. Stossel, 2003)
investigación
Pregunta de
Hipótesis /

Los parásitos kinetoplastida y apicomplexa poseen diferentes estadios con

diferentes características que permiten diferenciarlos entre sí.

- Aprender a diferenciar parásitos de los grupos Kinetoplastida y

Objetivos

práctica

Apicomplexa.
de la

- Identificar los diferentes estadíos de los parásitos y sus características.

Materiales Microscopio Extendido de cultivos

y Micropreparados de sangre de paloma Tejido de Hámster
Equipos Extendidos de sangre

Colorantes Aceite de inmersión

y Solución limpia lentes
Reactivos

Versión 1-2 enero 2018 , Versión 3. 2021 Diseñado por: Yih Wen Fung
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
PROGRAMA CURRICULAR DE BIOLOGÍA

1. Extraer el microscopio del estante de manera cuidadosa y llevarlo hacia el puesto

de trabajo. Asegurarse de que esté apagado y enfocado en 4x; desinfectar
adecuadamente, conectarlo y encenderlo.
2. Tomar la lámina de micro preparado con extendido de sangre de paloma y
colocarlo en el portaobjetos. Enfocar la muestra con el tornillo macrométrico y
luego con el tornillo micrométrico; buscar e identificar las células sanguíneas no
infectadas para esquematizarlas. Al momento de usar el objetivo 100x, usar la
Metodología

técnica de inmersión en aceite.

3. En la misma lámina con sangre de paloma, buscar e identificar el parásito
Haemoproteus columbae, con ayuda de las imágenes de los anexos;
esquematizar lo observado.
4. Regresar al objetivo 4x directamente desde 100x, limpiar el objetivo con solución
limpia lentes y la lámina utilizada de manera adecuada.
5. Repetir el paso 2 con cada una de las muestras para esquematizar lo observado;
cada vez que sea necesario cambiar de muestra, repetir el paso 4.
6. Una vez observadas y esquematizadas todas las muestras, dejar el microscopio
enfocado en 4x, apagarlo, dejar que se enfríe, desconectarlo, limpiarlo
adecuadamente y guardarlo cuidadosamente en su correspondiente estante.

Muestra Aumento: 1000X

Origen: Micropreparado Tipo: Amastigotes de Tinción: desconocida
Leishmania donovani
Esquema Observaciones/descripción:

Parásito intracelular del

grupo kinetoplastida,
presentan una forma
ovalada. Se puede identificar
el macrófago con su núcleo,
Resultados

en el cual se encuentran y de
su estructura podemos ver el
núcleo de un color más
intenso, el citoplasma y el
kinetoplasto. Se encuentran
en los macrófagos de los
mamíferos.

Muestra Aumento: 1000X

Origen: Micropreparado Tipo: Gametocitos Tinción: desconocida
elongados de
Plasmodium falciparum

Versión 1-2 enero 2018 , Versión 3. 2021 Diseñado por: Yih Wen Fung
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
PROGRAMA CURRICULAR DE BIOLOGÍA

Esquema Observaciones/descripción:

Parásito intracelular del

grupo apicomplexa, con
forma alargada en donde se
puede identificar el
citoplasma, los gránulos de
hemozoina hacia el centro
que tienen un color más
intenso y un residuo de la
célula hospedera mucho
más claro. Se encuentran
ubicados en las células
sanguíneas del mamífero
Muestra Aumento: 1000X
Origen: Micropreparado Tipo: Células sanguíneas Tinción: desconocida
(de paloma) no infectadas
Esquema Observaciones/descripción:

Células sanguíneas de una

paloma, que no se
encuentran infectadas por el
parásito Haemoproteus
columbae; se observan los
glóbulos rojos maduros
(eritrocitos) con una
coloración violeta/azulada
en el citoplasma y una
coloración azul intensa en el
núcleo, de forma ovalada y
con un núcleo condensado;
también se observan
glóbulos rojos inmaduros
con un núcleo de mayor
tamaño (ya que se
encuentra menos
condensado); los
trombocitos observados
presentan una coloración
azul, un núcleo de gran
tamaño y poco citoplasma
visible. En la muestra
observada fue posible
detectar muy pocos linfocitos
y basófilos. También se
identificó un eosinófilo, con
forma redondeada y
abundante citoplasma.

Versión 1-2 enero 2018 , Versión 3. 2021 Diseñado por: Yih Wen Fung
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
PROGRAMA CURRICULAR DE BIOLOGÍA

Muestra Aumento: 1000x

Origen: micropreparado Tipo: Gametocito de e Tinción:desconocida
Haemoproteus columbae
Esquema Observaciones/descripción:

Glóbulo rojo maduro

infectado con el
macrogametocito (femenino)
de Haemoproteus
columbae; parásito
intracelular; el gametocito
posee una forma alargada y
tubular/ovalada. Se observa
el citoplasma del gametocito
con una coloración azul más
intensa que la coloración del
citoplasma del glóbulo rojo.
Este parásito se encuentra
en el hospedero intermedio,
en este caso en el eritrocito
Resultados

de una paloma. Pertenece al

grupo apicomplexa.
Muestra Aumento: 1000x
Origen: Micropreparado Tipo:promastigotes de Tinción: desconocida
Leishmania
Esquema Observaciones/descripción:

Estadio promastigote de
Leishmania; parásito
extracelular, de forma
“ovalada” y alargada, en la
que es posible distinguir el
núcleo cerca a uno de sus
extremos y el kinetoplasto
cerca al nacimiento del
flagelo; también es posible
distinguir el flagelo del
organismo. Del grupo
kinetoplastida. Se
encuentran en el hospedero
intermediario.
Muestra Aumento: 1000x
Origen: Micropreparado Tipo: tripomastigotes de Tinción: desconocida
Trypansoma

Versión 1-2 enero 2018 , Versión 3. 2021 Diseñado por: Yih Wen Fung
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
PROGRAMA CURRICULAR DE BIOLOGÍA

Esquema Observaciones/descripción:

Estadio de tripomastigote de
Trypanosoma; parásito
extracelular; se observa que
tiene una forma de “s”
alargada y aplanada, es
posible distinguir el
kinetoplasto, el núcleo, el
citoplasma y parte del
flagelo. Es del grupo de los
kinetoplastida; se encuentra
en el anfitrión.

Muestra Aumento: 1000X

Origen: Micropreparado Tipo: epimastigotes de Tinción:
Trypanosoma
Estadio epimastigote que se
encuentra
extracelularmente, tiene una
Resultados

forma alargada con

presencia de un flagelo libre
además de un membrana
ondulante. Se encuentra en
el vector y se identifica de un
color más intenso el núcleo
y el kinetoplasto

Versión 1-2 enero 2018 , Versión 3. 2021 Diseñado por: Yih Wen Fung
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
PROGRAMA CURRICULAR DE BIOLOGÍA

En la práctica se visualizaron diferentes placas para tratar de identificar parásitos de los

grupos Apicomplexa y Kinetoplastido, además de reconocer sus diferentes estadíos.
Comenzamos con los gametocitos de Haemoproteus columbae que fueron encontrados
en la muestra con el extendido de sangre de paloma, estos presentan una reproduccion
asexual y son encontrados dentro de los eritrocitos del anfitrion (Jhon J. Macías, 2020)
despues pasamos a visualizar Plasmodium, el cual se encuentra tambien dentro del grupo
Apicomplexa, alli solo se pudieron identificar claramente los gametocitos, los cuales al
igual que los de la especie Haemoproteus llevan a cabo reproduccion asexual y se
encuentran en los globulos rojos del anfitrion. De este grupo no se pudieron observar
estadíos que presentan reproducción sexual ya que esta solo ocurre en las etapas
encontradas en el vector (Kenneth J. Ryan, C. George Ray, 2014) y en esta ocasión en la
práctica solo vimos placas de sangre de ave.

Por otro lado del grupo Kinetoplastido se pudieron observar amastigotes de Leishmania
donovani en la placa con tejido de hamster; este estaíio presenta reproduccion asexual y
se encuentra en los macrofagos del anfitrion, ademas de la especie Leishmania tambien
pudimos ver un cultivo de promastigotes los cuales igualemente presentan una
reproduccion asexual pero se encuentran en el vector u hospedero intermedio. Por ultimo
vimos cultivos en diferentes estadios de Trypanosoma, los cuales presentan reproduccion
Discusión de resultados

asexual ya que el grupo kinetoplastida solo presenta esta reproduccion, en el caso de los
epimastigotes estos son encontrados en el vector mientras los tripomastigotes se
encuentra en la sangre del anfitrion. (Angie D. Gonzales, 2020)

En este caso, cómo se observaron parásitos tanto del grupo apicomplexa como del grupo
kinetoplastida fue necesario tener en cuenta algunas de sus características morfológicas
para diferenciarlos entre sí; por su parte, los gametocitos observados del grupo
apicomplexa poseían una forma ovalada y alargada, y carecían de flagelo; mientras que,
los diferentes estadios observados del grupo kinetoplastida poseían un flagelo ( a
excepción de los amastigotes), además tenían una forma no tan redondeada y más
parecida a la forma de una gota alargada o una “s” aplanada en algunos de sus estadios
más maduros y fue posible identificar el kinetoplasto cercano al flagelo o al nacimiento de
este.

Al comparar los protozoos parásitos con los protozoos de vida libre observados en la
práctica pasada, es posible identificar que, en el caso del grupo apicomplexa, estos
organismos no poseen cilios, flagelos o pseudópodos en su morfología que les permita
moverse libremente en el ambiente y alimentarse, a excepción del gameto masculino que
presenta un flagelo (García et al, 2008), pero poseen el complejo apical, que es una
estructura que no poseen los protozoos de vida libre, ya que esta estructura es la que le
permite a los apicomplejos parasitar al permitirles entrar en su hospedero (García et al,
2008). Por su parte, los protozoos del grupo kinetoplastida poseen un flagelo,
especialmente distinguible en sus formas de epimastigote y tripomastigote (Díaz et al,
2011) que los hace de un aspecto similar a los flagelados de vida libre, sin embargo, los
parásitos de este grupo poseen además el kinetoplasto, que es la estructura que permite
distinguirlos de los flagelados de vida libre.

Al finalizar la práctica se pudo notar un fortalecimiento en el manejo de microscopio,

además de tener una mejor habilidad a la hora de identificar, esquematizar y describir

Versión 1-2 enero 2018 , Versión 3. 2021 Diseñado por: Yih Wen Fung
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
PROGRAMA CURRICULAR DE BIOLOGÍA

microorganismos, como también a la hora de consultar información de lugares confiables

para el desarrollo de preguntas y citas de bibliografía.

- Al finalizar la práctica se adquiere una mayor claridad a la hora de identificar y

distinguir parásitos del grupo Apicomplexa del Kinetoplastida.
Conclusiones

- Los parásitos de estos grupos poseen diferencias morfológicas entre sí que

permiten distinguirlos, así como también poseen características que permiten
identificar su estadio.
- Se lograron distinguir las formas de los parásitos en las diferentes etapas de su
ciclo de vida, además de identificar su tipo de reproducción, lugar y hospedero en
el que se encuentran.

Versión 1-2 enero 2018 , Versión 3. 2021 Diseñado por: Yih Wen Fung
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
PROGRAMA CURRICULAR DE BIOLOGÍA

Álvarez, A. R. (2006). Los protozoos. Características generales y su rol como agentes

patógenos. Edu.ar.
http://www.biblioteca.unlpam.edu.ar/pubpdf/revet/n08a06alvarez.pdf

Díaz, Martha Lucía, Torres, Rodrigo, & González, Clara Isabel. (2011). Expresión
diferencial entre estadios de Trypanosoma cruzi I en el aislamiento de un paciente
con cardiomiopatía chagásica crónica de zona endémica de Santander, Colombia.
Biomédica, 31(4), 503-513. Retrieved April 06, 2022, from
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-
41572011000400005&lng=en&tlng=es.

FVET Universidad de Buenos Aires (s.f). Sangre de Ave [página web].

http://www.fvet.uba.ar/b_histo/10-2-sangreave.htm

Galvez, C., Ramírez, G. & Osorio, J. (2009). El laboratorio clínico en hematología de aves
exóticas. Biosalud. 8. 178-188.
http://www.scielo.org.co/pdf/biosa/v8n1/v8n1a20.pdf
Referencias

García, I., Muñoz, B., Aguirre, A., Polo, I., García, A. & Refoyo, P. (2008). Manual de
laboratorio de Parasitología. 1. Introducción a los Protozoos. Reduca (Biología).
Serie Parasitología. 1 (1): 1‐6.
http://www.revistareduca.es/index.php/biologia/article/viewFile/774/790

Gonzalez, A. D. (2020, abril 22). Laboratorio Virtual protozoos parásitos.

https://youtu.be/eZf4mpAP6-E

Handin, R. I., Lux, S., & Stossel, T. P. (2003). Blood: Principles and practice of hematology
(2a ed.). Lippincott Williams and Wilkins.

Ryan, K., Ray, C. G., Ahmad, N., Drew, W. L., & Plorde, J. (2014). Sherris Medical
Microbiology 6/E (6a ed.). McGraw-Hill Professional.
https://accessmedicina.mhmedical.com/book.aspx?bookid=2169#162978873

Zacipa, J. J. M. (20 marzo de 2020). Caracterización de parásitos sanguíneos en aves

asociadas a cuerpos de agua y su prevalencia en 12 departamentos de Colombia
[Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca].
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/handle/unicolmayor/118/Caracteri
zación%20de%20parásitos%20sangu%C3%ADneos%20en%20aves%20asociad
as%20a%20cuerpos%20de%20agua%20y%20su%20prevalencia%20en%2012%
20departamentos%20de%20Colombia-2-1c.pdf?sequence=15

Versión 1-2 enero 2018 , Versión 3. 2021 Diseñado por: Yih Wen Fung